CN102321090A - 一种能抑制肿瘤血管生长的色原烯类化合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及生物制药技术领域，具体涉及一种能抑制肿瘤血管生长的色原烯类化合物及其制备方法。本发明的目的在于，提供一种能抑制肿瘤血管生长的色原烯类化合物及其制备方法，以克服现有技术存在的毒副作用高和体内靶向性差的问题。本发明提供的能抑制肿瘤血管生长的色原烯类化合物的结构具体包括如下通式：

本发明的优点是：本发明合成的化合物具有抑制肿瘤血管生长的作用，是一种可用于研发治疗或者预防细胞恶性增长疾病或异常的小分子化合物。在治疗疾病的过程中，可达到最大限度降低临床长期用药引发的诸如血栓、血压过高或过低等众多血管问题。

Description

一种能抑制肿瘤血管生长的色原烯类化合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及生物制药技术领域，具体涉及一种能抑制肿瘤血管生长的色原烯类化合物及其制备方法。

背景技术

关于肿瘤血管生成研究近年来进展很快，并取得了很多有价值的研究成果，研究人员针对多种血管生成因子和血管内皮细胞标志物设计并合成了很多抗肿瘤血管生成药物，并有多种药物已进入了临床研究阶段，但由于其毒副作用，仅有少数被应用于个别肿瘤的临床治疗。

 VEGFR2在血管生成过程中的重要功能

迄今为止，研究人员已经研究发现了在肿瘤血管生长过程中发挥重要作用的VEGF受体相关的两种信号途径：酪氨酸激酶受体和非酪氨酸激酶受体。前者包括血管内皮生长因子受体-1（VEGFR1，Flt-1)、血管内皮生长因子受体-2（VEGFR2，KDR）及血管内皮生长因子受体-3（VEGFR3），后者包括肝素样分子、血小板源性生长因子受体、神经纤毛蛋白-1受体和神经纤毛蛋白2受体。 研究证实，VEGFR2在VEGF的信号通路及血管内皮生成过程中起主导作用。 因此，VEGFR2成为当前抗肿瘤血管生成研究中的热点。VEGFR2是VEGF的主要功能受体，人的VEGFR2称为KDR（kinase inserted domaincontainingreceptor），鼠的VEGFR2称为flk-1（fetal liver kinase-l）。VEGFR2作为一种酪氨酸激酶受体，由一个胞外结构域，一个跨膜结构域和一个胞质内酪氨酸激酶结构域组成，其胞外结构域含7个免疫球蛋白样袢。研究证实，VEGFR2胞外段是VEGFR2与其配体VEGF相结合的部位，VEGFR2胞外第1个袢是与VEGF结合的必要部位，第2-3袢是与VEGF紧密结合的主要部位，受体通过第4个Ig样区形成同源二聚体的活性形式，而第5-7袢与VEGF结合的关系不密切。VEGFR2与VEGF结合，形成二聚体及酪氨酸发生自身磷酸化，激活并将细胞膜/细胞质激酶级联反应信号传递到细胞核，可引发内皮细胞的一系列变化，包括钙离子内流、IP3的增加、VonWillebrand因子的释放以及胎儿血管内皮金属蛋白酶、凝血酶的产生，诱导整合素的表达，调节与纤维蛋白溶解和凝固相关的因子在内皮上的表达，如Vwf、组织因子。这些级联反应通过抗凋亡等机制调节内皮细胞的存活，促进新生血管形成并维持其完整性。同时，VEGF刺激VEGFR2，介导肿瘤血管内皮细胞DNA合成和增殖。VEGF诱导内皮细胞的增殖、迁移。此外，VEGFR2还参与由VEGF介导的血管通透性改变。

