CN102406858B

CN102406858B - 一种消毒抗菌剂

Info

Publication number: CN102406858B
Application number: CN 201110393033
Authority: CN
Inventors: 向飞丹州; 茆灿泉; 李迪强
Original assignee: XIANGFEI DANZHOU
Priority date: 2011-12-01
Filing date: 2011-12-01
Publication date: 2013-07-10
Anticipated expiration: 2031-12-01
Also published as: CN102406858A

Abstract

本发明提供一种消毒抗菌剂，其特征在于由下列质量份的组份组成：红花20～40克，芸香草10～20克，紫草20～30克，刺五加20～30克，苦天茄10～20克，酒精1000毫升。在临床实践和总结分析我国民族药用植物传统知识的基础上，创造性地以红花、芸香草等多种民族药用植物为主要原料，结合现代天然产物提取技术与生物工程发酵技术，研制成功了纯天然药用植物提取液，在抗菌消毒、创口愈合、皮肤溃烂修复、止痛、抗肿瘤等多种疾病或领域均具有良好的治疗效果或康复作用。

Description

一种消毒抗菌剂

技术领域

本发明涉及一种消毒抗菌剂，尤其是一种用纯天然药用植物提取液制备的，用于抗菌消毒、创口愈合、皮肤溃烂修复、止痛、抗肿瘤等临床治疗领域中的消毒抗菌药物，属于医药卫生用品技术领域。

背景技术

现代文明与科学技术的飞速发展，使得我们人类的生活水平与生活质量得到了极大的提高，人类健康有了较大的进步与保障。但至今包括恶性肿瘤、心脑血管疾病、糖尿病、免疫缺陷等多种疾病仍未有效攻克，寻求早期诊断及有效治疗的手段与药物一直是医药工作者追求的主要目标。中华民族历史悠久，中华医学博大精深，现代科学飞速发展，将传统医药学知识与现代医药生物技术相结合，有望在我国创新药物研发领域走出一条新的和有效途径。

中国是一个生物资源大国，拥有全球10%的生物遗传资源，动、植物、微生物26万种。中国不仅拥有丰富的药用植物资源，而且在民间药用实践中取得了大量的宝贵经验与传统知识。但如何有效利用与开发我国民族药用植物资源，更好地回报和造福人类，一直是一个重大的研究难题。将民族传统医学知识与现代医学生物技术与方法相结合，是解决本难题的一条可能有效途径。本发明正是在该思路的基础上创建的。本发明的研究者们在临床实践的基础上，总结和分析我国民族药用植物传统知识，创造性地以红花、芸香草等多种民族药用植物为主要原料，结合现代天然产物提取技术与生物发酵技术，研制成功了一种纯天然民族药用植物提取液。已有的实验研究结果显示，本发明提供的消毒抗菌剂在抗菌消毒、创口愈合、皮肤溃烂修复、止痛、抗肿瘤等多种疾病或领域均具有良好的治疗效果或康复作用，目前尚未见国内外同类研究报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种在抗菌消毒、创口愈合、皮肤溃烂修复、止疼、抗肿瘤等多种疾病或领域，均具有良好的治疗效果或康复作用的纯天然民族药用植物提取物——消毒抗菌剂。

本发明提供的是这样一种消毒抗菌剂，其特征在于由下列质量份的组份组成：

红花 20～40克

芸香草 10～20克

紫草 20～30克

刺五加 20～30克

苦天茄 10～20克

酒精 1000毫升。

其中，红花性味辛、温，入心、肝经，具有活血通经，去瘀止痛的功效；芸香草性味辛苦，凉，具有解表，利湿，平喘，止咳的功效；紫草性味苦、寒，入心包络、肝经，具有凉血，活血，清热，解毒的功效；剌五加性味辛、微苦、温，入脾、肾经，具有益气健脾，补肾安神的功效；苦天茄，又名刺天茄，其性味微苦，寒，具有消炎解毒，镇静止痛的作用。

