CN102488673B

CN102488673B - 普罗布考纳米分散物及其制备方法

Info

Publication number: CN102488673B
Application number: CN201110398548.2A
Authority: CN
Inventors: 徐晖; 李芳�; 王绍宁; 王思玲; 郭建博; 刘东春
Original assignee: Shenyang Pharmaceutical University
Current assignee: Shenyang Pharmaceutical University
Priority date: 2011-12-06
Filing date: 2011-12-06
Publication date: 2014-01-01
Anticipated expiration: 2031-12-06
Also published as: CN102488673A

Abstract

本发明提供了一种普罗布考纳米分散物及其制备方法。普罗布考的颗粒直径均在3微米以下，平均直径在800纳米以下，且稳定性较好。其制备方法为将普罗布考原料药与不同类型和不同浓度的稳定剂水溶液混合，采用行星式球磨机加液球磨法研磨分散。可采用冷冻干燥和喷雾干燥等技术干燥纳米混悬液，并进一步加工制得片剂、胶囊剂、干混悬剂等固体制剂。

Description

普罗布考纳米分散物及其制备方法

技术领域

本发明属于药物制剂技术领域，具体涉及水难溶性药物普罗布考的纳米分散物及其制备方法。

背景技术

目前，改善水溶性药物的溶出和口服生物利用度是药学研究和药品生产领域的难题。

普罗布考，化学名4，-[(1-甲基亚乙基)二硫]双[2,6-二（1,1-二甲乙基）苯酚]，是一种有效的高脂质血症治疗药，对动脉粥样硬化有很好的预防和治疗作用，尤其适用于家族性高血脂症。普罗布考不仅有降血脂的作用，其抗氧化、抗炎作用和对经皮经腔冠状动脉成形术（PTCA）的术后冠状动脉再狭窄的预防作用等方面都具有确切的效果［洪绍彩, 赵水平. 普罗布考对高密度脂蛋白胆固醇代谢的影响及其作用机制. 中国药理学通报, 2004, 20 (11): 1218-21；李婷婷, 郭媛. 普罗布考的研究新进展及应用前景. 心血管病学进展, 2009, 30 (4): 649-652. ]。

普罗布考为白色或类白色的结晶性粉末，熔点124℃-127℃，有特臭；强光、高热条件下分解，室温长期放置稳定；在三氯甲烷中易溶解，在乙醇中溶解，在水中不溶。普罗布考胃肠道吸收有限且不规则，一般报道口服生物利用度只有8%左右，口服剂量的84%从粪便排出，1%-2%从尿中排出，尿中代谢物为联对苯醌，粪便中以原形为主；与食物同服可增加其口服吸收；T_1/2为52-60小时。普罗布考为水不溶性药物（预测logP=8.92），属BCS分类的Ⅱ类药物，溶出度低为其生物利用度低的主要原因。目前，临床应用普罗布考为口服片剂，日服剂量1克，临床使用的口服制剂有规格为0.25克和0.125克的片剂。

有报道采用制备固体分散体、油溶液、微囊、包合物、自乳化药物传递系统、壳聚糖纳米粒等方法，以提高普罗布考的溶出度和改善其口服吸收[齐晓丹，曹德英. 普罗布考固体分散体的制备及体内评价. 中国医药工业杂志，2005，36 (8): 483-486；Enhanced bioavailability pharmaceutical composition containing probucol. WO92/10996； Improved delivery formulation for lipophilic drugs. WO93/21909；Delivery systems for hydrophobic drug. US6096338；Hiroaki Jizomoto，Eri Kanaoka. Gelatin-Acacia Microcapsules for Trapping Micro Oil Droplets Containing Lipophilic Drugs and Ready Disintegration in the Gastrointestinal Tract. Pharm. Res. 1993: 10 (8): 1115-1122；张正, 陈宝玲. 普罗布考包合物胶囊在家犬体内的药代动力学与相对生物利用度. 药学学报, 2002, 37 (3): 210-213；马俐丽, 朱照静. 普罗布考自微乳释药系统处方优化及体内外评价. 2009, 40 (1): 41-46；Flemming Seier Nielsen，Kamilla Bucminberg Petersen. Bioavailability of probucol from lipid and surfactant based formulations in minipigs: Influence of droplet size and dietary state. Eur. J. Pharm. Biopharm., 2008, 69: 553-562；高礼, 万锕俊. 普罗布考壳聚糖纳米粒子的制备及体外释放. 中国新药杂志, 2009, 18 (19): 1892-1896.]。但上述方法均存在一定的不足，如：载药量小，需添加大量药用辅料；制备包合物需要添加大量环糊精；乳剂要求药物在油相中有足够的溶解度；自微乳释药系统需要大量表面活性剂（可能引起不良反应）；固体分散体存在载体老化、不稳定等缺点；微囊和壳聚糖纳米粒等方法缺乏合适的工业化生产技术，难以转化为产品。