 VEGFR2在肿瘤血管生成过程中的重要功能及临床应用

肿瘤特有的微环境具有刺激VEGF和VEGFR2在肿瘤细胞和肿瘤周围内皮细胞特异性表达的功能，使肿瘤较正常组织中VEGF和VEGFR2的表达显著增加。而很多抗肿瘤药物如奥曲肽、干扰素、中草药及其衍生物等也具有抑制VEGF和抗血管生成的作用。这提示，通过阻断VEGF/VEGFR2信号转导通路抑制肿瘤新生血管生成是一种有效的抗肿瘤治疗方案。

由于VEGFR2为酪氨酸激酶受体，当VEGF与VEGFR2结合后，受体首先自身磷酸化，继而激活磷脂酰肌醇代谢的信号转导通路和丝裂原活化的蛋白激酶，表现出VEGF的有丝分裂原特性，诱导血管内皮细胞的增殖。因此，通过抑制酪氨酸激酶的活性来阻断肿瘤血管生成因子的信号传导途径成为人们研究的热点，而酪氨酸激酶受体抑制物也相继进入临床实验。由Sugen公司开发的SU5416是第一个进行临床试验的VEGFR激酶抑制剂，是针对KDR/Flk-1受体酪氨酸激酶信号途径的小分子抑制物，在Ⅰ/Ⅱ期临床试验中分别与顺铂和健择联合。 但由于该药易出现严重血栓栓塞并发症，导致临床试验终止。随后， Sugen公司开发了另一种以KDR/Flk-1，PDGF受体和FGF受体为靶点的广泛RTK抑制剂SU6668。在临床试验中每天一次的剂量显示具有良好的耐受性，但每天两次的剂量却发生严重不良反应如乏力、呼吸困难、胸痛、心包积液, 且没有显示出临床疗效。此后新一代广谱的口服酪氨酸激酶抑制剂SU11248问世，它能够抑制VEGF，PDGF，c-Kit和Flt-3的激酶活性，并在临床前的模型中显示出显著疗效，目前已进入Ⅲ期临床试验。此外，在VEGF/VEGFR2信号转导通路中的关键蛋白质如接头蛋白PLC-γ，Sck及信号分子PI3K，p38MAPK和DAG等在肿瘤血管生成中也发挥重要作用。阻断肿瘤组织中这些分子的功能可下调血管内皮细胞体外的血管生成作用，有可能起到抗肿瘤效果。

可是在抗肿瘤血管生成药物临床试验中却遇到了一些问题。其中最为突出的是动物试验与临床试验结果的差异以及药物使用时的毒副作用。

第一、动物试验与临床试验的差异：如SU5416在动物试验和早期临床试验效果很好，当进入Ⅲ期临床试验时效果很差；Angiostatin和Endostatin也一样，动物试验表明它们对肿瘤新生血管生成有强烈抑制作用，但后期临床试验都失败了。其中的主要原因是，在动物试验中，主要应用实验性肿瘤，这种肿瘤主要生长于皮下无血管间隙组织内，为了进一步生长，这些肿瘤自身诱导新生毛细血管。因此，这一类肿瘤对抗血管形成的治疗较为敏感。而临床试验中的病例大多为转移或者本身具有较为丰富血管的肿瘤，所以其中相当一部分患者体内的肿瘤组织对药物的治疗作用并未达到预期效果。

第二、毒副作用：抗血管药物毒副作用主要表现为：形成血栓、出血、生殖/排卵/妊娠功能障碍、伤口愈合延迟等其他多种毒副作用。例如，SU5416在临床试验过程中发现19个病人中有8个产生血栓反应；Iressa在治疗非小细胞肺癌Ⅱ期临床试验中，疗效很好，但在美国有0.3%的病人合并严重的肺部疾病，其中大约1/3的病人因此死亡，而在日本有2%的病人合并严重的肺部疾病。其中的主要原因是大多血管生成抑制因子会阻碍新生血管的形成，接受该类药物治疗的患者如果出现伤口，就有可能因为伤口愈合问题而产生感染。也正是由于这个原因，妊娠期妇女不能使用该药物，因为这会破坏胎儿血管的形成。此外，长时间使用该类药物会导致诸如血栓、血压过高或过低等众多血管问题。

