CN102344851A - 一种海狗油的精制方法 - Google Patents
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Abstract
一种海狗油的精制方法,a、将海狗动物脂肪切碎;b、将切碎的海狗动物脂肪用40-45℃温度的温水清洗;c、将切碎的海狗动物脂肪清洗后放入油水分离器中离心分离得到分离出的水和脂肪原料;d、将脂肪原料采用单级短程分子蒸馏纯化方法精制。它保留了海狗油中纯天然的抗氧化剂-角鲨烯,一改传统过滤方式除菌不彻底、无法连续生产、劳动强度大、产品品质低等缺点。可维持高通量下的长期稳定运行,所得产品品质优良。
Description
技术领域:
本发明涉及一种海狗油软胶囊及其在制备改善化学性肝损伤保健品中的应用。
背景技术:
海狗油(Seal oil)俗称海狗油,是从深海高寒(-50℃)水域中的哺乳动物海狗的脂肪层提炼加工的油。海狗是以名贵鳕鱼,三文鱼等为食,体内富集厚厚的脂肪层,海狗油中的ω-3不饱和脂肪酸EPA、DPA、DHA等含量高达20%左右,加之北极无污染洁净的自然生态环境,海狗油成为大自然中最理想的ω-3不饱和脂肪酸的重要来源。其具有保护肝脏、调节血脂等作用在一些文献中已有报道,引起了国内外食品界的高度重视,并掀起了海狗油功能食品开发热潮。
海狗油的精制方法有多种,传统酯化法,须将原料海狗油与碱金属盐混合再进行加工,加工程序复杂,劳动强度大,且无法连续生产,有化学物残留。传统多级蒸馏法,须将原料海狗油重复加工,周期长,无法连续生产,且进料速度慢,能耗大,效率低。
分子蒸馏也称短程蒸馏,是一种在高真空下进行的连续蒸馏过程。由于其操作温度远低于物质常压下的沸点温度,同时物料被加热的时间非常短,不会对物质本身造成破坏,因此分子蒸馏广泛应用于化工、医药、轻工、石油、油脂、核化工等工业中,用于浓缩或纯化高分子量、高沸点、高粘度的物质及热稳定性较差的有机化合物。中国专利CN1951399A采用分子蒸馏法制备精制海狗油,该专利存在以下缺点:(1)、两级蒸馏步骤复杂,效率不高,原料经两级高温蒸馏后,易碳化;(2)、两级蒸馏破坏了角鲨烯的有效性,故在生产成品时,还须在原料内添加VE;(3)、该专利所采用的蒸馏方法,蒸馏量极低,不能正常用于工业生产。
发明内容:
本发明的目的就是针对现有技术之不足,而提供一种海狗油的精制方法,它保留了海狗油中纯天然的抗氧化剂-角鲨烯,一改传统过滤方式除菌不彻底、无法连续生产、劳动强度大、产品品质低等缺点。可维持高通量下的长期稳定运行,所得产品品质优良。
一种海狗油的精制方法,a、将海狗动物脂肪切碎;
b、将切碎的海狗动物脂肪用40-45℃温度的温水清洗;
c、将切碎的海狗动物脂肪清洗后放入油水分离器中离心分离得到分离出的水和脂肪原料;
d、将脂肪原料采用单级短程分子蒸馏纯化方法精制。
所述对步骤C中分离出的水进行过滤得到水和离心分离遗漏的脂肪原料,将离心分离遗漏的脂肪原料加入脂肪原料中。
所述单级短程分子蒸馏纯化方法步骤如下:
1)、对脂肪原料脱气:在系统真空达到0.001-0.003mbar、主加热器预设温度310-320℃、进料加热器预设温度200-220℃的条件下对脂肪原料进行脱气;
2)、对脱气后的脂肪原料进行蒸馏分离出水份得到高温液态精制海狗油:主加热器温度达到200℃后,开始进料,进料流速80-90L/h;主加热器温度达到310-320℃后,进料速度140-160L/h;
3)、冷却:对高温液态精制海狗油采用常温循环冷却水冷却收集即得精制海狗油成品。
所述单级短程分子蒸馏纯化方法选用德国UIC公司的单级短程分子蒸馏提取设备。
本发明的有益效果在于:
1、它采用单级短程分子蒸馏技术精制海狗油,保留了海狗油中纯天然的抗氧化剂-角鲨烯;
