CN102224924B - 含有海参皂苷的组合物及其在食品药品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了用于制备预防、改善或治疗II型糖尿病的食品或药品的组合物,其中,所述组合物包括海参总皂苷或一种海参皂苷。通过动物实验,结果表明海参总皂苷或一种海参皂苷可以明显降低空腹血糖值,显著改善胰岛素抵抗,对改善、预防或治疗II型糖尿病具有显著的效果,可将海参皂苷或海参总皂苷单独使用以及作为一种组分或辅料配合制成食品或药物。本发明中海参总皂苷的制备方法成本低,步骤较为简单,对环境产生的有机溶剂污染较小,所得海参皂苷经动物实验证实具有很好的改善、预防或治疗II型糖尿病的效果,可用于开发安全有效的改善、预防或治疗II型糖尿病的食品或药品。
Description
技术领域
本发明涉及一种功能性组合物及其在食品药品中的应用,尤其涉及一种含有海参皂苷的组合物及其在食品药品中的应用。
背景技术
糖尿病是一种多病因的代谢性疾病,特点是慢性高血糖,伴随因胰岛素分泌作用缺陷引起的糖、脂肪和蛋白质代谢紊乱。该疾病分为I型糖尿病(胰岛素依赖型糖尿病)和II型糖尿病(非胰岛素依赖型糖尿病)。其中2型糖尿病患者占糖尿病人总数的90%左右,其发病率随着社会经济的发展和生活方式的变化呈逐年上升趋势,成为仅次于心脑血管病和肿瘤的严重威胁人类健康的第三大非传染性疾病。据国际糖尿病联盟统计,2007年全球糖尿病患者达到2.46亿,预计到2025年全球将有3.80亿人受到糖尿病的困扰。随着人口老龄化进程的加速和居民生活方式的改变,我国的糖尿病患病率、致残率和死亡率呈现明显的上升趋势,因此,亟需能够治疗和改善II型糖尿病的物质。
II型糖尿病的发病中心环节是胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)。经典的胰岛素抵抗定义是:正常剂量的胰岛素产生低于正常生物学效应的一种状态,是指胰岛素靶组织对胰岛素介导的葡萄糖摄取和利用作用的抵抗,又称为胰岛素敏感性下降。它是II型糖尿病的主要特征,一旦发生胰岛素抵抗,就会出现糖耐量受损,极有可能进展为II型糖尿病,不仅如此,胰岛素抵抗也是糖尿病各种并发症的病理基础,它贯穿II型糖尿病发生、发展的始终。因此,改善胰岛素抵抗对于治疗改善II型糖尿病有着积极重要的意义。
流行病学研究表明,环境因素在II型糖尿病的发病过程中起了很重要的作用,其中饮食是主要的环境因素之一。过多的脂肪和糖类摄入无疑是造成肥胖,进而发展为糖尿病的主要途径。长期的高脂、高糖饮食可以引起实验动物糖耐受损,并出现高胰岛素血症和胰岛素抵抗,发展成为II型糖尿病,这类模型的发病机制与人类发病过程类似。在本发明中,就是通过长期高脂、高糖饮食建立II型糖尿病动物模型。
海参为棘皮动物门(Echinodermata)海参纲(Holothurioider)楯手目(Aspidochirota)动物。绝大多数营底栖生活,分布于热带和温带海洋中。自古以来,海参被视为一种名贵的滋补食品和药材,在历代医书中多有记载。近年来通过现代药理学、营养学方法对海参的生理活性进行研究,发现其具有提高免疫力,抑癌,降血脂,降血压等作用,民间流传有海参可以辅助治疗糖尿病的说法,但仅限于口头描述,缺乏系统科学的动物或临床实验依据。皂苷是海参中一种重要活性成分,但对其功能活性的研究起步较晚,其有益调节功能迫切需要开发挖掘。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是在于提供一种含有海参总皂苷的组合物,其制备方法以及在制备预防、改善或治疗II型糖尿病的食品药品中的应用,该组合物可以明显降低空腹血糖值,显著改善胰岛素抵抗,对预防、改善或治疗II型糖尿病具有显著的效果,在充分的预防、改善或治疗II型糖尿病的同时,不会带来任何的毒副作用,从而弥补现有技术上的不足。
本发明中的海参总皂苷也即海参皂苷混合物。
本发明提供了一种用于制备预防、改善或治疗II型糖尿病的食品或药品的组合物,其包括海参总皂苷或一种海参皂苷。
