CN113456796B - 一种抗老化组合物及其制备方法和应用 - Google Patents
一种抗老化组合物及其制备方法和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113456796B CN113456796B CN202010246174.1A CN202010246174A CN113456796B CN 113456796 B CN113456796 B CN 113456796B CN 202010246174 A CN202010246174 A CN 202010246174A CN 113456796 B CN113456796 B CN 113456796B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- polysaccharide
- cells
- aging
- skin
- centella
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 35
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 title claims abstract description 30
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims abstract description 84
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims abstract description 84
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims abstract description 83
- 240000007164 Salvia officinalis Species 0.000 claims abstract description 26
- QRYRORQUOLYVBU-VBKZILBWSA-N Carnosic acid Natural products CC([C@@H]1CC2)(C)CCC[C@]1(C(O)=O)C1=C2C=C(C(C)C)C(O)=C1O QRYRORQUOLYVBU-VBKZILBWSA-N 0.000 claims abstract description 22
- 108010087806 Carnosine Proteins 0.000 claims abstract description 22
- CQOVPNPJLQNMDC-UHFFFAOYSA-N N-beta-alanyl-L-histidine Natural products NCCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CN=CN1 CQOVPNPJLQNMDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 22
- 229940044199 carnosine Drugs 0.000 claims abstract description 22
- CQOVPNPJLQNMDC-ZETCQYMHSA-N carnosine Chemical compound [NH3+]CCC(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CNC=N1 CQOVPNPJLQNMDC-ZETCQYMHSA-N 0.000 claims abstract description 22
- 241000167550 Centella Species 0.000 claims abstract description 21
- 235000017276 Salvia Nutrition 0.000 claims abstract description 18
- 230000009759 skin aging Effects 0.000 claims abstract description 15
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 14
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 14
- 240000008397 Ganoderma lucidum Species 0.000 claims abstract description 10
- 235000001637 Ganoderma lucidum Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- 235000005412 red sage Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 4
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims abstract 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 79
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 18
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims description 14
- 238000005238 degreasing Methods 0.000 claims description 11
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 11
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 9
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 9
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 9
- 241000222336 Ganoderma Species 0.000 claims description 8
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 8
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 claims description 8
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 7
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 5
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims description 4
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract description 78
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 abstract description 28
