CN102242068B - 催化阿糖胞苷酯合成反应的霉菌细胞催化剂的制备方法 - Google Patents
催化阿糖胞苷酯合成反应的霉菌细胞催化剂的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102242068B CN102242068B CN201110119930.5A CN201110119930A CN102242068B CN 102242068 B CN102242068 B CN 102242068B CN 201110119930 A CN201110119930 A CN 201110119930A CN 102242068 B CN102242068 B CN 102242068B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- preparation
- washing
- mould
- cell catalyst
- cytosine arabinoside
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 title abstract description 26
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 title abstract description 22
- YJTVZHOYBAOUTO-URBBEOKESA-N cytarabine ocfosfate Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OCCCCCCCCCCCCCCCCCC)O[C@H]1N1C(=O)N=C(N)C=C1 YJTVZHOYBAOUTO-URBBEOKESA-N 0.000 title abstract 4
- 229950006614 cytarabine ocfosfate Drugs 0.000 title abstract 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 19
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 19
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 16
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 239000000411 inducer Substances 0.000 claims abstract description 10
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims abstract description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 claims abstract description 4
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 claims description 24
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 claims description 10
- 240000006439 Aspergillus oryzae Species 0.000 claims description 9
- 235000002247 Aspergillus oryzae Nutrition 0.000 claims description 9
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 9
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 claims description 9
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 9
- 244000168141 Geotrichum candidum Species 0.000 claims description 7
- 235000017388 Geotrichum candidum Nutrition 0.000 claims description 7
- 238000013016 damping Methods 0.000 claims description 7
- 238000010701 ester synthesis reaction Methods 0.000 claims description 7
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 7
- FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 6-methoxy-1,2,3,4-tetrahydroquinoline Chemical compound N1CCCC2=CC(OC)=CC=C21 FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 claims description 4
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 claims description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 3
