CN102424663B - 一种阿托伐他汀氨基酸盐及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种阿托伐他汀氨基酸盐和这些盐的制备方法，阿托伐他汀酸与碱性氨基酸反应得到这类化合物，其制备方法：(1)称取阿托伐他汀酸，溶解于C1-C6的醇溶剂、水中或卤代烃溶剂中，溶解形成溶液甲；(2)称取碱性氨基酸，溶解于C1-C6的醇溶剂或水中，溶解形成溶液乙；(3)将上述乙溶液加入甲溶液，混合溶液开始澄清，从母液中析出晶体，即为阿托伐他汀的氨基酸盐。本发明制备的阿托伐他汀氨基酸盐不仅具有治疗高胆固醇血脂和混合型高脂血症的作用，还增加了氨基酸具有的功能，例如精氨酸对肝脏有保护的功能，因此所发明的盐有效弥补已知的钙盐、钾盐和钠盐等对肝脏损伤的副作用的缺陷。

Description

一种阿托伐他汀氨基酸盐及其制备方法

技术领域

本发明属于心血管病医药领域，涉及阿托伐他汀盐，尤其一种阿托伐他汀氨基酸盐及其制备方法。

背景技术

心血管疾病严重危害了人类的健康、影响了人类的生活品质，立普妥(Lipitor)，又名阿托伐他汀(Atorvastatin)，作为他汀类血脂调节药，属HMG-CoA还原酶抑制剂，目前使用的主要是阿托伐他汀钙盐。

阿托伐他汀钙盐本身无活性，它的主要活性成分是经口服吸收后的水解产物。其在体内竞争性地抑制胆固醇合成过程中的限速酶羟甲戊二酰辅酶A还原酶，从而使胆固醇的合成减少，也使低密度脂蛋白受体合成增加。其主要作用部位在肝脏，结果使血胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平降低，中度降低血清甘油三酯水平和增高血高密度脂蛋白水平，由此对动脉粥样硬化和冠心病的防治产生作用，常被用于治疗高胆固醇血症和混合型高脂血症，冠心病和脑中风的防治，但是，长期服用它也会导致肝脏的问题。同其它降脂药一样，它与肝功能的生化异常有关，服用时，血氨基转移酶可能增高，长期治疗时，需定期检测肝功能。

阿托伐他汀的活性成分是有机酸，它能与碱发生反应，生成盐，同时阿托伐他汀有治疗高胆固醇血症和混合型高脂血症的作用。

精氨酸是人体必须的氨基酸之一，为碱性氨基酸，能与阿托伐他汀酸反应生成盐，精氨酸能有效地保护肝脏，降低血氨水平，常被用于肝昏迷、对肝脏过多地积累的氨引起中毒，具有解毒与减轻脂肪的作用，预防肝硬化的形成等其他很多有益的生理功能，因此被称为肝脏器官的忠诚卫士。

组氨酸可以维护生长与消化，并起到免疫的功能；赖氨酸能促进人体发育、增强免疫功能，改善药物的性能，提高药效，还可作为利尿剂的辅助药物，它能改善立普妥原药的对肾功能的损坏作用。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种水溶性好、能有效保护肝脏、提高免疫力和改善肾功能损坏的药品纯度高的阿托伐他汀氨基酸盐及其制备方法。

本发明实现目的的技术方案是：

一种阿托伐他汀氨基酸盐，由阿托伐他汀酸与碱性氨基酸反应得到。

而且，其结构式如下：

且，所述阿托伐他汀酸由阿托伐他汀叔丁酯C₄₀H₄₇FN₂O₅制备得到。

一种阿托伐他汀氨基酸盐的制备方法，步骤如下：

(1)称取阿托伐他汀，溶解于C1-C6的醇溶剂或水中或卤代烃溶剂中，溶解形成溶液甲；

(2)称取碱性氨基酸，与阿托伐他汀的摩尔比为1-5∶1，溶解于C1-C6的醇溶剂或水中，溶解形成溶液乙；

(3)将上述乙溶液逐滴滴入或直接加入甲溶液，混合溶液开始澄清，室温或加热回流反应，即为阿托伐他汀的氨基酸盐溶液，盐溶液静止至室温，白色沉淀或无色晶体产生，过滤得到白色固体或无色晶体即为阿托伐他汀的氨基酸盐。

