CN102091046A - 一种磷酸氟达拉滨冻干粉针剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药技术领域，涉及到一种磷酸氟达拉滨冻干粉针剂及其制备方法。该磷酸氟达拉滨冻干粉针剂由磷酸氟达拉滨和甘露醇组成，其二者的质量比为1∶0.6～1.2。本发明的磷酸氟达拉滨冻干粉针剂制备方法为：于配液罐中加入注射用水，然后加入处方量的磷酸氟达拉滨，再加碱搅拌直至全部溶解，之后加入甘露醇，调节pH，加入活性炭脱色，过滤脱碳，再用滤膜精滤，分装，冷冻干燥。该磷酸氟达拉滨冻干粉针剂成型性良好，冻前溶液外观澄清，冻干品复溶性好，复溶后的澄清度好，杂质含量低，水分含量低，稳定性好，质量可控。

Description

一种磷酸氟达拉滨冻干粉针剂及其制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及到一种磷酸氟达拉滨冻干粉针剂及其制备方法。

背景技术

磷酸氟达拉滨，化学名称为9-β-D-阿拉伯酸-呋喃糖-2-氟腺嘌呤-5-磷酸盐，分子式为C₁₀H₁₃F N₅O₇P，分子量为365.21，其结构式为：

磷酸氟达拉滨，是一种抗代谢的氟化嘌呤核苷类似物，它对淋巴细胞有高度的选择性，它能够抑制处于静止期细胞DNA的修复及处于分裂期细胞DNA的合成，并且具有促进这些细胞凋亡的作用，已显示出良好疗效，目前被广泛的运用于治疗各种血液系统疾病，尤其是慢性淋巴细胞白血病。磷酸氟达拉滨是通过促进肿瘤细胞凋亡来提高疾病的缓解率。其促凋亡的方式主要是通过调节以下几种途径达到的：死亡受体途径，线粒体途径，P53，神经酰胺，Bcl一2家族及一些凋亡促进子和凋亡抑制子。

注射用磷酸氟达拉滨含磷酸氟达拉滨，为抗病毒药阿糖腺苷的氟化核苷酸类似物，9-β-D-阿拉伯酸-呋喃基腺嘌呤(ara-A)，可相对地抵抗腺苷脱氨基酶的脱氨基作用。磷酸氟达拉滨是近年来治疗慢性淋巴细胞白血病和低度恶性非霍奇金淋巴瘤(NHL)疗效比较突出的新药，磷酸氟达拉滨是近年来发展的新型抗肿瘤药物，已应用于血液系统恶性肿瘤，如慢性淋巴细胞白血病、淋巴瘤、急性髓细胞白血病和MDS等疾病的治疗。磷酸氟达拉滨主要通过诱导细胞凋亡来杀伤细胞。在过去10年，磷酸氟达拉滨对提高B-细胞型恶性疾病的疗效起了重要作用，对于慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocyte eukaemia，CLL)，其较小的剂量即可达到令人满意的疗效，不良反应较少。在国际CLL药品市场中，磷酸氟达拉滨目前处于领先地位，值得临床应用。

中国专利200710202969.7公开了一种治疗实体肿瘤的氟达拉滨缓释植入剂，该缓释植入剂含有氟达拉滨、缓释辅料和一定量的缓释调节剂，该氟达拉滨缓释植入剂中辅料成分较多，不仅增加了冻干粉针中由辅料带来的杂质的种类和含量，也增加了辅料对人体所带来的风险。

US2004006041公开了一种磷酸氟达拉滨注射液，该注射液由磷酸氟达拉滨、碱及水组成，其中，磷酸氟达拉滨的含量为0.5～50mg/ml，所使用的碱包括NaOH，NH₄OH和KOH，该磷酸氟达拉滨注射液的pH范围在5.5～7.1之间。该发明通过控制注射液的pH，增强了注射液在短暂的高温环境中的稳定性，但是该注射液在27.5℃的条件下贮存7个月，杂质含量可达到0.94％，该注射液对贮存温度和贮存时间的容忍性不强。

W02010046917公开了一种磷酸氟达拉滨注射液，该注射液由磷酸氟达拉滨、缓释剂、张度剂及注射用水组成。其中，磷酸氟达拉滨的含量为0.5～50mg/ml，缓释剂调节pH的范围在5.5～7.1之间。该磷酸氟达拉滨注射液和US2004006041的不同之处在于该注射液组成中不含碱。

但是，鉴于磷酸氟达拉滨的热稳定性较差，其原料需在冷处贮存，而注射液在制备的过程中要求的条件较高，需要进行高温终端灭菌，这对磷酸氟达拉滨的热稳定性产生了较大的影响，所以磷酸氟达拉滨不适合制成需高温终端灭菌的注射液。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种磷酸氟达拉滨冻干粉针剂，该磷酸氟达拉滨冻干粉针剂成型性良好，冻前溶液外观澄清，冻干品复溶性好，复溶后的澄明度好，杂质含量低，水分含量低，稳定性好，质量可控。