根据Noyes-Whitney方程可知，减小难溶性药物的粒径可增加药物的比表面积，从而极大的提高溶出度，进而提高药物的生物利用度。纳米混悬剂（Nanosuspension）给药系统正是利用这一策略来增加药物的溶出度。纳米混悬剂是利用高分子聚合物或表面活性剂的稳定作用，将药物颗粒分散在水中，通过粉碎或者控制析晶等技术形成的稳定的纳米胶态分散体。目前，将药物制成稳定的纳米胶态分散体主要有Top-down和Bottom-up两类技术。Top-down技术是将大颗粒的药物结晶分散到纳米范围尺寸，如高压均质法和介质研磨法；Bottom-up技术是将溶液中药物分子聚集形成纳米范围粒径的结晶，如乳化法和溶剂反溶剂法。由于Top-down技术制备过程需使用有机溶剂或油相、所制备混悬液中药物浓度低、不利于工业化生产等缺点，目前国外已上市的采用纳米分散技术的制剂均采用介质研磨或匀质技术。通过研磨或者匀质过程，可以将微米尺寸（通常50-500微米）的药物颗粒破碎成亚微米尺寸或纳米尺寸的微粒，在稳定剂的保护下，均匀分散于液体介质中。根据研磨过程中加液与否可以分为湿磨法（加液研磨法，Media milling method）和干磨法（Dry milling method）。干磨法制得的药物不再需要固化，但是由于没有液体的存在，研磨过程中能量输入大，磨珠与药物碰撞产热较高，容易引起药物性质发生改变，因此需要对样品进行控温，操作条件要求高，不利于转化生产[Adchara Pongpeerapat , Chalermphon Wanawongthai. Formation mechanism of colloidal nanoparticles obtained from probucol/PVP/SDS ternary ground mixture. Int. J. Pharm. 352 (2008) 309-316]。

加液研磨法具有大量优点，包括：所得到的混悬剂中的微粒粒径分布窄；可封闭研磨，磨罐和磨珠采用性质稳定的材质，容易保证样品的纯度；工艺简单、易控制、便于分离磨珠、适合工业化生产；直接获得高浓度纳米混悬液，可稀释或固体化；无有机溶剂（与溶剂挥发法制备固体分散体，或溶剂-非溶剂沉淀法制备纳米混悬剂等技术比较）；室温或低温加工，有利于药物稳定；能显著提高难溶性药物的溶出度，有利于改善药物吸收。目前，美国FDA批准上市的基于纳米分散物口服制剂中，多数采用加液研磨法。

适合湿法研磨的球磨机有很多类型，如：行星式球磨机、篮式球磨机、高能球磨机、立式球磨机、珠子磨等。行星式球磨机，其工作原理为：利用磨罐自转和公转产生的离心力、及磨罐与磨珠间的摩擦力等的作用，使磨珠与药物在罐内产生相互冲击、摩擦、上下翻滚，使得磨珠与磨料在高速运转中相互之间猛烈碰撞、挤压，大大提高了研磨效率和研磨效果［王继杰. 球磨机的研究进展及实用技术综述.中国陶瓷工业, 2007, 14 (5): 32-34. ]。