2、以100%精制海狗油为原料制成软胶囊,原料中无需添加维生素E,该海狗油软胶囊在制备改善化学性肝损伤的保健品中应用较好。
3、单级短程分子蒸馏技术过滤级别可选,精度高,处理效果非常稳定,一改传统过滤方式除菌不彻底、无法连续生产、劳动强度大、产品品质低等缺点。可维持高通量下的长期稳定运行,所得产品品质优良。
具体实施方式:
实施例1,设备:采用德国UIC公司制造的EA250/KD200单级短程分子蒸馏提取设备。制备步骤如下:
一种海狗油的精制方法,a、将海狗动物脂肪切碎;
b、将切碎的海狗动物脂肪用40-45℃温度的温水清洗;
c、将切碎的海狗动物脂肪清洗后放入油水分离器中离心分离得到分离出的水和脂肪原料;
d、将脂肪原料采用单级短程分子蒸馏纯化方法精制。
所述对步骤C中分离出的水进行过滤得到水和离心分离遗漏的脂肪原料,将离心分离遗漏的脂肪原料加入脂肪原料中。
所述单级短程分子蒸馏纯化方法步骤如下:
1)、对脂肪原料脱气:在系统真空达到0.001-0.003mbar、主加
热器预设温度310-320℃、进料加热器预设温度200-220℃的条件下对脂肪原料进行脱气;
2)、对脱气后的脂肪原料进行蒸馏分离出水份得到高温液态精制海狗油:主加热器温度达到200℃后,开始进料,进料流速80-90L/h;主加热器温度达到310-320℃后,进料速度140-160L/h;
3)、冷却:对高温液态精制海狗油采用常温循环冷却水冷却收集即得精制海狗油成品。
所述单级短程分子蒸馏纯化方法选用德国UIC公司的单级短程分子蒸馏提取设备。
实施例1中精制海狗油的理化指标检验结果:
取精制海狗油,用常规方法制成每粒0.75g的海狗油软胶囊,化学性肝损伤者口服每日2次,每次4粒,对化学性肝损伤具有有辅助保护功能。
实施例2,设备:采用德国UIC公司制造的EA250/KD200单级短程分子蒸馏提取设备。
a、将海狗动物脂肪切碎;
b、将切碎的海狗动物脂肪用40-45℃温度的温水清洗;
c、将切碎的海狗动物脂肪清洗后放入油水分离器中离心分离得到分离出的水和脂肪原料;
d、将脂肪原料采用单级短程分子蒸馏纯化方法精制。
所述对步骤C中分离出的水进行过滤得到水和离心分离遗漏的脂肪原料,将离心分离遗漏的脂肪原料加入脂肪原料中。
采用单级短程分子蒸馏纯化方法精制海狗油,步骤如下:
a)脱气:开启分子蒸馏器,当系统真空达到0.002mbar时,设定主加热器温度为315℃,设定进料加热器温度为210℃。
b)蒸馏:主加热器温度达到200℃后,开始进料,进料流速90L/h;主加热器温度达到315℃后,进料速度150L/h。
c)收集:收集蒸馏系统蒸馏出来的精制海狗油成品。
实施例2中精制海狗油的理化指标检验结果:
取精制海狗油,用常规方法制成每粒0.75g的海狗油软胶囊,化学性肝损伤者口服每日2次,每次4粒,对化学性肝损伤具有有辅助保护功能。
实施例3,设备:采用德国UIC公司制造的EA250/KD200单级短程分子蒸馏提取设备。
a、将海狗动物脂肪切碎;
b、将切碎的海狗动物脂肪用40-45℃温度的温水清洗;
c、将切碎的海狗动物脂肪清洗后放入油水分离器中离心分离得到分离出的水和脂肪原料;
d、将脂肪原料采用单级短程分子蒸馏纯化方法精制。
所述对步骤C中分离出的水进行过滤得到水和离心分离遗漏的脂肪原料,将离心分离遗漏的脂肪原料加入脂肪原料中。
采用单级短程分子蒸馏纯化方法精制海狗油,步骤如下:
a)脱气:开启分子蒸馏器,当系统真空达到0.001mbar时,设定主加热器温度为312℃,设定进料加热器温度为200℃。
b)蒸馏:主加热器温度达到200℃后,开始进料,进料流速90L/h;主加热器温度达到312℃后,进料速度140L/h。
c)收集:收集蒸馏系统蒸馏出来的精制海狗油成品。
