CN102367589A - 一种二元金纳米粒子Janus组装体的制备方法 - Google Patents

一种二元金纳米粒子Janus组装体的制备方法 Download PDF

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Abstract

一种二元金纳米粒子Janus组装体的制备方法，属于材料化学技术领域。本发明包括金纳米粒子合成，金纳米棒合成，金纳米粒子修饰DNA1，金纳米棒修饰DNA2，磁性纳米粒子修饰DNA3，金纳米棒和磁性纳米粒子组装，金纳米棒DNA的不对称延长，金纳米棒和磁性纳米粒子解离，二元金纳米粒子Janus组装体结构的形成及表征。由于二元金属纳米材料在自组装材料中表现出来的不同于两种单独的金属纳米材料的令人着迷的性质，本发明构建了高产的二元金属纳米粒子的Janus组装体并对其性质进行研究显得尤为重要。

Description

一种二元金纳米粒子Janus组装体的制备方法
技术领域
一种二元金纳米粒子Janus组装体的制备方法，属于材料化学技术领域。
背景技术
近年来，具有特定形状的金纳米材料的自组装体拥有异于单分散的金纳米材料和金体材料的独特性质使得其具有极其光明的应用前景，因此，金纳米材料的自组装得到了全世界纳米科学家的广泛关注。其中金纳米材料主要包括金纳米粒子和金纳米棒等，这些纳米材料具有粒径及形状依赖性的光吸收、光散射及拉曼增强效应等使得这两种纳米粒子作为纳米科学与技术研究中应用最为广泛的两种材料，尤其金纳米棒。
单个的金纳米棒由于棒上的导带电子有两个谐振的方向即沿着棒的长轴的方向或者垂直于棒长轴的方向进而导致了其有两个局部表面等离子共振峰——纵向等离子共振峰（近红外或者红外区）和横向等离子共振峰（520nm左右）。并且金纳米棒同时具有空间几何和化学各向异性，并且金纳米棒可以通过改变长径比（金纳米棒的长度和金纳米棒的直径的比值）调节金纳米棒的纵向共振峰来实现金纳米棒在可见光或者近红外区域强的光吸收，因而这些独特的性质使得金纳米棒能够实现可控自组装材料良好的“原料”，进而能够提供对自组装纳米材料进行理论解析的一个良好的模型。通过研究可控、动态自组装材料的性质可以更好地理解宏观材料的物理和化学性质。在可控纳米材料自组装的过程中，纳米材料的各向异性及其表现出来的特异化学反应性质成为纳米材料自组装的关键因素。
“Janus”粒子在1991年首次由De Gennes 在诺贝尔颁奖大会上提出，以便于用来描述粒子的两个球面具有不同的性质。这种不同的性质主要是由于这种粒子的两个球面的不同性质导致形成的，Janus粒子由于其独特的不对称结构和性能受到科学界的广泛重视，其具有非常强的应用前景。目前，Janus粒子的制备方法主要有：微流体合成，拓扑选择表面改性，模板自组装，可控相分离，可控表面成核等几种方法。由于金纳米材料的自组装体具有非常强的等离子耦合效应，导致电磁场增强等良好的性质，二元金属纳米材料在自组装材料中表现出来不同于的两种单独的金属纳米材料的令人着迷的性质，着实使得纳米粒子Janus组装体犹如一朵奇葩，其光芒令人夺目。而令人惊奇的是，到目前为止世界上还未有成功构建高产的二元纳米粒子的Janus组装体的报道。如何构建高产的二元金属纳米粒子的Janus组装体并对其性质进行研究显得尤为重要。 
发明内容
本发明的目的是提供一种新型制备纳米粒子Janus组装体的方法，制备出高产，组装结构均一，可控的纳米粒子Janus组装体，并对其性质（例如：手性等）进行了研究。
本发明的技术方案：一种二元金纳米粒子Janus组装体的制备方法，包括金纳米粒子合成，金纳米棒合成，金纳米粒子修饰DNA1，金纳米棒修饰DNA2，磁性纳米粒子修饰DNA3，金纳米棒和磁性纳米粒子组装，金纳米棒DNA的不对称延长，金纳米棒和磁性纳米粒子解离，和二元金纳米粒子Janus组装体结构的形成及表征；工艺步骤为：
（1）金纳米粒子合成
采用柠檬酸三钠还原氯金酸合成金纳米粒子；
（2）金纳米棒合成
采用晶种生长法合成金纳米棒；
（3）金纳米粒子和DNA1偶联
步骤（1）合成出的金纳米粒子和巯基修饰的DNA1进行偶联形成金纳米粒子-DNA1复合体；
（4）金纳米棒和DNA2偶联
对步骤（2）合成出的金纳米棒的侧面修饰DNA2，形成金纳米棒侧面-DNA2复合体；
（5）磁性纳米粒子和DNA3的偶联
采用EDC方法对磁性纳米粒子和氨基修饰的DNA3进行偶联形成磁性纳米粒子-DNA3复合体；
（6）金纳米棒和磁性纳米粒子组装
采用步骤（4）制备出来的金纳米棒侧面-DNA2复合体和步骤（5）制备出来的磁性纳米粒子-DNA3复合体进行杂交形成金纳米棒-磁性纳米粒子组装体；
（7）金纳米棒DNA的不对称延长
加入DNA连接酶，通过加入的DNA连接酶使步骤（6）制备的金纳米棒-磁性纳米粒子组装体互补的多余的DNA进行连接，使得金纳米棒-磁性纳米粒子结合的DNA的延长导致金纳米棒DNA的不同的面上的DNA的长度不一致，得金纳米棒-磁性纳米粒子的超结构；
（8）金纳米棒和磁性纳米粒子解离
采用在DNA的解链温度下导致步骤（7）制备的金纳米棒-磁性纳米粒子的超结构进行解离，并通过磁分离的方法对金纳米棒进行回收；
（9）二元金纳米粒子Janus组装体结构的形成及表征
步骤（8）回收得到的金纳米棒和步骤（3）合成出来的金纳米粒子-DNA1复合体进行杂交形成二元金纳米粒子Janus组装体，并对此结构进行表征。
表1  DNA的编号、序列及长度
编号 序列(5’-3’) 长度
DNA1 PO4 3--TAACAATAATCCCTCAAAAAAAAAA-SH 25
DNA2 CGTTAGGACTTACGCAAAAAAAAAA-SH 25
DNA3 GAGGGATTATTGTTACGTTAGGACTTACGCAAAAAAAAAA-NH2 40
DNA4 GCGTAAGTCCTAACG-OH 15
注：本发明所使用的DNA均购自中国上海生工生物工程有限公司，并通过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯化。
所述金纳米粒子合成：洁净的三角烧瓶中加入95mL的水，而后向水中加入5mL的浓度为2g/L的三水合四氯金酸，加热，煮沸，紧接着加入2.5mL 质量浓度1%的柠檬酸三钠溶液，边加热边搅拌，溶液颜色从淡黄色变成红色，反应持续6-8min以使柠檬酸三钠完全沉降，最后，溶液冷却至室温，稀释到100mL，4℃保藏，即制得18nm的金纳米粒子。
所述金纳米棒合成：
Figure 2011102726601100002DEST_PATH_IMAGE001
 晶种合成：28.0℃下0.1mL的2g/L的三水合四氯金酸加入到1mL 的0.2M的十六烷基三甲基溴化铵溶液中，溶液颜色由无色变成黄褐色，然后加入0.12mL新配制的0.01M硼氢化钠溶液快速搅拌2min，溶液颜色即由黄褐色变为浅棕色；
Figure 573574DEST_PATH_IMAGE002
 金纳米棒生长：种子溶液合成好以后，进行金纳米棒的生长，5mL的2g/L的三水合四氯金酸加入到5mL 0.2 M 十六烷基三甲基溴化铵溶液中，加入4mL的水，混匀，0.125 mL 的 0.01M 硝酸银溶液加入到上述混合体系中，混匀，随后将65μL的 0.1M 抗坏血酸溶液加入上述体系溶液，28.0℃下搅拌反应2min，溶液由褐色变成无色，最后，加入0.05mL 的晶种溶液轻柔搅拌混匀20s，28.0℃反应4h，即得金纳米棒溶液。
所述金纳米粒子和DNA1偶联：
Figure 450263DEST_PATH_IMAGE001
 将步骤（1）制备的10mL的金纳米粒子10000r/min离心10min，用1mL的水分散，10000r/min离心10min弃上清，用1mL含0.01%的SDS的pH8.0、0.01M的PBS分散，4℃保藏、待用；
Figure 272726DEST_PATH_IMAGE002
 取上述制备好的金纳米粒子100μL加入12μL 100μM的DNA1，混匀，振摇反应20min后，用含0.01%的SDS、2M的NaCl、pH8.0的0.01M的PBS缓冲液加至反应体系中，使NaCl浓度达到50mM，超声10s，振摇反应20min后，继续加入该缓冲液至反应体系中NaCl浓度达到100mM，随后按照NaCl浓度每增加100 mM的梯度重复上述反应过程至体系中NaCl浓度达到0.4M时，室温振摇反应12h；
Figure 2011102726601100002DEST_PATH_IMAGE003
 将上述步骤中反应溶液在8000r/min离心10min，弃上清，后用100μL的0.01%的SDS分散沉淀，后用0.01%的SDS的溶液清洗一次，4℃保藏、得金纳米粒子-DNA1复合体，待用。
所述金纳米棒修饰DNA2：取上述制备好的金纳米棒100μL加入10μL的10μM的二硫苏糖醇静置反应12h，封闭端面，后加入40μL的DNA2修饰侧面，振摇反应12h，5000r/min离心6min，弃上清，用100μL的水分散金纳米棒侧面-DNA2复合体，水洗一次，4℃保藏、待用。
所述磁性纳米粒子和DNA3的偶联：取0.5 mL采用溶剂热法合成带有羧基修饰的200nm的磁性纳米粒子，加入N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）0.62mg，N-乙基-N’-[(3-二甲氨基)丙基]碳二亚胺盐酸盐（EDC-HCl）1.13mg，室温搅拌反应过夜，离心去沉淀，上清液再与15μL 100μM的DNA3在4℃下搅拌反应过夜，然后进行磁性分离，弃上清，再加入PBST洗涤液，洗涤后磁分离，去上清，最后向磁性分离过的离心管中加入1mL 0.02mol/L pH 7.6的Tris缓冲液，4℃保存备用。
所述金纳米棒和磁性纳米粒子组装：取步骤（4）修饰好的不对称修饰的金纳米棒侧面-DNA2复合体10μL和步骤（5）的磁纳米粒子-DNA3复合体50μL，加入60μL 含0.01%的SDS、10mM的MgCl2、pH7.5的0.01M的Tris-HCl杂交缓冲液，振摇反应12h，最后，采用磁分离的方法对金纳米棒和金纳米棒-磁性纳米粒子组装体分离，去除上述未被吸附的金纳米棒。
所述金纳米棒DNA的不对称延长：对步骤（6）制备的金纳米棒-磁性纳米粒子组装体加入4μL 100μM的DNA4，室温振摇反应5h，然后加入1μL的100μM的ATP，加入最终酶活单位为4000 U /mL的T4 DNA 链接酶，振摇反应5h，最后经过外加磁场进行磁分离形成金纳米棒的一面不对称DNA4延长的与磁纳米粒子的超结构复合体。
所述金纳米棒和磁性纳米粒子解离：将步骤（7）制备出的磁性纳米粒子-金纳米棒的超结构放在90℃的水浴锅中反应10 min，然后采用磁分离的方式去除磁性纳米粒子，对上清液进行8000r/min离心10min，得到的金纳米粒子采用10μL含有0.01%的十二烷基磺酸钠的pH8.0、0.01M的磷酸缓冲液进行分散，4℃保藏，待用。
所述二元金纳米粒子Janus组装体结构的形成及表征：取步骤（8）修饰好的不对称修饰的金纳米棒10μL和步骤（3）的金纳米粒子-DNA1复合体50μL，加入60μL含0.01%的SDS、20mM的KCl、pH7.5的0.01M的Tris-HCl杂交缓冲液，振摇反应12h，得二元金纳米粒子Janus组装体。
本发明的有益效果：二元金属纳米材料在自组装材料中表现出来的不同于两种单独的金属纳米材料的令人着迷的性质，着实使得纳米粒子Janus组装体犹如一朵奇葩，其光芒令人夺目。而令人惊奇的是，到目前为止世界上还未有成功构建高产的二元纳米粒子的Janus组装体的报道。本发明构建了高产的二元金属纳米粒子的Janus组装体并对其性质进行研究显得尤为重要。
附图说明
图1 典型的二元金纳米粒子Janus组装体的组装结构图。
图2 二元金纳米粒子Janus组装体的圆二色光谱图。
具体实施方式
实施例1
金纳米粒子的合成
金纳米粒子的合成方案为：洁净的三角烧瓶中加入95mL的水，而后向水中加入5mL的浓度为2g/L的三水合四氯金酸，加热，煮沸，紧接着加入2.5mL 1%的新鲜配制的柠檬酸三钠溶液，边加热边搅拌，溶液颜色从淡黄色变成红色，持续沸腾反应10 min。最后，溶液冷却至室温，稀释到100mL，4℃保藏。即制得18nm的金纳米粒子。
金纳米棒的合成
金纳米棒的合成方案为：
Figure 165858DEST_PATH_IMAGE001
 晶种合成：28.0℃下0.1mL的2g/L的三水合四氯金酸加入到1mL 的0.2M的十六烷基三甲基溴化铵溶液中，溶液颜色由无色变成黄褐色。然后加入0.12mL新配制的0.01M硼氢化钠溶液快速搅拌2min。溶液颜色即由黄褐色变为浅棕色。
Figure 427075DEST_PATH_IMAGE002
 金纳米棒生长：种子溶液合成好以后，进行金纳米棒的生长。5mL的2g/L的三水合四氯金酸加入到5mL 0.2 M 十六烷基三甲基溴化铵溶液中，加入4mL的水，混匀。0.125 mL 的 0.01M 硝酸银（AgNO3）溶液加入到上述混合体系中，混匀，随后将65μL 的 0.1M 抗坏血酸溶液加入上述体系中，28.0℃下搅拌反应2 min，溶液由褐色变成无色。最后，加入0.05mL 的晶种溶液轻柔搅拌混匀20s。28.0℃反应4h。即得金纳米棒溶液。
金纳米粒子和DNA1偶联
Figure 158271DEST_PATH_IMAGE001
 将步骤（1）制备的10mL的金纳米粒子10000r/min离心10min，用1mL的水分散，10000r/min离心10min弃上清，用1mL含0.01%的SDS的pH8.0、0.01M的PBS分散，4℃保藏、待用。
Figure 213951DEST_PATH_IMAGE002
 取上述制备好的金纳米粒子100μL加入12μL 100μM的DNA1，混匀，振摇反应20min后，用含0.01%的SDS、2M的NaCl、pH8.0的0.01M的PBS缓冲液加至反应体系中，使NaCl浓度达到50mM，超声10s，振摇反应20min后，继续加入该缓冲液至反应体系中NaCl浓度达到100mM，随后按照NaCl浓度每增加100 mM的梯度重复上述反应过程至体系中NaCl浓度达到0.4M时，室温振摇反应12h。
Figure 968281DEST_PATH_IMAGE003
 将上述步骤中反应溶液在8000r/min离心10min，弃上清，后用100μL的0.01%的SDS分散沉淀，后用0.01%的SDS的溶液清洗一次，4℃保藏、得金纳米粒子-DNA1复合体，待用。
金纳米棒和DNA2偶联
取上述制备好的金纳米棒100μL加入10μL的10μM的二硫苏糖醇静置反应12h，封闭端面，后加入40μL的DNA2修饰侧面，振摇反应12h，5000r/min离心6min，弃上清，用100μL的水分散金纳米棒侧面-DNA2复合体，水洗一次，4℃保藏、待用。
磁性纳米粒子和DNA3的偶联
取0.5 mL采用溶剂热法合成带有羧基修饰的200nm的磁性纳米粒子，加入N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）0.62mg，N-乙基-N’-[(3-二甲氨基)丙基]碳二亚胺盐酸盐（EDC-HCl）1.13mg，室温搅拌反应过夜，离心去沉淀，上清液再与15μL 100μM的DNA3在4℃下搅拌反应过夜，然后进行磁性分离，弃上清，再加入PBST洗涤液，洗涤后磁分离，去上清，最后向磁性分离过的离心管中加入1mL 0.02mol/L pH7.6的Tris缓冲液，4℃保存备用。
金纳米棒和磁性纳米粒子组装
取步骤（4）修饰好的不对称修饰的金纳米棒侧面-DNA2复合体10μL和步骤（5）的磁纳米粒子-DNA3复合体50μL，加入60μL含0.01%的SDS、10mM的MgCl2、pH7.5的0.01M的Tris-HCl杂交缓冲液，振摇反应12h。最后，采用磁分离的方法对金纳米棒和金纳米棒-磁性纳米粒子组装体分离，去除上述未被吸附的金纳米棒。
金纳米棒DNA的不对称延长
对步骤（6）制备的金纳米棒-磁性纳米粒子组装体加入4μL 100μM的DNA4，室温振摇反应5小时，然后加入1μL的100μM的ATP，加入最终酶活单位为4000 单位/毫升的T4 DNA 链接酶，振摇反应5h，最后经过外加磁场进行磁分离形成金纳米棒的一面不对称DNA4延长的与磁纳米粒子的超结构复合体。
金纳米棒和磁性纳米粒子解离
将步骤（7）制备出的磁性纳米粒子-金纳米棒的超结构放在90℃的水浴锅中反应10 min，然后采用磁分离的方式去除磁性纳米粒子，对上清液进行8000r/ min离心10 min，得到的金纳米粒子采用10μL的pH8.0、0.01M的磷酸缓冲液（含有0.01%的十二烷基磺酸钠）进行分散，4℃保藏，待用。
二元金纳米粒子Janus组装体结构的形成
取步骤（8）修饰好的不对称修饰的金纳米棒10μL和步骤（3）的金纳米粒子-DNA1复合体50μL，加入60μL pH7.5的0.01M的Tris-HCl，（含0.01%的SDS，20mM的KCl）杂交缓冲液，振摇反应12h，得二元金纳米粒子Janus组装体。
二元金纳米粒子Janus组装体的表征
将上述组装好的产品进行5000r/min离心6min，弃上清，沉淀重分散到120μL的水中，水洗一次。电镜表征：7μL的上述处理过的样品滴加到碳膜支持的铜网上，在红外灯下进行干燥。投射电镜采用JEOL JEM-2100型号的电镜，其加速电压为200 kV。CD表征：取100μL的上述样品加入到比色皿中，25℃圆二色谱法测定其信号。

Claims (10)

1.一种二元金纳米粒子Janus组装体的制备方法，其特征在于包括金纳米粒子合成，金纳米棒合成，金纳米粒子修饰DNA1，金纳米棒修饰DNA2，磁性纳米粒子修饰DNA3，金纳米棒和磁性纳米粒子组装，金纳米棒DNA的不对称延长，金纳米棒和磁性纳米粒子解离，二元金纳米粒子Janus组装体结构的形成及表征；工艺步骤为：
（1）金纳米粒子合成
采用柠檬酸三钠还原氯金酸合成金纳米粒子；
（2）金纳米棒合成
采用晶种生长法合成金纳米棒；
（3）金纳米粒子和DNA1偶联
步骤（1）合成出的金纳米粒子和巯基修饰的DNA1进行偶联形成金纳米粒子-DNA1复合体；
（4）金纳米棒和DNA2偶联
对步骤（2）合成出的金纳米棒的侧面修饰DNA2，形成金纳米棒侧面-DNA2复合体；
（5）磁性纳米粒子和DNA3的偶联
采用EDC方法对磁性纳米粒子和氨基修饰的DNA3进行偶联形成磁性纳米粒子-DNA3复合体；
（6）金纳米棒和磁性纳米粒子组装
采用步骤（4）制备出来的金纳米棒侧面-DNA2复合体和步骤（5）制备出来的磁性纳米粒子-DNA3复合体进行杂交形成金纳米棒-磁性纳米粒子组装体；
（7）金纳米棒DNA的不对称延长
加入DNA连接酶，通过加入的DNA连接酶使步骤（6）制备的金纳米棒-磁性纳米粒子组装体互补的多余的DNA进行连接，使得金纳米棒-磁性纳米粒子结合的DNA的延长导致金纳米棒DNA的不同的面上的DNA的长度不一致，得到金纳米棒-磁性纳米粒子的超结构；
（8）金纳米棒和磁性纳米粒子解离
采用在DNA的解链温度下导致步骤（7）制备的金纳米棒-磁性纳米粒子的超结构进行解离，并通过磁分离的方法对金纳米棒进行回收；
（9）二元金纳米粒子Janus组装体结构的形成及表征
步骤（8）回收得到的金纳米棒和步骤（3）合成出来的金纳米粒子-DNA1复合体进行杂交形成二元金纳米粒子Janus组装体，并对此结构进行表征；
DNA1：5’-PO4 3--TAACAATAATCCCTCAAAAAAAAAA-SH-3’；
DNA2：5’-CGTTAGGACTTACGCAAAAAAAAAA-SH-3’；
DNA3：5’-GAGGGATTATTGTTACGTTAGGACTTACGCAAAAAAAAAA-NH2-3’；
DNA4：5’-GCGTAAGTCCTAACG-OH-3’。
2.根据权利要求1所述的二元金纳米粒子Janus组装体的制备方法，其特征在于金纳米粒子合成：洁净的三角烧瓶中加入95mL的水，而后向水中加入5mL的浓度为2g/L的三水合四氯金酸，加热，煮沸，紧接着加入2.5mL 质量浓度1%的柠檬酸三钠溶液，边加热边搅拌，溶液颜色从淡黄色变成红色，反应持续6-8min以使柠檬酸三钠完全沉降，最后，溶液冷却至室温，稀释到100mL，4℃保藏，即制得18nm的金纳米粒子。
3.根据权利要求1所述的二元金纳米粒子Janus组装体的制备方法，其特征在于金纳米棒合成：
Figure 2011102726601100001DEST_PATH_IMAGE001
 晶种合成：28.0℃下0.1mL的2g/L的三水合四氯金酸加入到1mL 的0.2M的十六烷基三甲基溴化铵溶液中，溶液颜色由无色变成黄褐色，然后加入0.12mL新配制的0.01M硼氢化钠溶液快速搅拌2min，溶液颜色即由黄褐色变为浅棕色；
Figure 2011102726601100001DEST_PATH_IMAGE002
 金纳米棒生长：种子溶液合成好以后，进行金纳米棒的生长，5mL的2g/L的三水合四氯金酸加入到5mL 0.2 M 十六烷基三甲基溴化铵溶液中，加入4mL的水，混匀，0.125 mL 的 0.01M 硝酸银溶液加入到上述混合体系中，混匀，随后将65μL 的 0.1M 抗坏血酸溶液加入上述体系中，28.0℃ 下搅拌反应2min，溶液由褐色变成无色，最后，加入0.05mL 的晶种溶液轻柔搅拌混匀20s，28.0℃反应4h，即得金纳米棒溶液。
4.根据权利要求1所述的二元金纳米粒子Janus组装体的制备方法，其特征在于金纳米粒子和DNA1偶联：
Figure 599035DEST_PATH_IMAGE001
 将步骤（1）制备的10mL的金纳米粒子10000r/min离心10min，用1mL的水分散，10000r/min离心10min弃上清，用1mL含0.01%的SDS的pH8.0、0.01M的PBS分散，4℃保藏、待用；
Figure 696436DEST_PATH_IMAGE002
 取上述制备好的金纳米粒子100μL加入12μL 100μM的DNA1，混匀，振摇反应20min后，用含0.01%的SDS、2M的NaCl、pH8.0的0.01M的PBS缓冲液加至反应体系中，使NaCl浓度达到50mM，超声10s，振摇反应20min后，继续加入该缓冲液至反应体系中NaCl浓度达到100mM，随后按照NaCl浓度每增加100 mM的梯度重复上述反应过程至体系中NaCl浓度达到0.4M时，室温振摇反应12h；