其中,相对于所述组合物的含量,所述海参总皂苷或一种海参皂苷的重量分数优选为0.03%以上,如果重量份数低于0.03%,则获得的组合物无法明显降低空腹血糖值,显著改善胰岛素抵抗,从而不能很好的预防、改善或治疗II型糖尿病。
其中,所述海参总皂苷包括多种海参烷型三萜皂苷,所述一种海参皂苷优选为一种海参烷型三萜皂苷。
其中,所述海参总皂苷进一步优选包括holothurin A、holothurin B、echinoside A、echinoside B、24-dehydroechinoside A、ds echinoside A、holotoxinsA、holotoxins B、holothurin A1和stichoposide E中的至少两种。
其中,所述海参总皂苷更进一步优选由holothurin A和echinoside A构成。
其中,所述一种海参皂苷进一步优选为holothurin A、holothurin B、echinoside A、echinoside B、24-dehydroechinoside A、ds echinoside A、holotoxinsA、holotoxins B、holothurin A1和stichoposide E中的一种,并进一步优选为holothurin A或echinoside A。
其中,所述海参总皂苷的制备方法可以包括以下步骤:
第一步,将海参干燥粉碎后制成粉末;
第二步,用溶剂多次加热回流抽提第一步中的海参粉末,过滤,收集各次滤液;
第三步,将所述的收集的滤液进行浓缩,得到浸膏;
第四步,将所述浸膏加水溶解,然后通过大孔树脂吸附,用不同浓度的乙醇溶液梯度洗脱,收集洗脱液;
第五步,将第四步中收集的特定浓度的乙醇溶液的洗脱液进行减压浓缩除去乙醇,真空冷冻干燥。
其中,所述的打孔树脂可以为Amberlite XDA-2、Polychrom-1、DA101、HP-20等。
其中,所述第二步中的溶剂进一步优选质量百分比40%-80%的乙醇溶液。
其中,所述第四步中的特定浓度的乙醇溶液进一步优选为80%质量百分比的乙醇溶液。
所述海参总皂苷的制备方法还可以进一步包括以下步骤:
第一步,将海参置于80℃烘箱中干燥过夜,粉碎至20目,得到海参粉末;
第二步,称取1kg海参粉末,加入4L质量百分比为60%乙醇溶液,在80℃下加热回流抽提2小时,过滤,回收滤液,将滤液5000r/min离心15min,保留上清液;再向抽提过的海参渣滓中加入3L质量百分比为60%乙醇溶液,以上述同样条件进行热回流抽提,收集本次上清液,再向抽提过的海参残渣中再次加入3L质量百分比为60%乙醇溶液,以上述同样条件再次进行热回流抽提,收集本次上清液,合并该三次所得上清液;
第三步,将所得上清液在50℃下真空旋转蒸发进行浓缩,去除其中的乙醇成分,得浸膏;
第四步,将浸膏加水溶解制成水溶液,加样于HP-20型大孔树脂,吸附4h后,首先用蒸馏水以2mL/min流速洗去杂质,再使用质量百分比60%,80%,100%的乙醇水溶液进行洗脱,收集质量百分比80%的乙醇溶液的洗脱液成分,其中主要成分为海参皂苷;
第五步,将第四步中收集的质量百分比为80%乙醇溶液洗脱液组份进行减压浓缩除去乙醇,浓缩液经真空冷冻干燥后得到所述海参总皂苷。
其中,本发明所述的组合物除了包含海参总皂苷,还包含任意的其他成分,比如当制备药物时,所述组合物中根据制备不同的药剂,加入常规的赋形剂、崩解剂、粘合剂、增溶剂中的一种或多种,制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液。
本发明还提供了一种上述用于制备改善、预防或治疗II型糖尿病的食品、或药品的组合物中的海参总皂苷的制备方法,其包括如下步骤:
第一步,粉碎海参的步骤;
第二步,加热回流抽提、过滤的步骤;
第三步,浓缩滤液的步骤;
第四步,吸附洗脱的步骤;
第五步,冷冻干燥的步骤;
其中,所述第一步进一步包括:将海参置于;在80℃下烘箱中干燥过夜,粉碎至20目,得到海参粉末;