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 abstract description 24
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 abstract description 16
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 abstract description 12
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 abstract description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 abstract description 3
- NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N chembl421 Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(N=NC=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 4
- 102100033717 Retroviral-like aspartic protease 1 Human genes 0.000 abstract 2
- 101710188689 Small, acid-soluble spore protein 1 Proteins 0.000 abstract 2
- 101710188693 Small, acid-soluble spore protein 2 Proteins 0.000 abstract 2
- 101710166422 Small, acid-soluble spore protein A Proteins 0.000 abstract 2
- 101710166404 Small, acid-soluble spore protein C Proteins 0.000 abstract 2
- 101710174019 Small, acid-soluble spore protein C1 Proteins 0.000 abstract 2
- 101710174017 Small, acid-soluble spore protein C2 Proteins 0.000 abstract 2
- 101710174574 Small, acid-soluble spore protein gamma-type Proteins 0.000 abstract 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 abstract 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 45
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 14
- 230000006870 function Effects 0.000 description 11
- OPIFSICVWOWJMJ-AEOCFKNESA-N 5-bromo-4-chloro-3-indolyl beta-D-galactoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CNC2=CC=C(Br)C(Cl)=C12 OPIFSICVWOWJMJ-AEOCFKNESA-N 0.000 description 8
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 8
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 7
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 6
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 6
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 6
- OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N phenol;sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O.OC1=CC=CC=C1 OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- 244000146462 Centella asiatica Species 0.000 description 5
- 235000004032 Centella asiatica Nutrition 0.000 description 5
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 4
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- 102000001398 Granzyme Human genes 0.000 description 4
- 108060005986 Granzyme Proteins 0.000 description 4
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 4
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 4
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 4
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 4
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 4
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 4
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 4
- 210000004177 elastic tissue Anatomy 0.000 description 4
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 4
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 239000004017 serum-free culture medium Substances 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 3
- 101000917858 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 3