本发明的另一个目的在于提供一种磷酸氟达拉滨冻干粉针剂的制备方法。

为实现本发明的第一个目的，采用如下技术方案：

一种磷酸氟达拉滨冻干粉针剂，由磷酸氟达拉滨和甘露醇组成，其二者的质量比为1∶0.6～1.2。

上述磷酸氟达拉滨冻干粉针剂中，经过处方筛选试验，磷酸氟达拉滨与甘露醇的质量比优选为1∶0.8～1，最优选为1∶0.8。

所述磷酸氟达拉滨冻干粉针剂在不大于30℃时储存24月，其杂质含量不高于0.9％。

本领域技术人员知道，磷酸氟达拉滨冻干粉针剂的处方中辅料的成分和含量越少，那么由辅料带来的杂质的种类和含量就越少，由杂质引起的风险就越小，并且辅料本身给注射者带来的风险也就越小，因此本发明采用甘露醇一种赋形剂，甘露醇主要起支架剂的作用。本发明中，由于所用辅料仅有一种，所以磷酸氟达拉滨和甘露醇的比例是影响冻干粉针的外观、复溶性等性质的重要原因之一。经过大量实验，发现当磷酸氟达拉滨与甘露醇的质量比为1∶0.6～1.2时，产品的外观为疏松块状物，杂质含量低，复溶性也达到了要求，当磷酸氟达拉滨与甘露醇的质量比为1∶0.8～1时，产品的外观饱满不萎缩、色泽均一，复溶性、澄清度达到优良；出于节省成本的考虑，最优选二者比例为1∶0.8。

本发明新制的磷酸氟达拉滨冻干粉针剂外观饱满不萎缩、色泽均一、复溶性好、杂质含量不高于0.4％，冻干粉针剂在30℃贮存24个月后，其杂质含量不高于0.9％，冻干粉针剂的颜色无变化，并且复溶后的澄清度好，各项指标均无明显变化，具有非常优异的稳定性。

处方和工艺是决定磷酸氟达拉滨冻干粉针质量的关键，由于本产品所用辅料简单、辅料的含量低，这将会给冻干粉针剂外观、复溶性带来一定的影响，本发明对磷酸氟达拉滨冻干粉针剂的制备过程中的各个环节做了反复的试验和研究，通过改进冻干粉针的制备工艺，克服了磷酸氟达拉滨冻干粉针剂因辅料的成分和含量相对较少带来的缺陷，提高了磷酸氟达拉滨冻干粉针剂的质量。

本发明提供的一种磷酸氟达拉滨冻干粉针剂的制备方法包括如下步骤：

(a)称取处方量的磷酸氟达拉滨和甘露醇；

(b)于配液罐中加入注射用水至全量，再加入磷酸氟达拉滨，充分搅拌后加入氢氧化钠溶液直至磷酸氟达拉滨完全溶解；

(c)再加入甘露醇，搅拌使其全部溶解；

(d)用氢氧化钠溶液调节药液pH值，补加注射用水，混匀；

(e)再加入活性炭，搅拌吸附，经边脱碳边循环的方式脱碳，一次除菌过滤，二次终端除菌过滤后，所得滤液至药液瓶内，供灌装用；

(f)滤液分装，半加塞，放入冻干机中进行冷冻干燥，冷冻干燥分为预冻、一次干燥和二次干燥三个阶段；

预冻阶段：将搁板温度以0.5～0.55℃/min的速度降至-3℃，保温0.5小时，再以0.70～0.78℃/min的速度降至-30℃，停止降温，保温1小时，缓慢升温至-5℃，保温1小时，再以0.70～0.78℃/min的速度降温至-40～-50℃，继续保温3～5小时，抽真空至箱内真空度达10pa；

一次干燥阶段：搁板温度采用阶梯式升温，升温-保温交替进行，每升温10分钟，接着保温5分钟，升温的速率为0.29～0.36℃/min，待温度升至-5～-1℃时，继续保温3～5小时；

二次干燥阶段：将搁板温度以0.5～0.6℃/min的速度升至17～19℃，保温1小时，搁板继续以0.18～0.22℃/min的速度升至38～42℃，待二次干燥中的制品的温度达33～37℃后，继续保温2～3小时，检查合格后全压塞，出箱。。

上述制备方法中，步骤(b)中加入注射用水的量为总注射用水量的85％，加入磷酸氟达拉滨时配液罐中的溶液温度控制在0～15℃之间。

上述制备方法中，氢氧化钠溶液的浓度为5mol/L。

上述制备方法中，步骤(d)中调节pH至7.2～8.2，优选为7.7。

上述制备方法中，步骤(e)中加入活性炭的量为药液总体积的0.3％(g/ml)，搅拌吸附30分钟后，用0.45μm微孔滤膜过滤脱碳、0.2μm滤膜一次除菌过滤及0.2μm滤膜二次终端除菌过滤。

上述制备方法中，步骤(f)优选方案为：

预冻阶段：将搁板温度以0.5℃/min的速度降至-3℃，保温0.5小时，再以0.72℃/min的速度降至-30℃，停止降温，保温1小时，缓慢升温至-5℃，保温1小时，再以0.72℃/min的速度降温至-45℃；

