CN102099334A - 作为蕈毒碱受体拮抗剂的新颖化合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及式(I)的化合物

Description

作为蕈毒碱受体拮抗剂的新颖化合物

【技术领域】

本发明涉及通式(I)化合物：

其中R¹至R⁵及X具有以下指示的含义，且涉及用于制备所述衍生物的方法及中间体、含有所述衍生物的组合物及所述衍生物的用途。

【现有技术】

胆碱能蕈毒碱受体为G蛋白偶合受体总科的成员且进一步分成5个亚型M₁至M₅。蕈毒碱受体亚型广泛且有差别地表达于身体中。已克隆所有5个亚型的基因且已在动物及人类组织中广泛地在药理学上表征这些受体中的M₁、M₂及M₃受体。M₁受体表达于脑(皮层及海马区)、腺中且表达于交感神经及副交感神经的神经节中。M₂受体表达于心脏、后脑、平滑肌中且表达于自主神经系统的突触中。M₃受体表达于脑、腺及平滑肌中。在气管中，对M₃受体的刺激引起气管平滑肌收缩，导致支气管收缩，而在唾液腺中M₃受体刺激可增加流体及粘液分泌，导致流涎增加。表达于平滑肌上的M₂受体被理解为促收缩性的，而突触前M₂受体可调节自副交感神经释放乙酰胆碱。对表达于心脏中的M₂受体的刺激产生心跳徐缓。

短效及长效蕈毒碱拮抗剂可用于控制气喘及COPD；这些拮抗剂包括短效药剂

(异丙托溴铵(ipratropium bromide))及

(氧托溴铵(oxitropium bromide))及长效药剂

(噻托溴铵(tiotropium bromide))。在吸入投与之后，这些化合物产生支气管扩张。除改良肺活量值的外，在慢性阻塞性肺病(COPD)中使用抗蕈毒碱也与健康状态及生活质量计分的改良有关。

由于蕈毒碱受体在身体内的广泛分布，大量系统性暴露于蕈毒碱拮抗剂与诸如以下的效应有关：口腔干燥、便秘、瞳孔放大、尿潴留(都主要经由阻断M₃受体来介导)及心跳过速(由阻断M₂受体来介导)。在吸入投与治疗剂量的当前临床上所用的非选择性蕈毒碱拮抗剂之后，通常报导的副作用为口腔干燥且虽然此副作用经报导为在强度方面仅为轻度的，但是其确实限制特定吸入药剂的剂量。

因此，仍需例如在效能、药物动力学或作用持续时间方面及尤其对于通过吸入途径投与而言具有合适药理学概况的M₃受体拮抗剂。另外，因为蕈毒碱受体拮抗剂适合于治疗慢性疾病(诸如气喘或COPD)，所以其可能至少有时与其他化合物共投与。因此，所述化合物优选具有与共投与的化合物相互作用的较低可能性。在此情形中，本发明涉及新颖M₃受体拮抗剂。

【发明内容】

本发明涉及式(I)化合物

或其药物学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药物学上可接受的溶剂化物，其中：

X选自-CH₂-、-C(＝O)CH₂-、-C(＝O)-；

R¹为H或甲基或当X为-CH₂-时，则R¹也可表示下式基团：

其中R⁶、R⁷、R⁸及R⁹中之一为OH，R⁶、R⁷、R⁸及R⁹中之一为卤素，R⁶、R⁷、R⁸及R⁹中之一为H，且R⁶、R⁷、R⁸及R⁹中之一选自H或卤素；

R²、R³、R⁴及R⁵中之一为OH，R²、R³、R⁴及R⁵中之一为H，R²、R³、R⁴及R⁵中之一为卤素，且R²、R³、R⁴及R⁵中之一为H或卤素，或者当X为-C(＝O)CH₂-且R¹为甲基时，则R⁴也可为OH，而R²、R³及R⁵为H。

在上文通式(I)中，术语“卤素”表示选自由氟、氯、溴及碘组成的组的卤素原子。优选，卤素为氟或氯。

本发明的优选化合物为：

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-氯-4-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-氟-3-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-氯-5-氟-2-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[2-(3-氯-4-羟基-苯基)-乙酰氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-氯-3-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-氟-4-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(4-氟-3-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-氟-2-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(5-氟-2-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3，5-二氯-2-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(4-氯-2-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-{[2-(3-氯-4-羟基-苯基)-乙酰基]-甲基-氨基}-壬基)-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4-氟-3-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氯-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-{[2-(3-氟-4-羟基-苯基)-乙酰基]-甲基-氨基}-壬基)-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(4-氯-3-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-氟-4-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3，5-二氯-4-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3，5-二氯-4-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯萘-1，5-二磺酸盐；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2，3-二氟-4-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-5-氯-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(4-羟基-3，5-二氯-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-4-氟-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3，5-二氟-4-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-4，5-二氯-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-3，5-二氟-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-3-氟-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-3，5-二氯-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(5-氯-2-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-4-氯-5-氟-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-氯-4-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-5-氟-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-羟基-4-氟-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2，4-二氯-3-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(4-羟基-3-氟-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[双-(2-氯-3-羟基-苄基)-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氟-2-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4，5-二氯-2-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4-氟-3-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4-氯-5-氟-2-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氯-4-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氟-4-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(5-氯-2-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(2-氯-3-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3，5-二氯-4-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(2-氟-3-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3，5-二氟-4-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(2，4-二氯-3-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3，5-二氟-2-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3，5-二氯-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氯-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3，4-二氟-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氟-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4-氯-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4-氟-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4-氯-3-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(2，3-二氟-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-{[2-(3-羟基-苯基)-乙酰基]-甲基-氨基}-壬基)-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(5-氟-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(5-氯-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯及

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氟-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

或其药物学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药物学上可接受的溶剂化物。

本发明的更优选化合物为：

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-氯-4-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-氟-3-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-氯-5-氟-2-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[2-(3-氯-4-羟基-苯基)-乙酰氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-氯-3-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-氟-4-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(4-氟-3-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-{[2-(3-氯-4-羟基-苯基)-乙酰基]-甲基-氨基}-壬基)-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4-氟-3-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氯-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-{[2-(3-氟-4-羟基-苯基)-乙酰基]-甲基-氨基}-壬基)-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(4-氯-3-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-氟-4-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3，5-二氯-4-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2，3-二氟-4-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3，5-二氟-4-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-3，5-二氟-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-3，5-二氯-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-氯-4-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-羟基-4-氟-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2，4-二氯-3-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[双-(2-氯-3-羟基-苄基)-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4，5-二氯-2-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4-氟-3-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(2-氯-3-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3，5-二氯-4-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3，5-二氟-4-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4-氯-3-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(2，3-二氟-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-{[2-(3-羟基-苯基)-乙酰基]-甲基-氨基}-壬基)-哌啶-4-基酯；及

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氟-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

或其药物学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药物学上可接受的溶剂化物。

本发明的进一步更优选化合物为：

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-{[2-(3-氯-4-羟基-苯基)-乙酰基]-甲基-氨基}-壬基)-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氯-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2，4-二氯-3-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(2-氯-3-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(2，3-二氟-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-{[2-(3-羟基-苯基)-乙酰基]-甲基-氨基}-壬基)-哌啶-4-基酯；及

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氟-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

或其药物学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药物学上可接受的溶剂化物。

最优选化合物为联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-{[2-(3-羟基-苯基)-乙酰基]-甲基-氨基}-壬基)-哌啶-4-基酯；及联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氟-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯，或其药物学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药物学上可接受的溶剂化物。

式(I)化合物可以多种方式制备。以下途径说明一种制备这些化合物的该方式；本领域技术人员了解其他途径可同样地可行。

流程1

其中：

R¹⁰为甲基或适合保护基，诸如叔丁氧基羰基；

R¹¹为适合保护基，诸如叔丁氧基羰基；

R¹⁰与R¹¹可一起形成适合保护基，诸如邻苯二甲酰亚胺；

R¹²为H或甲基；

n＝0或1；

LG表示适合离去基，诸如溴离子或甲磺酸根；且

除非另外陈述，否则R¹至R⁹及X如对于式(I)化合物所定义。

式(II)化合物可如US 2006/205779中所述制备。

其中LG为溴离子且R¹⁰及R¹¹两者皆为叔丁氧基羰基的式(III)化合物可如WO 2007/107828中所述制备。

其中LG为甲磺酸根，R¹⁰为甲基且R¹¹为叔丁氧基羰基的式(III)化合物可如流程2中所述制备：

流程2

其中R¹⁰为甲基，R¹¹为叔丁氧基羰基且LG为甲磺酸根。

式(VIII)化合物为可购得的。

式(IX)化合物为可购得的。

式(X)化合物可自式(VIII)及(IX)化合物通过溴离子置换来制备(方法步骤(vi))。典型条件包含在室温下使化合物(VIII)与过量化合物(IX)(甲胺，乙醇中的33％溶液)反应18小时。

式(XI)化合物可自式(X)化合物通过Boc保护来制备(方法步骤(vii))。典型条件包含在0℃至室温下、在适合溶剂(诸如二氯甲烷)中使化合物(X)与Boc酸酐反应4小时。

式(III)化合物可自式(XI)化合物通过甲磺酰化来制备(方法步骤(viii))。典型条件包含在5℃至室温下、在适合溶剂(诸如二氯甲烷)中使化合物(XI)与甲磺酰氯及适合碱(诸如三乙胺)反应1小时。

其中LG为溴离子且R¹⁰为甲基或其中LG为甲磺酸根且R¹⁰为叔丁氧基羰基或其中LG为甲磺酸根或溴离子且R¹⁰及R¹¹一起为邻苯二甲酰亚胺的式(III)化合物可使用与流程2中所述类似的程序制备。

式(IV)化合物可自式(II)化合物及式(III)化合物通过烷基化来制备(方法步骤(i))。典型条件包含在60-70℃之间的温度下、在适合溶剂(诸如二甲基甲酰胺)中使化合物(II)与化合物(III)及适合碱(诸如三乙胺、碳酸钠或碳酸钾)反应18-48小时。

式(V)化合物可自式(IV)化合物、使用如T.W.Greene及P.Wutz的“Protecting Groups in Organic Synthesis”中描述的标准方法通过去保护来制备(方法步骤(ii))。当R¹⁰及R¹¹或R¹¹为叔丁氧基羰基时，典型条件包含在室温下、在适合溶剂(诸如二

烷)中使化合物(IV)与盐酸反应18小时。当R¹⁰及R¹¹表示邻苯二甲酰亚胺时，典型条件包含在90℃下、在适合溶剂(诸如乙醇)中使化合物(IV)与水合肼反应3小时。

式(VI)化合物为可购得的，在文献中已知的或其可由本领域技术人员根据标准程序容易地制备。

式(VII)及(VIIa)化合物为可购得的，在文献中已知的或其可由本领域技术人员根据标准程序容易地制备。

其中X为-C(＝O)CH₂-或-C(＝O)-的式(I)化合物可自式(V)化合物及式(VI)化合物通过酰化作用来制备(方法步骤(iii))。典型条件包含在室温至60℃下、在适合溶剂(诸如二氯甲烷、二甲基甲酰胺、四氢呋喃、1-甲基-2-吡咯烷酮或2-甲基四氢呋喃)中、任选在适合添加剂(诸如1-羟基苯并三唑单水合物或N，N-二甲氨基吡啶)及适合碱(诸如三乙胺或N，N-二异丙基乙胺)存在下使化合物(V)及化合物(VI)与适合偶合剂(诸如(3-(二甲氨基)丙基)乙基碳化二亚胺盐酸盐或六氟磷酸O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲脲鎓)反应18至72小时。

其中X为CH₂且R¹为H或甲基的式(I)化合物可自式(V)化合物及式(VII)化合物通过还原胺化来制备(方法步骤(iv))。典型条件包含在室温下、在适合溶剂(诸如乙醇、二氯甲烷或二氯乙烷)中、任选在适合催化剂(诸如乙酸或四异丙醇钛)存在下、任选在干燥剂(诸如硫酸钠)存在下，且任选在适合碱(诸如三乙胺)存在下使化合物(V)与化合物(VII)反应1至18小时，接着在0℃至室温下添加适合还原剂(诸如硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠或氰基硼氢化钠)18至24小时。

其中X为CH₂且R¹为

的式(I)化合物可自其中X为CH₂且R¹为H的式(I)化合物及式(VIIa)化合物通过还原胺化来制备(方法步骤(v))。典型条件包含以类似于先前对于方法步骤(iv)所描述的方式使化合物(I)与化合物(VIIa)反应。

除已描述的那些方法之外，式(I)化合物的制备也可需要保护潜在反应性官能基。在该情况下，适合保护基的实例及其保护及去保护的具体方法描述于T.W.Greene及P.Wutz的“Protecting Groups inOrganic Synthesis”(Wiley-Interscience Publication，1981)或P.J.Kocienski的“Protecting groups”(Georg Thieme Verlag，1994)中。

用于制备的式(I)化合物以及中间体可根据各种熟知方法(例如结晶或层析法)来纯化及分离。

式(I)化合物的药物学上可接受的盐包括其酸加成盐及碱盐。

适合酸加成盐自形成无毒性盐的酸形成。实例包括乙酸盐、己二酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、硼酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环己氨磺酸盐、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、反丁烯二酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、六氟磷酸盐、羟苯酰苯酸盐(hibenzate)、盐酸盐/氯化物、氢溴酸盐/溴化物、氢碘酸盐/碘化物、羟乙磺酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、顺丁烯二酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘二甲酸盐、1，5-萘二磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、焦谷氨酸盐、葡萄糖二酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、丹宁酸盐(tannate)、酒石酸盐、甲苯磺酸盐、三氟乙酸盐及羟萘甲酸盐(xinofoate)。

适合碱盐自形成无毒性盐的碱形成。实例包括铝盐、精氨酸盐、苄星(benzathine)盐、钙盐、胆碱盐、二乙胺盐、二乙醇胺盐、甘氨酸盐、赖氨酸盐、镁盐、葡甲胺盐、乙醇胺盐、钾盐、钠盐、缓血酸胺盐及锌盐。

也可形成酸及碱的半盐，例如半硫酸盐及半钙盐。

关于适合盐的评述，参见Stahl及Wermuth的Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties，Selection，and Use(Wiley-VCH，2002)。

式(I)化合物的药物学上可接受的盐可通过三个方法中之一或多种制备：

(i)通过使式(I)化合物与所需酸或碱反应；

(ii)使用所需酸或碱，通过自式(I)化合物的适合前体去除酸或碱不稳定保护基或通过使适合环状前体(例如内酯或内酰胺)开环；或

(iii)通过使式(I)化合物的一种盐经由与合适酸或碱反应或借助于适合离子交换柱而转化为另一种盐。

所有三个反应通常在溶解状态中执行。所得盐可沉淀出且通过过滤收集或可通过蒸发溶剂来回收。所得盐的电离程度可在完全电离至几乎未电离之间变化。

本发明的化合物可以完全非晶形至完全结晶的范围内的一系列固体状态存在。术语“非晶形”是指物质在分子层面下缺乏长程有序且视温度而定可展现固体或液体的物理性质的状态。通常，所述物质不产生独特X射线绕射图案且虽然展现固体性质，但是较正式地描述为液体。在加热后，出现固体至液体的性质变化，其通过通常为二阶的状态变化(“玻璃态化”)来表征。术语“结晶”是指物质在分子层面下具有规则有序内部结构且产生具有确定峰的独特X射线绕射图案的固相。当充分地加热所述物质时，所述物质也展现液体性质，但固体至液体的变化通过通常为一阶的相变(“熔点”)来表征。

本发明的化合物也可以非溶剂化及溶剂化形式存在。本文中使用术语“溶剂化物”来描述包含本发明的化合物及一或多个药物学上可接受的溶剂分子(例如乙醇)的分子复合物。当该溶剂为水时，使用术语“水合物”。

