CN102114102A - 一种中药提取物混合制剂及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种中药提取物混合制剂,包括黄芩提取物、栀子提取物和茯苓提取物,其中,三者之间的用量配比关系为:(80~100)∶(80~100)∶(100~150);所述黄芩提取物中黄芩苷的含量在90%以上,栀子提取物中京尼平苷的含量在90%以上,茯苓提取物中多糖的含量在50%以上。所述中药提取物混合制剂具有保肝利胆的作用,可以用于制备具有保肝利胆的药物或保健品,用于制备治疗梗阻性黄疸的药物,用于制备治疗胆汁淤积的药物,用于制备治疗慢性酒精性肝损伤的药物,其对对胆管结扎致大鼠、ANIT所致大鼠胆汁淤积及大鼠酒精性肝损伤的保护和利胆的作用明显优于常规对照药物,显著的降低肝损伤程度和黄疸指数。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药提取物混合制剂及其应用。
背景技术
黄芩,栀子,茯苓,均是常见中药,其药理药性如下:
黄芩,系唇形科Labiatae物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根,性寒、味苦,归肺、胆、脾、大肠、小肠经,具有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎等功效。主产于河北、山西、河南、陕西、内蒙古及东北等地,以河北北部产者为道地药材。临床应用:用于湿温发热、胸闷、口渴不欲饮,以及湿热泻痢、黄疸等症。对湿温发热,与滑石、白蔻仁、茯苓等配合应用;对湿热泻痢、腹痛,与白芍、葛根、甘草等同用;对于湿热蕴结所致的黄疸,可与茵陈、栀子、淡竹叶等同用。有研究者对黄芩的传统药效进行了研究,证实其具有保护肝脏及抗自由基损伤的作用。黄芩苷是从唇形科植物黄芩中提取、分离出来的一种黄酮类化合物,是黄芩的主要有效成分之一,其具有解热、利胆、保肝、抗菌等药理作用。
栀子,别名黄栀子、山栀、白蟾,是茜草科植物栀子的果实。目前,栀子的果实是传统中药,属卫生部颁布的第I批药食两用资源,具有解热、抗菌、镇静、止血、消肿、保肝利胆、防治急性胰腺炎、降低心肌收缩力、降压、防治动脉粥样硬化及血栓、抗炎等药理作用。关于治疗急性黄疸型肝炎,有研究表明:栀子提取物、栀子苷和西红花苷均具有显著促进大鼠胆汁分泌的作用,但尚未见其退黄作用的研究报道。
茯苓,为多孔菌科真菌茯苓Poria Cocos(Schw.)Wolf的干燥菌核,性味甘、淡,平;归心、脾、肺、肾经,具有利水渗湿,健脾宁心之功效。茯苓中的主要成分为茯苓多糖(pachy-man),其具有抑制肿瘤生长,调节机体免疫等功能,对急、慢性炎症也具有抵抗作用。
这三味中药的药理药性虽然清楚,但三者合用后的药效如何,现有技术中并未见有报道。
发明内容
针对上述现有技术,本发明提供了一种中药提取物混合制剂,及其在制备药物中的应用。
本发明是通过以下技术方案实现的:
一种中药提取物混合制剂,包括黄芩提取物、栀子提取物和茯苓提取物,其中,三者之间的用量配比关系为:(80~100)∶(80~100)∶(100~150)(质量比);所述黄芩提取物中黄芩苷的含量在90%以上,栀子提取物中京尼平苷的含量在90%以上,茯苓提取物中多糖的含量在50%以上(均为质量百分比)。
制备时,将黄芩提取物、栀子提取物和茯苓提取物混合混匀即可。
所述黄芩提取物是通过以下制备方法得到的:取黄芩5000g,加8~12倍(质量倍数)40~60%乙醇(体积百分比,下同)回流提取两次,每次1~1.5小时,回收乙醇,过滤,合并滤液,滤液浓缩到200~300ml,用盐酸(浓度优选1~3mol/L)调pH值至1.5~2.0,60℃保温30~45分钟,冷却至室温,放置12~24小时,滤过,残渣用乙醇洗至pH值4.0,加6~10倍(质量倍数)水搅拌均匀,用氢氧化钠溶液(浓度优选3~9%,质量百分比)调pH值至7.0,溶解后加等质量乙醇搅匀,放置12小时,滤过,滤液用盐酸(浓度优选1~3mol/L)调pH值至1.8~2.0,50~80℃保温30分钟,冷却至室温,滤过,残渣用乙醇洗至pH值4.0,回收乙醇后真空干燥,粉碎成细粉,即得黄芩提取物。