一种阿托伐他汀氨基酸盐的制备方法，反应步骤为：阿托伐他汀叔丁酯C40H47FN2O5溶解在C1-C6的醇溶剂或卤代烃溶剂或卤代烃溶剂或水中→向溶液中加有机酸或无机酸→加入碱性氨基酸→得到阿托伐他汀氨基酸盐溶液→冷却、过滤得到阿托伐他汀氨基酸盐或直接蒸干溶剂得到阿托伐他汀氨基酸盐，其中阿托伐他汀叔丁酯∶盐酸∶碱性氨基酸的摩尔当量比为1∶1∶3。

而且，所述反应步骤为：

(1)将阿托伐他汀叔丁酯加入到无水乙醇中，搅拌溶解；

(2)向上述溶液中加入盐酸溶液，在70-80℃左右搅拌，加热回流，溶液很快澄清，约1-2h后，反应完全；

(3)继续加入碱性氨基酸，加热回流约25-35h后，停止反应；

(4)旋蒸除去溶剂，除去多余的碱性氨氨酸，即得阿托伐他汀氨基酸盐，

其中阿托伐他汀叔丁酯∶盐酸∶碱性氨基酸的摩尔当量比为1∶1∶3。

而且，所述醇溶剂为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、丙二醇、丙三醇溶剂，所述无机酸为盐酸、三氟乙酸、冰醋酸、硫酸、磷酸，所属卤代烃溶剂为：氯仿、二氯甲烷、二氯乙烷。

一种阿托伐他汀氨基酸盐的制备方法，反应步骤为：阿托伐他汀叔丁酯C₄₀H₄₇FN₂O₅溶解在C1-C6的醇溶剂中或卤代烃溶剂或水中→向溶液中加有机酸或无机酸→向溶液中加入有机碱或无机碱→向溶液中加有机酸或无机酸→再加入碱性氨基酸→得到阿托伐他汀氨基酸盐溶液→溶液中析出晶体即阿托伐他汀氨基酸盐，

而且，反应步骤如下：

(1)在反应器中加入阿托伐丁叔丁酯、甲醇，搅拌溶解；

(2)再加入的盐酸溶液，在室温30-35℃搅拌反应，反应液开始时为白色悬浊液，经过一段时间后变为无色透明，经TLC检测反应完成；用的氢氧化钠溶液调节溶液至中性或弱碱性，再加入等摩尔的氢氧化钠溶液，TLC跟踪反应，得到此时溶液为阿托伐他汀钠盐溶液；

(3)用盐酸溶液调节溶液pH＝3-4，此时溶液为阿托伐他汀酸溶液；再调节溶液至弱酸性，再向溶液中加入1-1.5摩尔当量的碱性氨基酸，在70-80℃下加热回流6-7小时，旋蒸除去溶剂，真空干燥1-3h，无水甲醇溶解干燥后的固体，过滤除去碱性氨基酸，除去甲醇，残渣用真空油泵干燥2h，得到阿托伐他汀氨基酸盐；

其中所述碱为无机碱或有机碱，所述无机碱为碳酸氢锂、碳酸氢钠、碳酸氢钾、碳酸锂、碳酸钠、碳酸钾、氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾或氢氧化钙，所述有机碱为氨水、氢氧化铵、甲基胺、三乙胺、二乙基胺、丙基胺、丁基胺。