有机水合物的当前公认分类系统为定义经分离的位点、通道或金属-离子配位水合物的一种分类系统-参见K.R.Morris的Polymorphism in Pharmaceutical Solids(编者H.G.Brittain，Marcel Dekker，1995)。经分离的位点水合物为其中水分子由插入有机分子而分离以免彼此直接接触的一种水合物。在通道水合物中，水分子存在于晶格通道中，其中水分子紧邻其他水分子。在金属-离子配位水合物中，水分子与金属离子键结。

当溶剂或水紧密地结合时，复合物将具有与湿度无关的经明确定义的化学计量。然而，如在通道溶剂化物及吸湿性化合物中，当溶剂或水微弱地结合时，水/溶剂含量视湿度及干燥条件而定。在所述情况下，非化学计量性将为基准。

本发明的范畴内也包括多组份复合物(除盐及溶剂化物以外)，其中药物及至少一种其他组份以化学计量或非化学计量的量存在。此类型的复合物包括晶笼化合物(药物-主体包合复合物)及共晶体。后者通常定义为经由非共价相互作用结合在一起的中性分子组份的结晶复合物，但也可为中性分子与盐的复合物。共晶体可通过熔融结晶、通过自溶剂再结晶，或通过将组份一起物理研磨来制备-参见O.Almarsson及M.J.Zaworotko的Chem Commun，17，1889-1896(2004)。对于多组份复合物的一般评述，参见Haleblian的J Pharm Sci，64(8)，1269-1288(1975年8月)。

当本发明的化合物经受适合条件时，本发明的化合物也可以介晶状态(中间相或液晶)存在。介晶状态为介于真实结晶状态与真实液体状态(熔融或溶解)之间的中间状态。由于温度变化而出现的介晶现象描述为“向温性的”，且由添加第二组份(诸如水或另一溶剂)产生的彼介晶现象描述为“向液性的”。可能形成向液晶中间相的化合物描述为“两亲媒性的”，且由具有离子(诸如-COO^-Na⁺、-COO^-K⁺或-SO₃ ^-Na⁺)或非离子(诸如-N^-N⁺(CH₃)₃)极性头基的分子组成。对于更多信息，参见N.H.Hartshorne及A.Stuart的Crystals and the PolarizingMicroscope第4版(Edward Arnold，1970)。

在下文中所有对式(I)化合物的提及包括提及其盐、溶剂化物、多组份复合物及液晶，且包括提及其盐的溶剂化物、多组份复合物及液晶。

本发明的化合物包括如在上文中定义的式(I)化合物，包括其所有多晶型物及晶体惯态、前药及同位素标记的式(I)化合物。

如所指示，式(I)化合物的所谓“前药”也在本发明的范畴内。因此，本身可具有极少药理学活性或不具有药理学活性的式(I)化合物的特定衍生物当投与身体中或投与身体上时可(例如)通过水解分裂而转化为具有所需活性的式(I)化合物。所述衍生物称为“前药”。关于使用前药的其他信息可见于Pro-drugs as Novel Delivery Systems，第14卷，ACS专题论丛(T.Higuchi及W.Stella)及BioreversibleCarriers in Drug Design，Pergamon Press，1987(编者E.B.Roche，American Pharmaceutical Association)中。

本发明的前药可(例如)通过以如(例如)H.Bundgaard的Designof Prodrugs(Elsevier，1985)中描述的本领域技术人员已知为“前部分”的特定部分取代存在于式(I)化合物中的合适官能基来产生。

根据本发明的前药的某些实例包括

(i)在式(I)的化合物含有醇官能团(-OH)时，包含其醚，例如，其中式(I)化合物的醇官能团的氢由(C₁-C₆)烷酰基氧基甲基取代的化合物；及

(ii)在式(I)的化合物含有伯或仲胺基官能团(-NH₂或-NHR，其中R≠H)时，包含其酰胺，例如，其中式(I)化合物的胺基官能团的一或两个氢可以视情况经(C₁-C₁₀)烷酰基取代的化合物。

根据以上实例及其他前药类型的实例的取代基团的其他实例可见于上述参照文献中。

另外，特定式(I)化合物本身可充当其他式(I)化合物的前药。

本发明的范畴内也包括式(I)化合物的代谢物，亦即在投与药物后活体内形成的化合物。根据本发明的代谢物的某些实例包括：

(i)其中式(I)化合物含有甲基，其羟基甲基衍生物(-CH₃-＞-CH₂OH)；

(ii)其中式(I)化合物含有苯基部分，其苯酚衍生物(-Ph-＞-PhOH)；且

本发明包含所有药学上可接受的同位素标记的式(I)化合物，其中一或多个原子由具有相同原子数但具有与在自然界中占优势的原子量或质量数不同的原子量或质量数的原子取代。

适合于包括于本发明的化合物中的同位素的实例包括氢的同位素(诸如²H及³H)、碳(诸如¹¹C、¹³C及¹⁴C)、氯(诸如³⁶Cl)、氟(诸如¹⁸F)、碘(诸如¹²³I及¹²⁵I)、氮(诸如¹³N及¹⁵N)及氧(诸如¹⁵O、¹⁷O及¹⁸O)。

某些同位素标记的式(I)化合物(例如那些纳入放射性同位素的)可用于药物及/或基质组织分布研究。放射性同位素氚(即³H)及碳-14(即¹⁴C)因易于纳入且容易探测而尤其可用于此目的。

用较重同位素(诸如氘，即²H)取代可提供较强代谢稳定性所产生的某些治疗优点，举例而言，体内半衰期增加或剂量需要减少，因此在某些情况下可能较优选。

用正电子发射同位素(例如¹¹C、¹⁸F、⁵O及¹³N)取代可在正电子发射断层扫描(PET)研究中用来检测基质受体占据情况。

同位素标记的式(I)化合物通常可由本领域技术人员已知的习用技术制备，或可通过随附实例及制备中所述的类似的方法使用适宜同位素标记试剂代替先前使用的未标记试剂来制备。

本发明的药学上可接受的溶剂化物包含其中结晶溶剂可经同位素取代的，例如D₂O、d₆-丙酮、d₆-DMSO。

应评定式(I)化合物的生物药学性质，诸如溶解性及溶液稳定性(遍及pH值范围)、渗透性等，以便选择治疗所提出适应症的最合适剂型及投药途径。

欲用于医药应用的本发明化合物可以晶体或无定形产品形式投与。其可通过例如沉淀、结晶、冻干、喷雾干燥、或蒸发干燥的方法获得呈例如固体栓剂(plugs)、粉剂、或薄膜形式。微波或射频干燥法可用于此目的。优选地，本发明的化合物以结晶产物形式投与。

本发明化合物可单独投与，或与一种或多种本发明其他化合物组合或与一种或多种其他药物组合(或以其任一组合形式)投与。通常，其将以与一种或多种药学上可接受的赋形剂组合的调配物投与。本文所用术语“赋形剂”描述除本发明化合物外的任何成份。赋形剂的选择很大程度上取决于以下因素：例如投与的特定方式、赋形剂对溶解性及稳定性的影响、及剂型的性质。

适于递送本发明化合物的药物组合物及其制备方法容易为本领域技术人员所了解。该组合物及其制备方法可参见例如‘Remington’s Pharmaceutical Sciences′，第19版(Mack Publishing Company，1995)。

本发明化合物可口服投与。口服投与可涉及吞咽以便化合物进入胃肠道，和/或可采用口含、舌或舌下投与，由此化合物直接自口腔进入血流。

适合于经口投与的调配物包括固体、半固体及液体系统，诸如片剂；软或硬胶囊，其含有多颗粒或纳米颗粒、液体或散剂；口含剂(包括液体填充的)；咀嚼物；凝胶剂；快速分散剂型；薄膜；胚珠；喷雾剂；及颊内/粘膜附着贴片。

液体调配物包括悬浮液、溶液、糖浆剂及酏剂。所述调配物可用作软或硬胶囊(例如自明胶或羟丙基甲基纤维素制得)中的填充剂且通常包含载剂(例如水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甲基纤维素或适合油)及一或多种乳化剂及/或悬浮剂。液体调配物也可通过固体(例如)自药囊重新构建来制备。

本发明的化合物也可用于快速溶解、快速崩解剂型中，例如那些阐述于Liang及Chen的Expert Opinion in Therapeutic Patents，11(6)，981-986(2001)中的。

对于片剂剂型而言，视剂量而定，药物可占该剂型的1重量％至80重量％，更通常占该剂型的5重量％至60重量％。除该药物外，片剂中通常含有崩解剂。崩解剂的实例包含羟基乙酸淀粉钠、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、交联羧甲基纤维素钠、交聚维酮(crospovidone)、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、微晶纤维素、低碳数烷基取代的羟丙基纤维素、淀粉、预胶化淀粉及藻酸钠。通常，崩解剂占剂型的1重量％至25重量％、较优选5重量％至20重量％。

粘合剂通常用于赋予片剂调配物粘附质量。适宜粘合剂包含微晶纤维素、明胶、糖、聚乙二醇、天然及合成树胶、聚乙烯吡咯烷酮、预胶化淀粉、羟丙基纤维素及羟丙基甲基纤维素。片剂也可含有稀释剂，例如乳糖(单水合物、经喷雾干燥的单水合物、无水物及诸如此类)、甘露醇、木糖醇、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、微晶纤维素、淀粉及二水合磷酸氢钙。

片剂也可任选包括表面活性剂(例如月桂基硫酸钠及聚山梨醇酯80)及助流剂(例如二氧化硅及滑石粉)。若存在，则表面活性剂可占片剂的0.2重量％至5重量％，且助流剂可占片剂的0.2重量％至1重量％。

片剂通常也含有润滑剂，例如，硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、硬脂基富马酸钠、及硬脂酸镁与月桂基硫酸钠的混合物。润滑剂通常占片剂的0.25重量％至10重量％、较优选0.5重量％至3重量％。

其他可能的成份包含抗氧化剂、着色剂、矫味剂、防腐剂及遮味剂。

例示性片剂含有最多至约80％的药物、约10重量％至约90重量％的粘合剂、约0重量％至约85重量％的稀释剂、约2重量％至约10重量％的崩解剂、及约0.25重量％至约10重量％的润滑剂。

片剂掺合物可直接或通过辊子压制形成片剂。另外，片剂掺合物或掺合物部分在制片前可经湿式、干式、或熔融粒化、熔融凝结、或挤出。最终调配物可包含一或多层并可涂覆或不涂覆；甚至可装入胶囊中。

片剂调配物论述于H.Lieberman及L.Lachman的Pharmaceutical Dosage Forms：Tablets，第1卷，(Marcel Dekker，New York，1980)中。

供人类或兽医使用的可消耗性口服膜剂通常为柔软的水溶性或水可膨胀性薄膜剂型，其可迅速溶解或粘膜粘附，通常包括式I化合物、成膜聚合物、粘合剂、溶剂、润湿剂、增塑剂、稳定剂或乳化剂、粘度修饰剂及溶剂。调配物的一些组份可实施一种以上的功能。

式(I)化合物可为水溶性或非水溶性。水溶性化合物通常占溶质的1重量％至80重量％、更通常20重量％至50重量％。溶解性较低的化合物可占该组合物的更高比例，通常占溶质的多达88重量％。另外，式(I)化合物可呈多粒子珠粒形式。

成膜聚合物可选自天然多糖、蛋白质或合成水胶体，其通常以0.01-99重量％的范围、更通常30-80重量％的范围存在。

其他可能的成份包含抗氧化剂、着色剂、矫味剂及增味剂、防腐剂、催涎剂、冷却剂、共溶剂(包含油)、润肤剂(emollients)、膨胀剂(bulking agents)、消泡剂、表面活性剂及遮味剂。

本发明的膜剂通常通过对涂覆至可剥离衬底支持物或纸上的水性薄膜实施蒸发干燥而制备。此可在干燥烘箱或管道(通常为组合涂覆干燥器)中实施，或通过冻干或真空来实施。

可将口服投与的固体调配物调配成能直接释放及/或以改良方式释放。以改良方式释放调配物包含延时释放、持续释放、脉动释放、受控释放、靶向释放及程序性释放。

适用于本发明目的的以改良方式释放调配物阐述于美国专利第6,106,864号中。其他适宜释放技术(例如高能分散液及渗透性及经涂覆粒子)的详细资料参见Verma等人的Pharmaceutical Technology On-line，25(2)，1-14，(2001)。使用口香糖达成受控释放阐述于WO00/35298中。

本发明化合物也可直接投与至血流、肌肉、或内部器官中。适用于非经肠投与的方式包含静脉内、动脉内、腹膜腔内、鞘内、心室内、尿道内、胸骨内、颅内、肌内、滑膜内及皮下投与。适用于非经肠投与的装置包含针式(包含微型针)注射器、无针式注射器及输注技术。

非经肠调配物通常为水溶液，其可含有赋形剂(例如盐、碳水化合物)及缓冲剂(较优选至3-9的pH)，但对于某些应用，可能更适合将其调配为无菌非水性溶液或干燥形式以同适宜媒剂(例如无菌、无致热源的水)组合使用。

非经肠调配物在无菌条件下的制备(例如通过冷冻干燥法)可容易地使用本领域技术人员所习知的标准医药技术完成。

用于制备非经肠溶液的式(I)化合物的溶解性可通过使用适当调配技术(例如纳入增溶剂)来增强。

非经肠投与的调配物可经调配而直接释放及/或以改良方式释放。以改良方式释放调配物包含延时释放、持续释放、脉动释放、受控释放、靶向释放及程序性释放。因此，可将本发明的化合物调配成悬浮液或者固体、半固体、或触变液体用于以植入的储积物形式投与，进而以改良方式释放活性化合物。该调配物的实例包含经药物涂覆的支架及及半固体及包含载有药物的聚(dl-乳酸-共羟乙酸(coglycolic))酸(PGLA)微球体。

本发明的化合物也可局部、表皮(内)或经皮投与至皮肤或粘膜。用于此目的的典型调配物包含凝胶、水凝胶、洗剂、溶液、乳霜、软膏、撒施粉、敷料、发泡体、膜剂、皮肤贴片、糯米纸囊剂、植入物、海绵、纤维、绷带及微型乳剂。也可使用脂质体。典型载剂包含乙醇、水、矿物油、液体凡士林、白色凡士林、甘油、聚乙二醇及丙二醇。可纳入增渗剂-参见(例如)J Pharm Sci，88(10)，955-958，Finnin及Morgan(1999年10月)。

其他局部投与方式包含通过电穿孔、离子电渗法、声透法、超音促渗法及微型针或无针(例如，Powderject^TM、Bioject^TM等)注射来进行递送。

局部投与的调配物可经调配以直接释放及/或以改良方式释放。以改良方式释放调配物包含延时释放、持续释放、脉动释放、受控释放、靶向释放及程序性释放。

本发明化合物也可经鼻内投与或通过吸入投与，该投与所用典型形式为：来自干粉吸入器的干燥粉剂(或单独地、作为混合物(例如，与乳糖的干燥掺合物)、或作为混合组份粒子(例如，与磷脂(例如磷脂酰胆碱)混合))或作为来自加压容器、泵、喷射器、雾化器(较优选使用电流体动力学的雾化器以生成细雾)或喷雾器的喷雾剂(其中使用或不使用适宜推进剂，例如1，1，1，2-四氟乙烷或1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷)，或以滴鼻剂形式投与。对于鼻内使用而言，粉剂可包括生物粘附剂，例如，脱乙酰壳多糖或环糊精。

加压容器、泵、喷射器、雾化器或喷雾器含有包括(例如)乙醇、乙醇水溶液、或用于活性物质分散、增溶、或延长释放的适宜替代剂、作为溶剂的推进剂及(视需要)表面活性剂(例如三油酸山梨醇酐酯、油酸、或寡聚乳酸)的本发明化合物的溶液或悬浮液。

在干燥粉剂或悬浮液调配物中使用的前，将药品微米尺寸化至适于通过吸入递送的尺寸(通常小于5微米)。此可通过任一适宜粉末化方法(例如螺旋喷射研磨、流化床喷射研磨、超临界流体处理)来形成纳米粒子、高压均化、或喷雾干燥而达成。