- ZEMPKEQAKRGZGQ-AAKVHIHISA-N 2,3-bis[[(z)-12-hydroxyoctadec-9-enoyl]oxy]propyl (z)-12-hydroxyoctadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCC(O)C\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCC\C=C/CC(O)CCCCCC)COC(=O)CCCCCCC\C=C/CC(O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-AAKVHIHISA-N 0.000 claims description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 2
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 claims description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 3
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 abstract description 2
- 241001052560 Thallis Species 0.000 abstract 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 abstract 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 abstract 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 7
- 239000012533 medium component Substances 0.000 description 7
- 241000235526 Mucor racemosus Species 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 241000235403 Rhizomucor miehei Species 0.000 description 5
- 240000005384 Rhizopus oryzae Species 0.000 description 5
- 235000013752 Rhizopus oryzae Nutrition 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 4
- 239000002585 base Substances 0.000 description 3
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 3
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 3
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 3
- 241000235527 Rhizopus Species 0.000 description 2
- 241000235528 Rhizopus microsporus var. chinensis Species 0.000 description 2
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- -1 cytosine arabinoside ester Chemical class 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate Substances CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BABWWODCHTVFPY-UHFFFAOYSA-N hexane;pyridine Chemical compound CCCCCC.C1=CC=NC=C1 BABWWODCHTVFPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CKTSBUTUHBMZGZ-SHYZEUOFSA-N 2'‐deoxycytidine Chemical class O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 CKTSBUTUHBMZGZ-SHYZEUOFSA-N 0.000 description 1
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 241000159512 Geotrichum Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 241000235402 Rhizomucor Species 0.000 description 1
- HVUMOYIDDBPOLL-XGKPLOKHSA-N [2-[(2r,3r,4s)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]-2-hydroxyethyl] octadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O HVUMOYIDDBPOLL-XGKPLOKHSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 150000001733 carboxylic acid esters Chemical class 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 239000000306 component Substances 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 210000000865 mononuclear phagocyte system Anatomy 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 1