一次干燥阶段：搁板的升温速率为0.34℃/min；

二次干燥阶段：将搁板温度以0.55℃/min的速度升至18℃，保温1小时，搁板继续以0.2℃/min的速度升至40℃，保温3小时。

本发明根据磷酸氟达拉滨的特点和磷酸氟达拉滨冻干粉针剂处方的特点，对磷酸氟达拉滨冻干粉针剂的制备工艺进行了反复地研究，如：各组分的用量、配液温度、pH值的范围、活性炭的量及吸附时间、脱碳方式、冻干工艺等等，通过选择最合适的组分用量配比、优化生产工艺，所得到的冻干品复溶后的澄明度良好，杂质含量低，稳定性好，质量可控。

磷酸氟达拉滨对温度特别敏感，当温度高于室温时，磷酸氟达拉滨易发生降解，转化为磷酸氟达拉滨的2-羟基类似物(FA-2HA)，本发明针对磷酸氟达拉滨的热不稳定的特点，在配制药液的过程中先制造一个低温的溶液环境，然后将磷酸氟达拉滨加入配液罐的注射用水中，磷酸氟达拉滨在溶解时放出溶解热，溶解热将及时快速地释放到大量低温的注射用水中，释放的溶解热不会对磷酸氟达拉滨本身带来任何影响，之后再加入碱并搅拌，直至磷酸氟达拉滨全部溶解，待磷酸氟达拉滨处于一个低温稳定的碱性溶液环境中之后，再加入辅料甘露醇并调节pH值，保证了磷酸氟达拉滨冻干粉针剂药液在配制的全过程处于一个稳定的环境中，避免了磷酸氟达拉滨和甘露醇在溶解过程中瞬间释放的溶解热对磷酸氟达拉滨本身带来的不利影响。

本发明对活性炭的用量和使用方法进行了研究，0.3％(g/ml)的活性炭用量即保证可以完全吸附药液中的热原、杂质等，提高产品的纯度和成品率，又不会对药液中主药的含量产生影响；采用边脱炭边循环的方法，使得活性炭附着在过滤棒上，使活性炭的吸附能力得到了加强，保证一次、二次0.2μm除菌滤膜的不堵塞而顺利地完成过滤药液，使其除菌过滤效果达到了极佳的状态；提高了过滤药液的澄清度、冻干后溶解性较好。

本发明对磷酸氟达拉滨的冻干工艺进行了研究，预冻时，先将搁板温度以0.5～0.55℃/min的速率降至共融点为-3℃左右，保温0.5小时，以消除药液和搁板之间的温差及药液内部的温度梯度，此步骤中的降温速率考虑到降温快能耗高、降温慢效率低，所以选择0.5～0.55℃/min的降温速率。当药液的温度低于-3℃继续降温时，如果降温速率越大，溶液的过冷度和过饱和度愈大，临界结晶的粒度则愈小，成核速度越快，容易形成颗粒较多尺寸较小的细晶，因而冰晶升华后，物料内形成的孔隙尺寸较小，干燥速率会比较低，但冻干后复溶性好；相反，慢速冻结容易形成大颗粒的冰晶，冰晶升华后形成的水气逸出通道尺寸较大，有利于提高干燥速率，但干后复水性差。所以冻干粉针剂在预冻阶段都采用较为快速的冷冻工艺，但是在实际的制备过程中，预冻阶段，如果温度下降的太快，易导致有些晶种析不出来；如果温度下降的太慢，易使一部分原料形成晶型。本发明在预冻阶段采用先降温后升温再降温的程序，在预冻过程中按照0.67～0.78℃/min的降温速率先快速降温至-30℃，停止降温，保温1小时，快速预冻使分装的滤液形成颗粒较多尺寸较小的细晶，为避免有些晶种析不出来，再使搁板温度缓慢升温至-5℃，保温1小时，再降温至-40～-50℃，这时，滤液制品中的晶种不仅能全部析出，并且形成一个理想的冻结结构，其中的溶质能均匀地分布在整个冻结后的冰晶中，并出现高精度的微小多孔结构，整个冰晶冻结结构规则均一。本发明在预冻时将温度降至-40～-50℃，保证药液制品彻底被冻结，并且不浪费能源和时间。