用于吸入器或吹药器中的胶囊(例如，通过明胶或羟丙基甲基纤维素制成)、泡罩及药筒可经调配而含有本发明化合物的粉末混合物、适宜粉末基质(例如乳糖或淀粉)及性能改良剂(例如1-白氨酸、甘露醇、或硬脂酸镁)。乳糖可为无水的或呈单水合物形式，较优选为后者。其他适宜赋形剂包含葡聚糖、葡萄糖、麦芽糖、山梨醇、木糖醇、果糖、蔗糖及海藻糖。

适用于使用电流体动力学以生成细雾的雾化器中的溶液调配物每次喷射可含有1微克至20毫克的本发明化合物，且喷射体积可在1微升至100微升间变化。典型调配物可包括式I化合物、丙二醇、无菌水、乙醇及氯化钠。可用于替代丙二醇的替代溶剂包含甘油及聚乙二醇。

可将适宜矫味剂(例如薄荷脑及左薄荷脑)、或增甜剂(例如糖精或糖精钠)添加至那些欲以吸入/鼻内方式投与的本发明调配物中。

吸入/鼻内方式投与的调配物可使用(例如)PGLA调配成能直接释放及/或以改良方式释放。以改良方式释放调配物包含延时释放、持续释放、脉动释放、受控释放、靶向释放及程序性释放。

在干粉吸入器及雾剂的情况下，剂量单位取决于预填充胶囊、泡罩或袋或使用重力计量式供给室的系统。本发明的单位通常经布置以投与含1微克至5000微克(根据本发明的式(I)的化合物名称)、或其盐的计量剂量或“喷雾(puff)”。全天剂量通常介于1微克至20毫克之间，其可以单次剂量投与或更经常地作为分次剂量于一天内投与。

式(I)化合物尤其适合于通过吸入投与。根据优选实施方案，本发明的化合物经由干粉吸入器投与。在此情况下，本发明的化合物便利地与乳糖一起调配以便形成干粉。

本发明化合物可经直肠或阴道(例如以栓剂、阴道栓、或灌肠剂的形式)投与。可可油为习用栓剂基质，但视需要可使用多种替代物。

经直肠/阴道投与的调配物可经调配而能直接释放及/或以改良方式释放。以改良方式释放调配物包含延时释放、持续释放、脉动释放、受控释放、靶向释放及程序性释放。

本发明的化合物也可直接投与至眼或耳内，通常以等渗且pH经调节的无菌盐水中的微米尺寸化悬浮液或溶液的液滴剂形式。其他适于经眼及耳投与的调配物包含软膏、凝胶、可生物降解(例如可吸收性凝胶海绵、胶原)及不可生物降解的(例如聚硅酮)植入物、糯米纸囊剂、透镜及颗粒或泡状系统(例如非离子表面活性剂囊泡或脂质体)。可将诸如交联聚丙烯酸、聚乙烯醇、透明质酸、纤维素聚合物(例如，羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素或甲基纤维素)或杂多糖聚合物(例如，琼脂糖胶)等聚合物与防腐剂(例如，苯扎氯铵)一起掺入。该调配物也可通过离子电渗法递送。

经眼/耳投与的调配物可经调配而能直接释放及/或以改良方式释放。以改良方式释放调配物包含延时释放、持续释放、脉动释放、受控释放、靶向释放、或程序性释放。

本发明化合物可与可溶性大分子体(例如环糊精及其适宜衍生物或含有聚乙二醇的聚合物)组合使用，以改善其在以任一上述投与方式使用时的溶解性、溶解速率、遮味情况、生物利用度及/或稳定性。

发现药物-环糊精复合物(举例而言)可广泛用于大多数剂型及投与途径。包含包合物及不包含包合物的情况皆可使用。作为与药物直接复合的替代形式，环糊精可用作辅助添加剂，亦即作为载剂、稀释剂、或增溶剂。最经常用于该目的的是α-、β-、及γ-环糊精，其实例可参见国际专利申请案第WO 91/11172号、第WO 94/02518号及第WO 98/55148号。

由于理想情况为投与活性化合物的组合(举例而言，出于治疗特定疾病或病状的目的)，故本发明范围涵盖以下情形：两种或更多种药物组合物(其中至少一种含有本发明的化合物)可方便地组合成适于同时投与该组合物的试剂盒形式。

因此，本发明的试剂盒包括两种或更多种分开的药物组合物(其中至少一种含有本发明的式(I)化合物)及用于分别保存该组合物的装置(例如容器、分开式瓶子、或分开式箔片组)。此一试剂盒的实例是用于包装片剂、胶囊及诸如此类的常见泡罩包装。

本发明试剂盒尤其适用于投与不同剂型(例如，口服和非经肠)、适用于以不同剂量间隔投与单独组合物、或适用于相互滴定分析单独的组合物。为有助于依从性，该试剂盒通常包括用药说明，并可能提供有所谓的记忆辅助对象。

对于投与人类患者而言，本发明的化合物的总日剂量当然视投与模式而定通常在0.001mg至5000mg的范围中。例如，经口投与可需要0.1mg至1000mg的总日剂量，而静脉内给药可仅需要0.001mg至100mg。总日剂量可以单次剂量或分次剂量投与且可由医师酌定而在本文中指定的典型范围以外。这些剂量以体重为约60kg至70kg的平均人类个体计。医师能够容易地确定体重在此范围以外的个体(诸如婴儿及老年人)的剂量。

为避免疑义，本文中提及“治疗”包括提及治愈性、缓解性及预防性治疗。

式(I)化合物具有与蕈毒碱受体相互作用的能力且归因于蕈毒碱受体在所有哺乳动物的生理学中发挥的基本作用，从而具有如下文中所描述的广泛范围的治疗应用。

因此，本发明的另一实施方式涉及用于治疗涉及蕈毒碱受体的疾病、病症及病状的式(I)化合物，或其药物学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药物学上可接受的溶剂化物。

因此，本发明也涉及式(I)化合物，或其药物学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药物学上可接受的溶剂化物的用途，其用于制造适用于治疗或预防涉及蕈毒碱受体的疾病、病症及病状的药物。

本发明进一步涉及一种以蕈毒碱受体拮抗剂治疗哺乳动物(包括人类)的方法，其包括以有效量的式(I)化合物，或其药物学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药物学上可接受的溶剂化物治疗该哺乳动物。

更特定地，本发明也涉及用于治疗选自由以下组成的组的疾病、病症及病状的式(I)化合物，或其药物学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药物学上可接受的溶剂化物：

●慢性或急性支气管收缩、慢性支气管炎、小气管阻塞及肺气肿；

●任何类型、病因或发病机制的阻塞性或炎症性气管疾病，尤其为选自由以下组成的组的成员的阻塞性或炎症性气管疾病：慢性嗜酸细胞性肺炎，慢性阻塞性肺病(COPD)，包括慢性支气管炎、肺气肿或与COPD相关或不相关的呼吸困难的COPD，以不可逆、进行性气管阻塞为特征的COPD，成人呼吸窘迫综合征(ARDS)，其他药物疗法引起的气管过度反应恶化及与肺性高血压相关的气管疾病；

●任何类型、病因或发病机制的支气管炎，尤其为选自由以下组成的组的成员的支气管炎：急性支气管炎、急性喉气管支气管炎、花生仁吸入性支气管炎、卡他性支气管炎(catarrhal bronchitis)、格鲁布性支气管炎(croupus bronchitis)、干性支气管炎、传染性哮喘性支气管炎、增生性支气管炎、葡萄球菌性或链球菌性支气管炎及肺泡性支气管炎；

●任何类型、病因或发病机制的气喘，尤其为选自由以下组成的组的成员的气喘：变应性气喘、非变应性气喘、过敏性气喘、变应性支气管I gE介导的气喘、支气管气喘、特发性气喘、真性气喘、由病理生理障碍所引起的内源性气喘、由环境因素所引起的外源性气喘、未知或不明病因的特发性气喘、非变应性气喘、支气管性气喘、肺气肿性气喘、运动诱发性气喘、过敏原诱发性气喘、冷空气诱发性气喘、职业性气喘、由细菌、真菌、原虫或病毒感染所引起的感染性气喘、非过敏性气喘、早期气喘、喘鸣婴儿综合征及细支气管炎；

●急性肺损伤；及

●任何类型、病因或发病机制的支气管扩张，尤其为选自由以下组成的组的成员的支气管扩张：柱状支气管扩张、囊状支气管扩张、梭形支气管扩张、细支气管扩张、囊性支气管扩张、干性支气管扩张及滤泡性支气管扩张。

式(I)化合物，或其药物学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药物学上可接受的溶剂化物优选用于治疗COPD或气喘。

可由本发明的化合物治疗的疾病、病症及病状的其他实例为炎症性肠道疾病、肠易激疾病、憩室病、动晕症、胃溃疡、肠的放射学检查、BPH(良性前列腺肥大)的对症治疗、NSAID诱发性胃溃疡、尿失禁(包括尿急、尿频、急迫性尿失禁、膀胱过动症、夜尿症及下泌尿道症状)、睫状肌麻痹、扩瞳及帕金森氏症(Parkinson′s disease)。

因为COPD及气喘为慢性疾病，所以用于疗法的化合物通常与其他药物共投与。因此，药物-药物相互作用的可能性可在分子的总安全性中起重要作用。展现多个代谢途径，亦即第I阶段及第II阶段(例如葡萄糖醛酸反应)的化合物具有产生显著药物-药物相互作用的较低可能性。使用活体外代谢数据，可以市售软件(例如

)模拟化合物的药物-药物相互作用的可能性。与先前技术相比，本发明中的化合物展现第I阶段及第II阶段代谢均产生较低的药物-药物相互作用可能性的优势。

可与式(I)化合物，或其药物学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药物学上可接受的溶剂化物组合使用的其他治疗剂的适合实例包括(但决不限于)：

(a)5-脂氧合酶(5-LO)抑制剂或5-脂氧合酶活化蛋白(FLAP)拮抗剂；

(b)白三烯拮抗剂(LTRA)，包括LTB₄、LTC₄、LTD₄及LTE₄的拮抗剂；

(c)组织胺受体拮抗剂，包括H1及H 3拮抗剂；

(d)用于减轻充血的α1-及α2-肾上腺素受体激动剂血管收缩拟交感神经剂；

(e)PDE抑制剂，包括PDE3、PDE4及PDE5抑制剂；

(f)β2受体激动剂；

(g)茶碱；

(h)色甘酸钠；

(i)COX抑制剂，非选择性及选择性COX-1或COX-2抑制剂(NSAID)；

(j)前列腺素受体拮抗剂及前列腺素合成酶抑制剂；

(k)经口及吸入糖皮质类固醇；

(l)肾上腺皮质激素受体的解离激动剂(DAGR)；

(m)针对内因性发炎实体具有活性的单克隆抗体；

(n)抗肿瘤坏死因子(抗TNF-α)剂；

(o)粘附分子抑制剂，包括VLA-4拮抗剂；

(p)激肽-B₁-受体及B₂-受体拮抗剂；

(q)免疫抑制剂，包括I gE路径抑制剂及环孢菌素；

(r)基质金属蛋白酶(MMP)的抑制剂；

(s)速激肽NK₁、NK₂及NK₃受体拮抗剂；

(t)蛋白酶抑制剂，诸如弹性酶抑制剂；

(u)腺苷A2a受体激动剂及A2b拮抗剂；

(v)尿激酶抑制剂；

(w)作用于多巴胺受体的化合物，诸如D2激动剂；

(x)NFκβ路径的调节剂，诸如IKK抑制剂；

(y)细胞因子信号转导路径(诸如p38MAP激酶、PI3激酶、JAK激酶、syk激酶、EGFR或MK-2)的调节剂；

(z)可归类为粘液溶解药或止咳药的药剂；

(aa)增强对于吸入皮质类固醇的反应的药剂；

(bb)有效对抗可移生呼吸道中的微生物的抗生素及抗病毒剂；

(cc)HDAC抑制剂；

(dd)CXCR2拮抗剂；

(ee)整合素拮抗剂；

(ff)趋化因子；

(gg)上皮钠通道(ENaC)阻断剂或上皮钠通道(ENaC)抑制剂；

(hh)P2Y2激动剂及其他核苷酸受体激动剂；

(ii)血栓素抑制剂；

(jj)PGD₂合成及PGD₂受体(DP1及DP2/CRTH2)的抑制剂；

(kk)烟碱；及

(ll)粘附因子，包括VLAM、ICAM及ELAM。

根据本发明，式(I)化合物与H3拮抗剂、β₂激动剂、PDE4抑制剂、类固醇(尤其糖皮质类固醇)、腺苷A2a受体激动剂、细胞因子信号转导路径(诸如p38 MAP激酶或syk激酶)的调节剂，或白三烯拮抗剂(LTRA)(包括LTB₄、LTC₄、LTD₄及LTE₄的拮抗剂)的组合为优选的。

根据本发明，式(I)化合物与以下的组合：

-糖皮质类固醇，尤其具有降低的全身性副作用的吸入糖皮质类固醇，包括泼尼松(prednisone)、泼尼龙(prednisolone)、氟尼缩松(flunisolide)、曲安奈德(triamcinolone acetonide)、二丙酸倍氯米松(beclomethasone dipropionate)、布地奈德(budesonide)、丙酸氟替卡松(fluticasone propionate)、环索奈德(ciclesonide)及糠酸莫美他松(mometasone furoate)；或

-β2激动剂，尤其包括沙丁胺醇(salbutamol)、特布他林(terbutaline)、班布特罗(bambuterol)、非诺特罗(fenoterol)、沙美特罗(salmeterol)、福莫特罗(formoterol)、妥布特罗(tulobuterol)及其盐；

是进一步优选的。

【实施方式】

以下实例说明式(I)化合物的制备：

制备

制备l

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-(双(叔丁氧基羰基))氨基-壬基)-哌啶-4-基酯

在60℃下、在氮气下将N-(2-联苯基)氨基甲酸4-哌啶酯盐酸盐(US2006205779，46.6g)及N，N-(双(叔丁氧基羰基)-9-溴壬胺(WO2007107828，36.1g)于二甲基甲酰胺(120ml)及三乙胺(60ml)中的溶液加热18小时。溶剂在减压下去除且残余物在乙酸乙酯与水之间分配(各250ml)。分离有机层，以水(100ml)洗涤，随后以盐水(50ml)洗涤且经硫酸镁干燥。将有机层蒸发至干以产生棕色油状物(71.77g)，其通过正相硅胶柱色谱法使用60∶40∶0.5至30∶70∶0.5(以体积计)的庚烷∶乙酸乙酯∶880氨作为洗脱剂纯化，产生呈白色发泡体状的标题化合物(38.9g)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝1.20-1.25(m，10H)，1.30-1.70(m，6H)，1.50(s，18H)，1.80-1.95(m，2H)，2.08-2.23(m，2H)，2.50-2.78(m，3H)，2.80-2.95(m，1H)，3.48-3.54(m，2H)，4.78-4.90(m，1H)，6.82(s，1H)，7.10-7.58(m，8H)，8.03-8.16(d，1H)ppm。

制备2

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐

将联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-(双(叔丁氧基羰基))氨基-壬基)-哌啶-4-基酯(制备1，38.9g)溶解于二氯甲烷(120ml)中，接着逐份添加盐酸(4M于二

烷中，177ml)且在室温下搅拌18小时。将溶剂及过量酸真空去除且残余物与甲醇共沸若干次产生呈无色粉末状的标题化合物(31.98g)。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ＝1.25-1.43(m，10H)，1.75-1.89(m，4H)，1.99-2.08(m，1H)，2.13-2.17(m，2H)，2.24-2.33(m，1H)，2.48-2.52(m，2H)，2.82-2.91(m，2H)，2.93-3.06(m，2H)，3.48-3.52(m，1H)，3.63-3.67(m，1H)，4.77-4.85(m，1H)，5.06(s，1H)，6.77(d，1H)，7.11-7.24(m，3H)，7.31-7.51(m，5H)，8.00(d，1H)，8.31(br s，1H)ppm。