加液式球磨法制备难溶性药物的纳米分散物，通常耗时较长，分散后的颗粒易发生聚集，导致产品不稳定，生物利用度得不到改善。因此，选择适宜的研磨条件（包括磨球的材质、直径和用量，球磨机转速等）和适宜的稳定剂，以提高研磨效率和有效降低粒径，防止分散的药物颗粒聚集和提高分散物的物理稳定性，是成功制备难溶性药物的纳米分散物的关键。

发明内容

本发明的目的是提供性质稳定和药物含量高的普罗布考纳米分散物，以提高水不溶性药物普罗布考的溶出度，进而提高其生物利用度。

本发明的另一个目的是提供一种用行星式球磨制备普罗布考纳米分散物的方法。

本发明所述的普罗布考纳米分散物包括普罗布考和分散稳定剂等，其特征在于：纳米分散物性质稳定且药物含量高，普罗布考的颗粒直径均在3微米以下，平均直径在800纳米以下。

所述普罗布考纳米分散物中普罗布考原料药和分散稳定剂的质量优选在25:1-1:2之间。

所述普罗布考纳米分散物中普罗布考的含量在50-450毫克/毫升范围内。

本发明所述的普罗布考纳米分散物是通过以下方法制得的：

（1）将普罗布考原料药放入适宜的含有分散稳定剂的水溶液中，混匀，形成研磨物料混合物；

（2）向研磨物料混合物中加入总体积相当于磨罐容积40%-60%，直径为0.1-5毫米的磨珠，放入行星式球磨机中；

（3）根据球磨机的型号选择适宜的转速，研磨至适宜的粒径，即得。

通常，采用普通球磨机需研磨30小时以上，而采用行星式球磨机研磨5小时即可。

所述第（1）步的研磨物料混合物中，普罗布考与分散稳定剂的质量比在25:1-1:2范围内，研磨物料混合物中普罗布考的含量在50-450毫克/毫升范围内。

分散稳定剂的作用包括多个方面，包括：改善水不溶性药物的润湿性、降低界面张力、促进大颗粒崩碎、防止和减缓颗粒聚集、提供助悬效果等。对于药用纳米混悬剂，加液研磨时最适宜的溶剂为水，因此，常用的分散稳定剂为水溶性的适合药用的天然或合成高分子化合物、表面活性剂等、或其组合物。高分子聚合物和非离子表面活性剂可以起到空间稳定作用，离子型表面活性剂则起到电荷稳定的作用。适合使用的分散稳定剂包括：羟丙甲基纤维素、羟丙基纤维素、甲基纤维素、聚维酮、聚乙烯醇、聚乙二醇中、维生素E聚乙二醇琥珀酸酯、泊洛沙姆、聚山梨酯、十二烷基硫酸钠、十二烷基磺酸钠、去氧胆酸盐、吐温、多库酯钠、卵磷脂、大豆卵磷脂、聚氧乙烯蓖麻油衍生物中的一种或一种以上。

优选使用低分子量羟丙甲基纤维素、羟丙基纤维素和甲基纤维素等纤维素衍生物类稳定剂中的一种，与聚氧乙烯蓖麻油衍生物、泊洛沙姆、十二烷基硫酸钠中的一种或几种联合使用。

可根据具体的设备参数、处方组成等确定药物与分散稳定剂的质量比，稳定剂浓度过大，对应的黏度增加，不利于磨珠运动，会减小磨珠对药物的摩擦力及撞击力；稳定剂浓度太小又不能起到稳定纳米粒子的作用。

所述第（2）步中，球磨机中磨罐与磨珠的材质通常可以选择氧化锆、玛瑙、不锈钢、玻璃或交联的聚苯乙烯树脂等，磨珠和研磨物料混合物的体积占磨罐容积的百分率为介质填充率，其在40%-60%范围内，磨珠直径在0.1-5毫米。