所述第二步进一步包括:称取1kg海参粉末,加入4L质量百分比为60%乙醇溶液,在80℃下加热回流抽提2小时,过滤,回收滤液,将滤液5000r/min离心15min,保留上清;再向抽提过的海参渣滓中加入3L质量百分比为60%乙醇溶液,以上述同样条件进行热回流抽提,收集本次上清,再向抽提过的海参残渣中再次加入3L质量百分比为60%乙醇溶液,以上述同样条件再次进行热回流抽提,收集本次上清液,合并该三次所得上清;
所述第三步进一步包括:将所得上清液在50℃下真空旋转蒸发进行浓缩,去除其中的乙醇成分,得浸膏;
所述第四步进一步包括:将浸膏加水溶解制成水溶液,加样于HP-20型大孔树脂,吸附4h后,首先用蒸馏水以2mL/min流速洗去杂质,再使用质量百分比为60%,80%,100%的乙醇水溶液进行洗脱,收集质质量百分比为80%乙醇溶液的洗脱液成分,其中主要成分为海参皂苷;
所述第五步进一步包括:将第四步中收集质量百分比为80%乙醇溶液洗脱液组份进行减压浓缩除去乙醇,浓缩液经真空冷冻干燥后得到所述海参总皂苷。
本发明还提供了一种食品,其包括上面所述的组合物。
本发明还提供了一种药品,其包括上面所述的组合物,所述组合物中还包括赋形剂、崩解剂、粘合剂、增溶剂中的一种或多种。
本发明还提供了一种饲料,其包括上面所述的组合物,所述组合物中还包括普通动物饲料。
本发明还提供了上述组合物在制备改善、预防或治疗II型糖尿病的食品、或药品中的应用。
其中,优选所述海参总皂苷或一种海参皂苷作为唯一原料成分在制备改善、预防或治疗II型糖尿病的食品或药品中的应用。
本发明还提供了上述组合物中的海参总皂苷或海参皂苷在制备改善、预防或治疗II型糖尿病的食品或药品中的应用。
其中,优选所述海参总皂苷或一种海参皂苷作为唯一原料成分在制备改善、预防或治疗II型糖尿病的食品或药品中的应用。
本发明有益的技术效果在于:本发明海参皂苷在改善、预防或治疗II型糖尿病的食品或药品的应用中,动物实验结果表明海参皂苷可以明显降低空腹血糖值,显著改善胰岛素抵抗,对改善、预防或治疗II型糖尿病具有显著的效果,可将海参皂苷单独使用以及作为一种组分或辅料配合制成产品。本发明中海参皂苷的制备方法成本低,步骤较为简单,对环境产生的有机溶剂污染较小,所得海参皂苷经动物实验证实具有很好的改善、预防或治疗II型糖尿病的效果,可用于开发安全有效的改善、预防或治疗II型糖尿病的食品或药品。
附图说明
图1为本发明实施例海参皂苷对口服葡萄糖后血糖水平的影响。
具体实施方式
以下采用实施例来详细说明本发明的实施方式,借此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题,并达成技术效果的实现过程能充分理解并据以实施。
实施例1:海参总皂苷的制备方法
第一步,市场购得的干海参置于80℃烘箱中干燥过夜,粉碎至20目,得到海参粉末;
第二步,称取1kg海参粉末,加入4L质量百分比为60%乙醇溶液,在80℃下加热回流抽提2小时,过滤,回收滤液,将滤液5000r/min离心15min,保留上清液;再向抽提过的海参渣滓中加入3L质量百分比为60%乙醇溶液,以上述同样条件进行热回流抽提,收集本次上清液,再向抽提过的海参残渣中再次加入3L质量百分比为60%乙醇溶液,以上述同样条件再次进行热回流抽提,收集本次上清液,合并该三次所得上清液,该过程共消耗10L 60%的乙醇溶液;
第三步,将所得上清液在50℃下真空旋转蒸发进行浓缩,去除其中的乙醇成分,得浸膏;
第四步,将浸膏加水溶解制成水溶液,加样于HP-20型大孔树脂,吸附4h后,首先用蒸馏水以2mL/min流速洗去杂质,再使用质量百分比为60%,80%,100%的乙醇溶液进行洗脱,收集质量百分比为80%的乙醇溶液的洗脱液成分,其中主要成分为海参皂苷;
第五步,将收集的质量百分比为80%乙醇溶液洗脱液的组份进行减压浓缩除去乙醇,浓缩液经真空冷冻干燥后得到所述海参总皂苷。
利用IR、ESIMS、NMR等现代光谱手段和PMP-HPLC化学手段对海参皂苷进行了分析测定,制备的海参皂苷组由holothurin A、holothurin B、echinoside A、echinoside B、24-dehydroechinoside A、、ds echinoside A、holotoxins A、holotoxins B、holothurin A1、stichoposide E等单体组成,皆为海参烷型三萜皂苷。其中,holothurin A和echinoside A为上述海参皂苷的主要组分。