制备2a

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯

将联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，5g，9.8mmol)溶解于二氯甲烷中且以1N氢氧化钠水溶液洗涤。分离有机层，经硫酸镁干燥且在真空中浓缩产生标题化合物(3.11g)。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ＝1.26-1.30(m，10H)，1.38-1.48(m，4H)，1.64-1.73(m，2H)，1.91-1.97(m，2H)，2.15-2.20(m，2H)，2.27-2.31(m，2H)，2.65-2.69(t，2H)，2.70-2.74(m，2H)，4.70-4.75(m，1H)，6.59(s，1H)，7.11-7.14(m，1H)，7.21(d，1H)，7.33-7.51(m，7H)，8.10(d，1H)ppm。

制备3

9-甲基氨基-壬-1-醇

向9-溴壬醇(25g)中添加甲胺(33％乙醇溶液，200ml)且在室温下、在氮气下搅拌溶液18小时。将溶剂在真空下去除，将所得无色固体溶解于二氯甲烷(200mL)中，以氢氧化钠水溶液(2M，100ml)、水(100ml)洗涤，干燥(硫酸钠)且在真空中浓缩产生呈黄色油状的标题化合物，其在静置时固化(14.95g)。该化合物原状用于制备4中。

制备4

(9-羟基-壬基)-甲基-氨基甲酸叔丁酯

将9-甲基氨基-壬-1-醇(制备3，14.95g)悬浮于二氯甲烷(250ml)与三乙胺(17.6g)的混合物中且在冰浴中以搅拌冷却。经5分钟逐份添加Boc酸酐(18.8g)且将反应在冰浴中搅拌1小时且随后在室温下搅拌4小时。将反应以水(150ml)、10％柠檬酸水溶液(50ml)及饱和盐水(50ml)洗涤，随后干燥(硫酸钠)且在真空中浓缩以产生呈黄色液体状的标题化合物(22.95g，97％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝1.20-1.38(m，10H)，1.47(s，9H)，1.47-1.60(m，4H)，2.80(s，3H)，3.10-3.22(t，2H)，3.78-3.83(t，2H)ppm。

制备5

甲磺酸9-(叔丁氧基羰基-甲基-氨基)-壬基酯

在5℃下，向(9-羟基-壬基)-甲基-氨基甲酸叔丁酯(制备4，22.95g)于二氯甲烷(230mL)及三乙胺(18mL)中的溶液中逐滴添加甲磺酰氯(7.2mL)且在室温下将粘稠、混浊溶液搅拌1小时。将混合物以水、碳酸氢钠饱和水溶液洗涤且将有机层干燥(硫酸镁)且在真空中蒸发产生呈淡黄色油状的标题化合物(29.30g)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝1.20-1.45(m，10H)，1.44(s，9H)，1.44-1.52(m，2H)，1.70-1.79(m，2H)，2.82(s，3H)，2.98(s，3H)，3.14-3.24(m，2H)，4.20-4.4.24(t，2H)ppm。

制备6

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(叔丁氧基羰基-甲基-氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

在二甲基甲酰胺(250ml)中，将N-(2-联苯基)氨基甲酸4-哌啶酯盐酸盐(US2006205779，29.3g)与碳酸钾(46g)搅拌0.5小时。随后添加甲磺酸9-(叔丁氧基羰基-甲基-氨基)-壬基酯(制备5，27.7g)及碘化钾(277mg)。在65℃下将反应混合物搅拌24小时，随后添加额外二甲基甲酰胺(100mL)以辅助在65℃下再搅拌24小时。真空去除溶剂且残余物在水与乙酸乙酯(各500ml)之间分配。分离水层且再以乙酸乙酯(200ml)萃取。将经合并的有机层以饱和盐水洗涤，干燥(硫酸钠)且在真空中浓缩。将粗残余物(46.46g)通过正相硅胶柱色谱法使用乙酸乙酯∶庚烷∶880氨(80∶20∶0.5，以体积计)作为洗脱剂纯化，产生呈无色油状的标题化合物，其在静置时结晶(30g，65％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝1.22-1.38(m，12H)，1.44(s，9H)，1.44-1.56(m，2H)，1.61-1.73(m，2H)，1.88-1.97(m，2H)，2.12-2.24(t，2H)，2.23-2.30(t，2H)，2.64-2.72(m，2H)，2.82(s，3H)，3.16-3.24(m，2H)，4.63-4.78(m，1H)，6.60(s，1H)，7.08-7.56(m，8H)，8.03-8.15(d，1H)ppm。

制备7

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐

在室温下，将联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(叔丁氧基羰基-甲基-氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯(制备6，18.5g)在盐酸的二

烷溶液(85ml，4M)中搅拌18小时。将溶剂及过量酸真空去除且残余物与二氯甲烷(100ml)共沸两次产生呈白色固体状的标题化合物(18.0g)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝1.22-1.38(m，10H)，1.54-2.10(m，8H)，2.78-2.97(m，4H)，3.29-3.42(m，2H)，3.53-3.65(m，2H)，3.57(s，3H)，4.57-4.67(m，1H)，4.74(b s，1H)，7.30-7.45(m，8H)，8.80-8.90(m，3H)10.71-10.87(m，1H)ppm。

制备7a

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯

将联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，1.355g，2.583mmol)溶解于水(20ml)中且以1N氢氧化钠水溶液(6ml，6mmol)处理。将所得白色悬浮液以二氯甲烷(40ml)萃取，且随后以二氯甲烷∶甲醇(40ml，以体积计95∶5)萃取。将经合并的有机层干燥(硫酸镁)且在真空中浓缩产生呈无色玻璃状的标题化合物，其在静置时结晶(产率96％，1.116g)。

¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝1.25-1.34(m，10H)，1.45-1.51(m，2H)，1.67-1.80(m，4H)，1.95-1.99(m，2H)，2.23-2.28(m，2H)，2.32-2.36(t，2H)，2.61(s，3H)，2.71-2.76(m，2H)，2.81-2.85(t，2H)，4.70-4.75(m，1H)，6.58(s，1H)，7.10-7.14(t，1H)，7.21(d，1H)，7.33-7.50(m，6H)，8.08(d，1H)ppm。

制备8

4-氯-5-氟-2-羟基-苯甲醛

将六亚甲基四胺(210g，1.5mol)以较小部分添加至三氟乙酸(3.6

L)且在78℃下将所得混合物加热至回流。随后逐滴添加3-氯-4-氟苯酚(210g，1.43mo)于三氟乙酸(1.4L)中的溶液且将混合物再搅拌1小时。将混合物冷却至室温且在真空中浓缩。将残余物倾入冰-水(2L)中且搅拌隔夜。将混合物过滤且滤饼溶解于乙酸乙酯(500mL)中，经硫酸镁干燥且在真空中浓缩。将此粗残余物以乙酸乙酯/石油醚(10∶1，以体积计)洗涤产生呈白色固体状的标题化合物(56.5g，23％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝7.00-7.01(m，1H)，7.19-7.26(m，1H)，9.75(s，1H)，10.82(s，1H)ppm。

LCMS：m/z 172.9M-

制备9

(2，6-二氯-苯氧基)-三乙基-硅烷

将2，6-二氯苯酚(16.3g，100mmol)溶解于四氢呋喃(300ml)中。向此溶液中添加无水吡啶(16.2ml，200mmol)及氯三乙基硅烷(22.7ml，135mmol)。将所得反应混合物在室温下搅拌18小时，且随后在80℃下搅拌5小时。将反应冷却至室温且倾于碳酸氢钠饱和水溶液(150ml)上且以二氯甲烷萃取(3×80ml)。将经合并的有机层干燥(硫酸钠)且在真空中浓缩产生粗产物。将残余物通过硅胶柱色谱法以庚烷进行洗脱来纯化从而提供呈无色油状的标题化合物(产率54％，15g)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝0.83-0.89(q，6H)，0.99-1.03(t，9H)，6.80-6.84(m，1H)，7.23-7.26(m，2H)ppm。

制备10

2，4-二氯-3-羟基-苯甲醛

在-72℃下，将环己烷中的第二丁基锂(1.4M，34.5ml，48.3mmol)缓慢添加至(2，6-二氯-苯氧基)-三乙基-硅烷(制备7，12.17g，43.89mmol)的四氢呋喃(100ml)溶液中。当添加完成时，将反应在-72℃下搅拌1小时。随后添加无水二甲基甲酰胺(4.42ml，57.1mmol)，保持反应温度低于-65℃。在-65℃下持续搅拌10分钟且随后经0.5小时在-65℃搅拌至室温。通过添加以氯化钠(100ml)饱和的2N盐酸溶液来中止反应且将所得混合物以乙酸乙酯(100ml)萃取。将有机层以盐水(100ml)洗涤，干燥(硫酸钠)且在真空中浓缩产生粗产物。在庚烷∶二氯甲烷(10∶1，以体积计；220ml)中湿磨产生呈白色固体状的标题化合物(产率65％，5.5g)。

LCMS：m/z 188M-

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ7.32(d，1H)，7.49(d，1H)，10.23(s，1H)ppm。

实例

实例1

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-氯-4-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

向联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，200mg，457μmol)于二氯甲烷(5ml)中的溶液中添加三乙胺(191μl，1.37mmol)、3-氯-4-羟基苯甲酸(91.3mg，503μmol)、1-羟基苯并三唑单水合物(84mg，548μmol)及(3-(二甲氨基)丙基)乙基碳化二亚胺盐酸盐(105mg，548μmol)且将混合物在室温下搅拌72小时。将所得透明溶液以碳酸氢钠饱和水溶液(5ml)、水(5ml)、盐水(5ml)洗涤，干燥(硫酸钠)且真空去除溶剂产生无色胶状物。使用硅胶滤筒、以二氯甲烷∶甲醇∶0.88氨(99∶1∶0.1至90∶10∶1，以体积计)洗脱来纯化残余物，提供呈白色发泡体状的标题化合物(产率73％，198mg)。

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.27-1.40(m，10H)，1.46-1.55(m，2H)，1.56-1.68(m，4H)，1.82-1.90(m，2H)，2.32-2.42(m，4H)，2.66-2.76(m，2H)，3.31-3.35(t，2H)，4.58-4.66(m，1H)，6.92(d，J＝8.19Hz，1H)，7.23-7.45(m，8H)，7.52-7.56(m，1H)，7.60(dd，J＝8.39，2.15Hz，1H)，7.80(d，1H)ppm。

LCMS：m/z 592[M+H]+，590M-

实例2

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-氟-3-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

向联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯(制备2，150mg，343μmol)的乙醇(5ml)溶液中添加2-氟-3-羟基苯甲醛(Syn thesis，(9)，710-12，1988；48.1mg，343μmol)、乙酸(超过0.02ml，343μmol)及硫酸钠(干燥剂)，且将混合物在氮气下在室温下搅拌1小时。随后添加三乙酰氧基硼氢化钠(145mg，686μmol)且将混合物在氮气下在室温下搅拌24小时。将混合物以水(2ml)稀释，真空去除溶剂且残余物在碳酸氢钠饱和溶液(10ml)与二氯甲烷(10ml)之间分配。分离有机层，以盐水(5ml)洗涤，干燥(硫酸钠)且真空去除溶剂产生无色胶状物。使用

硅胶滤筒、以二氯甲烷∶甲醇∶0.88氨(99∶1∶0.1至95∶5∶0.5，以体积计)洗脱来纯化残余物，提供呈无色胶状的标题化合物(产率47％，90mg)。

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.27-1.36(m，10H)，1.45-1.56(m，4H)，1.56-1.66(m，2H)，1.81-1.89(m，2H)，2.23-2.35(m，4H)，2.58-2.71(m，4H)，3.80(s，2H)4.56-4.63(m，1H)，6.75-6.78(t d，1H)，6.80-6.85(t d，1H)，6.91-6.95(td，1H)，7.23-7.44(m，8H)，7.52-7.56(m，1H)ppm。

LRMS：m/z 562[M+H]+，560M-

实例3

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-氯-5-氟-2-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例2中所述的相同方法，自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯(制备2，130mg，297μmol)及3-氯-5-氟-2-羟基苯甲醛(51.8mg，297μmol)制备标题化合物。产物在甲醇中额外结晶提供呈白色结晶固体状的标题化合物(产率43％，77mg)。

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.26-1.41(m，10H)，1.45-1.53(m，2H)，1.57-1.67(m，4H)，1.80-1.89(m，2H)，2.23-2.35(m，4H)，2.62-2.70(m，2H)，2.74-2.78(t，2H)，4.00(s，2H)，4.56-4.63(m，1H)，6.76-6.79(dd，1H)，6.99-7.02(dd，1H)，7.23-7.44(m，8H)，7.52-7.56(m，1H)ppm。

LRMS：m/z 596[M+H]+，594M-

实例4

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[2-(3-氯-4-羟基-苯基)-乙酰氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例1中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，100mg，229μmol)及3-氯-4-羟基苯基乙酸(46.9mg，251μmol)制备标题化合物提供呈白色发泡体状的标题化合物(产率72％，100mg)。

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.27-1.35(m，10H)，1.46-1.55(m，4H)，1.58-1.68(m，2H)，1.82-1.90(m，2H)，2.28-2.37(m，4H)，2.66-2.74(m，2H)，3.15-3.19(t，2H)，3.35(s，2H)，4.58-4.66(m，1H)，6.82-6.84(d，1H)，7.01-7.04(1H，dd)，7.23-7.45(m，9H)，7.52-7.56(m，1H)ppm。

LCMS：m/z 606[M+H]⁺

实例5

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-氯-3-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例2中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯(制备2，130mg，297μmol)及2-氯-3-羟基苯甲醛(46.5mg，297μmol)制备标题化合物提供呈无色玻璃状的标题化合物(产率39％，67mg)。

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.26-1.381(m，10H)，1.45-1.68(m，6H)，1.80-1.89(m，2H)，2.23-2.35(m，4H)，2.60-2.72(m，4H)，3.88(s，2H)，4.56-4.63(m，1H)，6.85-6.89(2xd，2H)，7.08-7.12(dd，1H)，7.23-7.44(m，8H)，7.52-7.56(m，1H)ppm。

LRMS：m/z 578-80[M+H]+，576-578M-

实例6

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-氟-4-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例1中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，2.20g，4.31mmol)及3-氟-4-羟基苯甲酸(740mg，4.74mmol)制备标题化合物提供呈白色发泡体状的标题化合物(产率51％，1.26g)。

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.27-1.41(m，10H)，1.46-1.54(m，2H)，1.55-1.68(m，4H)，1.81-1.89(m，2H)，2.30-2.42(m，4H)，2.65-2.75(m，2H)，3.31-3.35(t，2H)，4.58-4.65(m，1H)，6.90-6.95(dd，1H)，7.23-7.56(m，11H)ppm。

LCMS：m/z 576[M+H]+，574M-

实例7

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(4-氟-3-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例1中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，30.0mg，68.6μmol)及4-氟-3-羟基苯甲酸(11.8mg，75.4μmol)以搅拌5天制备标题化合物。添加碳酸氢钠水溶液(5ml)，将混合物搅拌2小时且经相分离滤筒过滤。将有机层在真空中还原且将粗物质通过HPLC方法D纯化从而提供标题化合物。

LCMS方法D：RT 2.53min(100％面积)

ES m/z 576.316[M+H]⁺

实例8

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-氟-2-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例7中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，30.0mg，68.6μmol)及3-氟-2-羟基苯甲酸(11.8mg，75.4μmol)制备标题化合物。

LCMS方法D：RT 2.69min(100％面积)

ES m/z 576.316[M+H]⁺

实例9

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(5-氟-2-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例7中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，30.0mg，68.6μmol)及5-氟-2-羟基苯甲酸(11.8mg，75.4μmol)制备标题化合物。

LCMS方法D：RT 2.69min(100％面积)

