CN102250788B - 降解高浓度甲苯的嗜麦芽寡养单胞菌及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种降解高浓度甲苯的嗜麦芽寡养单胞菌及其应用。嗜麦芽寡养单胞菌命名为，其保藏编号为CGMCC No.4839。本发明还公开了一种降解甲苯的方法，是利用嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839降解甲苯。本发明的嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839能够在高甲苯浓度下降解甲苯，并利用甲苯作为唯一碳源和能源生长，嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839对甲苯具有极强的降解、利用和耐受能力。

Description

降解高浓度甲苯的嗜麦芽寡养单胞菌及其应用
技术领域
本发明属于微生物技术领域，尤其涉及一种能够降解高浓度甲苯，并利用甲苯作为唯一碳源和能源生长的嗜麦芽寡养单胞菌及其应用。
背景技术
甲苯是一种重要的有机溶剂和应用广泛的基础化工原料，工业上被大量生产和使用。由于泄漏和处置不当，甲苯成为许多工业点源广泛排放的重要污染物，并成为空气、水体等环境中存在的主要污染物之一。甲苯具有挥发性，但甲苯很难从水环境中完全除去，并可能长时间存在。甲苯具有很强的毒性，暴露于一定浓度的甲苯会对人体健康产生严重的影响，甲苯的主要毒害作用是对人体的中枢神经系统造成损害，中毒严重可致死。例如，甲苯浓度达到或超过1mg/L可能损害神经系统、肾和肝脏。由于其对人体的毒性，甲苯已经被美国和中国等很多国家列入优先控制污染物黑名单。有些国家还制定了人体接触甲苯等苯系物的极限容许浓度。
甲苯的毒害主要是由于其所具有的辛醇－水分配系数和较高的水溶性。有机溶剂的毒性与其在辛醇和水中分配系数的对数值（log Pow）相关，log Pow介于1.5-4.0之间的有机溶剂对生物体细胞具有极强的毒性，因为它们会选择性地分配到细胞质膜中，破坏其结构和功能。甲苯的log Pow（2.73，25℃）恰在此范围内。同时，甲苯的溶解度（532mg/L，25℃）较高，在污染水体中具有较大的扩散倾向。
甲苯污染治理包括采用物理、化学和生物等方法，其中，生物方法利用微生物对甲苯的降解和代谢能力，可以完全去除甲苯。生物方法设备简单，运行费用低，二次污染小，具有经济、节能、环境友好等潜在优势，是治理甲苯等苯系物污染的重要技术之一。
目前，已报道的能够好氧降解甲苯的微生物主要包括Pseudomonas（假单胞菌）属、Alcaligenes属、Acinetobacter属、Rhodococcus属和Nocardia属的某些种的细菌。其中，某些Pseudomonas属细菌，如Pseudomonas putida，Pseudomonas aeruginosa和Pseudomonas fluorescens，因其在多种芳香族化合物降解方面的出色表现而成为广为研究的菌种。不过，这些Pseudomonas属细菌能够降解的甲苯液相浓度往往低于200－300mg/L。用于甲苯污染治理的生物方法，对高污染物浓度是十分敏感的，高甲苯浓度可能导致污染处理系统因微生物降解和耐受能力的局限而完全失效。因此，分离对高浓度甲苯具有强降解和强耐受能力的微生物菌株对污染环境的生物修复具有重要的意义。
嗜麦芽寡养单胞菌（Stenotrophomonas maltophilia）是一种严格的非发酵型需氧的革兰氏阴性杆菌，广泛分布于水、土壤、植物根系、人和动物的体表与消化道中。关于嗜麦芽寡养单胞菌降解甲苯的报道仅见一例。Lee等（J.Air&Waste Manage.Assoc.2002,52:400-406）从生物滤床中分离得到1株S.maltophilia T3-c，这株菌能够降解甲苯，但其降解和耐受甲苯的能力十分有限，报道中加入甲苯总量的最大值仅为70μmol，根据其采用的培养条件进行计算，其培养初始时最大甲苯液相浓度仅为30.1mg/L。这远不能满足高浓度甲苯污染条件下生物修复的需要。
发明内容
本发明的目的是提供一株能够降解高浓度甲苯和利用甲苯作为唯一碳源和能源生长的嗜麦芽寡养单胞菌及其应用。
该菌株是利用无机盐培养基，以0.1%(v/v)甲苯作为选择压力，从北京市高碑店污水处理厂活性污泥样品中，经多周期驯化、富集和分离得到的。根据其16S rRNA基因序列测定数据，以及细胞形态和生理生化实验数据，经中国科学院微生物研究所鉴定，该菌种为嗜麦芽寡养单胞菌（Stenotrophomonas maltophilia）。将该菌株命名为：
嗜麦芽寡养单胞菌（Stenotrophomonas maltophilia），已于2011年5月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（地址北京市朝阳区北辰西路1号院），保藏编号为CGMCC No.4839。
本发明的嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839可用来降解甲苯。
本发明的另一个目的是提供一种降解甲苯的方法。
