CN102133372B - 一种复方薄荷精油制剂及其作用 - Google Patents
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Abstract
本发明所属医药产品研究开发技术领域。本发明涉及一种复方薄荷精油制剂及其作用，薄荷精油∶姜黄精油＝1∶1，薄荷精油∶姜黄精油＝1∶2，薄荷精油∶姜黄精油＝2∶1；分别取粉碎的薄荷全草和姜黄粉末各80g-100g，分别加入2000mL圆底烧瓶中，加入800mL-1000mL水，同时加少量沸石，放入微波炉中，微波功率520W，微波辐射时间10min-12min；再进行水蒸气蒸馏，蒸馏时间1.5h-2.0h，静置，分出精油；本发明产品对痤疮丙酸杆菌、金黄色葡萄球菌球菌、大肠杆菌具有抑菌作用，本发明产品适合工业化生产。
Description
技术领域
本发明所属医药产品研究开发技术领域。本发明涉及一种复方薄荷精油制剂及其作用。本发明产品对痤疮丙酸杆菌、金黄色葡萄球菌球菌、大肠杆菌具有抑菌作用，本发明产品适合工业化生产。
背景技术
痤疮是一种皮脂腺的慢性皮肤疾病，痤疮的主要致病菌是痤疮丙酸杆菌、金黄色葡萄球菌，目前抗痤疮药物活性评价主要考察对这两种菌的抑菌作用，用药物减少毛囊中细菌数量是治疗痤疮的主要途径之一。抗生素类是临床上治疗痤疮较常使用的药物。常用的抗生素有红霉素、甲硝唑等，但随着抗生素的不规范使用甚至滥用，细菌对药物产生耐药性，从而影响痤疮治疗的效果及稳定性。而使用精油治疗痤疮，效果显著又兼具美容养颜之功效，正逐渐受到人们的青睐。进一步探究复方薄荷精油对痤疮主要致病菌的抑菌效果，系统考察其体外抑菌活性，拟为痤疮的治疗提供一种新的方法。并系统考察了复方薄荷精油对大肠杆菌的抑菌作用。
发明内容
1、一种复方薄荷精油制剂，其特征在于是由下述重量配比的精油制成的制剂：
薄荷精油∶姜黄精油＝1∶1，薄荷精油∶姜黄精油＝1∶2，薄荷精油∶姜黄精油＝2∶1。
2、权利要求1所述的一种复方薄荷精油制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
步骤(一)：分别取粉碎的薄荷全草和姜黄粉末各80g-100g，分别加入2000mL圆底烧瓶中，加入800mL-1000mL水，同时加少量沸石，放入微波炉中，微波功率520W，微波辐射时间10min-12min；
步骤(二)：将(一)中圆底烧瓶再进行水蒸气蒸馏，蒸馏时间1.5h-2.0h，静置，分出精油，薄荷精油得率约为3.02％，姜黄精油得率约为5.46％。
3、权利要求1所述的一种复方薄荷精油制剂的作用，其特征在于对痤疮丙酸杆菌、金黄色葡萄球菌球菌、大肠杆菌具有抑菌作用。
根据本发明，本发明中的“％”是重量百分比。
具体实施方式
本发明所述的涉及一种具有抑菌作用的复方薄荷精油制剂包括以下实施例，下面的实施例可进一步说明本发明，但不以任何方式限制本发明。
实施例1：
步骤(一)：分别取粉碎的薄荷全草和姜黄粉末各80g，分别加入2000mL圆底烧瓶中，加入800mL水，同时加少量沸石，放入微波炉中，微波功率520W，微波辐射时间10min；
步骤(二)：将(一)中圆底烧瓶再进行水蒸气蒸馏，蒸馏时间1.5h，静置，分出精油，薄荷精油得率约为3.02％，姜黄精油得率约为5.46％。
步骤(三)：薄荷精油∶姜黄精油＝1∶1，薄荷精油∶姜黄精油＝1∶2，薄荷精油∶姜黄精油＝2∶1。
实施例2：
步骤(一)：分别取粉碎的薄荷全草和姜黄粉末各100g，分别加入2000mL圆底烧瓶中，加入1000mL水，同时加少量沸石，放入微波炉中，微波功率520W，微波辐射时间12min；