- 101000917839 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Proteins 0.000 description 3
- 102000000380 Matrix Metalloproteinase 1 Human genes 0.000 description 3
- 108010000684 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 description 3
- 102000002274 Matrix Metalloproteinases Human genes 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 102100030416 Stromelysin-1 Human genes 0.000 description 3
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 3
- 230000005859 cell recognition Effects 0.000 description 3
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 3
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 3
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 3
- VKUYLANQOAKALN-UHFFFAOYSA-N 2-[benzyl-(4-methoxyphenyl)sulfonylamino]-n-hydroxy-4-methylpentanamide Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1S(=O)(=O)N(C(CC(C)C)C(=O)NO)CC1=CC=CC=C1 VKUYLANQOAKALN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 2
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 108010016113 Matrix Metalloproteinase 1 Proteins 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 101710108790 Stromelysin-1 Proteins 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000032677 cell aging Effects 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000028023 exocytosis Effects 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 2
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 2
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 description 2
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 102000000503 Collagen Type II Human genes 0.000 description 1
- 108010041390 Collagen Type II Proteins 0.000 description 1
- 102000001187 Collagen Type III Human genes 0.000 description 1
- 108010069502 Collagen Type III Proteins 0.000 description 1
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 1
- 206010013786 Dry skin Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 206010064571 Gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 101001013150 Homo sapiens Interstitial collagenase Proteins 0.000 description 1
- 101000990915 Homo sapiens Stromelysin-1 Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108010031099 Mannose Receptor Proteins 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 241000555745 Sciuridae Species 0.000 description 1
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000010183 Thymus Hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 229940000635 beta-alanine Drugs 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 1
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 230000011382 collagen catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 230000037336 dry skin Effects 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000000214 effect on organisms Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000003803 hair density Effects 0.000 description 1
- 230000004217 heart function Effects 0.000 description 1
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 229940127130 immunocytokine Drugs 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 210000000865 mononuclear phagocyte system Anatomy 0.000 description 1
