CN102331491A - 封闭板稳定剂 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种封闭板稳定剂，每100ml水中，含有：蛋白0.1～3g，氨基酸3～20g，有机聚合物0.01～1g，非离子型表面活性剂0.01～0.05ml，防腐剂0.01～0.1g。本发明的封闭稳定剂正是考虑包被于固定相的抗原或抗体容易失活的特点而研究设计的。本发明的封闭稳定剂配方其组成不仅含有能有效封闭板孔上多余位点的封闭组分，而且还含有多种有效稳定抗原或抗体的有机和无机组分。因此，可将封闭和稳定这两个目的通过一步操作有机结合的在一起。本发明的微孔板封闭稳定剂能用于以微孔板作为固定相的酶联免疫分析、化学发光免疫分析、时间分辨免疫荧光分析等免疫学检测方法之中，能有效的稳定板上包被的抗原或抗体的活性。

Description

封闭板稳定剂
技术领域
本发明涉及一种用于微孔板的封闭板稳定剂。 
背景技术
免疫检测技术在当今生物医学领域内得到了广泛的应用，并已经在临床，科学研究，环境及卫生检测，法医鉴定等诸多部门中成为必备的常规技术手段，发挥着不可替代的作用，因此有关的检测产品也就具有巨大的市场。免疫检测技术包括酶联免疫分析、化学发光免疫分析、时间分辨免疫荧光分析等，这些检测技术所用的固定相大部分是微孔板。抗原或抗体包被于微孔板固定相后，由于被动吸附或藕联以及运输和长期保存的过程中，抗原或抗体的结构可能发生改变，甚至部分变性，造成板孔上的抗原或抗体活性逐渐丧失，给试剂盒的临床和实验室应用造成很大困难。另一方面，临床诊断的要求不断提高，这就要求诊断试剂的质量稳定，这样可以防止因质量问题而导致误诊。因此对于诊断试剂的稳定性，已列入免疫检测试剂盒研发过程中最主要关注的问题。而作为固定相的微孔板是免疫检测试剂盒的关键组成之一。因此，微孔板的稳定性优劣至关重要。
目前解决微孔板的稳定性问题的方法有两种：一种是将封闭工艺和稳定板孔的操作工艺分两步，即先封闭，待封闭结束后再加稳定剂稳定板孔；另一种是将封闭工艺和稳定板孔工艺在一步同时完成，既能达到封闭的效果，也能起到稳定板孔的作用，较为方便。但不论是一步还是两步，目前使用的稳定剂配方是高度的商业机密，且大多价格较高。因此寻找一种价格低廉，既能起到封闭又能稳定板孔的作用的微孔板封闭稳定剂来稳定包被抗原或抗体的活性就显得非常重要了。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种能提高微孔板稳定性和延长微孔板保存期的封闭稳定剂。
本发明的目的通过下述技术方案来实现：
一种用于微孔板的封闭稳定剂，每100ml水中，含有：
蛋白                   0.1～3g
氨基酸                  3～20g
有机聚合物             0.01～1g
非离子型表面活性剂     0.01～0.05ml
防腐剂                0.01～0.1g
调整pH7.0。
在上述封闭稳定剂中，所述蛋白优选为牛血清白蛋白、明胶或酪蛋白。
在上述封闭稳定剂中，所述氨基酸为胱氨酸或亮氨酸。
在上述封闭稳定剂中，所述防腐剂为Germall Ⅱ（重氮烷基咪唑脲）、ProClin 300、叠氮钠或硫酸庆大霉素。
在上述封闭稳定剂中，所述有机聚合物为PVP、GAFQUAT 755N或PEG。
在上述封闭稳定剂中，所述非离子型表面活性剂为Tween-20、Tween-40、Tween-80或Triton X-100。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：本发明的封闭稳定剂正是考虑包被于固定相的抗原或抗体容易失活的特点而研究设计的。本发明的封闭稳定剂配方其组成不仅含有能有效封闭板孔上多余位点的封闭组分，而且还含有多种有效稳定抗原或抗体的有机和无机组分。因此，可将封闭和稳定这两个目的通过一步操作有机结合的在一起。本发明的微孔板封闭稳定剂能用于以微孔板作为固定相的酶联免疫分析、化学发光免疫分析、时间分辨免疫荧光分析等免疫学检测方法之中，能有效的稳定板上包被的抗原或抗体的活性。
具体实施方式
下面结合实施例及附表对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1
BSA                0.2g
PVP-40             0.5g
胱氨酸               8g
Tween-20           0.02ml
叠氮钠            0.05g
将上述的组分溶于90ml水中，用浓HCl调整pH值到7.0，定容至100ml。
取上述封闭稳定剂和0.5％BSA溶液（此作为对照）分别加入到包被有抗癌胚抗原（CEA）抗体的微孔板中，每孔加入280微升，然后室温孵育2小时，后将微孔板中的液体全部倒出并将板拍干，置于干燥箱中晾干后进行真空包装。将微孔板分别置于37℃和60℃ 7天，以0天的微孔板作为对照，以时间分辨免疫荧光法检测并计算微孔板置于37℃和60℃7天后的残余活性。
 表1   37℃和60℃7天后微孔板中CEA抗体的残余活性
Figure 2011101655651100002DEST_PATH_IMAGE001
实施例2
BSA                   0.3g
PVP-40                0.5g
亮氨酸                7.5g
Tween-20              0.01ml
ProClin 300            0.05g
将上述的组分含量溶于90ml水中，用浓NaOH溶液调整pH值到7.0，定容至100ml。
取上述封闭板稳定剂和0.5％BSA溶液（此作为对照）分别加入到包被有乙肝表面抗原（HBsAg）的微孔板中，每孔加入280微升，然后室温孵育2小时，后将微孔板中的液体全部倒出并将板拍干，置于干燥箱中晾干后进行真空包装。将微孔板分别置于37℃和60℃ 7天，以0天的微孔板作为对照，以时间分辨免疫荧光法检测并计算微孔板置于37℃和60℃7天后的残余活性。
 表2  37℃和60℃7天后微孔板中HBsAg的残余活性
Figure 2011101655651100002DEST_PATH_IMAGE002

Claims (6)

1.一种封闭板稳定剂，其特征在于每100ml水中，含有：
蛋白                   0.1～3g
氨基酸                  3～20g
有机聚合物             0.01～1g
非离子型表面活性剂     0.01～0.05ml
防腐剂                0.01～0.1g
调整pH7.0。
2.根据权利要求1所述的封闭板稳定剂，其特征在于，所述蛋白为牛血清白蛋白、明胶或酪蛋白。
3.根据权利要求1所述的封闭板稳定剂，其特征在于，所述氨基酸为胱氨酸或亮氨酸。
4.根据权利要求1所述的封闭板稳定剂，其特征在于，所述防腐剂为
Germall Ⅱ（重氮烷基咪唑脲）、ProClin 300、叠氮钠或硫酸庆大霉素。
5.根据权利要求1所述的封闭板稳定剂，其特征在于，所述有机聚合物为PVP、GAFQUAT 755N或PEG。
6.根据权利要求1所述的封闭板稳定剂，其特征在于，所述非离子型表
面活性剂为Tween-20、Tween-40、Tween-80或Triton X-100。
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PB01 Publication
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

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