所述栀子提取物是通过以下制备方法得到的:将栀子5000g用8~12倍(质量倍数)60~80%的乙醇回流提取两次,每次1~2小时,滤过,合并提取液,回收乙醇得浓缩液;浓缩液依次用石油醚和正丁醇萃取,正丁醇部位浓缩得浸膏;将正丁醇部位得到的浸膏拌样、上硅胶柱,用氯仿-甲醇进行梯度洗脱,在氯仿-甲醇为100∶7(体积比)时,出现大量粉末,氯仿-甲醇重结晶,得白色针状结晶,即为栀子提取物。
所述茯苓提取物是通过以下制备方法得到的:茯苓药材饮片加8~15倍量(质量倍数)的80℃水温浸90分钟,收集浸取液,再加5~8倍水(质量倍数),沸腾提取60~120分钟,合并收集提取液,80℃真空减压干燥,即得茯苓提取物。
所述中药提取物混合制剂在实际生产和应用中,还可以包括微晶纤维素、交联聚维酮、微粉硅胶、硬脂酸镁等常规的药用辅料,可以将其制成颗粒剂、片剂、胶囊剂等常规的药物剂型。
所述中药提取物混合制剂具有保肝利胆的作用,可以用于制备具有保肝利胆的药物或保健品,用于制备治疗梗阻性黄疸的药物,用于制备治疗胆汁淤积的药物,用于制备治疗慢性酒精性肝损伤的药物,其对对胆管结扎致大鼠、ANIT所致大鼠胆汁淤积及大鼠酒精性肝损伤的保护和利胆的作用明显优于常规对照药物,显著的降低肝损伤程度和黄疸指数。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明。
实施例1制备中药提取物混合制剂
配方为:黄芩提取物100g,栀子提取物100g,茯苓提取物150g,微晶纤维素100g,交联聚维酮(PVPP)30g,微粉硅胶7g,硬脂酸镁1g。
制备方法如下:
(1)黄芩提取物、栀子提取物、茯苓提取物和微晶纤维素充分混合均匀,在80℃烘干2小时,研细,过100目筛,混合,混匀,备用。
(2)将交联聚维酮过100目筛,备用。
(3)将(1)中得到的混合物与PVPP处方量的1/3按等量递加的方法充分混合均匀,并过100目筛,95%乙醇(体积分数)制软材,过24目筛制粒,60℃干燥30min,得干颗粒。
或:(3)将(1)所得干颗粒中加入PVPP处方量的另外2/3混合均匀,过40目筛,整粒,然后加入处方量的微粉硅胶,混匀;再加入处方量的硬脂酸镁,混匀,制颗粒或φ12mm浅凹冲压片,调节片重约500mg,硬度控制在5-6kg,得片剂。
所述黄芩提取物是通过以下制备方法得到的:取黄芩5000g,加10倍50%乙醇回流提取两次,每次1小时,回收乙醇,过滤,合并滤液,滤液浓缩到300ml,用盐酸调pH值至2.0,60℃保温30分钟,冷却至室温,放置12小时,滤过,残渣用乙醇洗至pH值4.0,加8倍水搅拌均匀,用氢氧化钠溶液调pH值至7.0,溶解后加等质量乙醇搅匀,放置12小时,滤过,滤液用盐酸调pH值至1.6-2.2,70℃保温30分钟,冷却至室温,滤过,残渣用乙醇洗至pH值4.0,回收乙醇后真空干燥,粉碎成细粉,即得黄芩提取物。
所述栀子提取物是通过以下制备方法得到的:将栀子5000g用10倍70%的乙醇回流提取两次,每次1.5小时,滤过,合并提取液,回收乙醇得浓缩液;浓缩液依次用石油醚和正丁醇萃取,正丁醇部位浓缩得浸膏;将正丁醇部位得到的浸膏拌样、上硅胶柱,用氯仿-甲醇进行梯度洗脱,在氯仿-甲醇为100∶7时,出现大量粉末,氯仿-甲醇重结晶,得白色针状结晶,即为栀子提取物。
所述茯苓提取物是通过以下制备方法得到的:茯苓药材饮片加12倍量的80℃水温浸90分钟,收集浸取液,再加6倍水,沸腾提取90分钟,合并收集提取液,80℃真空减压干燥,即得茯苓提取物。
