CN102250003A

CN102250003A - 一种青藤碱磺酸化物及其制备和应用

Info

Publication number: CN102250003A
Application number: CN201110123703XA
Authority: CN
Inventors: 蒋秋桃; 李文莉; 刘雁鸣; 林海; 龙海燕; 赵勇; 孙辉; 丁野
Original assignee: HUNAN DRUG TESTING INSTITUTE
Current assignee: HUNAN DRUG TESTING INSTITUTE
Priority date: 2011-05-13
Filing date: 2011-05-13
Publication date: 2011-11-23

Abstract

本发明涉及药物合成领域，具体提供了一种青藤碱磺酸化物及其制备和应用。青藤碱磺酸化物的分子式为：C₁₉H₂₅SNO₇，分子量为411；理化性质为：白色粉末，易溶于水，且能溶于甲醇、乙醇。具体制备步骤为：将青藤碱与亚硫酸、亚硫酸盐类、二氧化硫、焦亚硫酸、焦亚硫酸盐类或硫代硫酸盐类中的一种或多种混合，使得青藤碱与溶液中的亚硫酸根离子的摩尔比为1∶10-8，再加入相对与原料固体物质6-10倍重量的水，加热反应4.5小时-5.5小时，重结晶，得到青藤碱磺酸化物。青藤碱磺酸化物具有抗炎、镇痛的功效，活性优于青藤碱。

Description

一种青藤碱磺酸化物及其制备和应用

技术领域

本发明涉及药物合成领域，具体涉及一种抗炎、镇痛类药物的合成，即青藤碱磺酸化物的制备和应用。

背景技术

青藤碱是从青风藤植物中提取的最有效的治疗风湿和类风湿性关节炎疾病的生物碱类药物，具有显著的镇痛、镇静、抗炎、免疫抑制、降血压等作用。它能作用于中枢神经系统和内分泌系统，通过双向调节，改善免疫和抗炎机制，消除体内致病因素，修复组织损伤。

现在广泛应用的青藤碱盐类药物主要是以盐酸青藤碱为原料药，制成各种类型的片剂、胶囊、注射液等。在用药过程中发现有部分数患者出现一定程度的不良反应，如肌肉红肿、瘙痒等。青藤碱类药物不仅仅局限于盐酸青藤碱，还可以在青藤碱母核结构中的引入其它基团，来研究活性更优良的其它抗炎镇痛类化合物。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种青藤碱磺酸化物及其制备方法和用途，即青藤碱磺酸化物制备抗炎或镇痛药物中的应用。

为实现上述目的本发明的技术方案为：

本发明的提供了一种青藤碱磺酸化物，该化合物是在青藤碱母核结构中的引入一个磺酸基，活性优于青藤碱。

一种青藤碱磺酸化物，其化学结构式如下：

化学结构名称为：(9alpha，13alpha，14alpha)-4-羟基-3，7-二甲氧基-17-甲基吗啡喃-6-酮-8-磺酸；分子式为：C₁₉H₂₅SNO₇，分子量为411；理化性质为：白色粉末，易溶于水，且能溶于甲醇、乙醇。

青藤碱磺酸化物在制备以青藤碱磺酸化物作为活性成分的抗炎类药物中的应用。

青藤碱磺酸化物在制备以青藤碱磺酸化物作为活性成分的镇痛类药物中的应用。

上述青藤碱磺酸化物的制备方法，具体步骤为：将青藤碱与亚硫酸、亚硫酸盐类、二氧化硫、焦亚硫酸、焦亚硫酸盐类或硫代硫酸盐类中的一种或多种混合，使得青藤碱与溶液中的亚硫酸根离子的摩尔比为1∶10-8，再加入相对与原料固体物质6-10倍重量的水，加热反应4.5小时-5.5小时，重结晶，得到青藤碱磺酸化物。

下面对本发明做进一步的解释和说明：

所述抗炎或镇痛类药物是指以青藤碱磺酸化物作为活性成分的药物组合物。青藤碱磺酸化物可作为活性成分，与药学上可接受的赋形剂一起用于制备药物组合物，该药物组合物可以采用本领域的常规方法制备成各种剂型，如胶囊、片剂、丸剂、口服液、颗粒剂、酊剂等口服给药的剂型和注射液等口服以外给药剂型，如针剂等。根据剂型的不同，该药物组合物使用的赋形剂也不同。常用赋形剂包括稀释剂、湿润剂、润滑剂、填充剂、防腐剂等。其中稀释剂为乳糖、淀粉、糊精、微品纤维素、微粉硅胶和甘露醇等，湿润剂为水和50％～85％不同浓度的乙醇，含有本发明青藤碱磺酸化物的药物组合物的优选剂型是注射剂。

通过相关试验证明，青藤碱磺酸化物具有抗炎、镇痛等作用。

抗炎作用：以60mg/kg腹腔注射对大白鼠甲醛性及蛋清性关节炎有显著的消肿作用。较水杨酸钠200mg/kg的作用强。动物实验发现，青藤碱磺酸化物能降低大鼠肾上腺素内维生素C的含量。对切除肾上腺或垂体的大鼠，青藤碱磺酸化物则无抗炎作用。抗炎作用的机制可能是通过下丘脑影响垂体-肾上腺系统所致。

青藤碱磺酸化物100mg/kg给小白鼠腹腔注射能显著提高动物对热刺激性的痛阈。起作用强度与吗啡比较约为1∶0.25。在急性试验条件下，镇痛作用是药物作用于脑组织的结果。

附图说明

图1实施例中青藤碱磺酸化物的MS谱图；

图2实施例中青藤碱磺酸化物的¹H-NMR谱图；

图3实施例中青藤碱磺酸化物的¹³C-NMR谱图；

图4实施例中青藤碱磺酸化物的COSY谱图；

图5实施例中青藤碱磺酸化物的HMBC谱图；

图6实施例中青藤碱磺酸化物的DEPT谱图；

图7实施例中青藤碱磺酸化物的HSQC谱图；

图8实施例中青藤碱磺酸化物的NOESY谱图。

具体实施方式

为了更好的理解本发明，下面结合实施例对本发明做进一步地详细说明，但是本发明要求保护的范围并不局限于实施例表示的范围。

实施例1：

取盐酸青藤碱原料20g和亚硫酸氢钠6g，水200ml使混合均匀，使反应物浓度在8％-12％，在温度为100℃下加热回流5小时。反应完成后，蒸去多数水溶剂，剩余约20ml水，重结晶法可以得到纯度为98％以上的单一反应产物。经质谱及核磁共振法确定其结构为青藤碱磺酸化物，得到量为10.8g。

实施例2：

取盐酸青藤碱原料20g和焦亚硫酸钠5g，加水200ml使混合均匀，使反应物浓度在8％-12％，在温度为100℃下加热反应5小时。反应完成后，蒸去多数水溶剂，剩余约20ml水，重结晶法可以得到纯度为98％以上的单一反应产物。经质谱及核磁共振法确定其结构为青藤碱磺酸化物，得到量为4.6g。

实施例3：

取盐酸青藤碱原料20g，加水200ml，通二氧化硫5分钟，在温度为100℃下加热反应5小时。反应完成后，蒸去多数水溶剂，剩余约20ml水，重结晶法可以得到纯度为98％以上的单一反应产物。经质谱及核磁共振法确定其结构为青藤碱磺酸化物，得到量为7.6g。

实施例4：

取盐酸青藤碱原料20g和硫代硫酸钠15g，加水200ml使混合均匀，使反应物浓度在8％-12％，在温度为100℃下加热反应5小时。反应完成后，经分离和重结晶法可以得到纯度为98％以上的单一反应产物。经质谱及核磁共振法确定其结构为青藤碱磺酸化物，得到量为8.9g。

实施例5：结构检测

对上述实施例1-4所制备的产物进行MS、¹H-NMR、¹³C-NMR、COSY、HMBC、DEPT、HSQC及NOESY分析，如谱图1-8所示，得出数据如表1所示：

表1青藤碱磺酸化物¹H-NMR、¹³C-NMR、COSY、HMBC及NOESY数据

如图1所示，MS图提示该化合物m/z：[M-H]-412，较青藤碱的分子量多82，结合该化合物的制备过程，推断该化合物可能为青藤碱上多了-SO3片段。

如图2所示，1H-NMR图谱显示低场区有一组邻偶的芳香氢信号δH 6.69(1H，d，J＝8.5Hz)，δH 6.87(1H，d，J＝8.5Hz)，是典型的邻芳质子耦合系统，提示存在四取代的苯环结构；较高场区显示有两个-OCH3氢信号δH 3.74(1H，s)，δH 3.22(3H，s)和一个-NCH3氢信号δH 2.86(3H，s)。

如图3和图6所示，¹³C-NMR及DEPT图谱显示该化合物有三个甲基碳，四个亚甲基碳，六个次甲基碳及6个季碳，低场区有一羰基碳信号δC 208.46及一组典型的芳香碳信号δC 112.22、119.78、119.84、126.70、144.23、146.36；高场区显示有两个-OCH3碳信号δC56.47、58.90及一个-NCH3碳信号δC40.85。

如图4和图7所示，COSY及HSQC图谱提示存在如下的偶合系统

(1)δH 4.15(1H，d，J＝9.3Hz)-δH 4.15(1H，dd，J＝11.3Hz，9.3Hz)-δH2.79(1H，dd，J＝11.3Hz，2.9Hz)-δH 4.48(1H，dd，J＝6.0Hz，2.9Hz)-δH 3.37(1H，dd，J＝20.2Hz，6.5Hz)、δH 3.37(1H，dd，J＝20.2Hz，6.5Hz)

(2)δH 2.09(1H，m)、1.96(1H，dd，J＝13.4，4.0Hz)-δH 3.17(1H，overlap)、2.63(1H，d，J＝13.4，4.0Hz)

如图5的HMBC图谱所示，δH 3.37(1H，dd，J＝20.2，6.5Hz)与苯环碳信号δC 119.84、126.70有远程相关从而确定了偶合系统(1)与芳香环连接的位置；δH 2.79(1H，dd，J＝11.3Hz，2.9Hz)与季碳δC 39.19有远程相关，表明片段(1)通过季碳δC 39.19与苯环相连；由于δH 4.15(1H，d，J＝9.3Hz)与羰基碳δC208.46有先远程相关由此推断出偶合系统(1)与羰基碳相连；δH 2.09(1H，m)、1.96(1H，dd，J＝13.4，4.0Hz)与芳香碳δC 119.84及季碳δC39.19有远程相关，表明片段(2)通过季碳δC 39.19与苯环相连；综合以上信息最终确定该化合物结构如下：

分子式为C₁₉H₂₅SNO₇，为类白色粉末，分子量为411，溶于甲醇、乙醇等有机溶剂。

实施例6：毒理实验

对(9alpha，13alpha，14alpha)-4-羟基-3，7-二甲氧基-17-甲基吗啡喃-6-酮-8-磺酸(本发明的青藤碱磺酸化物)进行了如下药理毒理试验，结果总结如下：

1.1动物急性毒性试验

健康雄性小鼠，体重18-25克，用青藤碱磺酸化物水溶液100mg/kg灌胃，连续一周，未见小鼠死亡。

2.青藤碱磺酸化物的抗炎作用

2.1青藤碱磺酸化物对巴豆油所致小鼠耳肿胀的影响

小鼠60只，雄性，体重24～26g，均分成6组(n＝10)，青藤碱磺酸化物100mg/kg灌胃，每天一次，共7天，末次给药1小时，每鼠右耳涂2％巴豆油(2％巴豆油，20％无水乙醇，5％蒸馏水和73％乙醚)0.1ml，左耳作空白对照。2小时后再给药一次，涂巴豆油4小时后颈椎脱臼处死小鼠，沿耳廓基线剪下两耳，用直径为8mm的打孔器打下耳片并称重，以两耳重量差作为每组小鼠肿胀度，结果进行t检验，结果见表2。

表2青藤碱磺酸化物对巴豆油所致小鼠耳肿胀的影响(

n＝10)

与模型对照组比较^*P＞0.05，^**P＜0.05，^***P＜0.01

2.2青藤碱磺酸化物对大鼠棉球肉芽肿的影响

SD大鼠60只，雌性，体重160～200g，用25％乌拉坦腹腔注射0.4ml/100g麻醉，然后将腹腔部位皮肤切一小口，将两个灭菌棉球(每个重50±1mg，高压灭菌，各加入氨苄青霉素1mg/0.1ml/个，60℃烘干备用)分别植入大鼠两侧腋窝皮下，待动物清醒后均分成6组(n＝10)，术后当天开始给药，青藤碱磺酸化物100mg/kg灌胃，每天一次，共7天，第8天颈椎脱臼处死，取出棉球，60℃烘12小时，称重，计算肉芽肿重及抑制率。结果进行t检验，结果见表3。

表3青藤碱磺酸化物对大鼠棉球肉芽肿的影响(

n＝10)

与模型对照组比较^*P＞0.05，^**P＜0.05，^***P＜0.01

结果表明，青藤碱磺酸化物及阿司匹林组分别与模型对照组比较，对大鼠棉球肉芽肿均具有明显的抑制作用。

3.青藤碱磺酸化物的镇痛作用

3.1青藤碱磺酸化物对催产素致痛小鼠的影响[5]

取小鼠60只，雌性，体重18～22g，均分成6组(n＝10)，青藤碱磺酸化物100mg/kg灌胃，每只动物均皮下注射己烯雌酚0.2mg/20g，连续3天，于第一天开始灌胃给药，连续4天，于末次给药后1小时，每只动物腹腔注射催产素2u/20g，观察并记录20min内小鼠扭体次数，结果进行t检验，结果见表4。

表4青藤碱磺酸化物对催产素致痛小鼠扭体反应的影响(n＝10)

#与对照组比较#P＞0.05，##P＜0.05，###P＜0.01

结果表明，青藤碱磺酸化物组及阿司匹林组分别与对照组比较，均能明显抑制催产素致痛小鼠扭体次数。

3.2青藤碱磺酸化物对小鼠热板法致痛的影响

取痛阈大于5秒且小于30秒的雌性昆明种小鼠60只，体重18～20g，均分成6组(n＝10)，按2.1法剂量一次性给药，给药后30、60、90和120min分别置热板测痛仪测小鼠痛阈，结果进行t检验，结果见表5。

表5青藤碱磺酸化物对热板法致痛小鼠痛阈的影响(n＝10)

与对照组比较#P＞0.05，##P＜0.05，###P＜0.01

结果表明，青藤碱磺酸化物组及阿司匹林组分别与对照组比较，在观察时间内均能明显提高小鼠痛阈。青藤碱磺酸化物组均能明显提高小鼠痛阈。

Claims

1.一种青藤碱磺酸化物，其特征是，化学结构式如下

2.一种权利要求1所述青藤碱磺酸化物，其特征是，该化合物在制备以青藤碱磺酸化物为活性成分的抗炎类药物中的应用。

3.一种权利要求1所述青藤碱磺酸化物，其特征是，该化合物在制备以青藤碱磺酸化物为活性成分的镇痛类药物中的应用。

4.权利要求1所述青藤碱磺酸化物的制备方法，其特征是，具体步骤为：将青藤碱与亚硫酸、亚硫酸盐类、二氧化硫、焦亚硫酸、焦亚硫酸盐类或硫代硫酸盐类中的一种或多种混合，使得青藤碱与溶液中的亚硫酸根离子的摩尔比为1：10-8，再加入相对与原料固体物质6-10倍重量的水，加热反应4.5小时-5.5小时，重结晶，得到青藤碱磺酸化物。