综上所述，筛选一种毒副作用少，且可以特异性结合血管生长因子受体达到抑制肿瘤血管生长作用的药物是目前临床肿瘤治疗研究领域的研究热点。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种能抑制肿瘤血管生长的色原烯类化合物及其制备方法，以克服现有技术存在的毒副作用高和体内靶向性差的问题。

本发明是这样实现的： 

本发明所述的一类新型抑制肿瘤血管生长的色原烯类化合物的结构具体包括如下通式I：

（I）

或其几何异构体、对映异构体、非对应异构体、外消旋物、药学上可接受的盐、前体药物及其溶剂化物，其中，R1-R7是分别独立的选自由N、Cl、O或者S所组成的组中，其中，R也可以是独立的选自由氢、羟基、取代的羟基、氨基、取代的氨基、卤素、取代的烷氧基或者未被取代的烷氧基、取代的烷氨基或者未被取代的烷氨基、取代的二烷氨基或者未被取代的二烷氨基、取代的硫醇或者未被取代的硫醇、取代的羰基、磺酰、酰基、脂肪族基团和取代的脂肪族基团所组成的组中；取代的烷基或者未被取代的烷基、取代的烯基或者未被取代的烯基、取代的炔基或者未被取代的炔基、芳烷基、芳基烯基、芳基炔基、杂芳基烷基、杂芳基烯基、杂芳基炔基、杂环基芳基、杂环基烯基、杂环基炔基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基、环烯基、烷基芳基烷基、烷基芳基烯基、烷基芳基炔基、烯基芳基烷基、烯基芳基烯基、烯基芳基炔基、炔基芳基烷基、炔基芳基烯基、炔基芳基炔基、烷基杂芳基烷基、烷基杂芳基烯基、烷基杂芳基炔基、烯基杂芳基烷基、烯基杂芳基烯基、烯基杂芳基炔基、炔基杂芳基烷基、炔基杂芳基烯基、炔基杂芳基炔基、烷基杂环基烷基、烷基杂环基烯基、烷基杂环基炔基、烯基杂环基烷基烯基杂环基烯基、烯基杂环基炔基、炔基杂环基烷基、炔基杂环基烯基、或者炔基杂环基炔基所组成的组中，其中，一个或者一个以上亚甲基可以被O、S、S(O)、C(O)、取代的芳基或者未被取代的芳基、取代的杂芳基或者未被取代的杂芳基、取代的杂环基或者未被取代的杂环基所间隔或者终止。其中，R1、R5、R6或R7可以为缺失。

上述能抑制肿瘤血管生长的色原烯类化合物，其结构式如下：

或者它的几何异构体、对映异构体、非对应异构体、外消旋物、药学上可接受的盐、前体药物和溶剂化物。

上述能抑制肿瘤血管生长的色原烯类化合物，结构式如下：

或者它的几何异构体、对映异构体、非对应异构体、外消旋物、药学上可接受的盐、前体药物和溶剂化物。

上述能抑制肿瘤血管生长的药物组合物，包括作为活性成分的化合物和药学上可接受的载体。

与现有技术相比，本发明的优点是：本发明合成的化合物具有抑制肿瘤血管生长的作用，是一种可用于研发治疗或者预防细胞恶性增长疾病或异常的小分子化合物。在治疗疾病的过程中，可以较低浓度有效作用于血管形成过程，且杀伤血管内皮细胞的能力较弱，不会产生广泛的血管生成抑制作用，而阻碍正常新生血管形成，患者不易因为伤口愈合问题而产生继发感染等毒副反应。从而达到最大限度降低临床长期用药引发的诸如血栓、血压过高或过低等众多血管问题。

附图说明

图1是化合物抑制人胎脐静脉内皮细胞小管形成实验；

图2是化合物1-5的体外细胞杀伤IC50实验。

具体实施方式

该色原烯类化合物，是根据VEGFR2的空间结构模拟筛选出的可特异性嵌合小分子化合物结构，设计和制备成具有不同替代基团的系列化合物：苯基色原酮吲哚及其相关衍生物（如：3,9-二羟基色原酮[4,3-b]吲哚等）。

