CN102210724A - 救必应药材的综合利用 - Google Patents

Abstract

救必应药材的综合利用，涉及医药领域中来源于植物的提取分离方法及应用，具体涉及从救必应药材中同时提取紫丁香苷、长梗冬青苷、救必应酸和救必应总皂苷的方法及应用。本发明是从救必应药材的水提取液中制得紫丁香苷，从救必应药材水提取后的药渣中制得长梗冬青苷和救必应酸，紫丁香苷、长梗冬青苷和救必应酸的纯度均在98％以上，和/或从救必应水提的药渣中提取救必应总皂苷。救必应总皂苷可用于制备防治高脂血症、改善心肌缺血、心绞痛及制备抗炎镇痛的药物。本发明的有益效果：1、从救必应药材同时可得到四种活性成分，充分利用资源；2、原料易得，工艺简单、质量可控，可大批量生产。

Description

救必应药材的综合利用

技术领域

本发明涉及医药领域中来源于植物的提取分离方法及应用，具体涉及从救必应药材中同时提取紫丁香苷、长梗冬青苷、救必应酸和救必应总皂苷的方法及应用。

背景技术

中药材救必应为冬青科植物铁冬青(Ilex rotunda Thunb.)的干燥树皮，广泛分布于中国南方各省，主产于广西、广东省，民间常用于清热解毒，消肿止痛，治感冒发热，急慢性肝炎，急性肠胃炎，胃及十二指肠溃疡，风湿关节痛。救必应的化学成分研究报道不多，在文献“救必应化学成分的研究”中草药，1991，22(6)：246-248中报道了救必应中含铁冬青酸即救必应酸、具栖冬青苷即长梗冬青苷，铁冬青酸异丙叉酮缩醇，紫丁香苷、芥子醛、芥子醛葡萄糖苷、丁香醛、3一乙酰齐墩果酸及硬脂酸。

救必应中含有大量的五环三萜类皂苷，据文献“高效液相色谱法测定救必应药材中具栖冬青苷的含量”特产研究2007，4：45-47报道，救必应药材中具栖冬青苷的含量高达8.8％，如果再加上其苷元救必应酸的含量，其总皂苷含量更高。救必应药材现已收载在中国药典2010版一部，293页中，药典规定其长梗冬青苷的含量不得低于4％，紫丁香苷含量不得低于1％。目前药材主要用其水提取物制成治疗胃肠炎，消化不良等疾病的中成药，如救必应胃痛片，复方救必应胶囊，腹可安片，肠胃适胶囊等，提取工艺均采用水提取法，提取后的救必应药渣作为废渣弃去，既不环保又是一种浪费。我们发现救必应药材水提取法，主要提取了救必应中的水溶性成分紫丁香苷，而药渣中还存在有很多的五环三萜类皂苷未提取完全，造成了资源的浪费。本发明主要目的是从救必应水提后的药渣中提取长梗冬青苷、救必应酸及救必应总皂苷，制成药物，降低生产成本，造福于人类。

救必应是有着广泛用途的药材，在中国专利CN101032534A公开了救必应总苷的制备方法及在心脑血管系统疾病的应用，其提取方法是救必应药材直接用乙醇提取，专利中提到的救必应总皂苷实际上为一个救必应提取物，因为专利中未有化学数据表明它是皂苷，总皂苷中的成分、含量都未有表明，质量难于控制。

救必应中的有效成分用途有较多报道及专利，中国专利CN101342186A公开了长梗冬青苷(pedunculoside)用于治疗高脂血症，CN101033245A还公开了长梗冬青苷可用于治疗冠心病，心绞痛，中风，脑梗死等心脑血管系统疾病，CN101342186A公开了救必应酸(Rotundic acid)用于治疗高脂血症，药学学报，1980，15(5)：303-305报道了紫丁香苷具有止血作用，国外医药，中医中药分册，2000，22(6)：346-347报道了紫丁香苷具有保肝作用，文献PlantaMed.，2004，70：1027-1032又报道了紫丁香苷具有抗炎镇痛作用。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种救必应药材综合利用的方法。