由于一次干燥时，箱内的真空度为10pa，真空度很低，所以冰晶由外层向内层的热传导非常慢，而随着搁板的不断升温，搁板温度和冰晶的温差会不断增大，冰晶由外层向内的温差也不断增大，冰晶受热不均匀，当达到冰晶坍塌温度时，多孔性骨架刚度降低，干燥层内的颗粒出现脱落，会封闭已干燥部分的微孔通道，阻止升华的进行，使升华速率减慢，甚至使下层部分略微萎缩，影响制品残留水分的含量，导致复水性、稳定性和澄清度同时变差。本发明一次干燥阶段采用阶梯式升温，升温-保温交替进行，每升温10分钟，接着保温5分钟，消除搁板和冰晶之间的温差以及冰晶内部的温差，确保一次干燥阶段的冰晶受热均匀，冰晶内水分均匀升华，以克服冰晶在一次升温阶段中由于升温不均匀带来的升华速率减慢、质量下降等问题，确保冰晶在一次升温的过程中保持外形饱满不萎缩、色泽均一，并且干燥后的成品复溶性好，而且由于阶梯式升温过程中冰晶受热均匀、冰晶最内层和最底层的水分也能通畅地升华，这减少了一次升温阶段中最后的保温时间，搁板在升至-5～-1℃后，只需保温3～5小时，提高了升华效率。另外，本发明中的辅料甘露醇具有较高的崩解温度，有利于升华的进行。

一次干燥后制品中还存有很多细小的冰晶，由于细小冰晶具有很高的表面能，若二次干燥的升温速率较慢，则小冰晶易相互结合形成大冰晶，若二次干燥的升温速率较快，则可能出现干燥不充分现象，而磷酸氟达拉滨又是热不稳定的物质，所以本发明采用先快速升温，将搁板温度以0.5～0.6℃/min的较快速度升至17～19℃，保温1小时，使得一次干燥后的小冰晶中的水分先快速蒸发，避免小冰晶之间因升温较慢而相互结合形成大冰晶，之后，考虑到磷酸氟达拉滨在高于室温的环境中的不稳定性、干燥的效果以及二次干燥最后保温时的温度较高(为38～42℃)等因素，再以较慢的0.18～0.22℃/min的速率缓慢升温干燥，并且减少了二次干燥最后阶段中保温的时间，待二次干燥中的制品的温度达33～37℃后，继续保温2～3小时，即确保了磷酸氟达拉滨冻干粉针剂干燥的效果，又确保磷酸氟达拉滨在干燥过程中的保持稳定。

与现有技术相比，本发明提供的一种磷酸氟达拉滨冻干粉针剂及其制备方法的有益效果为：

1.本发明提供的磷酸氟达拉滨冻干粉针剂外观饱满均一、复溶性好、杂质含量少、稳定性好，有利于稳定地运输和贮存，并且处方简单，对人体的副作用小，安全可靠。

2.针对磷酸氟达拉滨的特点以及磷酸氟达拉滨冻干粉针剂处方的特点，对磷酸氟达拉滨冻干粉针剂的制备工艺进行了大量的研究，提供的制备工艺简单、方便可行、重复性好，很容易实现工业化大生产，并且冻干时间短、废品率低、灯检剔废难度低，节约人力，较短的生产周期、较低的废品率和更低的人力成本，使生产成本大幅度降低，可以产生可观的经济和社会效益。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明的发明内容做进一步说明，但并不因此而限定本发明的内容。

实施例1

于配液罐中加入注射用水1530ml，配液罐温度为10℃，再加入50g磷酸氟达拉滨，充分搅拌后，加入适量5mol/L氢氧化钠溶液并搅拌，直至磷酸氟达拉滨完全溶解；再加入40g甘露醇，搅拌使药液成澄明溶液；用5mol/L氢氧化钠溶液调节药液pH值至7.7，补加注射用水270ml，混匀。

向澄明溶液中加入活性炭5.4g，搅拌吸附30分钟后，用0.45μm微孔滤膜采用边脱碳边循环的方式过滤脱碳、0.2μm滤膜一次除菌过滤及0.2μm滤膜二次终端除菌过滤，所得滤液至药液瓶内，供灌装用。

滤液分装，每瓶含有磷酸氟达拉滨25mg，半加塞，放入冻干机中进行冷冻干燥，冷冻干燥分为预冻、一次干燥和二次干燥三个阶段；

预冻阶段：将搁板温度以将搁板温度以0.5℃/min的速度降至-3℃，保温0.5小时，再以0.72℃/min的速度降至-30℃，停止降温，保温1小时，缓慢升温至-5℃，保温1小时，再以0.72℃/min的速度降温至-45℃，继续保温4小时，抽真空至箱内真空度达10pa；

一次干燥阶段：搁板温度采用阶梯式升温，升温-保温交替进行，每升温10分钟，接着保温5分钟，升温的速率为0.34℃/min，待温度升至-3℃时，继续保温4小时；

二次干燥阶段：将搁板温度以0.55℃/min的速度升至18℃，保温1小时，搁板继续以0.2℃/min的速度升至40℃，待二次干燥中的制品的温度达35℃后，继续保温3小时。

整个冻干过程结束，全压塞，检测合格后出箱。

实施例2

于配液罐中加入注射用水1360ml，配液罐温度为0℃，再加入50g磷酸氟达拉滨，充分搅拌后，加入适量5mol/L氢氧化钠溶液并搅拌，直至磷酸氟达拉滨完全溶解；再加入30g甘露醇，搅拌使药液成澄明溶液；用5mol/L氢氧化钠溶液调节药液pH值至7.2，补加注射用水240ml，混匀。