实施例2制备中药提取物混合制剂
配方为:黄芩提取物80g,栀子提取物80g,茯苓提取物100g,微晶纤维素80g,交联聚维酮(PVPP)30g,微粉硅胶7g,硬脂酸镁1g。
制备方法同实施例1。
所述黄芩提取物是通过以下制备方法得到的:取黄芩5000g,加12倍40%乙醇回流提取两次,每次1.5小时,回收乙醇,过滤,合并滤液,滤液浓缩到250ml,用盐酸调pH值至1.5,60℃保温45分钟,冷却至室温,放置24小时,滤过,残渣用乙醇洗至pH值4.0,加10倍水搅拌均匀,用氢氧化钠溶液调pH值至7.0,溶解后加等质量乙醇搅匀,放置12小时,滤过,滤液用盐酸调pH值至1.8,80℃保温30分钟,冷却至室温,滤过,残渣用乙醇洗至pH值4.0,回收乙醇后真空干燥,粉碎成细粉,即得黄芩提取物。
所述栀子提取物是通过以下制备方法得到的:将栀子5000g用8倍80%的乙醇回流提取两次,每次2小时,滤过,合并提取液,回收乙醇得浓缩液;浓缩液依次用石油醚和正丁醇萃取,正丁醇部位浓缩得浸膏;将正丁醇部位得到的浸膏拌样、上硅胶柱,用氯仿-甲醇进行梯度洗脱,在氯仿-甲醇为100∶7时,出现大量粉末,氯仿-甲醇重结晶,得白色针状结晶,即为栀子提取物。
所述茯苓提取物是通过以下制备方法得到的:茯苓药材饮片加15倍量的80℃水温浸90分钟,收集浸取液,再加8倍水,沸腾提取120分钟,合并收集提取液,80℃真空减压干燥,即得茯苓提取物。
实施例3提取物颗粒制剂(实施例1制备)对大鼠的保肝利胆作用
1.对胆管结扎致大鼠梗阻性黄疸的影响:
方法:取SD大鼠50只,随机分为正常对照组、假手术组、模型对照组、优思弗胶囊组、提取物制剂剂量组、提取物制剂中剂量组、提取物制剂高剂量组,共5组,每组10只,除正常对照组外,各组大鼠开腹后分离总胆管,上下端结扎后剪断总胆管,造成梗阻性黄疸模型,假手术组开腹后分离总胆管但不进行结扎,缝合。各组大鼠在手术后5天,按10ml/kg体重进行灌胃给药,每天1次,药物浓度分别是:提取物制剂12%和提取物制剂24%(每次给药量;1.2g/kg、2.4g/kg),思美泰根据药物临床应用剂量,大鼠给予2%浓度,每次给药量;0.2g/kg,共10d,正常对照假手术组、模型对照组给等体积蒸馏水。末次给药后1h,各组大鼠眼眶取血,3000r离心10min分离血清,按照试剂盒操作方法测定其TBIL、AST、ALT、ALP、GGT值。
结果:由表1可见,提取物制剂两剂量组(均能显著降低胆管结扎大鼠血清中TBIL含量、ALP活性、GGT活性、ALT和AST活性(提取物制剂、高剂量组的TBIL含量、ALP活性、GGT活性、ALT和AST活性与模型对照组比较,P<0.01或0.05),提示提取物制剂能够抑制胆管结扎所致的梗阻性黄疸,具有较好的退黄作用。
表1提取物制剂对胆管结扎致大鼠梗阻性黄疸的影响(x±s,n=10)
注:与正常对照组比较:##P<0.01;与模型对照组比较:*P<0.05,**P<0.012.对ANIT所致大鼠胆汁淤积的影响:取SD大鼠50只,随机分为正常对照组、模型对照组、思美泰组、提取物制剂剂量组、提取物制剂中剂量组、提取物制剂高剂量组,共6组,每组10只,各组大鼠按10ml/kg体重进行灌胃给药药物的浓度分别是,提取物制剂12%和提取物制剂24%,思美泰根据药物临床应用剂量,大鼠给予2%浓度,1次/d,共7d,正常对照组、模型对照组给等体积蒸馏水,第7天给药后1h,除正常对照组外,其余各组动物均腹腔注射5%2ml/kg ANIT植物油溶液进行造模剂量为100mg/kg,造模后继续给药,1次/d,造模48h末次给药后2h后各组大鼠取血,3000r离心10min分离血清,按照试剂盒操作方法测定其TBIL、AST、ALT、ALP、GGT值。