实施例3中精制海狗油的理化指标检验结果:
取精制海狗油,用常规方法制成每粒0.75g的海狗油软胶囊,化学性肝损伤者口服每日2次,每次4粒,对化学性肝损伤具有有辅助保护功能。
本发明实施例3中海狗油软胶囊的毒理学安全性测试如下:
1材料与方法
1.1样品及处理:软胶囊供试样品为产品内容物,淡黄色油状液体,比重约为0.92。实验时用食用植物油作为溶剂配制成各剂量供试。
1.2实验动物和检测条件:实验用SD大鼠由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供,生产许可证号为SCXK(沪)2007-0005,清洁级,体重55-80g。实验动物饲料由浙江省实验动物中心提供,执行标准GB14924-2001。检测环境条件,实验动物房使用证可证号为SYXK(浙)2008-0106,温度范围20-23℃,相对湿度范围50-70%。实验动物试验前在动物房环境中适应3天。
1.3方法
1.3.1剂量设计:本产品人推荐量为6.0g/60kg/日。实验设三个剂量组和一个阴性对照组(蒸馏水)、一个溶剂对照组(食用植物油),低、中、高三个剂量分别为2.5、5.0、10.0g/kg体重,相当于人推荐量的25倍、50倍和100倍。实验2.5、5.0g/kg体重剂量组分别取60.0、120.0g样品加食用植物油至240ml配成0.25、0.50g/ml,按10ml/g体重经口灌胃给予,10.0g/kg体重剂量组用产品原液按11ml/kg体重经口灌胃给予,连续30天。阴性对照组和溶剂对照组分别用蒸馏水、食用植物油灌胃,按10ml/kg体重经口灌胃给予。
1.3.2实验方法:SD大鼠100只,随机分5组,每组20只,雌雄各半,大鼠单笼饲养,自由进食、饮水。大鼠连续观察30天,每周记录体重和进食量并计算食物利用率,实验期末尾静脉取血进行血液学检查(用MEK-6318KWG全自动血球计数仪测定),断头取血进行血检查(取血清用Accute TBA-40FR全自动生化分析仪测定),对每只大鼠进行脏器大体观察,同时取肝、肾、脾、睾丸(卵巢)称重并计算脏体比,并取肝、肾、脾、胃、肠、睾丸(卵巢)进行病理组织学检查(石蜡切片,H-E染色,光镜检查)。
1.3.3结果分析:方差分析,秩和检验。
2结果:
2.1一般观察,实验期间,各组大鼠均未见异常症状和体征,也无死亡。
2.2对大鼠体重的影响
结果见表1,原始数据符合方差齐的要求(P>0.05),实验各时间点三剂量组大鼠体重和阴性对照组、溶剂对照组比较差异均元显著性(方差分析,P>0.05)。
表1.本软胶囊对大鼠体重的影响(±SD)
2.3对大鼠周进食量及总食物利用率、周食物利用率的影响
结果见表2,原始数据符合方差齐的要求(P>0.05),各剂量组大鼠周进食量和阴性对照组、溶剂对照组比较差异均无显著性(方差分析,P>0.05)。
表2.本软胶囊对大鼠周进食量的影响(±SD)
2.4对大鼠血液学的影响
结果见表3,数值均在正常范围内,除雌雄性大鼠血红蛋白和红细胞计数原始数据不符合方差齐的要求(P<0.05),数据经转换仍不符合方差齐性要求,各剂量组雌雄性大鼠血红蛋白、红细胞计数和阴性对照组、溶剂对照组比较差异无显著性外(秩和检验,P>0.05)。白细胞计数原始数据符合方差齐的要求(P>0.05),各剂量组大鼠白细胞计数和阴性对照组、溶剂对照组比较差异无显著性(方差分析,P>0.05)。
表3.本软胶囊对大鼠HB、RBC、WBC的影响(±SD)
2.5对大鼠WBC的影响
结果见表4,原始数据符合方差齐的要求(P>0.05)。数值均在正常范围内。各剂量组大鼠白细胞分类淋巴、单核、粒细胞和阴性对照组、溶剂对照组比较差异均无显著性(方差分析,P>0.05)。