实施例2:海参皂苷对患有II型糖尿病的动物小鼠的改善作用
一、材料和方法
实验动物采用C57/BL6小鼠,雄性,体重22±0.5g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司,许可证号:SCXK(京)2009-0007。将小鼠按体重随机分为4组:正常对照组、模型对照组、实施例1制备的海参总皂苷低剂量组、实施例1制备的海参总皂苷高剂量,每组8只,分别喂食相应的饲料。
各组动物饲料的具体配方见表1,其中正常对照组饲料的蛋白含量20%,脂肪含量为5%,淀粉65%,矿物质及维生素复合物均参照AIN-93配方;而模型对照组饲料的蛋白含量20%,脂肪含量为25%,果糖含量为30%,矿物质混合物及维生素复合物同样参照AIN-93配方。受试动物组饲料在模型组饲料基础上分别添加0.3g/kg和1.2g/kg的海参总皂苷。
动物置于钢丝笼内饲喂,每笼2只,自由摄食和饮水,每天记录食量。室温23±2℃,12∶12小时明暗交替。实验持续60天,末次喂食后,禁食不禁水10小时,乙醚麻醉后,腹主动脉取全血处死。
(1)口服葡萄糖耐受实验
在饲喂50天时进行葡萄糖耐量试验。动物禁食不禁水10小时,经口灌胃葡萄糖(2g/kg B.W.)后,在0小时、0.5小时、1小时、2小时时间点从尾静脉采集微量血液,使用血糖仪配合血糖试纸进行测定,用以绘制口服糖耐曲线。
(2)血清葡萄糖和胰岛素含量测定
采用酶法试剂盒测定了血清中葡萄糖含量,ELISA试剂盒测定了血清胰岛素含量。
(3)血清脂联素含量测定
采用ELISA试剂盒测定血清中脂联素的水平。
(4)统计学处理
二、实验结果
(1)高脂高果糖饮食诱导使得模型小鼠空腹血糖值明显升高,海参总皂苷可以显著降低空腹血糖值水平(见表1)。
(2)相比正常对照组,模型小鼠血清胰岛素水平显著提高,通过计算HOMA-IR指数发现,模型小鼠的HOMA-IR指数显著提高(P<0.05),表明长期高脂高果糖饮食试小鼠产生胰岛素抵抗。给予不同剂量的海参总皂苷可以显著降低HOMA-IR指数,提示海参皂苷可改善胰岛素抵抗,从而改善治疗II型糖尿病(见表1)。
表1 海参皂苷对胰岛素抵抗指标的影响(n=8)
#P<0.05,##P<0.01与正常对照组相比;*P<0.05,**P<0.01与模型对照组相比
HOMA-IR=血糖浓度*胰岛素含量/22.5
(3)由图1可知,高脂高果糖饮食导致小鼠发生糖耐量受损,这可由计算曲线下面积进一步证实,血糖曲线下面积较正常对照组显著增大(P<0.01)。而给予不同剂量海参总皂苷均可以显著降低曲线下面积,提示海参皂苷可以改善糖耐受损现象,对II型糖尿病有一定治疗效果。
(4)脂联素是由白色脂肪组织分泌的一种有益细胞因子,可提高胰岛素敏感性。可以通过相对脂联素水平(relative adiponectin)来表示脂肪组织产生脂联素的能力,结果表明模型小鼠产生脂联素能力明显低于正常对照组(P<0.01),而海参总皂苷可以明显促进脂联素的生成,高剂量海参总皂苷使小鼠脂联素水平提高了3.3倍(P<0.01)(见表2)。海参皂苷可以显著提高脂肪组织分泌脂联素的能力从而改善胰岛素敏感性,这是其改善II型糖尿病的途径之一。
表2 海参皂苷对血清脂联素水平的影响(n=8)
##P<0.01与正常对照组相比;**P<0.01与模型对照组相比
本实施例中的海参总皂苷也可以采用单一种类的海参皂苷替代,比如holothurin A或echinoside A,所获得的饲料也可以显著降低空腹血糖值水平,显著提高脂肪组织分泌脂联素的能力从而改善胰岛素敏感性。
实施例3:以海参皂苷为主要成分的胶囊
实施例1中的海参总皂苷或单一种类的海参皂苷holothurin A或echinoside A 50g,微粉硅胶20g,糊精400g,淀粉530上述成分加入搅拌机,充分搅拌混匀后,填充胶囊,每颗1g,可制成胶囊1000颗。其中每颗胶囊含有效成分海参皂苷50mg。
实施例4:以海参皂苷为主要成分的片剂