- PGSADBUBUOPOJS-UHFFFAOYSA-N neutral red Chemical compound Cl.C1=C(C)C(N)=CC2=NC3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 PGSADBUBUOPOJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- 230000010287 polarization Effects 0.000 description 1
- -1 polysaccharide compound Chemical class 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 1
- 230000003716 rejuvenation Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000007665 sagging Methods 0.000 description 1
- 150000003333 secondary alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 230000037152 sensory function Effects 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 230000037394 skin elasticity Effects 0.000 description 1
- 230000004215 skin function Effects 0.000 description 1
- 230000036558 skin tension Effects 0.000 description 1
- 238000009751 slip forming Methods 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 210000000603 stem cell niche Anatomy 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 108091035539 telomere Proteins 0.000 description 1
- 102000055501 telomere Human genes 0.000 description 1
- 210000003411 telomere Anatomy 0.000 description 1
- 230000028016 temperature homeostasis Effects 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
- 230000037314 wound repair Effects 0.000 description 1
- 230000037373 wrinkle formation Effects 0.000 description 1
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/05—Dipeptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
- A61K8/73—Polysaccharides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/18—Antioxidants, e.g. antiradicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/08—Anti-ageing preparations
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
- A61K2800/59—Mixtures
- A61K2800/592—Mixtures of compounds complementing their respective functions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
- A61K2800/59—Mixtures
- A61K2800/592—Mixtures of compounds complementing their respective functions
- A61K2800/5922—At least two compounds being classified in the same subclass of A61K8/18
Abstract
本发明公开了一种抗老化组合物抗老化组合物及其制备方法和应用。所述抗老化组合物由丹参多糖、灵芝多糖、积雪草多糖、肌肽组成，并且它们的质量比为：丹参多糖：灵芝多糖：积雪草多糖：肌肽＝10:10:5:(1.5～2.5)。所述抗老化组合物，可以抑制皮肤细胞SASP因子表达，通过增强巨噬细胞及NK细胞清除老化的皮肤细胞的机理，减少皮肤老化细胞,可以作为抑制皮肤细胞SASP因子表达和/或减少皮肤老化细胞的药物或护肤品添加剂。
Description
技术领域
本发明属于皮肤护理领域，具体涉及一种抗老化组合物及其制备方法和应用。
背景技术
在机体衰老过程中，皮肤衰老表现得最为清楚和直观。由于皮肤处于体表，更易受到外界环境因素的影响，因此相对于内脏器官，外源性的衰老诱导因素对皮肤衰老的影响更多。皮肤衰老导致皮肤功能的衰退，包括屏障功能、感觉功能、免疫功能、体温调节功能和创伤修复功能都会受到影响。皮肤衰老主要为皮肤干燥、萎缩变薄、松弛下垂、皮下脂肪减少、以及细小的皱纹等。老年皮肤的胶原蛋白含量降低以及弹性纤维的减少和变性，导致皮肤弹性明显下降，共同成为老化皮肤松弛和皱纹形成的结构基础。弹性纤维的主要作用是赋予皮肤以弹性和顺应性。弹性纤维受到短暂拉伸后可迅速回缩，同时可抵抗过长拉伸。当弹性纤维减少或结构发生改变时，皮肤的弹性就会下降，导致皮肤松弛继而产生皱纹。原蛋白占皮肤干重的70％～80％，是人体皮肤中主要的结构蛋白。成年人皮肤中主要是Ⅰ型和Ⅲ型胶原，其中Ⅰ型胶原约占80％，它们在真皮中聚集成胶原纤维束，交织成网，维持皮肤张力，赋予皮肤机械性与充盈感。在年轻皮肤组织中，胶原纤维出现高度有序的组织结构，随着皮肤老化进程，皮肤胶原含量逐渐减少。细胞老化是皮肤老化的基础，细胞老化是指细胞由于逐渐积累了多种应激因素(包括紫外线辐射、自由基、端粒过度缩短、基因突变等)所引起的损伤而进入的一种不可逆的增殖停滞的状态。除增殖停滞外，活跃的分泌能力是老化细胞的另一个重要特征，即老化细胞会持续性表达一系列的促炎细胞因子(IL-1β等)、趋化因子(CXCR2等)、生长因子以及蛋白酶(MMP1和MMP3)等，此即所谓的老化相关的分泌表型(senescence-associated secretory phenotype，SASP)。这些SASP因子使皮肤组织处于低水平的慢性炎症状态，影响皮肤细胞的正常分化，并破坏皮肤干细胞壁龛，使其功能紊乱，损害皮肤的自我更新和创伤修复能力，尤其是老化细胞来源的MMPs是导致老化皮肤胶原降解和变性的重要原因。
细胞老化是绝大多数致衰老因素诱导老化的共同环节，是机体老化的关键所在。老年机体内的老化细胞之所以能够持续存在，是由于老年机体的免疫系统机能降低，不能及时清除不断形成的老化细胞所致。其实，在年轻机体组织中老化细胞也会不断产生，但可被免疫细胞及时清除，因此老化细胞不会堆积。但老年机体免疫力下降，不能及时清除老化细胞，致使老化细胞不断堆积。在包括皮肤在内的不同器官组织中，老化细胞会随着年龄的增加而积聚，而且老化细胞释放的SASP因子会影响到周围组织的结构和功能，因此老化细胞积累是衰老及相关疾病的重要病理基础，而靶向清除老化细胞能够非常有效地改善机体的衰老症状，包括皮肤和毛发的显著改善。2016年美国梅奥诊所的科学家研究发现选择性清除老化细胞可以使小鼠年轻6个月，相当于人类年轻数十年，这些经老化细胞清除剂治疗的小鼠生癌时间更晚，心、肾功能增强，更喜欢在鼠笼内探究，在生理、心理和衰老疾病等方面都表现出理想的抗衰老效果，而且无任何副作用。另一项研究发现选择性地诱导老化细胞凋亡能够显著改善快速衰老转基因小鼠和自然老化小鼠的衰老症状，包括肾功能和毛发密度等，同时不导致任何副作用。这些新的研究证据更加明确地表明机体组织器官的衰老与老化细胞的堆积直接相关，而靶向清除这些老化细胞可使机体年轻化。皮肤免疫功能下降将直接导致不断产生的皮肤老化细胞不能被及时清除而不断堆积，进而致使皮肤老化。因此通过增强皮肤免疫系统的老化细胞免疫监督功能可以达到延缓皮肤老化甚至使皮肤再年轻化的目的。
植物多糖来源于植物，部分植物多糖已经被证明了对机体积细胞带来有益效果，例如可以激活巨噬细胞提高机体抗病菌和抗肿瘤的能力、可通过甘露糖受体等激活巨噬细胞,也可被吞噬并激活不明的细胞内目标来促进细胞的吞噬功能、增强网状内皮系统在碳廓清试验中的活性,并增加抗体的生成，延迟过敏反应等等。尽管现有技术已经证明了多糖对人体有有益效果，但来源于不同植物的多糖作用往往也不同且具有局限性，现有技术尝试将不同的多糖进行组合以获得能功能得到加强的组合物，然而由于多糖种类繁多，并且组合后更多的效果显示出1+1<2的作用，因此多糖复合物的领域还有待深入开发研究。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种抗老化组合物，所述抗老化组合物在多糖复合的基础上加入肌肽，能够增强免疫细胞对老化细胞的清除能力。
本发明的另一目的在于提供所述抗老化组合物的制备方法。
本发明的另一目的在于提供所述抗老化组合物的应用。
本发明的上述目的通过如下技术方案予以实现：
一种抗老化组合物，由丹参多糖、灵芝多糖、积雪草多糖和肌肽组成，并且它们的质量比为：丹参多糖：灵芝多糖：积雪草多糖：肌肽＝10:10:5:(1.5～2.5)。
丹参多糖、灵芝多糖均是非常成熟的多糖产品，丹参多糖能够刺激免疫抑制脾脏及胸腺增生,从而增强免疫器官的功能。丹参多糖能调节T淋巴细胞亚群的水平和加强IL-2和IFN-γ的表达，发挥细胞因子对机体的调节作用,从而充分的调动机体免疫网络对机体的保护。灵芝多糖药理具有免疫调节、抗肿瘤、降血糖、降血脂、解毒、抗病毒、抗细菌、抗辐射等广泛作用。灵芝多糖具有调节机体免疫的作用，可以通过激活树突状细胞和巨噬细胞分化及成熟，诱导自然杀伤细胞，调节T、B淋巴细胞的增殖与免疫应答、促进免疫细胞因子生成，用于发挥提高机体非特异性和特异性免疫的作用。从破壁灵芝孢子粉热水提取物中分离纯化的多糖GL-BSP可显著提高自然杀伤细胞(NK细胞)活力，增强巨噬细胞的吞噬作用。积雪草多糖具有显著的抗氧化作用，能够促进皮肤修复，且具有免疫刺激活性。肌肽能够增强NK细胞的活性，并能够调控巨噬细胞的激活和极化状态的效果。发明人意外发现，丹参多糖、灵芝多糖、积雪草多糖、肌肽按照上述比例组合能够显著增强吞噬细胞的吞噬功能，同时能够增强NK细胞的识别能力和杀伤能力；与此同时，还具有产生抑制皮肤细胞SASP因子表达，减少皮肤老化细胞的效果。
最优选地，所述丹参多糖：灵芝多糖：积雪草多糖：肌肽＝10:10:5:2。
优选地，所述积雪草多糖的制备方法为：积雪草除杂、干燥、粉碎后，用乙醇充分水浴回流脱脂，脱脂粉；加入盐酸，提取得到的溶液经氯化钙沉淀，离心得到上清液，上清液经透析处理截留其中分子量大于5kDa的物质，进行醇沉，得到分子量大于5kDa的积雪草多糖。
优选地，所述积雪草多糖的制备方法为：积雪草除杂、干燥、粉碎后，用95％乙醇充分水浴回流脱脂，脱脂粉；按照料液比1:10(重量比)加入1mol/的盐酸，提取两次，每次3h，提取得到的溶液经氯化钙沉淀，离心得到上清液，上清液经透析处理截留其中分子量大于5kDa的物质，用95％乙醇醇沉，得到分子量大于5kDa的积雪草多糖。
95％乙醇表示乙醇含量为95wt％的乙醇水溶液。
经苯酚硫酸法测定，上述积雪草多糖中多糖含量为95％以上。更具体地，所述粉碎的程度为过60目筛。所述透析处理的时间为24h。所述醇沉的时间为12h。
优选地，所述丹参多糖的制备方法为：丹参粉碎、脱脂、脱色、水提、离心取上清液、浓缩、除去蛋白、透析截留分子量大于3.5kDa的物质，醇沉、得到分子量大于3.5kDa的丹参多糖。
优选地，所述丹参多糖的制备方法为：
丹参粉碎、脱脂、脱色，加入纯水，70℃下提取4h；离心取上清液，浓缩，除去蛋白，透析截留分子量大于3.5kDa的物质，进行醇沉、得到分子量大于3.5kDa的丹参多糖。
优选地，所述丹参多糖的制备方法为：
丹参粉碎、脱脂、脱色，按照料液比1:20加入纯水，70℃，提取时间4h；离心15min取上清液，浓缩，除去蛋白，透析截留分子量大于3.5kDa的物质，用80％乙醇进行醇沉、得到分子量大于3.5kDa的丹参多糖。
80％乙醇表示乙醇含量为80wt％的乙醇水溶液。
经苯酚硫酸法测定，上述丹参多糖中多糖含量为90％以上。
更具体地，所述粉碎的程度为过60目筛。所述透析处理的时间为24h。所述醇沉的时间为12h。所述除去蛋白是采用与Sevag试剂混合，剧烈震荡，离心的方式除去蛋白。
优选地，所述灵芝多糖的制备方法为：
灵芝粉碎、脱脂、水提、醇沉、除蛋白、脱色、再次醇沉、分离得到灵芝多糖。
优选地，所述灵芝多糖的制备方法为：
灵芝粉碎、乙醚回流提取脱脂，残渣挥干，按照料液比1:10(重量比)加入蒸馏水，回流提取，提取时间4-6h，得到水提取液；加入60％乙醇进行醇沉，收集沉淀。沉淀用除去蛋白后，加入活性炭，置60℃水浴中3h，过滤除去活性炭，滤液再次加入70％乙醇进行醇沉，分离得到灵芝多糖。
70％乙醇表示乙醇含量为70wt％的乙醇水溶液,60％乙醇表示乙醇含量为60wt％的乙醇水溶液。
经苯酚硫酸法测定，上述灵芝多糖中多糖的含量为97％。
更具体地，所述粉碎的程度为过60目筛。所述再次醇沉的时间为24h。所述除去蛋白是采用与Sevag试剂混合，剧烈震荡，离心的方式除去蛋白。
肌肽，是一种由β-丙氨酸和L-组氨酸两种氨基酸组成的二肽。本发明中所述肌肽可以来自于市场商品。
所述抗老化组合物的制备方法，将丹参多糖、灵芝多糖、积雪草多糖和肌肽混合得到。
所述抗老化组合物在制备抑制皮肤细胞SASP因子表达的药物或护肤品添加剂中的应用。
所述抗老化组合物在制备减少皮肤老化细胞的药物或护肤品添加剂中的应用。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明提供一种抗老化组合物，所述抗老化组合物由多糖复合物和肌肽组成，所述抗老化组合物具有改善或增强NK细胞、巨噬细胞免疫监督功能的效果，除此以外，该抗老化组合物可以抑制皮肤细胞SASP因子表达，通过增强巨噬细胞及NK细胞清除老化的皮肤细胞的机理，减少皮肤老化细胞。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明作进一步的说明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非另有说明，本发明实施例采用的原料试剂为常规购买的原料试剂。