上述阿托伐他汀氨基酸盐在降低胆固醇药物中的应用或治疗高胆固醇血症和混合型高脂血症的药物中的应用或保护肝脏药物中的应用或作为提高免疫力药物同时保护肾功能药物中的应用。

本发明的优点和有益效果为：

1、本发明针对已知的阿托伐他汀钙盐、钾盐和钠盐等盐做了改进和发明，本发明采用了阿托伐他汀酸与氨基酸反应生成盐的形式生成新的阿托伐他汀酸氨基酸盐。众所周知氨基酸除生成能量以外，还有多种生理功效，如促进蛋白质合成、促进胶原合成、促进生长激素分泌、保护肝功能、解毒、预防酒精造成的肝功能损伤、以及提高免疫功能、安眠、美肤美容等等，改进后的药物不仅具有治疗高胆固醇血脂和混合型高脂血症的作用，还增加了氨基酸具有的功能，有效弥补该药治疗过程中的肝脏损伤的缺陷。

2、本发明制备的阿托伐他汀氨基酸盐的水溶性得到了很大的提高，溶解后可以制成更多的剂型，如注射液、口服液、片剂、冲剂、胶囊、滴丸、糖浆型等，丰富了阿托伐他汀类药物的剂型，提高的该类药物的应用范围。

4、本发明提供了另外的两种制备阿托伐他汀氨基酸盐方法，该两种方法的起始物为阿托伐他汀叔丁酯，阿托伐他汀叔丁酯具有更加优惠的价格，并且在反应过程中能够控制反应的进行，有效控制阿托伐他汀氨基酸盐的成品率，提高反应效率，增加原始产品的利用率。

5、本发明所制备的阿托伐他汀氨基酸盐也对已知的阿托伐他汀钙盐、钾盐和钠盐等的生理功效做了改进；采用了阿托伐他汀酸与氨基酸反应生成的盐，比已知的钙盐药物提高了溶解度；阿托伐他汀氨基酸盐不仅具有治疗高胆固醇血脂和混合型高脂血症的作用，还增加了氨基酸具有的功能，例如精氨酸对肝脏有保护的功能，因此所发明的盐有效弥补已知的钙盐、钾盐和钠盐等对肝脏损伤的副作用的缺陷。又例如，赖氨酸能促进人体发育、增强免疫功能，改善药物的性能，提高药效，还可作为利尿剂的辅助药物，这就改善了立普妥原药的对肾功能的损坏作用。

6、本发明涉及的阿托伐他汀氨基酸盐与阿托伐他汀的钙盐相比，提高了水溶性，有利于人体的吸收。

附图说明

图1为本发明阿托伐他汀精氨酸盐的MS谱图；

图2为本发明阿托伐他汀精氨酸盐的1HNMR图；

图3为本发明阿托伐他汀精氨酸盐的晶体照片；

图4为本发明阿托伐他汀精氨酸盐照片；

图5为本发明药物注射后不同时间点小鼠血清转氨酶水平；

图6为本发明药物注射后24小时小鼠肝脏病理情况。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明作进一步详述，以下实施例只是描述性的，不是限定性的，不能以此限定本发明的保护范围。

本发明涉及的阿托伐他汀氨基酸盐的原理是采用阿托伐他汀酸与氨基酸反应的，氨基酸的结构通式为，其中-R基中包括-NH₂或-NH-基团类的氨基酸，也包括该类氨基酸的部分衍生物，本实施例中涉及的碱性氨基酸为精氨酸、赖氨酸、组氨酸。本发明中阿托伐他汀氨基酸盐中阿托伐他汀与氨基酸结合力包括离子键以及范德华力。