所述酒精为市购医用级别的酒精。

本发明所述消毒抗菌剂通过下列方法制备：

A、按下列质量比备料：

红花 20～40克

芸香草 10～20克

紫草 20～30克

刺五加 20～30克

苦天茄 10～20克

酒精 1000毫升；

B、将上述红花、芸香草、紫草、刺五加、苦天茄粉碎成粉，并混合均匀，加入酒精没过原料粉，经常规浸提后，过滤得滤液和滤渣，滤渣再加入酒精至没过原料渣，经常规浸提后，过滤得滤液和液渣，合并两次滤液；

C、在步骤B的滤渣中加入等量酒精，发酵5～9天，过滤得滤液和滤渣，滤渣继续加入等量酒精发酵4～6天，过滤后，合并两次发酵滤液，弃渣；

D、将步骤B的滤液与步骤C的发酵滤液合并后，加入酒精补至1000毫升，混合均匀后，按常规进行灭菌处理，即得消毒抗菌剂。

本发明具有下列优点和效果：本发明以全天然植物药为原料，经常规加工工艺提取其有效成份后，再经过严格的精制工艺，获得本消毒抗菌剂，该消毒抗菌剂具有以下功效：

A．抗菌及消毒作用。使伤口腐烂组织得到清除，防止伤口感染，同时还具有很强的抗菌，如抗绿脓杆菌、抗真菌，以及消炎、收敛、脱水等作用。可用于人体体表（皮肤、粘膜）消毒，清洁伤口，肿瘤手术创口，肿瘤放射治疗引起的皮肤损伤，各种微创手术创面，高血压所致动脉硬化症，刀口感染（缝合破裂），创伤感染或化脓，以及各类创伤引起的创面感染、皮肤溃烂、组织坏死干疽、血液循环障碍型下肢溃烂、褥疮及其它压力性溃疡、糖尿病足等。

B. 细胞及组织再生与伤口愈合作用。能使久未愈合的伤口，或者糖尿病并发组织坏死，或者肌肉组织坏疽，或其他感染所致的坏死细胞等，迅速恢复组织细胞的再生功能，促使受损组织或器官的创面产生干细胞，恢复原有组织或器官的细胞增殖分化能力，从而使伤口的细胞迅速分裂，并产生与原有组织相同的新细胞，在干细胞分化出与原有组织相同的细胞时，也修复了局部受损免疫系统，增强了局部抗感染的能力，血管组织的营养供应也得以恢复，从而达到快速愈合伤口的目的。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步描述。

实施例1

A、按下列质量比备料：

红花 20克

芸香草 20克

紫草 30克

刺五加 20克

苦天茄 10克

酒精 1000毫升；

B、将上述红花、芸香草、紫草、刺五加、苦天茄粉碎成粉，并混合均匀，加入质量浓度为75%的医用酒精没过原料粉，经常规浸提后，过滤得滤液和滤渣，滤渣再加入质量浓度为75%的医用酒精至没过原料渣，经常规浸提后，过滤得滤液和液渣，合并两次滤液；

C、在步骤B的滤渣中加入等量的质量浓度为75%的医用酒精，发酵5天，过滤得滤液和滤渣，滤渣继续加入等量的质量浓度为75%的医用酒精发酵6天，过滤后，合并两次发酵滤液，弃渣；

D、将步骤B的滤液与步骤C的发酵滤液合并后，加入质量浓度为90%的医用酒精酒精补至1000毫升，混合均匀后，按常规进行灭菌处理，即得消毒抗菌剂。

实施例2

A、按下列质量比备料：

红花 40克

芸香草 10克

紫草 20克

刺五加 30克

苦天茄 20克

酒精 1000毫升；

C、在步骤B的滤渣中加入等量的质量浓度为75%的医用酒精，发酵9天，过滤得滤液和滤渣，滤渣继续加入等量的质量浓度为75%的医用酒精发酵4天，过滤后，合并两次发酵滤液，弃渣；