所述第（3）步中，可根据具体的设备参数、处方组成等确定适宜的球磨机转速和研磨时间。转速越大，输入的动能越大，在一定程度上对减小粒子越有利。但当达到一定程度后，由于能量过大，会使小粒子不稳定，发生聚集。随研磨时间的延长，药物粒径减小，到一定程度后粒径不再改变或改变缓慢。

研磨后的分散液适当稀释后用激光动态光散射法测定分散颗粒的大小，均用此法测定了实施例1-14中药物混悬液的粒径分布。

研磨后的纳米分散液喷雾干燥后，经差示扫描量热分析（DSC）和粉末X-射线衍射分析（XPRD）验证，药物熔点基本不变，特征峰仍然存在，判断分散物中的药物仍以晶体状态存在，没有改变原料药固有的结晶性质。

本发明所提出的制备方法操作简便、不使用有机溶剂、适用于工业生产；通过选择合适的分散稳定剂，可获得高效的分散效果，分散时间短至几个小时，有效减小药物颗粒尺寸至3微米以下（大部分药物颗粒小于1微米）；所得纳米分散物中药物含量高、且分散的颗粒不易发生聚集、稳定性良好；能显著提高普罗布考的溶出度。该技术可用于提高普罗布考口服给药的生物利用度，减少患者口服剂量，从而改善患者的顺应性。

所制备的普罗布考纳米分散液可以加入适宜的药用辅料制备成供药用的混悬剂，混悬剂的稳定性良好，放置15天粒径无明显增大，即颗粒无明显聚集。普罗布考纳米分散液中可加入适宜的填充剂、崩解剂等，并采用药剂学公知的技术制成颗粒剂、片剂和胶囊剂。普罗布考纳米分散液也可以用离心、超滤等方法浓缩后，或加入适宜的药用辅料后经过喷雾干燥、冷冻干燥等方法干燥后，再进一步采用药剂学公知的技术制成片剂，胶囊剂等剂型。

附图说明

图1为实施例1-8所制得药物混悬液的粒径分布图。

图2为实施例9-14所制得药物混悬液的粒径分布图。

图3为实施例5-8所制得药物混悬液的溶出度曲线。所选择溶出条件如下：溶出介质为2%十二烷基硫酸钠溶液，900毫升；转速100转/分钟；温度37±0.5℃。本发明经实验证实，与普罗布考原料药相比，纳米分散物的溶出速度显著提高。

图4为实施例6中所制得药物混悬液喷雾干燥的分散物样品的X-PRD图。结果表明，药物经研磨、喷干后，特征峰仍存在，药物晶体固有性质没有改变。

图5实施例6中所制得药物混悬液经喷雾干燥的分散物样品的DSC图。结果表明药物经研磨、喷干后，熔点没有变化，药物仍以晶体状态存在。

图6实施例6所制得药物混悬液放置0、3、5、15天过程中药物颗粒粒径的变化。结果表明，药物混悬液在15天内粒径变化不大，药物混悬液稳定性良好。

图7实施例8所制备普罗布考纳米分散液及普罗布考市售片制备的粗分散液的大鼠体内药时曲线。A为普罗布考纳米分散液；B为市售片制备的粗混悬剂。

普罗布考纳米分散液的相对生物利用度为市售片制备的粗分散液的520%。

具体实施方式

实施例1： 将5克普罗布考药物混悬于含1% HPMC-603的溶液20毫升中（普罗布考和分散稳定剂的质量比为25:1），混匀，加入质量150克，直径0.5毫米的磨珠，置行星式球磨机中，以1015转/分的转速，研磨5小时。平均强度径为846.2纳米。

实施例2： 将5克普罗布考药物混悬于含5%HPMC-603的溶液20毫升中（普罗布考和分散稳定剂的质量比为5:1），混匀，加入质量150克，直径0.5毫米的磨珠，置行星式球磨机中，以1015转/分的转速，研磨5小时。平均强度径为1292.3纳米。