结果:由表2可见,提取物制剂两剂量组均能显著降低ANIT所致大鼠血清中TBIL含量、ALP活性、GGT活性、ALT和AST活性(提取物制剂的TBIL含量、ALP活性、GGT活性、ALT和AST活性与模型对照组比较,P<0.01或0.05),提示提取物制剂能够抑制ANIT所致的胆汁淤积,具有显著退黄功效。
表2提取物制剂对ANIT所致大鼠胆汁淤积的影响(±s,n=10)
注:与正常对照组比较:##P<0.01;与模型对照组比较:*P<0.05,**P<0.01。
讨论:黄疸是由于胆色素代谢障碍,血浆中胆红素含量增高,使皮肤、巩膜、粘膜等被染成黄色的一种病理变化和临床表现。按病因学分为溶血性、肝细胞性、胆汁淤积性和先天性非溶血性黄疸,胆汁淤积性黄疸又分为肝内胆汁淤积性黄疸和肝外胆汁淤积性黄疸。黄疸可引起机体多系统的改变,包括中枢神经系统功能障碍、继发性胆汁性肝硬化、肝损伤、肝细胞凋亡、脂肪泻、内毒素血症、心动过缓、心肌收缩力下降、血压下降、肾功能不全、免疫功能失调等。目前治疗黄疸的西药主要着眼于改善肝功能,增加胆红素代谢和排泄,增加胆汁分泌;而中医药多以清热解毒、利湿退黄为主要治疗方法,兼顾活血、化瘀。
实施例4提取物制剂(实施例1制备)对大鼠慢性酒精性肝损伤的影响
1、材料
1.1动物:Wistar大鼠,体重(180-200)g,雌性,山东大学实验动物中心提供,合格证号:SCXK(鲁)2003004。
1.2试剂:北京二锅头酒(国家许可证编号Xk-16-030360,执行标准QH22-20002二级),北京双庆和酒业有限责任公司产品,酒精度56%(v/v),白酒出厂日期20080611。绞股蓝总苷片,广州白云山中药厂生产,含绞股蓝总苷20mg/片,批号0310016。
1.3试剂盒:丙氨酸氨基转换酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转换酶(AST)试剂盒、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(S0D)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、考马斯亮蓝试剂盒为南京建成生物工程研究所产品,批号20041013,20041013,20041015,20041014和20041016。
1.4仪器:日立7080型全自动生化分析仪;西安FJ-2008自动γ免疫计数器。
2.方法:
2.1动物分组:取大鼠60只,随机分2组,空白对照组(10只),每日灌胃(ig)10mL/kg蒸馏水;模型对照组(50只),每日ig 56°白酒5mL/kg;每日2次,连续4周。4周后,取模型组2只大鼠肝脏,做病理检查,光镜下观察可见肝脏汇管区大量炎细胞润,肝细胞弥漫变性坏死,证明模型已成立。
2.2模型制备与分组给药:将酒精肝模型60大鼠随机分4组,每组12只。模型组每日ig 56°白酒5mL/kg;阳性药组每日ig 25mg/kg绞股蓝总苷和56°白酒5mL/kg;提取物制剂高,低剂量组日ig 1.2,2.4g/kg提取物制剂,同时ig 56°白酒5mL/kg,每日1次,连续4周。末次给药后,禁食12h,由腹主动脉采血,离心,取血清,测定ALT,AST,MDA,TNF-α含量,测定SOD和GSH-Px活性。取肝脏左叶,测定MDA含量,测定ALT,AST,SOD,GSH-Px活性(均按试剂盒方法进行)。取肝脏右叶,石蜡包埋,肝脏病理切片厚度为5μm,HE染色,做病理检查。
2.3统计学处理:试验数据以(x±s)表示,生化结果进行t检验;肝损害程度采用SPSS12.0软件,用非参数中等级资料秩和检验统计。
3结果
3.1对酒精肝大鼠血清及肝脏生化指标的影响:模型组大鼠血清和肝脏中ALT,AST,MDA含量显著增加;SOD和GSH-Px活性明显降低。给予提取物制剂的酒精肝大鼠血清ALT,AST,MDA和TNF-α含量明显降低;SOD和GSH-Px活性明显增加,如表3、表4所示。