本发明所述苯基色原酮吲哚及其相关衍生物可以通过任意已知可以应用的方法来制备，这些方法可以用于制备相关的化合物。其中，某些适用于临床治疗的中间体的制备方法。必需的起始材料可以通过有机化学的标准方法获得。这里描述了这种起始材料的制备方法，并提供了非限制性例子。作为选择，必需的起始材料可以通过与本领域普通技术人员的理解相似的方法来获得。

根据以下具有代表性的合成方案，可以更好的理解本发明化合物的合成方法。以下方案只是描述了本发明中所述化合物可能的制备方法，仅起到图解作用，并不对本发明范围进行限制。该系列化合物及其衍生物，采用液相有机合成的方法制备，合成路线如下：

 方案1

方案2

 

方案3

方案4

方案5

方案6

本发明以一种或者几种化合物的成分，进行盐化、溶剂化或至少使用一种药用载体进行药物制剂的制备。该色原烯类化合物的应用，包括使用一种或多种有效剂量的化合物对目的细胞或患者进行治疗和研究。

本发明中的化合物，包括化合物本身及其相关盐化，溶剂化，水化，多形变体或前体药物。术语“药用盐化”指由任何一种实验体化合物制备成的盐，其含有酸性功能基团，如羧酸功能基团和一种药学中可接受的有机或无机碱。其中适用的碱包括但并不局限于碱性金属的羟基（如：钠，钾，锂），碱土金属的羟基（如：钙和镁），其他金属的羟基（如：铝和锌），铵和有机胺（如：非替代或羟基替代的单，双或三烷基胺，双环己胺，三丁基胺，吡啶，N-甲基，N-乙胺，二乙胺，三乙胺），单,双或三（2-羟基低烷胺）（如：单,双或三（2-羟乙基）胺），2-羟基-叔-氨基丁烷或3-（羟甲基）甲胺，N,N-2-低烷基-N-（羟基低烷基）-胺（如：N,N-二甲基-N-（2-羟乙基）胺或3-（2-羟乙基）胺），N-甲基-D-葡萄糖胺以及氨基酸（如：精氨酸，赖氨酸及类似物）。术语“药用盐”指以前面所述任一种具有基本功能基团的实验体化合物制备而成的盐（如：一个氨基功能基团和一个药用有机或无机酸，其中适当的酸包括：硫氢酸，柠檬酸，乙酸，乙二酸，盐酸，溴化氢，碘化氢，硝酸，磷酸，乳酸，水杨酸，酒石酸，抗坏血酸，丁二酸，马来酸，苯磺酸，富马酸，葡糖酸，葡糖糖醛酸，甲酸，苯甲酸，谷氨酸，甲磺酸，乙磺酸和P-甲苯磺酸）。

这些术语和专有名词（例如：烃基，烯基，炔基，杂烷基，芳香基，杂环芳香基等）的解释可以从教材或者以前的公知技术中获得（例如：美国专利申请20080306130）。

本发明可用于研发治疗或者预防细胞恶性增长疾病或异常的新型小分子化合物。该化合物可应用于易发生或者患不良细胞增殖疾病或细胞异常的肿瘤患者的治疗研究，其首选应用是抗肿瘤治疗研究，其中包括使用一种或多种上述的化合物，单一或混合用于抗肿瘤治疗研究（恶性肿瘤包括实体瘤和微转移肿瘤）。

本发明还包括在治疗或预防研究领域中相关新型小分子化合物对患者体内标志物或者诊断指标的变化影响（这些指标的变化包括：出现，消失，增加和减少）。其中标志物和检测指标包括（肿瘤，炎症和免疫相关异常状态，逆转录病毒的感染（如：HIV感染，HIV复制，病毒载量或者HIV感染标志物的表达））。更重要的是，通过这些评估可以为早期治疗研究的开展提供依据。如上所述，本发明中的方法包括了：（1）采集和分析样本。样本可以是细胞，遗传物质，组织或体液（例如：血液，血浆和唾液等）。（2）将样本的分析结果报告给个体或者其他卫生保健专家。（3）提供相关疾病及症状的治疗研究方法。