向澄明溶液中加入活性炭4.8g，搅拌吸附30分钟后，用0.45μm微孔滤膜采用边脱碳边循环的方式过滤脱碳、0.2μm滤膜一次除菌过滤及0.2μm滤膜二次终端除菌过滤，所得滤液至药液瓶内，供灌装用。

滤液分装，每瓶含有磷酸氟达拉滨25mg，半加塞，放入冻干机中进行冷冻干燥，冷冻干燥分为预冻、一次干燥和二次干燥三个阶段；

预冻阶段：将搁板温度以将搁板温度以0.55℃/min的速度降至-3℃，保温0.5小时，再以0.70℃/min的速度降至-30℃，停止降温，保温1小时，缓慢升温至-5℃，保温1小时，再以0.70℃/min的速度降温至-40℃，继续保温3小时，抽真空至箱内真空度达10pa；

一次干燥阶段：搁板温度采用阶梯式升温，升温-保温交替进行，每升温10分钟，接着保温5分钟，升温的速率为0.29℃/min，待温度升至-5℃时，继续保温3小时；

二次干燥阶段：将搁板温度以0.5℃/min的速度升至17℃，保温1小时，搁板继续以0.18℃/min的速度升至38℃，待二次干燥中的制品的温度达33℃后，继续保温2小时。

整个冻干过程结束，全压塞，检测合格后出箱。

实施例3

于配液罐中加入注射用水1700ml，配液罐温度为15℃，再加入50g磷酸氟达拉滨，充分搅拌后，加入适量5mol/L氢氧化钠溶液并搅拌，直至磷酸氟达拉滨完全溶解；再加入50g甘露醇，搅拌使药液成澄明溶液；用5mol/L氢氧化钠溶液调节药液pH值至8.2，补加注射用水300ml，混匀。

向澄明溶液中加入活性炭6g，搅拌吸附30分钟后，用0.45μm微孔滤膜采用边脱碳边循环的方式过滤脱碳、0.2μm滤膜一次除菌过滤及0.2μm滤膜二次终端除菌过滤，所得滤液至药液瓶内，供灌装用。

滤液分装，每瓶含有磷酸氟达拉滨25mg，半加塞，放入冻干机中进行冷冻干燥，冷冻干燥分为预冻、一次干燥和二次干燥三个阶段；

预冻阶段：将搁板温度以将搁板温度以0.5℃/min的速度降至-3℃，保温0.5小时，再以0.78℃/min的速度降至-30℃，停止降温，保温1小时，缓慢升温至-5℃，保温1小时，再以0.78℃/min的速度降温至-50℃，继续保温5小时，抽真空至箱内真空度达10pa；

一次干燥阶段：搁板温度采用阶梯式升温，升温-保温交替进行，每升温10分钟，接着保温5分钟，升温的速率为0.36℃/min，待温度升至-1℃时，继续保温5小时；

二次干燥阶段：将搁板温度以0.6℃/min的速度升至19℃，保温1小时，搁板继续以0.22℃/min的速度升至42℃，待二次干燥中的制品的温度达37℃后，继续保温3小时。

整个冻干过程结束，全压塞，检测合格后出箱。

实施例4

于配液罐中加入注射用水1870ml，配液罐温度为10℃，再加入50g磷酸氟达拉滨，充分搅拌后，加入适量5mol/L氢氧化钠溶液并搅拌，直至磷酸氟达拉滨完全溶解；再加入60g甘露醇，搅拌使药液成澄明溶液；用5mol/L氢氧化钠溶液调节药液pH值至7.7，补加注射用水330ml，混匀。

向澄明溶液中加入活性炭6.6g，搅拌吸附30分钟后，用0.45μm微孔滤膜采用边脱碳边循环的方式过滤脱碳、0.2μm滤膜一次除菌过滤及0.2μm滤膜二次终端除菌过滤，所得滤液至药液瓶内，供灌装用。

滤液分装，每瓶含有磷酸氟达拉滨25mg，半加塞，放入冻干机中进行冷冻干燥，冷冻干燥分为预冻、一次干燥和二次干燥三个阶段；

预冻阶段：将搁板温度以将搁板温度以0.5℃/min的速度降至-3℃，保温0.5小时，再以0.72℃/min的速度降至-30℃，停止降温，保温1小时，缓慢升温至-3℃，保温1小时，再以0.72℃/min的速度降温至-45℃，继续保温4小时，抽真空至箱内真空度达10pa；

一次干燥阶段：搁板温度采用阶梯式升温，升温-保温交替进行，每升温10分钟，接着保温5分钟，升温的速率为0.34℃/min，待温度升至-3℃时，继续保温4小时；

二次干燥阶段：将搁板温度以0.55℃/min的速度升至18℃，保温1小时，搁板继续以0.2℃/min的速度升至40℃，待二次干燥中的制品的温度达35℃后，继续保温3小时。