表4.本软胶囊对大鼠WBC的影响(±SD)
2.6对大鼠血生化的影响
结果见表5、表6,数值均在正常范围内。除雌性大鼠血清谷丙转氨酶、尿素氮,雄性大鼠血清肌肝原始数据不符合方差齐的要求(P<0.05),数据经转换仍不符合方差齐性要求,各剂量组雌性大鼠血清尿素氮和雄性大鼠血清肌酐与阴性对照组、溶剂对照组比较差异均无显著性外(秩和检验,P>0.05),其余原始数据符合方差齐的要求(P>0.05)。各剂量组大鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素氮、肌酐、总胆固醇、甘油三酯和阴性对照组、溶剂对照组比较差异均无显著性(方差分析,P>0.05)。
表6数值均在正常范围内。原始数据符合方差齐的要求(P>0.05)。各剂量组大鼠血清血糖、总蛋白、白蛋白、球蛋白、白/球比和阴性对照组、溶剂对照组比较差异均无显著性(方差分析,P>0.05)。
表5.本软胶囊对大鼠血生化的影响(±SD)
表6.本软胶囊对大鼠血生化的影响(±SD)
2.7对大鼠脏器重和脏体比的影响
结果见表7,原始数据符合方差齐的要求(P>0.05)。各剂量组大鼠脏器重肝、脾、肾、睾丸(卵巢)及脏体比肝/体、脾/体、肾/体、睾丸(卵巢)/体比和阴性对照组、溶剂对照组比较,差异均无显著性(方差分析,P>0.05)。
表7.本软胶囊对大鼠脏器生和脏体比的影响(±SD)
2.8大鼠病理组织学检查
大体解剖未发现明显异常,镜下检查发现:肝:肝脏被膜完整,肝小叶结构清晰,肝板排列不紊乱,胞核形状规则,汇管区小胆管、血管、淋巴管可见,枯否氏细胞无殊;少量大鼠肝小叶中央静脉轻度淤血(阴性对照:雄性大鼠2例,雌性大鼠1例,该组动物总数为20只,简述为♂2♀1/20例;溶剂对照组:雄性大鼠2例、雌性大鼠2例,简述为♂2♀2/20例;高剂量组:雄性大鼠3例、雌性大鼠2例,简述为♂3♀2/20例)。少量大鼠肝脏血窦轻度扩张充血,小片状分布(阴性对照:♀1/20例;溶剂对照组:♂1/20例;高剂量组:♂1♀2/20例).少量大鼠肝脏细胞胞浆内可见圆形空泡,小片状散在分布(阴性对照:0/20例;溶剂对照组:♀2/20例;高剂量组:♂1♀4/20例)。少量大鼠肝脏小叶内可见点灶状炎细胞浸润(阴性对照组:♂1♀1/20例;溶剂对照组:♂2♀2/20例;高剂量组:♂2♀2/20例),少量大鼠肝脏汇管区可见散在的炎细胞浸润(阴性对照:♂1♀2/20例;溶剂对照组:♂1♀2/20例;高剂量组:♂2♀2/20例),少量大鼠肝脏可见点灶状肝细胞坏死伴炎细胞浸润(阴性对照:♂1♀1/20例;溶剂对照组:♂1♀3/20例;高剂量组:♂2♀3/20例)。肾:被膜完整,皮质区与髓质区分层清晰,无纤维组织增生。肾小球未见充盈、萎缩、坏死等改变。肾盂黏膜完整,无化生等异常改变。少量大鼠肾脏部分肾小管上皮细胞轻度肿胀(阴性对照:♂1♀1/20例;溶剂对照组:♀2/20例;高剂量组:♂1♀1/20例),少量大鼠肾脏局部肾皮质间质血管轻度扩张充血(阴性对照:♂1♀2/20例;溶剂对照组:♂2♀2/20例;高剂量组:♂2♀2/20例)。少量大鼠肾皮质区可见小灶状炎细胞浸润(阴性对照:0/20例;溶剂对照组:0/20例;高剂量组:♂2/20例。个别大鼠肾乳头管上皮细胞灶性坏死伴炎细胞浸润(阴性对照:0/20例;溶剂对照组:0/20例;高剂量组:♂1/20例)。脾:脾组织未见异常,红随与白髓可见,白髓内可见动脉鞘,红随内可见散在的淋巴细胞与红细胞,红、白髓比例基本正常。少量大鼠脾血窦轻度扩张充血(阴性对照:♂2/20例;溶剂对照组:♂2/20例;高剂量组:♀1/20例)。胃和肠(小肠、十二指肠):粘膜上皮细胞形态未见异常,固有层,粘膜下层,肌层和浆膜层未见炎细胞浸润,胃腺,肠腺均无萎缩,增生性改变。个别大鼠胃粘膜下层血管轻度充血(阴性对照:0/20例;溶剂对照组:♀1/20例;高剂量组:0/20例)。睾丸:个别大鼠睾丸曲细精管内生精细胞减少,部分曲细精管内未见生精细胞,间质细胞增生(阴性对照:0/20例;溶剂对照组:0/20例;高剂量组:♂1/20例)。其余大鼠睾丸曲细精管不萎缩,各级生精细胞排列不紊乱,间质未见异常改变。卵巢:可见各级生长卵泡、间质未见异常。