为实施本发明的目的所采用的技术方案是从救必应药材的水提取液中制得紫丁香苷，从救必应药材水提取后的药渣中制得救必应酸和/或救必应总皂苷，

具体操作步骤：

具体操作步骤：一、救必应药材用水提取、滤过后得水提取液1和药渣2，水提取液1浓缩后，用常规的醇沉法沉淀，滤过得醇沉液3，醇沉液3回收乙醇、浓缩得稀浸膏4，稀浸膏4加入硅胶混匀，干燥得硅胶干膏粉5，再用有机溶剂A提取，得有机溶剂A提取液6，提取液6回收溶剂至干，得到紫丁香苷提取物7，加有机溶剂B加热回流溶解，滤过，得有机溶剂B液8，放置，滤过，沉淀物为紫丁香苷粗品9，粗品9用乙醇或甲醇重结晶得纯度在98％以上的紫丁香苷10，所说的有机溶剂A为丙酮或以体积比计氯仿∶甲醇或乙醇为1∶0.02～0.1或二氯甲烷∶甲醇或乙醇为1∶0.02～0.1的二种混合溶剂，所说的有机溶剂B为以体积比计乙醇或甲醇∶二氯甲烷为1∶0.2～3、乙醇或甲醇∶氯仿为1∶0.2～3的二种混合溶剂；

二、将药渣2用乙醇或甲醇提取、滤过得醇提取液11，醇提取液11回收溶剂，浓缩至浸膏，加入硅胶混匀，干燥，得醇提取物硅胶粉12，醇提取物硅胶粉12用弱极性有机溶剂提取，得救必应酸提取液14和残留物15，取提取液14回收溶剂，放置，滤过，得救必应酸粗品16，救必应酸粗品16用甲醇或乙醇重结晶得纯度在98％以上的救必应酸17，所说的弱极性有机溶剂为氯仿、苯、二氯甲烷或石油醚；

和/或将醇提取液11回收溶剂后浓缩至救必应投料重量的0.5～2倍，再加2～5倍浓缩液重量的水搅匀后，滤过，得沉淀物13，干燥得救必应总皂苷21，救必应总皂苷21中含有长梗冬青苷50～80％和救必应酸5～30％。

为了更好地利用药材，可以进一步将第二步骤所说的残留物15用强极性有机溶剂提取，得长梗冬青苷提取液18，回收溶剂至干，固体物为长梗冬青苷粗品19，用体积浓度为30～100％甲醇或30～95％乙醇重结晶得纯度在98％以上的长梗冬青苷20，

所说的强极性有机溶剂为乙酸乙酯、乙醇、甲醇。

步骤二中所说的醇提取液11，优选用体积浓度为70-100％的甲醇或体积浓度为70-95％的乙醇提取所得，提取方法可采用常规的回流提取法、渗漉提取法或浸渍提取法。

从救必应水提的药渣中提取救必应总皂苷21，用于制备防治高脂血症，改善心肌缺血，心绞痛的中药制剂，其毒性较低，副作用小，并且具有抗炎镇痛作用，可用于制备抗炎镇痛的药物，如制备治疗风湿关节炎的药物等。将救必应总皂苷21添加制备不同剂型时所需的各种常规辅料，按常规的中药制剂工艺制成任何一种口服制剂如片剂、硬胶囊、软胶囊、颗粒剂、口服液、糖浆剂、滴丸剂或缓释片等。

本发明的有益效果：1、从救必应药材同时得到四种活性成分，充分利用资源，降低生产成本；2、原料易得，工艺简单、操作方便，产品质量易控制，可大批量投入生产；3、救必应总皂苷是有效降血脂，改善心肌缺血及用于制备抗炎镇痛的药物，其毒性较低，副作用小。