本发明中所说的个体和患者可以互换。其中的个体和群体主要指动物，特别是哺乳动物，包括灵长类和非灵长类（例如：猴，猿或人），尤其指人。具体来讲，个体是一个免疫缺损或免疫抑制的哺乳动物，以人为主（例如：HIV感染患者）。另一种情况，个体是具有不良细胞（特别是肿瘤细胞）增殖的哺乳动物，以肿瘤患者为主。本发明可应用于多种前期药物的研发：以一种或多种化合物的有效剂量在需要研究的细胞或个体内发挥作用。其中个体包括哺乳动物，如灵长类，特别是人。其中的方法包括：个体（已发现的需要研究的个体）应用前面所述一种化合物或多种化合物的有效剂量进行研究。其特征在于，研究个体的鉴别可由个体或卫生保健专家通过主观（选择）或客观（例如：通过诊断或检测方法测试）进行判断。

本发明中的化合物，可以使用单一或混合的方法与其他治疗药物联合研究开发新的治疗策略。该化合物或混合物可作为药物制剂的成分与传统赋形剂混合（例如：药用有机或无机载体物质）用于口服，肠外，肠内或局部应用。该赋形剂不会与活性化合物产生有害反应，也不会给受体造成有害反应。其中，适当的药用载体包括但不局限于水，氯化钠溶液，酒精，植物油，聚乙二醇，凝胶，乳糖，直链淀粉，硬脂酸镁，滑石粉，硅酸，粘性石蜡，香精，脂肪酸甘油一脂和甘油二脂，脂肪酸脂，羟甲基纤维素，聚乙烯吡咯烷酮等。药物的制备过程可进行灭菌。如有需要，该化合物可以与辅助药物混合（例如：润滑剂，防腐剂，稳定剂，湿润剂，乳化剂，可用于调整渗透压的盐，缓冲液，颜色，香料和/或芳香族物质，以及与活性化合物不发生有害反应的类似物）。

根据所使用的不同活性化合物的特点，尤其是实验体的化合物成分，使用方法以及给药途径等调整应用剂量。根据前期资料和指导方案，按照常规剂量的设定可以确定本发明中最佳用药频率和方案。同时，经过参考《Remington制药科学》中的内容，从总体上确定本发明中所述的一种或多种化合物的适当有效剂量（特别是使用多种化合物时）的范围为0.01-100mg/kg受试者体重/天，较佳范围为0.01-20mg/kg受试者体重/天，最佳范围为0.05-4mg/kg受试者体重/天。最低剂量为0.01mg/kg/天到90mg/kg/天之间的任意剂量，最高剂量为1mg/kg/天到100mg/kg/天之间的任意剂量（例如：0.5mg/kg/天和2mg/kg/天，5mg/kg/天和20mg/kg/天）。其中，最佳剂量每天使用一次或亚剂量每天使用多次（例如：2-4次亚剂量）适当间隔或以其他适当进度进行治疗研究。这种亚剂量使用时可作为一个单位剂量，例如每单位剂量含有0.05-10mg的本发明所述化合物，最低剂量为0.05mg/天到400mg/天之间的任意剂量；最高剂量为1mg/天到500mg/天之间的任意剂量（例如：5mg/天和100mg/天，150mg/天和500mg/天）。

本发明中所描述的药用衍生物或前体药物指：任何可药用的盐、酯、酯类盐或其他本发明中化合物的衍生物。应用于受体时可直接或间接提供本发明中所述的活性化合物。其中，当该化合物及其衍生物可能具有研究开发治疗肿瘤的潜在特性应用于哺乳动物（例如：通过口服化合物）治疗研究时因为具备更易于吸收入血或增加母体化合物传递入生物学屏障（例如：大脑和中枢神经系统）等特点，而增加本发明中所述化合物的生物利用度的衍生物和前体化合物及其衍生物是本发明的重点内容。好的前体化合物及其衍生物是指在本发明所述的实验体结构基础上附加一个基团后可以增加化合物及其衍生物的水溶性或通过消化道粘膜主动转运的衍生物。