实施例3

A、按下列质量比备料：

红花 30克

芸香草 15克

紫草 25克

刺五加 25克

苦天茄 15克

酒精 1000毫升；

C、在步骤B的滤渣中加入等量的质量浓度为75%的医用酒精，发酵7天，过滤得滤液和滤渣，滤渣继续加入等量的质量浓度为75%的医用酒精发酵5天，过滤后，合并两次发酵滤液，弃渣；

D、将步骤B的滤液与步骤C的发酵滤液合并后，加入质量浓度为90%的医用酒精补至1000毫升，混合均匀后，按常规进行灭菌处理，即得消毒抗菌剂。

实施例4

A、按下列质量比备料：

红花 20 克

芸香草 10 克

紫草 20 克

刺五加 20 克

苦天茄 10 克

酒精 1000毫升；

按与实施例3相同的步骤和方法，制得消毒抗菌剂。

实施例5

A、按下列质量比备料：

红花 40 克

芸香草 20 克

紫草 30 克

刺五加 30 克

苦天茄 20 克

酒精 1000毫升；

按与实施例3相同的步骤和方法，制得消毒抗菌剂。

为表明本发明的消毒抗菌剂的多种功效，本发明通过下列试验加以证明：

（一）、皮肤用药急性毒性试验

1.试验目的

研究本发明消毒抗菌剂对家兔皮肤局部用药的急性毒性

2.试验材料

动物：新西兰种白色家兔，由昆明医学院动物科提供。

药物：受试组使用本发明实施例2的消毒抗菌剂；对照组使用40%乙醇。

3.试验方法

选健康新西兰种白色家兔12只，雌雄各半，体重1.98±0.20kg，各兔背部两侧对称区域去毛50cm²，观察一天，分笼饲养，随机分为3组，其中：第一组为对照组，使用体积浓度为40%的乙醇；第二组为实施例2的消毒抗菌剂，用临床等效量浓度（低剂量）；第三组为实施例2的消毒抗菌剂，用临床等效量5倍量浓度（高剂量）。

1）完整皮肤试验：三组用药剂量均为1ml∕次，24小时内间歇用药共计3次，受试药物均匀涂于左侧脱毛区（完整皮肤），并用无菌纱布固定，受试药24小时后，洗除受试药物，并于1、24、48、72小时至第七日，每日观察记录各兔体重、皮肤毛发、眼和粘膜的变化以及呼吸、中枢神经系统、四肢活动等情况。

2）破损皮肤试验：在上述1）试验的第八天，对各兔右侧脱毛区皮肤进行消毒后，用手术刀在各免右侧脱毛区皮肤上划等面积“井”字，以渗血为度，作为破损皮肤区域，并在该区域用药，其用药量及观察方法同1）的完整皮肤试验。

4.结果

各组试验结果见表1

表1

Figure 2011103930333100002DEST_PATH_IMAGE001

经t检验，p﹥0.05，证明各组间无显著性差异

试验结果表明，本发明实施例2的消毒抗菌剂高、低剂量组与对照组对完整皮肤及破损皮肤家兔的活动、饮食、皮毛光泽和体重无任何影响，观察14天内，未出现任何急性毒性反应。

（二）、临床试验报告

一、资料和方法

1、临床资料

收集整理门诊病历共210例，其中：各种微创手术创口 82例，刀口感染、创伤感染或化脓80 例，血液循环障碍型下肢溃烂48例。将上述观察对象随机分为两组，两组患者的一般情况详见表2。

