CN102089290A - 用于疾病治疗的三唑衍生物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及式(1)的化合物

Description

用于疾病治疗的三唑衍生物

【技术领域】

本发明涉及通式(1)的化合物：

其中A、X、Y、n、R¹及R²具有下文所阐释的含义，且涉及制备该衍生物的方法及该衍生物的中间体、含有该衍生物的组合物及该衍生物的用途。

【背景技术】

β₂肾上腺素能激动剂及胆碱能毒蕈碱拮抗剂是用于治疗诸如COPD及哮喘等阻塞性呼吸性疾病的广为接受的治疗剂。当前所用的吸入式β₂激动剂包含短效剂(例如沙丁胺醇(salbutamol)(q.i.d.)及特布他林(terbutaline)(t.i.d))及长效剂(例如沙美特罗(salmeterol)及福莫特罗(formoterol)(b.i.d.))且经由刺激气道平滑肌上的肾上腺素能受体来产生支气管扩张。临床使用的吸入式毒蕈碱拮抗剂包含短效异丙托溴铵(ipratropium bromide)(q.i.d.)、氧托溴铵(oxitropium bromide)(q.i.d)及长效噻托溴铵(tiotropium)(q.d.)。毒蕈碱拮抗剂通过抑制胆碱能药对气道的正常伸缩性来产生支气管扩张，而此抑制主要通过拮抗乙酰胆碱对气道平滑肌上存在的毒蕈碱受体的作用来产生。许多公开研究已证明，与仅接受任一单类药剂的患者相比，向阻塞性肺病患者组合投与吸入式β₂激动剂及吸入式毒蕈碱拮抗剂(不论短效或长效)在肺功能、症状及生活质量量表方面获得优良改善。迄今为止，研究局限于单一药剂的组合研究，然而，期望在单一分子内组合两种药效，因为这可产生增加的支气管扩张功效具有类似于单一药剂的治疗指数，或类似功效具有优良的治疗指数。此外，将两种药效组合于单一分子中将允许与抗炎药组合的可能性，由此从单一吸入器获得三重治疗。

因此，业内需要作为β2受体激动剂及毒蕈碱拮抗剂的替代活性化合物，其适用于较优选通过吸入途径来治疗呼吸性疾病。该化合物具有适宜的药理曲线，例如在作用的功效、药物动力学或持久性方面。此外，因这些化合物可用于治疗诸如哮喘或COPD等慢性疾病，故优选地，其与共同投与的化合物发生相互作用的可能性应较小。

【发明内容】

本发明涉及通式(1)的化合物：

其中：

A是选自：

其中*代表A至具有羟基的碳的结合点；

X为-(CH₂)_m-，其中m为介于7至12之间且包括二者的整数，或为下式：

Y选自

其中**及***代表结合点，**与X连接；

n为0或1；

R¹选自环戊基、环己基、苯基、呋喃基及噻吩基；且，

R²选自苯基、呋喃基及噻吩基；

或其药学上可接受的盐、或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物。

【实施方式】

式(1)的化合物为β2肾上腺素能受体激动剂及毒蕈碱受体拮抗剂，其尤其用于通过展示极佳效能(尤其在经由吸入途径投与时)治疗涉及该受体的疾病及/或病状。

可通过各种方式来制备式(1)的化合物。下列途径展示制备所述化合物的一种方法，其中除非另有说明，否则A、X、Y、n、R¹及R²如前文对于式(1)的化合物所定义。本领域技术人员应了解，其他途径可同样适用。

(1)

式(1)的胺衍生物：

可通过使式(2)的胺与式(3)的溴化物反应制得：

其中A¹代表使用诸如苄基等适宜酚保护基团保护的A。

在一典型程序中，使式(2)的胺与式(3)的溴化物在80℃-120℃的温度下任选在溶剂或溶剂混合物(例如，二甲亚砜、甲苯、N，N-二甲基甲酰胺、丙腈、乙腈、丁腈、二氯甲烷)存在下、任选在适宜碱(例如，三乙胺、二异丙基乙胺、碳酸钾、碳酸氢钠)存在下反应12至72小时。然后可使用裂解氧保护基团(例如教科书T.W.Greene，Protective Groups in Organic Synthesis(Wiley-Interscience Publication，1981)中发现的那些基团)的标准方法去除保护基团诸如叔-丁基二甲基甲硅烷基及苄基等。

式(3)的化合物(其中A¹如下所示)可根据下列参考文献中所揭示的方法制得：

式(2)的胺可以从式(4)的相应受保护胺制得：

其中R^a及R^b代表诸如叔-丁氧基羰基等适宜保护基团或均代表邻苯二甲酰亚胺。

在一典型程序中，使用裂解氮保护基团(例如教科书T.W.Greene，Protective Groups in Organic Synthesis(Wiley-Interscience Publication，1981)中发现的那些基团)的标准方法使式(4)的胺去保护。

式(4)的胺可通过使式(5)的相应胺与式(6)的化合物反应制得，

其中p及q独立地选自1或2，

其中R^a及R^b如前文所定义且LG为诸如溴或甲磺酸根等适宜离去基团。

在一典型程序中，使式(5)的胺与式(6)的化合物在50℃-90℃的温度下在适宜碱(例如，三乙胺、二异丙基乙胺)存在下且任选在亲核添加剂(例如碘化钠)存在下于适宜溶剂(例如，二甲亚砜、甲苯、N，N-二甲基甲酰胺、丙腈、乙腈、甲基乙基酮)中反应18至48小时。

除用于制备式(1)的化合物的应用外，式(5)的化合物也可用作毒蕈碱拮抗剂。具体而言，其可用于治疗可通过调节毒蕈碱受体活性而减轻的疾病。

式(6)的化合物(其中LG为溴)可通过使相应胺亲核物质R^aR^bNH与式(7)的相应二溴化物反应制得：

Br-X-Br(7)

在一典型程序中，使邻苯二甲酰亚胺或亚胺基二甲酸二-叔丁基酯(R^aR^bNH)与适宜碱(例如氢化钠(于油中的60％分散液))在0℃-室温的温度下于适宜溶剂(例如N，N-二甲基甲酰胺或四氢呋喃)中反应最多1小时，然后添加式(7)的二溴化物，使其在0℃、150℃的温度下反应6-48小时。

式R^aR^bNH的胺市面有售。

式(7)的化合物(其中X为-(CH₂)_m-)市面有售。

式(7)的化合物(其中X为下式：)可如Journal of Organic Chemistry，46(22)，4608-10；1981中所述制得。

可替代地，式(6)的化合物，其中R^a及R^b均代表邻苯二甲酰亚胺且X为下式：

可如以下反应图1中所述制得：

反应图1

其中R^a及R^b均代表邻苯二甲酰亚胺。

式(8)及式(9)的化合物市面有售。

式(10)的化合物可通过Heck反应自式(8)及(9)的化合物制得(方法步骤(i))。典型条件包括使化合物(8)与化合物(9)、三-邻-甲苯基膦、乙酸钯(II)及适宜碱(例如二异丙基乙胺)在90℃下于适宜溶剂(例如乙腈)中反应21小时。

式(11)的化合物可通过氢化自式(10)的化合物制得(方法步骤(ii))。典型条件包括使化合物(10)与甲酸铵及30％氢氧化钯/碳在80℃下于适宜溶剂(例如乙酸乙酯及乙醇)中反应18小时。替代条件包括使化合物(10)与氢气及三(三苯基膦)氯化铑在20psi及室温下于适宜溶剂(例如乙酸乙酯及乙醇)中反应24小时。

式(6a)的化合物(其中LG为溴)可通过溴化自式(11)的化合物制得(方法步骤(iii))。典型条件包括使化合物(11)与三溴化磷在回流下于适宜溶剂(例如甲苯)中反应4小时。

式(6a)的化合物(其中LG为甲磺酸根)可通过甲磺酸化自式(11)的化合物制得(方法步骤(iii))。典型条件包括使化合物(11)与甲磺酰氯及适宜碱(例如三乙胺)在0℃至室温下于适宜溶剂(例如甲基乙基酮)中反应1-4小时。

式(5)的胺可自式(12)的相应受保护胺制得：

其中R^c代表适宜保护基团，例如叔-丁氧基羰基或苄氧羰基。

在一典型程序中，使用裂解氮保护基团(例如教科书T.W.Greene，Protective Groups in Organic Synthesis(Wiley-Interscience Publication，1981)中发现的那些基团)的标准方法使式(12)的胺去保护。

式(12)的胺可通过使式(13)的相应化合物：

其中LG为适宜离去基团，例如溴或甲磺酸根，

与式(14)的化合物反应制得：

在一典型程序中，使式(13)的化合物与式(14)的化合物在介于70℃至150℃的温度下、在适宜碱(例如，碳酸钾、碳酸铯、三乙胺、二异丙基乙胺)存在下、于适宜溶剂(例如，N，N-二甲基甲酰胺、丙腈、乙腈、丙酮)中反应5至48小时。

式(13)的化合物市面有售或可根据本领域技术人员已知的方法制得。

具体而言，式(13)的化合物(其中R^c为叔-丁氧基羰基，p及q代表1或2，n为0且LG为甲磺酸根)市面有售。式(13)的化合物(其中R^c为叔-丁氧基羰基，p及q为1，n为1且LG为甲磺酸根)可如美国专利申请公开案第2005101586号中所述制得。式(13)的化合物(其中R^c为叔-丁氧基羰基，p为1，q为2，n为1且LG为溴或甲磺酸根)市面有售。最后，式(13)的化合物(其中R^c为叔-丁氧基羰基或苄氧羰基，p及q为2，n为1且LG为溴)市面有售。

式(14)的化合物可自式(15)的相应酰胺制得：

在一典型程序中，使式(15)的化合物与N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛在90℃下反应2小时。在真空中去除多余N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛且使残余物与诸如甲苯等适宜溶剂共沸。添加水合肼，然后添加冰乙酸，且在90℃下加热2小时。

式(15)的化合物可自式(16)的相应酸制得：

在一典型程序中，使式(16)的化合物与羰基二咪唑在室温下于适宜溶剂(例如二氯甲烷或四氢呋喃)中反应1小时，然后添加0.880氨水溶液并在室温下反应18小时。

在需要时，式(16)的化合物及其相应单一对映异构体市面有售(如参考文献中所熟知)，可如参考文献中所述制备，或通过类似于参考文献中那些方法的方法制备。具有该信息或包括该信息的相关参考文献实例包含(但不限于)：WO 2002/053564、WO 2006/048225、WO 2001/04118、WO 2003/057694、WO 2004/052857、WO 96/33973、Journal of Organic Chemistry，46(14)，2885-9；1981、Journal of Organic Chemistry(1961)，26，1573-7、Chimica Therapeutica(1966)，(4)，238-45及Journal of Medicinal Chemistry，44(20)，3244-3253；2001。

举例而言，式(16a)的化合物：

以(2R)-2-环己基-2-羟基-2-苯乙酸形式市面有售。

另外，式(14)的化合物可自式(17)的相应化合物制得：

在一典型程序中，使式(17)的化合物与硼氢化钠在回流下于诸如乙醇等适宜溶剂中反应3小时。

式(17)的化合物可通过使式(18)的化合物：

与式(19)的化合物反应制得：

在一典型程序中，使式(18)的化合物与适宜碱(例如正丁基锂)在介于-78℃至室温的温度下于适宜溶剂(例如四氢呋喃)中反应1小时，然后添加式(19)的化合物并在介于-78℃至室温的温度下于四氢呋喃中反应18小时。

式(18)的化合物可如Tetrahedron：Asymmetry，8(9)，1491-1500；1997中所述制得。

式(19)的化合物市面有售、可如参考文献中所述制得、或通过类似于参考文献中所述那些方法的方法制得。具有该信息的相关参考文献实例包含(但不限于)：

Tetrahedron Letters，49(11)，1884-1888；2008；Tetrahedron Letters，46(44)，7627-7630；2005

Synthesis，(13)，1970-1978；2007；Journal of Organic Chemistry，55(4)，1286-91；1990；美国专利第5969159号；Tetrahedron Letters，47(10)，1649-1651；2006；Journal of Chemical Research，Synopses，(9)，280-1；1984；Synthesis，(3)，242-3；1991；Journal of the Chemical Society，Perkin Transactions 2：Physical Organic Chemistry(1972-1999)，(11)，1741-51；1989；及Synthetic Communications，34(23)，4249-4256；2004。

除已阐述的那些方法外，式(1)化合物的制备可能需要对潜在反应性官能团进行保护。在此一情形下，适宜保护基团及其保护及去保护的具体方法的实例阐述于“Protecting Groups in Organic Synthesis”，T.W.Greene及P.Wutz(Wiley-Interscience Publication，1981)或“Protecting groups”，P.J.Kocienski(Georg Thieme Verlag，1994)中。

可根据各种公知方法来纯化及分离式(1)的化合物以及用于其制备的中间体，例如结晶或层析。

含有下列取代基、或下列取代基的组合的式(1)化合物的亚群优选：

优选地，A为下式：

其中*代表A至具有羟基的碳的结合点。

优选地，X为(CH₂)₉或下式：

在一优选实施例中，X为(CH₂)₉。

在另一优选实施例中，X为下式：

优选地，Y为下式：

其中**及***代表结合点，**与X连接。

优选地，R¹为苯基或环己基。

优选地，R²为苯基。

优选地，n为1。

在R¹与R²不同时，具有这两个取代基的碳原子可呈(R)或(S)构型。优选地，在R¹与R²不同时，具有R¹及R²的碳原子呈(R)构型。

式(1)的化合物，其中：

A为下式：

其中*代表A至具有羟基的碳的结合点；

X为-(CH₂)₉-或下式：

Y为下式：

其中**及***代表结合点，**与X连接；

n为1；

R¹为环己基或苯基且R²为苯基；

或其药学上可接受的盐、或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物更优选。

下列化合物更优选：

5-[(1R)-2-({9-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮，

5-[(1R)-2-({9-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮萘-1，5-二磺酸盐，

5-[(1R)-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮，

5-[(1R)-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮萘-1，5-二磺酸盐，

5-[(1R)-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮琥珀酸盐，

5-[(1R)-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮富马酸盐，

5-[(1R)-2-({9-[4-({3-[环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮，

8-羟基-5-[(1R)-1-羟基-2-({9-[4-({3-[羟基(二苯基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)乙基]喹啉-2(1H)-酮，及

8-羟基-5-[(1R)-1-羟基-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[羟基(二苯基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}乙基]喹啉-2(1H)-酮。