试验结果表明:本软胶囊大鼠30天喂养试验三剂量组各项指标均未见明显毒性反应。
本发明海狗油软胶囊的功能性测试如下:
1实验动物和检测条件:
实验动物使用许可证号为SYXK(浙)2008-0106。实验用ICR小鼠由上海西普尔-必凯实验动物有限责任公司提供,实验动物生产许可证为SCXK(沪)2008-0016,清洁级,雄性,体重20±2g。饲料由浙江省实验动物中心提供,执行标准GB14924.1-2001。检测环境条件,温度20-24℃,相对湿度40-70%。动物于试验前在动物房环境中适应3天。
2剂量设计:
实验设三个剂量组:正常对照组、模型对照组(蒸馏水)和溶剂对照组(大豆油)。低、中、高三个剂量分别为0.5、1.0、3.0g/kg体重,相当于人推荐量的5、10和30倍(人推荐量为6.0g/60kg/日)。三剂量组分别称取供试样品3.0、6.0和18.0g加大豆油至60ml,配制成浓度为0.005、0.100和0.300g/ml样品,灌胃给样品,灌胃容量按0.1ml/10g体重计。
3实验方法:
3.1各剂量组每天经口灌胃给予受试物,正常对照组和模型对照组给予蒸馏水,溶剂对照组给予食用大豆油。动物每周称重两次,以调整受试物的剂量。于实验的第45天将模型对照组、溶剂对照组,受试物各剂量组动物一次灌胃给予50%乙醇14ml/kg体重,正常对照组动物给蒸馏水,禁食16h处死动物,取肝脏进行各项指标的检测(10%肝脏组织匀浆以10000转/分钟离心)及病理组织学检查。
3.2检测指标:肝组织中的丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)和甘油三酯(TG)含量。
3.3肝脏病理组织学检查,从小鼠肝脏左叶中部做横切面取材,冰冻切片,苏丹III染色。镜检从肝脏的一端视野开始记录细胞的病理变化,用40倍物镜连续观察整个组织切片,主要观察脂滴在肝脏的分布、范围和面积。
3.4数据处理:经方差齐性检验方差齐性或进行适当的数据转换后方差齐性,则采用方差分析。若经数据转换后仍未到达到正态或方差齐性要求,则改用秩和检验进行统计。实验结果用SPSS11.5统计软件统计。
4实验结果:
4.1受试物对实验小鼠体重的影响:
结果见表8。经方差齐性检验,原始数据符合发差齐性。低、中、高三剂量组小鼠初始体重、中期体重、终期体重及体重增重和正常对照组、模型对照组、溶剂对照组比较,差异均无统计学意义(方差分析,P>0.05)。
表8.受试物对小鼠体重的影响
4.2受试物对小鼠肝组织MDA、GSH、TG含量的影响:
结果见表9,与正常对照组比较,模型对照组小鼠肝组织中MDA、TG明显升高,GSH明显降低,差异均有统计学意义(t检验,P<0.05),说明乙醇肝损伤模型成立。与模型对照组和溶剂对照组比较,高剂量组小鼠肝组织中TG明显降低、GSH明显升高,差异均有统计学意义(q检验,P<0.05);与模型对照组比较,低剂量组小鼠肝组织中GSH明显升高,差异有统计学意义(q检验,P<0.05);与溶剂对照组比较,低剂量组小鼠肝组织中TG明显降低,差异有统计学意义(q检验,P<0.05)。
表9.受试物对小鼠肝组织MDA、GSH、TG含量的影响
注:a.与正常对照组比较,t检验,P<0.05;b.与模型对照组比较,q检验,P<0.05;c.与溶剂对照组比较,q检验,P<0.05。
4.3肝脏病理组织学变化:
镜检结果见表10,模型对照组与各剂量组动物肝脏病理改变以肝细胞脂肪变性为主,病变单位以小叶周边带多见。与正常对照组比较,模型对照组小鼠肝脏细胞脂肪变性评分明显升高,经统计学处理,差异有统计学意义(t检验,P<0.01),说明模型建立成功。与模型对照组和溶剂对照组比较,高剂量组小鼠肝脏细胞脂肪变性评分均值明显降低,差异均有统计学意义(q检验,P<0.05)。
表10.受试物对小鼠肝组织病理组织学变化影响
注:a.与正常对照组比较,t检验,P<0.01;b.与模型对照组比较,q检验,P<0.05;c.与溶剂对照组比较,q检验,P<0.05。
试验结果表明:本软胶囊对小鼠的化学性肝损伤有辅助保护功能。
本研究采用先进的科技手段开发利用海狗油资源,将其制成具有对化学性肝损伤有保护功能的功能性食品,具有功效成分含量高、服用量小、疗效好的特点,该产品必将带来良好的社会效益和经济效益。
Claims (4)
1.一种海狗油的精制方法,其特征在于:
a、将海狗动物脂肪切碎;
b、将切碎的海狗动物脂肪用40-45℃温度的温水清洗;
c、将切碎的海狗动物脂肪清洗后放入油水分离器中离心分离得到分离出的水和脂肪原料;
d、将脂肪原料采用单级短程分子蒸馏纯化方法精制。
2.根据权利要求1所述一种海狗油的精制方法,其特征在于:对步骤C中分离出的水进行过滤得到水和离心分离遗漏的脂肪原料,将离心分离遗漏的脂肪原料加入脂肪原料中。
3.根据权利要求1所述一种海狗油的精制方法,其特征在于:所述的单级短程分子蒸馏纯化方法步骤如下:
1)、对脂肪原料脱气:在系统真空达到0.001-0.003mbar、主加热器预设温度310-320℃、进料加热器预设温度200-220℃的条件下对脂肪原料进行脱气;
2)、对脱气后的脂肪原料进行蒸馏分离出水份得到高温液态精制海狗油:主加热器温度达到200℃后,开始进料,进料流速80-90L/h;主加热器温度达到310-320℃后,进料速度140-160L/h;
3)、冷却:对高温液态精制海狗油采用常温循环冷却水冷却,收集即得精制海狗油成品。
4.根据权利要求3所述一种海狗油的精制方法,其特征在于:所述的单级短程分子蒸馏纯化方法选用德国UIC公司的单级短程分子蒸馏提取设备。
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CN102755350A (zh) * | 2012-08-01 | 2012-10-31 | 浙江金诺康生物制药有限公司 | 精制海狗油及其在制备治疗非酒精性脂肪肝药物中的应用 |
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CN1378843A (zh) * | 2002-03-22 | 2002-11-13 | 海南加华海产生物制药有限公司 | 海狗油胶丸 |
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CN101530425A (zh) * | 2009-04-29 | 2009-09-16 | 刘威 | 精制海狗油在制备治疗慢性肾功能衰竭药物中的应用 |
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2011
- 2011-09-07 CN CN201110263392.7A patent/CN102344851B/zh not_active Expired - Fee Related
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