CN102356732B - 田间高压提取果树和林木木质部汁液的方法 - Google Patents
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Abstract
一种田间高压提取果树和林木木质部汁液的方法，采取强力高压注射的方法，从枝条断面直接采收木质部汁液，进行成分分析。由于田间取样，不离体，提取的木质部汁液成分的真实性比离体条件下更真实可靠，对于分析木质部汁液的成分能够更客观、更准确。而且设备结构简单，制造成本低，操作易行，十分利于推广。
Description
技术领域
本发明属在田间高压提取果树和林木木质部汁液的方法。
背景技术
随着对果树和林木根冠关系和植物营养关系研究的不断深入，以及对根系随水分和土层深度变化差异性的不断认识，人们已意识到了解植物木质部汁液成分变化是认识根冠关系的基本条件。木质部汁液的组成成分以及各组分浓度变化受许多因素的影响，例如根系和地上部的生理活性、土壤通气性、土壤水分、温度等，因此研究木质部汁液成分时如何正确的收集到汁液成为研究这一问题的技术关键之一。
目前收集木质部汁液的方法有以下三种：
1根压自然收集法切去植物地上部分，收集靠植物根压溢出的木质部汁液。这种方法收集的木质部汁液是一种缺少蒸腾拉力所形成的导管汁液张力条件下收集的汁液，由于流速减小，木质部汁液浓度明显增加，不能代表蒸腾下活体茎杆汁液的真实情况。此种靠较小根压收集的木质部汁液需时较长，以致由韧皮部供给根系的光合产物减少而严重影响根系活力、营养吸收以及根系的呼吸代谢。这种收集方法对绝大多数果树和林木来说相当困难，尤其是在土壤干旱条件下，几乎收集不到任何汁液，给研究带来了极大困难。
2压力室收集木质部汁液法将切下的完整植株或割去地上部的完整根系放入压力室中，切面突出压力室外，逐步提高压力室内的静水压直到切面上刚呈现液滴，此时所加压力为平衡压，为快速获得汁液进一步施加压力称为过压，采用这种方法能够很容易收集到各种植物在任何条件下的木质部汁液。但此法有以下问题：(1)用完整根系加压很难得知施加的压力应该有多大？(2)离体材料提取的木质部汁液成分不能符合自然生长条件下的木质部汁液成分，难以进行定性、定量测定；(3)压力室成本昂贵。
3真空萃取法日本专家用真空萃取法提取温州蜜柑的木质部汁液进行研究。完整的真空萃取装置包括：一个玻璃室，Corian盖子，一个密封圈，一个真空计和阀组件，聚四氟乙烯端口，一个可以调节的收集架，密封luer针座，插头和玻璃室保护插头。目前价值约12400元人民币，而且是离体提取，难以反映木质部汁液成分的真实情况。
由上可见：发明田间在不离体条件下直接提取果树和林木木质部汁液的方法是十分必要的。
发明内容
本发明申请要解决的技术问题是提供一种在田间果树和林木不离体的条件下提取木质部汁液的方法。
本发明以如下技术方案解决上述技术问题：
一种田间高压提取果树和林木木质部汁液的方法，其特征是采取强力高压注射的方法，从枝条断面直接采收木质部汁液，进行成分分析。
具体步骤是：用电钻在果树或林木的主干上打三个直径2-3mm、深2-3cm的孔，分别插入3个与密封容器连接、外径与孔径匹配的空心插头后，密封容器内加入1.5-2.5L有色溶液，加压到3个大气压后开始输液；输液8-12分钟后，从树冠上选择直径为0.5±0.2cm的枝条剪断，有白色、透明的木质部汁液流出，用试管或小瓶接收，密封；当断口溶液稍带色时停止接收木质部汁液并密封。
本发明用自制强力高压注射设备在田间不离体条件下从果树和林木上提取木质部汁液，不仅能够真实反映木质部汁液成分，而且可以获取大量木质部汁液，对于分析木质部汁液的成分能够更客观、更准确。而且设备结构简单，制造成本低，操作易行，十分利于推广。
具体实施方式
以下是提取木质部汁液实例：
2011年8月22日，在河北省曲周县相公庄村张明海果园，以6年生红富士苹果为试材，在距地面30cm高的主干上，用可充电钻打3个在不同方向上的直径3mm、深2cm的孔，在密封的压力容器内加入2L邻菲罗啉铁溶液(红色)，将插头插入孔后，用气泵向压力容器内加压至3个大气压后，开始输液。输液10分钟后，从树冠上选直径5mm枝条剪断，枝条断口流出的木质部汁液用干净的小瓶(类似装青霉素、链霉素针剂的小瓶)接住密封；当断口溶液稍带色时，说明开始有输入液，即停止接收木质部汁液。所取木质部汁液进行有机酸测定。
有机酸的分析
用高压液相色谱仪对木质部汁液中的有机酸组分定性：在相同的色谱条件下，将样品色谱图与有机酸标准液色谱图进行对照，根据保留时间确定样品中的有机酸；在样品中加入有机酸的标准溶液，根据峰高的突增进一步验证色谱峰的归属。
采用Enpower色谱工作站中增强型积分法测量峰面积，按外标法定量。制定中线性回归方程：在实验样品的浓度范围内，各种有机酸浓度与峰面积的线性关系均良好，用外标法定量，准确度可以得到保证。
测定结果如下表：
苹果木质部汁液有机酸量(mg/l)
从上表可以看出：苹果木质部汁液中检测到的有机酸主要有草酸、苹果酸、酒石酸、琥珀酸和丙二酸，以草酸含量为高。
Claims (1)
1.一种田间高压提取果树和林木木质部汁液的方法，其特征是具体步骤是：用电钻在果树或林木的主干上打三个直径2-3mm、深2-3cm的孔，分别插入3个与密封容器连接、外径与孔径匹配的空心插头后，密封容器内加入1.5-2.5L有色溶液，加压到3个大气压后开始输液；输液8-12分钟后，从树冠上选择直径为0.5±0.2cm的枝条剪断，有白色、透明的木质部汁液流出，用试管或小瓶接收，密封；当断口溶液稍带色时停止接收木质部汁液并密封。
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