ES m/z 576.316[M+H]⁺

实例10

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[2-(3-氟-4-羟基-苯基)-乙酰氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例7中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，30.0mg，68.6μmol)及3-氟-4-羟基苯基乙酸(12.8mg，75.4μmol)制备标题化合物。

LCMS方法D：RT 2.32min(100％面积)

ES m/z 590.332[M+H]⁺

实例11

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-氯-2-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例7中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，30.0mg，68.6μmol)及3-氯-2-羟基苯甲酸(13.0mg，75.4μmol)制备标题化合物。

LCMS方法D：RT 2.68min(100％面积)

ES m/z 592.28[M+H]⁺

实例12

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3，4-二氟-2-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例7中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，30.0mg，68.6μmol)及3，4-二氟-2-羟基苯甲酸(13.1mg，75.4μmol)制备标题化合物。

LCMS方法D：RT 2.61min(100％面积)

ES m/z 594.307[M+H]⁺

实例13

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3，5-二氯-2-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例7中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，30.0mg，68.6μmol)及3，5-二氯-2-羟基苯甲酸(15.6mg，75.4μmol)制备标题化合物。

LCMS方法D：RT 2.91min(100％面积)

ES m/z 626.247[M+H]⁺

实例14

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(4-氯-2-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例7中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，45.0mg，88μmol)及4-氯-2-羟基苯甲酸(15.2mg，88μmol)制备标题化合物。

LCMS方法D：RT 2.62min(100％面积)ES m/z 592.28[M+H]⁺

实例15

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-{[2-(3-氯-4-羟基-苯基)-乙酰基]-甲基-氨基}-壬基)-哌啶-4-基酯

向联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，20.0mg，44μmol)的二氯甲烷(2ml)溶液中添加三乙胺(9.26μl，66μmol)、3-氯-4-羟基苯基乙酸(8.26mg，44μmol)及六氟磷酸O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲脲鎓(21.8mg，58μmol)且在室温下搅拌5天。真空去除溶剂且使用

SCX-1滤筒、以甲醇然后以甲醇中的2M氨洗脱来纯化粗残余物。在减压下蒸发碱性洗脱份且通过HPLC方法F纯化残余物提供标题化合物。

LCMS方法F：RT 2.7min(100％面积)

ES m/z 620.318[M+H]⁺

或者，标题化合物也通过以下程序制备：

向联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，3.0g，5.72mmol)的二甲基甲酰胺(30ml)溶液中添加三乙胺(1.63ml，11.7mmol)、3-氯-4-羟基苯基乙酸(1.28g，6.86mmo l)、N，N-二甲氨基吡啶(210mg，1.72mmol)及(3-(二甲氨基)丙基)乙基碳化二亚胺盐酸盐(1.32g，6.86mmol)。将反应于室温下搅拌18小时。真空去除溶剂且残余物在乙酸乙酯(50ml)与水(50ml)之间分配。将有机层以碳酸氢钠饱和水溶液洗涤(2×50ml)，经硫酸镁干燥且在真空中浓缩。通过硅胶柱色谱、以二氯甲烷∶甲醇∶880氨(96∶4∶0.4至92∶8∶0.8，以体积计)洗脱来纯化残余物，提供呈白色发泡体状的标题化合物(产率50％，1.77g)。

将50mg标题化合物溶解于异丙醇、乙酸异丙酯或乙酸乙酯(1ml，热状态下)中，接着在室温下静置72小时且过滤提供呈结晶固体状的标题化合物。

LCMS：APCI ESI m/z 621[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.17-1.34(m，10H)，1.37-1.55(m，2H)，1.59-1.67(m，4H)，1.80-1.89(m，2H)，2.24-2.35(m，4H)，2.62-2.72(m，2H)，2.90-3.00(d，3H)，3.34-3.39(m，2H)，3.62-3.65(d，2H)，4.57-4.63(m，1H)，6.84(d，1H)，6.99(d，1H)，7.18-7.44(m，9H)，7.56(d，1H)ppm。

实例16

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4-氟-3-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例15中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，20.0mg，44μmol)及4-氟-3-羟基苯甲酸(6.91mg，44μmol)制备标题化合物。

LCMS方法F：RT 2.59min(100％面积)

ES m/z 590.332[M+H]⁺

实例17

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氯-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例15中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，20.0mg，44μmol)及3-氯-4-羟基苯甲酸(7.64mg，44μmol)制备标题化合物。

LCMS方法F：RT 2.67min(100％面积)

ES m/z 606.302[M+H]⁺

或者，标题化合物也通过以下程序制备：

向联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，4.0g，8.856mmol)的四氢呋喃(100ml)溶液中添加3-氯-4-羟基苯甲酸(1.69g，9.30mmol)、N，N-二甲氨基吡啶(433mg，3.54mmol)及(3-(二甲氨基)丙基)乙基碳化二亚胺盐酸盐(2.04g，10.6mmol)。将反应于室温下搅拌18小时。将混合物于乙酸乙酯(75ml)与水(75ml)之间分配。将水层进一步以乙酸乙酯(75ml)萃取且经合并的有机层以盐水(75ml)洗涤，经硫酸镁干燥且在真空中浓缩。将残余物溶解于甲醇/水(100ml/20ml)中且以碳酸钾(9.8g，70.9mmol)处理且在50℃下加热3小时。真空去除溶剂且残余物在乙酸乙酯(75ml)与水(75ml)之间分配。将水层通过添加盐酸水溶液调整至pH 8，且进一步以乙酸乙酯(75ml)萃取。将经合并的有机萃取物以盐水(50ml)洗涤，经硫酸镁干燥且在真空中浓缩。通过硅胶柱色谱法以乙酸乙酯∶甲醇∶880氨(100∶0∶0至90∶10∶1，以体积计)洗脱来纯化残余物，提供呈白色发泡体状的标题化合物(产率25％，1.1g)。

将150mg标题化合物悬浮于乙腈(4ml)中，加热至回流且随后使其冷却至室温。将所得油/溶剂混合物加热至80℃直至出现结晶且随后使其冷却至室温。通过过滤收集固体从而产生呈白色结晶固体状的标题化合物(102mg)。

LCMS：APCI ESI m/z 606[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ＝1.11-1.23(m，10H)，1.30-1.44(m，4H)，1.46-1.54(m，2H)，1.65-1.73(m，2H)，1.99-2.07(m，2H)，2.15-2.21(m，2H)，2.51-2.58(m，2H)，2.88(s，3H)，3.15-3.19(m，2H)，4.37-4.45(m，1H)，6.95(d，1H)，7.15(d，1H)，7.24-7.42(m，9H)，8.54(d，1H)ppm。

实例18

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-{[2-(3-氟-4-羟基-苯基)-乙酰基]-甲基-氨基}-壬基)-哌啶-4-基酯

使用如实例15中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，20.0mg，44μmol)及3-氟-4-羟基苯基乙酸(8.29mg，49μmol)制备标题化合物。

LCMS方法F：RT 2.6min(100％面积)

ES m/z 604.347[M+H]⁺

实例19

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(4-氯-3-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

将(3-(二甲氨基)丙基)乙基碳化二亚胺盐酸盐(69.6mg，0.363mmol)添加至联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯(制备2，159mg，0.363mmol)、4-氯-3-羟基苯甲酸(56.4mg，0.327mmol)及1-羟基苯并三唑单水合物(55.6mg，0.363mmol)于二氯甲烷(2ml)及二甲基甲酰胺(1ml)的混合物中的溶液且在室温下在氮气下搅拌24小时。真空去除溶剂且将残余物在二氯甲烷(40ml)与碳酸氢钠饱和溶液(30ml)之间分配。将各层分离且水层再以二氯甲烷(40ml)萃取。将经合并的有机层干燥(硫酸镁)、溶剂真空去除且通过硅胶柱色谱法以乙酸乙酯∶甲醇∶880氨(98∶2∶0.2至90∶10∶1，以体积计)洗脱来纯化粗残余物从而提供呈白色发泡体状的标题化合物(产率63％，135mg)。

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.26-1.41(m，10H)，1.47-1.54(m，2H)，1.56-1.66(m，4H)，1.80-1.89(m，2H)，2.26-2.37(m，4H)，2.63-2.72(m，2H)，3.28-3.35(m，2H)，4.58-4.64(m，1H)，7.18-7.44(m，11H)，7.56(d，J＝7.80Hz，1H)ppm。

LCMS：APCI ESI m/z 592[M+H]⁺

实例20

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-氟-4-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例19中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯(制备2，159mg，0.363mmol)及2-氟-4-羟基苯甲酸(51.0mg，0.327mmol)制备呈无色玻璃状的标题化合物(产率70％，147mg)。

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.26-1.41(m，10H)，1.47-1.54(m，2H)，1.56-1.69(m，4H)，1.79-1.89(m，2H)，2.26-2.37(m，4H)，2.63-2.72(m，2H)，3.30-3.32(m，2H)，4.58-4.64(m，1H)，6.52-6.55(m，1H)，6.63-6.66(m，1H)，7.24-7.44(m，8H)，7.56(d，J＝7.80Hz，1H)7.59-7.63(m，1H)ppm。

LCMS：APCI ESI m/z 576[M+H]⁺

实例21

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-氯-4-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例19中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯(制备2，159mg，0.363mmol)及2-氯-4-羟基苯甲酸水合物(62.3mg，0.327mmol)制备呈无色玻璃状的标题化合物(产率75％，162mg)。

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.27-1.44(m，10H)，1.47-1.54(m，2H)，1.56-1.68(m，4H)，1.80-1.90(m，2H)，2.27-2.37(m，4H)，2.65-2.72(m，2H)，3.30-3.31(m，2H)，4.56-4.65(m，1H)，6.72-6.75(m，1H)，6.82-6.83(m，1H)，7.23-7.44(m，9H)，7.54-7.56(m，1H)ppm。

LCMS：ESI m/z 592[M+H]⁺

实例22

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3，5-二氯-4-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

在室温下，将联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯(制备2，0.5g)及3，5-二氯-4-羟基苯甲醛(0.187g)溶解于二氯甲烷(9ml)中。添加乙酸(一滴)，接着以约20分钟的间隔，添加三份各为100mg的三乙酰氧基硼氢化钠。将所得混合物在室温下在氮气下搅拌21小时，随后在二氯甲烷(20mL)与碳酸氢钠饱和水溶液(20mL)之间分配。分离有机相，以盐水洗涤(2×10ml)，经硫酸钠干燥，过滤且在真空中蒸发产生白色固体，其通过硅胶柱色谱法使用二氯甲烷∶甲醇∶880氨(96∶4∶0.5至90∶10∶0.5，以体积计)作为洗脱剂纯化从而产生呈白色固体状的标题化合物(312mg)。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ＝1.24-1.70(m，14H)，1.83-1.94(m，2H)，2.24-2.38(m，4H)，2.61-2.63(m，2H)，2.63-2.75(m，2H)，2.81-2.86(m，2H)，3.82(s，2H)，4.60-4.64(m，1H)，7.19(s，2H)，7.23-7.44(m，8H)，7.52-7.60(d，1H)ppm。

或者，标题化合物也通过以下程序分离：

将标题化合物(306mg)于甲醇(5ml)中的溶液加热从而产生透明溶液且随后使其冷却至室温。将所得固体过滤且在真空中干燥从而提供呈白色结晶固体状的标题化合物(190mg)。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d)δ＝：1.15-1.28(m，10H)，1.32-1.47(m，6H)，1.67-1.75(m，2H)，2.01-2.10(m，2H)，2.17-2.23(m，2H)，2.54-2.60(m，2H)，3.16(s，2H)，3.60(s，2H)，4.39-4.47(m，1H)，7.19(s，2H)，7.25-7.43(m，9H)，8.60(s，1H)ppm。

实例22a

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3，5-二氯-4-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯萘-1，5-二磺酸盐

将联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3，5-二氯-4-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯(实例22，306mg)在甲醇(3ml)中加热产生透明溶液，接着添加萘-1，5-二磺酸(180mg)的甲醇(1ml)溶液。在室温下，2小时之后，将所得固体过滤且在真空中干燥从而提供呈结晶固体状的标题化合物(412mg)。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d)δ＝1.13-1.25(m，10H)，1.48-1.58(m，4H)，1.73-2.03(m，2H)，2.79-3.03(m，6H)，3.27-3.50(m，4H)，4.03-4.08(t，2H)，4.72-4.77(m，1H)，7.30-7.45(m，11H)，7.54(m，2H)，7.93-7.95(d，2H)，8.54-8.61(b s，2H)，8.86-8.88(d，2H)ppm。

实例23

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2，3-二氟-4-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

向联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，35mg，68.5μmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中添加三乙胺(28.7μl，206μmol)、2，3-二氟-4-羟基苯甲酸(12.5mg，72μmol)、1-羟基苯并三唑单水合物(12.6mg，82.3μmol)及(3-(二甲氨基)丙基)乙基碳化二亚胺盐酸盐(15.8mg，82.3μmol)且在室温下搅拌18小时。将所得透明溶液以二氯甲烷(5ml)及碳酸氢钠饱和水溶液(5ml)稀释且剧烈搅拌10分钟。将所得双相溶液使用相分离滤筒来分离且将有机层浓缩从而产生白色发泡体。通过HPLC方法D纯化残余物从而提供标题化合物。

LCMS方法D：RT 2.61min(100％面积)ES m/z 594.307[M+H]⁺

实例24

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-5-氯-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例23中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，35mg，68.5μmol)及5-氯水杨酸(12.4mg，72μmol)制备标题化合物从而提供呈橙色胶状的粗产物。通过HPLC方法D纯化残余物从而提供标题化合物。

LCMS方法D：RT 2.87min(100％面积)

ES m/z 590.286[M+H]⁺

实例25

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(4-羟基-3，5-二氯-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例23中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，35mg，68.5μmol)及4-羟基-3，5-二氯-苯甲酸(14.9mg，72μmol)制备标题化合物从而提供呈白色发泡体状的粗产物。将残余物通过HPLC方法D纯化从而提供标题化合物。

LCMS方法D：RT 2.68min(100％面积)

ES m/z 626.247[M+H]⁺

实例26

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-4-氟-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例23中描述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，35mg，68.5μmol)及2-羟基-4-氟-苯甲酸(10.7mg，72μmol)制备标题化合物从而提供呈无色胶状的粗产物。将残余物通过HPLC方法D纯化从而提供标题化合物。

LCMS方法D：RT 2.82min(100％面积)

ES m/z 576.316[M+H]⁺

实例27

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3，5-二氟-4-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

向联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，35mg，68.5μmol)及三乙胺(9.5μl，68.5μmol)的乙醇(1ml)溶液中添加3，5-二氟-4-羟基苯甲醛(10.8mg，68.5μmol)、乙酸(超过4μl，68.5μmol)及硫酸钠，且在氮气下在室温下搅拌1小时。随后添加氰基硼氢化钠(8.6mg，137μmol)且将混合物在氮气下在室温下搅拌18小时。真空去除溶剂且将残余物溶于二氯甲烷(3ml)及碳酸氢钠溶液(3ml)中。将所得双相溶液剧烈搅拌10分钟随后使用相分离滤筒分离且在真空中浓缩有机层产生黄色胶状物。通过HPLC方法A纯化残余物从而提供标题化合物。

LCMS方法A：RT 2.42min(100％面积)

ES m/z 580.327[M+H]⁺

实例28

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-4，5-二氯-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例27中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，35mg，68.5μmol)及2-羟基-4，5-二氯-苯甲醛(13.1mg，68.5μmol)制备标题化合物从而提供呈黄色胶状的粗产物。将残余物通过HPLC方法A纯化从而提供标题化合物。

LCMS方法A：RT 2.34min(100％面积)

ES m/z 612.268[M+H]⁺

实例29

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-3，5-二氟-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例27中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，35mg，68.5μmol)及3，5-二氟-水杨醛(10.8mg，68.5μmol)制备标题化合物从而提供呈黄色胶状的粗产物。将残余物通过HPLC方法A纯化从而提供标题化合物。