步骤(二)：将(一)中圆底烧瓶再进行水蒸气蒸馏，蒸馏时间2.0h，静置，分出精油，薄荷精油得率约为3.02％，姜黄精油得率约为5.46％。
步骤(三)：薄荷精油∶姜黄精油＝1∶1，薄荷精油∶姜黄精油＝1∶2，薄荷精油∶姜黄精油＝2∶1。
药理实验
复方薄荷精油制剂的抑菌作用实验
1材料与方法
1.1试验药物、菌株、仪器及试剂
1.1.1试验药物
薄荷、姜黄购于威海燕喜堂大药房；甲硝唑注射液，山东长富洁晶药业有限公司生产，批号09092571；土霉素片，安阳玉威制药有限公司生产，批号100602；阿莫西林分散片，中诺药业有限公司生产，批号09117005；橄榄油，上海恋尚日用品有限公司生产。
1.1.2薄荷、姜黄精油的制备
步骤(一)：分别取粉碎的薄荷全草和姜黄粉末各100g，分别加入2000mL圆底烧瓶中，加入1000mL水，同时加少量沸石，放入微波炉中，微波功率520W，微波辐射时间12mine；
步骤(二)：将(一)中圆底烧瓶再进行水蒸气蒸馏，蒸馏时间2.0h，静置，分出精油，薄荷精油得率约为3.02％，姜黄精油得率约为5.46％。
1.1.3菌株
痤疮丙酸杆菌，购于广东微生物所；金黄色葡萄球菌、大肠杆菌，由山东大学威海分校海洋学院微生物实验室提供。
1.1.4仪器及试剂
厌氧培养罐及换气装置，自制；隔水式恒温培养箱，上海博迅实业有限公司医疗器械设备厂生产；光学显微镜，MOTIC B1 series；硫乙醇酸盐培养基，青岛高科园海博生物技术有限公司生产，批号20100709；牛肉粉，青岛高科园海博生物技术有限公司分装，批号2003017；蛋白胨，北京双旋微生物培养基制品厂生产，批号20090415；琼脂粉，北京奥博星生物技术有限责任公司生产，批号20080520。
1.2方法
1.2.1培养基及供试药液的制备
配置牛肉膏蛋白胨培养基调PH至7，用于培养大肠杆菌与金黄色葡萄球菌，硫乙醇酸盐培养基调PH至7，用于培养痤疮丙酸杆菌，培养基分装后121℃高压蒸汽灭菌30分钟。以薄荷精油∶姜黄精油＝1∶1，薄荷精油∶姜黄精油＝1∶2，薄荷精油∶姜黄精油＝2∶1配制精油，记为复方方一、复方方二、复方方三；配制阿莫西林和土霉素悬浊液。
1.2.2菌悬液的制备
将大肠杆菌与金黄色葡萄球菌分别接种于牛肉膏蛋白胨液体培养基中置于37℃恒温培养箱中培养，将痤疮丙酸杆菌接种于硫乙醇酸盐液体培养基中置于37℃厌氧培养罐中培养。24h后取出，用血球计数板将菌悬液调整到107～108个/ml备用。
1.2.3抑菌圈直径的测定
分别取大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌菌液各200μL于不同平板培养基表面，用涂布器涂布均匀。用橄榄油按二倍稀释法分别稀释复方方一、复方方二、复方方三，稀释到16倍。滤纸片浸泡1h取出自然风干，贴于涂布菌液的平板表面。并以单方精油作对照组，橄榄油作阴性对照，阿莫西林、土霉素、甲硝唑作阳性对照，末涂布菌液的平板作空白对照。每组设平行样三个。置于37℃培养箱中培养。24h后用直尺、三角板、圆规测量抑菌圈直径。复方方三的抑菌效果最好，故选用复方方三做进一步实验，测定其最低抑菌浓度(MIC)。
1.2.4测定最低抑菌浓度(MIC)
将液体培养基分装到试管中，每只试管5ml，121℃高压蒸汽灭菌30分钟。灭菌后，每只试管中加入菌悬液100μl，分别加入复方方三50μl、40μl、30μl、20μl、10μl、5μl，震荡摇匀，配制成浓度梯度为10μl/ml、8μl/ml、6μl/ml、4μl/ml、2μl/ml、1μl/ml的药敏试管，每组设平行样三个，并以不加菌液和精油的培养基试管作为空白对照。置37℃恒温培养箱(痤疮丙酸杆菌置37℃厌氧培养罐)中培养24h，以浊度为指标检查试管中有无细菌生长，以不显示浑浊、细菌未生长的那一管的药液稀释度作为最低抑菌浓度(MIC)。
2结果与分析
2.1抑菌圈测定结果
2.1.1不同浓度精油对金黄色葡萄球菌的抑菌作用 见表1。
表1 不同浓度精油对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径(mm)
(注：阴性对照为橄榄油，金黄色葡萄球菌的阳性对照为阿莫西林，-表示没有或有较弱的抑菌作用)
2.1.2不同浓度精油对痤疮丙酸杆菌的抑菌作用 见表2。
表2 不同浓度精油对痤疮丙酸杆菌的抑菌圈直径(mm)
(注：阴性对照为橄榄油，痤疮丙酸杆菌的阳性对照为甲硝唑，-表示没有或有较弱的抑菌作用)
2.1.3不同浓度精油对大肠杆菌的抑菌作用 见表3。
表3 不同浓度精油对大肠杆菌的抑菌圈直径(mm)
(注：阴性对照为橄榄油，大肠杆菌的阳性对照为土霉素，-表示没有或有较弱的抑菌作用)
空白对照未长出菌落，阴性对照未出现抑菌圈，表明培养基与橄榄油以及培养条件等对抑菌效果测定均无干扰。如表1所示，复方精油对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径大于单方精油，方三抑菌圈直径最大，三种配方的抑菌圈直径随浓度的增大而增大。如表2所示，复方精油对痤疮丙酸杆菌的抑菌圈直径大于单方精油，复方方三抑菌圈直径最大，三种配方的抑菌圈直径随浓度的增大而增大。如表3所示，复方精油对大肠杆菌的抑菌圈直径大于单方精油，复方方三抑菌圈直径最大，三种配方的抑菌圈直径随浓度的增大而增大。
2.2最低抑菌浓度(MIC)测定结果
表4 复方精油对不同菌株的最低抑菌浓度(MIC)
(注：-表示肉眼未见微生物长出；+表示肉眼可见微生物长出。)
空白管中培养基澄清，说明培养基与培养条件对最低抑菌浓度MIC的测定没有干扰。如表4所示，复方精油对金黄色葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌和大肠杆菌的最低抑菌浓度MIC分别为2μL/mL、6μL/mL、6μL/mL。
Claims (3)
1.一种具有抑菌作用的复方薄荷精油制剂，其特征在于是由下述重量配比的精油制成的制剂：
薄荷精油∶姜黄精油＝1∶1或薄荷精油∶姜黄精油＝1∶2或薄荷精油∶姜黄精油＝2∶1。
2.权利要求1所述的一种具有抑菌作用的复方薄荷精油制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
步骤(一)：分别取粉碎的薄荷全草和姜黄粉末各80g-100g，分别加入2000mL圆底烧瓶中，加入800mL-1000mL水，同时加少量沸石，放入微波炉中，微波功率520W，微波辐射时间10min-12min；
步骤(二)：将(一)中圆底烧瓶再进行水蒸气蒸馏，蒸馏时间1.5h-2.0h，静置，分出精油，薄荷精油得率为3.02％，姜黄精油得率为5.46％。
3.权利要求1所述的一种复方薄荷精油制剂在制备对痤疮丙酸杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有抑菌作用的药物中的应用。
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