CN102127131A

CN102127131A - 一种梓醇的提取方法

Info

Publication number: CN102127131A
Application number: CN2010105294376A
Authority: CN
Inventors: 张守力
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2010-11-03
Filing date: 2010-11-03
Publication date: 2011-07-20

Abstract

本发明涉及药物制备领域，是一种梓醇的制备方法，解决了现有技术梓醇的制备转化率低，产量低，产品品质不好的问题，工艺如下：原料洗净、切片，后酶解，然后加乙醇，常温下在匀浆提取装置中匀浆提取2次或2次以上，合并匀浆液，滤渣取液，滤液减压浓缩，稠浸膏加水稀释，加到大孔树脂中，洗脱，将洗脱液减压浓缩成浸膏；在浸膏中加入拌样硅胶，搅拌均匀，过硅胶柱，洗脱液减压浓缩，再用甲醇重结晶，得到梓醇纯品。通过本发明的方法极大地提高了生产效率和转化率，促使原料中的有效物质更多的转化为梓醇，使得产品质量更进一步提高，且产品纯度高，适合工业化生产。

Description

一种梓醇的提取方法

技术领域

本发明涉及中药有效成分的提取方法，具体涉及从地黄或地黄茎中提取梓醇的提取方法。

背景技术

梓醇是地黄最主要有效成分之一，是其“滋阴”作用的有效活性成分，为一种不很稳定的环烯醚萜苷类化合物，常与多种环烯醚萜苷类成分如桃叶珊瑚苷和胡黄连苷等同时存在于植物组织中，具有利尿、缓泻、降血糖、保肝及抗衰老等多种药理活性。研究表明，在暂时缺血情况下，梓醇有显著的神经保护功能，并发现梓醇能激活脑神经元，可以治疗因外伤、代谢障碍、脑缺血和帕金森氏病等引起的脑神经病。

地黄为玄参科植物地黄Rehmannia glutinosa Libsch的块根。是常用补益中药之一，临床应用极为广泛。据文献报道，主要成分含有植物甾醇类、糖类、氨基酸、梓醇等。梓醇是地黄中含量最高的环烯醚萜单糖苷，为地黄的主要活性，现代药理研究表明其具有降血糖、利尿、缓泻、抗癌、抗炎等作用，另外对脑缺血受损神经还有保护作用，有望成为潜在的治疗帕金森病和早老性痴呆的药物。

国内专家学者的研究和发明主要是从地黄根中提取梓醇，匡岩巍等(匡岩巍，卢兖伟，吴祖泽.大孔吸附树脂分离纯化鲜地黄叶中梓醇的初步研究，军事医学科学院院刊，2009，33(6)，550-553)研究了采用大孔吸附树脂从鲜地黄叶中提取分离梓醇的方法。地黄茎通常是在种植和收割时，仅作为饲料、肥料，甚至往往是被废弃的。通过研究发现，相比地黄根，在地黄茎中梓醇含量比较多，糖类相对较少，能够有效的作为梓醇提取的材料。本方法利用废弃的地黄茎，采用废物利用的新工艺，具有很好的实用价值和经济效益。

梓醇在加热条件下易水解和氧化，所以现有技术中在提取梓醇方面有很大限制。

发明内容

本发明的一个目的是为解决上述现有技术提取时间长，转化率低，技术操作复杂等问题，提供一种操作便捷、转化的可靠性、产品回收率高，可达到工业化生产要求的梓醇的提取方法。

工艺研究：

(1)选用鲜地黄或鲜地黄茎，洗净、切片，以质量计，加入0.1-0.5％的复合酶溶液酶解1-3小时，然后加5-20质量倍数的70-95％乙醇，常温下在匀浆提取装置中匀浆提取5-10min，连续2次或2次以上，匀浆液转移后在超声波作用下5-30min，合并匀浆液，滤渣取液，滤液减压浓缩成稠浸膏。

(2)将稠浸膏用2倍以上的水稀释，加到预先用95％乙醇浸泡过的大孔树脂，洗脱，将洗脱液减压浓缩成浸膏；

(3)在浸膏中加入拌样硅胶，搅拌均匀，过硅胶柱，用混合溶剂冲洗柱子，收集混合溶剂，减压浓缩，再用甲醇重结晶，得到纯度达到99％的梓醇纯品。

步骤(2)中洗脱时用5-20％的乙醇洗脱。

步骤(2)中洗脱时也可以先用水洗，水的量为稠浸膏量的0.01-0.5倍，再用5-20％的乙醇洗脱。

步骤(3)中混合溶剂为甲醇∶乙酸乙酯1-3∶1或者正丁醇∶乙酸乙酯∶甲醇2-4∶1-3∶1。

所用超声波功率为80-100W的超声波。

所述复合酶溶液是质量百分含量为0.1-0.5％的溶液，所述复合酶溶液质量浓度为0.1-0.5％；所述复合酶为纤维素酶与酒曲酶、淀粉酶、蛋白酶的混合物；纤维素酶与酒曲酶、淀粉酶、蛋白酶按照质量计算，比例为1∶0.5-1∶0.01-0.5∶0.01-1；所述复合酶中，纤维素酶与酒曲、淀粉酶、蛋白酶按照质量计算，优选比例为1∶0.6-0.8∶0.05-0.2∶0.05-0.5。

所述蛋白酶优选酸性蛋白酶。

所述酶解时间1-3小时，酶解温度40-50℃，酶解时Ph值为4-6。

Ph值通过盐酸或硫酸调节，优选盐酸。

本发明的有益效果在于：

本发明在总结前人的工作和自己探索的基础上，经反复的研究改进，采用酶法协同超声波法进行提取，解决了常规生产中梓醇在加热条件下易水解和氧化的难题，使原料中的有效物质最大程度的被提取出来，极大地地提高了生产效率和转化率，使得产品质量更进一步提高，且产品纯度高，适合工业化生产。

在提取过程中加入抗氧化剂，进一步解决了常规生产中梓醇在加热条件下易水解和氧化的难题，提高了产率和产量，梓醇遇到部分酶，如β葡萄糖苷酶，可以使梓醇降解，本发明中采用复合酶，本复合酶很好的破坏细胞壁等影响梓醇析出的壁垒，提高生产效率，并且因为复合酶中各种成分相互作用避免了使梓醇降解的情况。

本发明可以利用废弃的地黄茎，采用废物利用的新工艺，具有很好的实用价值和经济效益，适宜推广应用。

具体实施方式

下面结合实施例来进一步说明本发明，但并不作为对本发明的限定。

实施例1

(1)选用100kg鲜地黄茎，洗净、切片，以质量计，加入0.2kg的复合酶溶液酶解2小时，然后加500kg的75％乙醇，分为3份，加入1份在酶解后的原料中，常温下在匀浆提取装置中匀浆提取8min，转移匀浆液，然后将剩余的乙醇溶液中的1份加入匀浆后的物质中，重复匀浆过程，匀浆过程完成后，再次重复操作，匀浆液转移后在超声波作用下15min，合并匀浆液，滤渣取液，滤液减压浓缩成稠浸膏；得到5kg稠浸膏。

(2)将稠浸膏用10kg水稀释，加到预先用95％乙醇浸泡过的大孔树脂中，过树脂，然后洗脱，将洗脱液减压浓缩成浸膏，得到3kg浸膏；

(3)在浸膏中加入拌样硅胶，搅拌均匀，过硅胶柱，用甲醇∶乙酸乙酯2∶1的混合溶剂冲洗硅胶柱，收集混合溶剂，减压浓缩，再用甲醇重结晶，得到梓醇纯品。

所述步骤(2)中洗脱时先用少量水洗，再用5-20％的乙醇洗脱。所用水的量为0.5kg。

所用超声波功率为80-100W的超声波。

所述复合酶溶液为质量百分含量为0.2％的溶液，所述复合酶中，纤维素酶与酒曲、淀粉酶、蛋白酶按照质量计算，比例为1∶0.8∶0.1∶0.3。

所述酶解时间1-3小时，酶解温度40-50℃，酶解时Ph值为4-6。

产量为368g，产率达90％以上，产品纯度为99.13％。

原料选用河南武陵生产的地黄的茎，经精密测量，原料中的梓醇含量不超过4.2mg/g。

实施例2

为避免梓醇的损失，直接用10％乙醇洗脱，而不用水先洗，可提高产量、提高制备样品纯度。其余同实施例1。产量为370g，产品纯度为99.07％。

实施例3

所述酶解液为纤维素酶、酒曲酶、淀粉酶、酸性蛋白酶复合酶，比例为1∶0.6∶0.2∶0.3，其余同实施例2。产量为365g，产品纯度为99.12％。

实施例4

(1)选用100kg鲜地黄，洗净、切片，以质量计，加入0.1kg的复合酶溶液酶解1-3小时，然后加800kg质量倍数的95％乙醇，常温下在匀浆提取装置中匀浆提取5min，连续4次，匀浆液转移后在超声波作用下5min，合并匀浆液，滤渣取液，滤液减压浓缩成稠浸膏；

(2)将稠浸膏用2倍以上的水稀释，加到预先用95％乙醇浸泡过的大孔树脂，先用0.8kg水洗，再用5-20％的乙醇洗脱；将洗脱液减压浓缩成浸膏；

(3)在浸膏中加入拌样硅胶，搅拌均匀，过硅胶柱，用正丁醇∶乙酸乙酯∶甲醇2∶1∶1混合溶剂冲洗柱子，收集混合溶剂，减压浓缩，再用甲醇重结晶，得到梓醇纯品。其余同实施例1，产量为367g，产品纯度为98.9％。

实施例5

(1)选用鲜地黄和鲜地黄茎，洗净、切片，以质量计，加入0.5kg的复合酶溶液酶解3小时，然后加20质量倍数的70％乙醇，常温下在匀浆提取装置中匀浆提取10min，连续5次，匀浆液转移后在超声波作用下30min，合并匀浆液，滤渣取液，滤液减压浓缩成稠浸膏；

(2)将稠浸膏用5倍的水稀释，加到预先用95％乙醇浸泡过的大孔树脂，洗脱，将洗脱液减压浓缩成浸膏；

(3)在浸膏中加入拌样硅胶，搅拌均匀，过硅胶柱，用正丁醇∶乙酸乙酯∶甲醇4∶3∶1混合溶剂冲洗柱子，收集混合溶剂，减压浓缩，再用甲醇重结晶，得到梓醇纯品。

所述步骤(2)中洗脱时用5-20％的乙醇洗脱。其余同实施例1，产量为366g，产品纯度为98.9％。

实施例6-13

所述酶解液为纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和溶菌酶的复合酶以下表比例的组合；酶解温度，酶解时间也如下表所示，其余同实施例2。

实施例14-19

所述步骤(3)中混合溶剂中各成分比例如下，其余同实施例1：

Claims

1.一种梓醇的提取方法，其特征在于：所述工艺如下：

(1)选用鲜地黄或鲜地黄茎，洗净、切片，以质量计，加入0.1-0.5％的复合酶溶液酶解1-3小时，然后加5-20质量倍数的70-95％乙醇，常温下在匀浆提取装置中匀浆提取5-10min，连续2次或2次以上，匀浆液转移后在超声波作用下5-30min，合并匀浆液，滤渣取液，滤液减压浓缩成稠浸膏；

(3)在浸膏中加入拌样硅胶，搅拌均匀，过硅胶柱，用混合溶剂冲洗柱子，收集混合溶剂，减压浓缩，再用甲醇重结晶，得到梓醇纯品。

2.如权利要求1所述的一种梓醇的提取方法，其特征在于：所述步骤(2)中洗脱时用5-20％的乙醇洗脱。

3.如权利要求2所述的一种梓醇的提取方法，其特征在于：所述步骤(2)中洗脱时先用水洗，再用5-20％的乙醇洗脱。

4.如权利要求1所述的一种梓醇的提取方法，其特征在于：所用超声波功率为80-100W的超声波；所述步骤(3)中混合溶剂为甲醇∶乙酸乙酯1-3∶1或者正丁醇∶乙酸乙酯∶甲醇2-4∶1-3∶1。

5.如权利要求1所述的一种梓醇的提取方法，其特征在于：所述复合酶溶液质量浓度为0.1-0.5％；所述复合酶为纤维素酶与酒曲酶、淀粉酶、蛋白酶的混合物；纤维素酶与酒曲酶、淀粉酶、蛋白酶按照质量计算，比例为1∶0.5-1∶0.01-0.5∶0.01-1；酶解时间为0.5-24小时，酶解温度为15-70℃。

6.如权利要求5所述的一种梓醇的提取方法，其特征在于：所述复合酶中，纤维素酶与酒曲、淀粉酶、蛋白酶按照质量计算，比例为1∶0.6-0.8∶0.05-0.2∶0.05-0.5。

7.如权利要求5所述的一种梓醇的提取方法，其特征在于：所述酶解时间1-3小时，酶解温度40-50℃，酶解时Ph值为4-6。

8.如权利要求5所述的一种梓醇的提取方法，其特征在于：所述蛋白酶为酸性蛋白酶。