LCMS方法A：RT 2.28min(100％面积)

ES m/z 580.327[M+H]⁺

实例30

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-3-氟-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

标题化合物使用如实例27中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，35mg，68.5μmol)及2-羟基-3-氟-苯甲醛(9.6mg，68.5μmol)制备从而提供呈黄色胶状的粗产物。将残余物通过HPLC方法A纯化从而提供标题化合物。

LCMS方法A：RT 2.19min(100％面积)

ES m/z 562.337[M+H]+

实例31

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-3，5-二氯-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例27中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，35mg，68.5μmol)及3，5-二氯-水杨醛(13.1mg，68.5μmol)制备标题化合物从而提供呈黄色胶状的粗产物。将残余物通过HPLC方法A纯化从而提供标题化合物。

LCMS方法A：RT 2.28min(100％面积)

ES m/z 612.268[M+H]⁺

实例32

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(5-氯-2-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例27中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，35mg，68.5μmol)及2-羟基-5-氯-苯甲醛(10.7mg，68.5μmol)制备标题化合物从而提供呈黄色胶状的粗产物。将残余物通过HPLC方法A纯化从而提供标题化合物。

LCMS方法A：RT 2.51min(100％面积)

ES m/z 578.307[M+H]⁺

实例33

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-4-氯-5-氟-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例27中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，35mg，68.5μmol)及2-羟基-4-氯-5-氟-苯甲醛(制备8，12.0mg，68.5μmol)制备标题化合物从而提供呈黄色胶状的粗产物。将残余物通过HPLC方法A纯化从而提供标题化合物。

LCMS方法A：RT 2.34min(100％面积)ES m/z 596.298[M+H]⁺

实例34

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-氯-4-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例27中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，35mg，68.5μmol)及3-氯-4-羟基-苯甲醛(10.7mg，68.5μmol)制备标题化合物从而提供呈黄色胶状的粗产物。将残余物通过HPLC方法A纯化从而提供标题化合物。

LCMS方法A：RT 2.20min(100％面积)

ES m/z 578.307[M+H]⁺

实例35

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-5-氟-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例27中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，35mg，68.5μmol)及2-羟基-5-氟-苯甲醛(9.6mg，68.5μmol)制备标题化合物从而提供呈黄色胶状的粗产物。将残余物通过HPLC方法A纯化从而提供标题化合物。

LCMS方法A：RT 2.27min(100％面积)

ES m/z 562.337[M+H]⁺

实例36

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-羟基-4-氟-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例27中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，100mg，196μmol)及3-羟基-4-氟-苯甲醛(27.4mg，196μmol)制备标题化合物从而提供呈黄色胶状的粗产物(110mg)。使用硅胶柱色谱法以乙酸乙酯∶甲醇∶0.88氨(95∶5∶0.5至90∶10∶1.0，以体积计)洗脱来纯化残余物从而提供呈无色胶状的标题化合物(产率68％，75mg)。

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.27-1.34(m，10H)，1.46-1.55(m，4H)，1.58-1.65(m，2H)，1.81-1.88(m，2H)，2.23-2.34(m，4H)，2.58-2.62(t，2H)，2.64-2.69(m，2H)，3.68(s，2H)，4.56-4.62(m，1H)，6.67-6.71(m，1H)，6.85-6.88(dd，1H)，6.93-6.98(m，1H)，7.23-7.44(m，8H)，7.53-7.57(m，1H)ppm。

LCMS：APCI ESI m/z 562[M+H]⁺

实例37

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2，4-二氯-3-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例27中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，100mg，196μmol)及3-羟基-2，4-二氯苯甲醛(37.4mg，196μmol)制备标题化合物从而提供呈灰白色发泡体状的粗产物(127mg)。使用硅胶柱色谱法以乙酸乙酯∶甲醇∶0.88氨(95∶5∶0.5至85∶15∶1.5，以体积计)洗脱来纯化残余物从而提供呈橙色胶状的标题化合物(产率76％，91mg)。

¹H NMR  (400MHz，甲醇-d₄)δppm 1.26-1.40(m，10H)，1.47-1.54(m，2H)，1.58-1.66(m，4H)，1.83-1.91(m，2H)，2.38-2.42(m，4H)，2.74-2.78(m，2H)，2.82-2.84(m，2H)，4.02(s，2H)，4.60-4.64(m，1H)，6.58-.6.51(m，1H)，7.17-7.19(d，1H)，7.22-7.48(m，8H)，7.56-7.60(m，1H)。

LCMS：APCI ESI m/z 612[M+H]⁺，610[M^-]

或者，标题化合物通过以下程序制备：

将联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯(制备2a，3.11g，7.116mmol)溶解于乙醇(60ml)中，向其中添加3-羟基-2，4-二氯苯甲醛(2.04g，10.7mmol)，接着添加四异丙醇钛(4.17ml，14.2mmol)。将反应混合物在室温下搅拌18小时，随后冷却至0℃且经30分钟逐份添加硼氢化钠(808mg，21.3mmol)。使反应温至室温且搅拌4小时。通过逐滴添加水(10ml)使反应中止且在室温下保持静置18小时。将混合物在二氯甲烷(200ml)与1N盐酸水溶液之间分配。将有机层以碳酸氢钠饱和水溶液(150ml)、盐水(150ml)洗涤，经硫酸镁干燥且在真空中浓缩。使用硅胶柱色谱法以二氯甲烷∶甲醇∶0.88氨(95∶5∶0.5至90∶10∶1，以体积计)洗脱来纯化残余物从而提供呈白色发泡体状的标题化合物(产率46％，1.99g)。

将70mg标题化合物溶解于热甲醇(5ml)中，随后使其缓慢冷却至室温且保持静置18小时。通过过滤收集所得固体从而产生呈白色结晶固体状的标题化合物(50mg)。

LCMS：APCI ESI m/z 612[M+H]⁺，610[M^-]

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.26-1.40(m，10H)，1.47-1.54(m，2H)，1.58-1.66(m，4H)，1.83-1.91(m，2H)，2.38-2.42(m，4H)，2.74-2.78(m，2H)，2.82-2.84(m，2H)，4.02(s，2H)，4.60-4.64(m，1H)，6.58-.6.51(m，1H)，7.17-7.19(d，1H)，7.22-7.48(m，8H)，7.56-7.60(m，1H)ppm。

实例38

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(4-羟基-3-氟-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯

使用如实例37中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备2，100mg，196μmol)及4-羟基-3-氟-苯甲醛(27.4mg，196μmol)制备标题化合物从而提供呈无色胶状的标题化合物(产率68％，75mg)。

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.21-1.36(m，10H)，1.44-1.55(m，4H)，1.56-1.65(m，2H)，1.78-1.87(m，2H)，2.21-2.35(m，4H)，2.57-2.68(m，4H)，3.67(s，2H)，4.56-4.63(m，1H)，6.79-6.84(m，1H)，6.89-6.93(m，1H)，7.00-7.03(m，1H)，7.23-7.42(m，8H)，7.53-7.58(m，1H)ppm。

LCMS：APCI ESI m/z 562[M+H]⁺，584[M+Na]⁺

实例39

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[双-(2-氯-3-羟基-苄基)-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例2中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-氨基-壬基)-哌啶-4-基酯(制备2，130mg，297μmol)及2-氯-3-羟基苯甲醛(46.5mg，297μmol)制备标题化合物从而提供呈白色发泡体状的标题化合物(产率15％，32mg)。

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.16-1.32(m，10H)，1.45-1.55(m，4H)，1.58-1.69(m，2H)，1.79-1.92(m，2H)，2.24-2.37(m，4H)，2.45-2.48(t，2H)，2.63-2.74(m，2H)，3.67(s，4H)，4.57-4.64(m，1H)，6.77-6.79(m，2H)，7.02-7.07(m，4H)，7.23-7.44(m，8H)，7.53-7.57(m，1H)ppm。

LCMS：m/z 718-20[M+H]+，716-717M-

实例40

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氟-2-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

将联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，40.0mg，89μmol)溶解于乙醇(0.5ml)中且添加至含有3-氟-2-羟基苯甲醛(12.5mg，89μmol)的反应容器中。随后向反应混合物中添加乙酸(5.1μl，90μmol)及硫酸钠(干燥剂)且在室温下将所得混合物搅拌30分钟。随后添加乙醇(0.5ml)中的三(乙酰氧基)硼氢化钠(38mg，178μmol)，且在室温下将反应搅拌18小时。再添加三(乙酰氧基)硼氢化钠(19mg，89μmol)且将反应再搅拌24小时。真空去除溶剂且将残余物在二氯甲烷(2ml)与碳酸氢钠饱和水溶液(2ml)之间分配。分离水相且再以二氯甲烷(1ml)萃取。将经合并的有机层在真空中浓缩且通过HPLC方法A纯化残余物从而提供标题化合物。

LCMS方法A：RT 2.28min(100％面积)

ES m/z 576[M+H]⁺。

实例41

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4，5-二氯-2-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例40中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，40.0mg，89μmol)及4，5-二氯-2-羟基苯甲醛(17.0mg，89μmol)制备标题化合物。

LCMS方法A：RT 2.27min(100％面积)

ES m/z 626[M+H]⁺。

实例42

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4-氟-3-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

将联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，150mg，0.332mmol)溶解于二氯甲烷(3ml)中。向其中添加4-氟-3-羟基苯甲醛(Bioorg.Med.Chem，2001，9，677；51.1mg，0.365mmol)、乙酸(19.0μl，0.332mmol)及三(乙酰氧基)硼氢化钠(141mg，0.664mmol)。将所得混合物于室温下搅拌18小时。将反应以2M碳酸钠水溶液(5ml)中止且随后在乙酸乙酯(20ml)与水(20ml)之间分配。将有机层以盐水(20ml)洗涤，干燥(硫酸钠)且在真空中浓缩。通过硅胶柱色谱法以二氯甲烷∶甲醇∶880氨(100∶0∶0至90∶10∶1，以体积计)洗脱来纯化粗残余物从而提供呈无色油状的标题化合物(产率28％，53mg)。

LCMS：ESI m/z 576[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.27-1.34(m，10H)，1.46-1.55(m，4H)，1.59-1.67(m，2H)，1.81-1.89(m，2H)，2.20(s，3H)，2.25-2.39(m，6H)，2.63-2.71(m，2H)，3.43(s，2H)，4.57-4.63(m，1H)，6.69-6.74(m，1H)，6.88(d，1H)，6.94-6.99(m，1H)，7.23-7.44(m，8H)，7.55(d，1H)ppm。

实例43

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4-氯-5-氟-2-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

将联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，200mg，0.443mmol)溶解于二氯乙烷(5ml)中。向其中添加4-氯-5-氟-2-羟基苯甲醛(制备8，73.7mg，0.422mmol)且将反应混合物在室温下搅拌1小时。添加三(乙酰氧基)硼氢化钠(125mg，0.591mmol)且将混合物在室温下再搅拌18小时。通过逐滴添加水(1ml)中止反应且真空去除溶剂。将残余物在二氯甲烷(20ml)与碳酸氢钠饱和水溶液(20ml)之间分配，干燥有机层(硫酸镁)且随后在真空中浓缩。通过硅胶柱色谱法以二氯甲烷∶甲醇∶880氨(100∶0∶0至95∶5∶0.5，以体积计)洗脱来纯化粗残余物从而提供呈无色油状的标题化合物(产率45％，121mg)。

LCMS：ESI m/z 610[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.28-1.35(m，10H)，1.48-1.68(m，6H)，1.82-1.89(m，2H)，2.29(s，3H)，2.32-2.40(m，4H)，2.48-2.52(m，2H)，2.67-2.74(m，2H)，3.68(s，2H)，4.59-4.65(m，1H)，6.77(d，1H)，6.93(d，1H)，7.23-7.44(m，8H)，7.56(d，1H)ppm。

实例44

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氯-4-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例42中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，150mg，0.332mmol)及3-氯-4-羟基苯甲醛(57.2mg，0.365mmol)制备标题化合物从而提供呈白色发泡体状的标题化合物(产率72％，142mg)。

LCMS：ESI m/z 592[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.26-1.33(m，10H)，1.46-1.55(m，4H)，1.57-1.67(m，2H)，1.80-1.89(m，2H)，2.19(s，3H)，2.24-2.39(m，6H)，2.62-2.71(m，2H)，3.42(s，2H)，4.56-4.63(m，1H)，6.85(d，1H)，7.05(d，1H)，7.23-7.44(m，9H)，7.55(d，1H)ppm。

实例45

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氟-4-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例42中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，150mg，0.332mmol)及3-氟-4-羟基苯甲醛(51.1mg，0.365mmol)制备标题化合物从而提供呈白色发泡体状的标题化合物(产率19％，37mg)。

LCMS：ESI m/z 576[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.26-1.34(m，10H)，1.47-1.56(m，4H)，1.58-1.67(m，2H)，1.81-1.89(m，2H)，2.20(s，3H)，2.25-2.40(m，6H)，2.63-2.72(m，2H)，3.44(s，2H)，4.57-4.65(m，1H)，6.82-6.92(m，2H)，7.02(d，1H)，7.23-7.44(m，8H)，7.55(d，1H)ppm。

实例46

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(5-氯-2-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例40中描述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，40.0mg，89μmol)及5-氯-2-羟基苯甲醛(13.9mg，89μmol)制备标题化合物。

LCMS方法A：RT 2.43min(100％面积)

ES m/z 592[M+H]⁺。

实例47

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(5-氟-2-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例40中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，40.0mg，89μmol)及5-氟-2-羟基苯甲醛(12.5mg，89μmol)制备标题化合物。

LCMS方法A：RT 2.27min(100％面积)

ES m/z 576[M+H]⁺。

实例48

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(2-氯-3-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

将联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯(制备7a，1.116g，2.583mmol)溶解于二氯乙烷(25ml)中且向其中添加2-氯-3-羟基苯甲醛。将所得混合物在室温下搅拌15分钟，随后添加三(乙酰氧基)硼氢化钠(733mg，3.46mmol)。随后将反应于室温下搅拌18小时。通过添加水(2ml)使反应中止且真空去除溶剂。将残余物在二氯甲烷∶甲醇(50ml，以体积计95∶5)与水(20ml)之间分配。干燥有机层(硫酸镁)且在真空中浓缩。使用硅胶柱色谱法以二氯甲烷∶甲醇∶0.88氨(97∶3∶0.3至94∶6∶0.6，以体积计)洗脱来纯化残余物从而提供呈无色玻璃状的标题化合物(产率77％，1.12g)。

LCMS：ESI m/z 592[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.26-1.35(m，10H)，1.45-1.66(m，6H)，1.81-1.87(m，2H)，2.23(s，3H)，2.24-2.34(m，4H)，2.42-2.45(m，2H)，2.62-2.70(m，2H)，3.61(s，2H)，4.57-4.63(m，1H)，6.83(d，1H)，6.92(d，1H)，7.06-7.10(m，1H)，7.22-7.44(m，8H)，7.55(d，1H)ppm。

实例48a

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(2-氯-3-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯萘-1，5-二磺酸盐

将联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(2-氯-3-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯(实例48，87mg，0.15mmol)溶解于甲醇(5ml)中，向其中添加萘-1，5-二磺酸(42.4mg，0.15mmol)。将混合物搅拌2.5小时且在真空中减少溶剂，产生白色沉淀物，通过过滤收集该白色沉淀物从而产生呈白色固体状的标题化合物(产率78％，101mg)。

实例49

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氯-5-氟-2-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例40中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，40.0mg，89μmol)及3-氯-5-氟-2-羟基苯甲醛(15.5mg，89μmol)制备标题化合物。

LCMS方法A：RT 2.37min(100％面积)

ES m/z 610[M+H]⁺。

实例50

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3，5-二氯-4-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例42中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，150mg，0.332mmol)及3，5-二氯-4-羟基苯甲醛(69.7mg，0.365mmol)制备标题化合物从而提供呈白色发泡体状的标题化合物(产率44％，91mg)。