甚至更优选的是5-[(1R)-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮。

5-[(1R)-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮萘-1，5-二磺酸盐最优选。

式(1)化合物的药学上可接受的盐包含其酸加成盐及碱式盐。适宜酸加成盐由可形成无毒盐的酸形成。实例包含乙酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、硼酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡萄糖酸盐、葡糖醛酸盐、六氟磷酸盐、羟苯酰苯酸盐、氢氯酸盐/氯化物、氢溴酸盐/溴化物、氢碘酸盐/碘化物、羟乙磺酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘酸盐、1，5-萘二磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、糖二酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐及三氟乙酸盐。适宜碱式盐由可形成无毒盐的碱形成。实例包含铝盐、精氨酸盐、苄星盐(benzathine)、钙盐、胆碱盐、二乙胺盐、二醇胺盐、甘氨酸盐、赖氨酸盐、镁盐、葡胺盐、醇胺盐(olamine)、钾盐、钠盐、氨基丁三醇盐及锌盐。也可形成酸及碱的半盐，例如，半硫酸盐及半钙盐。有关适宜盐的综述参见Stahl及Wermuth的“Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties，Selection，and Use”(Wiley-VCH，Weinheim，Germany，2002)。

式(1)化合物的药学上可接受的盐可通过以下三种方法中的一种或多种制得：

(i)通过使式(1)的化合物与期望的酸或碱反应；

(ii)通过使用期望的酸或碱自式(1)化合物的适宜前体中去除酸不稳定或碱不稳定性保护基团或开环适宜环状前体(例如，内酯或内酰胺)；或

(iii)通过与适宜酸或碱反应或借助适宜离子交换柱将式(1)化合物的一种盐转变成另一种盐。

全部三种反应通常皆在溶液中实施。所得盐可经沉淀析出并通过过滤收集或可通过蒸发溶剂来回收。所得盐的离子化程度可在完全离子化至几乎未离子化之间变化。

本发明的化合物既可以非溶剂化形式存在也可以溶剂化形式存在。本文所用术语“溶剂化物”描述包括本发明化合物或其盐及化学计量量的一种或多种药学上可接受的溶剂分子(例如，乙醇)的分子复合物。当该溶剂为水时，使用术语“水合物”。

本发明范围包含络合物，例如包合物、药物-基质包合络合物，其中与上述溶剂化物对比，药物及基质以化学计量或非化学计量量存在。本发明也包含含有两种或更多种有机及/或无机组份的药物复合物，该组份可以是化学计量量或非化学计量量。所得复合物可以是离子化、部分离子化或未离子化。有关该复合物的综述参见Haleblian的J Pharm Sci，64(8)，1269-1288(1975年8月)。

下文中对式(1)化合物的所有提及包含提及其盐、溶剂化物及络(复)合物以及其盐的溶剂化物和络(复)合物。

本发明的化合物包含如上文所定义的式(1)化合物(包含如下文所定义的所有其多晶型物及晶癖、其前药及异构体(包含光学、几何及互变异构体))及同位素标记的式(1)化合物。

如所指出，所谓式(1)的化合物的“前药”也涵盖于本发明的范围内。因此，式(1)化合物的某些衍生物本身可稍有或不具有药理活性，但当将其投与至身体内部或表面上时，可通过(例如)水解裂解转化成具有期望活性的式(1)化合物。该衍生物称作‘前药’。有关前药用途的其他信息可参见‘Pro-drugs as Novel Delivery Systems，第14卷，ACS Symposium Series(T.Higuchi及W.Stella)与‘Bioreversible Carriers in Drug Design’，Pergamon Press，1987(E.B Roche编辑，American Pharmaceutical Association)。

举例而言，本发明前药可通过使用那些本领域技术人员所习知的某些部分(例如“Design of Prodrugs”，H.Bundgaard(Elsevier，1985)中所述的‘前体部分’)取代存在于式(1)化合物中的适宜官能团来产生。

本发明前药的一些实例包含：

(i)在式(1)的化合物含有醇官能团(-OH)时，包含其醚，例如，其中式(1)化合物的醇官能团的氢由(C₁-C₆)烷酰基氧基甲基取代的化合物；及

(ii)在式(1)的化合物含有伯或仲胺基官能团(-NH₂或-NHR，其中R≠H)时，包含其酰胺，例如，其中式(1)化合物的胺基官能团的一或两个氢可以视情况经(C₁-C₁₀)烷酰基取代的化合物。

可在前述参考文献中找到合乎上述实例及其他前药类型实例的取代基的其他实例。

另外，式(1)的某些化合物本身可用作式(1)的其他化合物的前药。

本发明范围也包含式(1)的化合物的代谢物，即，在投与该药物后于体内形成的化合物。本发明代谢物的一些实例包含

(i)在式(1)的化合物含有甲基时，其羟甲基衍生物(-CH₃→-CH₂OH)；

(ii)在式(1)的化合物含有烷氧基时，其羟基衍生物(-OR→-OH)；

(iii)在式(1)的化合物含有叔胺时，其仲胺基衍生物(-NR¹R²→-NHR¹或-NHR²)；

(iv)在式(1)的化合物含有仲胺基时，其伯胺衍生物(-NHR¹→-NH₂)；

(v)在式(1)的化合物含有苯基部分时，其苯酚衍生物(-Ph→-PhOH)；及

(vi)在式(1)的化合物含有酰胺基团时，其羧酸衍生物(-CONH₂→COOH)。

式(1)的化合物(其中R¹与R²不同)可以立体异构体形式存在。在结构异构体经由低能障壁互换时，可能出现互变异构现象(‘互变现象，)。此可在含有(例如)亚胺基、酮基或肟基的式(1)化合物中采用质子互变异构形式，或在含有芳族部分的化合物中采用所谓的化合价互变异构形式。其遵循单个化合物可存在一种以上类型的异构现象。具体而言，本发明包含其中三唑部分可以不同区域同分异构体存在的式(1)化合物。

本发明范围包含式(1)化合物的所有立体异构体及互变异构体形式(包含显示一种以上类型异构现象的化合物)及其一种或多种的混合物。本发明也包含酸加成盐或碱式盐，其中抗衡离子具光学活性，例如，d-乳酸盐或l-赖氨酸，或具外消旋性，例如，dl-酒石酸盐或dl-精氨酸。

用于制备/分离单个对映异构体的习用技术包含由适宜光学纯前体进行手性合成或使用(例如)手性高压液相色谱法(HPLC)进行外消旋异构体(或盐或衍生物的外消旋异构体)的拆分。

另外，外消旋异构体(或外消旋前体)可与适宜光学活性化合物(例如，醇)反应，或在式(1)化合物含有酸性或碱性部分的情况下可与酸或碱(例如酒石酸或1-苯乙胺)反应。所得非对映异构混合物可通过色谱法及/或分级结晶分离且可通过本领域技术人员所熟知的方法将非对映异构体的一或两个转化成相应的纯对映异构体。

可通过使用由烃(通常为庚烷或己烷)构成的含有0至50体积％的异丙醇(通常为2％至20％)及0至5体积％的烷基胺(通常为0.1％的二乙胺)的流动相在不对称树脂上实施色谱法(通常为HPLC)来获得呈对映异构体富集形式的本发明手性化合物(及其手性前体)。浓缩洗脱液得到经富集混合物。

立体异构聚集物可通过本领域技术人员习知的习用技术分离-参见(例如)E.L.Eliel的“Stereochemistry of Organic Compounds”(Wiley，New York，1994)。

本发明包含所有药学上可接受的同位素标记的式(1)化合物，其中一或多个原子由具有相同原子数但具有与在自然界中占优势的原子量或质量数不同的原子量或质量数的原子取代。

适于纳入本发明化合物中的同位素实例包含氢同位素(例如²H及³H)、碳同位素(例如¹¹C、¹³C及¹⁴C)、氮同位素(例如¹³N及¹⁵N)、氧同位素(例如¹⁵O、¹⁷O及¹⁸O)及硫同位素(例如³⁵S)。

某些同位素标记的式(1)化合物(例如那些纳入放射性同位素的)可用于药物及/或基质组织分布研究。放射性同位素氚(即³H)及碳-14(即¹⁴C)因易于纳入且容易探测而尤其可用于此目的。

用较重同位素(诸如氘，即²H)取代可提供较强代谢稳定性所产生的某些治疗优点，举例而言，体内半衰期增加或剂量需要减少，因此在某些情况下可能较优选。

用正电子发射同位素(例如¹¹C、¹⁵O及¹³N)取代可在正电子发射断层扫描(PET)研究中用来检测基质受体占据情况。

同位素标记的式(1)化合物通常可由本领域技术人员已知的习用技术制备，或可通过随附实例及制备中所述的类似的方法使用适宜同位素标记试剂代替先前使用的未标记试剂来制备。

本发明的药学上可接受的溶剂化物包含其中结晶溶剂可经同位素取代的，例如D₂O、d₆-丙酮、d₆-DMSO。

式(1)的化合物、其药学上可接受的盐及/或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物是有价值的药学活性化合物，其适用于治疗及预防许多涉及β2受体及/或毒蕈碱受体的病症。这些化合物特别可用于治疗及预防许多其中β2受体的激动作用及毒蕈碱受体的拮抗作用可诱发益处的病症，尤其过敏性及非过敏性气道疾病。

欲用于医药应用的本发明化合物可以晶体或无定形产品形式投与。其可通过例如沉淀、结晶、冻干、喷雾干燥、或蒸发干燥的方法获得呈例如固体栓剂(plugs)、粉剂、或薄膜形式。微波或射频干燥法可用于此目的。

本发明化合物可单独投与，或与一种或多种本发明其他化合物组合或与一种或多种其他药物组合(或以其任一组合形式)投与。通常，其将以与一种或多种药学上可接受的赋形剂组合的调配物投与。本文所用术语“赋形剂”描述除本发明化合物外的任何成份。赋形剂的选择很大程度上取决于以下因素：例如投与的特定方式、赋形剂对溶解性及稳定性的影响、及剂型的性质。

适于递送本发明化合物的药物组合物及其制备方法容易为本领域技术人员所了解。该组合物及其制备方法可参见例如‘Remington’s Pharmaceutical Sciences′，第19版(Mack Publishing Company，1995)。

本发明化合物可口服投与。口服投与可涉及吞咽以便化合物进入胃肠道，或可采用口含或舌下投与，由此化合物直接自口腔进入血流。

适于口服投与的调配物包含固体调配物(例如片剂)、含有颗粒、液体、或粉剂的胶囊、菱形片剂(包含液体填充的)、咀嚼剂、多颗粒及纳米颗粒、凝胶、固体溶液、脂质体、膜剂、阴道栓剂、喷雾剂及液体调配物。

液体调配物包含悬浮液、溶液、糖浆剂及酏剂。该调配物可作为软质或硬质胶囊内的填充物使用且通常包括载剂(例如，水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甲基纤维素、或适宜油)及一种或多种乳化剂及/或悬浮剂。液体调配物也可通过(例如)对药袋中的固体实施再构成制得。

本发明的化合物也可用于快速溶解、快速崩解剂型中，例如那些阐述于Liang及Chen的Expert Opinion in Therapeutic Patents，11(6)，981-986(2001)中的。

对于片剂剂型而言，视剂量而定，药物可占该剂型的1重量％至80重量％，更通常占该剂型的5重量％至60重量％。除该药物外，片剂中通常含有崩解剂。崩解剂的实例包含羟基乙酸淀粉钠、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、交联羧甲基纤维素钠、交聚维酮(crospovidone)、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、微晶纤维素、低碳数烷基取代的羟丙基纤维素、淀粉、预胶化淀粉及藻酸钠。通常，崩解剂占剂型的1重量％至25重量％、较优选5重量％至20重量％。

粘合剂通常用于赋予片剂调配物粘附质量。适宜粘合剂包含微晶纤维素、明胶、糖、聚乙二醇、天然及合成树胶、聚乙烯吡咯烷酮、预胶化淀粉、羟丙基纤维素及羟丙基甲基纤维素。片剂也可含有稀释剂，例如乳糖(单水合物、经喷雾干燥的单水合物、无水物及诸如此类)、甘露醇、木糖醇、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、微晶纤维素、淀粉及二水合磷酸氢钙。

片剂也可任选包括表面活性剂(例如月桂基硫酸钠及聚山梨醇酯80)及助流剂(例如二氧化硅及滑石粉)。若存在，则表面活性剂可占片剂的0.2重量％至5重量％，且助流剂可占片剂的0.2重量％至1重量％。

片剂通常也含有润滑剂，例如，硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、硬脂基富马酸钠、及硬脂酸镁与月桂基硫酸钠的混合物。润滑剂通常占片剂的0.25重量％至10重量％、较优选0.5重量％至3重量％。

其他可能的成份包含抗氧化剂、着色剂、矫味剂、防腐剂及遮味剂。

例示性片剂含有最多至约80％的药物、约10重量％至约90重量％的粘合剂、约0重量％至约85重量％的稀释剂、约2重量％至约10重量％的崩解剂、及约0.25重量％至约10重量％的润滑剂。

片剂掺合物可直接或通过辊子压制形成片剂。另外，片剂掺合物或掺合物部分在制片前可经湿式、干式、或熔融粒化、熔融凝结、或挤出。最终调配物可包含一或多层并可涂覆或不涂覆；甚至可装入胶囊中。

片剂调配物论述于H.Lieberman及L.Lachman的Pharmaceutical Dosage Forms：Tablets，第1卷，(Marcel Dekker，New York，1980)中。

供人类或兽医使用的可消耗性口服膜剂通常为柔软的水溶性或水可膨胀性薄膜剂型，其可迅速溶解或粘膜粘附，通常包括式(1)化合物、成膜聚合物、粘合剂、溶剂、润湿剂、增塑剂、稳定剂或乳化剂、粘度修饰剂及溶剂。调配物的一些组份可实施一种以上的功能。

式(1)化合物可为水溶性或非水溶性。水溶性化合物通常占溶质的1重量％至80重量％、更通常20重量％至50重量％。溶解性较低的化合物可占该组合物的更高比例，通常占溶质的多达88重量％。另外，式(1)化合物可呈多粒子珠粒形式。

成膜聚合物可选自天然多糖、蛋白质或合成水胶体，其通常以0.01-99重量％的范围、更通常30-80重量％的范围存在。

其他可能的成份包含抗氧化剂、着色剂、矫味剂及增味剂、防腐剂、催涎剂、冷却剂、共溶剂(包含油)、润肤剂(emollients)、膨胀剂(bulking agents)、消泡剂、表面活性剂及遮味剂。

本发明的膜剂通常通过对涂覆至可剥离衬底支持物或纸上的水性薄膜实施蒸发干燥而制备。此可在干燥烘箱或管道(通常为组合涂覆干燥器)中实施，或通过冻干或真空来实施。

可将口服投与的固体调配物调配成能直接释放及/或以改良方式释放。以改良方式释放调配物包含延时释放、持续释放、脉动释放、受控释放、靶向释放及程序性释放。

适用于本发明目的的以改良方式释放调配物阐述于美国专利第6,106,864号中。其他适宜释放技术(例如高能分散液及渗透性及经涂覆粒子)的详细资料参见Verma等人的Pharmaceutical Technology On-line，25(2)，1-14，(2001)。使用口香糖达成受控释放阐述于WO 00/35298中。

本发明化合物也可直接投与至血流、肌肉、或内部器官中。适用于非经肠投与的方式包含静脉内、动脉内、腹膜腔内、鞘内、心室内、尿道内、胸骨内、颅内、肌内及皮下投与。适用于非经肠投与的装置包含针式(包含微型针)注射器、无针式注射器及输注技术。

非经肠调配物通常为水溶液，其可含有赋形剂(例如盐、碳水化合物)及缓冲剂(较优选至3-9的pH)，但对于某些应用，可能更适合将其调配为无菌非水性溶液或干燥形式以同适宜媒剂(例如无菌、无致热源的水)组合使用。

非经肠调配物在无菌条件下的制备(例如通过冷冻干燥法)可容易地使用本领域技术人员所习知的标准医药技术完成。

用于制备非经肠溶液的式(1)化合物的溶解性可通过使用适当调配技术(例如纳入增溶剂)来增强。

非经肠投与的调配物可经调配而直接释放及/或以改良方式释放。以改良方式释放调配物包含延时释放、持续释放、脉动释放、受控释放、靶向释放及程序性释放。因此，可将本发明的化合物调配成固体、半固体、或触变液体用于以植入的储积物形式投与，进而以改良方式释放活性化合物。该调配物的实例包含经药物涂覆的支架及聚(dl-乳酸-共羟乙酸(coglycolic))酸(PGLA)微球体。

本发明的化合物也可局部投与至皮肤或粘膜，亦即经皮或穿过皮肤投与。用于此目的的典型调配物包含凝胶、水凝胶、洗剂、溶液、乳霜、软膏、撒施粉、敷料、发泡体、膜剂、皮肤贴片、糯米纸囊剂、植入物、海绵、纤维、绷带及微型乳剂。也可使用脂质体。典型载剂包含乙醇、水、矿物油、液体凡士林、白色凡士林、甘油、聚乙二醇及丙二醇。可纳入增渗剂-参见(例如)J Pharm Sci，88(10)，955-958，Finnin及Morgan(1999年10月)。

其他局部投与方式包含通过电穿孔、离子电渗法、声透法、超音促渗法及微型针或无针(例如，Powderject^TM、Bioject^TM等)注射来进行递送。

局部投与的调配物可经调配以直接释放及/或以改良方式释放。以改良方式释放调配物包含延时释放、持续释放、脉动释放、受控释放、靶向释放及程序性释放。

本发明化合物也可经鼻内投与或通过吸入投与，该投与所用典型形式为：来自干粉吸入器的干燥粉剂(或单独地、作为混合物(例如，与乳糖的干燥掺合物)、或作为混合组份粒子(例如，与磷脂(例如磷脂酰胆碱)混合))或作为来自加压容器、泵、喷射器、雾化器(较优选系使用电流体动力学的雾化器以生成细雾)或喷雾器的喷雾剂(其中使用或不使用适宜推进剂，例如1，1，1，2-四氟乙烷或1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷)。对于鼻内使用而言，粉剂可包括生物粘附剂，例如，脱乙酰壳多糖或环糊精。

加压容器、泵、喷射器、雾化器或喷雾器含有包括(例如)乙醇、乙醇水溶液、或用于活性物质分散、增溶、或延长释放的适宜替代剂、作为溶剂的推进剂及(视需要)表面活性剂(例如三油酸山梨醇酐酯、油酸、或寡聚乳酸)的本发明化合物的溶液或悬浮液。

在干燥粉剂或悬浮液调配物中使用的前，将药品微米尺寸化至适于通过吸入递送的尺寸(通常小于5微米)。此可通过任一适宜粉末化方法(例如螺旋喷射研磨、流化床喷射研磨、超临界流体处理)来形成纳米粒子、高压均化、或喷雾干燥而达成。

用于吸入器或吹药器中的胶囊(例如，通过明胶或羟丙基甲基纤维素制成)、泡罩及药筒可经调配而含有本发明化合物的粉末混合物、适宜粉末基质(例如乳糖或淀粉)及性能改良剂(例如1-白氨酸、甘露醇、或硬脂酸镁)。乳糖可为无水的或呈单水合物形式，较优选为后者。其他适宜赋形剂包含葡聚糖、葡萄糖、麦芽糖、山梨醇、木糖醇、果糖、蔗糖及海藻糖。

适用于使用电流体动力学以生成细雾的雾化器中的溶液调配物每次喷射可含有1微克至20毫克的本发明化合物，且喷射体积可在1微升至100微升间变化。典型调配物可包括式(1)化合物、丙二醇、无菌水、乙醇及氯化钠。可用于替代丙二醇的替代溶剂包含甘油及聚乙二醇。

可将适宜矫味剂(例如薄荷脑及左薄荷脑)、或增甜剂(例如糖精或糖精钠)添加至那些欲以吸入/鼻内方式投与的本发明调配物中。

吸入/鼻内方式投与的调配物可使用(例如)PGLA调配成能直接释放及/或以改良方式释放。以改良方式释放调配物包含延时释放、持续释放、脉动释放、受控释放、靶向释放及程序性释放。

在干粉吸入器及雾剂的情况下，剂量单位系取决于预填充胶囊、泡罩或袋或使用重力计量式供给室的系统。本发明的单位通常经布置以投与含1微克至5000微克(本文的化合物名称)、或其盐的计量剂量或“喷雾(puff)”。全天剂量通常介于1微克至20毫克之间，其可以单次剂量投与或更经常地作为分次剂量于一天内投与。

式(1)的化合物尤其适用于(具体而言)使用干粉吸入器以吸入式投与。

本发明化合物可经直肠或阴道(例如以栓剂、阴道栓、或灌肠剂的形式)投与。可可油为习用栓剂基质，但视需要可使用多种替代物。

经直肠/阴道投与的调配物可经调配而能直接释放及/或以改良方式释放。以改良方式释放调配物包含延时释放、持续释放、脉动释放、受控释放、靶向释放及程序性释放。

本发明的化合物也可直接投与至眼或耳内，通常以等渗且pH经调节的无菌盐水中的微米尺寸化悬浮液或溶液的液滴剂形式。其他适于经眼及耳投与的调配物包含软膏、可生物降解(例如可吸收性凝胶海绵、胶原)及不可生物降解的(例如聚硅酮)植入物、糯米纸囊剂、透镜及颗粒或泡状系统(例如非离子表面活性剂囊泡或脂质体)。可将诸如交联聚丙烯酸、聚乙烯醇、透明质酸、纤维素聚合物(例如，羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素或甲基纤维素)或杂多糖聚合物(例如，琼脂糖胶)等聚合物与防腐剂(例如，苯扎氯铵)一起掺入。该调配物也可通过离子电渗法递送。

经眼/耳投与的调配物可经调配而能直接释放及/或以改良方式释放。以改良方式释放调配物包含延时释放、持续释放、脉动释放、受控释放、靶向释放、或程序性释放。

本发明化合物可与可溶性大分子体(例如环糊精及其适宜衍生物或含有聚乙二醇的聚合物)组合使用，以改善其在以任一上述投与方式使用时的溶解性、溶解速率、遮味情况、生物利用度及/或稳定性。

发现药物-环糊精络合物(举例而言)可广泛用于大多数剂型及投与途径。包含包合物及不包含包合物的情况皆可使用。作为与药物直接复合的替代形式，环糊精可用作辅助添加剂，亦即作为载剂、稀释剂、或增溶剂。最经常用于该目的的是α-、β-、及γ-环糊精，其实例可参见国际专利申请案第WO 91/11172号、第WO 94/02518号及第WO 98/55148号。

由于理想情况为投与活性化合物的组合(举例而言，出于治疗特定疾病或病状的目的)，故本发明范围涵盖以下情形：两种或更多种药物组合物(其中至少一种含有本发明的化合物)可方便地组合成适于同时投与该组合物的试剂盒形式。

因此，本发明的试剂盒包括两种或更多种分开的药物组合物(其中至少一种含有本发明的式(1)化合物)及用于分别保存该组合物的装置(例如容器、分开式瓶子、或分开式箔片组)。此一试剂盒的实例是用于包装片剂、胶囊及诸如此类的常见泡罩包装。

本发明试剂盒尤其适用于投与不同剂型(例如，非经肠)、适用于以不同剂量间隔投与单独组合物、或适用于相互滴定分析单独的组合物。为有助于依从性，该试剂盒通常包括用药说明，并可能提供有所谓的记忆辅助对象。

对于投与给人类患者而言，本发明化合物的总日剂量通常介于0.001毫克至5000毫克之间，当然需视投与方式而定。举例而言，静脉内日剂量可仅要求在0.001毫克至40毫克之间。总日剂量可以单次或分开剂量投与且可按医师判断超出本文所给的典型范围。

该剂量基于平均具有约65公斤至70公斤重量的人类受试者。医师能够易于确定用于体重超出此范围的受试者(例如婴儿及老年人)的剂量。

为避免产生疑问，本文所提及的“治疗”包含所提及的治疗性、姑息性及预防性治疗。

根据本发明另一实施例，式(1)的化合物或其药学上可接受的盐及/或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物也可与一种或多种欲同时投与至患者的其他治疗剂组合使用，以获得某些特别期望的最终治疗结果，例如治疗病理生理学相关疾病的方法，包含但不限于(i)支气管收缩、(ii)发炎、(iii)过敏、(iv)组织破坏、(v)体征及症状(例如呼吸暂停、咳嗽)。第二及更多其他治疗剂也可为式(1)的化合物、或其药学上可接受的盐及/或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物，或一种或多种业内已知的β2激动剂。更通常而言，第二及更多治疗剂选自不同种类的治疗剂。

本文所用术语“同时投与(co-administration)”、“经同时投与(co-administered)”及“组合(in combination with)”在提及(1)的化合物及一种或多种其他治疗剂时，欲指且确实系指且包含下列：

●向需要治疗的患者同时投与(1)的化合物与治疗剂的此组合，此时该组份在一起调配成单一剂型，实质上同时向该患者释放该组份，

●向需要治疗的患者实质上同时投与(1)的化合物与治疗剂的此组合，此时该组份彼此分别调配成单独的剂型，其实质上同时由该患者服用，由此该组份实质上同时向该患者释放，

●向需要治疗的患者依序投与(1)的化合物与治疗剂的此组合，此时该组份彼此分别调配成单独的剂型，其在连续时间内由该患者服用，且在每次投与期间有明显的时间间隔，由此该组份在实质上不同时间内向该患者释放；及

●向需要治疗的患者依序投与(1)的化合物与治疗剂的此组合，此时该组份在一起调配成单一剂型，以受控方式释放该组份，由此在相同及/或不同时间内由该患者同时、连续及/或重叠投与，

其中每一部分可由相同或不同途径投与。

可与式(1)化合物、或其药学上可接受的盐及/或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物组合使用的其他治疗剂的适宜实例包含但决不限于：

(a)5-脂肪氧合酶(5-LO)抑制剂或5-脂肪氧合酶活化蛋白(FLAP)拮抗剂；

(b)白三烯拮抗剂(LTRA)，包含LTB₄、LTC₄、LTD₄及LTE₄的拮抗剂；

(c)组胺受体拮抗剂，包含H1及H3拮抗剂；

(d)用于解充血药用途的α₁-及α₂-肾上腺素受体激动剂血管收缩拟交感神经药剂；

(e)PDE抑制剂，例如PDE3、PDE4及PDE5抑制剂；

(f)β2受体激动剂；

(g)蕈毒碱M3受体拮抗剂或抗胆碱能药剂；

(h)茶碱(Theophylline)；

(i)色甘酸钠；

(j)COX抑制剂，非选择性及选择性COX-1或COX-2抑制剂(NSAID)；

(k)前列腺素受体拮抗剂及前列腺素合成酶抑制剂；

(l)口服及吸入式糖皮质类固醇；

(m)肾上腺皮质激素受体的解离激动剂(DAGR)；

(n)对内源性炎症实体具有活性的单克隆抗体；

(o)抗肿瘤坏死因子(抗-TNF-α)药剂；

(p)粘附分子抑制剂，包含VLA-4拮抗剂；

(q)激肽-B₁-及B₂-受体拮抗剂；

(r)免疫抑制剂，包含IgE路径抑制剂及环孢菌素；

(s)基质金属蛋白酶(MMP)的抑制剂；

(t)速激肽NK₁、NK₂及NK₃受体拮抗剂；

(u)蛋白酶抑制剂，例如弹性蛋白酶抑制剂；

(v)腺苷A2a受体激动剂及A2b拮抗剂；

(w)尿激酶抑制剂；

(x)对多巴胺受体起作用的化合物，例如D2激动剂；

(y)NFκβ路径调节剂，例如IKK抑制剂；

(z)细胞因子信号传导路径的调节剂，例如p38 MAP激酶、PI3激酶、JAK激酶、syk激酶、EGFR或MK-2；

(aa)可归类为粘液溶解药或镇咳药的药剂；

(bb)增强对所吸入皮质类固醇反应的药剂；

(cc)有效抵抗可定殖呼吸道的微生物的抗生素及抗病毒剂；

(dd)HDAC抑制剂；

(ee)CXCR2拮抗剂；

(ff)整合素拮抗剂；

(gg)趋化因子；

(hh)上皮钠通道(ENaC)阻断剂或上皮钠通道(ENaC)抑制剂；

(ii)P2Y2激动剂及其他核苷酸受体激动剂；

(jj)血栓烷抑制剂；

(kk)PGD₂合成及PGD₂受体抑制剂(DP1及DP2/CRTH2)；

(ll)烟酸；及

(mm)粘附因子，包含VLAM、ICAM、及ELAM。

根据本发明，更优选式(1)的化合物与下列物质的组合：

-H3拮抗剂；

-毒蕈碱M3受体拮抗剂；

-PDE4抑制剂；

-糖皮质类固醇；

-腺苷A2a受体激动剂；

-细胞因子信号传导路径的调节剂，例如p38 MAP激酶或syk激酶；或

-白三烯拮抗剂(LTRA)，包含LTB₄、LTC₄、LTD₄及LTE₄的拮抗剂。

根据本发明，更优选式(1)的化合物与下列的组合：

-糖皮质类固醇，尤其全身性副作用较低的吸入糖皮质类固醇，包含泼尼松(prednisone)、泼尼松龙(prednisolone)、氟尼缩松(flunisolide)、曲安奈德(triamcinolone acetonide)、倍氯美松双丙酸酯(beclomethasone dipropionate)、布地奈德(budesonide)、丙酸氟替卡松(fluticasone propionate)、环索奈德(ciclesonide)及莫米松糠酸酯(mometasone furoate)，或