实施例中多糖的来源：
丹参多糖
丹参去除杂质后晒干、打碎过60目筛得到丹参粉末，并进行脱脂脱色处理，取100g经脱脂脱色处理后的丹参粉末，按照1:20加入纯水，70℃，提取时间4h；离心15min取上清液，上清液蒸发浓缩后，与Sevag(浓缩液:氯仿:正丁醇＝16:4:1)试剂混合，剧烈震荡30min，离心分层除去蛋白。将去除蛋白后的上清液经截留分子量为3.5kDa透析袋流水透析24h。截留液浓缩后加入80％乙醇，4℃放置醇沉12h，将沉淀真空冷冻干燥，即可得到分子量大于3.5kDa的丹参多糖，经苯酚硫酸法测定，丹参多糖含量为90％。
灵芝多糖
灵芝去除杂质后晒干、打碎过60目筛得到灵芝粉末，取100g灵芝粉末，置于索氏提取器中，加入乙醚，回流提取，去除油脂。残渣挥干，加入蒸馏水提取，得到水提取液，然后加入60％乙醇进行醇沉，收集沉淀；沉淀用Sevag(浓缩液:氯仿:正丁醇＝16:4:1)去除蛋白后，加入活性炭，置60℃水浴中3h，过滤除去活性炭，滤液再次加入70％乙醇进行醇沉，室温放置24h，使沉淀完全，离心20min，收集沉淀，沉淀经真空干燥得到灵芝多糖。经苯酚硫酸法测定，上述灵芝多糖中多糖含量为97％。
积雪草多糖
取300g积雪草去除杂质后晒干、打碎过60目筛得到积雪草粉末，粉末用95％乙醇充分水浴回流脱脂，经60℃烘干后得到脱脂粉。按照料液比1:10加入1mol/L的盐酸，提取两次，每次3小时，提取得到的溶液浓缩后加入4mol/L氯化钙沉淀，离心后的上清液经截留分子量为5kDa透析袋流水透析24h，截留液浓缩后加入95％乙醇，室温放置醇沉12h，将沉淀真空冷冻干燥，即可得到分子量大于5kDa的积雪草多糖。经苯酚硫酸法测定，上述积雪草多糖中多糖含量为95％。
按表1配方制备实施例1-5和对比例1-5
表1
对比例6
以上述丹参多糖单独作为对比例6。
对比例7
以上述灵芝多糖单独作为对比例7。
对比例8
以上述积雪草多糖单独作为对比例8。
对比例9
以肌肽单独作为对比例9。
实施例1-5和对比例1-9的RAW264.7细胞吞噬能力检测
调节RAW264.7巨噬细胞密度为5×105个/ml，以每孔100μL接种于96孔板，置于培养箱(37℃、5％CO2)培养12h后，用PBS清洗2次。每孔加入100μL含10％胎牛血清的RPMI1640培养基，加入待测成分处理12h后每孔加入含中性红(体积分数0.5％)的生理盐水溶液100μl，继续培养4h，弃去上清液，每孔加入细胞裂解液(V(冰醋酸)：V(乙醇)＝1：1)100μl，4℃条件下放置0.5h，待细胞溶解后在酶标仪上测定540nm波长处的光密度值。根据光密度值得到吞噬的能力的相对值，对应吞噬能力，列于表2中。与空白对照组相比，实施例1～5的抗老化组合物能够同时显著提高巨噬细胞的吞噬能力。
实施例1-5和对比例1-9的NK细胞识别能力、杀伤能力检测
已知NK细胞对老化细胞的杀伤作用主要依赖其表面受体CD16对老化细胞的特异性识别以及由此介导的颗粒胞吐作用，颗粒酶(Granzyme)是NK细胞在颗粒胞吐过程中释放的杀伤老化细胞主要颗粒成分，可用qPCR检测NK细胞CD16受体以及颗粒成分Granzyme的mRNA表达水平来分别反映NK细胞的识别能力和杀伤能力。NK细胞以1.5×105/well接种于6孔板。设置空白对照组，加入多糖复合物孵育12h，细胞裂解提取总RNA，根据反转录试剂盒说明书，反转录成cDNA后，采用qPCR检测细胞识别受体CD16吞杀伤颗粒Granzyme的mRNA的相对表达水平，分别对应NK细胞的识别能力和杀伤能力，结果详见表2，与空白对照组相比，实施例1～5的抗老化组合物能够同时显著提高NK细胞的识别能力、杀伤能力。
表2 RAW264.7细胞吞噬能力和NK细胞识别能力、杀伤能力
注：*与实施例3对比P<0.05，**与实施例3对比P<0.01
实施例1-5和对比例1-9对SASP因子表达的检测
将HaCaT细胞以1.5×105/well接种于6孔板，
将HaCaT细胞与t-BHP(10uM)共孵育以诱导老化，分别加入50ug待测成分，继续孵育12h，细胞裂解提取总RNA。采用qPCR检测SASP因子IL-1β的mRNA表达水平，作为老化细胞的辅助检测指标，将结构列于表3中。
将HFF-1细胞与t-BHP(10uM)共孵育以诱导老化，分别加入50ug待测成分，继续孵育12h，细胞裂解提取总RNA。采用qPCR检测SASP因子MMP-1、MMP-3的mRNA表达水平，作为老化细胞的辅助检测指标，将结构列于表3中。与肌肽单独作用组相比，实施例1-5的组合物与对比例1-5相比能够显著增强肌肽抑制IL-1β、MMP1、MMP3表达的能力。表明特定的抗老化组合物(丹参多糖：灵芝多糖：积雪草多糖：肌肽＝10:10:5:1.5～2.5)能够产生协同增效作用，显著抑制老化皮肤细胞的形成。
表3 HaCaT细胞IL-1β和HFF-1细胞MMP-1、MMP-3的表达水平
注：##模型组与空白组对比P<0.01*与实施例3对比P<0.05，**与实施例3对比P<0.01
实施例1-5和对比例1-9在不同细胞体系中的抗老化功效
RAW264.7细胞(巨噬细胞)和HaCaT细胞共培养体系内老化相关β-半乳糖苷酶含量的检测
将HaCaT细胞以3×104/well接种于48孔板，培养细胞24h后，弃去上清液，加入无血清培养基稀释的10μM的t-BHP共孵育8h以诱导老化，随后更换不含t-BHP的完全培养基孵育12h，然后按效靶比1:1加入RAW264.7细胞，同时加入50ug待测成分，共培养12h。采用SPiDER-βgal生色底物X-gal将老化细胞染色，于荧光倒置显微镜下观察绿色荧光强度，镜下计数X-gal-positive cells的百分比反应老化细胞的数量，列于表4中，百分比占比越小，表示待测成分在巨噬细胞/HaCaT的细胞体系中的抗老化能力越强。
RAW264.7细胞(巨噬细胞)和HFF-1细胞共培养体系内老化相关β-半乳糖苷酶含量的检测
将HFF-1细胞以5×103/well接种于48孔板，培养细胞24h后，弃去上清液，加入无血清培养基稀释的10μM的t-BHP共孵育8h以诱导老化，随后更换不含t-BHP的完全培养基孵育12h，然后按效靶比1:1加入RAW264.7细胞，同时加入50ug待测成分共培养12h。采用SPiDER-βgal生色底物X-gal将老化细胞染色，于荧光倒置显微镜下观察绿色荧光强度。镜下计数X-gal-positive cells的百分比反应老化细胞的数量，列于表4中，百分比占比越小，表示待测成分在巨噬细胞/HFF-1的细胞体系中的抗老化能力越强。
NK细胞和HaCaT细胞共培养体系内老化相关β-半乳糖苷酶含量的检测
将HaCaT细胞以3×104/well接种于48孔板，培养细胞24h后，弃去上清液，加入无血清培养基稀释的10μM的t-BHP共孵育8h以诱导老化，随后更换不含t-BHP的完全培养基孵育12h，然后按效靶比1:2加入NK-92MI细胞，同时加入50ug驻颜因子复合物待测成分，共培养12h。采用SPiDER-βgal生色底物X-gal将老化细胞染色，于荧光倒置显微镜下观察绿色荧光强度。镜下计数X-gal-positive cells的百分比反应老化细胞的数量，列于表4中，百分比占比越小，表示待测成分在NK细胞/HaCaT的细胞体系中的抗老化能力越强。
NK细胞和HFF-1细胞共培养体系内老化相关β-半乳糖苷酶含量的检测