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.23-1.34(m，10H)，1.45-1.56(m，4H)，1.64-1.75(m，2H)，1.89-1.97(m，2H)，2.34(s，3H)，2.42-2.52(m，6H)，2.72-2.81(m，2H)，3.53(s，2H)，4.62-4.69(m，1H)，7.19(s，2H)，7.23-7.44(m，8H)，7.55(d，1H)ppm。

LCMS：ESI m/z 624[M-H]^-

实例51

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-[(2-氟-3-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例43中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，200mg，0.443mmol)及2-氟-3-羟基苯甲醛(Journal of Medicinal Chemistry，1986，29(10)，1982-8；59.1mg，0.422mmol)制备标题化合物。使用硅胶柱色谱法以乙酸乙酯∶甲醇∶0.88氨(100∶0∶0至95∶5∶0.5，以体积计)洗脱来纯化粗产物从而提供呈无色油状的标题化合物(产率61％，156mg)。

LCMS：ESI m/z 576[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.27-1.33(m，10H)，1.46-1.66(m，6H)，1.81-1.87(m，2H)，2.21(s，3H)，2.24-2.34(m，4H)，2.37-2.41(m，2H)，2.61-2.69(m，2H)，3.56(s，2H)，4.56-4.63(m，1H)，6.76-6.79(m，1H)，6.81-6.86(m，1H)，6.90-6.94(m，1H)，7.22-7.44(m，8H)，7.56(d，1H)ppm。

实例52

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3，5-二氯-2-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例40中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，40.0mg，89μmol)及3，5-二氯-2-羟基苯甲醛(17.0mg，89μmol)制备标题化合物。

LCMS方法A：RT 2.34min(100％面积)

ES m/z 626[M+H]⁺。

实例53

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3，5-二氟-4-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例42中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，150mg，0.332mmol)及3，5-二氟-4-羟基苯甲醛(57.7mg，0.365mmol)制备标题化合物从而提供呈白色发泡体状的标题化合物(产率41％，80mg)。

LCMS：ESI m/z 592[M-H]^-

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.25-1.34(m，10H)，1.46-1.56(m，4H)，1.61-1.71(m，2H)，1.83-1.92(m，2H)，2.26(s，3H)，2.35-2.46(m，6H)，2.68-2.77(m，2H)，3.48(s，2H)，4.60-4.66(m，1H)，6.85(d，2H)，7.22-7.44(m，8H)，7.55(d，1H)ppm。

实例54

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(2，4-二氯-3-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例43中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，200mg，0.443mmol)及2，4-二氯-3-羟基苯甲醛(制备10，80.6mg，0.422mmol)制备标题化合物。使用硅胶柱色谱法以乙酸乙酯∶甲醇∶0.88氨(100∶0∶0至95∶5∶0.5，以体积计)洗脱来纯化粗产物从而提供呈无色油状的标题化合物(产率63％，176mg)。

LCMS：ESI m/z 626[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.26-1.34(m，10H)，1.46-1.59(m，4H)，1.63-1.71(m，2H)，1.85-1.93(m，2H)，2.33(s，3H)，2.39-2.43(m，4H)，2.53-2.57(m，2H)，2.69-2.77(m，2H)，3.70(s，2H)，4.60-4.66(m，1H)，6.77(d，1H)，7.18(d，1H)，7.23-7.44(m，8H)，7.55(d，1H)ppm。

实例55

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3，5-二氟-2-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例40中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，40.0mg，89μmol)及3，5-二氟-2-羟基苯甲醛(14.1mg，89μmol)制备标题化合物。

LCMS方法A：RT 2.19min(100％面积)

ES m/z 594[M+H]⁺。

实例56

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3，5-二氯-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

将联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，40.2mg，89μmol)溶解于二甲基甲酰胺(0.5ml)中且添加至含有3，5-二氯-2-羟基苯甲酸(18.4mg，89μmol)的反应容器中。随后向反应混合物中添加1-羟基苯并三唑单水合物(16.4mg，107μmol)的二甲基甲酰胺(0.2ml)溶液、(3-(二甲氨基)丙基)乙基碳化二亚胺盐酸盐(20.5mg，107μmol)的二甲基甲酰胺(0.4ml)溶液及二异丙基乙胺(38.7μl，222μmol)。将反应于室温下搅拌24小时。真空去除溶剂且将残余物在二氯甲烷(2ml)与水(2ml)之间分配。将水相再以二氯甲烷(1ml)萃取且经合并的有机层在真空中浓缩。通过HPLC方法G纯化粗残余物从而提供标题化合物。

LCMS方法G：RT 2.98min(100％面积)

ES m/z 640[M+H]⁺。

实例57

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氯-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例56中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，40.2mg，89μmol)及3-氯-2-羟基苯甲酸(15.4mg，89μmol)制备标题化合物。通过HPLC方法F纯化粗产物且通过HPLC方法G分析从而产生标题化合物。

LCMS方法G：RT 3.06min(100％面积)

ES m/z 606[M+H]⁺。

实例58

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3，4-二氟-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例56中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，40.2mg，89μmol)及3，4-二氟-2-羟基苯甲酸(15.5mg，89μmol)制备标题化合物。通过HPLC方法F纯化粗产物且通过HPLC方法G分析从而产生标题化合物。

LCMS方法G：RT 2.87min(100％面积)

ES m/z 608[M+H]⁺。

实例59

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氟-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例56中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，40.2mg，89μmol)及3-氟-2-羟基苯甲酸(13.9mg，89μmol)制备标题化合物。通过HPLC方法F纯化粗产物且通过HPLC方法G分析以产生标题化合物。

LCMS方法G：RT 3.13min(100％面积)

ES m/z 590[M+H]⁺。

实例60

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4-氯-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例56中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，40.2mg，89μmol)及4-氯-2-羟基苯甲酸(15.4mg，89μmol)制备标题化合物。通过HPLC方法F纯化粗产物且通过HPLC方法G分析以产生标题化合物。

LCMS方法G：RT 3.45min(100％面积)

ES m/z 606[M+H]⁺。

实例61

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4-氟-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例56中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，40.2mg，89μmol)及4-氟-2-羟基苯甲酸(13.9mg，89μmol)制备标题化合物。通过HPLC方法F纯化粗产物且通过HPLC方法G分析以产生标题化合物。

LCMS方法G：RT 3.47min(100％面积)

ES m/z 590[M+H]⁺。

实例62

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4-氯-3-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例56中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，40.2mg，89μmol)及4-氯-3-羟基苯甲酸(15.4mg，89μmol)制备标题化合物。通过HPLC方法F纯化粗产物且通过HPLC方法G分析以产生标题化合物。

LCMS方法G：RT 3.15min(95％面积)

ES m/z 606[M+H]⁺。

实例63

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(2-氟-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例56中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，40.2mg，89μmol)及2-氟-4-羟基苯甲酸(13.9mg，89μmol)制备标题化合物。通过HPLC方法F纯化粗产物且通过HPLC方法G分析以产生标题化合物。

LCMS方法G：RT 3.32min(94％面积)

ES m/z 590[M+H]⁺。

实例64

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(2，3-二氟-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

将联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，2.5g，5.5mmol)溶解于四氢呋喃(85ml)中。向此溶液中添加2，3-二氟-4-羟基苯甲酸(1.16g，6.64mmol)、三乙胺(1.0ml，7.21mmol)、4-二甲氨基吡啶(235mg，1.92mmol)及(3-(二甲氨基)丙基)乙基碳化二亚胺盐酸盐(1.49g，7.75mmol)。将反应混合物在室温下搅拌15分钟，随后在60℃下搅拌18小时。真空去除溶剂且残余物在乙酸乙酯(100ml)与水(75ml)之间分配。将水层进一步以乙酸乙酯(100ml)萃取且将经合并的有机层干燥(硫酸镁)且在真空中浓缩。使用硅胶柱色谱法以二氯甲烷∶甲醇∶0.88氨(100∶0∶0至95∶5∶0.5，以体积计)洗脱来纯化残余物从而提供呈无色油状的标题化合物(产率40％，1.36g)。

LCMS：ESI m/z 608[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.29-1.41(m，10H)，1.47-1.54(m，4H)，1.61-1.73(m，2H)，1.81-1.95(m，2H)，2.35-2.54(m，4H)，2.68-2.83(m，2H)，2.94-3.07(m，3H)，3.25-3.28(m，1H)，3.50-3.54(m，1H)，4.58-4.69(m，1H)，6.69-6.76(m，1H)，6.85-6.93(m，1H)，7.23-7.44(m，7H)，7.55(d，1H)，8.06(d，1H)ppm。

实例65

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(2-氯-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例56中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，40.2mg，89μmol)及2-氯-4-羟基苯甲酸水合物(17.0mg，89μmol)制备标题化合物。通过HPLC方法F纯化粗产物且通过HPLC方法G分析从而产生标题化合物。

LCMS方法G：RT 3.54min(95％面积)

ES m/z 606[M+H]⁺。

实例66

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-{[2-(3-羟基-苯基)-乙酰基]-甲基-氨基}-壬基)-哌啶-4-基酯

使用如实例64中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，2.50g，5.54mmol)及3-羟基苯基乙酸(1.01g，6.64mmol)制备标题化合物。使用硅胶柱色谱法以二氯甲烷∶甲醇∶0.88氨(100∶0∶0至90∶10∶1，以体积计)洗脱来纯化残余物从而提供呈无色油状的标题化合物(产率31％，1.01g)。

将100mg标题化合物悬浮于庚烷中且在50℃下调浆18小时，且随后在室温下调浆2天。通过过滤收集固体从而产生呈白色结晶固体状的标题化合物(57mg)。

LCMS：ESI m/z 586[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.22-1.33(m，10H)，1.36-1.54(m，4H)，1.58-1.67(m，2H)，1.80-1.88(m，2H)，2.24-2.35(m，4H)，2.63-2.70(m，2H)，2.90-2.99(m，3H)，3.33-3.39(m，2H)，3.66-3.68(d，2H)，4.57-4.62(m，1H)，6.64-6.71(m，3H)，7.09-7.13(m，1H)，7.23-7.44(m，8H)，7.55(d，1H)ppm。

实例67

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(5-氟-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例56中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，40.2mg，89μmol)及5-氟-2-羟基苯甲酸(13.9mg，89μmol)制备标题化合物。通过HPLC方法F纯化粗产物且通过HPLC方法G分析从而产生标题化合物。

LCMS方法G：RT 3.95min(100％面积)

ES m/z 590[M+H]⁺。

实例68

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(5-氯-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

使用如实例56中所述的相同方法自联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，40.2mg，89μmol)及5-氯-2-羟基苯甲酸(15.4mg，89μmol)制备标题化合物。通过HPLC方法F纯化粗产物且通过HPLC方法G分析从而产生标题化合物。

LCMS方法G：RT 3.78min(100％面积)

ES m/z 606[M+H]⁺。

实例69

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氟-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯

向联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-甲基氨基-壬基)-哌啶-4-基酯二盐酸盐(制备7，4.47g，9.90mmol)的四氢呋喃(150ml)溶液中添加3-氟-4-羟基苯甲酸(1.85g，11.9mmol)、三乙胺(2.07ml，14.8mmol)、N，N-二甲氨基吡啶(484mg，3.96mmol)及(3-(二甲氨基)丙基)乙基碳化二亚胺盐酸盐(2.66g，13.9mmol)。将混合物在室温下搅拌15分钟且随后在60℃下搅拌18小时。再添加3-氟-4-羟基苯甲酸(308mg，2.0mmol)且在60℃下将反应再加热18小时。真空去除溶剂且残余物在乙酸乙酯(200ml)与水(150ml)之间分配。进一步以乙酸乙酯(200ml)萃取水层且将经合并的有机层经硫酸镁干燥且在真空中浓缩。将残余物溶解于甲醇/水(115ml/23ml)中、以碳酸钾(12.9g，93.2mmol)处理且在50℃下加热18小时。真空去除溶剂且残余物在二氯甲烷(200ml)与水(200ml)之间分配。将有机层以盐水(100ml)洗涤且在真空中浓缩。通过硅胶柱色谱法以二氯甲烷∶甲醇∶880氨(100∶0∶0至95∶5∶0.5，以体积计)洗脱来纯化残余物从而提供呈油性发泡体状的标题化合物(产率52％，3.01g)。

LCMS：APCI ESI m/z 590[M+H]⁺

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝1.12-1.40(m，10H)，1.45-1.54(m，2H)，1.56-1.68(m，4H)，1.81-1.91(m，2H)，2.29-2.40(m，4H)，2.64-2.75(m，2H)，3.01(s，3H)，3.34-3.53(m，2H)，4.58-4.65(m，1H)，6.92-6.96(m，1H)，7.05(d，1H)，7.12(d，1H)，7.23-7.44(m，8H)，7.55(d，1H)ppm。

HPLC方法

方法A：

方法D：

方法F：

方法G：

对人类重组M₃蕈毒碱受体的基于细胞的效能评定

在经NFAT-β内酰胺酶基因转染的CHO-K1细胞中测定M₃效能。重组表达人类蕈毒碱M₃受体的CHO(中国仓鼠卵巢)细胞经NFAT_β-Lac_Zeo质体转染。使细胞在具有Glutamax-1、补充以25mMHEPES(Life Technologies 32430-027)、含有10％FCS(胎牛血清；SigmaF-7524)、1nM丙酮酸钠(Sigma S-8636)、NEAA(非必需氨基酸；Invitrogen 11140-035)及200μg/ml吉欧霉素(Zeocin)(InvitrogenR250-01)的DMEM中生长。

hM₃β-内酰胺酶检测方案

在37℃下、在含有5％CO₂的氛围中，使用与细胞一起培育的无酶细胞分离液(enzyme free cell Dissociation Solution)(Lifetechnologies 13151-014)，当细胞达到80-90％汇合时，采集细胞用于检测。将经分离的细胞收集于温热生长培养基中且在2000rpm下离心10分钟，在PBS(磷酸盐缓冲生理食盐水；Life Technologies14190-094)中洗涤且如刚才所描述再次离心。将细胞以2×10⁵个细胞/毫升再悬浮于生长培养基(组成如上所述)中。将20μl的该细胞悬浮液添加至384孔黑色透明底板(Greiner Bio One 781091-PFI)的每一孔中。所用检测缓冲液为补充以0.05％Pluronic F-127(Sigma9003-11-6)及2.5％DMSO的PBS。使用在37℃/5％CO₂下与细胞一起培育4小时的80nM氨基甲酰基胆碱(Aldrich N240-9)来刺激蕈毒碱M₃受体信号转导且在培育期结束时使用Tecan SpectraFluor+板阅读器(λ-激发波长405nm，发射波长450nm及503nm)进行监控。在4小时培育期开始时，将测试中的M₃受体拮抗剂添加到检测中且化合物活性测量为氨基甲酰基胆碱诱发的信号的浓度依赖性抑制。将抑制曲线作图且使用4参数S形拟合产生IC₅₀值且使用Cheng-Prusoff校正及检测中的氨基甲酰基胆碱的K_D值将其转化为Ki值。

对人类重组M₃蕈毒碱受体的结合亲和力评定

膜制备

将来自重组表达人类蕈毒碱M₃受体的CHO(中国仓鼠卵巢)细胞的细胞颗粒在20mM HEPES(pH 7.4)中均质化且在4℃下、在48000×g下离心20分钟。将颗粒再悬浮于缓冲液中且重复均质化及离心步骤。将所得颗粒再悬浮于1ml缓冲液/ml初始堆积细胞体积(originalpacked cell volume)中且重复均质化步骤。对于悬浮液执行蛋白质估测且将约1mg/ml的1ml等分试样冷冻于-80℃下。

hM₃竞争结合检测方案

在RT(室温)下、在1ml聚苯乙烯96孔深孔板中将膜(5微克/孔)与³H-NMS(在5×K_D的浓度下)+/-测试化合物一起培育24小时。最终检测体积为200μl，其包含：20μl+/-测试化合物；20μl3H-NMS(Perkin Elmer NEN 636)及160μl膜溶液。总结合以0.1％DMSO定义；非特异性结合以1μM阿托品(Atropine)定义。检测缓冲液为20mM Hepes(pH 7.4)。