-蕈毒碱M3受体拮抗剂或抗胆碱能药剂，尤其包含异丙托铵盐(即异丙托溴铵)、噻托铵盐(即噻托溴铵)、氧托铵盐(即氧托溴铵)、哌仑西平(perenzepine)、及替仑西平(telenzepine)。

应了解，本文所有提及的治疗包含治愈性治疗、缓解性治疗及预防性治疗。

如下文进一步所述，式(1)的化合物能够与β2受体及胆碱毒蕈碱受体相互作用且由此具有宽范围的治疗应用，此乃因β2受体及毒蕈碱受体在所有哺乳动物生理学中起重要作用。

因此，本发明另一实施方式涉及用于治疗涉及β2受体及/或毒蕈碱受体的疾病、病症、及病状中的式(1)的化合物、或其药学上可接受的盐及/或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物。更具体而言，本发明也涉及用于治疗选自由以下组成的组的疾病、病症、及病状的式(1)的化合物、或其药学上可接受的盐及/或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物：

●无论何种类型、病源学或发病机制的哮喘，尤其是选自由以下组成的组的成员的哮喘：异位性哮喘、非异位性哮喘、过敏性哮喘、异位性支气管性IgE介导的哮喘、支气管哮喘、特发性哮喘、真哮喘、由病理生理学紊乱所致的内源性哮喘、由环境因子所致的外源性哮喘、未知或隐性原因的特发性哮喘、非异位性哮喘、支气管炎性哮喘、肺气肿性哮喘、运动诱发性哮喘、过敏原诱发性哮喘、冷空气诱发性哮喘、职业性哮喘、由细菌、真菌、原生动物或病毒感染所致的感染性哮喘、非过敏性哮喘、初发哮喘、喘鸣婴儿综合征及细支气管炎(bronchiolytis)；

●慢性或急性支气管收缩、慢性支气管炎、小气道阻塞及肺气肿；

●无论何种类型、病源学或发病机制的阻塞性或炎症性气道疾病，尤其是选自由以下组成的组的成员的阻塞性或炎症性气道疾病：慢性嗜酸粒细胞性肺炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、包含慢性支气管炎的COPD、与COPD相关或不相关性肺气肿或呼吸困难、特征在于不可逆的进行性气道阻塞的COPD、成人呼吸窘迫综合征(ARDS)、由其他药物治疗所致的气道过度反应性加重及与肺高血压症相关的气道疾病；

●无论何种类型、病源学或发病机制的支气管炎，尤其是选自由以下组成的组的成员的支气管炎：急性支气管炎、急性喉气管支气管炎、花生仁吸入性支气管炎、卡他性(catarrhal)支气管炎、克鲁布性(croupus)支气管炎、干性支气管炎、传染性哮喘性支气管炎、增生性支气管炎、葡萄球菌性或链球菌性支气管炎及肺泡性支气管炎；

●急性肺损伤；及

●无论何种类型、病源学或发病机制的支气管扩张症，尤其是选自由以下组成的组的成员的支气管扩张症：柱状支气管扩张症、袋状支气管扩张症(sacculated bronchiectasis)、梭形支气管扩张症、细支气管扩张症、囊状支气管扩张症(cystic bronchiectasis)、干性支气管扩张症及滤泡性支气管扩张症。

本发明的又一实施方式也涉及式(1)的化合物、或其药学上可接受的盐及/或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物在制造具有β2激动剂活性及M3拮抗剂活性的药物中的用途。具体而言，本发明涉及式(1)的化合物、或其药学上可接受的盐及/或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物在制造用于治疗涉及β2及毒蕈碱受体的疾病及/或病状、尤其为上述疾病及/或病状的药物中的用途。

因此，本发明提供使用有效量的式(1)化合物、或其药学上可接受的盐及/或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物来治疗哺乳动物(包含人类)的尤其令人感兴趣的方法。更确切而言，本发明提供治疗哺乳动物(包含人类)中涉及β2及毒蕈碱受体的β2-介导的疾病及/或病状、尤其为上述疾病及/或病状的尤其令人感兴趣的方法，其包括向该哺乳动物投与有效量的式(1)化合物、其药学上可接受的盐及/或所述化合物或盐的溶剂化物。

下列实例阐释式(1)化合物的制备：

附图

图1/1：实施例2a的PXRD图案。

方案

对于下文所有实例，使用下列实验条件：

粉末X射线衍射法(PXRD)

使用配备有自动换样器、θ-θ测角计、自动光束发散狭缝及PSD Vantec-1检测器的Bruker-AXS公司，D4粉末X射线衍射仪测定粉末X射线衍射图案。通过放置于低背景腔室硅晶片样品支架上来准备试样以待分析。使所获得的峰与硅参照标准品校准。旋转样品，同时使用在40千伏/35毫安下运作的X射线管用Cu Kα₁X射线(波长＝1.5406埃)进行辐照。在2度至55度的2θ范围内使用设定为0.2秒钟计数/0.018度步长以连续模式运行的测角计实施分析。

制备

制备1

(2R)-2-环己基-2-羟基-2-苯乙酰胺

将(2R)-2-环己基-2-羟基-2-苯乙酸(制备36，4.87g，20.8mmol)溶于二氯甲烷(150mL)中且一次性添加羰基二咪唑(3.37g，20.8mmol)。在室温下搅拌1小时后，添加0.880氨水(21mL)并在室温下持续搅拌18小时。分离有机层，使用盐水(50mL)洗涤，通过硫酸镁进行干燥，过滤且在真空中去除溶剂以提供白色泡沫状标题化合物(产率为92％，4.56g)。

LRMS：APCI ESI m/z 232[M-H]^-

¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝0.92(m，1H)，1.15(m，5H)，1.76(m，4H)，2.40(m，1H)，5.38(br.s，1H)，6.52(br.s，1H)，7.28(m，1H)，7.37(m，2H)，7.62(m，2H)ppm。

制备2

(R)-环己基(苯基)1H-1，2，4-三唑-3-基甲醇

将(2R)-2-环己基-2-羟基-2-苯乙酰胺(制备1，4.497g，19.27mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(60ml)中。在90℃下搅拌2小时后，在真空中去除溶剂且使残余物与甲苯(100ml)共沸以产生黄色油状物。添加水合肼(1.11ml，22.9mmol)然后添加冰乙酸(90ml)。在90℃下搅拌2小时后，在真空中去除溶剂且使残余物在乙酸乙酯(250ml)与碳酸氢钠饱和水溶液(250mL)之间分配。分离有机层，通过硫酸镁进行干燥，过滤且在真空中去除溶剂。通过在硅胶上使用乙酸乙酯洗脱的柱色谱来纯化残余物以提供白色固体状标题化合物(产率为100％，4.9g)。

LRMS：ESI m/z 256[M-H]^-

¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝1.08(m，3H)，1.36(m，2H)，1.70(m，5H)，2.46(m，1H)，3.08(br.s，1H)，7.23(m，1H)，7.34(m，2H)，7.65(m，2H)，8.00(s，1H)ppm。

对映异构体过量：99.3％，使用利用79％庚烷、31％异丙醇以流速1ml/min洗脱的Chiralpak AS-H柱(250×4.6mm)计算。期望的(R)-对映异构体的保留时间为13.61min，不期望的(S)-对映异构体的保留时间为11.31min(自外消旋物中鉴别)。

制备3

4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯

将4-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(6.75g，24.2mmol)溶于DMF(62ml)中且添加(R)-环己基(苯基)1H-1，2，4-三唑-3-基甲醇(制备2，5.2g，20mmol)，然后添加碳酸钾(5.58g，40.4mmol)。在70℃下搅拌18小时后，在真空中去除溶剂，且使残余物在乙酸乙酯(150ml)与水(150mL)之间分配。分离有机层，通过硫酸镁进行干燥，过滤并在真空中去除溶剂。通过在硅胶上使用乙酸乙酯∶庚烷(体积比为1∶4至1∶1)洗脱的柱色谱来纯化残余物以提供白色泡沫状标题化合物(产率为51％，4.7g，含有10％的另一三唑区域同分异构体)。

LRMS：APCI ESI m/z 487[M+H+MeOH]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.05-1.36(m，9H)，1.43(s，9H)，1.47-1.75(m，5H)，2.09(m，1H)，2.38(m，1H)，2.72(m，2H)，4.08(m，4H)，7.17(m，1H)，7.26(m，2H)，7.58(d，2H)，8.30(s，1H)ppm。

可替代地，根据下列程序制备标题化合物：

将(R)-环己基(苯基)1H-1，2，4-三唑-3-基甲醇(制备2，3.0g，11.7mmol)溶于丙酮(60mL)中，且添加4-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(3.24g，11.7mmol)，然后添加碳酸铯(7.60g，23.3mmol)。在70℃下搅拌5小时后，将反应物冷却至室温并再搅拌16小时。在真空中去除溶剂，且使残余物在乙酸乙酯(50ml)与水(50mL)之间分配。分离有机层，通过硫酸镁进行干燥，过滤并在真空中去除溶剂。将100mg此残余物溶于乙腈(0.5ml)中且蒸发直至接近干燥状态，此时所得油状物开始结晶。将剩余残余物溶于乙腈(55ml)中且使用先前获得的结晶物质加晶种。实施结晶18小时以上且通过过滤收集所得固体以提供白色固体状标题化合物(产率为64％，3.4g)。

LRMS：APCI ESI m/z 487[M+H+MeOH]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.05-1.36(m，9H)，1.43(s，9H)，1.47-1.75(m，5H)，2.09(m，1H)，2.38(m，1H)，2.72(m，2H)，4.08(m，4H)，7.17(m，1H)，7.26(m，2H)，7.58(d，2H)，8.30(s，1H)ppm。

制备4

(R)-环己基(苯基)[1-(哌啶-4-基甲基)-1H-1，2，4-三唑-3-基]甲醇

将4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(制备3，5.60g，12.3mmol)溶于DCM(31ml)中且添加存于乙醚中的2M HCl(31ml，60mmol)。在室温下搅拌5小时后，在真空中去除溶剂，且使残余物在二氯甲烷(200ml)与碳酸氢钠饱和水溶液(200mL)之间分配。分离有机层，通过硫酸镁进行干燥，过滤且在真空中去除溶剂以提供白色泡沫状标题化合物(产率为92％，4.03g，含有10％的另一三唑区域同分异构体)。

LRMS：APCI ESI m/z 377[M+Na]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.04-1.36(m，9H)，1.38-1.57(m，2H)，1.58-1.81(m，3H)，2.00(m，1H)，2.38(m，1H)，2.58(m，2H)，3.06(m，2H)，4.06(d，2H)，7.17(m，1H)，7.25(m，2H)，7.58(d，2H)，8.31(s，1H)ppm。

可替代地，根据下列程序制备标题化合物：

将4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(制备3a，2.00g，4.40mmol)溶于二

烷(11ml)中并剧烈搅拌以达成溶解。然后添加存于二

烷中的4M HCl(5.54mL，22.1mmol)。在室温下搅拌24小时后，在真空中去除溶剂，且使残余物在二氯甲烷(50ml)与碳酸氢钠饱和水溶液(50mL)之间分配。分离有机层，通过硫酸镁进行干燥，过滤且在真空中去除溶剂以提供无色油状标题化合物(产率为96％，1.5g)。

LRMS：APCI ESI m/z 377[M+Na]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.04-1.36(m，9H)，1.38-1.57(m，2H)，1.58-1.81(m，3H)，2.00(m，1H)，2.38(m，1H)，2.58(m，2H)，3.06(m，2H)，4.06(d，2H)，7.17(m，1H)，7.25(m，2H)，7.58(d，2H)，8.31(s，1H)ppm。

制备5

{9-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}亚胺基二甲酸二-叔-丁基酯

将(R)-环己基(苯基)[1-(哌啶-4-基甲基)-1H-1，2，4-三唑-3-基]甲醇(制备4，2.00g，5.64mmol)及(9-溴壬基)亚胺基二甲酸二-叔-丁基酯(US 04167167，2.38g，5.64mmol)溶于乙腈(60ml)中且添加三乙胺(2.35ml，16.9mmol)。在50℃下搅拌18小时后，在真空中去除溶剂，且通过在硅胶上使用二氯甲烷∶甲醇∶880氨水(体积比为98∶2∶0.2)洗脱的柱色谱来纯化残余物以提供澄清油状标题化合物(产率为60％，2.6g，含有10％的另一三唑区域同分异构体)。

LRMS：APCI ESI m/z 696[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.14(m，4H)，1.25-1.38(m，18H)1.41-1.51(m，18H)，1.51-1.75(m，6H)，1.99(m，2H)，2.14(m，2H)，2.42(m，2H)，3.06(m，2H)，3.55(m，2H)，4.09(m，2H)，7.16(m，1H)，7.26(m，2H)，7.58(m，2H)，8.32(m，1H)ppm。

制备6

(R)-(1-{[1-(9-氨基壬基)哌啶-4-基]甲基}-1H-1，2，4-三唑-3-基)(环己基)苯基甲醇

将{9-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}亚胺基二甲酸二-叔-丁基酯(制备5，2.6g，3.7mmol)溶于二氯甲烷(15ml)中并添加存于二乙醚中的氯化氢(2M，15ml，30mmol)。在室温下搅拌5小时后，在真空中去除溶剂，且使残余物在二氯甲烷(200ml)与碳酸氢钠饱和水溶液(200mL)之间分配。分离有机层，通过硫酸镁进行干燥，过滤并在真空中去除溶剂。通过在硅胶上使用二氯甲烷∶甲醇∶880氨水(体积比为97.5∶2.5∶0.25)洗脱的柱色谱来纯化残余物以提供澄清油状标题化合物(产率为70％，1.29g，含有10％的另一三唑区域同分异构体)。

LRMS：APCI m/z 496[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.12(m，4H)，1.23-1.34(m，18H)，1.49(m，6H)，1.64(m，2H)，1.94(m，2H)，2.31(m，2H)，2.63(m，2H)，2.93(m，2H)，4.07(m，2H)，7.16(m，1H)，7.25(m，2H)，7.58(m，2H)，8.31(s，1H)ppm。

制备7

8-(苄氧基)-5-[(1R)-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-({9-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)乙基]喹啉-2(1H)-酮

将(R)-(1-{[1-(9-氨基壬基)哌啶-4-基]甲基}-1H-1，2，4-三唑-3-基)(环己基)苯基甲醇(制备6，350mg，0.706mg)、8-(苄氧基)-5-[(1R)-2-溴-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基]喹啉-2(1H)-酮(WO 200509286，345mg，0.706mmol)及碳酸氢钠(88.9mg，1.06mmol)组合于乙腈(7mL)中。在90℃下搅拌72小时后，在真空中去除溶剂且使残余物在二氯甲烷(50ml)与碳酸氢钠饱和水溶液(50mL)之间分配。分离有机层，通过硫酸镁进行干燥，过滤并在真空中去除溶剂。通过在硅胶上使用二氯甲烷∶甲醇∶880氨水(体积比为99∶1∶0.1至95∶5∶0.5)洗脱的柱色谱来纯化残余物以提供澄清玻璃状标题化合物(产率为37％，240mg，含有10％的另一三唑区域同分异构体)。

LRMS：APCI ESI m/z 904[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝0.07(s，3H)，0.37(s，3H)，1.17(s，9H)，1.37-1.49(m，4H)，1.52-1.63(m，18H)，1.76(m，6H)，1.92(m，2H)，2.20(m，2H)，2.60(m，2H)，2.88(m，2H)，3.01(m，1H)，3.18(m，3H)，4.35(m，2H)，5.50(m，1H)，5.61(s，2H)，6.95(d，1H)，7.41-7.70(m，8H)，7.79(m，2H)，7.86(m，2H)，8.59(s，1H)，8.74(d，1H)ppm。

制备8

5-[(1R)-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-({9-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮

将8-(苄氧基)-5-[(1R)-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-({9-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)乙基]喹啉-2(1H)-酮(制备7，230mg，0.255mmol)溶于乙醇(10ml)中且添加氢氧化钯[20wt.％(干基)，于碳(湿)上](5mg)然后添加甲酸铵(161mg，2.55mmol)。在回流下搅拌1小时后，经由arbocel

过滤反应混合物且在真空中去除溶剂。通过在硅胶上使用二氯甲烷∶甲醇∶880氨水(体积比为97.5∶2.5∶0.25至90∶10∶1)洗脱的柱色谱来纯化残余物以提供玻璃状标题化合物(产率为87％，180mg)。

LRMS：APCI ESI m/z 813[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝0.00(s，3H)，0.30(s，3H)，1.10(s，9H)，1.45-1.94(m，28H)，2.21(m，3H)，2.58(m，3H)，2.85(m，2H)，2.95(m，1H)，3.17(m，3H)，4.29(m，2H)，5.42(m，1H)，6.85(d，1H)，7.14(d，1H)，7.32-7.48(m，4H)，7.78(m，2H)，8.52(s，1H)，8.65(d，1H)ppm。

制备9

2-{2-[4-(2-羟基-乙基)-苯基]-乙烯基}-异吲哚-1，3-二酮

向存于乙腈(480mL)中的2-(4-溴苯基)乙醇(48.3g)溶液中添加二异丙基乙胺(46.6g)、N-乙烯基邻苯二甲酰亚胺(43.7g)及三-邻-甲苯基膦(7.31g)且使用氮气将混合物吹扫三次。添加乙酸钯(2.7g)且在90℃下于氮气中将混合物搅拌21hr。冷却反应物且通过过滤收集沉淀产物。将所得固体再次溶解于二氯甲烷及乙酸乙酯中且经由硅胶进行过滤。将该滤液在真空中浓缩以获得24g标题化合物。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝2.81-2.84(t，2H)，3.82-3.90(t，2H)，7.23-7.26(d，2H)7.32-7.36(d，1H)，7.40-7.43(d，2H)，7.61-7.64(d，1H)，7.66-7.78(d，2H)，7.86-7.88(d，2H)ppm。

制备10

2-{2-[4-(2-羟基-乙基)-苯基]-乙基}-异吲哚-1，3-二酮

向存于乙醇及乙酸乙酯(各350mL)中的搅拌的2-{2-[4-(2-羟基-乙基)-苯基]-乙烯基}-异吲哚-1，3-二酮(制备9，10g)溶液中添加30％氢氧化钯/碳(1.44g)，然后添加甲酸铵(21.5g)。将反应物于80℃下加热4小时。再次添加氢氧化钯/碳(1.44g)及甲酸铵(21.5g)并将反应物在80℃下搅拌18小时。冷却反应物，经由Arbocel^TM垫过滤且使用甲醇进行冲洗。在减压下去除溶剂且将所得白色固体在二氯甲烷(200ml)与水(100ml)之间分配。分离水层且进一步使用二氯甲烷(2×50mL)进行萃取。干燥(硫酸钠)合并的有机层且在真空中去除溶剂以得到9.11g灰白色固体状标题化合物。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝2.80-2.83(t，2H)，2.92-3.00(t，2H)，3.82-3.86(t，2H)，3.87-3.96(t，2H)，7.14-7.22(2x d，4H)，7.70-7.72(dd，2H)，7.82-7.84(dd，2H)ppm。

可替代地，根据下列程序制备标题化合物：

将2-{2-[4-(2-羟基-乙基)苯基]-乙烯基}-异吲哚-1，3-二酮(制备9，62.0g，211.37mmol)溶于乙酸乙酯(1200mL)中。向此溶液中添加三(三苯基膦)氯化铑(12.7g，13.7mmol)且将混合物在20psi、室温下实施氢化24小时。过滤反应物并在真空中浓缩。将残余物溶于乙酸乙酯(1000mL)中并经过硅胶垫，使用乙酸乙酯进行洗涤。在真空中去除溶剂以得到浅褐色固体，将该浅褐色固体在乙酸乙酯∶庚烷(体积比为4∶1)中重结晶以产生灰白色结晶固体状标题化合物(产率为85％，53g)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝2.80-2.83(t，2H)，2.92-3.00(t，2H)，3.82-3.86(t，2H)，3.87-3.96(t，2H)，7.14-7.22(2x d，4H)，7.70-7.72(dd，2H)，7.82-7.84(dd，2H)ppm。

制备11

2-{2-[4-(2-溴-乙基)-苯基]-乙基}-异吲哚-1，3-二酮

将存于甲苯(500mL)中的2-{2-[4-(2-羟基-乙基)-苯基]-乙基}-异吲哚-1，3-二酮(制备10，22.37g)及三溴化磷(8.20g)的溶液回流4小时。将混合物冷却至室温，使用乙酸乙酯(300mL)进行稀释且使用存于水(100mL)中的亚硫酸氢钠/碳酸氢钠(1∶1)缓缓骤冷。分离有机层且使用另一存于水(100mL)中的亚硫酸氢钠/碳酸氢钠(1∶1)洗涤，通过硫酸钠进行干燥且在真空中浓缩。使用庚烷∶叔-丁基甲基醚(100mL；体积比为9∶1)研磨所得固体(24.26g)以得到17.94g浅绿色固体状标题化合物。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝2.93-3.00(t，2H)，3.07-3.18(t，2H)，3.53-3.59(t，2H)，3.88-3.94(t，2H)，7.13-7.23(2xd，4H)，7.70-7.73(dd，2H)，7.83-7.85(dd，2H)ppm。

制备12

2-[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮

将环己基-苯基-(1-哌啶-4-基甲基-1H-[1，2，4]三唑-3-基)-甲醇(制备4，8.2g，2.98mmol)、2-{2-[4-(2-溴-乙基)-苯基]-乙基}-异吲哚-1，3-二酮(制备11，7.56g，21.1mmol)及三乙胺(13.3ml，95.9mmol)溶于乙腈(100ml)中。在90℃下搅拌48小时后，在真空中去除溶剂，且使残余物在二氯甲烷(200ml)与水(200mL)之间分配。分离有机层，通过硫酸镁进行干燥，过滤并在真空中去除溶剂。通过在硅胶上使用二氯甲烷∶甲醇∶880氨水(体积比为98∶2∶0.2)洗脱的柱色谱来纯化残余物且然后在叔-丁基甲基醚中研磨所得物质以提供澄清固体状标题化合物(产率为28％，3.4g)。

LRMS：APCI ESI m/z 632[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.13(m，3H)，1.22-1.37(m，5H)，1.43(m，1H)，1.50-1.74(m，5H)，1.94(m，1H)，2.03(m，2H)，2.38(m，1H)，2.52(m，2H)，2.73(m，2H)，2.90-3.02(m，4H)，3.86(t，2H)，4.08(d，2H)，7.06-7.17(m，5H)，7.25(m，2H)，7.58(m，2H)，7.78(m，4H)，8.32(s，1H)ppm。

可替代地，根据下列程序制备标题化合物：

将环己基-苯基-(1-哌啶-4-基甲基-1H-[1，2，4]三唑-3-基)-甲醇(制备4，0.40g，1.13mmol)及2-{2-[4-(2-溴-乙基)-苯基]-乙基}-异吲哚-1，3-二酮(制备11，0.404g，1.13mmol)及二异丙基乙胺(0.59ml，3.38mmol)溶于甲基乙基酮(8mL)中。在90℃下搅拌24小时后，将反应物缓慢冷却至室温。出现结晶且通过过滤收集所得固体并在真空中干燥以产生奶油色固体状标题化合物(产率为74％，0.532g)。

LRMS：APCI ESI m/z 632[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.13(m，3H)，1.22-1.37(m，5H)，1.43(m，1H)，1.50-1.74(m，5H)，1.94(m，1H)，2.03(m，2H)，2.38(m，1H)，2.52(m，2H)，2.73(m，2H)，2.90-3.02(m，4H)，3.86(t，2H)，4.08(d，2H)，7.06-7.17(m，5H)，7.25(m，2H)，7.58(m，2H)，7.78(m，4H)，8.32(s，1H)ppm。

另外，也可根据下列程序制备标题化合物：

将甲磺酸2-{4-[2-(1，3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-乙基]-苯基}-乙基酯(制备35，20.00g，53.56mmol)溶于乙腈(80mL)中且在室温下搅拌。逐份添加碘化钠(16.06g，107.12mmol)且将所得浆液加热至80℃并保持18h。将反应混合物冷却至50℃且另外添加乙腈(80mL)。向该混合物中添加环己基-苯基-(1-哌啶-4-基甲基-1H-[1，2，4]三唑-3-基)-甲醇(制备4，15.87g，53.56mmol)及二异丙基乙胺(9.79mL，56.24mmol)且持续加热6小时，然后冷却至室温。添加水(160mL)并将所得浆液在室温下搅拌过夜。通过过滤收集固体且使用乙腈(5×20mL)进行洗涤，然后在45℃下于真空中干燥8小时以产生褐色固体状标题化合物(产率为68％，20.9g)。

LRMS：APCI ESI m/z 632[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.13(m，3H)，1.22-1.37(m，5H)，1.43(m，1H)，1.50-1.74(m，5H)，1.94(m，1H)，2.03(m，2H)，2.38(m，1H)，2.52(m，2H)，2.73(m，2H)，2.90-3.02(m，4H)，3.86(t，2H)，4.08(d，2H)，7.06-7.17(m，5H)，7.25(m，2H)，7.58(m，2H)，7.78(m，4H)，8.32(s，1H)ppm。

制备13

(R)-{1-[(1-{2-[4-(2-氨基乙基)苯基]乙基}哌啶-4-基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-3-基}(环己基)苯基甲醇

将2-[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(制备12，3.4g，5.38mmol)悬浮于乙醇(20ml)中且添加一水合肼(2.61ml，53.8ml)。在回流下搅拌2小时后，将反应物冷却至室温且通过过滤收集沉淀物并使用乙醇(200ml)进行洗涤。在真空中浓缩滤液以提供白色固体状标题化合物(产率为81％，2.57g)。

LRMS：ESI m/z 502[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.04-1.75(m，14H)，1.90-2.08(m，3H)，2.38(m，1H)，2.54(m，2H)，2.68-2.78(m，4H)，2.84(m，2H)，2.99(m，2H)，3.96(d，2H)，7.09-7.17(m，4H)，7.12(m，1H)，7.25(m，2H)，7.59(m，2H)，8.31(s，1H)ppm。

制备14

8-(苄氧基)-5-[(1R)-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}乙基]喹啉-2(1H)-酮

使用与制备7中所述相同的方法自(R)-{1-[(1-{2-[4-(2-氨基乙基)苯基]乙基}哌啶-4-基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-3-基}(环己基)苯基甲醇(制备13，2.57g，5.12mmol)及8-(苄氧基)-5-[(1R)-2-溴-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基]喹啉-2(1H)-酮(WO 2005/09286，2.50g，5.12mmol)制备标题化合物，得到白色固体(产率为40％，2.3g)。

LRMS：ESI m/z 909[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝-0.28(s，3H)，-0.04(s，3H)，0.76(s，9H)，1.04-1.76(m，14H)，1.93(m，3H)，2.39(m，1H)，2.53(m，2H)，2.64-2.79(m，5H)，2.79-2.94(m，3H)，2.99(m，2H)，4.07(d，2H)，5.15(m，1H)，5.30(s，2H)，6.65(m，1H)，7.06(m，4H)，7.15(m，3H)，7.20-7.43(m，5H)，7.49(d，2H)，7.59(d，2H)，8.32(s，1H)，8.39(d，1H)ppm。

制备15

5-[(1R)-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮

使用与制备8中所述相同的方法自8-(苄氧基)-5-[(1R)-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}乙基]喹啉-2(1H)-酮(制备14，2.30g，2.81mmol)来制备标题化合物，得到黄色固体(产率为91％，2.10g)。

LRMS：ESI m/z 819[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝-0.28(s，3H)，-0.04(s，3H)，0.77(s，9H)，1.02-1.22(m，3H)，1.22-1.51(m，6H)，1.51-1.76(m，5H)，1.95(m，1H)，2.08(m，2H)，2.39(m，1H)，2.57(m，2H)，2.69-2.81(m，5H)，2.84-2.94(m，3H)，3.07(m，2H)，4.08(d，2H)，5.13(m，1H)，6.62(d，1H)，6.91(d，1H)，6.99-7.11(m，5H)，7.16(m，1H)，7.25(m，2H)，7.59(d，2H)，8.32(s，1H)，8.38(d，1H)ppm。

制备16

1-(吡咯烷-1-基甲基)-1H-1，2，4-三唑

将三唑(10g，144.8mmol)及吡咯烷(11.3g，159.0mmol)溶于乙醇(60ml)且添加甲醛(37％的水溶液，12.9ml，159.0mmol)。在回流下搅拌4小时，将反应物在室温下保持18小时。在真空中去除溶剂，且使残余物在二氯甲烷(150ml)与水(80mL)之间分配。分离出水相并使用额外二氯甲烷(80ml)加以萃取。使用盐水(100mL)洗涤合并的有机层，通过硫酸镁进行干燥，过滤且在真空中去除溶剂以提供黄色油状标题化合物(产率为55％，12.2g)。

¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝1.75(m，4H)，2.70(m，4H)，5.13(s，2H)，7.94(s，1H)，8.13(s，1H)ppm。

制备17

环己基(苯基)[1-(吡咯烷-1-基甲基)-1H-1，2，4-三唑-5-基]甲醇

将1-(吡咯烷-1-基甲基)-1H-1，2，4-三唑(制备16，12.0g，78.84mmol)溶于四氢呋喃(120mL)中且将溶液冷却至-78℃。然后经30min逐滴添加正丁基锂(2.5M，存于己烷中，34.7ml，86.7mmol)。加热至室温并搅拌1小时后，将反应混合物冷却至-78℃且逐滴添加存于四氢呋喃(30mL)中的环己基(苯基)甲酮(16.3g，86.7mmol)溶液。加热至室温保持18hr后，添加水(100ml)且在真空中去除溶剂。使用乙酸乙酯(200ml)分配残余物，分离出水相且使用乙酸乙酯(2×200ml)再次进行萃取。通过硫酸镁干燥合并的有机层，过滤且在真空中去除溶剂以提供黄色油状标题化合物(产率为100％，27.28g)。

¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝1.00-1.94(m，14H)，2.49(m 1H)，2.71(m，4H)，5.08(s，2H)，7.19(m，1H)，7.30(m，2H)，7.72(m，2H)，8.00(s，1H)ppm。

制备18

环己基(苯基)1H-1，2，4-三唑-3-基甲醇

将环己基(苯基)[1-(吡咯烷-1-基甲基)-1H-1，2，4-三唑-5-基]甲醇(制备17，27.28g，80.12mmol)溶于乙醇(400ml)中并逐份添加硼氢化钠(3.03g，80.1mmol)。在回流下搅拌3小时后，经18hr将反应物冷却至室温。在真空中去除溶剂且通过在硅胶上使用戊烷∶乙酸乙酯(体积比为3∶1至0∶1)洗脱的柱色谱来纯化残余物以提供白色泡沫状标题化合物(产率为79％，16.4g)。

LRMS：APCI ESI m/z 256[M-H]^-

¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝0.90-1.80(m，10H)，2.46(m 1H)，7.25(m，1H)，7.33(m，2H)，7.67(m，2H)，8.00(s，1H)ppm。

制备19

4-({3-[环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯

使用与制备3中所述相同的方法自环己基(苯基)1H-1，2，4-三唑-3-基甲醇(制备18，500mg，1.94mmol)及4-(溴甲基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(649mg，2.33mmol)来制备标题化合物，得到澄清油状物(产率为47％，415mg)。

LRMS：APCI ESI m/z 381[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.05-1.45(m，9H)，1.43(s，9H)，1.52(m，2H)，1.67(m，3H)，2.09(m，1H)，2.38(m，1H)，2.72(m，2H)，4.08(m，4H)，7.17(m，1H)，7.26(m，2H)，7.58(d，2H)，8.30(s，1H)ppm。

制备20

环己基(苯基)[1-(哌啶-4-基甲基)-1H-1，2，4-三唑-3-基]甲醇

使用与制备4中所述相同的方法自4-({3-[环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-甲酸叔-丁基酯(制备19，450mg，0.990mmol)来制备标题化合物，得到澄清油状物(产率为91％，320mg)。

LRMS：APCI ESI m/z 378[M+Na]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.04-1.35(m，9H)，1.39-1.55(m，2H)，1.59-1.75(m，3H)，2.03(m，1H)，2.38(m，1H)，2.5(m，2H)，3.01(m，2H)，4.05(d，2H)，7.15(m，1H)，7.27(m，2H)，7.58(d，2H)，8.31(s，1H)ppm。

制备21

{9-[4-({3-[环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)-哌啶-1-基]壬基}亚胺基二甲酸二-叔-丁基酯

使用与制备5中所述相同的方法自环己基(苯基)[1-(哌啶-4-基甲基)-1H-1，2，4-三唑-3-基]甲醇(制备20，300mg，0.846mmol)及(9-溴壬基)亚胺基二甲酸二-叔-丁基酯(US 04167167，357mg，0.846mmol)来制备标题化合物，得到白色发泡体(产率为61％，360mg)。

LRMS：APCI ESI m/z 696[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.14(m，4H)，1.23-1.37(m，18H)1.46-1.60(m，24H)1.68(m，2H)1.96(m，2H)2.33(m，2H)2.95(m，2H)3.55(m，2H)4.07(m，2H)7.16(m，1H)7.26(m，2H)7.58(m，2H)8.31(s，1H)ppm。

制备22

(1-{[1-(9-氨基壬基)哌啶-4-基]甲基}-1H-1，2，4-三唑-3-基)(环己基)苯基甲醇

使用与制备6中所述相同的方法自{9-[4-({3-[环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}亚胺基二甲酸二-叔-丁基酯(制备21，360mg，0.57mmol)来制备标题化合物，得到澄清油状物(产率为90％，230mg)。

LRMS：APCI m/z 496[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.12(m，4H)，1.22-1.39(m，18H)，1.39-1.58(m，6H)，1.64(m，2H)，1.94(m，2H)，2.31(m，2H)，2.65(m，2H)，2.93(m，2H)，4.06(d，2H)，7.16(m，1H)，7.25(m，2H)，7.58(d，2H)，8.31(s，1H)ppm。

制备23

8-(苄氧基)-5-[(1R)-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-({9-[4-({3-[环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}-氨基)乙基]喹啉-2(1H)-酮

使用与制备7中所述相同的方法自(1-{[1-(9-氨基壬基)哌啶-4-基]甲基}-1H-1，2，4-三唑-3-基)(环己基)苯基甲醇(制备22，150mg，0.303mg)及8-(苄氧基)-5-[(1R)-2-溴-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基]喹啉-2(1H)-酮(WO 05/09286，148mg，0.303mmol)来制备标题化合物，得到澄清油状物(产率为24％，66mg)。

LRMS：APCI m/z 904[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝0.07(s，3H)，0.37(s，3H)，1.15(s，9H)，1.32-1.65(m，22H)，1.76(m，6H)，1.92(m，2H)，2.20(m，2H)，2.58(m，2H)，2.86(m，2H)，3.01(m，1H)，3.19(m，3H)，4.35(m，2H)，5.52(m，1H)，5.61(s，2H)，6.95(d，1H)，7.4-7.69(m，8H)，7.79(m，2H)，7.86(m，2H)，8.59(s，1H)，8.74(d，1H)ppm。

制备24

5-[(1R)-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-({9-[4-({3-[环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮

使用与制备8中所述相同的方法自8-(苄氧基)-5-[(1R)-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-({9-[4-({3-[环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)乙基]喹啉-2(1H)-酮((制备23，60mg，0.066mmol)来制备标题化合物，得到澄清玻璃状物(产率为70％，38mg)。

LRMS：ESI m/z 813[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝0.05(s，3H)，0.35(s，3H)，1.16(s，9H)，1.35-1.62(m，22H)，1.68-1.85(m，6H)，1.85-2.02(m，2H)，2.22(m，2H)，2.63(m，2H)，2.90(m，2H)，3.04(m，1H)，3.23(m，3H)，4.34(m，2H)，5.47(m，1H)，6.87(d，1H)，7.19(d，1H)，7.42(m，2H)，7.53(m，2H)，7.85(m，2H)，8.58(s，1H)，8.70(d，1H)ppm。

制备25

4-({3-[羟基(二苯基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-甲酸苄基酯

将4-(溴甲基)哌啶-1-甲酸苄基酯(5g，16mmol)溶于二甲基甲酰胺(40ml)中且添加二苯基-(1H-[1，2，4]三唑-3-基)-甲醇(Tetrahedron：Asymmetry，8(9)，1491-1500；1997；3.35g，13.65mmol)，然后添加碳酸钾(3.69g，26.7mmol)。在70℃下搅拌18小时后，在真空中去除溶剂，且使残余物在乙酸乙酯(150ml)与水(150mL)之间分配。分离有机层，通过硫酸镁进行干燥，过滤且在真空中去除溶剂以提供白色固体状标题化合物(产率为81％，5.2g)。

¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝1.11-1.40(m，5H)，1.50-1.77(m，2H)，2.75(m，2H)，4.20(m，2H)，5.09(m，2H)，7.23-7.46(m，15H)，8.01(s，1H)ppm。

制备26

二苯基[1-(哌啶-4-基甲基)-1H-1，2，4-三唑-3-基]甲醇

将4-({3-[羟基(二苯基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-甲酸苄基酯(制备25，5.2g，16.78mmol)溶于乙醇(300ml)中且添加甲酸铵(6g)及氢氧化钯[20wt.％(干基)，于碳(湿)上](1g)。在回流下搅拌1小时后，将反应混合物冷却至室温且经由arbocel过滤。在真空中去除溶剂，且使残余物在二氯甲烷(500ml)与水(500mL)之间分配。分离水层且然后使用氢氧化钠水溶液(2N，200ml)实施碱化且使用二氯甲烷(500ml)进行萃取。然后通过硫酸镁干燥此有机层，过滤且在真空中去除溶剂。在乙腈中对粗制物质实施重结晶以提供白色固体状标题化合物(产率为51％，1.9g)。

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.56(m，2H)，1.86(m，2H)，2.35(m，1H)，2.99(m，2H)，3.40(m，2H)，4.38(m，2H)，7.28-7.47(m，11H)ppm。

制备27

{9-[4-({3-[羟基(二苯基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}亚胺基二甲酸二-叔-丁基酯

使用与制备5中所述相同的方法自二苯基[1-(哌啶-4-基甲基)-1H-1，2，4-三唑-3-基]甲醇(制备26，2.00g，5.740mmol)及(9-溴壬基)亚胺基二甲酸二-叔-丁基酯(US 04167167，2.42g，5.740mmol)来制备标题化合物，得到澄清油状物(产率为43％，1.7g)。

LRMS：APCI ESI m/z 691[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝1.18-1.35(m，11H)，1.41(m，3H)，1.49(s，18H)，1.57(m，4H)，1.94(m，3H)，2.38(m，2H)2.96(m，2H)3.54(m，2H)，4.00(m，2H)7.22-7.48(m，10H)，7.99(s，1H)ppm。

制备28

(1-{[1-(9-氨基壬基)哌啶-4-基]甲基}-1H-1，2，4-三唑-3-基)(二苯基)甲醇

将{9-[4-({3-[羟基(二苯基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}亚胺基二甲酸二-叔-丁基酯(制备27，1.7g，2.46mmol)溶于乙醇(30ml)且添加存于乙醚中的氯化氢(2M，30ml，60mmol)。在室温下搅拌18小时后，在真空中去除溶剂，且使残余物在二氯甲烷(200ml)与碳酸氢钠饱和水溶液(200mL)之间分配。分离有机层，通过硫酸镁进行干燥，过滤并在真空中去除溶剂。通过在硅胶上使用二氯甲烷∶甲醇∶880氨水(体积比为90∶10∶1至80∶20∶2)洗脱的柱色谱来纯化残余物以提供白色固体状标题化合物(产率为60％，725mg)。

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.30(m，11H)，1.40-1.62(m，7H)，1.93(m，3H)，2.28(m，2H)，2.61(m，2H)，2.94(m，2H)，4.09(m，2H)，7.20-7.36(m，10H)，8.36(s，1H)ppm。

制备29

8-(苄氧基)-5-[(1R)-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-({9-[4-({3-[羟基(二苯基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)乙基]喹啉-2(1H)-酮

将(1-{[1-(9-氨基壬基)哌啶-4-基]甲基}-1H-1，2，4-三唑-3-基)(二苯基)甲醇(制备28，710mg，1.45mmol)及8-(苄氧基)-5-[(1R)-2-溴-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基]喹啉-2(1H)-酮(WO 200509286，708mg，1.45mmol)溶于二氯甲烷(5ml)中且添加二甲亚砜(100μl)及二异丙基乙胺(253μl)。在95℃下于密封容器中搅拌48小时后，在真空中去除溶剂。通过在硅胶上使用二氯甲烷∶甲醇∶880氨水(体积比为90∶10∶1)洗脱的柱色谱来纯化残余物以提供澄清油状标题化合物(产率为38％，500mg)。

LRMS：APCI m/z 898[M+H]⁺

制备30

5-[(1R)-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-({9-[4-({3-[羟基(二苯基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮

使用与制备8中所述相同的方法自8-(苄氧基)-5-[(1R)-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-({9-[4-({3-[羟基(二苯基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)乙基]喹啉-2(1H)-酮(制备29，500mg，0.056mmol)来制备标题化合物，得到黄色玻璃状物(产率为59％，267mg)。

LRMS：ESI m/z 807[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝0.00(s，3H)，0.20(s，3H)，1.00(s，9H)，1.06-1.82(m，18H)，2.19(m，3H)，2.55(m，2H)，2.63(m，1H)，2.73(m，1H)，3.05(m，1H)，3.13(m，1H)，3.25(m，2H)，4.17(m，2H)，5.22(m，1H)，6.78(m，2H)，7.13-7.48(m，7H)，7.58(m，4H)，8.17(m，1H)，8.50(m，1H)ppm。

制备31

2-[2-(4-{2-[4-({3-[羟基(二苯基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮

使用与制备12中所述相同的方法自二苯基[1-(哌啶-4-基甲基)-1H-1，2，4-三唑-3-基]甲醇(制备26，778mg，2.23mmol)及2-{2-[4-(2-溴乙基)苯基]乙基}-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(制备11，800mg，2.23mmol)来制备标题化合物，得到白色固体(产率为71％，1.00g)。

LRMS：ESI m/z 627[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.24-2.03(m，7H)，2.54(m，2H)，2.75(m，2H)，2.97(m，4H)，3.88(m，2H)，3.99(m，2H)，7.10(m，2H)，7.20(m，2H)，7.29(m，7H)，7.44(m，3H)，7.70(m，2H)，7.82(m，2H)，7.99(s，1H)ppm。