整个冻干过程结束，全压塞，检测合格后出箱。

为验证本发明所述注射用磷酸氟达拉冻干粉针处方及其制备方法的合理性，发明人曾进行大量试验，现列举部分如下：

实验例1

酸度范围确定

根据注射用磷酸氟达拉滨质量标准(进口药品注册标准JX20040040)的pH值范围为7.2～8.2，基于磷酸氟达拉滨的溶解性和人体的耐受性影响因素，本制剂在配液时，药液的pH值为7.2～8.2，优选为7.7。

实验例2

药用活性炭用量的确定

采用活性炭除热原和脱色可能会对溶液中药物有吸附作用，因此考察一定浓度的活性炭对磷酸氟达拉滨吸附的影响

试验方法：于34ml注射用水中加入称取的处方量的磷酸氟达拉滨，充分搅拌后，加入适量5mol/L氢氧化钠溶液并搅拌，直至磷酸氟达拉滨完全溶解；再加入处方量的甘露醇，搅拌使药液成澄明溶液；用5mol/L氢氧化钠溶液调节药液pH值至7.7，补加注射用水6ml，混匀。将新配制的40ml磷酸氟达拉滨药液，分成4等份，其中3份分别加入占各药液总体积的0.2％、0.3％、0.5％(g/ml)的药用活炭活性炭，另一份作未吸附溶液，均于室温下搅拌30min，过滤除炭，量取各续滤液进行分析检测，考察磷酸氟达拉滨药液经不同浓度的活性炭在相同搅拌时间内的相对含量(相对吸附前的溶液)、溶液澄清及颜色、pH值、细菌内毒素，分析结果见表1。

表1药用活性炭吸附结果

由分析结果可知：药用活性炭0.2％～0.5％(g/ml)对磷酸氟达拉滨均无明显的吸附，经活性炭吸附后溶液澄清度与纯化水比较，基本相当，细菌内毒素均符合规定，各续滤液与吸附前药液pH值没有明显变化。综合考虑吸附细菌内毒素的效果和其他指标的影响，我们选择0.3％浓度的药用活性炭进行吸附。

实验例3

药用活性炭吸附时间的考察

根据以上试验结果，用0.3％浓度的药用活性炭，经不同的吸附时间，考察药用活性炭对磷酸氟达拉滨的吸附情况，确定药用活性炭的吸附时间。

试验方法：于25.5ml注射用水中加入称取的处方量的磷酸氟达拉滨，充分搅拌后，加入适量5mol/L氢氧化钠溶液并搅拌，直至磷酸氟达拉滨完全溶解；再加入处方量的甘露醇，搅拌使药液成澄明溶液；用5mol/L氢氧化钠溶液调节药液pH值至7.7，补加注射用水4.5ml，混匀。将新配制的磷酸氟达拉滨溶液30ml，分成3等份，分别加入占药液总体积的0.3％(g/ml)的药用活性炭，分别于室温下按表2中的时间进行搅拌吸附，过滤除炭，再取各滤液进行分析检测，考察磷酸氟达拉滨溶液经相同浓度的活性炭在不同吸附时间的含量变化情况、溶液澄清度及颜色、pH值、细菌内毒素的影响，结果见表2。

表2药用活性炭吸附时间的考察

试验结果表明：0.3％(g/ml)浓度的活性炭，在吸附时间20min、30min及50min时，活性炭对磷酸氟达拉滨没有明显的吸附作用，溶液澄清度与纯化水基本相当，药液的pH值与吸附前均没有变化，细菌内毒素均符合规定。

因此，本制剂活性炭用量的选择浓度为0.30％(g/ml)，室温下吸附时间30min。

实验例4

冻干工艺参数的确定

采用上述确定的处方及配液方法，配制磷酸氟达拉滨溶液，按表3中设计的各个工艺参数进行真空冷冻干燥，分别分析所制得的制品，结果见表4。确定适合本制剂的冻干工艺参数。

表3冻干工艺参数

表4制品分析结果

结果综述：

冻干工艺1和2制备的制品为白色块状物，但外观不及工艺4和5的制品疏松、饱满、均一，并且，冻干工艺1的制品杂质含量相对较高；冻干工艺3制备的制品水分偏大，有部分制品表面出现塌陷；冻干工艺4和冻干工艺5制备的样品各项指标分析结果均较好。

由制品分析结果得知，本制剂基本的冻干工艺参数可选如下：

预冻阶段参数为：将搁板温度以0.5～0.55℃/min的速度降至-3℃，保温0.5小时，再以0.70～0.78℃/min的速度降至-30℃，停止降温，保温1小时，缓慢升温至-5℃，保温1小时，再以0.70～0.78℃/min的速度降温至-40～-50℃，继续保温3～5小时，抽真空至箱内真空度达10pa；

第一次干燥阶段参数为：搁板温度采用阶梯式升温，升温-保温交替进行，每升温10分钟，接着保温5分钟，升温的速率为0.29～0.36℃/min，待温度升至-5～-1℃时，继续保温3～5小时；

第二次干燥阶段参数为：将搁板温度以0.5～0.6℃/min的速度升至17～19℃，保温1小时，搁板继续以0.18～0.22℃/min的速度升至38～42℃，待二次干燥中的制品的温度达33～37℃后，继续保温2～3小时。