附图说明

图1为救必应药材综合利用的工艺流程图

下面结合附图和实施例进一步阐述本发明的技术方案

具体实施方式

以下通过试验例来阐述本发明的技术方案及有益效果

试验例1  紫丁香苷、救必应总皂苷、长梗冬青苷及救必应酸的制备，如图1所示

步骤一  紫丁香苷的制备

取救必应药材10Kg，粉碎成粗粉，煎煮二次，每次加水80Kg，每次2小时，合并煎液，滤过后得水提取液1和药渣2，药渣2备用，水提取液1浓缩至4Kg，加12Kg乙醇沉淀，放置24小时，滤过，得醇沉液3，回收乙醇后浓缩至稀浸膏4加入硅胶1.5Kg混匀，干燥得硅胶干膏粉5，置于连续循环提取分离器中，用氯仿∶甲醇体积比为1∶0.05的混合溶剂13000ml回流提取，得有机溶剂A提取液6，回收溶剂至干，得到紫丁香苷提取物7，再用乙醇∶氯仿体积比为1∶0.5的混合有机溶剂3500ml加热回流溶解，滤过，得有机溶剂B液8，放置，滤取沉淀物，干燥，为紫丁香苷粗品9，粗品9用乙醇重结晶得得紫丁香苷43.8g，用高效液相法测定，见中国药典2010版一部，293页，纯度为98.68％。

步骤二  救必应酸和救必应总皂苷的制备

取上述的救必应药渣2，每次加95％乙醇30Kg，回流提取二次，每次2小时，合并二次提取液，滤过，得醇提取液11共56Kg，取一半28Kg(另一半28Kg备用)，回收乙醇并浓缩至浸膏，加入硅胶500g混匀，干燥，得醇提取物硅胶粉12，醇提取物硅胶粉12置于连续循环提取分离器中，用氯仿4000ml提取，得救必应酸提取液14和残留物15，取提取液14回收氯仿至1500ml，放置，滤过，沉淀物为救必应酸粗品16，救必应酸粗品16用乙醇重结晶得救必应酸34.5g，用高效液相色谱法测定，含量为98.11％。

取救必应醇提取液11另一半量28Kg，回收乙醇，浓缩至5.0Kg，加水15.0Kg，搅匀，滤过，得沉淀物13，干燥得救必应总皂苷246g，用高效液相色谱法测定，含长梗冬青苷61.81％，含救必应酸22.66％。

步骤三  长梗冬青苷的制备

第二步骤中氯仿提取后的残留物15，再用乙醇3500ml回流提取至无长梗冬青苷，滤过，得长梗冬青苷提取液18，回收乙醇并浓缩至干，固体物为长梗冬青苷粗品19，用50％乙醇重结晶，得长梗冬青苷122g，用高效液相色谱法测定，含量为98.23％。

高效液相色谱法测定长梗冬青苷，救必应酸及救必应总皂苷含量的方法：

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈∶0.1％磷酸溶液(50∶50)作流动相；检测波长为210nm。

对照品溶液的制备分别取长梗冬青苷对照品、救必应酸对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每1ml含长梗冬青苷150μg、救必应酸50μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备分别取上述长梗冬青苷和救必应酸，研细，各取约0.02g，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇适量，在功率250W，频率50KHz下超声处理10分钟，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

取上述救必应总皂苷，研细，取约0.025g，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇适量，在功率250W，频率50KHz下超声处理10分钟，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

试验例2  本发明的活性成分救必应总皂苷的降血脂，抗心肌缺血及抗炎镇痛作用

1.救必应总苷的降血脂的作用

取清洁级SD大鼠50只，雌性，体重210±10g，随机分为5组，每组10只，按表1分组，各组自由摄取普通饲料适应性喂养一周后，除空白对照组外，其余各组每天按10ml/kg量灌胃给予高脂的脂肪乳(100ml含15g猪油，6g胆固醇，2g胆盐，0.2g丙硫氧嘧啶和20mL吐温80，65mL蒸馏水)，持续到实验结束，造模一周后，正常组与模型组给1％羧甲基纤维素钠(1ml/100g体重)，其余各组灌胃给药，药物均配制成1％羧甲基纤维素钠混悬液(1ml/100g体重)，每日1次，按照表1分组给药，连续给药21天，每三天称1次体重，以调整给药量。各组动物于给药21天后禁食不禁水16h，摘眼球取血，分离血清，测定血清总胆固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)、血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。结果见表1