原料:实施例1中的海参皂苷混合物海参总皂苷或单一种类的海参皂苷holothurin A或echinoside A200g,药用淀粉800g,混合均匀后,用适量乙醇制粒,经整粒机整粒,压片,每片0.25g。其中每粒含海参皂苷50mg。
所有上述的首要实施这一知识产权,并没有设定限制其他形式的实施这种新产品和/或新方法。本领域技术人员将利用这一重要信息,上述内容修改,以实现类似的执行情况。但是,所有修改或改造基于本发明新产品属于保留的权利。
以上所述,仅是本发明的较佳实施例而已,并非是对本发明作其它形式的限制,任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容,依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型,仍属于本发明技术方案的保护范围。
Claims (3)
1.一种海参总皂苷在制备改善、预防或治疗II型糖尿病的食品或药品中的应用,其特征在于:
所述海参总皂苷的制备方法包括如下步骤:
第一步,将海参干燥粉碎后制成粉末;
第二步,用溶剂多次加热回流抽提第一步中的海参粉末,过滤,收集各次滤液;
第三步,将所述收集的滤液进行浓缩,得到浸膏;
第四步,将所述浸膏加水溶解,然后通过大孔树脂吸附,梯度乙醇溶液洗脱,获得洗脱液;
第五步,收集第四步中的特定浓度的乙醇溶液的洗脱液,减压浓缩除去乙醇,真空冷冻干燥,获得所述海参总皂苷。
2.如权利要求1所述的海参总皂苷在制备改善、预防或治疗II型糖尿病的食品或药品中的应用,其特征在于:
所述海参总皂苷的制备方法包括如下步骤:
第一步,将海参置于80℃烘箱中干燥过夜,粉碎至20目,得到海参粉末;
第二步,称取1kg海参粉末,加入5L质量百分比为60%乙醇溶液,在80℃下加热回流抽提2小时,过滤,回收滤液,将滤液5000r/min离心15min,保留上清;再向抽提过的海参渣滓中加入3L质量百分比为60%乙醇溶液,以上述同样条件进行热回流抽提,收集本次上清,再向抽提过的海参残渣中再次加入3L质量百分比为60%乙醇溶液,以上述同样条件再次进行热回流抽提,收集本次上清液,合并该三次所得上清;
第三步,将所得上清液在50℃下真空旋转蒸发进行浓缩,去除其中的乙醇成分,得浸膏;
第四步,将浸膏加水溶解制成水溶液,加样于HP-20型大孔树脂,吸附4h后,首先用蒸馏水以2mL/min流速洗去杂质,再使用质量百分比60%,80%,100%的乙醇水溶液进行洗脱,收集质量百分比80%的乙醇溶液的洗脱液成分,其中主要成分为海参皂苷;
第五步,将第四步中收集的质量百分比为80%乙醇溶液洗脱液组份进行减压浓缩除去乙醇,浓缩液经真空冷冻干燥后得到所述海参总皂苷。
3.如权利要求1或2所述的海参总皂苷在制备改善、预防或治疗II型糖尿病的食品或药品中的应用,其特征在于:
第一步,粉碎海参的步骤;
第二步,加热回流抽提、过滤的步骤;
第三步,浓缩滤液的步骤;
第四步,吸附洗脱的步骤;
第五步,冷冻干燥的步骤;
其中,所述第一步进一步包括:将海参置于;在80℃下烘箱中干燥过夜,粉碎至20目,得到海参粉末;
所述第二步进一步包括:称取1kg海参粉末,加入5L质量百分比为60%乙醇溶液,在80℃下加热回流抽提2小时,过滤,回收滤液,将滤液5000r/min离心15min,保留上清;再向抽提过的海参渣滓中加入3L质量百分比为60%乙醇溶液,以上述同样条件进行热回流抽提,收集本次上清,合并两次所得上清;
所述第三步进一步包括:将所得上清液在50℃下真空旋转蒸发进行浓缩,去除其中的乙醇成分,得浸膏;
所述第四步进一步包括:将浸膏加水溶解制成水溶液,加样于HP-20型大孔树脂,吸附4h后,首先用蒸馏水以2mL/min流速洗去杂质,再使用质量百分比为60%,80%,100%的乙醇水溶液进行洗脱,收集质质量百分比为80%乙醇溶液的洗脱液成分,其中主要成分为海参皂苷;
所述第五步进一步包括:将第四步中收集质量百分比为80%乙醇溶液洗脱液组份进行减压浓缩除去乙醇,浓缩液经真空冷冻干燥后得到所述海参总皂苷。
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