考虑到冻干工艺的生产周期、能耗以及结合产品的质量等因素，确定本制剂的最优选的冻干工艺如下：

预冻：将搁板温度以0.5℃/min的速度降至-3℃，保温0.5小时，再以0.72℃/min的速度降至-30℃，停止降温，保温1小时，缓慢升温至-5℃，保温1小时，再以0.72℃/min的速度降温至-45℃，继续保温4小时，抽真空至箱内真空度达10pa；

一次干燥：搁板温度采用阶梯式升温，升温-保温交替进行，每升温10分钟，接着保温5分钟，升温的速率为0.34℃/min，待温度升至-3℃时，继续保温4小时；

二次干燥：将搁板温度以0.55℃/min的速度升至18℃，保温1小时，搁板继续以0.2℃/min的速度升至40℃，待二次干燥中的制品的温度达33～37℃后，继续保温3小时。

实验例5

磷酸氟达拉滨冻干粉针剂工艺放大生产结果

以实施例1的生产工艺，进行了放大样品生产，磷酸氟达拉滨冻干粉针剂生产结果及样品检验结果分别见表5和表6。

表5注射用磷酸氟达拉滨3批生产结果

表6注射用磷酸氟达拉滨样品检验结果

结论：在经过验证的抗肿瘤药注射剂车间生产的注射用磷酸氟达拉滨3批样品，检验结果均符合所订药品质量标准草案。工艺稳定，质量可控，药品的安全性能有效地得到保障。

实验例6

磷酸氟达拉滨冻干粉针剂稳定性研究

(1)加速试验

在试验期间第1、2、3、6个月末分别取样，对样品的药物性状、胶塞外观、溶解时间、酸度、溶液澄清度与颜色、水分、容器密封性、不溶性微粒、可见异物、有关物质、细菌内毒素、无菌、含量进行考察。

表7注射用磷酸氟达拉滨加速试验1月结果

规格：50mg；编号090401、090402、090403

存储条件：温度30℃，相对湿度75％

包装形式：模拟市售包装

表8注射用磷酸氟达拉滨加速试验2月结果

规格：50mg；编号090401、090402、090403

存储条件：温度30℃，相对湿度75％

包装形式：模拟市售包装

表9注射用磷酸氟达拉滨加速试验3月结果

规格：50mg；编号090401、090402、090403

存储条件：温度30℃，相对湿度75％

包装形式：模拟市售包装

表10注射用磷酸氟达拉滨加速试验6月结果

规格：50mg；编号090401、090402、090403、0901010

存储条件：温度30℃，相对湿度75％

包装形式：模拟市售包装

加速试验结果表明：模拟上市包装于温度30℃，相对湿度75％的条件下(倒置放置)放置6月，各项指标均无明显变化。说明此条件下，本品的稳定性好。

(2)长期试验

样品模拟上市包装，于温度30℃，相对湿度60％的条件下放置(直立放置)，分别于3、6、9、12、18、24、36个月末取样，对样品的药物性状、胶塞外观、溶解时间、酸度、溶液澄清度与颜色、水分、容器密封性、不溶性微粒、可见异物、有关物质、细菌内毒素、无菌、含量进行考察。

表11注射用磷酸氟达拉滨长期试验3月结果

规格：50mg；编号090401、090402、090403

存储条件：温度30℃，相对湿度60％

包装形式：模拟市售包装

表12注射用磷酸氟达拉滨长期试验9月结果

规格：50mg；编号090401、090402、090403、0901010

存储条件：温度30℃，相对湿度60％

包装形式：模拟市售包装

表13注射用磷酸氟达拉滨长期试验24月结果

长期试验结果：于温度30℃，相对湿度60％的条件下放置(直立放置)放置3、6、9、12、18、24、36个月，各项指标均无明显变化。说明此条件下，本品的稳定性好。

(3)药物与胶塞的相容性试验参考SFDA2008[765]号文中关于头孢类制剂相容性加速试验方法进行的本品内容物与胶塞相容性试验结果可知：振碎后的本品三批中试样品内容物于60℃恒温箱内，倒置放置5天，其溶液均澄清。初步表明本品内容物与胶塞的相容好。

(4)配伍试验试验结果表明：参照本品说明书中静脉推注和静脉滴注的用法用量配制的两种配伍溶液，在室温下8小时内外观、pH值、溶液的澄清度与颜色、不溶性微粒、可见异物、含量、有关物质均基本不变，两种配伍溶液均稳定，满足临床使用需要。

(5)影响因素试验

取样品，分别于高温(温度60℃、40℃；包装形式：模拟市售包装)、高湿(温度25℃、相对湿度92.5％；包装形式：模拟市售包装)、强光(照度4500lx；包装形式：不带外包装，即去纸盒和瓶签)条件下倒置放置10天，分别于第5天和第10天取样，对样品的性状、胶塞外观、酸度、水分、溶液的澄清度与颜色、可见异物、有关物质及含量进行测定。