表1救必应总皂苷对高脂模型大鼠血脂指标的影响

注：与模型组比较，*P＜0.05有显著差异；**P＜0.01有非常显著差异

与正常组比较，△P＜0.05有显著差异；△△P＜0.01有非常显著差异

结果表明，对高脂血症的大鼠，救必应总皂苷能显著降低血清总胆固醇(TC)和血清甘油三酯(TG)含量；显著降低血清低密度脂蛋白胆固醇含量(LDL-C)，显著升高血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量。

2.救必应总苷对大鼠垂体后叶素素性急性心肌缺血模型心电图的影响

取心电图筛选正常用的SD大鼠40只，雌雄各半，随机分为4组，每组10只，按表2分组，所有的药物组均配成1％羧甲基纤维素钠的混悬液(1ml/100g体重)，模型对照组给1％羧甲基纤维素钠(1ml/100g体重)，各组每天灌胃给药1次，按照表2分组给药，连续给药5天，末次给药1小时后，用3％戊巴比妥酸钠(1ml/Kg)腹腔注射麻醉，将其固定，连接心电图机，随后静脉注射垂体后叶素(0.5U/Kg)，10秒内注射完毕，观察纪录10分钟的心电图，测量注射后30秒内的ST段及T波的变化。结果见表2。

表2救必应总皂苷对垂体后叶素致大鼠急性心肌缺血的影响

注：与模型对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01

结果表明救必应总皂苷能明显对抗垂体后叶素导致动物急性心肌缺血而发生的心电图变化，抑制T波高耸及ST段抬高，与模型对照组比较差异显著。

3.救必应总苷的对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀的影响

SD大鼠40只，雌雄各半，随机分为4组，每组10只，按表3分组，所有的药物组均配成1％羧甲基纤维素钠的混悬液(1ml/100g体重)，空白对照组给1％羧甲基纤维素钠(1ml/100g体重)，各组每天灌胃给药1次，按照表3分组给药，连续给药7天。末次给药后1h于每鼠右后足趾皮下注射1％角叉菜胶溶液0.1ml致炎，用足趾容积测定仪分别测定致炎前和致炎后1、3、5、7h足趾容积，以各鼠致炎前后容积的差值为肿胀度。结果如表3。

表3救必应总皂苷对足趾肿胀大鼠足趾容积的影响(

n＝10)

注：与空白对照组比较，*P＜0.05；**P＜0.01

结果表明，角叉菜胶致炎后1h，大鼠足趾开始急性炎症样红、肿等变化，约3h肿胀达高峰。救必应总皂苷于致炎后1h开始产生疗效，在1h、3h、5h、7h各个时间点对角叉菜胶诱导的大鼠足肿胀均有明显地抑制作用。

4.救必应总皂苷对醋酸致小鼠扭体反应的影响

ICR小鼠40只，雌雄各半，随机分为4组，每组10只，按表3分组，所有的药物组均配成1％羧甲基纤维素钠的混悬液(1ml/100g体重)，空白对照组给1％羧甲基纤维素钠(1ml/100g体重)，各组每天灌胃给药1次，按照表4分组给药，连续给药5天，末次给药后0.5h，每只小鼠腹腔注射0.7％醋酸溶液0.2ml，计数15min内小鼠出现的扭体反应，包括伸展后肢、腹部内凹和臀部抬高次数，计算镇痛率。结果如表4。

表4救必应提取物对小鼠扭体反应的影响(

n＝10)

注：与空白对照组比较：*P＜0.05，料P＜0.01

结果表明救必应总皂苷能减少醋酸所致的小鼠扭体反应次数，具有镇痛作用。

试验例3、救必应总皂苷的小鼠急性毒性试验

小鼠灌胃救必应总皂苷1.25、2.5、5、10g/kg，两周内未见死亡及其它异常反应发生，无法测出受试药物小鼠灌胃的LD50。小鼠以最大浓度、最大体积，24h内三次灌胃给药后无明显毒性反应，一周内亦无死亡。测得救必应总皂苷小鼠灌胃给药的最大给药量为60g/kg。

