CN102225074A - 一种治疗春季过敏和过敏性哮喘的注射剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种治疗春季过敏和过敏性哮喘的注射剂，以细胞为主要成分，每毫升注射用剂中细胞成分的含量为1000万个至5000万个；所述细胞成分是用提取人的骨髓间充质干细胞经过体外低血清或无血清培养和扩增，收集得到的人骨髓间充质干细胞细胞，将收集到的骨髓间充质干细胞制备成可以用做临床静脉滴注的注射剂，该注射剂用于治疗春季过敏和过敏性哮喘疾病。本发明提供了这种注射剂的制备方法。本发明的优点是：注射后可七天内出现明显的临床疗效，且作用持久，治疗程序简便。
Description
技术领域
本发明涉及一种治疗春季过敏和过敏性哮喘的注射剂及其制备方法。
背景技术
长期以来治疗春季过敏与过敏性哮喘就是医学界的一个难题，目前多采用激素抗过敏与消炎治疗，但疗效较差，症状轻者可起到一定的治疗作用，但对于反复发作者只能对症治疗，且效果很差。春季过敏与过敏性哮喘均属于自身免疫性疾病，其发病机理在于春季过敏与过敏性哮喘是由多种细胞特别是肥大细胞、嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞参与的慢性气道与皮肤炎症，免疫病理学已经证实在皮肤与呼吸道的慢性过敏性炎症是相似的，均有Th2细胞、肥大/嗜碱细胞、嗜酸性粒细胞以及IgE的参与，参与的细胞因子如IL-4等炎性化学介质。在敏感个体，与IgE结合的组织肥大细胞和嗜碱性粒细胞，在接触变应原后，遂被激活，释放组织胺、白三烯和其他介质。这种反应轻者可引起春季过敏，重者可引起速发性的鼻部刺激症状，如由神经介导的打喷嚏和流鼻涕，由血管充血引起的鼻塞等。在下呼吸道的速发症状是支气管痉挛和黏液的高分泌，引起咳嗽，呼吸困难，胸闷和喘息。
发明内容
为了克服上述治疗春季过敏与过敏性哮喘的药物的不足，本发明的目的在于提供一种见效快、疗效持久的治疗春季过敏与过敏性哮喘的注射剂。
本发明的另一个目的是提供这种注射剂的制备方法。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种治疗春季过敏与过敏性哮喘的注射剂，该剂主要由细胞成分组成，每毫升注射用剂中细胞成分的含量为1000万个至5000万个；所述细胞成分是从人骨髓中提取、纯化出的间充质干细胞经体外低血清或无血清培养和扩增后收集得到的骨髓间充质干细胞。
本发明所述的注射剂除了细胞成分，还可以含有一些辅助成分，所述辅助成分可以是本领域常见的能够做为细胞溶剂的成分，如维生素、葡萄糖、等渗生理盐水等等。
此外，本发明还提供了一种所述治疗春季过敏与过敏性哮喘的注射剂的制备方法，该方法步骤为：所述细胞成分是从人骨髓中提取、纯化出的间充质干细胞经体外低血清或无血清培养和扩增后收集得到的骨髓间充质干细胞。
本发明所采集的骨髓组织是从人的骨髓中抽取得到的。
在本发明所提供的注射剂制备方法中，将来源于人骨髓的间充质干细胞提取、纯化，再经体外低血清或无血清培养和扩增后收集得到的骨髓间充质干细胞。
取标本与细胞培养过程采用通用的方法。
注射剂配制：将培养数量达到要求的细胞首先使用胰蛋白酶进行消化处理，使其脱离培养皿底面，在使用无外源性蛋白的DMEM清洗数次，去除外源性生长因子和活性物质。再将收集到的细胞直接加入到5％的含氨基酸、生理盐水及维生素的葡萄糖注射液中，混匀，配成注射剂，每150毫升注射剂中细胞成分的总个数为1000万个至5000万个。
治疗步骤：将注射剂进行静脉滴注，40分钟内输完。
与现有治疗手段相比，本发明的注射剂具有治疗简便、无毒副作用、见效快，疗效持久等特点。
附图说明
图1是培养成功的细胞在100倍光学显微镜下形态学照片；
图2是本发明的一个具体实施例的治疗春季过敏与过敏性哮喘的注射剂在包装袋中的照片。
具体实施方式
下面进一步详细说明本发明所提供的治疗春季过敏与过敏性哮喘疾病的注射剂及其制备方法，但本发明并不因此而受到任何限制。
实施例：一种治疗春季过敏和过敏性哮喘的注射剂的制备
一.骨髓样品的抽取
常规手术消毒后抽取患者骨髓血，加抗凝剂后离心去脂肪层，加生理盐水稀释后三次离心，洗涤细胞后得到的细胞进行培养。
二.细胞悬液的制备
配制注射剂：将培养数量达到要求的细胞首先使用胰蛋白酶进行消化处理，使其脱离培养皿底面，再使用无外源性蛋白的DMEM清洗3次。将收集到的细胞加入到5％的含氨基酸的葡萄糖注射液中，混匀，配成注射剂，每毫升注射用剂中细胞成分的总个数为1000万至5000万个。
病毒检测：培养4周后的细胞进行HIV和肝炎病毒的检验，确定此为无病毒细胞。
免疫反应测试：第4周将0.1ml细胞注射液对受术者进行皮试(同青霉素皮试方法)，无免疫反应。
成品检测：
1)外观：注射液为无色混悬液。
2)本品中细胞分类检定：
骨髓间充质干细胞：采用细胞形态学方法观察。
3)无菌试验：按《中国生物制品规程》(2000版)通则《生物制品无菌试验规程》A/B项进行，结果符合无菌要求。
三.治疗
用于春季过敏和过敏性哮喘病例各1例。
1.治疗前检查，各项指标均正常，包括：血尿便常规、心电图、肝肾功能、HIV、HbsAg。
2.将注射部位用常规消毒消毒。
3.进行静脉点滴输液。
四、禁忌：
孕妇慎用。
五、效果描述
输液后三天症状减轻，一周后明显减轻，两周后症状基本消失。
Claims (3)
1.一种治疗春季过敏和过敏性哮喘的注射剂，该注射剂主要由人骨髓间充质干细胞成分组成，每毫升注射剂中细胞成分的含量为1000万至5000万个；所述细胞成分是从人骨髓中提取、纯化出的间充质干细胞经体外低血清或无血清培养和扩增后收集得到的骨髓间充质干细胞。
2.一种制备权利要求1所述的治疗春季过敏和过敏性哮喘的注射剂的方法，包括以下步骤：
(1)采用人骨髓为来源分离、纯化出的骨髓间充质干细胞进行体外低血清或无血清培养和扩增，收集所得到的大量骨髓间充质干细胞；
(2)将收集到的骨髓间充质干细胞制备成治疗春季过敏或过敏性哮喘的注射剂；每毫升该注射剂中细胞成分的含量为1000万个至5000万个。
3.将收集到的细胞直接加入到5％的含氨基酸、生理盐水及维生素的葡萄糖注射液中，混匀，配成注射剂150ml注射液。治疗过程为：每袋注射液150ml，经静脉滴注，每40天注射一次，三次注射为一个疗程。
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| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
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