一旦添加所有检测组份，将板覆盖且在室温下伴以震荡培育24小时。使用Packard filtermate采集器，通过迅速滤过以0.5％聚亚乙基亚胺(polyethylenimine)预浸泡的GF/B Unifilter板来终止检测，随后将过滤板以3×1ml4℃检测缓冲液洗涤。将过滤板在45℃下干燥1小时。将过滤板的底部密封且添加50微升/孔的Microscint“0”，将板顶部以Topseal密封。90分钟之后，在NXT Topcount上读取板的读数(每孔1分钟读取时间)。

所得数据表示为特异性结合的百分比(特异性结合＝总结合-非特异性结合)。将特异性结合％相对于测试化合物浓度作图以使用内部数据分析程序自S形曲线测定IC₅₀。通过应用Cheng-Prussoff方程式将IC₅₀值校正为Ki值：

Cheng-Prussoff方程式：

$K_i=\frac{{\mathrm{IC}}_{50}}{1+\left[L\right]/K_D}$

其中IC₅₀为未标记的药物抑制特异性放射性配体结合达50％的浓度。[L]为游离放射性配体浓度且K_D及K_i分别为放射性配体及未标记的药物的平衡解离常数。

因此已发现已在以上检测中加以测试的本发明式(I)化合物展示如在下表中列出的hM₃受体拮抗活性：

n.d.-未测定

豚鼠气管测定

挑出称重350-450g的雄性Dunkin-Hartley豚鼠在升高浓度的CO₂中杀死，接着将腔静脉放血。将自喉至胸腔进入点的气管切开且随后在室温下置于新鲜、含氧、改良克氏(Krebs)缓冲溶液(含有10μM普萘洛尔(propranolol)、10μM胍乙啶(guanethidine)及3μM吲哚美辛(indomethacin)的克氏溶液)中。通过将与气管肌相对的软骨切穿来打开气管。切割约3-5个软骨环宽的条带。在条带的一端将棉线连接至软骨以便连接至力转换器且在另一端产生棉圈以将组织锚定于器官浴(organ bath)中。将条带插于充满温热(37℃)充气改良克氏溶液的5ml器官浴中。将泵流动速率设定为1.0毫升/分钟且将组织连续洗涤。将组织置于1000mg的初始张力下。15及30分钟之后，将组织重拉伸，随后使其再平衡30-45分钟。

使组织经受以下参数的电场刺激(EFS)：每2分钟的10秒波列(train)、0.1毫秒脉冲宽度、10Hz及10-30V。在所陈述范围内，将电压每10分钟升高5V直至观察到每一组织的最大收缩反应。随后将每一组织的此恰好最大电压贯穿用于剩下的实验中。在相对于EFS平衡20分钟之后，停止泵，且15分钟之后在8-10分钟时间内获得对照读数(4-5次反应)。随后在30×Ki(在过滤结合测定中，对表达于CHO细胞中的人类M₃受体进行测定)下，将化合物以浓注剂量添加至每一组织，且保持培育2小时。随后以改良克氏溶液快速洗涤1分钟将化合物自组织洗去且对于剩下的实验而言，将流量恢复至1毫升/分钟。在实验结束时，将组织以组织胺(1μM)激发以测定生存力。使用

软件自动地收集在实验期间获得的读数。考虑EFS反应抑制的测量值，将原始数据转化为反应百分比。开始洗脱之后，记录组织自所诱发的抑制恢复25％所耗的时间且将其用作化合物作用持续时间的量度。组织生存力将实验持续时间限制于化合物洗脱后16小时。通常在n＝2至5下测试化合物以估计作用持续时间。

或者也可使用以下豚鼠气管检测：

将气管自雄性Dunkin-Hartley豚鼠(重量350-450g)取出且在取出粘连结缔组织之后，贯穿与气管肌相对的软骨划出一切口且制备3-5个软骨环宽的气管条带。将气管条带悬浮于等角应变计与固定组织钩之间，其中以水平面位于5ml组织浴中的肌肉处于1g的初始张力下，且浸泡于含有3μM吲哚美辛及10μM胍乙啶的温热(37℃)充气(95％O₂/5％CO₂)克氏溶液中。将组织定位于平行铂丝电极(约1厘米间隙)之间。使用蠕动泵维持穿过组织浴的新鲜克氏溶液(具有以上组成)的恒定1毫升/分钟流量。使组织平衡一小时，其中在自平衡时间开始的15分钟及30分钟时重拉伸至1g。在平衡结束时，将组织使用以下参数进行电场刺激(EFS)：10V、10Hz 0.1毫秒脉冲宽度，及每2分钟10秒波列。在每一组织中，在10V-30V范围内构建电压反应曲线(保持所有其他刺激参数恒定)以测定恰好最大刺激。如由通过1μM河豚毒素或1μM阿托品进行阻断所证实，使用这些刺激参数，EFS反应为100％神经介导的并且是100％胆碱能的。随后以2分钟间隔重复地刺激组织直至反应为可重现的。在添加研究化合物之前20分钟停止蠕动泵且将最后10分钟内的平均抽搐收缩记录为对照反应。将研究化合物添加至组织浴中，且每一组织接受单一浓度的化合物且使其平衡2小时。添加后2小时，记录EFS反应的抑制且使用针对来自同一动物的气管条带的一系列化合物浓度产生IC₅₀曲线。随后迅速洗涤组织且重新进行克氏溶液的1毫升/分钟灌注。再刺激组织16小时且记录EFS反应的恢复。在16小时结束时，将10μM组织胺添加至组织浴中以证实组织生存力。自IC₅₀曲线识别拮抗剂的恰好最大浓度(产生＞70％但小于100％抑制的测试浓度)且计算接受此浓度的组织中所诱发的抑制恢复25％所耗的时间(T₂₅)。通常在n＝2至5下测试化合物以估计作用持续时间。

评定药物-药物相互作用可能性

如已在上文中陈述，化合物的药物-药物相互作用的可能性可使用可通过遵循

软件的用户准则来容易地产生的活体外代谢数据且根据本领域技术人员熟知的标准方案通过市售软件(例如

)来模拟。举例而言，葡萄糖醛酸反应数据可使用与Kilford等人，Drugmetabolism and Disposition，第37卷，第1期，第82-89页中所描述的参考方法类似的方法来测定。

Claims (10)

1.一种式(I)化合物：

或其药物学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药物学上可接受的溶剂化物，其中：

X选自-CH₂-、-C(＝O)CH₂-、-C(＝O)-；

R¹为H或甲基或当X为-CH₂-时，则R¹也可表示下式基团：

其中R⁶、R⁷、R⁸及R⁹中之一为羟基，R⁶、R⁷、R⁸及R⁹中之一为卤素，R⁶、R⁷、R⁸及R⁹中之一为H，且R⁶、R⁷、R⁸及R⁹中之一选自H或卤素；

R²、R³、R⁴及R⁵中之一为羟基，R²、R³、R⁴及R⁵中之一为H，R²、R³、R⁴及R⁵中之一为卤素，且R²、R³、R⁴及R⁵中之一为H或卤素，或者当X为-C(＝O)CH₂-且R¹为甲基时，则R⁴也可为羟基，而R²、R³及R⁵为H。

2.如权利要求1的化合物，或其药物学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药物学上可接受的溶剂化物，其选自：

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-氯-4-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-氟-3-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-氯-5-氟-2-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[2-(3-氯-4-羟基-苯基)-乙酰氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-氯-3-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-氟-4-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(4-氟-3-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-氟-2-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(5-氟-2-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3，5-二氯-2-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(4-氯-2-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-{[2-(3-氯-4-羟基-苯基)-乙酰基]-甲基-氨基}-壬基)-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4-氟-3-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氯-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-{[2-(3-氟-4-羟基-苯基)-乙酰基]-甲基-氨基}-壬基)-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(4-氯-3-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-氟-4-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3，5-二氯-4-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3，5-二氯-4-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯萘-1，5-二磺酸盐；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2，3-二氟-4-羟基-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-5-氯-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(4-羟基-3，5-二氯-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-4-氟-苯甲酰氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3，5-二氟-4-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-4，5-二氯-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-3，5-二氟-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-3-氟-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-3，5-二氯-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(5-氯-2-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-4-氯-5-氟-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-氯-4-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2-羟基-5-氟-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(3-羟基-4-氟-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2，4-二氯-3-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(4-羟基-3-氟-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[双-(2-氯-3-羟基-苄基)-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氟-2-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4，5-二氯-2-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4-氟-3-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4-氯-5-氟-2-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氯-4-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氟-4-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(5-氯-2-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(2-氯-3-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3，5-二氯-4-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(2-氟-3-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3，5-二氟-4-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(2，4-二氯-3-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3，5-二氟-2-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3，5-二氯-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氯-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3，4-二氟-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氟-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4-氯-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4-氟-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(4-氯-3-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(2，3-二氟-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-{[2-(3-羟基-苯基)-乙酰基]-甲基-氨基}-壬基)-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(5-氟-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(5-氯-2-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯及

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氟-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯。

3.如权利要求1的化合物，或其药物学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药物学上可接受的溶剂化物，其选自：

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-{[2-(3-氯-4-羟基-苯基)-乙酰基]-甲基-氨基}-壬基)-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氯-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-[9-(2，4-二氯-3-羟基-苄氨基)-壬基]-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(2-氯-3-羟基-苄基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(2，3-二氟-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯；

联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-{[2-(3-羟基-苯基)-乙酰基]-甲基-氨基}-壬基)-哌啶-4-基酯及

联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氟-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯。

4.如权利要求1的化合物，其为联苯-2-基-氨基甲酸1-(9-{[2-(3-羟基-苯基)-乙酰基]-甲基-氨基}-壬基)-哌啶-4-基酯或其药物学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药物学上可接受的溶剂化物。

5.如权利要求1的化合物，其为联苯-2-基-氨基甲酸1-{9-[(3-氟-4-羟基-苄酰基)-甲基-氨基]-壬基}-哌啶-4-基酯，或其药物学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药物学上可接受的溶剂化物。

6.一种药物组合物，其包含至少有效量的如权利要求1至5中任一项的式(I)化合物或其药物学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药物学上可接受的溶剂化物。

7.如权利要求1至5中任一项的式(I)化合物，或其药物学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药物学上可接受的溶剂化物，其用作药物。

8.如权利要求1至5中任一项的式(I)化合物，或其药物学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药物学上可接受的溶剂化物，其用于治疗选自由以下组成的组的疾病、病症及病状：

慢性或急性支气管收缩、慢性支气管炎、小气管阻塞及肺气肿；

任何类型、病因或发病机制的阻塞性或炎症性气管疾病，尤其为选自由以下组成的组的成员的阻塞性或炎症性气管疾病：慢性嗜酸细胞性肺炎，慢性阻塞性肺病(COPD)，包括慢性支气管炎、肺气肿或与COPD相关或不相关的呼吸困难的COPD，以不可逆、进行性气管阻塞为特征的COPD，成人呼吸窘迫综合征(ARDS)，其他药物疗法引起的气管过度反应恶化及与肺性高血压相关的气管疾病；

任何类型、病因或发病机制的支气管炎，尤其为选自由以下组成的组的成员的支气管炎：急性支气管炎、急性喉气管支气管炎、花生仁吸入性支气管炎、卡他性支气管炎、格鲁布性支气管炎、干性支气管炎、传染性哮喘性支气管炎、增生性支气管炎、葡萄球菌性或链球菌性支气管炎及肺泡性支气管炎；

任何类型、病因或发病机制的气喘，尤其为选自由以下组成的组的成员的气喘：变应性气喘、非变应性气喘、过敏性气喘、变应性支气管I gE介导的气喘、支气管气喘、特发性气喘、真性气喘、由病理生理障碍所引起的内源性气喘、由环境因素所引起的外源性气喘、未知或不明病因的特发性气喘、非变应性气喘、支气管性气喘、肺气肿性气喘、运动诱发性气喘、过敏原诱发性气喘、冷空气诱发性气喘、职业性气喘、由细菌、真菌、原虫或病毒感染所引起的感染性气喘、非过敏性气喘、早期气喘、喘鸣婴儿综合征及细支气管炎；

急性肺损伤；及

任何类型、病因或发病机制的支气管扩张，尤其为选自由以下组成的组的成员的支气管扩张：柱状支气管扩张、囊状支气管扩张、梭形支气管扩张、细支气管扩张、囊性支气管扩张、干性支气管扩张及滤泡性支气管扩张。

9.如权利要求1至5中任一项的式(I)化合物，或其药物学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药物学上可接受的溶剂化物，其用于治疗选自由以下组成的组的疾病、病症及病状：炎症性肠道疾病、肠易激疾病、憩室病、动晕症、胃溃疡、肠的放射学检查、BPH(良性前列腺肥大)的对症治疗、NSAID诱发性胃溃疡、尿失禁(包括尿急、尿频、急迫性尿失禁、膀胱过动症、夜尿症及下泌尿道症状)、睫状肌麻痹、扩瞳及帕金森氏症。

10.一种如权利要求1至5中任一项的式(I)化合物，或其药物学上可接受的盐，或所述化合物或盐的药物学上可接受的溶剂化物与选自以下的其他治疗剂的组合：

(a)5-脂氧合酶(5-LO)抑制剂或5-脂氧合酶活化蛋白(FLAP)拮抗剂；

(b)白三烯拮抗剂(LTRA)，包括LTB₄、LTC₄、LTD₄及LTE₄的拮抗剂；

(c)组织胺受体拮抗剂，包括H1及H3拮抗剂；

(d)用于减轻充血的α1-及α2-肾上腺素受体激动剂血管收缩拟交感神经剂；

(e)PDE抑制剂，包括PDE3、PDE4及PDE5抑制剂；

(f)β2受体激动剂；

(g)茶碱；

(h)色甘酸钠；

(i)COX抑制剂，非选择性及选择性COX-1或COX-2抑制剂(NSAID)；

(j)前列腺素受体拮抗剂及前列腺素合成酶抑制剂；

(k)经口及吸入糖皮质类固醇；

(l)肾上腺皮质激素受体的解离激动剂(DAGR)；

(m)针对内因性发炎实体具有活性的单克隆抗体；

(n)抗肿瘤坏死因子(抗TNF-α)剂；

(o)粘附分子抑制剂，包括VLA-4拮抗剂；

(p)激肽-B₁-受体及B₂-受体拮抗剂；

(q)免疫抑制剂，包括IgE路径抑制剂及环孢菌素；

(r)基质金属蛋白酶(MMP)的抑制剂；

(s)速激肽NK₁、NK₂及NK₃受体拮抗剂；

(t)蛋白酶抑制剂，诸如弹性酶抑制剂；

(u)腺苷A2a受体激动剂及A2b拮抗剂；

(v)尿激酶抑制剂；

(w)作用于多巴胺受体的化合物，诸如D2激动剂；

(x)NFκβ路径的调节剂，诸如IKK抑制剂；

(y)细胞因子信号转导路径(诸如p38MAP激酶、PI3激酶、JAK激酶、syk激酶、EGFR或MK-2)的调节剂；

(z)可归类为粘液溶解药或止咳药的药剂；

(aa)增强对于吸入皮质类固醇的反应的药剂；

(bb)有效对抗可移生呼吸道中的微生物的抗生素及抗病毒剂；

(cc)HDAC抑制剂；

(dd)CXCR2拮抗剂；

(ee)整合素拮抗剂；

(ff)趋化因子；

(gg)上皮钠通道(ENaC)阻断剂或上皮钠通道(ENaC)抑制剂；

(hh)P2Y2激动剂及其他核苷酸受体激动剂；

(ii)血栓素抑制剂；

(jj)PGD₂合成及PGD₂受体(DP1及DP2/CRTH2)的抑制剂；

(kk)烟碱；及

(ll)粘附因子，包括VLAM、ICAM及ELAM。