以上试验初步表明救必应总皂苷的毒付作用较低。

下面通过实施例和附图进一步阐述本发明的技术方案

紫丁香苷，长梗冬青苷，救必应酸制备

实施例1

取救必应药材1Kg，粉碎成粗粉，加水煎煮二次，每次2小时，第一次加水10kg，第二次加水7Kg，合并煎液，滤过，药渣2备用，滤液1浓缩至0.3Kg，加0.6Kg乙醇，静置24小时，滤过，滤液即醇沉液3浓缩至200g稀浸膏4，加入150g硅胶分散搅匀，干燥得硅胶干膏粉5置于连续循环提取分离器中，用二氯甲烷∶乙醇体积比为1∶0.1的混合溶剂1300ml回流提取，直至分离器中的流出液用薄层层析法检查已无紫丁香苷，得有机溶剂提取液6，回收溶剂至干，得到紫丁香苷提取物7，再用甲醇∶二氯甲烷体积比为1∶3的混合溶剂320ml加热回流溶解，滤过，得有机溶剂液8，静置，滤取沉淀物，为紫丁香苷粗品9，粗品9用乙醇重结晶，滤过，干燥得紫丁香苷4.5g，含量98.12％。

上述药渣2每次用95％乙醇3Kg回流提取二次，每次2小时，合并提取液，滤过，得乙醇提取液11，回收乙醇，浓缩至浸膏，加入100g硅胶混匀，干燥，得醇提取物硅胶粉12，加于连续循环提取分离器中，先用二氯甲烷1000ml加热回流提取至无救必应酸，得救必应酸提取液14和残留物15，取提取液14回收溶剂，浓缩至300ml，放置，滤过，得救必应酸粗品16，再用乙醇重结晶，滤过，干燥得救必应酸6.9g，含量达98.58％；

提取器中的残留物15，再用乙酸乙酯900ml加热回流提取至无长梗冬青苷，提取液18回收溶剂，浓缩至干，得到长梗冬青苷粗品19，粗品19用50％乙醇重结晶，滤过，干燥得到长梗冬青苷25.1g，含量达98.72％。

实施例2

取救必应药材1Kg，粉碎成粗粉，加水煎煮二次，每次2小时，第一次加水8kg，第二次加水6Kg，合并煎液，滤过，药渣2备用，滤液1浓缩至0.4Kg，加1.6Kg乙醇，静置24小时，滤过，滤液3浓缩至200g的稀浸膏4，加入150g硅胶分散搅匀，干燥后的硅胶干膏粉5置于连续循环提取分离器中，用二氯甲烷∶甲醇体积比为1∶0.02的混合溶剂1200ml回流提取，直至分离器中的流出液用薄层层析法检查已无紫丁香苷，有机溶剂提取液6回收溶剂至干得紫丁香苷提取物7，再用甲醇∶氯仿体积比为1∶0.2的混合溶剂250ml加热回流溶解，滤过，得有机溶剂液8，静置，滤取沉淀物为紫丁香苷粗品9，粗品9用甲醇重结晶，过滤，干燥得紫丁香苷5.1g，含量98.31％。

上述药渣2用甲醇浸渍二次，第一次加甲醇6Kg，浸提48小时，第二次再加甲醇4Kg，浸提24小时，合并提取液，滤过，滤液为甲醇提取液11，回收甲醇，浓缩至浸膏，加入100g硅胶混匀，干燥得醇提取物硅胶粉12，置于连续循环提取分离器中，先用氯仿800ml加热回流提取至无救必应酸，得救必应酸提取液14，残留物15备用，救必应酸提取液14回收溶剂，浓缩至350ml，放置，滤过，得救必应酸粗品16，再用乙醇重结晶，滤过，干燥得救必应酸6.5g，含量达98.42％；

提取器中的残留物15，再用乙醇700ml加热回流提取至无长梗冬青苷，长梗冬青苷提取液18回收溶剂，浓缩至干得到长梗冬青苷粗品19，粗品19用60％甲醇重结晶，滤过，干燥得到长梗冬青苷22.5g，含量达98.55％；

实施例3

取救必应药材1Kg，粉碎成粗粉，加水煎煮二次，每次2小时，第一次加水8kg，第二次加水8Kg，合并煎液，滤过，药渣2备用，滤液1浓缩至0.5Kg，加1.5Kg乙醇，静置24小时，滤过，滤液3浓缩至200g的稀浸膏4，加入150g硅胶分散搅匀，干燥后的硅胶干膏粉5置于连续循环提取分离器中，用丙酮1200ml回流提取，直至分离器中的流出液用薄层层析法检查已无紫丁香苷，有机溶剂提取液6回收溶剂至干得紫丁香苷提取物7，再用乙醇∶氯仿体积比为1∶3的混合溶剂300ml加热回流溶解，滤过，滤液8静置，滤取沉淀物为紫丁香苷粗品9，粗品9用甲醇重结晶，过滤，干燥得紫丁香苷4.1g，含量9880％。

上述药渣2用70％乙醇回流提取二次，第一次加70％乙醇5Kg，回流4小时，第二次再加70％乙醇4Kg，回流3小时，合并提取液，滤过，得乙醇提取液11回收乙醇，浓缩至浸膏，加入100g硅胶混匀，干燥得醇提取物硅胶粉12，置于连续循环提取分离器中，先用苯900ml加热回流提取至无救必应酸，得救必应酸提取液14，残留物15备用，救必应酸提取液14回收溶剂，浓缩至350ml，放置，滤过，得救必应酸粗品16，再用甲醇重结晶，滤过，干燥得救必应酸4.2g，含量达98.63％；

提取器中的残留物15，再用甲醇800ml加热回流提取至无长梗冬青苷，有机溶剂提取液18回收溶剂，浓缩至干，得到长梗冬青苷粗品19，粗品19用甲醇重结晶，滤过，干燥得到长梗冬青苷24.3g，含量达98.21％。

实施例4

取救必应药材1Kg，粉碎成粗粉，加水煎煮二次，每次2小时，第一次加水9kg，第二次加水5Kg，合并煎液，滤过，药渣2备用，滤液1浓缩至0.4Kg，加0.8Kg乙醇，静置24小时，滤过，滤液3浓缩至200g的稀浸膏4，加入150g硅胶分散搅匀，干燥后的硅胶干膏粉5置于连续循环提取分离器中，用氯仿∶甲醇体积比为1∶0.1的混合溶剂1300ml回流提取，直至分离器中的流出液用薄层层析法检查已无紫丁香苷，有机溶剂提取液6回收溶剂至干得紫丁香苷提取物7，再用乙醇∶氯仿体积比为1∶2的混合溶剂320ml加热回流溶解，滤过，滤液8静置，滤取沉淀物为紫丁香苷粗品9，粗品9用甲醇重结晶，过滤，干燥得紫丁香苷4.9g，含量98.17％。

上述药渣2，加85％乙醇渗漉提取，按中华人民共和国药典2005年版一部附录11页方法进行渗漉，直至渗漉液对liebermann-Burchard试验不明显，渗漉液11回收乙醇，浓缩至浸膏，加入100g硅胶混匀，干燥得醇提取物硅胶粉12，置于连续循环提取分离器中，先用石油醚1200ml加热回流提取至无救必应酸，得救必应酸提取液14，残留物15备用，救必应酸提取液14回收溶剂，浓缩至380ml，放置，滤过，得救必应酸粗品16，再用乙醇重结晶得救必应酸5.2g，含量达98.25％；

提取器中的残留物15，再用乙醇650ml加热回流提取至无长梗冬青苷，有机溶剂提取液18回收溶剂，浓缩至干得到长梗冬青苷粗品19，粗品19用30％乙醇重结晶，滤过，干燥得到长梗冬青29.8g，含量达98.13％

实施例5

取救必应药材1Kg，粉碎成粗粉，加水煎煮二次，每次2小时，第一次加水8kg，第二次加水7Kg，合并煎液，滤过，药渣2备用，滤液1浓缩至0.4Kg，加1.2Kg乙醇，静置24小时，滤过，滤液3浓缩至200g的稀浸膏4，加入150g硅胶分散搅匀，干燥后的硅胶干膏粉5置于连续循环提取分离器中，用氯仿∶甲醇体积比为1∶0.05的混合溶剂1300ml回流提取，直至分离器中的流出液用薄层层析法检查已无紫丁香苷，有机溶剂提取液6回收溶剂至干为紫丁香苷提取物7，再用乙醇∶氯仿体积比为1∶1的混合溶剂310ml加热回流溶解，滤过，滤液8静置，滤取沉淀物为紫丁香苷粗品9，粗品9用乙醇重结晶，过滤，干燥得紫丁香苷4.3g，含量98.41％。

上述药渣2用70％甲醇回流提取二次，第一次加70％乙醇5Kg，回流4小时，第二次再加70％乙醇4Kg，回流3小时，合并提取液，滤过，醇提取液11回收乙醇，浓缩至浸膏，加入100g硅胶混匀，干燥得醇提取物硅胶粉12，置于连续循环提取分离器中，先用氯仿800ml加热回流提取至无救必应酸，得救必应酸提取液14，残留物15备用，救必应酸提取液14回收溶剂，浓缩至250ml，放置，滤过，得救必应酸粗品16，再用甲醇重结晶，滤过，干燥得救必应酸4.1g，含量达98.51％；

提取器中的残留物15，再用乙酸乙酯700ml加热回流提取至无长梗冬青苷，有机溶剂提取液18回收溶剂，浓缩至干，得到长梗冬青苷粗品19，粗品19用30％甲醇重结晶，滤过，干燥得到长梗冬青苷24.8g，含量达98.19％

实施例6

取救必应药材1Kg，粉碎成粗粉，加水煎煮二次，每次2小时，第一次加水8kg，第二次加水6Kg，合并煎液，滤过，药渣2备用，滤液1浓缩至0.4Kg，加1.6Kg乙醇，静置24小时，滤过，滤液3浓缩至200g的稀浸膏4，加入150g硅胶分散搅匀，干燥后硅胶干膏粉5置于连续循环提取分离器中，用氯仿∶乙醇体积比为1∶0.02的混合溶剂1200ml回流提取，直至分离器中的流出液用薄层层析法检查已无紫丁香苷，有机溶剂提取液6回收溶剂至干为紫丁香苷提取物7，再用乙醇∶二氯甲烷体积比为1∶0.2的混合溶剂280ml加热回流溶解，滤过，滤液8静置，滤取沉淀物为紫丁香苷粗品9，粗品9用乙醇重结晶，过滤，干燥得紫丁香苷4.2g，含量98.32％。

上述药渣2，加85％甲醇回流提取二次，第一次加85％甲醇5Kg，回流2小时，第二次再加85％甲醇4Kg，回流2小时，合并提取液，滤过，得醇提取液9Kg，取7.2Kg的醇提取液，相当于原生药量800g，(余下的醇提取液1.8Kg备用)回收甲醇，浓缩至浸膏，加入80g硅胶混匀，干燥得醇提取物硅胶粉12，置于连续循环提取分离器中，先用氯仿700ml加热回流提取至无救必应酸，得救必应酸提取液14，残留物15备用，救必应酸提取液14回收溶剂，浓缩至200ml，放置，滤过，得救必应酸粗品16，再用乙醇重结晶，滤过，干燥得救必应酸4.3g，含量达98.45％；

提取器中的残留物15，再用乙酸乙酯750ml加热回流提取至无长梗冬青苷，有机溶剂提取液18回收溶剂，浓缩至干，得到长梗冬青苷粗品19，粗品19用95％乙醇重结晶，滤过，干燥得到长梗冬青苷23.5g，含量达98.33％

救必应总皂苷制备

实施例7

取上述实施例6余下的1.8Kg85％甲醇提取液11，回收甲醇至100g，加水200g，搅匀，滤过，得沉淀物13，干燥，得救必应总皂苷10.7g，内含长梗冬青苷70.25％，救必应酸13.33％。

实施例8

取救必应药材200g，按实施例1的水提方法，滤过后的药渣用95％乙醇提取，取乙醇提取液11，回收乙醇至400g，加水2000g，搅匀，滤过，得沉淀物13，干燥，得救必应总皂苷8.8g，内含长梗冬青苷51.38％，救必应酸28.86％。