本发明涉及的阿托伐他汀氨基酸盐与阿托伐他汀的钙盐相比，提高了水溶性，有利于人体的吸收。

实施例1

一种阿托伐他汀精氨酸盐，其成盐后的结构式如下：

一种阿托伐他汀精氨酸盐的制备方法，步骤如下：

(1)称取117mg阿托伐他汀，溶解于1mL乙醇中，加热到75℃左右，溶液呈均一不透明状，形成溶液甲；

(2)称取36mg精氨酸，溶解于0.1mL H₂O中，并加热到75℃左右，溶液呈均一澄清状，形成溶液乙；

(3)将上述溶液乙逐滴滴入甲溶液，混合溶液开始澄清，加热到约75℃左右回流，冷却析出晶体，将产物分离出来，用1H NMR、MS等测定，其即为阿托伐他汀的精氨酸盐。

本实施例采用阿托伐他汀的酸，具有降血脂的作用，其与精氨酸作用形成水溶性好的盐，精氨酸不仅具有能与阿托伐他汀酸反应产生盐的功能，改善心血管系统疾病，还能有效保护肝脏，对肝脏过多地积累的氨引起中毒，有解毒与减轻脂肪的作用，预防肝硬化的形成大有益处，它被称为肝脏器官的忠诚卫士。两者成盐得到的新化合物能兼具降血脂和护肝的作用，减小了阿托伐他汀用药的副作用。

实施例2

一种阿托伐他汀赖氨酸盐，其成盐后的结构式如下：

一种阿托伐他汀赖氨酸盐的制备方法，步骤如下：

(1)称取117mg阿托伐他汀，溶解于1mL乙醇中，加热到75℃左右，溶液呈均一不透明状，形成溶液甲；

(2)称取30mg赖氨酸，溶解于0.1mL H₂O中，并加热到75℃左右，溶液呈均一澄清状，形成溶液乙；

(3)将上述溶液乙逐滴滴入甲溶液，混合溶液开始澄清，加热到约75℃左右，加热到约75℃左右回流，冷却析出晶体，将产物分离出来，用1H NMR、MS等测定，其即为阿托伐他汀的赖氨酸盐。

本实施例将阿托伐他汀酸与赖氨酸进行反应，生成它的盐，就进一步促进了原药阿托伐他汀的功效。赖氨酸是人体必需氨基酸之一，能促进人体发育、增强免疫功能，并有提高中枢神经组织功能的作用，由于谷物食品中的赖氨酸含量甚低，且在加工过程中易被破坏而缺乏，故称为第一限制性氨基酸；在医药上赖氨酸还可改善某些药物的性能，提高药效；赖氨酸在医药上还可作为利尿剂的辅助药物，这就改善了立普妥原药的对肾功能的损坏作用，同时它可以可以降低血中甘油三酯的水平，预防心脑血管疾病的产生。

实施例3

一种阿托伐他汀组氨酸盐，其成盐后的结构式如下：

一种阿托伐他汀组氨酸盐的制备方法，步骤如下：

(1)称取117mg阿托伐他汀，溶解于1mL乙醇中，并加热到75℃左右，溶液呈均一不透明状，形成溶液甲；

(2)称取32mg组氨酸，溶解于0.1mL H₂O中，并加热到75℃左右，溶液呈均一澄清状，形成溶液乙；

(3)将上述乙溶液逐滴滴入甲溶液，混合溶液开始澄清，加热到约75℃左右回流，分离出产物，其即为阿托伐他汀的组氨酸盐。

本实施例将阿托伐他汀酸与碱性组氨酸反应形成盐，具有改善原药阿托伐他汀用药中的副作用。组氨酸(L-Histidine)可以维护我们的生长与消化，组氨酸对生长、组织修护、溃疡、控制胃酸、消化及胃液等均具有重要的作用，它有助于治疗过敏、风湿性关节炎、贫血等病，制造红血球、白血球都需要组氨酸；组氨酸组成了组织氨，它能释放到细胞外，还能起到免疫的功能。