实施例3： 将5克普罗布考药物混悬于含2% HPMC-603的溶液20毫升中（普罗布考和分散稳定剂的质量比为12.5:1），混匀，加入质量150克，直径0.5毫米的磨珠，置行星式球磨机中，以1015转/分的转速，研磨4小时。平均强度径为519.8纳米。

实施例4： 将5克普罗布考药物混悬于含2%HPMC-603的溶液20毫升中（普罗布考和分散稳定剂的质量比为12.5:1），混匀，加入质量150克，直径0.5毫米的磨珠，置行星式球磨机中，以1015转/分的转速，研磨5小时。平均强度径为439纳米。

实施例5： 将5克普罗布考药物混悬于含2%HPMC-603、0.1%SDS的溶液20毫升中（普罗布考和分散稳定剂的质量比为5:0.42），混匀，加入质量150克，直径0.5毫米的磨珠，置行星式球磨机中，以1015转/分的转速，研磨5小时。平均强度径为374纳米，其2小时溶出量为24%。

实施例6： 将5克普罗布考药物混悬于含2%HPMC-603、1%F68、0.1%SDS的溶液20毫升中（普罗布考和分散稳定剂的质量比为5:0.62，混匀，加入质量150克，直径0.5毫米的磨珠，置行星式球磨机中，以1015转/分的转速，研磨5小时，平均强度径为286.2纳米，其2小时溶出量为29%。

实施例7： 将5克普罗布考药物混悬于含2%TPGS、1%F68、0.1%SDS的溶液20毫升中（普罗布考和分散稳定剂的质量比为5:0.62），混匀，加入质量150克，直径0.5毫米的磨珠，置行星式球磨机中，以1015转/分的转速，研磨5小时，平均强度径为257.0纳米，其2小时溶出量为42%。

实施例8： 将5克普罗布考药物混悬于含2%HPC-SL、1%F68、0.1%SDS的溶液20毫升中（普罗布考和分散稳定剂的质量比为5:0.62），混匀，加入质量150克，直径0.5毫米的磨珠，置行星式球磨机中，以1015转/分的转速，研磨5小时，平均强度径为271.9纳米，其2小时溶出量为35%。

实施例9： 将5克普罗布考药物混悬于含2%HPMC-603、1%F68、0.1%SDS的溶液20毫升中（普罗布考和分散稳定剂的质量比为5:0.62），混匀，再加入质量150克，直径为5毫米的磨珠，置行星式球磨机中，以1015转/分的转速，研磨5小时，平均强度径为971.2纳米。

实施例10： 将5克普罗布考药物混悬于含2%HPMC-603、1%F68、0.1%SDS的溶液20毫升中（普罗布考和分散稳定剂的质量比为5:0.62），混匀，再加入质量150克，直径为10毫米的磨珠，置行星式球磨机中，以1015转/分的转速，研磨5小时，平均强度径为1453.7纳米。

实施例11： 将5克普罗布考药物混悬于含2%HPMC-603、1%F68、0.1%SDS的溶液20毫升中（普罗布考和分散稳定剂的质量比为5:0.62），混匀，再加入直径为0.5毫米的磨珠75克，及直径为5毫米的磨珠75克，置行星式球磨机中，以1015转/分的转速，研磨5小时，平均强度径为727.7纳米。

实施例12： 将9克普罗布考药物混悬于含2%HPMC-603、1%F68、0.1%SDS的溶液20毫升中（普罗布考和分散稳定剂的质量比为9:0.62），混匀，加入直径0.5毫米的氧化锆磨珠150克，置行星式球磨机中，以1015转/分的转速，研磨5小时，平均强度径为570.4纳米。

实施例13： 将1克普罗布考药物混悬于含2%HPMC-603、1%F68、0.1%SDS的溶液20毫升中（普罗布考和分散稳定剂的质量比为1:0.62），混匀，加入直径0.5毫米的氧化锆磨珠150克，置行星式球磨机中，以1015转/分的转速，研磨5小时，平均强度径为410.6纳米。