本发明所提供的降解甲苯的方法，是利用嗜麦芽寡养单胞菌CGMCCNo.4839降解甲苯。
其中，具体包括如下步骤，将嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839接种到含有甲苯浓度为182.4-401.3mg/L的无机盐培养基中30-37℃振荡培养降解甲苯。
该方法还可包括预培养步骤。
所述预培养为在浓度182.4-401.3mg/L含甲苯的丰富培养基或无机盐培养基中30-37℃振荡预培养。
所述振荡培养的转速为150-200rpm。
所述接种后嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839的OD600为0.15-0.50。
所述无机盐培养基组成可包括Na2HPO45.65g/L，KH2PO45.44g/L，(NH4)2SO41.00g/L，氨三乙酸0.2g/L，MgSO40.29g/L，CaCl2·2H2O0.07g/L，(NH4)6Mo7O24·4H2O0.19g/L，FeSO4·7H2O8.3mg/L，乙二胺四乙酸二钠3.1mg/L，ZnSO4·7H2O13.7mg/L，MnSO4·7H2O1.9mg/L，CuSO4·5H2O0.5mg/L，Co(NO3)2·6H2O0.3mg/L，Na2B4O7·10H2O0.2mg/L。
本发明的嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839能够在高甲苯浓度下降解甲苯，并利用甲苯作为唯一碳源和能源生长，嗜麦芽寡养单胞菌CGMCCNo.4839对甲苯具有极强的降解、利用和耐受能力，这使其在甲苯污染环境的生物修复以及生物监测等领域具有重要的优势和潜在的应用前景。
附图说明
图1嗜麦芽寡养单胞菌在LB琼脂平板上的菌落；
图2嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839在无机盐培养基中在不同甲苯浓度下生长的特征；
图3嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839在无机盐培养基中在不同甲苯浓度下生长的比生长速率；
图4嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839在不同温度条件下生长的特征；
图5嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839在不同pH条件下生长的特征；
图6嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839在不同供氧条件下生长的特征；
图7嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839在不同预培养条件下生长的特征；
图8嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839在LB培养基中对甲苯的耐受性；
图9嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839分别以苯、乙苯和二甲苯为唯一碳源的生长。
具体实施方式
下面结合附图和优选实施例对本发明的技术方案做详细描述。
实施例1、嗜麦芽寡养单胞菌的分离
在250ml血清瓶中，加入50ml无机盐培养基，培养基组成包括Na2HPO45.65g/L，KH2PO45.44g/L，(NH4)2SO41.00g/L，氨三乙酸0.2g/L，MgSO40.29g/L，CaCl2·2H2O0.07g/L，(NH4)6Mo7O24·4H2O0.19g/L，FeSO4·7H2O8.3mg/L，乙二胺四乙酸二钠3.1mg/L，ZnSO4·7H2O13.7mg/L，MnSO4·7H2O1.9mg/L，CuSO4·5H2O0.5mg/L，Co(NO3)2·6H2O0.3mg/L，Na2B4O7·10H2O0.2mg/L。在121℃条件下将培养基灭菌20分钟。通过无菌操作，向血清瓶中加入0.1%(v/v)甲苯。
取高碑店污水处理厂好氧活性污泥2ml，无菌加入到上述250ml血清瓶中。用含胶垫的瓶盖封闭血清瓶，并进一步用Parafilm薄膜密闭培养系统。将血清瓶置于培养箱中培养，培养条件为30℃和150rpm。培养5d后，从中取2ml培养液，无菌加入到内含0.1%(v/v)甲苯和50ml无机盐培养基的250ml血清瓶中，在30℃和150rpm条件下培养5d。然后，重复此过程，共5－6个周期。培养结束后，取培养液在LB琼脂平板（蛋白胨10g/L，酵母膏5g/L，NaCl10g/L，琼脂15g/L）上稀释涂布，分离得到可以降解甲苯的菌株。
该菌株在LB琼脂平板上菌落呈黄色，圆形，中央隆起（图1）。菌株的生理生化特征参见表1。
表1嗜麦芽寡养单胞菌生理生化特征
Figure GDA00003263031500051
注：“＋”表示生长或反应阳性；“－”表示不生长或反应阴性；“B”表示不确定。
嗜麦芽寡养单胞菌，已于2011年5月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（地址北京市朝阳区北辰西路1号院），保藏编号为CGMCC No.4839。
实施例2、嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839以甲苯为唯一碳源和能源的生长（与保藏证明中的名称一致）
在250ml血清瓶中，加入25ml无机盐培养基，培养基组成包括Na2HPO45.65g/L，KH2PO45.44g/L，(NH4)2SO41.00g/L，氨三乙酸0.2g/L，MgSO40.29g/L，CaCl2·2H2O0.07g/L，(NH4)6Mo7O24·4H2O0.19g/L，FeSO4·7H2O8.3mg/L，乙二胺四乙酸二钠3.1mg/L，ZnSO4·7H2O13.7mg/L，MnSO4·7H2O1.9mg/L，CuSO4·5H2O0.5mg/L，Co(NO3)2·6H2O0.3mg/L，Na2B4O7·10H2O0.2mg/L。在121℃条件下将培养基灭菌20分钟。通过无菌操作，向血清瓶中加入15、25、35、45和55μl甲苯，并接入2ml在含182.4mg/L甲苯的25ml无机盐培养基（250ml血清瓶）预培养2d（30℃，150rpm）的嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839培养液。接种后OD600为0.20，甲苯初始液相浓度分别为109.5、182.4、255.4、328.4和401.3mg/L。用含胶垫的瓶盖封闭血清瓶，并进一步用Parafilm薄膜密闭培养系统。
将血清瓶置于培养箱中，培养条件为30℃和150rpm。在3d内每隔8h，用注射器无菌取样，测定OD600，获得生长曲线，结果见图2，并计算对数期比生长速率，结果见图3。从中可知，嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839能够在以甲苯为唯一碳源和能源的无机盐培养基中，在甲苯液相浓度109.5-401.3mg/L范围内，获得良好的生长。并且，甲苯浓度的提高促进了细胞的生长，随着甲苯浓度的增大，细胞比生长速率随着增大。
实施例3、嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839在不同温度下的生长
在250ml血清瓶中，加入25ml无机盐培养基，培养基组成包括Na2HPO45.65g/L，KH2PO45.44g/L，(NH4)2SO41.00g/L，氨三乙酸0.2g/L，MgSO40.29g/L，CaCl2·2H2O0.07g/L，(NH4)6Mo7O24·4H2O0.19g/L，FeSO4·7H2O8.3mg/L，乙二胺四乙酸二钠3.1mg/L，ZnSO4·7H2O13.7mg/L，MnSO4·7H2O1.9mg/L，CuSO4·5H2O0.5mg/L，Co(NO3)2·6H2O0.3mg/L，Na2B4O7·10H2O0.2mg/L。在121℃条件下将培养基灭菌20分钟。通过无菌操作，向血清瓶中加入25μl甲苯，并接入2ml在含182.4mg/L甲苯的25ml无机盐培养基（250ml血清瓶）预培养2d（30℃，150rpm）的嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839培养液。接种后OD600为0.20，甲苯液相浓度为182.4mg/L。用含胶垫的瓶盖封闭血清瓶，并进一步用Parafilm薄膜密闭培养系统。
将血清瓶置于培养箱中，培养条件分别为23、30和37℃和150rpm。在2d内每隔8h，用注射器无菌取样，测定OD600，结果见图4。从图中可知，嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839菌株生长的较优的温度范围为30-37℃。
实施例4、嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839在不同pH下的生长
在250ml血清瓶中，加入25ml无机盐培养基，培养基组成包括Na2HPO45.65g/L，KH2PO45.44g/L，(NH4)2SO41.00g/L，氨三乙酸0.2g/L，MgSO40.29g/L，CaCl2·2H2O0.07g/L，(NH4)6Mo7O24·4H2O0.19g/L，FeSO4·7H2O8.3mg/L，乙二胺四乙酸二钠3.1mg/L，ZnSO4·7H2O13.7mg/L，MnSO4·7H2O1.9mg/L，CuSO4·5H2O0.5mg/L，Co(NO3)2·6H2O0.3mg/L，Na2B4O7·10H2O0.2mg/L。用1M HCl和1M KOH调节培养基pH分别为5.99、6.67、7.34、8.11和8.82。在121℃条件下将培养基灭菌20分钟。通过无菌操作，向血清瓶中加入25μl甲苯，并接入2ml在含182.4mg/L甲苯的25ml无机盐培养基（250ml血清瓶）预培养2d（30℃，150rpm）的嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839培养液。甲苯初始液相浓度为182.4mg/L。用含胶垫的瓶盖封闭血清瓶，并进一步用Parafilm薄膜密闭培养系统。
将血清瓶置于培养箱中，培养条件为30℃和150rpm。在2d内每隔8h，用注射器无菌取样，测定OD600，结果见图5。从图中可知，嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839生长的较优pH范围为6.67-8.82。
实施例5、嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839在不同供氧条件下的生长
在250ml血清瓶中，分别加入15、25、50、100和150ml无机盐培养基，培养基组成包括Na2HPO45.65g/L，KH2PO45.44g/L，(NH4)2SO41.00g/L，氨三乙酸0.2g/L，MgSO40.29g/L，CaCl2·2H2O0.07g/L，(NH4)6Mo7O24·4H2O0.19g/L，FeSO4·7H2O8.3mg/L，乙二胺四乙酸二钠3.1mg/L，ZnSO4·7H2O13.7mg/L，MnSO4·7H2O1.9mg/L，CuSO4·5H2O0.5mg/L，Co(NO3)2·6H2O0.3mg/L，Na2B4O7·10H2O0.2mg/L。在121℃条件下将培养基灭菌20分钟。通过无菌操作，向血清瓶中分别加入15、25、50、100和150μl甲苯，并分别接入1.2、2、4、8和12ml在含182.4mg/L甲苯的25ml无机盐培养基（250ml血清瓶）预培养2d（30℃，150rpm）的嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839培养液。接种后OD600相同（0.20），甲苯初始液相浓度相同（182.4mg/L）。用含胶垫的瓶盖封闭血清瓶，并进一步用Parafilm薄膜密闭培养系统。
将血清瓶置于培养箱中，培养条件为30℃和150rpm。在2d内每隔8h，用注射器无菌取样，测定OD600，结果见图6。从图中可知，嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839在250ml血清瓶中培养基装液量15-50ml时，即装液量占血清瓶体积4.67%-15.56%时，能够获得比较充分的O2供应，获得较好的生长。
实施例6、嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839在不同预培养条件下的生长
在250ml血清瓶中，分别加入下列培养基：25ml无机盐培养基+182.4mg/L液相甲苯，25ml LB培养基（蛋白胨10g/L，酵母膏5g/L，NaCl10g/L），25ml无机盐培养基+2g/L葡萄糖，25ml LB培养基+182.4mg/L液相甲苯，25ml无机盐培养基+2g/L葡萄糖+182.4mg/L液相甲苯。在121℃灭菌20分钟后，向血清瓶中接入1ml在含182.4mg/L甲苯的25ml无机盐培养基（250ml血清瓶）预培养2d（30℃，150rpm）的嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839培养液，在30℃和150rpm预培养2d。
分别用这5种预培养液作为种液，取2ml接入含25ml无机盐培养基+182.4mg/L液相甲苯的250ml血清瓶中，在30℃和150rpm密闭培养，得到其生长特征如图7所示。从图中可知，嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839在含甲苯（液相浓度182.4mg/L）的丰富培养基或无机盐培养基中预培养后，能够比在相应的无甲苯的培养基中预培养后，在含甲苯无机盐培养基中获得更快的生长。
实施例7、嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839对甲苯的耐受性
在250ml血清瓶中，加入25ml LB培养基（蛋白胨10g/L，酵母膏5g/L，NaCl10g/L）。在121℃条件下将培养基灭菌20分钟。通过无菌操作，分别向血清瓶中加入0、0.25、1.32、2.78、6.25和25ml甲苯，并接入2ml在含182.4mg/L甲苯的25ml无机盐培养基（250ml血清瓶）预培养2d（30℃，150rpm）的嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839培养液。接种后OD600为0.21，甲苯浓度（v/v）分别为0、1％、5％、10％、20％和50％。用含胶垫的瓶盖封闭血清瓶，并进一步用Parafilm薄膜密闭培养系统。
将血清瓶置于培养箱中，培养条件为30℃和150rpm。在48h测定OD600，结果见图8。从图中可知，嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839具有良好的甲苯耐受性，能够在1％（v/v）的高甲苯浓度下生长，当甲苯浓度高于5％（v/v）时，细胞生长才受到显著抑制。
实施例8、嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839在其他苯系物上的生长
在250ml血清瓶中，加入25ml无机盐培养基，培养基组成包括Na2HPO45.65g/L，KH2PO45.44g/L，(NH4)2SO41.00g/L，氨三乙酸0.2g/L，MgSO40.29g/L，CaCl2·2H2O0.07g/L，(NH4)6Mo7O24·4H2O0.19g/L，FeSO4·7H2O8.3mg/L，乙二胺四乙酸二钠3.1mg/L，ZnSO4·7H2O13.7mg/L，MnSO4·7H2O1.9mg/L，CuSO4·5H2O0.5mg/L，Co(NO3)2·6H2O0.3mg/L，Na2B4O7·10H2O0.2mg/L。在121℃条件下将培养基灭菌20分钟。通过无菌操作，分别向血清瓶中加入2.5μl和25μl苯，2.5μl和25μl乙苯，以及2.5μl和25μl二甲苯，并接入2ml在含182.4mg/L甲苯的25ml无机盐培养基（250ml血清瓶）预培养2d（30℃，150rpm）的嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839培养液。接种后OD600为0.26。用含胶垫的瓶盖封闭血清瓶，并进一步用Parafilm薄膜密闭培养系统。
将血清瓶置于培养箱中，培养条件为30℃和150rpm。在48h测定OD600，结果见图9。从图中可知，嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839能够在分别以苯（0.1%）和乙苯（0.1%）为唯一碳源和能源的无机盐培养基中获得良好的生长，说明嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839能够分别降解和利用高浓度苯和乙苯生长。
实施例9、嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839对甲苯（液相浓度182.4mg/L）的降解
在250ml血清瓶中，加入25ml无机盐培养基，培养基组成包括Na2HPO45.65g/L，KH2PO45.44g/L，(NH4)2SO41.00g/L，氨三乙酸0.2g/L，MgSO40.29g/L，CaCl2·2H2O0.07g/L，(NH4)6Mo7O24·4H2O0.19g/L，FeSO4·7H2O8.3mg/L，乙二胺四乙酸二钠3.1mg/L，ZnSO4·7H2O13.7mg/L，MnSO4·7H2O1.9mg/L，CuSO4·5H2O0.5mg/L，Co(NO3)2·6H2O0.3mg/L，Na2B4O7·10H2O0.2mg/L。在121℃条件下将培养基灭菌20分钟。通过无菌操作，向血清瓶中加入25μl甲苯，并接入2ml在含182.4mg/L甲苯的25ml无机盐培养基（250ml血清瓶）预培养2d（30℃，150rpm）的嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839培养液。接种后OD600为0.28，甲苯初始液相浓度为182.4mg/L。用含胶垫的瓶盖封闭血清瓶，并进一步用Parafilm薄膜密闭培养系统。
将血清瓶置于培养箱中，培养条件为30℃和150rpm。在24h和48h，用气密注射器抽取1000μl血清瓶顶空气体样品，利用气相色谱仪（上海分析仪器厂，GC112A）分析甲苯气相浓度，气相色谱仪分析条件为：采用毛细管柱（50m），柱温150℃，进样室180℃，检测器200℃，以N2为载气。根据甲苯的亨利常数（0.316，30℃），计算得到甲苯液相浓度分别为0.45mg/L（24h）和0.51mg/L（48h），对应的甲苯降解率分别为99.75%和99.72%，结果参见表2。
在同样条件下，未接入嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839的对照实验表明，在48h培养过程中，甲苯挥发逃逸等非生物降解性损失可以忽略不计。
实施例10、嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839对甲苯（液相浓度401.3mg/L）的降解
在250ml血清瓶中，加入25ml无机盐培养基，培养基组成包括Na2HPO45.65g/L，KH2PO45.44g/L，(NH4)2SO41.00g/L，氨三乙酸0.2g/L，MgSO40.29g/L，CaCl2·2H2O0.07g/L，(NH4)6Mo7O24·4H2O0.19g/L，FeSO4·7H2O8.3mg/L，乙二胺四乙酸二钠3.1mg/L，ZnSO4·7H2O13.7mg/L，MnSO4·7H2O1.9mg/L，CuSO4·5H2O0.5mg/L，Co(NO3)2·6H2O0.3mg/L，Na2B4O7·10H2O0.2mg/L。在121℃条件下将培养基灭菌20分钟。通过无菌操作，向血清瓶中加入55μl甲苯，并接入2ml在含182.4mg/L甲苯的25ml无机盐培养基（250ml血清瓶）预培养2d（30℃，150rpm）的嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839培养液。接种后OD600为0.29，甲苯初始液相浓度为401.3mg/L。用含胶垫的瓶盖封闭血清瓶，并进一步用Parafilm薄膜密闭培养系统。
将血清瓶置于培养箱中，培养条件为30℃和150rpm。在24h和48h，用气密注射器抽取1000μl血清瓶顶空气体样品，利用气相色谱仪（上海分析仪器厂，GC112A）分析甲苯气相浓度，气相色谱仪分析条件为：采用毛细管柱（50m），柱温150℃，进样室180℃，检测器200℃，以N2为载气。根据甲苯的亨利常数（0.316，30℃），计算得到甲苯液相浓度分别为58.91mg/L（24h）和1.31mg/L（48h），对应的甲苯降解率分别为85.32%和99.67%，结果参见表2。
在同样条件下，未接入嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839的对照实验表明，在48h培养过程中，甲苯挥发逃逸等非生物降解性损失可以忽略不计。
表2嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839在无机盐培养基中培养时对甲苯的降解
培养时间（h） 0 24 48
液相浓度（mg/L） 182.4 0.45 0.51
降解率（%） - 99.75 99.72
液相浓度（mg/L） 401.3 58.91 1.31
降解率（%） - 85.32 99.67

Claims (9)

1.一种嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)，其保藏编号为CGMCC No.4839。
2.如权利要求1所述的嗜麦芽寡养单胞菌在降解甲苯中的应用。
3.一种降解甲苯的方法，是利用嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839降解甲苯。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：包括如下步骤，将嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839接种到含有甲苯浓度为182.4-401.3mg/L的无机盐培养基中30-37℃振荡培养降解甲苯，所述无机盐培养基组成包括Na2HPO45.65g/L，KH2PO45.44g/L，(NH4)2SO41.00g/L，氨三乙酸0.2g/L，MgSO40.29g/L，CaCl2·2H2O0.07g/L，(NH4)6Mo7O24·4H2O0.19g/L，FeSO4·7H2O8.3mg/L，乙二胺四乙酸二钠3.1mg/L，ZnSO4·7H2O13.7mg/L，MnSO4·7H2O1.9mg/L，CuSO4·5H2O0.5mg/L，Co(NO3)2·6H2O0.3mg/L，Na2B4O7·10H2O0.2mg/L。
5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于：还包括预培养步骤。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述预培养为在含甲苯浓度182.4-401.3mg/L的无机盐培养基中30-37℃振荡预培养；所述无机盐培养基组成包括Na2HPO45.65g/L，KH2PO45.44g/L，(NH4)2SO41.00g/L，氨三乙酸0.2g/L，MgSO40.29g/L，CaCl2·2H2O0.07g/L，(NH4)6Mo7O24·4H2O0.19g/L，FeSO4·7H2O8.3mg/L，乙二胺四乙酸二钠3.1mg/L，ZnSO4·7H2O13.7mg/L，MnSO4·7H2O1.9mg/L，CuSO4·5H2O0.5mg/L，Co(NO3)2·6H2O0.3mg/L，Na2B4O7·10H2O0.2mg/L。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述振荡培养的转速为150-200rpm。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述接种后嗜麦芽寡养单胞菌CGMCC No.4839的OD600为0.15-0.50。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：所述培养基组成包括Na2HPO45.65g/L，KH2PO45.44g/L，(NH4)2SO41.00g/L，氨三乙酸0.2g/L，MgSO40.29g/L，CaCl2·2H2O0.07g/L，(NH4)6Mo7O24·4H2O0.19g/L，FeSO4·7H2O8.3mg/L，乙二胺四乙酸二钠3.1mg/L，ZnSO4·7H2O13.7mg/L，MnSO4·7H2O1.9mg/L，CuSO4·5H2O0.5mg/L，Co(NO3)2·6H2O0.3mg/L，Na2B4O7·10H2O0.2mg/L。
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