本发明中阿托伐他汀氨基酸盐可由阿托伐他汀叔丁酯先与酸反应，再与碱性氨基酸反应，最后生成阿托伐他汀氨基酸盐，具体实施方式如下：

以下实施例4、5、6是以阿托伐他汀叔丁酯与精氨酸反应为例来说明阿托伐他汀氨基酸盐的制备方法：

实施例4

一种阿托伐他汀精氨酸盐的制备方法，步骤如下：

(1)将264mg(0.4mmol)阿托伐他汀叔丁酯加入到3mL无水乙醇中，搅拌溶解；

(2)向上述溶液中加入1mL盐酸溶液(1mol/L)，在75℃左右搅拌，加热回流，溶液很快澄清，约1.5h后，反应完全；

(3)继续加入1g精氨酸，继续加热回流约30h后，停止反应；

(4)旋蒸除去溶剂，油泵抽干，用适量无水乙醇溶解，抽滤，收集滤液。然后旋蒸去掉滤液，抽干，溶解，过滤等重复操作几次，保证精氨酸完全除去，即得到较纯的阿托伐他汀精氨酸盐。

本实施例中阿托伐他汀精氨酸盐产率为86％。

实施例4的化学反应结构式示意图如下图所示：

实施例5

一种阿托伐他汀精氨酸盐的制备方法，步骤如下：

(1)阿托伐他汀叔丁酯10g，70mL无水甲醇于250mL的三口瓶中，常温下搅拌；

(2)逐滴加入5mL浓盐酸使其pH≤1，常温下搅拌，数分钟后溶液澄清透明，过程TLC检测(氯仿∶甲醇＝50∶1)，一个小时后，反应完毕。

(3)将反应瓶置于冰浴中，用5mol/L NaOH溶液调碱pH＝13-14，3h后反应完毕，旋蒸除去反应液中的甲醇，剩余残渣倒入100mL水中，该悬浊液用100mL×2甲基叔丁基醚洗涤。分离除去甲基叔丁基醚，剩余水的悬浊液用1mol/L的HCl溶液调酸至pH＝3-4，该溶液用80mL×3的乙酸乙酯萃取，分离出的有机相用饱和的NaHCO₃溶液调至pH＝6-7，分离除去少量的水，有机相用饱和的氯化钠溶液40mL洗涤一次，无水硫酸钠干燥2h，旋蒸去除乙酸乙酯，得到阿托伐他汀酸7.5g。

(4)将得到的7.5g阿托伐他汀酸，与30mL无水甲醇，4.7g的L-精氨酸，5mL的水混合溶解于三口瓶，加热回流8h。

(5)旋蒸除去溶剂，真空干燥2h，50mL无水甲醇溶解干燥后的固体，过滤除去L-精氨酸，反复五次，旋蒸除去甲醇，残渣用真空油泵干燥2h，得到阿托伐他汀精氨酸盐7.2g。

本实施例中阿托伐他汀精氨酸盐产率为72.9％。

实施例6

一种阿托伐他汀精氨酸盐的制备方法，步骤如下：

(1)在反应器中加入阿托伐他汀叔丁酯0.369g(0.564mmol)，甲醇5ml，搅拌溶解；

(2)再加入0.3ml的1mol/L的盐酸溶液，在室温30-35℃搅拌反应，反应液开始时为白色悬浊液，经过一段时间后变为无色透明，经TLC检测原料消失，反应完成；用1mol/L的氢氧化钠溶液调节溶液至中性或弱碱性，再加入等摩尔的氢氧化钠溶液，TLC跟踪反应，待反应结束后，此时溶液为阿托伐他汀钠盐溶液。

(3)用盐酸溶液调节溶液pH＝3-4，此时溶液为阿托伐他汀酸溶液；再调节溶液至弱酸性，再向溶液中加入1-1.5摩尔当量的精氨酸，在75℃下加热回流6-7小时，旋蒸除去溶剂，真空干燥2h，10mL无水甲醇溶解干燥后的固体，过滤除去L-精氨酸，反复五次，旋蒸除去甲醇，残渣用真空油泵干燥2h，得到阿托伐他汀精氨酸盐。

实施例5-6的反应原理示意图如下：

注：阿托伐他汀叔丁酯(即(4R-cis)-6-[2-[2-(4-氟苯基)-5-(1-异丙基)-3-苯基-4-[(苯胺)羟基]-1H-吡咯-1-基]乙基]-2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-乙酸叔丁酯)结构式，分子式：C₄₀H₄₇FN₂O₅，结构式如下：

阿托伐他汀酸的结构式为：

本发明中阿托伐他汀氨基酸盐的结构式如下：

1、一个阿托伐他汀酸+多个精氨酸(即n个)结构式：

2、一个阿托伐他汀酸+多个组氨酸(即n个)结构式：

3、一个阿托伐他汀酸+多个赖氨酸(即n个)结构式：

4、阿托伐他汀酸+(精氨酸)m+(组氨酸)n+(赖氨酸)m等等或其中两个氨基酸的结构式：

动物

实验

化合物立普妥的精氨酸盐(其实验代号为HL-002-001-01)肝脏毒性检测报告

实验目的

用小鼠肝脏损伤动物模型验证化合物HL-002-001-01的肝脏毒性，并与同剂量下得刀豆蛋白A(阳性对照)、立普妥进行比较。

实验方法

小鼠眼静脉注射10mg/kg的刀豆蛋白A(阳性对照)、立普妥和化合物HL-002-001-01，在不同时间点赖氏法测转氨酶水平，24小时后取肝组织脱水、包埋、石蜡切片、HE染色，进行病理分析。

实验结果

小鼠肝损伤后的血清转氨酶水瓶曲线(图5)；

药物注射后24小时小鼠肝脏病理情况(图6)。

从实验结果中可以看出，在10mg/kg的浓度下，化合物HL-002-001-01的肝脏毒性显著低于同剂量的立普妥和刀豆蛋白A，从24小时肝脏病理切片也可以看出，化合物HL-002-001-01造成的肝脏病理损伤程度较立普妥和刀豆蛋白A轻。

结论

在10mg/kg剂量下，化合物HL-002-001-01的肝脏毒性明显低于同剂量的立普妥和阳性对照刀豆蛋白A。

Claims (1)

1.一种阿托伐他汀精氨酸盐的制备方法，其特征在于：步骤如下：

⑴阿托伐他汀叔丁酯10g，70mL无水甲醇于250mL的三口瓶中，常温下搅拌；

⑵逐滴加入5mL浓盐酸使其pH≤1，常温下搅拌，数分钟后溶液澄清透明，过程TLC检测，氯仿：甲醇=50:1，一个小时后，反应完毕；

⑶将反应瓶置于冰浴中，用5mol/LNaOH溶液调碱pH=13-14，3h后反应完毕，旋蒸除去反应液中的甲醇，剩余残渣倒入100mL水中，该悬浊液用100mL×2甲基叔丁基醚洗涤，分离除去甲基叔丁基醚，剩余水的悬浊液用1mol/L的HCl溶液调酸至pH=3-4，该溶液用80mL×3的乙酸乙酯萃取，分离出的有机相用饱和的NaHCO₃溶液调至pH=6-7，分离除去少量的水，有机相用饱和的氯化钠溶液40mL洗涤一次，无水硫酸钠干燥2h，旋蒸去除乙酸乙酯，得到阿托伐他汀酸7.5g；

⑷将得到的7.5g阿托伐他汀酸，与30mL无水甲醇，4.7g的L-精氨酸，5mL的水混合溶解于三口瓶，加热回流8h；

⑸旋蒸除去溶剂，真空干燥2h，50mL无水甲醇溶解干燥后的固体，过滤除去L-精氨酸，反复五次，旋蒸除去甲醇，残渣用真空油泵干燥2h,得到阿托伐他汀精氨酸盐7.2g。

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