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种催化阿糖胞苷酯合成反应的霉菌细胞催化剂的制备方法。该方法是将霉菌孢子接种至含0.5g/L~50g/L产酶诱导剂的液体基础培养基中，接种量为1×103~1×1012个/L，培养条件为10℃~45℃，培养时间为10h~200h；收集菌体，蒸馏水或缓冲液洗涤后再用丙酮洗涤1~3次，抽滤菌体，得到催化阿糖胞苷酯合成反应的霉菌细胞催化剂；或者可采用冷冻干燥的方法去除水分，得到催化阿糖胞苷酯合成反应的霉菌细胞催化剂。本发明的霉菌细胞催化剂具有成本低、易制备、环境友好、催化剂活性高的优点。
Description
技术领域
本发明属于微生物培养、生物催化及生物医药制备领域，涉及一种催化阿糖胞苷酯合成反应的霉菌细胞催化剂的制备方法。
背景技术
阿糖胞苷是一类非天然核苷，属于脱氧胞嘧啶核苷类似物，具有很高的抗白血病活性，是临床上用于治疗急性骨髓性白血病最有效的化疗药物之一。但其在临床存在口服利用度低，半衰期短，毒副作用大等缺点。阿糖胞苷酯是阿糖胞苷的前药之一，其通过酰化阿糖胞苷糖基部分的羟基而得。药理学试验结果表明，阿糖胞苷酯类衍生物比阿糖胞苷本身更适合于系统或者局部恶性肿瘤治疗,尤其对于网状内皮系统和中枢神经系统中的恶性肿瘤，疗效更显著。此外阿糖胞苷羧酸酯类衍生物在治疗实体肿瘤中也表现出良好的活性，因此，其作为新型抗肿瘤药物已引起了人们的广泛关注。
目前阿糖胞苷酯的合成均采用化学催化剂或者离体酶催化剂。由于糖环上羟基众多，且反应活性相似，采用化学催化剂时存在的主要问题是反应区域选择性很低,易产生大量的副产物及含碱废液，对环境造成严重污染。酶催化剂较之化学催化剂更为绿色，且区域选择性高，反应条件温和，但是由于酶的分离纯化过程复杂且在此过程中酶活性有部分损失，在立体环境中不稳定，易失活等缺点，且酶的价格昂贵，造成酶法反应成本较高，这些方面均严重制约了其的工业化应用。因此，研究开发新型绿色催化剂用于阿糖胞苷酯的制备具有重大的现实意义。
发明内容
本发明针对现有用于阿糖胞苷酯合成的催化剂之不足，目的在于提供一种的具有催化阿糖胞苷酯合成活性的霉菌细胞催化剂的制备方法。其制备方法简单易操作，原材料价廉易购买，不涉及酶的分离纯化。所制备的可催化阿糖胞苷酯合成反应的细胞催化剂其区域选择性可达50%-90%。从而克服了传统化学方法的选择性低导致底物利用率低，产物纯度低，易生成副产物等缺点。同为绿色，反应条件温和的生物催化剂，细胞催化剂较之离体酶催化剂具有稳定性高，价廉、易获取的优点。
本发明目的通过以下技术方案来实现：
一种催化阿糖胞苷酯合成反应的霉菌细胞催化剂的制备方法，包括以下步骤：
1）将霉菌孢子接种至含0.5g/L~50g/L产酶诱导剂的液体基础培养基中，接种量为1×103~1×1012个/L，培养条件为10℃~45℃，培养时间为10h~200h；
2）收集菌体，洗涤，抽滤或冷冻干燥菌体，得到催化阿糖胞苷酯合成反应的霉菌细胞催化剂。
所述的液体基础培养基的成分为：1g/L 酵母浸膏, 5g/L (NH4)2SO4，1g/L K2HPO4，0.2g/L MgSO4·7H2O，0. 5g/L~50g/L产酶诱导剂。
所述产酶诱导剂包括糖类化合物、饱和植物油脂、不饱和植物油脂、脂肪酸、Tween系列或Span系列中的一种或两种。
所述霉菌包括米曲霉（Aspergillus oryzae）、米根霉（Rhizopus oryzae）、华根霉（Rhizopus chinensis）、白地霉（Geotrichum candidum）、总状毛霉（Mucor racemosus）或米黑根毛霉（Rhizomucor miehei）。
所述洗涤为用蒸馏水或pH7.0的缓冲液洗涤后再用丙酮洗涤1~3次。
所述的缓冲液是pH7.0，0.1mol/L的K2HPO4/KH2PO4缓冲液。
步骤（3）采用抽滤或冷冻干燥去除水分，得到具有催化活性的细胞催化剂。
本发明所用的霉菌包括米曲霉（Aspergillus oryzae），米根霉（Rhizopus oryzae），华根霉（Rhizopus chinensis），白地霉（Geotrichum candidum），总状毛霉（Mucor racemosus），米黑根毛霉（Rhizomucor miehei）为Aspergillusoryzae，所得到的霉菌细胞催化剂是在有机介质中催化阿糖胞苷酯化反应的霉菌全细胞催化剂。
本发明所用霉菌公众可以从菌种中心购买或自己筛选得到。
本发明与现有的技术相比具有如下的优点：
1. 霉菌细胞催化剂为生物催化剂，较之化学催化剂反应条件温和、环境友好；区域选择性高较之酶催化剂成本更为低廉。
2.霉菌细胞催化剂营养要求低，易培养，制备简单易操作，成本低，免去了利用离体酶催化剂需要分离纯化及固定化等步骤，细胞体相当于酶的天然保护层，可有效避免酶在反应体系中失活；
3.本发明制备方法简单易操作，原材料价廉易购买，不涉及酶的分离纯化。所制备的细胞催化剂的区域选择性可达50%-90%。从而克服了传统化学方法的选择性低导致底物利用率低，产物纯度低，易生成副产物等缺点。
具体实施方式
为更好理解本发明，下面结合实施例对本发明做进一步地详细说明，但是本发明要求保护的范围并不局限于实施例表示的范围。
实施例1
将米曲霉（Aspergillus oryzae GIM3.30）孢子接种至将孢子接种至液体基础培养基中，接种量为1×103个/L，培养条件为20℃，培养基成分为：0.1g/L 酵母浸膏, 0.5g/L (NH4)2SO4，0.1g/L K2HPO4，0.02g/L MgSO4·7H2O，0.05g/L的蓖麻油。培养基制备方法为准确称量各组分，倒入锥形瓶后，然后加入蒸馏水，加热至各成分溶解，将瓶密封灭菌备用。培养60h后，冷冻干燥后。使用前将干菌丝于30℃真空干燥10min。该细胞催化剂用于阿糖胞苷与乙酸乙烯酯的酰化反应中，在1mL的阿糖胞苷酯化反应体系中添加0.05g的干菌丝作为催化剂，阿糖胞苷用量为5mg，反应体系为75% ( v/v）吡啶-正己烷,反应温度为30℃，振荡速度180rpm，常压下反应24h。产物区域选择性方法：3’-阿糖胞苷乙酯的产量/阿糖胞苷酯的总产量。此时，区域选择性为80%。