制备32

{1-[(1-{2-[4-(2-氨基乙基)苯基]乙基}哌啶-4-基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-3-基}(二苯基)甲醇

使用与制备13中所述相同的方法自2-[2-(4-{2-[4-({3-[羟基(二苯基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(制备31，1.0g，1.59mmol)来制备标题化合物，得到无色油状物(产率为75％，790mg)。

LRMS：ESI m/z 497[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.37(m，2H)1.58(m，2H)1.93(m，1H)2.05(m，2H)2.54(m，2H)2.73(m，4H)2.83(m，2H)3.02(m，2H)4.09(d，2H)7.13(m，4H)7.26(m，6H)7.33(m，4H)，8.38(s，1H)ppm。

制备33

8-(苄氧基)-5-[(1R)-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[羟基(二苯基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]-氨基}乙基]喹啉-2(1H)-酮

使用与制备7中所述相同的方法自{1-[(1-{2-[4-(2-氨基乙基)苯基]乙基}哌啶-4-基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-3-基}(二苯基)甲醇(制备32，590mg，1.2mmol)及8-(苄氧基)-5-[(1R)-2-溴-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}乙基]喹啉-2(1H)-酮(WO 2005/09286，581mg，1.19mmol)来制备标题化合物，得到白色固体(产率为67％，740mg)。

LRMS：ESI m/z 903[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝-0.28(s，3H)，-0.04(s，3H)，0.76(s，9H)，1.38(m，2H)，1.59(m，2H)，1.92(m，1H)，2.05(m，2H)，2.54(m，2H)，2.69-2.94(m，8H)，3.03(m，2H)，4.11(m，2H)，5.15(m，1H)，5.32(s，2H)，6.65(d，1H)，7.08(m，4H)，7.16(m，2H)，7.27(m，6H)，7.35(m，7H)，7.50(m，2H)，8.40(s，2H)ppm。

制备34

5-[(1R)-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[羟基(二苯基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮

将8-(苄氧基)-5-[(1R)-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[羟基(二苯基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}乙基]喹啉-2(1H)-酮(制备33，740mg，0.82mmol)、氢氧化钯[20wt.％(干基)，于碳(湿)上](23mg，0.164mmol)及甲基环己二烯(231mg，2.46mmol)溶于MeOH(20ml)中。在50℃下搅拌18小时后，再次添加甲基环己二烯(115.5mg，1.23mmol)且在50℃下再持续搅拌18小时。冷却反应混合物，经由arbocel

过滤且在真空中去除溶剂以提供黄色固体状标题化合物(产率为87％，580mg)。

LRMS：ESI m/z 814[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝-0.28(s，3H)，-0.04(s，3H)，0.77(s，9H)，1.38(m，2H)，1.60(m，2H)，1.92(m，1H)，2.07(m，2H)，2.57(m，2H)，2.70-2.96(m，8H)，3.05(m，2H)，4.10(m，2H)，5.14(m，1H)，6.59(d，1H)，6.92(d，1H)，7.08(m，4H)，7.15(m，1H)，7.25(m，6H)，7.35(m，4H)，8.33(d，1H)，8.40(s，1H)ppm。

制备35

甲磺酸2-{4-[2-(1，3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-乙基]-苯基}-乙基酯

将存于甲基乙基酮(315mL)中的2-{2-[4-(2-羟基-乙基)苯基]-乙基}-异吲哚-1，3-二酮(制备10，21.0g，71.25mmol)溶液冷却至0℃。添加三乙胺(14.9mL，106.87mmol)然后逐滴添加甲磺酰氯(6.07mL，78.37mmol)。在0-4℃下搅拌反应物1小时且然后将其加热至室温。添加碳酸钾水溶液(1M，210mL)且搅拌混合物。分离有机层及水层且使用甲基乙基酮(50mL)对水层进行再次萃取。通过蒸馏将合并的有机层浓缩至40mL。将叔-丁基甲基醚(300mL)缓慢添加至热溶液中，以使得出现结晶。将混合物冷却至室温且然后搅拌72小时。通过过滤去除固体且使用叔-丁基甲基醚(3×25mL)进行洗涤。将固体在45℃下于真空中干燥4小时以产生浅褐色固体状标题化合物(产率为92％，24.6g)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝2.82(s，3H)，2.96-3.02(m，4H)，3.89-3.93(t，2H)，4.37-4.40(t，2H)，7.13-7.23(2xd，4H)，7.70-7.72(dd，2H)，7.81-7.83(dd，2H)ppm。

制备36

(2R)-环己基-羟基-苯基-乙酸

向存于乙腈(810ml)及水(65ml)中的D-酪氨酸甲基酯(90.0g，460mmol)浆液中添加外消旋2-环己基-2-羟基-2-苯乙酸(216.0g，921mmol)。将混合物加热至回流保持1小时且然后冷却至室温过夜。将混合物进一步冷却至4℃并保持4小时且然后过滤，使用冷乙腈(400ml)洗涤以得到白色固体(169.9g)。将此固体在甲基叔-丁基醚(1.35L)及0.5M盐酸水溶液(765ml，1eq)之间分配。分离有机层，使用0.5M盐酸水溶液(380ml，0.5eq)洗涤，通过硫酸钠进行干燥，过滤且在真空中去除溶剂以提供84.5g白色固体状标题化合物。

LRMS：APCI ESI m/z 233[M-H]^-

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ＝0.95-1.14(m，4H)，1.19-1.29(m，1H)，1.32-1.42(m，1H)，1.49-1.63(m，3H)，1.69-1.78(m，1H)，2.11-2.19(m，1H)，7.21-7.25(m，1H)，7.30-7.34(m，2H)，7.57-7.60(m，2H)ppm。

实例

实例1

5-[(1R)-2-({9-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮

将5-[(1R)-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-({9-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮(制备8，13.06g，16.06mmol)溶于甲醇(430ml)中且添加氟化铵(2.97g，80.3mmol)。在40℃下搅拌18小时后，在真空中去除溶剂且使残余物在二氯甲烷/甲醇(950ml/50ml)与碳酸氢钠饱和水溶液(500mL)之间分配。分离出有机层，且使用二氯甲烷/甲醇(450ml/50ml)进一步萃取水层。通过硫酸镁干燥合并的有机层，过滤且在真空中去除溶剂。通过在硅胶上使用二氯甲烷∶甲醇∶880氨水(体积比为90∶10∶1)洗脱的柱色谱来纯化残余物以提供黄色泡沫状标题化合物(产率为72.3％，8.12g)。

LRMS：ESI m/z 699[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝：1.05-1.77(m，28H)，1.98(m，3H)，2.35(m，3H)2.75(m，2H)，2.95(m，4H)，4.09(m，2H)，5.24(m，1H)，6.65(d，1H)，6.95(d，1H)，7.15-7.27(m，4H)，7.60(m，2H)，8.33(s，1H)，8.38(d，1H)ppm。

实例1a

5-[(1R)-2-({9-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮；萘-1，5-二磺酸盐

将5-[(1R)-2-({9-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮(实例1，2.0g，2.86mmol)溶于甲醇(15ml)中，且逐滴添加存于水(3ml)中的萘-1，5-二磺酸(825.0mg，2.86mmol)溶液。将该混合物在室温下搅拌过夜。通过过滤获取所得固体且在真空中干燥以产生2.03g白色固体。使用甲醇∶水(体积比为70∶30，1ml)处理50mg此物质且将所得悬浮液加热至70℃且然后经24小时缓慢冷却至20℃。通过过滤回收固体，使用水洗涤且在真空中干燥以产生19mg白色结晶固体状标题化合物。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d)δ＝：0.95-1.70(m，28H)，1.96-2.29(m，3H)，2.71-3.13(m，7H)，3.42(m，2H)，4.07(m，2H)，5.30(m，1H)，6.58(d，1H)，6.95(d，1H)，7.13(m，2H)，7.23(m，2H)，7.41(m，2H)，7.56(m，2H)，7.92(m，2H)，8.17(d，1H)，8.42(s，1H)，8.89(d，2H)ppm。

实例2

5-[(1R)-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮

使用与实例1中所述相同的方法自5-[(1R)-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮(制备15，2.30g，2.81mmol)来制备标题化合物，得到黄色固体(产率为77％，1.40g)。

LRMS：ESI m/z 705[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.08-1.48(m，9H)，1.48-1.81(m，5H)，1.94(m，1H)，2.08(m，2H)，2.38(m，1H)，2.54(m，2H)，2.66-2.97(m，8H)，3.04(m，2H)，4.07(d，2H)，5.18(m，1H)，6.61(d，1H)，6.92(d，1H)，7.07(m，4H)，7.15(m，2H)，7.25(m，2H)，7.56(d，2H)，8.31(m，2H)ppm。

实例2a

5-[(1R)-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮；萘-1，5-二磺酸盐

将5-[(1R)-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮(实例2，935mg，1.33mmol)溶于甲醇(10mL)中。添加存于甲醇(5mL)中的1，5-萘二磺酸四水合物(478mg，1.33mmol)溶液且通过添加水(5mL)及加热将所形成的沉淀物再次溶解。将所得溶液在真空中蒸发、再悬浮于甲醇(50mL)中且加热至回流保持30秒。自残余物中倾倒出上清液，且将残余物再悬浮于甲醇(50mL)中且在搅拌及回流下加热4天。通过过滤收集所得沉淀物且在真空下干燥以提供990mg无色结晶固体状标题化合物。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ＝0.94-1.49(m，8H)，1.50-1.74(m，6H)，1.99-2.12(m，1H)，2.19-2.27(m，1H)，2.83-3.01(m，6H)，3.04-3.24(m，6H)，3.49-3.59(m，2H)，4.05-4.11(d，2H)，5.07(s，1H)，5.30-5.36(m，1H)，6.14-6.19(d，1H)，6.57-6.59(d，1H)，6.97-6.99(d，1H)，7.12-7.19(m，6H)，7.24-7.28(t，2H)，7.39-7.43(t，2H)，7.56-7.58(d，2H)，7.94-7.96(d，2H)，8.15-8.18(d，1H)，8.45(s，1H)，8.59-8.74(bm，2H)，8.88-8.90(d，2H)，9.04-9.19(bm，1H)，10.41(s，1H)，10.45(s，1H)ppm。

由上述方法制得的结晶形式(形式1)也具有图1/1的相应粉末X射线衍射图案中所示的特征。主要特征峰位于12.7、18.1、21.0、22.2及23.6度2-θ±0.1度2-θ处且进一步示于下表1中。

表1-实例2a的特征PXRD峰

角度(°2θ)	强度％	角度(°2θ)	强度％	角度(°2θ)	强度％
						3.166	14.4	15.284	30.5	22.165	84.3
6.362	14.4	16.044	26.5	23.557	96.6
						9.533	15.9	16.981	55.5	24.709	45.6
10.568	10.4	17.206	54.3	25.052	43.3
						10.991	13.2	17.634	46.5	25.627	61.7
11.698	25.4	18.066	100	26.362	49.2
						11.976	18.6	19.147	46.9	27.234	41.6
12.729	81.7	19.459	62.3	30.136	25.1
						13.487	21.8	20.563	46.6	30.626	24.3
14.306	15.9	20.962	80.6	31.097	22.7
						15.03	26.6	21.204	70.2	35.593	18.5

实例2b

5-[(1R)-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮；琥珀酸盐

将5-[(1R)-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮(实例2，50mg，0.07mmol)溶于甲醇(4mL)中。添加存于甲醇(1mL)中的琥珀酸(8.4mg，0.07mmol)溶液且在静置过夜后蒸发所得浑浊溶液。将所得胶状物在加热下再溶解于乙醇(2.5mL)及水(2.5mL)中且然后在搅拌下冷却至室温过夜。通过过滤收集所得沉淀物且在真空下干燥以提供28mg无色结晶固体状标题化合物。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ＝0.97-1.85(m，15H)，1.88-1.93(m，2H)，2.19-2.25(m，1H)，2.34(s，4H)，2.44-2.47(m，2H)，2.64-2.68(m，2H)，2.71-2.75(m，2H)，2.84-2.93(m，6H)，4.02(d，2H)，5.10-5.13(m，1H)，6.52(d，1H)，6.93(d，1H)，7.07-7.16(m，6H)，7.25(t，2H)，7.56(d，2H)，8.15(d，1H)，8.38(s，1H)ppm。

实例2c

5-[(1R)-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮；富马酸盐

将5-[(1R)-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮(实例2，50mg，0.07mmol)溶于甲醇(4mL)中。添加存于甲醇(1mL)中的富马酸(8.2mg，0.07mmol)溶液且在静置过夜后蒸发所得浑浊溶液。将所得胶状物在加热下再溶解于乙醇(2.5mL)及水(2.5mL)中且然后在搅拌下冷却至室温过夜。通过过滤收集所得沉淀物且在真空下干燥以提供38mg无色结晶固体状标题化合物。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ＝0.99-1.84(m，15H)，1.91-1.98(m，2H)，2.18-2.24(m，1H)，2.46-2.49(m，2H)，2.65-2.69(m，2H)，2.78-2.82(m，2H)，2.90-3.02(m，6H)，4.03(d，2H)，5.19-5.22(m，1H)，6.51(m，3H)，6.95(d，1H)，7.09-7.16(m，6H)，7.23-7.27(m，2H)，7.56(d，2H)，8.18(d，1H)，8.39(s，1H)ppm。

实例3

5-[(1R)-2-({9-[4-({3-[环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮

使用与实例1中所述相同的方法自5-[(1R)-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-({9-[4-({3-[环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮(制备24，18mg，0.022mmol)来制备标题化合物，得到澄清玻璃状物(产率为65％，10mg)。

LRMS：APCI ESI m/z 699[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝：1.07-1.76(m，30H)，1.98(m，2H)，2.36(m，2H)，2.75(m，2H)，2.95(m，4H)，4.07(m，2H)，5.24(m，1H)，6.65(d，1H)，6.95(d，1H)，7.12-7.28(m，4H)，7.58(m，2H)，8.31(s，1H)，8.37(d，1H)ppm。

实例4

8-羟基-5-[(1R)-1-羟基-2-({9-[4-({3-[羟基(二苯基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)乙基]喹啉-2(1H)-酮

使用与实例1中所述相同的方法自5-[(1R)-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-({9-[4-({3-[羟基(二苯基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮(制备30，260mg，0.322mmol)来制备标题化合物，得到黄色玻璃状物(产率为49％，110mg)。