将HFF-1细胞以5×103/well接种于48孔板，培养细胞24h后，弃去上清液，加入无血清培养基稀释的10μM的t-BHP共孵育8h诱导老化，随后更换不含t-BHP的完全培养基孵育12h，然后按效靶比1:2加入NK细胞，同时加入待测成分培养12h。采用SPiDER-βgal生色底物X-gal将老化细胞染色，于荧光倒置显微镜下观察绿色荧光强度。镜下计数X-gal-positivecells的百分比反应老化细胞的数量，列于表4中，百分比占比越小，表示待测成分在NK细胞/HFF-1的细胞体系中的抗老化能力越强。
表4的数据根据Image J软件计算得到任意一种多糖或肌肽单独作用，或任意两种多糖与肌肽的组合能够一定程度上减少老化细胞的数量，但不显著。抗老化组合物与对比例组相比，能够更显著减少老化细胞的数量，说明抗老化组合物能够增强免疫细胞清除老化皮肤细胞的能力，减少老化细胞的数量。
表4组合物在不同细胞体系中抗老化功效
注：*与实施例3对比P<0.05，**与实施例3对比P<0.01
综上可见，实验证明，本发明所述抗老化组合物具有改善或增强NK细胞、巨噬细胞免疫监督功能的效果抗老化组合物，除此以外，该抗老化组合物可以抑制皮肤细胞SASP因子表达，增强巨噬细胞及NK细胞清除老化的皮肤细胞的机理，延缓皮肤衰老，不仅有效，而且安全可靠，可以应用于护肤品。
显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。
Claims (4)
1.一种抗老化组合物，其特征在于，所述抗老化组合物由丹参多糖、灵芝多糖、积雪草多糖和肌肽组成，并且它们的质量比为：丹参多糖：灵芝多糖：积雪草多糖：肌肽＝10:10:5:(1.5～2.5)；
所述积雪草多糖的制备方法为：
积雪草除杂、干燥、粉碎后，用95％乙醇充分水浴回流脱脂，脱脂粉；按照料液比1:10加入1mol/的盐酸，提取两次，每次3h，提取得到的溶液经氯化钙沉淀，离心得到上清液，上清液经透析处理截留其中分子量大于5kDa的物质，用95％乙醇醇沉，得到分子量大于5kDa的积雪草多糖；
所述丹参多糖的制备方法为：
丹参粉碎、脱脂、脱色，按照料液比1:20加入纯水，70℃下提取4h；离心15min取上清液，浓缩，除去蛋白，透析截留分子量大于3.5kDa的物质，用80％乙醇进行醇沉、得到分子量大于3.5kDa的丹参多糖；
所述灵芝多糖的制备方法为：
灵芝粉碎、乙醚回流提取脱脂，残渣挥干，按照料液比1:10重量比加入蒸馏水，回流提取，提取时间4-6h，得到水提取液；加入60％乙醇进行醇沉，收集沉淀；沉淀用除去蛋白后，加入活性炭，置60℃水浴中3h，过滤除去活性炭，滤液再次加入70％乙醇进行醇沉，分离得到灵芝多糖。
2.根据权利要求1所述抗老化组合物，其特征在于，所述丹参多糖：灵芝多糖：积雪草多糖：肌肽＝10:10:5:2。
3.权利要求1或2所述抗老化组合物的制备方法，其特征在于，将丹参多糖、灵芝多糖、积雪草多糖和肌肽混合得到。
4.权利要求1或2所述抗老化组合物在制备减少皮肤老化细胞的药物或护肤品添加剂中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010246174.1A CN113456796B (zh) | 2020-03-31 | 2020-03-31 | 一种抗老化组合物及其制备方法和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010246174.1A CN113456796B (zh) | 2020-03-31 | 2020-03-31 | 一种抗老化组合物及其制备方法和应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113456796A CN113456796A (zh) | 2021-10-01 |
| CN113456796B true CN113456796B (zh) | 2024-04-12 |
Family
ID=77865681
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010246174.1A Active CN113456796B (zh) | 2020-03-31 | 2020-03-31 | 一种抗老化组合物及其制备方法和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113456796B (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115558036A (zh) * | 2022-10-23 | 2023-01-03 | 爱生泽(上海)生物科技有限公司 | 一种积雪草多糖的制备方法和在化妆品中的应用 |
Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1754892A (zh) * | 2004-09-29 | 2006-04-05 | 中国科学院上海药物研究所 | 一种积雪草多糖的制备方法和应用 |
| CN101721340A (zh) * | 2009-10-23 | 2010-06-09 | 无限极（中国）有限公司 | 一种用于延缓肌肤衰老的化妆品组合物 |
| CN102362869A (zh) * | 2011-10-27 | 2012-02-29 | 广州汉方现代中药研究开发有限公司 | 丹参多糖在制备抗炎药物中的应用 |
| CN102366420A (zh) * | 2011-10-27 | 2012-03-07 | 广州汉方现代中药研究开发有限公司 | 丹参多糖在制备抗氧化药物或保健品中的应用 |
| CN103550147A (zh) * | 2013-11-14 | 2014-02-05 | 福建农林大学 | 灵芝子实体多糖注射剂及其制备方法 |
| CN103564423A (zh) * | 2013-10-29 | 2014-02-12 | 无限极（中国）有限公司 | 灵芝提取物在制备具有抗辐射和抗衰老功效的保健食品或化妆品中的应用 |
| CN103961276A (zh) * | 2014-01-08 | 2014-08-06 | 片仔癀（上海）生物科技研发有限公司 | 抗糖化化妆品组合物及含其的抗糖化化妆品 |
| CN108135823A (zh) * | 2016-01-06 | 2018-06-08 | 韩国百鸥思特公司 | 包含肌肽、大豆肽及穿心莲提取物的抗老化用组合物 |
| CN110317279A (zh) * | 2019-08-19 | 2019-10-11 | 姜东生 | 一种积雪草多糖、用作植物源防腐剂的用途和在化妆品中的应用 |
-
2020
- 2020-03-31 CN CN202010246174.1A patent/CN113456796B/zh active Active
Patent Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1754892A (zh) * | 2004-09-29 | 2006-04-05 | 中国科学院上海药物研究所 | 一种积雪草多糖的制备方法和应用 |
| CN101721340A (zh) * | 2009-10-23 | 2010-06-09 | 无限极（中国）有限公司 | 一种用于延缓肌肤衰老的化妆品组合物 |
| CN102362869A (zh) * | 2011-10-27 | 2012-02-29 | 广州汉方现代中药研究开发有限公司 | 丹参多糖在制备抗炎药物中的应用 |