Figure 2011102726601100001DEST_PATH_IMAGE003
 将上述步骤中反应溶液在8000r/min离心10min，弃上清，后用100μL的0.01%的SDS分散沉淀，后用0.01%的SDS的溶液清洗一次，4℃保藏、得金纳米粒子-DNA1复合体，待用。
5.根据权利要求1所述的二元金纳米粒子Janus组装体的制备方法，其特征在于金纳米棒修饰DNA2：取上述制备好的金纳米棒100μL加入10μL的10μM的二硫苏糖醇静置反应12h，封闭端面，后加入40μL的DNA2修饰侧面，振摇反应12h，5000r/min离心6min，弃上清，用100μL的水分散金纳米棒侧面-DNA2复合体，水洗一次，4℃保藏、待用。
6.根据权利要求1所述的二元金纳米粒子Janus组装体的制备方法，其特征在于磁性纳米粒子和DNA3的偶联：取0.5 mL采用溶剂热法合成带有羧基修饰的200nm的磁性纳米粒子，加入N-羟基琥珀酰亚胺0.62mg，N-乙基-N’-[(3-二甲氨基)丙基]碳二亚胺盐酸盐1.13mg，室温搅拌反应过夜，离心去沉淀，上清液再与15μL 100μM的DNA3在4℃下搅拌反应过夜，然后进行磁性分离，弃上清，再加入PBST洗涤液，洗涤后磁分离，去上清，最后向磁性分离过的离心管中加入1mL 0.02mol/L pH 7.6的Tris缓冲液，4℃保存备用。
7.根据权利要求1所述的二元金纳米粒子Janus组装体的制备方法，其特征在于金纳米棒和磁性纳米粒子组装：取步骤（4）不对称修饰的金纳米棒侧面-DNA2复合体10μL和步骤（5）的磁纳米粒子-DNA3复合体50μL，加入60μL 含0.01%的SDS、10mM的MgCl2、pH7.5的0.01M的Tris-HCl杂交缓冲液，振摇反应12h，最后，采用磁分离的方法对金纳米棒和金纳米棒-磁性纳米粒子组装体分离，去除未被吸附的金纳米棒。
8.根据权利要求1所述的二元金纳米粒子Janus组装体的制备方法，其特征在于金纳米棒DNA的不对称延长：对步骤（6）制备的金纳米棒-磁性纳米粒子组装体加入4μL 100μM的DNA4，室温振摇反应5h，然后加入1μL的100μM的ATP，加入最终酶活单位为4000 U /mL的T4 DNA 链接酶，振摇反应5h，最后经过外加磁场进行磁分离形成金纳米棒的一面不对称DNA4延长的与磁纳米粒子的超结构复合体。
9.根据权利要求1所述的二元金纳米粒子Janus组装体的制备方法，其特征在于金纳米棒和磁性纳米粒子解离：将步骤（7）制备出的磁性纳米粒子-金纳米棒的超结构放在90℃的水浴锅中反应10 min，然后采用磁分离的方式去除磁性纳米粒子，对上清液进行8000r/min离心10min，得到的金纳米粒子采用10μL含有0.01%的十二烷基磺酸钠的pH8.0、0.01M的磷酸缓冲液进行分散，4℃保藏，待用。
10.根据权利要求1所述的二元金纳米粒子Janus组装体的制备方法，其特征在于二元金纳米粒子Janus组装体结构的形成及表征：取步骤（8）修饰好的不对称修饰的金纳米棒10μL和步骤（3）的金纳米粒子-DNA1复合体50μL，加入60μL含0.01%的SDS、20mM的KCl、pH7.5的0.01M的Tris-HCl杂交缓冲液，振摇反应12h，得二元金纳米粒子Janus组装体，将组装产品进行电镜和圆二色谱测CD值表征。
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