实施例9

取救必应药材200g，按实施例2的水提方法，滤过后的药渣用甲醇浸渍提取，取甲醇提取液11，回收甲醇至300g，加水900g，搅匀，滤过，得沉淀物13，干燥，得救必应总皂苷10.9g，内含长梗冬青苷60.28％，救必应酸20.35％。

实施例10

取救必应药材200g，按实施例3的水提方法，滤过后的药渣用70％乙醇浸渍二次，第一次加70％乙醇600g，浸提48小时，第二次再加70％乙醇600g，浸提24小时，合并提取液，滤过，乙醇提取液11回收乙醇至400g，加水800g，搅匀，滤过，得沉淀物13，干燥，得救必应总皂苷10.5g，内含长梗冬青苷78.28％，救必应酸5.54％。

Claims (5)

1.一种救必应药材综合利用的方法，其特征在于：从救必应药材的水提取液中制得紫丁香苷，从救必应药材水提取后的药渣中制得救必应酸和/或救必应总皂苷，

具体操作步骤：一、救必应药材用水提取、滤过后得水提取液(1)和药渣(2)，水提取液(1)浓缩后，用常规的醇沉法沉淀，滤过得醇沉液(3)，醇沉液(3)回收乙醇、浓缩得稀浸膏(4)，稀浸膏(4)加入硅胶混匀，干燥得硅胶干膏粉(5)，再用有机溶剂A提取，得有机溶剂A提取液(6)，提取液(6)回收溶剂至干，得到紫丁香苷提取物(7)，加有机溶剂B加热回流溶解，滤过，得有机溶剂B液(8)，放置，滤过，沉淀物为紫丁香苷粗品(9)，粗品(9)用乙醇或甲醇重结晶得纯度在98％以上的紫丁香苷(10)，所说的有机溶剂A为丙酮或以体积比计氯仿∶甲醇或乙醇为1∶0.02～0.1或二氯甲烷∶甲醇或乙醇为1∶0.02～0.1的二种混合溶剂，所说的有机溶剂B为以体积比计乙醇或甲醇∶二氯甲烷为1∶0.2～3、乙醇或甲醇∶氯仿为1∶0.2～3的二种混合溶剂；

二、将药渣(2)用乙醇或甲醇提取、滤过得醇提取液(11)，醇提取液(11)回收溶剂，浓缩至浸膏，加入硅胶混匀，干燥，得醇提取物硅胶粉(12)，醇提取物硅胶粉(12)用弱极性有机溶剂提取，得救必应酸提取液(14)和残留物(15)，取提取液(14)回收溶剂，放置，滤过，得救必应酸粗品(16)，救必应酸粗品(16)用甲醇或乙醇重结晶得纯度在98％以上的救必应酸(17)，所说的弱极性有机溶剂为氯仿、苯、二氯甲烷或石油醚；

和/或将醇提取液(11)回收溶剂后浓缩至救必应投料重量的0.5～2倍，再加2～5倍浓缩液重量的水搅匀后，滤过，得沉淀物(13)，干燥得救必应总皂苷(21)，救必应总皂苷(21)中含有长梗冬青苷50～80％和救必应酸5～30％。

2.根据权利要求1所说的救必应药材综合利用的方法，其特征在于：第二步骤所说的残留物(15)用强极性有机溶剂提取，得长梗冬青苷提取液(18)，回收溶剂至干，固体物为长梗冬青苷粗品(19)，用体积浓度为30～100％甲醇或30～95％乙醇重结晶得纯度在98％以上的长梗冬青苷(20)，

所说的强极性有机溶剂为乙酸乙酯、乙醇、甲醇。

3.根据权利要求1所说的救必应药材综合利用的方法，其特征在于：步骤二中所说的醇提取液(11)，是用体积浓度为70～100％的甲醇或体积浓度为70～95％的乙醇提取所得，提取方法采用常规的回流提取法、渗漉提取法或浸渍提取法。

4.一种如权利要求1所说的从救必应水提的药渣中提取救必应总皂苷，用于制备防治高脂血症，改善心肌缺血，心绞痛的中药制剂。

5.一种如权利要求1所说的从救必应水提的药渣中提取救必应总皂苷，用于制备抗炎镇痛的药物。