LRMS：APCI ESI m/z 693[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝：1.24-1.39(m，12H)，1.42-1.62(m，6H)，1.87-2.03(m，3H)，2.34(m，2H)，2.74(m，2H)，2.93(m，4H)，4.07(m，2H)，5.24(m，1H)，6.63(d，1H)，6.95(d，1H)，7.17-7.30(m，7H)，7.30-7.37(m，4H)，8.35(m，2H)ppm。

实例5

8-羟基-5-[(1R)-1-羟基-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[羟基(二苯基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}乙基]喹啉-2(1H)-酮

使用与实例1中所述相同的方法自5-[(1R)-1-{[叔-丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[羟基(二苯基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮(制备34，580mg，0.71mmol)来制备标题化合物，得到黄色固体(产率为60％，300mg)。

LRMS：APCI ESI m/z 699[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.37(m，2H)，1.58(m，2H)，1.91(m，1H)，2.07(m，2H)，2.54(m，2H)，2.82(m，8H)，3.04(m，2H)，4.11(m，2H)，5.18(m，1H)，6.62(d，1H)，6.92(d，1H)，7.05(m，4H)，7.15(m，1H)，7.25(m，6H)，7.34(m，4H)，8.33(d，1H)，8.38(s，1H)ppm。

人类重组M₃毒蕈碱受体的结合亲和力评价

膜制备

将来自重组表达人类毒蕈碱M₃受体的CHO(中国仓鼠卵巢)细胞的细胞颗粒在20mM HEPES(pH 7.4)中匀质化且在4℃下以48000×g离心20min。将该颗粒再次悬浮于缓冲液中且重复匀质化及离心步骤。将所得颗粒再次悬浮于1ml缓冲液/1ml初始压紧细胞体积中且重复匀质化步骤。对悬浮液实施蛋白质评价且将约1mg/ml的1ml等份试样在-80℃下冷冻。

hM₃竞争结合分析方案

将膜(5μg/孔)与³H-NMS(浓度为5×K_D)加/减测试化合物在RT(室温)下于1ml聚苯乙烯96-孔深孔板中一起培育24hr。最终分析体积为200μl，包括：20μl加/减测试化合物；20μl ³H-NMS(Perkin Elmer NEN 636)及160μl膜溶液。使用0.1％DMSO来界定总结合；使用1μM阿托品(Atropine)来界定非特异性结合。分析缓冲液系20mM Hepes(pH 7.4)。

添加所有分析组份后，立即覆盖板且在室温下于摇动下培育24hr。使用Packard filtermate收集器经由使用0.5％聚乙烯亚胺预浸渍的GF/B Unifilter板通过快速过滤来终止分析，然后使用3×1ml 4℃分析缓冲液洗涤过滤板。将过滤板在45℃下干燥1小时。密封过滤板底且添加50μl/孔的Microscint‘0’，使用Topseal密封板顶。90分钟后，在NXT Topcount上对板进行读数(每孔的读数时间为1分钟)。

所得数据表示为特异性结合的百分比(特异性结合＝总结合-非特异性结合)。绘制％特异性结合对测试化合物浓度的曲线以使用自有数据分析程序自S形曲线确定IC₅₀。通过应用Cheng-Prussoff等式将IC₅₀值校正为Ki值：

Cheng-Prussoff等式：

$K_i=\frac{{\mathrm{IC}}_{50}}{1+\left[L\right]/K_D}$

其中IC₅₀为抑制50％特异性放射性配体结合的未标记药物的浓度。[L]为游离放射性配体浓度且K_D及K_i为放射性配体药物及未标记药物各自的平衡解离常数。

在表达hβ₂受体的CHO细胞中使用全细胞cAMP分析的激动剂效力及功效的功能评价

细胞培养

将重组表达人类肾上腺素能β₂受体的CHO(中国仓鼠卵巢细胞)维持于由F12:DMEM(Gibco 21331-020)组成的生长培养基(含有10％胎牛血清(FBS：Sigma F4135)、10μg/ml嘌呤霉素(Sigma P8833)、0.1mg/ml遗传霉素G418(Sigma G7034)及2mM L-谷氨酰胺(Sigma G7513))中。将细胞在37℃下于含有5％CO₂的气氛中保持于无菌条件下。

hβ₂cAMP分析方案

在细胞达到80-90％铺满时，使用胰蛋白酶0.25％(Sigma T4049)与细胞在37℃下于含有5％CO₂的气氛中一起培育5min来收集细胞以用于分析。在温热生长培养基(上述组合物)中收集已分离细胞，且将其重新悬浮于分析培养基(F12:DMEM(Gibco 21331-020)，含有1％胎牛血清(FBS：Sigma F4135)及2mM L-谷氨酰胺(Sigma G7513))中以得到0.25×10⁶个细胞/ml的活细胞浓度。将100μl此悬浮液添加至经组织培养液处理的96孔view-plate(PerkinElmer 6005181)的各孔中且将该板在37℃下于含有5％CO₂的气氛中培育过夜。次日，使用磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤细胞(4×200μl，Skatron Skanstacker 300)。然后将板轻轻吸干且使用50μl PBS加0.5mM异丁基甲基黄嘌呤(IBMX)(Sigma I5879)代替培养基，然后将其送回培养箱中保持30min。重复PBS板洗涤程序，然后添加50μl PBS加0.5mM IBMX及50μl PBS加2％DMSO且将板送回培养箱中保持30min。在含有2％DMSO的PBS中准备各浓度范围的测试化合物。重复PBS板洗涤程序，且然后向分析板中添加50μl PBS加0.5mM IBMX，然后向适宜孔中添加50μl每一测试浓度的化合物。将50μl/孔的2％DMSO或200nM福莫特罗添加至对照孔中，得到最终分析浓度为1％DMSO或100nM的福莫特罗。将板送回至培养箱并再保持30min。在培育时间结束时，将PBS板洗涤程序重复如上所述的最终时间。将板轻轻吸干且添加30μl/孔PBS，然后添加40μl/孔cAMP II ED/基质混合物及40μl/孔cAMP II EA-Ab/溶菌混合物(DiscoverX 90-0034-03)。然后将板在室温下于黑暗中培育最少4小时。使用Fusion板读数器对板进行读数(荧光方案，每孔读数1秒钟)。绘制浓度作用曲线且使用利用自有数据分析程序产生的4参数S形拟合来确定EC₅₀及E_max值。在每一分析中使用福莫特罗及沙美特罗作为参照标准。

据此发现，在上述分析中所测试的本发明的式(1)化合物显示hβ₂受体激动剂活性及hM₃受体拮抗剂活性，如下表中所示：

Claims (15)

1.一种通式(1)的化合物，

其中：

A选自：

其中*代表A至具有羟基的碳的结合点；

X为-(CH₂)_m-，其中m为介于包括7至包括12之间的整数，或具有下式：

Y是选自

其中**及***代表结合点，**与X连接；

n为0或1；

R¹选自环戊基、环己基、苯基、呋喃基及噻吩基；及

R²选自苯基、呋喃基及噻吩基；

或其药学上可接受的盐、或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物。

2.如权利要求1的化合物，或其药学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物，其中A具有下式：

其中*代表A至具有羟基的碳的结合点。

3.如权利要求1或2的化合物，或其药学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物，其中X为-(CH₂)₉-或具有下式：

4.如权利要求1-3中任一项的化合物，或其药学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物，其中X具有下式：

其中**及***代表结合点，**与X连接。

5.如权利要求1-4中任一项的化合物，或其药学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物，其中R¹为苯基或环己基。

6.如权利要求1-5中任一项的化合物，或其药学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物，其中R²为苯基。

7.如权利要求1-6中任一项的化合物，或其药学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物，其中n为1。

8.如权利要求1的化合物，或其药学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物，其中：

A具有下式：

其中*代表A至具有羟基的碳的结合点；

X为-(CH₂)₉-或具有下式：

Y具有下式：

其中**及***代表结合点，**与X连接；

n为1；

R¹为环己基或苯基，且R²为苯基。

9.如权利要求1的化合物，其选自由以下组成的组：

5-[(1R)-2-({9-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮，

5-[(1R)-2-({9-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮；萘-1，5-二磺酸盐，

5-[(1R)-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮，

5-[(1R)-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮萘-1，5-二磺酸盐，

5-[(1R)-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮琥珀酸盐，

5-[(1R)-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮富马酸盐，

5-[(1R)-2-({9-[4-({3-[环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮，

8-羟基-5-[(1R)-1-羟基-2-({9-[4-({3-[羟基(二苯基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]壬基}氨基)乙基]喹啉-2(1H)-酮，及

8-羟基-5-[(1R)-1-羟基-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[羟基(二苯基)甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}乙基]喹啉-2(1H)-酮。

10.如权利要求1的化合物，其为5-[(1R)-2-{[2-(4-{2-[4-({3-[(R)-环己基(羟基)苯甲基]-1H-1，2，4-三唑-1-基}甲基)哌啶-1-基]乙基}苯基)乙基]氨基}-1-羟乙基]-8-羟基喹啉-2(1H)-酮萘-1，5-二磺酸盐。

11.一种药物组合物，其包括至少有效量的如权利要求1至10中任一项的式(1)化合物或其药学上可接受的盐或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物。

12.如权利要求1-10中任一项的式(1)化合物或其药学上可接受的盐或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物，其用作药物。

13.如权利要求1-10中任一项的式(1)化合物或其药学上可接受的盐或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物，其用于治疗选自由以下组成的组的疾病、病症、及病状：

任何类型、病源学或发病机制的哮喘，尤其选自由以下组成的组的哮喘：异位性哮喘、非异位性哮喘、过敏性哮喘、异位性支气管性IgE介导的哮喘、支气管哮喘、特发性哮喘、真哮喘、病理生理学紊乱所致的内源性哮喘、环境因子所致的外源性哮喘、未知或隐性原因的特发性哮喘、非异位性哮喘、支气管炎性哮喘、肺气肿性哮喘、运动诱发性哮喘、过敏原诱发性哮喘、冷空气诱发性哮喘、职业性哮喘、细菌、真菌、原生动物或病毒感染所致的感染性哮喘、非过敏性哮喘、初发哮喘、喘鸣婴儿综合征及细支气管炎(bronchiolytis)；

慢性或急性支气管收缩、慢性支气管炎、小气道阻塞及肺气肿；

任何类型、病源学或发病机制的阻塞性或炎症性气道疾病，尤其选自由下列组成的组的阻塞性或炎症性气道疾病：慢性嗜酸粒细胞性肺炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、包含慢性支气管炎的COPD、与COPD相关或不相关肺气肿或呼吸困难、特征在于不可逆的进行性气道阻塞的COPD、成人呼吸窘迫综合征(ARDS)、其他药物治疗所致的气道过度反应性加重、及与肺高血压相关的气道疾病；

任何类型、病源学或发病机制的支气管炎，尤其选自由以下组成的组的支气管炎：急性支气管炎、急性喉气管支气管炎、花生仁吸入性支气管炎、卡他性支气管炎、克鲁布性(croupus)支气管炎、干性支气管炎、传染性哮喘性支气管炎、增生性支气管炎、葡萄球菌性或链球菌性支气管炎及肺泡性支气管炎；

急性肺损伤；及

任何类型、病源学或发病机制的支气管扩张症，尤其选自由以下组成的组的支气管扩张症：柱状支气管扩张症、袋状支气管扩张症(sacculated bronchiectasis)、梭形支气管扩张症、细支气管扩张症、囊状支气管扩张症(cystic bronchiectasis)、干性支气管扩张症及滤泡性支气管扩张症。

14.一种如权利要求1至10中任一项的化合物、或其药学上可接受的盐、或所述化合物或盐的药学上可接受的溶剂化物与选自以下的其他治疗剂的组合：

(a)5-脂肪氧合酶(5-LO)抑制剂或5-脂肪氧合酶活化蛋白(FLAP)拮抗剂；

(b)白三烯拮抗剂(LTRAs)，包含LTB₄、LTC₄、LTD₄及LTE₄的拮抗剂；

(c)组胺受体拮抗剂，包含H1及H3拮抗剂；

(d)用于解充血药用途的α₁-及α₂-肾上腺素受体激动剂血管收缩拟交感神经药剂；

(e)PDE抑制剂，例如PDE3、PDE4及PDE5抑制剂；

(f)β2受体激动剂；

(g)蕈毒碱M3受体拮抗剂或抗胆碱能

药剂；

(h)作为β₂激动剂及毒蕈碱M3受体拮抗剂的双重活性化合物；

(i)茶碱(Theophylline)；

(j)色甘酸钠；

(k)COX抑制剂，非选择性及选择性COX-1或COX-2抑制剂(NSAIDs)；

(l)前列腺素受体拮抗剂及前列腺素合成酶抑制剂；

(m)口服及吸入式糖皮质类固醇；

(n)肾上腺皮质激素受体的解离激动剂(DAGR)；

(o)对内源性炎症实体具有活性的单克隆抗体；

(p)抗肿瘤坏死因子(抗-TNF-α)药剂；

(q)粘附分子抑制剂，包含VLA-4拮抗剂；

(r)激肽-B₁-及B₂-受体拮抗剂；

(s)免疫抑制剂，包含IgE路径抑制剂及环孢菌素；

(t)基质金属蛋白酶(MMPs)的抑制剂；

(u)速激肽NK₁、NK₂及NK₃受体拮抗剂；

(v)蛋白酶抑制剂，例如弹性蛋白酶抑制剂；

(w)腺苷A2a受体激动剂及A2b拮抗剂；

(x)尿激酶抑制剂；

(y)作用于多巴胺受体的化合物，例如D2激动剂；

(z)NFκβ路径调节剂，例如IKK抑制剂；

(aa)细胞因子信号传导路径的调节剂，例如p38 MAP激酶、PI3激酶、JAK激酶、syk激酶、EGFR或MK-2；

(bb)可归类为粘液溶解药或镇咳药的药剂；

(cc)增强对所吸入皮质类固醇反应的药剂；

(dd)有效抵抗可以移生呼吸道的微生物的抗生素及抗病毒剂；

(ee)HDAC抑制剂；

(ff)CXCR2拮抗剂；

(gg)整合素拮抗剂；

(hh)趋化因子；

(ii)上皮钠通道(ENaC)阻断剂或上皮钠通道(ENaC)抑制剂；

(jj)P2Y2激动剂及其他核苷酸受体激动剂；

(kk)血栓烷抑制剂；

(ll)PGD₂合成及PGD₂受体的抑制剂(DP1及DP2/CRTH2)；

(mm)烟酸；及

(nn)粘附因子，包含VLAM、ICAM、及ELAM。

15.一种下式的化合物：

其中p及q独立地选自1或2，且n、R¹及R²如权利要求1中所定义。