2、治疗方法

对照组使用云南白药气雾剂，并按其说明书所述服用；

治疗组使用本发明实施例3的消毒抗菌剂，一日二次，每次10ml；

且在治疗期间停止使用其它相关药物。

3、观察方法

用药期间每天观察一次，包括症状、体征改善情况、不良反应等。

二、疗效评判标准

1、疗效标准

按照国家中医药管理局发布的《中医病症诊断疗效标准》的有关病症项下的规定执行。

2、统计学方法

计数资料采用X²检验，计量资料采用t检验。

总治愈率=治愈率+好转率

三、结果

1) 临床试验结果见表3，表4。可见本发明消毒抗菌剂各处理治疗组治愈率大大提高，与阳性对照相比，具有显著的治疗和改善作用。

2）不良反应

治疗组病人和对照组病人均无不良反应发生。

表2 治疗组与对照组二组人员的一般情况（n=210）

经X²检验，两组年龄、性别、病情均具有可比性（p>0.05）

表3 症状改善情况

治疗组疗效明显优于对照组（p>0.01）

表4、症状改善情况及结果对照

四、讨论

本发明消毒抗菌剂对皮肤无毒，无刺激，具有很强的抗白色念珠球菌（抗真菌）、抗绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌等作用，可用于清除伤口腐烂组织、消除感染，更为突出的是它还能促进伤口愈合，使久未愈合的伤口或其他感染所致的老旧组织内空洞迅速起动组织的细胞再生功能，达到愈合伤口的目的。本品主要用于人体体表（皮肤、粘膜）消毒，清洁伤口，对肿瘤手术创口，肿瘤放射治疗引起的皮肤损伤，各种微创手术创面，高血压所致动脉硬化症、刀口感染（缝合破裂），创伤感染或化脓，各类创伤引起的创面感染，皮肤溃烂，组织坏死干疽，血液循环障碍型下肢溃烂，褥疮及其它压力性溃疡、糖尿病足等症具有很好的疗效。

（三）、甲醛致痛动物镇痛试验

1、试验目的

研究本发明消毒抗菌剂对小鼠疼痛模型的镇痛作用及生化作用机理。

2、试验试剂与材料

试验动物：昆明种小鼠，购自四川大学华西医院基因工程小鼠中心。阳性对照药物：雪上一枝蒿速效止痛搽剂。β内啡肽（β-EP）酶联免疫检测试剂盒：美国R.D公司。一氧化氮（NO）试剂盒：南京建成生物工程研究所。

3、试验方法

1) 给药方式

药液与甘油按体积比4：1混合均匀，搽涂于小鼠前后足及尾部皮肤，连续6天。

2) 试验分组设置

选用18~22g雌性小鼠。试验前12小时禁食，不禁水。将30只小鼠随机分为3组，分别为阴性对照组、阳性对照组、本发明实施例5消毒抗菌剂组，每组10只。

3）甲醛疼痛模型行为学观察

每组于末次给药后60min时，足趾注射5%甲醛溶液50μL，立即补涂药一次。以每1min为单位，观察记录60min内小鼠出现抬足、舔足等痛反应次数，并评分。计算单位分钟内痛反应评分均值、痛反应评分累积值，绘制时效曲线，组间对比。

评分标准：

2 抬足、舔足反应每次记0.1分。小鼠运动时任一爪不接触地面、静止时任一爪抬离地面等视为抬足反应；小鼠舔舐任一爪、尾部、以前爪瘙痒等均视为舔足反应。

2 狂躁、咬尾反应每次记1分。小鼠快速运动、往复运动、抓咬鼠笼等均视为狂躁反应；抓咬尾部、任一爪、臀部等均视为咬尾反应。

4）分子检测

2 采血及血清的制备

采用常规眼球取血法采血，血液离心获得血清，-70℃保存备用。

2 血清中一氧化氮（NO）浓度的测定

按照试剂盒说明方法测定。简要地，分别在空白管、标准管、测定管中加入0.1mL双蒸水、0.1mL 100μmol/L标准应用液、0.1mL血清。在各管内各加入0.4mL混合试剂，混匀，37℃准确水浴60min。各加入0.2mL试剂3，0.1mL试剂4。离心，取0.5mL上清显色，测定各管吸光度。

2 血清中β内啡肽浓度的测定

按照试剂盒说明方法测定。简要地，将标准品和待测样本按每孔100μL加入细胞板孔中，然后分别加入50μL酶联亲和物，37℃孵育反应60min，去上清、洗涤。分别加入底物Ⅰ和Ⅱ各50μL，避光反应15min后终止反应。450nm波长下酶标仪测定OD值。

