CN102366420A - 丹参多糖在制备抗氧化药物或保健品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了丹参多糖在制备抗氧化药物或保健品中的应用。本发明通过大量实验，发现丹参多糖ORAC指数较高，具有显著的抗氧化能力，可有效清除自由基。
Description
技术领域
本发明涉及丹参多糖在制备抗氧化药物或保健品中的新用途。
背景技术
氧化所产生的自由基与身体的许多疾病相关，自由基除会对细胞产生伤害外，还能发动自由基连锁反应，进一步恶化、伤害体内组织。目前已知有许多疾病皆因自由基过量而引起的。如肿瘤、高脂血症、免疫力低下、类风湿性关节炎、急性呼吸窘迫症候群等。因此，抗氧化剂在衰老和防治相关疾病越来越受到人们的重视。目前，人们已开发研究出大量的抗氧化剂用于食品、药品、以及化妆品行业。例如，依达拉奉（3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮，Edaravone）是第一种用于治疗脑梗死的药物，可清除自由基，抑制脂质过氧化，从而抑制脑细胞、血管内皮细胞、神经细胞的氧化损伤；依布硒啉（Ebselen）具有类似谷胱甘肽过氧化物酶的活性，能有效保护脑梗死或蛛网膜下腔出血患者的大脑功能；黄酮类化合物，如木犀草素、芦丁、槲皮素、橙皮苷等均具有较好的抗氧化效果，可以用于心血管病和肿瘤的预防；从茶叶中提取的茶多酚被广泛用于食品添加剂，其抗氧化能力高于维生E 10~20倍。因此，抗氧化剂的研究和开发在医药保健及食品行业具有广阔的应用前景。
丹参（Salvia miltionrrhiza Bge）为双子叶唇形科植物，是我国最常用的传统中药之一，始载于《神龙本草经》，被列为上品，历代本草著作均有收载。丹参味苦，性微寒，主要有祛瘀止痛、活血调经、养血安神之功效，被广泛应用于心血管疾病的治疗。
丹参的主要活性成分包括水溶性的丹参多糖、丹参酚酸和脂溶性的丹参酮类，目前国内外对水溶性丹参酚酸和脂溶性丹参酮类成分的研究较多，而对丹参多糖研究较少，蔡幼清在（丹参根中的精制多糖对大鼠实验性肾病的作用，国外医学(中医中药分册), 1995, 第4期）研究发现丹参梗中提取的多糖给肾病模型和肝损伤模型实验小鼠口服和肌注，能减少小鼠尿蛋白的排泄，抑制血清胆固醇和脂质过氧化浓度的提高。姚莹华等 (丹参多糖对小鼠急性肝损伤的保护作用，中国实验方剂学杂志, 2010, 第6期) 初步研究发现，丹参多糖能降低LPS诱导的急性肝损伤模型小鼠肝组织中MDA含量，升高GSH含量，降低血清ALT含量，对小鼠急性肝损伤有显著的保护作用。宋雨鸿在《丹参多糖抗小鼠免疫性肝损伤及其免疫调节机制的研究》 中发现丹参多糖有抗免疫性肝损伤的作用，这种作用的实现不仅表现在直接的保肝降酶方面，还对肝损伤后小鼠的免疫功能起到调节作用，通过免疫功能的调控进一步发挥保肝降酶作用，体外实验说明丹参多糖在一定浓度范围内对淋巴细胞有较强的增殖作用，并且还有促进相关细胞因子表达及分泌的作用。丹参多糖具有多种生物活性，但其抗氧化活性尚未见的报导。
目前，主要的体外抗氧化活性测试的方法主要有体外清除·OH的能力法、体外清除超氧自由基的能力法、DPPH自由基清除法和抗氧化能力指数(Oxygen Radical Absorbance Capacity, ORAC)的测定方法。其中，前三种方法都是采用吸光光谱检测，其测试结果不稳定，干扰因素较多。ORAC抗氧化能力指数的测定采用发射光谱检测，其主要优点有：
（1）灵敏度高，检出限低：其检出限一般为10-4~10-6g/L，甚至更低，通常较吸收光谱法高2~4个数量级；
（2）选择性强：ORAC法的光谱比较简单，特征性强，而且有激发光谱和发射光谱，选择的余地大，如果某几种物质的激发光谱相似，就可以从发射光谱的差异进行鉴别和分析；
（3）ORAC法可提供比较多的物理参数：可提供包括激发光谱、发射光谱和三维光谱及荧光强度、荧光效率、荧光寿命等多种物理参数。这些参数反映了分子的各种特性，能从不同角度提供研究对象的分子信息。
发明内容
本发明的目的在于提供丹参多糖在抗氧化活性方面的新应用。
本发明通过大量实验，发现丹参多糖提取物具有良好的抗氧化能力，可以有效的清除自由基。
体外生化试验证明，丹参多糖ORAC指数较高，具有显著的抗氧化能力，可有效清除自由基。能应用于制备具有抗氧化作用的药物。
附图说明
图1为实施例1所得丹参多糖提取物的不同浓度的ORAC指数。
具体实施方式
以下经过具体的实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
取丹参药材2 kg，粉碎成细粉，加入药材量10倍体积 (V/W)水，在20℃下搅拌提取2次，每次30分钟。提取过程加盐酸调节pH=3，提取完后过滤得滤液，经真空干燥得丹参多糖提取物。经分析该提取物糖含量为51.22%。
实施例2 实施例1所得丹参多糖的抗氧化能力测定
在96孔板中加入20 μL磷酸盐缓冲液，再加处理好样品待测液20 μL（实施例1所得丹参多糖提取物），接着依次加入AAPH 140 μL和缓冲液20 μL，最后添加Disodium fluorescein 20 μL（终浓度63 nmol/L）启动反应并迅速将酶标板置于荧光酶标仪（预置温度37℃）中开始测定。采用动力学方式，每2 min测定一个点，至荧光强度衰减为零为止。根据ORAC(Oxygen radical absorbance capacity)测定公式计算出其ORAC值。
抗氧化剂的氧自由基清除能力ORAC值，又称为抗氧化剂的抗氧化能力指数，是通过荧光衰退曲线的保护面积与20 μmol/L标准抗氧化物质Trolox（一种α-生育酚的水溶液类似物）的保护面积相比得出。其计算公式为：
ORAC值(U/ml) = R×[( AUCSample-AUC+AAPH ) / (AUCTrolox-AUC+AAPH) ]
R为样品稀释倍数，AUC为荧光衰退曲线下面积。
测定其结果见图1。
结果显示：丹参多糖具有显著的抗氧化活性，且随着剂量的增加而增强。
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1.丹参多糖在制备抗氧化药物或保健品中的应用。
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2011
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