下面将给出具体的实施例，使本发明的化合物和方法可以被更好的理解。这里的实施例只起到示例作用，并不作为对本发明范围的限制。对本领域技术人员来讲，这里公开的实施方案的多种变化和修饰都是显而易见的，在不脱离本发明核心技术和所附权利要求书要求保护的范围的情况下，这些变化和修饰包括，但不仅限于，关于化学结构的修饰、关于取代基的修饰、关于衍生物的修饰、关于本发明制剂和／或方法的修饰。

实施例1

吲哚6（11H）色烯（chromeno[4,3-b]indol-6(11H)-one）的制备

将2-羟基苯甲酸甲酯4.4克，和4.0克苯乙酸溶于20ML吡啶中，搅拌下，加入2ml POCl₃，室温反应lh，用冰冷的6M HCl酸化，沉淀析出，过滤，固体再用5％NaCO₃溶液，饱和盐水洗涤后，用乙醇重结晶，得2-（2苯乙酸基）苯甲酸甲酯（methyl 2-(2-phenyl acetoxy)benzoate）共5.7g，收率72.9％。

将0.5克碾成粉末状的KOH溶解于5ML干燥的吡啶中，搅拌下，加入上述2-（2苯乙酸基）苯甲酸甲酯（methyl 2-(2-phenyl acetoxy)benzoate）中间体0.5g，室温反应2h，静置，有沉淀析出，过滤，固体用水洗涤后，用乙醇重结晶，得产物4-羟基-3-苯基-2H-色烯-2-one（4-hydroxy-3-phenyl-2H-chromen-2-one）共0.3g，收率68.1％。

。

将3.2克上述产物4-羟基-3-苯基-2H-色烯-2-one（4-hydroxy-3-phenyl-2H-chromen-2-one）溶解于40ML三氯甲烷中，搅拌下慢慢滴加3ML三乙胺，使溶液变澄清。然后冰浴冷却，慢慢滴加含有2ML甲磺酰氯的l0ML三氯甲烷溶液。加完后，室温搅拌30min，TLC检测，反应完毕后，倒入l00ML冰水中，分离有机层，剩余水层再用50ML三氯甲烷萃取2次，合并有机层，MgSO₄干燥，减压蒸除溶剂，得淡黄色固体，用石油醚洗涤，干燥得产物2-氧-3-苯基-2H-苯并吡喃基-4-甲磺酸酯，共3.85g固体，收率98.0％。

将上述产物2-氧-3-苯基-2H-苯并吡喃基-4-甲磺酸酯和NaN₃，溶于10ML DMF中，加热回流2h，减压蒸除DMF，残留物加入50ML冰水，搅拌，过滤，回流，用热乙醇洗涤，干燥得[4,3-b]吲哚6（11H）色烯（chromeno[4,3-b]indol-6(11H)-one），共2.03g，收率52.7％。

实施例2

化合物1：[4,3-b]吲哚6（11H）色烯的抗肿瘤血管形成实验

按照上述方法制备的[4,3-b]吲哚6（11H）色烯（英文名：chromeno[4,3-b]indol-6(11H)-one）进行体外细胞实验。

   

（1）    [4,3-b]吲哚6（11H）色烯体外抑制内皮细胞血管形成实验

实验方法：人胎脐静脉内皮细胞(以下简称内皮细胞)培养。将HUVEC 置于含10 %小牛血清的1640 培养基中培养。将胶原I溶解于0.1M/L的无菌乙酸溶液中，终浓度为1.5mg/ml，4℃保存。将胶原I溶液在冰上与适量10%小牛血清F12培养液混匀，调pH值至7.5，800μl/孔加入6孔板中，37℃孵育1h使其凝固。将内皮细胞均匀接种于凝胶上，以10%小牛血清F12培养液培养。待细胞生长近融合状态后，吸去上清液，以无菌磷酸盐缓冲液洗2次。再次制备胶原I凝胶混合液，每孔200μl覆盖于内皮细胞上，凝胶凝固后，换以1%小牛血清F12 培养液培养，并加入bFGF浓度为10ng/ml和VEGF浓度为15ng/ml诱导血管生成。分别加入合成的色原烯类化合物终浓度为5μM，10μM，25μM，50μM，100μM，200μM，对照组加入生理盐水。37℃培养8h，在显微镜下观察，照相。

实验结果：[4,3-b]吲哚6（11H）色烯终浓度5μM条件下可有效抑制血管内皮细胞的小管形成和出芽功能（如图1所示）。

图1中，对照：仅使用PBS加药继续培养；1：加入化合物1，终浓度为10μM；2：加入化合物2，终浓度为10μM；3：加入化合物3，终浓度为10μM；4：加入化合物4，终浓度为10μM；5：加入化合物5，终浓度为10μM

（2） [4,3-b]吲哚6（11H）色烯抑制内皮细胞增殖能力测定

实验方法：将内皮细胞接种于96孔板中，以10%小牛血清F12培养液培养24h，然后以无血清培养基静止24h，用无菌磷酸盐缓冲液冲洗后，进行细胞计数。再把（1）中所述各组药物分别加入相应孔中，以10%小牛血清F12培养液继续孵育24h。每次设6个复孔，重复3次试验。MTT实验检测细胞增殖情况。

实验结果：该化合物的IC₅₀浓度为96μM（参见图2和表1）。

表1 化合物的体外活性实验结果分析

化合物序号	细胞毒实验IC50(μM)	血管形成抑制实验评分
			1	96	5
2	72	4
			3	81	4
4	65	3
			5	67	3

注：血管形成实验评分标准：5分——独立的单个细胞，4分——细胞开始迁移并互相连接，3分——细胞连成线性但无出芽结构，2分——可见的出芽结构，1分——形成闭合的多边形结构

实施例3

化合物2：3-羟基-6-氧-6,11-二氢化色烯并[4,3-b]吲哚-9-羧酸的抗肿瘤血管形成实验

根据公知的化学有机物合成方法衍生出：3-羟基-6-氧-6,11-二氢化色烯并[4,3-b]吲哚-9-羧酸，（英文名：3-hydroxy-6-oxo-6,11-dihydrochromeno[4,3-b]indole- 9-carboxylic acid），分子结构式如下：

实验方法如实施例2中所述。

实验结果：该化合物的IC₅₀浓度为72μM，结果见图1，2和表1。

实施例4

化合物3：2-氨基-N-(4-(3,9-二羟基-6-氧-6,11-二氢化色烯并[4,3-b]吲哚-7-氨基)苯基)乙酰胺的抗肿瘤血管形成实验

根据公知的化学有机物合成方法衍生出：2-氨基-N-(4-(3,9-二羟基-6-氧-6,11-二氢化色烯并[4,3-b]吲哚-7-氨基)苯基)乙酰胺（英文名：2-amino-N-(4-(3,9- dihydroxy-6-oxo-6,11-dihydrochromeno[4,3-b]indol-7-ylamino)phenyl)acetamide），分子结构式如下：

实验方法如实施例2中所述。

实验结果：该化合物的IC₅₀浓度为81μM，结果见图1，2和表1。

实施例5

化合物4：3,9-二羟基-6H-苯并呋喃基[3,2-c]-色烯-6-酮的抗肿瘤血管形成实验

根据公知的化学有机物合成方法衍生出：3,9-二羟基-6H-苯并呋喃基[3,2-c]-色烯-6-酮（英文名：3,9-dihydroxy-6H-benzofuro[3,2-c]chromen-6-one），分子结构式如下：

实验方法如实施例2中所述。

实验结果：该化合物的IC₅₀浓度为65μM，结果见图1，2和表1。

  

实施例6

化合物5：3,9-二羟基色原[4,3-b]吲哚-6(11H)-酮的抗肿瘤血管形成实验

根据公知的化学有机物合成方法衍生出：3,9-二羟基色原[4,3-b]吲哚-6(11H)-酮（英文名：3,9-dihydroxychromeno[4,3-b]indol-6(11H)-one），分子结构式如下：

实验方法如实施例2中所述。

实验结果：该化合物的IC₅₀浓度为67μM，结果见图1，2和表1。

结论：与其有效浓度相比，以上合成的5种有机化合物可以较低浓度有效作用于血管形成过程，且杀伤血管内皮细胞的能力较弱。

Claims (7)

1.一种能抑制肿瘤血管生长的色原烯类化合物：

或其几何异构体、对映异构体、非对应异构体、外消旋物、药学上可接受的盐、前体药物及其溶剂化物，其中，R1-R7是分别独立的选自由N、Cl、O或者S所组成的组中，其中，R也可以是独立的选自由氢、羟基、取代的羟基、氨基、取代的氨基、卤素、取代的烷氧基或者未被取代的烷氧基、取代的烷氨基或者未被取代的烷氨基、取代的二烷氨基或者未被取代的二烷氨基、取代的硫醇或者未被取代的硫醇、取代的羰基、磺酰、酰基、脂肪族基团和取代的脂肪族基团所组成的组中；取代的烷基或者未被取代的烷基、取代的烯基或者未被取代的烯基、取代的炔基或者未被取代的炔基、芳烷基、芳基烯基、芳基炔基、杂芳基烷基、杂芳基烯基、杂芳基炔基、杂环基芳基、杂环基烯基、杂环基炔基、芳基、杂芳基、杂环基、环烷基、环烯基、烷基芳基烷基、烷基芳基烯基、烷基芳基炔基、烯基芳基烷基、烯基芳基烯基、烯基芳基炔基、炔基芳基烷基、炔基芳基烯基、炔基芳基炔基、烷基杂芳基烷基、烷基杂芳基烯基、烷基杂芳基炔基、烯基杂芳基烷基、烯基杂芳基烯基、烯基杂芳基炔基、炔基杂芳基烷基、炔基杂芳基烯基、炔基杂芳基炔基、烷基杂环基烷基、烷基杂环基烯基、烷基杂环基炔基、烯基杂环基烷基烯基杂环基烯基、烯基杂环基炔基、炔基杂环基烷基、炔基杂环基烯基、或者炔基杂环基炔基所组成的组中，其中，一个或者一个以上亚甲基可以被O、S、S(O)、C(O)、取代的芳基或者未被取代的芳基、取代的杂芳基或者未被取代的杂芳基、取代的杂环基或者未被取代的杂环基所间隔或者终止，其中，R1、R5、R6或R7可以为缺失。

2.根据权利要求1所述的能抑制肿瘤血管生长的色原烯类化合物，其特征在于：结构式如下

或者它的几何异构体、对映异构体、非对应异构体、外消旋物、药学上可接受的盐、前体药物和溶剂化物。

3.根据权利要求I所述的能抑制肿瘤血管生长的色原烯类化合物，其特征在于：结构式如下

或者它的几何异构体、对映异构体、非对应异构体、外消旋物、药学上可接受的盐、前体药物和溶剂化物。

4.根据权利要求1所述的能抑制肿瘤血管生长的药物组合物，包括作为活性成分的化合物和药学上可接受的载体。

5.根据权利要求1所述的能抑制肿瘤血管生长的药物组合物的制备方法，其特征在于：

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6.根据权利要求1所述的能抑制肿瘤血管生长的药物组合物的制备方法，其特征在于：

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7.根据权利要求1所述的能抑制肿瘤血管生长的药物组合物的制备方法，其特征在于：

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