高温试验结果表明：温度对本品质量影响大，高温40℃环境下放置10天，样品外观略有收缩，有关物质由开始的0.4％增加到1.0％。高温60℃环境下放置10天，样品外观收缩成团，pH略有下降，有关物质增加到7.1％，含量明显减少；其它各项无明显变化。

高湿试验结果表明：按模拟上市包装的样品，倒置放置在高湿环境下，各项指标均无明显变化。虽本品极具引湿性，但中性硼硅玻璃管制注射剂瓶、丁基橡胶胶塞及铝塑组合盖包装本品，可以避免本品在高湿条件下变质。

强光试验结果表明：不带外包装(去瓶签和纸盒)的样品，倒置放置在强光环境下，各项指标均无明显变化，说明光照对本品质量的影响不大。

另经研究确定，本品可在温度不高于30℃的条件下贮存36个月。

Claims (9)

1.一种磷酸氟达拉滨冻干粉针剂，其特征在于，所述磷酸氟达拉滨冻干粉针剂由磷酸氟达拉滨和甘露醇组成，其二者质量比为1∶0.6～1.2。

2.根据权利要求1所述的磷酸氟达拉滨冻干粉针剂，其特征在于，所述磷酸氟达拉滨与甘露醇的质量比优选为1∶0.8～1，最优选为1∶0.8。

3.根据权利要求1所述的磷酸氟达拉滨冻干粉针剂，其特征在于，所述磷酸氟达拉滨冻干粉针剂在不大于30℃条件下储存24月，其杂质含量不高于0.9％。

4.一种制备权利要求1所述的磷酸氟达拉滨冻干粉针剂的方法，其特征为在于，所述的制备方法包括如下步骤：

(a)称取处方量的磷酸氟达拉滨和甘露醇；

(b)于配液罐中加入注射用水，再加入磷酸氟达拉滨，充分搅拌后加入氢氧化钠溶液直至磷酸氟达拉滨完全溶解；

(c)再加入甘露醇，搅拌使其全部溶解；

(d)用氢氧化钠溶液调节药液pH值，补加注射用水至全量，混匀；

(e)再加入活性炭，搅拌吸附，经边脱碳边循环的方式脱碳，一次除菌过滤，二次终端除菌过滤后，所得滤液至药液瓶内，供灌装用；

(f)滤液分装，半加塞，放入冻干机中进行冷冻干燥，冷冻干燥分为预冻、一次干燥和二次干燥三个阶段；

预冻阶段：将搁板温度以0.5～0.55℃/min的速度降至-3℃，保温0.5小时，再以0.70～0.78℃/min的速度降至-30℃，停止降温，保温1小时，缓慢升温至-5℃，保温1小时，再以0.70～0.78℃/min的速度降温至-40～-50℃，继续保温3～5小时，抽真空至箱内真空度达10pa；

一次干燥阶段：搁板温度采用阶梯式升温，升温-保温交替进行，每升温10分钟，接着保温5分钟，升温的速率为0.29～0.36℃/min，待温度升至-5～-1℃时，继续保温3～5小时；

二次干燥阶段：将搁板温度以0.5～0.6℃/min的速度升至17～19℃，保温1小时，搁板继续以0.18～0.22℃/min的速度升至38～42℃，待二次干燥中的制品的温度达33～37℃后，继续保温2～3小时，检查合格后全压塞，出箱。

5.根据根据权利要求4所述的磷酸氟达拉滨冻干粉针剂的制备方法，其特征在于，步骤(b)中加入注射用水的量为总注射用水量的85％，加入磷酸氟达拉滨时配液罐中的溶液温度控制在0～15℃之间，优选10℃。

6.根据权利要求4所述的磷酸氟达拉滨冻干粉针剂的制备方法，其特征在于，所述氢氧化钠溶液的浓度为为5mol/L。

7.根据根据权利要求4所述的磷酸氟达拉滨冻干粉针剂的制备方法，其特征在于，步骤(d)中调节pH至7.2～8.2，优选为7.7。

8.根据权利要求4所述的磷酸氟达拉滨冻干粉针剂的制备方法，其特征在于，步骤(e)中加入活性炭的量为药液总体积的0.3％g/ml，搅拌吸附30分钟后，用0.45μm微孔滤膜脱碳、0.2μm滤膜一次除菌过滤及0.2μm滤膜二次终端除菌过滤。

9.根据根据权利要求4所述的磷酸氟达拉滨冻干粉针剂的制备方法，其特征在于，步骤(f)优选为：

预冻阶段：将搁板温度以0.5℃/min的速度降至-3℃，保温0.5小时，再以0.72℃/min的速度降至-30℃，停止降温，保温1小时，缓慢升温至-5℃，保温1小时，再以0.72℃/min的速度降温至-45℃；

一次干燥阶段：搁板的升温速率为0.34℃/min；

二次干燥阶段：将搁板温度以0.55℃/min的速度升至18℃，保温1小时，搁板继续以0.2℃/min的速度升至40℃，保温3小时。