实施例14： 将10克普罗布考药物混悬于含2%HPMC-603、1%F68、0.1%SDS的溶液20毫升中（普罗布考和分散稳定剂的质量比为10:0.62），混匀，加入直径0.5毫米的氧化锆磨珠150克，置行星式球磨机中，以1015转/分的转速，研磨5小时，平均强度径为1311.6纳米。

实施例15： 取山梨醇溶液4.3毫升，糖浆1.4毫升及一定量的纯水混合均匀，加热后加入尼泊金甲酯0.014克，尼泊金丙酯0.0046克，冷却后，搅拌条件下加入到按实施例8方法制备的普罗布考纳米分散液中，补加纯水适量，制得每10毫升含普罗布考250毫克的混悬液。

实施例16： 将1.25克微晶纤维素，1克乳糖，0.24克交联羧甲基纤维素钠混合均匀，加10毫升按实施例8方法制备普罗布考纳米分散液，制软材，过40目筛，60℃干燥，40目筛整粒，再加入0.01克硬脂酸镁，混匀压片，每片含普罗布考125毫克。

实施例17： 将按实施例8方法制备的普罗布考纳米分散液喷雾干燥除去水分，取5g干燥粉末，加入微晶纤维素2克、乳糖1.5克、交联羧甲基纤维素钠0.5克，羟丙基纤维素0.35克，微粉硅胶0.10克，硬脂酸镁0.05克，混合均匀，压片，每片含普罗布考125毫克。

实施例18： 将按实施例8方法制备的普罗布考纳米分散液，加入相当于药物重量50%的海藻糖为冻干支撑剂，冷冻干燥。加入相当于冻干粉重量0.5%的羧甲基纤维素钠、0.02%的阿斯巴甜，混合均匀，分装为每袋含普罗布考250毫克的干混悬剂。

实施例19： 将按实施例8方法制备的普罗布考纳米分散液，加入相当于药物重量50%的乳糖为冻干支撑剂，冷冻干燥。加入相当于冻干粉重量5%的聚维酮K30、3%的蔗糖，混合均匀，分装为每袋含普罗布考250毫克的干混悬剂。

实验例20： 将12只大鼠随机分为两组，分别灌胃给予按实施例8制备的普罗布考纳米混悬剂与市售片所制成的粗混悬剂，按每千克大鼠体重单次灌胃给药250毫克，普罗布考分散液相对生物利用度为市售片剂的520%。

Claims

1.一种普罗布考纳米分散物，其特征在于，将5克普罗布考药物混悬于含2%HPMC-603、0.1%SDS的溶液20毫升中，普罗布考和分散稳定剂的质量比为5：0.42，混匀，加入质量150克，直径0.5毫米的磨珠，置行星式球磨机中，以1015转/分的转速，研磨5小时，平均强度径为374纳米，其2小时溶出量为24%。

2.一种普罗布考纳米分散物，其特征在于，将5克普罗布考药物混悬于含2%HPMC-603、1%F₆₈、0.1%SDS的溶液20毫升中，普罗布考和分散稳定剂的质量比为5：0.62，混匀，加入质量150克，直径0.5毫米的磨珠，置行星式球磨机中，以1015转/分的转速，研磨5小时，平均强度径为286.2纳米，其2小时溶出量为29%。

3.一种普罗布考纳米分散物，其特征在于，将5克普罗布考药物混悬于含2%TPGS、1%F₆₈、0.1%SDS的溶液20毫升中，普罗布考和分散稳定剂的质量比为5：0.62，混匀，加入质量150克，直径0.5毫米的磨珠，置行星式球磨机中，以1015转/分的转速，研磨5小时，平均强度径为257.0纳米，其2小时溶出量为42%。

4.一种普罗布考纳米分散物，其特征在于，将5克普罗布考药物混悬于含2%HPC-SL、1%F₆₈、0.1%SDS的溶液20毫升中，普罗布考和分散稳定剂的质量比为5：0.62，混匀，加入质量150克，直径0.5毫米的磨珠，置行星式球磨机中，以1015转/分的转速，研磨5小时，平均强度径为271.9纳米，其2小时溶出量为35%。