| CN102366420A (zh) * | 2011-10-27 | 2012-03-07 | 广州汉方现代中药研究开发有限公司 | 丹参多糖在制备抗氧化药物或保健品中的应用 |
| CN103564423A (zh) * | 2013-10-29 | 2014-02-12 | 无限极（中国）有限公司 | 灵芝提取物在制备具有抗辐射和抗衰老功效的保健食品或化妆品中的应用 |
| CN103550147A (zh) * | 2013-11-14 | 2014-02-05 | 福建农林大学 | 灵芝子实体多糖注射剂及其制备方法 |
| CN103961276A (zh) * | 2014-01-08 | 2014-08-06 | 片仔癀（上海）生物科技研发有限公司 | 抗糖化化妆品组合物及含其的抗糖化化妆品 |
| CN108135823A (zh) * | 2016-01-06 | 2018-06-08 | 韩国百鸥思特公司 | 包含肌肽、大豆肽及穿心莲提取物的抗老化用组合物 |
| CN110317279A (zh) * | 2019-08-19 | 2019-10-11 | 姜东生 | 一种积雪草多糖、用作植物源防腐剂的用途和在化妆品中的应用 |
Non-Patent Citations (7)
| Title |
|---|
| 4种河北道地药材多糖成分的制备及抗氧化作用;李兰等;《中国药理学与毒理学杂志》;第33卷(第6期);第469页 * |
| 徐威.《药学细胞生物学》.中国医药科技出版社,2019,第377-378页. * |
| 植物多糖的提取及其在化妆品中的应用研究进展;杨孝延等;《长江大学学报(自科版)》;第14卷(第22期);第54-59页 * |
| 灵芝多糖抗氧化、抗皮肤衰老;李响、梁杰;《中国组织工程研究》;第17卷(第41期);第7272-7277页 * |
| 积雪草中降血糖多糖的研究;王雪松等;《中国药学杂志》;第40卷(第22期);第1697-1700页 * |
| 积雪草多糖的分离纯化、化学结构、生物活性构效关系及葡聚糖和半乳聚糖的化学修饰研究;王雪松;《万方数据 知识服务平台》;全文 * |
| 黄芳一等.《发酵工程》.华中师范大学出版社,2019,第211页. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN113456796A (zh) | 2021-10-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US10869948B2 (en) | Composition of collagen peptide and elastin peptide, method of producing the same and use thereof | |
| EP2026759B1 (en) | Pharmaceutical and cosmetic use of extracts from algae obtainable from saline hot water sources | |
| KR20180131158A (ko) | 줄기세포로부터 엑소좀 분비를 촉진시키는 방법 및 줄기세포 유래 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 기능성 화장료 조성물 | |
| KR20110036127A (ko) | 알레르기 질환 치료를 위한 석곡속 식물 유래 폴리사카라이드 추출물 | |
| WO2009040847A2 (en) | Dermocosmetic compositions based on tamarind seed polysaccharide and vegetable extracts | |
| CN113456796B (zh) | 一种抗老化组合物及其制备方法和应用 | |
| JP2019023218A (ja) | 亜麻の種子から抽出した中性オリゴ糖の混合物の獲得方法 | |
| KR102002894B1 (ko) | 천연 복합추출물을 함유하는 화장료 조성물 | |
| JP5872805B2 (ja) | Ｍｆａｐ−４産生促進剤 | |
| CN108066237B (zh) | 一种具有美白、淡斑功效的组合物及其应用、护肤品 | |
| CN109078064A (zh) | 一种覆盆子提取物及其制备方法和应用 | |
| KR101538743B1 (ko) | 목향 및 측백나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 Ｔｈ1-매개 면역 질환 또는 Ｔｈ2-매개 면역 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 | |
| KR102181090B1 (ko) | 민물김 추출물을 유효성분으로 포함하는 상처 치료용 조성물 | |
| KR20230164611A (ko) | 대마 유래 엑소좀을 유효성분으로 포함하는 피부 세포 재생, 항염 및 미백용 화장료 조성물 | |
| CN111544324A (zh) | 一种改善皮肤弹性的组合物及化妆品 | |
| KR102477052B1 (ko) | 선복화 단백다당체 또는 선복화 올리고당/펩타이드 복합체를 유효성분으로 함유하는 피부 외용제 조성물 및 이의 제조방법 | |
| Liu et al. | Degraded Porphyra haitanensis sulfated polysaccharide relieves ovalbumin-induced food allergic response by restoring the balance of T helper cell differentiation | |
| JP6012352B2 (ja) | 天蚕セリシンの抽出・精製方法および天蚕セリシンを含む医薬組成物、食品、化粧料 | |
| KR101618726B1 (ko) | 명태껍질로부터 엘라스틴을 포함하는 단백질추출물을 제조하는 방법 | |
| KR102052107B1 (ko) | 화장료 조성물 | |
| KR102017026B1 (ko) | 염증 또는 알러지의 예방 또는 치료용 약학 조성물 및 염증 또는 알러지 개선용 화장료 조성물 | |
| TWI481718B (zh) | Preparation and Application of Seaweed Mannose Complex Polysaccharide Polymers | |
| Xiuying et al. | Deferring senile effect of polysaccharides from Angelica and Astragalus on aging mice | |
| KR100910131B1 (ko) | 자외선에 의한 세포 변이 억제 효과를 갖는 인동 추출물,그 추출 방법 및 인동 추출물을 포함하는 조성물 | |
| KR100702330B1 (ko) | 빈랑자 추출물 및 합성 팔미토일펜타펩타이드를유효성분으로 함유하는 피부 노화 억제용 화장료 조성물 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |