CN102335338B - 改善帕金森病脑神经递质代谢的中药复方制剂 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种改善帕金森病脑神经递质代谢的中药复方制剂及其制备方法，该中药复方制剂是由下列重量配比的原料制成的：肉苁蓉5-15份、淫羊藿5-15份、制黄精8-18份、冰片0.05-0.5份。经临床疗效、药效实验及安全性评价显示其对改善帕金森病脑神经递质代谢安全有效。

Description

改善帕金森病脑神经递质代谢的中药复方制剂

技术领域

本发明属于中药制剂技术领域，涉及一种改善帕金森病脑神经递质代谢的中药复方制剂。 

背景技术

帕金森病(Parkinson Disease, PD)是一种常见的中老年神经退行性疾病，主要临床表现有静止性震颤、肌强直、运动迟缓、姿势步态障碍。流行病学调查（据“九五”期间国家科技支撑计划调查）显示，我国 65 岁以上人群的患病率约为1.7%，PD患病总人数已达170多万人；且其发病率有随年龄增长而增高的趋势，男女之比约为 4∶3。帕金森病的神经递质代谢改变主要表现之一是脑内多巴胺合成减少、多巴胺水平降低。迄今为止, PD的确切病因及发病机制尚不清楚,但氧化应激、兴奋性氨基酸毒性等体内外病理因素引起的细胞凋亡增多而神经生长因子等保护性因素减少是多巴胺能神经细胞退行性病变的关键。目前对于PD的治疗虽有多种药物，但仍以左旋多巴为主的替代疗法为主；而左旋多巴治疗带来的诸多问题日益引起人们的注意，诸如“开关现象” 、“剂末现象”、运动障碍、精神异常等问题；还有15%左右的患者根本无效。并且左旋多巴本身不仅无法阻止或延缓多巴胺能神经元的进行性死亡，还可以通过自身氧化产物诱导神经细胞凋亡。这些都极大地影响了患者的治疗效果和生活质量。 

目前中医药治疗 PD 还不能处于主导地位，但无论古典医籍记载的方药还是近年提出的以中医本草为原料的治疗PD的可能新药，在临床上都有一定疗效；而且现代药理研究也证实中医方药可以不同程度地减轻机体的氧化应激损伤，清除自由基，提高脑内DA水平，提高机体抗氧化和抗细胞凋亡，延缓PD过程，增效减毒，改善 PD患者的生活质量，说明中药在PD黒质细胞保护性治疗和恢复性治疗中可以发挥其不可替代的优势。但纵观这些方药不难发现以下不足之处：1）药味组成太多，药物之间的化学成分可能会出现尚未掌握的不良反应，不利于新药新剂型的开发，2）内多含有有毒成分的药物，不宜于长期服用；3）其功效大多为化痰除湿、行气活血或益气养血为主，与PD肾虚髓空的基本病机不吻合。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种改善帕金森病脑神经递质代谢的中药复方制剂，它是在中医基础理论的指导下，根据帕金森病的基本病机结合实验及多年的临床经验研制出的一种新的疗效显著的，无毒副作用的治疗帕金森病的方药。 

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案： 

该中药复方制剂是由下列重量份配比的原料制成的：肉苁蓉5-15份、淫羊藿5-15份、制黄精8-18份、冰片0.05-0.5份。较优的重量份配比：肉苁蓉7-12份、淫羊藿7-12份、制黄精10-15份、冰片0.1-0.3份。最优的重量份配比：肉苁蓉10份、淫羊藿10份、制黄精12份、冰片0.1份。

炮制过程如下： 

（1）按原料配比称取肉苁蓉、淫羊藿、制黄精，加蒸馏水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，过滤，滤液常压直火，300-500℃浓缩15min-30min至50℃时的相对密度为1.20；所述的蒸馏水的每次加入量是按原料体积的10倍来计量的；

（2）浓缩液中加质量分数95%的乙醇溶液使浓缩液中的含醇量为60％，静置24-48h沉淀，取上清液，回收乙醇后浓缩成稠膏；

（3）在步骤（2）制备的稠膏中加计量好的冰片，再加入糊精，60℃～80℃干燥3-4h至含水量为2%，即得中药复方制剂。

剂型：散剂、颗粒剂、胶囊剂、冲剂、片剂、丸剂（水丸、水蜜丸、蜜丸）、口服液。 

散剂、颗粒剂、冲剂的用法：以沸水100-200毫升冲泡5-10分钟并调匀后温服。亦可直接口服，以温开水送服。用量：每次1袋（9克），每日2-3次。 

胶囊剂的用法：每次3粒，每天2-3次。 

片剂的用法：每次3片，每天2-3次。 

丸剂的用法：每次1丸，每天2-3次。 

根据中医配伍原则及现代药理学研究结果，选用上述4味中药材为本发明原料药，其中每味药的药理作用如下： 

肉苁蓉，味甘、咸，性温，归肾、大肠经，能补肾阳，益精血。药理学研究表明：肉苁蓉提取物可提高了MPTP作用48h后的SH-SY5Y细胞的生存率，对帕金森病细胞损伤模型具有保护作用。

淫羊藿，味辛、甘，性温，归肾、肝经，能补肾壮阳，祛风除湿。研究表明，以淫羊藿等中药组成的复方治疗帕金森病,经临床验证,疗效好,使用安全。 

制黄精，味甘，性平。归脾、肺、肾经。功效：滋肾润肺，补脾益气。药理研究表明，黄精多糖可上调 PPAR-γ表达，抑制炎症反应和细胞凋亡，改善PD大鼠行为，促进多巴胺神经元的再生。 

冰片，性味辛苦，凉；入心、肺经。功效：开窍醒神，散郁火，去翳明目，消肿止痛。主治：中风口噤，热病神昏，惊癎痰迷，气闭耳聋，喉痹，口疮，中耳炎，痈肿，痔疮，目赤翳膜，蛲虫病。研究发现，含有冰片的中药丹参注射液对神经细胞有保护作用,对神经细胞的凋亡有明显的抑制作用，可促进神经干细胞的分化生长。 

上述四种药物虽然都已有研究表明单味药物或者提取物具有治疗帕金森病或者促进神经细胞生长的药理作用，但还仅是实验研究，并没有得到临床验证，也不是针对帕金森病神经递质代谢的。本发明以“沙漠人参”肉苁蓉为君药，取其补肾阳、益精血的阴阳双补功效；补肾阳药物淫羊藿为臣药，重补肾阳，以求阳升气旺；补肾阴药物制黄精为佐药，既补益肾中阴精，又制约肉苁蓉和淫羊藿两味补阳药的温燥之性，以图“阳得阴助而生化无穷，阴得阳升而泉源不竭”之效；又因阳药多阴药少，故用量份数稍多；冰片引诸药入脑，是为引经药，故为使药。诸药配伍，肾阴阳俱补，精气双益，且阴阳调和，达到补肾填精，益髓健脑的功效，发挥优于单独用药的良好疗效。 

本发明的显著优点在于：这种改善帕金森病脑神经递质代谢的中药复方制剂是在中医基础理论的指导下，根据帕金森病的基本病机结合实验及多年的临床经验，凝练药理，精简药味，研制出的一种新的疗效显著的，无毒副作用的治疗帕金森病的方药。在临床应用证明能显著改善帕金森病患者的临床症状，减轻病情，获得较好临床疗效，且无不良反应。经小鼠、大鼠等动物实验证实，本发明组方能显著改善帕金森病动物模型脑神经递质代谢，主要表现在减少黑质-纹状体神经细胞的凋亡，减轻神经细胞损伤后的结构破坏，提高降低的多巴胺水平以及增加多巴胺合成代谢的酪氨酸羟化酶。急慢性毒性试验均证实本发明药物没有毒副作用。 

附图说明

图1是酪氨酸羟化酶免疫组化图：A、正常对照组；B、模型对照组；C、美多巴组；D、苁蓉精组。 

图2是电镜观察图：A、正常对照组；B、模型对照组；C、美多巴组；D、苁蓉精组。 

具体实施方式

实施例1

改善帕金森病脑神经递质代谢的中药复方制剂是由下列重量份配比的原料制成的：肉苁蓉5份、淫羊藿5份、制黄精8份、冰片0.05份。

炮制过程如下： 

（1）按原料配比称取肉苁蓉、淫羊藿、制黄精，加蒸馏水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，过滤，滤液常压直火（300℃）浓缩至50℃时的相对密度为1.20；所述的蒸馏水的每次加入量是按原料体积的10倍来计量的；

（2）浓缩液中加质量分数95%的乙醇溶液使浓缩液中的含醇量为60％，静置24h沉淀，取上清液，回收乙醇后浓缩成稠膏；

（3）在步骤（2）制备的稠膏中加计量好的冰片，再按药膏和辅料糊精的重量比为1：3的比例加入糊精，16目筛制粒，60℃干燥至含水量为2%，即得颗粒剂。

实施例2

改善帕金森病脑神经递质代谢的中药复方制剂是由下列重量份配比的原料制成的：肉苁蓉12份、淫羊藿12份、制黄精15份、冰片0.3份。

炮制过程如下： 

（1）按原料配比称取肉苁蓉、淫羊藿、制黄精，加蒸馏水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，过滤，滤液常压直火（500℃）浓缩至50℃时的相对密度为1.20；所述的蒸馏水的每次加入量是按原料体积的10倍来计量的；

（2）浓缩液中加质量分数95%的乙醇溶液使浓缩液中的含醇量为60％，静置48h沉淀，取上清液，回收乙醇后浓缩成稠膏；

（3）在步骤（2）制备的稠膏中加计量好的冰片，再按药膏和辅料糊精的重量比为1：3的比例加入糊精，16目筛制粒，80℃干燥至含水量为2%，即得无糖型颗粒剂。

实施例3

改善帕金森病脑神经递质代谢的中药复方制剂是由下列重量份配比的原料制成的：肉苁蓉10份、淫羊藿10份、制黄精12份、冰片0.1份。

炮制过程如下： 

（1）按原料配比称取肉苁蓉、淫羊藿、制黄精，加蒸馏水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，过滤，滤液常压直火（500℃）浓缩至50℃时的相对密度为1.20；所述的蒸馏水的每次加入量是按原料体积的10倍来计量的；

（2）浓缩液中加质量分数95%的乙醇溶液使浓缩液中的含醇量为60％，静置24h沉淀，取上清液，回收乙醇后浓缩成稠膏；

（3）在步骤（2）制备的稠膏中加计量好的冰片，再按药膏和辅料糊精的重量比为1：3的比例加入糊精，16目筛制粒，60℃干燥至含水量为2%，即得冲剂。

实施例4

本发明的中药复方制剂根据其原料简称为苁蓉精，以下表述皆同。

苁蓉精对帕金森病（PD）模型小鼠黒质-纹状体多巴胺（DA）含量的影响 

方法：

造模：取6周龄SPF级C₅₇BL/6J品系雄性小鼠，用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）腹腔注射法（40 mg·kg^-1·d^-1，1次/d，连续7天）建立PD小鼠模型。每次注射后至少4 h后检测小鼠的自主活动次数和转棒时间，选自主活动次数和转棒时间均下降小鼠为造模成功小鼠。

给药：选择造模成功小鼠随机分为模型对照组、苁蓉精组、美多巴组，每组10只，另取同周龄同品系小鼠10只作为正常对照组。正常对照组、模型对照组给予蒸馏水灌胃，苁蓉精组、美多巴组给予苁蓉精水煎液、美多巴水溶液灌胃，连续给药7天。 

取材：给药结束后，快速断头取脑，冰浴下分离黒质-纹状体，立即－80℃冰箱内保存待测。高效液相色谱法检测多巴胺（DA）及其代谢产物高香草酸（HVA）、二羟苯乙酸（DOPAC)的含量。 

结果： 

表 1  各组模型小鼠用药后DA及其代谢产物的含量(x±s，n=10)

注：*与正常对照组比较p<0.05；#与模型对照组比较p<0.05

结果说明：

（1）模型对照组DA含量显著低于正常对照组（p<0.05），苁蓉精组DA含量较模型组显著升高（p<0.05），与正常对照组、美多巴组无差异。

（2）模型对照组HVA含量显著低于正常对照组（p<0.05），苁蓉精组HVA含量较模型组显著升高（p<0.05），与正常对照组、美多巴组无差异。 

（3）模型对照组DOPAC含量显著低于正常对照组（p<0.05），苁蓉精组DOPAC含量较模型组显著升高（p<0.05），与正常对照组、美多巴组无差异。 

（4）DA/HVA和DA/DOPAC比值反应了多巴胺的代谢情况，从上表中可见：各组小鼠多巴胺的代谢是基本一致的。 

结论：苁蓉精能有效提高PD模型小鼠黒质-纹状体多巴胺DA含量。 

实施例5

苁蓉精对帕金森病（PD）模型小鼠酪氨酸羟化酶（TH）神经元数量的影响

方法：小鼠造模、给药同实施例4。取材：给药结束后，各组取10只大鼠，快速断头取脑并按大鼠编号逐一加以标记，用多聚甲醛水溶液灌流固定脑组织，取出脑黑质，用含蔗糖的磷酸盐缓冲液(PBS)浸泡，常规石蜡包埋，连续冠状切片(片厚5um)，按过氧化物酶标记的链霉卵白素(SP)两步法进行免疫组化染色。脱脂、水化后，经过热修复，滴加兔抗鼠TH 单克隆抗体(一抗，1:1200)，4℃过夜；加羊抗兔IgG(二抗)，37℃孵育15 min(各步骤间均以PBS冲洗)；3,3’-二氨基联苯胺(DAB)显色5min。镜检，脱水，透明，封固。每只大鼠随机选取3张切片镜下(×200)观察，用图像分析系统进行TH免疫染色阳性细胞计数，见图1、表2。

说明：模型对照组的TH阳性细胞数较正常对照组显著减少；经美多巴、苁蓉精给药后TH阳性细胞数显著增加。苁蓉精组的TH阳性细胞数较模型对照组显著增加，与美多巴组无显著差异。 

表2 各组模型小鼠用药后TH阳性神经元数(x±s，n=10) 

注：*与正常对照组比较p<0.05；#与模型对照组比较p<0.05

结果说明：

酪氨酸羟化酶 (Tyrosine hydroxylase，TH)是儿茶酚胺类活性物质生物合成的限速酶，在DA生物合成的调节中发挥重要作用。所以该酶在生物体内，尤其是在黑质纹状体系统中表达的变化（即多少）会直接影响到L-多巴胺的生物合成，直接影响PD的病情变化。

模型对照组的TH阳性细胞数较正常对照组显著减少（p<0.05），苁蓉精组的TH阳性细胞数较模型对照组显著增加（p<0.05），虽然还低于正常对照组（p<0.05），但是与美多巴组无差异。 

结论：苁蓉精能使PD模型小鼠TH阳性神经元数增加。 

实施例6

苁蓉精对帕金森病（PD）模型小鼠黒质神经元的影响（电镜观察）

方法：小鼠造模、给药同实施例4。取材：给药结束后，各组取3只大鼠，快速断头取脑，冰浴下参考《大鼠立体定位图谱》切取黒质，立即放入电镜固定液中送检。

结果：见图2。 

说明： 

正常对照组：小鼠黒质神经元电镜观察到细胞膜和细胞器完整，线粒体、高尔基复合体丰富，有少量溶酶体，染色质均匀分布于细胞核中，着色浅。

模型对照组：小鼠黒质神经元在电镜下则观察到细胞缩小，细胞核比例减少，细胞核固缩，染色质边聚，内质网扩张呈空泡状，溶酶体增多呈崩解破裂（崩解破裂的原因是：神经细胞被破坏的成份太多，溶酶体无法处理，最终表现为溶酶体破裂，加剧了神经元的损伤）；神经纤维增生明显。 

美多巴组：神经细胞呈均匀染色状态，细胞膜和细胞器完整，线粒体、高尔基复合体丰富，有少量溶酶体，染色质均匀分布于细胞核中，着色浅。可见少量神经纤维增生。基本接近正常对照组。 

苁蓉精组：虽然也可见到神经元细胞核固缩、染色质边聚、内质网扩张、溶酶体增多的现象，但较模型组显著减轻，表现为少部分神经元细胞核固缩、染色质边聚，大部分神经元仍然保持正常状态，内质网扩张但较模型组显著减轻，溶酶体数量较多但较少崩解破裂（原因是：清除被破坏的神经元成份）；神经纤维增生但数量较少。接近美多巴组神经元形态。 

结论：苁蓉精能减轻PD模型小鼠黒质神经元的损伤，使神经细胞基本保持正常。 

实施例7

苁蓉精对PD模型小鼠脑神经细胞凋亡因子的影响

   方法：小鼠造模、给药同实施例4。取材：给药结束后，各组取10大鼠，快速断头取脑，冰浴下参考《大鼠立体定位图谱》切取黒质-纹状体，去除血管、脂肪等，PBS冲洗去除残留的血液。冰浴下，加PBS用眼科剪将组织块剪成糊状，以200目尼龙网过滤成单细胞液体，离心去上清，加PBS混匀并调整细胞浓度为1×10⁶/ml单细胞悬液。取黒质-纹状体单细胞悬液100ul加入caspase-3、Fas/ Fas-L、Bal-2/Bax抗体，涡旋混匀，室温避光孵育15min；然后加PBS 2ml，1000rpm离心5min，弃上清，加PBS 500ul，重悬后上机检测。

结果： 

表3 苁蓉精对PD模型小鼠脑神经细胞凋亡因子的影响(x±s，n=10，%)

注：*与正常对照组比较p<0.05；#与模型对照组比较p<0.05

结果说明：

caspase-3、Fas/ Fas-L、Bal-2/Bax是反应细胞凋亡的有关凋亡因子，其中caspase-3、Fas/ Fas-L、Bax增高、Bal-2降低表示凋亡增加。

（1）模型对照组Caspase-3显著高于正常对照组（p<0.05），苁蓉精组DA含量较模型组显著降低（p<0.05），与美多巴组无差异，但美多巴组和苁蓉精组仍较高于正常对照组（p<0.05）（主要原因是造模时注射了大量的MPTP，造成小鼠黒质-纹状体神经元大量凋亡）。 

（2）模型对照组Fas/ Fas-L显著高于正常对照组（p<0.05），苁蓉精组Fas/ Fas-L含量较模型组显著降低（p<0.05），与美多巴组无差异。但苁蓉精组仍较高于正常对照组（p<0.05）。 

（3）模型对照组Bal-2含量显著低于正常对照组（p<0.05），苁蓉精组Bal-2含量较模型组显著升高（p<0.05），与美多巴组无差异，叫正常对照组也显著增高（p<0.05）。（Bal-2是对抗凋亡的保护因子，增高表示在受到MPTP导致的凋亡下，经苁蓉精和美多巴治疗，神经细胞启动了自我保护。） 

（4）模型对照组Bax显著高于正常对照组（p<0.05），苁蓉精组Bax含量较模型组显著降低（p<0.05），与美多巴组无差异。但苁蓉精组仍较高于正常对照组（p<0.05）。

结论：苁蓉精能降低黑质-纹状体神经元内caspase-3、Fas/ Fas-L、Bax等凋亡因子的表达，增高Bal-2的表达。 

实施例8

苁蓉精对帕金森病（PD）模型大鼠黒质-纹状体多巴胺（DA）含量的影响

方法：

造模：将2-3月龄、体重为200-300g的SPF级Wistar大鼠大鼠，腹腔注射麻醉后固定于立体定位仪，参照大鼠脑图谱，确定黑质致密部(SNC)、中脑腹侧被盖(VTA)的坐标（SNC为前囟后5.2mm，矢状缝左侧1.8mm，颅骨表面下7.6mm；VTA为前囟后4.6mm，矢状缝左侧0.9mm，颅骨表面下7.4mm），钻颅后将6ul 6-OHDA(3g/L，溶于含0.2％抗坏血酸的生理盐水中)，注射速度为0.5ul/min，注射完毕留针5mi n再以1mm/min的速度缓慢拔出，明胶海绵覆盖钻孔，封闭伤口，笼中饲养。

4周后，用阿朴吗啡按0.25mg/kg腹腔注射，诱发大鼠向健侧旋转，记录30min内旋转次数，选210转/30min(7转/min)以上的动物为成功PD模型，可供后续试验之用。 

给药：选择造模成功大鼠随机分为模型对照组、苁蓉精组、美多巴组，每组10只，另取同月龄同品系大鼠10只作为正常对照组。正常对照组、模型对照组给予蒸馏水灌胃，苁蓉精组、美多巴组给予苁蓉精水煎液、美多巴水溶液灌胃，2次/天（上午8-10点1次，下午4-6点1次），连续给药2周。 

取材：给药结束后，快速断头取脑，冰浴下分离黒质-纹状体，立即－80℃冰箱内保存待测。高效液相色谱法检测多巴胺（DA）及其代谢产物高香草酸（HVA）、二羟苯乙酸（DOPAC)的含量。 

结果 

表4  各组模型大鼠用药后DA及其代谢产物的含量(x±s，n=10)

注：*与正常对照组比较p<0.05；#与模型对照组比较p<0.05

结果说明：

（1）模型对照组DA含量显著低于正常对照组（p<0.05），苁蓉精组、美多巴组DA含量较模型组显著升高（p<0.05），与正常对照组无显著差异。

（2）模型对照组HVA含量显著低于正常对照组（p<0.05），苁蓉精组、美多巴组HVA含量较模型组显著升高（p<0.05），与正常对照组无显著差异。 

（3）模型对照组DOPAC含量显著低于正常对照组（p<0.05），苁蓉精组DOPAC含量较模型组有所升高，与正常对照组、美多巴组无差异。 

（4）DA/HVA和DA/DOPAC比值反应了多巴胺的代谢情况，从上表中可见：DA/HVA各组大鼠多巴胺的代谢是基本一致的。而DA/DOPAC比值，模型对照组显著低于正常对照组（p<0.05），苁蓉精组、美多巴组较模型组显著升高（p<0.05），与正常对照组无显著差异。 

结论：苁蓉精能有效提高PD模型大鼠黒质-纹状体多巴胺DA含量。 

实施例9

药物的急性毒性试验

动物分组：SPF级昆明种小鼠40只，20-22g，雌雄各半。分为空白对照组20只和苁蓉精组20只。空白对照组常规饲养。苁蓉精组小鼠自由饮水，禁食12小时后灌服苁蓉精颗粒剂蒸馏水混悬液lOg/kg，间隔8小时，共2次，日累积量为20g/kg（相当于60kg的人每公斤体重日用量的600倍）。

上述给药24小时后（第3天）处死10只小鼠，观察以下指标： 

（1）对小鼠体重的影响，见表5。

（2）对血常规（红细胞、血红蛋白、白细胞、血小板）的影响，见表6。 

（3）对血液生化学指标（总蛋白、总胆红素、谷丙转氨酶、碱性磷酸酯酶、总胆固醇、血糖、尿素氮、肌苷）的影响，见表7。 

（4）对尿蛋白、尿红血球的影响，见表8。 

（5）对心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、脑、胸腺及子宫、睾丸的脏器系数的影响，见表9。上述脏器病理组织学检查未见明显的病理性组织改变。 

（6）其他反应。给药后产生的主要不良反应为活动减少、聚群，持续时间1-2小时（大约是药物在胃肠道消化时间），余无异常。动物无一例死亡。 

两组剩余小鼠常规饲养一周（第10天），小鼠活动正常，体重增加，无异常反应。 

表5 苁蓉精对小鼠体重的影响(X±SD，g) 

苁蓉精组与空白对照组比较无显著性差异(P＞0.05)。

表6 苁蓉精对小鼠血常规的影响(X±SD) (第3天 n=10；第10天 n=l0) 

苁蓉精组与空白对照组比较，血常规各项指标无显著性差异(P＞0.05)。

表7 苁蓉精对小鼠血液生化指标的影响(X±SD) (第3天 n=10；第10天 n=l0) 

苁蓉精组与空白对照组比较，生化指标均无显著性差异(P＞0.05)。

表8 苁蓉精对小鼠尿常规的影响(X±SD，mg/g) (第3天 n=10；第10天 n=l0) 

苁蓉精组和空白对照组均未检出尿蛋白、尿红血球。

表9 苁蓉精对小鼠主要脏器系数的影响(X±SD，mg/g) 

(第3天 n=10，第10天 n=l0。其中子宫第3天 n=5，第10天 n=5；睾丸第3天 n=5，第10天 n=5)

苁蓉精组与空白对照组比较，各脏器指数均无显著性差异(P＞0.05)。上述脏器病理组织学检查未见明显的病理性组织改变。

实施例10

动物的慢性毒性试验

动物分组：选用8～9周、体重为250g± 的SPF级SD大鼠80只，雌雄各半，分为苁蓉精低剂量组、中剂量组、高剂量组和空白对照组，每组20只大鼠。苁蓉精低剂量组、中剂量组、高剂量组分别灌胃给予苁蓉精颗粒剂蒸馏水混悬液0.324，3.24，8.1g/kg（分别相当于人常用量的1、10和25倍，记为苁蓉精小剂量组、中剂量组、大剂量组），每天2次，连续30天(第30天)；停药后再常规饲养15天（第45天），观察药物是否有延迟性毒性反应。空白对照组常规饲养。

观察指标： 

（1）对大鼠体重的影响，见表10。

（2）对血常规（红细胞、血红蛋白、白细胞、血小板）的影响，见表11。 

（3）对血糖、总胆固醇、肝肾功能（血糖、总胆固醇、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素氮、肌苷）的影响，见表12。 

（4）对尿蛋白、尿红血球的影响，见表13。 

（5）对心、肝、脾、肺、肾、脑、子宫、睾丸等脏器系数的影响，见表14。 

上述脏器病理组织学检查未见明显的病理性组织改变。 

（6）其他反应。无明显不良影响，用药及停药期间生长良好，饮食饮水，排泄及对外界反应等精神行为活动正常，未见毒性。 

表10 苁蓉精对大鼠体重的影响(X±SD，g) (初始n=20；第30天 n=20；第45天 n=l0) 

苁蓉精各剂量组与空白对照组比较，体重变化无显著性差异(P>0.05)。

表11 苁蓉精对大鼠血常规的影响(X±SD) (第30天 n=10；第45天 n=l0) 

苁蓉精各剂量组与空白对照组比较，血常规各项指标均无显著性差异(P＞0.05)。

表12 苁蓉精对大鼠对血糖、总胆固醇、肝肾功能的影响(X±SD) (第30天 n=10；第45天 n=l0) 

苁蓉精各剂量组与空白对照组比较，血糖、总胆固醇、肝功能、肾功能等指标均无显著性差异(P＞0.05)。

表13 苁蓉精对大鼠尿常规的影响(X±SD，mg/g) (第30天 n=10；第45天 n=l0) 

苁蓉精各剂量组和空白对照组均未检出尿蛋白、尿红血球。

表14 苁蓉精对大鼠主要脏器系数的影响(X±SD，mg/g) (第30天 n=10；第45天 n=l0) 

苁蓉精各剂量组与空白对照组比较，各脏器指数均无显著性差异(P＞0.05)。上述脏器病理组织学检查未见明显的病理性组织改变。

实施例11

张某，男，54岁。于2009年3月14日首次就诊，主诉：上肢震颤一年余。病史：2008年初开始发病，症见左上肢震颤，不能控制，以伸手或取物时明显。2008年11月17日入住某三甲医院，确诊为帕金森综合征。在该医院予“金刚烷胺0.1 bid”治疗。药后数日内稍有好转，但1个月后症状波动，震颤程度同未服药时。改处方为“美多巴 125mg qd”治疗，第一个月效果明显，震颤明显好转。但第2个月开始症状又有所反复，患者及家属要求增加中药治疗。现主要症状：左上肢震颤，不能自主，尤以有目的的左上肢活动时明显。腰酸膝软，纳可寐安，二便调。舌淡红，苔薄白，尺脉重按无力。中医诊断：颤证；中医证型：肾精亏虚，经脉失养；西医诊断：帕金森病。治法：滋肾填精，充养经脉；方选苁蓉精。药后一周症状改善明显，震颤明显减轻，腰酸膝软症状减轻。继续以上治疗，病情稳定。

实施例12

陈某，女，72岁。2009年07月17日初诊。1年前出现四肢震颤，以右上肢为重，动作迟缓，尤以开始起步时为困难。检体：神清，表情稍呆板，颜面皮脂溢出增多呈油性，对答尚正常。行走、动作迟缓，步行来院。双上肢静止性震颤，双手平伸时震颤加重，以右上肢为明显，右手掌呈“挫丸样动作”。右前臂有“路标”现象，活动时稍感齿轮样强直。写字时出现“写字过小症”，行走时出现“慌张步态”。近5天症状加剧，偶见喝水呛咳，口干，纳可寐安，二便正常。舌暗红，裂纹舌苔剥，脉革。考虑西医诊断为“帕金森病”，中医诊断：颤证，证属阴阳两虚。治以补肾阳，滋肾阴。方用苁蓉精7剂，日1剂，水煎2次，每次150ml温服。7天后复诊：服药后自觉舒适，但仍时发四肢静止性震颤，纳可寐安，二便调。舌暗红，裂纹舌苔剥，脉革。续以前方。随诊半年，症状明显改善。

实施例13

患者男，56岁 初诊时间：2006年。

主诉：静止性震颤，伴周身僵直2个多月。 

现病史: 患者，男，56岁，因“静止性震颤，伴周身僵直2个多月”入院。近2个月来出现震颤，以下颌、四肢为著；精神紧张、饥饿、寒冷时加剧，周身僵硬；无头痛、头晕，无恶心、呕吐。因患者年龄在60岁以下并且以“震颤”为主要症状，故在本院门诊首选安坦片治疗。起初日剂量为6mg/d。随着情进展，剂量日益增加，2周后日剂量加至20mg。此时虽然震颤症状能够控制，但是出现胸闷、干、心悸、视物模糊、腹胀、便秘，考虑“慢性抗胆碱药物(安坦)中毒”。遂停用安坦，予美多巴片(每片含左旋多巴0.2g，盐酸苄丝肼57mg)1/2片，3次/d。服药1周后症状不能控制，加量为4次/d。2周后症状有所加重，美多巴每周增加1/2片剂量，并以日量3片维持，3周后症状又不能控制。患者及家属，考虑西药的副作用，拒绝继续服用西药，要求改为中药治疗。现主要症状：下颌、双上肢震颤，不能自主，不能持物，写字有“小写症”。纳食尚可，夜寐欠佳，二便调。舌淡苔白，脉沉。 

诊断：帕金森病。证属肾精亏虚，虚风内动。 

治疗：治法：滋肾填精，养阴熄风；方选苁蓉精。药后一周症状改善，震颤减轻。继续苁蓉精中药治疗半年，病情稳定。 

实施例14

患者男，58岁，教员。初诊时间：2008年。主诉：右手不自主震颤3年余。

现病史：患者于2008年4月参加半年度体检时，主诉右手不自主震颤半年余，安静时震颤明显，随意运动可减轻，紧张时加剧，入睡后消失，可短时控制，症状日渐加重。无头痛、头晕及四肢麻木，无发音及吞咽困难。患者既往史、个人史、家族史无特殊。入院查体未发现神经系统阳性体征。辅助检查：单光子发射计算机体层扫描多巴胺显像结果分析：双侧大脑基底节变小，形状欠则，双不对称，放射性摄取减少、欠均匀，可见异常放射性分布稀疏。印象：多巴胺运转蛋白功能显像符合帕金森病(Parkinson’S disease，PD)的核素影像学表现。 

诊断：帕金森病。 

治疗：服用中药苁蓉精，半个月后右手震颤明显减少。 

实施例15

患者男性，73岁，初诊时间：2009年

主诉：行走不稳、言语不清4年，加重1年。

现病史：患者男性,73岁, 因“行走不稳、言语不清4年，加重1年”于2009年入院。患者于2005年出现走路不稳、动作迟缓、口齿不清，同时还伴有听力下降等症状而引起家人注意。在某县城医院诊断为脑萎缩，主要用药是银杏叶提取物和维生素药物。经过1年的服药和治疗，患者没有好转，而且病情有加重迹象。走路步子变小，走路脚后跟拖地，不能独立行走，需他人搀扶。2008年，患者在某三甲医院做了脑部核磁共振，除脑部生理性萎缩外，没有发现其他异常，怀疑是小脑共济失调。用药有营养神经药物胞二磷胆碱和生物制剂脑活索及维生素B12类等，经1年治疗观察，无明显效果，遂到我院治疗。患者既往史、个人史、家族史无特殊。入院体检: 患者症状如前所述，患者目光呆滞，走路时有小碎步和前倾现象，手指偶有搓捻现象，并有写字凌乱难辨且越来越小等现象。 

诊断：帕金森病。 

治疗：苁蓉精水煎，2次/天，150ml/次。4天后有好转迹象，7天后从沙发上坐起时躯体前倾症状减轻。1个月后，可以自行下地行走。 

以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。 

Claims (7)

1.一种改善帕金森病脑神经递质代谢的中药复方制剂，其特征在于：所述的中药复方制剂是由下列重量份配比的原料制成的：肉苁蓉5-15份、淫羊藿5-15份、制黄精8-18份、冰片0.05-0.5份；

炮制过程如下：

（1）按原料配比称取肉苁蓉、淫羊藿、制黄精，加蒸馏水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，过滤，滤液浓缩至50℃时的相对密度为1.20；所述的蒸馏水的每次加入量是按原料体积的10倍来计量的；

（2）浓缩液中加质量分数95%的乙醇溶液使浓缩液中的含醇量为60％，静置24-48h，取上清液，回收乙醇后浓缩成稠膏；

（3）在步骤（2）制备的稠膏中加计量好的冰片，干燥即得中药复方制剂。

2.根据权利要求1所述的改善帕金森病脑神经递质代谢的中药复方制剂，其特征在于：所述的中药复方制剂的原料的重量份配比如下：肉苁蓉7-12份、淫羊藿7-12份、制黄精10-15份、冰片0.1-0.3份。

3.根据权利要求2所述的改善帕金森病脑神经递质代谢的中药复方制剂，其特征在于：所述的中药复方制剂的原料的重量份配比如下：肉苁蓉10份、淫羊藿10份、制黄精12份、冰片0.1份。

4.根据权利要求1所述的改善帕金森病脑神经递质代谢的中药复方制剂，其特征在于：制剂形式包括散剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂、口服液。

5.根据权利要求1所述的改善帕金森病脑神经递质代谢的中药复方制剂，其特征在于：制剂形式包括冲剂。

6.根据权利要求4所述的改善帕金森病脑神经递质代谢的中药复方制剂，其特征在于：所述的丸剂包括水丸、蜜丸。

7.根据权利要求4所述的改善帕金森病脑神经递质代谢的中药复方制剂，其特征在于：所述的丸剂包括水蜜丸。

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