4．试验结果

1）镇痛行为学测定

表5 小鼠甲醛测痛模型行为观察结果

* 60min时，提取液组评分值高于阳性药物组；**P＜0.05

从甲醛诱导的疼痛模型行为观察结果如表5中可以看出，本发明实施例5的消毒抗菌剂组较阴性对照组相比，其疼痛反应评分各时间点均有显著的降低（P＜0.05）；本发明实施例5的消毒抗菌剂组评分同时低于阳性药物对照组（P＜0.05），可见本发明实施例5的消毒抗菌剂在甲醛模型上的镇痛作用。

从甲醛诱导的疼痛模型的行为观察，在连续60min内，本发明实施例5的消毒抗菌剂组和阳性对照组均具有持续镇痛作用。

结论：经行为学判定和两项生化检测，确认本发明实施例5消毒抗菌剂在小鼠甲醛测痛模型上具有一定的镇痛作用。

（四）体外肿瘤细胞抑制试验

1、试验目的

研究本发明消毒抗菌剂对肿瘤细胞生长的抑制作用。

2、试验材料

骨髓瘤MG63（ATCC）细胞株，西南交通大学生命科学与工程学院保存。DNEM培养基、谷氨酰胺、青霉素、链霉素等购自Invitrogen，FBS购自Hyclone。

3、试验方法

MG63细胞的复苏、培养按常规操作(含10%FBS的DMEM，2 mmol /L 谷氨酰胺，100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素)于37℃，5%CO2的FORMA CO2培养箱中培养。分别接种5×10³ 的MG63细胞至96孔细胞培养板中，培养待细胞达到70％汇合度时，分别加入浓度梯度0%、0.05%、0.1%、0.5%、1%、5%的发明实施例4消毒抗菌剂，每个处理重复5个孔。处理1天后，每日观察细胞生长情况，连续观察3天，荧光倒置显微镜下镜检观察细胞生长情况。

4、试验结果

根据显微镜下细胞生长观察结果可知，随着处理时间的增加，细胞死亡数增加。随着消毒抗菌剂浓度的增加，细胞死亡数增加，0.1％的发明实施例4消毒抗菌剂加入量，即可有效抑制和杀伤MG63细胞的生长。

（五）移植肿瘤抑制试验

1、试验目的

研究本发明消毒抗菌剂对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用。

2、试验材料

小鼠C57BL/6共15只，雄性，4－6周龄，SPF级，体重18g左右。小鼠肺癌细胞系LLC。DNEM培养基、谷氨酰胺、青霉素、链霉素等购自Invitrogen，FBS购自Hyclone。

3、试验方法

1）肿瘤模型建立：LLC细胞的复苏、培养按常规操作。LLC细胞溶于无血清培养基，LLC细胞浓度为5×10⁶/ml，按每个接种点0.2ml皮下注射到小鼠腋下。

2）实验分组：A，阴性对照组为3只。B，阳性对照组为3只，造模7d后注射环磷酰胺，环磷酰胺给药剂量为60mg/kg。C，本发明实施例3消毒抗菌剂组为3只，造模7d后给药，早晚两次。

3）实验记录：接种肿瘤细胞后，每天观察荷瘤鼠，记录存活时间。每隔一天用游标卡尺测量肿瘤的长短径并计算出平均直径，计算公式为MD=(A+B)/2，其中，MD为肿瘤平均直径,A为短径，B为长径，以mm为单位,并算出瘤体积，公式为B×A²/2。造模三周后处死小鼠，剥离取出瘤块，称重。

4．试验结果

与空白对照相比，本发明实施例3消毒抗菌剂处理后荷瘤生长速度明显减慢，其处理效果略低于阳性对照环磷酰胺组，揭示本专利提取液对LLC荷瘤具有较好的抑制生长作用。

Claims

1.一种消毒抗菌剂，其特征在于由下列质量份的组份制成：

红花 20～40克

芸香草 10～20克

紫草 20～30克

刺五加 20～30克

苦天茄 10～20克

酒精 1000毫升。