本发明方法得到的催化剂的区域选择性是以阿糖胞苷与乙酸乙烯酯区域选择性酰化反应进行测定，反应条件为在1mL的阿糖胞苷酯化反应体系中添加0.05g的干菌丝作为催化剂，阿糖胞苷用量为5mg，反应体系为75% ( v/v）吡啶-正己烷,反应温度为30℃，振荡速度180rpm，常压下反应24h。反应区域选择性表征为：3’-阿糖胞苷乙酯的产量/阿糖胞苷酯的总产量。
实施例2
将米根霉（Rhizopus oryzae 3.4826）孢子接种至培养瓶，接种量为1×105个/L，培养条件为10℃，培养基成分为： 0.1g/L 酵母浸膏, 0.5g/L (NH4)2SO4，0.1g/L K2HPO4，0.02g/L MgSO4·7H2O，1g/L的橄榄油。培养10h后，冷冻干燥后。使用前将干菌丝于30℃真空干燥10min。 该细胞催化剂用于阿糖胞苷乙酰化反应中，区域选择性为70%。
实施例3
将华根霉（Rhizopus chinensis GIM3.114）孢子接种至培养瓶，接种量为1×1012个/L，培养条件为45℃，培养基成分为：0.1g/L 酵母浸膏, 0.5g/L (NH4)2SO4，0.1g/L K2HPO4，0.02g/L MgSO4·7H2O，0.5g/L的Span60。培养100h后，冷冻干燥后。使用前将干菌丝于30℃真空干燥10min。 该细胞催化剂用于阿糖胞苷乙酰化反应中，催化活性为66%。
实施例4
将白地霉（Geotrichum candidum GIM2.12）孢子接种至培养瓶，接种量为1×108个/L，培养条件为30℃，培养基成分为：0.1g/L 酵母浸膏, 0.5g/L (NH4)2SO4，0.1g/L K2HPO4，0.02g/L MgSO4·7H2O，0.5g/L的Tween 60。培养200h后，冷冻干燥后。使用前将干菌丝于30℃真空干燥10min。 该细胞催化剂用于阿糖胞苷乙酰化反应中，区域选择性为84%。
实施例5
将总状毛霉（Mucor racemosus）孢子接种至培养瓶，接种量为1×108个/L，培养条件为30℃，培养基成分为：0.1g/L 酵母浸膏, 0.5g/L (NH4)2SO4，0.1g/L K2HPO4，0.02g/L MgSO4·7H2O， 5g/L的Tween 20。培养200h后，用水洗涤后，丙酮洗涤1次。 该细胞催化剂用于阿糖胞苷乙酰化反应中，区域选择性为70%。
实施例6
将米黑根毛霉（Rhizomucor miehei GIM3.86）孢子接种至培养瓶，接种量为1×108个/L，培养条件为40℃，培养基成分为：0.1g/L 酵母浸膏, 0.5g/L (NH4)2SO4，0.1g/L K2HPO4，0.02g/L MgSO4·7H2O， 2g/L的麦芽糖。培养200h后，用K2HPO4/KH2PO4缓冲液洗涤后，丙酮洗涤3次。 该细胞催化剂用于阿糖胞苷乙酰化反应中，催化活性为58%。
实施例7
将米曲霉（Aspergillus oryzae 3.5232）孢子接种至培养瓶，接种量为1×108个/L，培养条件为30℃，培养基成分为：0.1g/L 酵母浸膏, 0.5g/L (NH4)2SO4，0.1g/L K2HPO4，0.02g/L MgSO4·7H2O， 5g/L的Tween 60 和橄榄油混合物。培养200h后，用水洗涤后，丙酮洗涤1次。 该细胞催化剂用于阿糖胞苷乙酰化反应中，区域选择性为90%。
Claims (3)
1.一种催化阿糖胞苷酯合成反应的霉菌细胞催化剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）将霉菌孢子接种至含0.5g/L~50g/L产酶诱导剂的液体基础培养基中，接种量为1×103~1×1012个/L，培养条件为10℃~45℃，培养时间为10h~200h；所述霉菌及其相应的产酶诱导剂组合为：米曲霉（Aspergillus oryzae GIM3.30）及其产酶诱导剂蓖麻油；或者米曲霉（Aspergillus oryzae CGMCC3.5232）及其产酶诱导剂Tween 60 /橄榄油混合物；或者白地霉（Geotrichum candidum GIM2.12）及其产酶诱导剂Tween 60；所述的液体基础培养基的成分为：1g/L 酵母浸膏, 5g/L (NH4)2SO4，1g/L K2HPO4，0.2g/L MgSO4·7H2O，0. 5g/L~50g/L产酶诱导剂；
2）收集菌体，洗涤，抽滤或冷冻干燥菌体，得到催化阿糖胞苷酯合成反应的霉菌细胞催化剂。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述洗涤为用蒸馏水或pH7.0的缓冲液洗涤后再用丙酮洗涤1~3次。
3.根据权利要求2中所述的制备方法，其特征在于：所述的缓冲液是pH7.0，0.1mol/L的K2HPO4/KH2PO4缓冲液。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201110119930.5A CN102242068B (zh) | 2011-05-10 | 2011-05-10 | 催化阿糖胞苷酯合成反应的霉菌细胞催化剂的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201110119930.5A CN102242068B (zh) | 2011-05-10 | 2011-05-10 | 催化阿糖胞苷酯合成反应的霉菌细胞催化剂的制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102242068A CN102242068A (zh) | 2011-11-16 |