表3提取物制剂对酒精性脂肪肝大鼠血清生化指标的影响(x±s)
注:与模型组比较*P<0.05,**P<0.01。
表4提取物制剂对酒精性脂肪肝大鼠肝脏中生化指标的影响(x±s)
注:与模型组比较*P<0.05,**P<0.01。
3.2对酒精肝大鼠肝脏组织损害程度的影响
病理检查结果:正常组大鼠肝小叶结构正常,肝细胞索排列整齐。模型组大鼠肝组织正常结构消失,小叶界限不清,细胞索紊乱,大部分肝窦扩张,肝细胞广泛脂肪变性,有小坏死灶及中央静脉扩张。阳性药组大鼠大部分肝脏肝小叶结构清晰,肝细胞索排列整齐,个别有中央静脉扩张和小坏死灶,以及轻度肝细胞脂肪变性。提取物制剂高剂量组大鼠大部分肝小叶结构清晰,肝细胞索排列整齐,部分肝细胞呈轻度浊肿。肝损伤明显轻于模型组。提取物制剂低剂量组大鼠有中央静脉扩张和小坏死灶及轻度肝细胞脂肪变性。各组肝脏肝细胞脂肪变性程度见表5。
表5肝脏镜下观察统计表
注:与模型组比较*P<0.05,**P<0.01。
I级表示一个视野下肝脏脂肪变性<1/10,基本正常;II级表示一个视野下肝脏脂肪变性<1/3;III级表示一个视野下肝脏脂肪变性<1/2;IV级表示一个视野下肝脏脂肪变性>1/2。
Claims (9)
1.一种中药提取物混合制剂,其特征在于:包括黄芩提取物、栀子提取物和茯苓提取物,其中,三者之间的用量配比关系为:(80~100)∶(80~100)∶(100~150);所述黄芩提取物中黄芩苷的含量在90%以上,栀子提取物中京尼平苷的含量在90%以上,茯苓提取物中多糖的含量在50%以上。
2.根据权利要求1所述的一种中药提取物混合制剂,其特征在于:所述黄芩提取物是通过以下制备方法得到的:取黄芩5000g,加8~12倍40~60%乙醇回流提取两次,每次1~1.5小时,回收乙醇,过滤,合并滤液,滤液浓缩到200~300ml,用盐酸调pH值至1.5~2.0,60℃保温30~45分钟,冷却至室温,放置12~24小时,滤过,残渣用乙醇洗至pH值4.0,加6~10倍水搅拌均匀,用氢氧化钠溶液调pH值至7.0,溶解后加等质量乙醇搅匀,放置12小时,滤过,滤液用盐酸调pH值至1.8~2.0,50~80℃保温30分钟,冷却至室温,滤过,残渣用乙醇洗至pH值4.0,回收乙醇后真空干燥,粉碎成细粉,即得黄芩提取物。
3.根据权利要求1所述的一种中药提取物混合制剂,其特征在于:所述栀子提取物是通过以下制备方法得到的:将栀子5000g用8~12倍60~80%的乙醇回流提取两次,每次1~2小时,滤过,合并提取液,回收乙醇得浓缩液;浓缩液依次用石油醚和正丁醇萃取,正丁醇部位浓缩得浸膏;将正丁醇部位得到的浸膏拌样、上硅胶柱,用氯仿-甲醇进行梯度洗脱,在氯仿-甲醇为100∶7时,出现大量粉末,氯仿-甲醇重结晶,得白色针状结晶,即为栀子提取物。
4.根据权利要求1所述的一种中药提取物混合制剂,其特征在于:所述茯苓提取物是通过以下制备方法得到的:茯苓药材饮片加8~15倍量的80℃水温浸90分钟,收集浸取液,再加5~8倍水,沸腾提取60~120分钟,合并收集提取液,80℃真空减压干燥,即得茯苓提取物。
5.根据权利要求1所述的一种中药提取物混合制剂,其特征在于:还包括常规药用辅料。
6.权利要求1所述的一种中药提取物混合制剂在制备治疗梗阻性黄疸的药物中的应用。
7.权利要求1所述的一种中药提取物混合制剂在制备治疗胆汁淤积的药物中的应用。
8.权利要求1所述的一种中药提取物混合制剂在制备治疗慢性酒精性肝损伤的药物中的应用。
9.权利要求1所述的一种中药提取物混合制剂在制备具有保肝利胆的药物或保健品中的应用。
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