| CN102242068B true CN102242068B (zh) | 2014-05-07 |
Family
ID=44960316
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201110119930.5A Expired - Fee Related CN102242068B (zh) | 2011-05-10 | 2011-05-10 | 催化阿糖胞苷酯合成反应的霉菌细胞催化剂的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102242068B (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102851337B (zh) * | 2012-08-31 | 2014-04-02 | 华南理工大学 | 利用米曲霉细胞催化胞苷类化合物羟基保护反应的方法 |
| CN104726374A (zh) * | 2015-03-18 | 2015-06-24 | 华南理工大学 | 催化柚皮苷酯合成反应的细菌细胞催化剂的制备方法 |
-
2011
- 2011-05-10 CN CN201110119930.5A patent/CN102242068B/zh not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| 固液态发酵中橄榄油对Rhizopus chinensis全细胞脂肪酶的影响;孙舒扬等;《微生物学通报》;20061231;第33卷(第4期);第11页第12-36行和图2 * |
| 孙舒扬等.固液态发酵中橄榄油对Rhizopus chinensis全细胞脂肪酶的影响.《微生物学通报》.2006,第33卷(第4期),第11页第12-36行和图2. |
| 王栋.华根霉（Rhizopus chinensis）非水相合成活性脂肪酶及其酶学特性的研究.《江南大学博士学位论文》.2009,第4.2.5和4.4节. * |
| 王雅娟等.阿糖胞苷衍生物的可控选择性酶促合成与表征.《化学世界》.2010,(第8期),第486-490页. |
| 阿糖胞苷衍生物的可控选择性酶促合成与表征;王雅娟等;《化学世界》;20101231(第8期);第486-490页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102242068A (zh) | 2011-11-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102093988B (zh) | 微生物发酵生产低温脂肪酶的方法 | |
| CN101338287B (zh) | 枯草芽孢杆菌酯酶及其用于生产l-薄荷醇的应用 | |
| CN1935977B (zh) | 左旋内酯水解酶产生菌及其用于制备手性羟基酸的方法 | |
| CN100558905C (zh) | 一种酶拆分制备(r)-6-羟基-8-氯辛酸乙酯的方法 | |
| CN106636290A (zh) | 一种发酵生产单葡萄糖醛酸甘草次酸的方法和应用 | |
| CN105543293A (zh) | 一种制备阿魏酸的方法 | |
| CN102250785B (zh) | 催化阿糖胞苷酯合成反应的细菌细胞催化剂的制备方法 | |
| CN102242068B (zh) | 催化阿糖胞苷酯合成反应的霉菌细胞催化剂的制备方法 | |
| CN102168036A (zh) | 微生物转化制备r-4-氯-3-羟基丁酸酯和s-3-羟基丁内酯及菌株 | |
| CN103525727B (zh) | 一种应用静息细胞转化1,3-丙二醇为3-羟基丙酸的方法 | |
| Huang et al. | Effect of ellagitannin acyl hydrolase, xylanase and cellulase on ellagic acid production from cups extract of valonia acorns | |
| CN102533685A (zh) | 一种固态发酵生产漆酶的方法 | |
| CN104651425B (zh) | 一种生物催化合成光学活性烷基内酯的方法 | |
| CN102286565B (zh) | 一种茶黄素单体的制备方法 | |
| CN104726375A (zh) | 催化秦皮甲素酯交换反应的细菌细胞催化剂的制备方法 | |
| DK1498488T3 (da) | Fremgangsmåde til fremstilling af lipid, der indeholder stærkt umættet fedtsyre | |
| CN105112320B (zh) | 一种唐菖蒲伯克霍尔德菌株及其发酵生产碱性脂肪酶的方法 | |
| CN102409068B (zh) | 一种(3aS,6aR)-生物素手性内酯的制备方法 | |
| CN102071231B (zh) | 一种微生物转化制备s-(+)-3-羟基四氢呋喃的方法 | |
| CN104726374A (zh) | 催化柚皮苷酯合成反应的细菌细胞催化剂的制备方法 | |
| CN107034261B (zh) | 炭黑曲霉转化黄芪甲苷制备6-o-葡萄糖-环黄芪醇的方法 | |
| CN108374029A (zh) | 一种促进牛樟芝液态发酵生产Antrodin C的方法 | |
| CN101709281A (zh) | 利用肠杆菌发酵生产2,3-丁二醇的方法 | |
| JP2011244756A (ja) | セルロース分解促進剤及びその用途 | |
| CN102229919B (zh) | 一种利用废渣固态发酵生产脂肪水解酶的制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20140507 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |