CN102068450A - 桃叶珊瑚苷在制备抗血栓形成药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及桃叶珊瑚苷在制备预防血栓形成药物中的应用，属于药物制备技术领域。本发明公开了桃叶珊瑚苷在制备预防血栓形成药物中的应用及一种由桃叶珊瑚苷为药效成分的预防血栓形成的药物，组分如下，均为重量份：桃叶珊瑚苷10～99份，药学上可接受的载体1～90份。发明人经研究中发现桃叶珊瑚苷具有抑制ADP引起的血小板凝集的作用。这与以往报道的桃叶珊瑚苷用途都不同。为预防和治疗血小板凝集引起的血栓形成性疾病提供了新的途径。

Description

桃叶珊瑚苷在制备抗血栓形成药物中的应用

技术领域

本发明涉及桃叶珊瑚苷在制备预防血栓形成药物中的应用，属于药物制备技术领域。

背景技术

血栓性疾病的发病率逐年增高，如何进行有效的预防、诊断和治疗，已受到国内外普遍重视。在活体的心血管内，血液发生凝固或血液中某些有形成分析出、凝集形成固体质块的过程，称为血栓形成(thrombosis)。与血凝块不同的是，血栓是在血液流动的状态下形成的，是由于血小板的活化和凝血因子被激活而发生的异常凝固。血栓形成的条件目前公认是由Virchow提出的三个条件：血管壁损伤(包括机械损伤和内皮细胞功能紊乱等)、血流滞缓和血液高凝状态。

血管壁损伤引起的止血过程是一种受到严密调控的机体防御体制。血管壁的损伤，暴露了内皮下的胶原纤维和血友病因子，然后，血小板通过胶原蛋白受体和GPIb与胶原纤维和血友病因子结合，使血小板活化并黏附到损伤的血管壁上。活化的血小板释放α颗粒(含有纤维蛋白原、纤维连接蛋白、抗肝素即血小板第4因子、血小板生长因子及血小板所合成的凝血酶敏感蛋白)和致密颗粒(含有丰富的ADP、Ca²⁺离子、去甲肾上腺素、组胺、5羟色胺)。促使血小板彼此粘集的因子主要是ADP、血栓素A2和凝血酶。活化的血小板释放的ADP启动了血小板凝集反应。血小板通过ADP受体GPIIb(CD41)和纤维蛋白原(fibrinogen)相互黏集在一起。在ADP量少的情况下，所形成的血小板凝集块是可恢复性的，即一旦血流加速，凝集成堆的血小板仍可一一散开；但随着血小板越积越多，活化后释出的ADP也愈多，凝集堆逐渐成为不可恢复性的。随后，组织因子(TF)与激活的凝血因子VII(FVIIa)结合，激活凝血因子X(FXa)。FXa进一步激活血小板释放的和血浆中的凝血因子Va(FVa)。FXa和FVa共同作用将凝血酶原激活成凝血酶。反过来，凝血酶又可以激活更多的血小板。最终导致血管损伤部位的凝血。凝血过程异常就会引起血栓症的发生。

不少事实表明血流滞缓是血栓形成的重要因素。由于比重的关系，在正常流速和正常流向的血液内，红细胞和白细胞在血流的中轴(轴流)，外层是血小板，流动得较红、白细胞缓慢，是外围是一层血浆带(边流)，将血液的有形成分和血管壁隔绝，阻止血小板和内膜接触。当血流缓慢或血流产生漩涡时，血小板得以进入边流，增加了和血管内膜接触的机会，血小板粘连于内膜的可能性必然增大。

血小板的粘附是血栓形成的第一步。无论心或动脉、静脉内的血栓，其形成过程都从血小板粘附于内膜裸露的胶原开始。因此，抑制血小板的粘附和聚集对于血栓疾病的预防和治疗非常重要。

随着人们生活水平的提高和人口的日渐老龄化，血栓性疾病的发病率逐年攀升。因此，开发疗效好的预防血栓形成的药物，具有重要的社会意义和经济意义。人工合成的抑制血小板凝集的药物由于不可避免的毒副反应成为进入临床的重要障碍。相对而言，天然、安全、可药食两用的中药抗血小板凝集药物具有独特优势。

桃叶珊瑚苷(aucubin)是一种环烯醚萜苷类化合物，为白色粉末或结晶，易溶于水、甲醇，溶于乙醇，不溶于乙醚、氯仿、苯及石油醚，结构如下：

桃叶珊瑚苷存在于传统中药杜仲、车前草、地黄等多种中药中，主要来源是通过在天然植物提取，也有人运用细胞工程方法，在杜仲的愈伤组织培养出桃叶珊瑚苷。从经济角度看，由于可供提取桃叶珊瑚苷的植物大多廉价易得，使工业化提取、药理实验、毒性实验、临床研究以及利用桃叶珊瑚苷研制新药成为可能。

研究表明桃叶珊瑚苷具有抗病毒，抗炎，抗骨质疏松，抗肿瘤，神经营养，抗氧化及延缓衰老等作用。并未发现相关桃叶珊瑚苷具有抑制ADP引起的血小板凝集的作用的文献报道。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供桃叶珊瑚苷在制备预防血栓形成药物中的应用。

桃叶珊瑚苷在制备预防血栓形成药物中的应用。

所述血栓形成是指心肌梗塞、脑梗塞、肺栓塞血栓性疾病。

一种由桃叶珊瑚苷为药效成分的预防血栓形成的药物，组分如下，均为重量份：

桃叶珊瑚苷10～99份，药学上可接受的载体1～90份。

所述药学上可接受的载体包括：药剂学意义上的填充剂75～90％(重量百分比)、黏合剂1～5％(重量百分比)、崩解剂5～20％(重量百分比)。

上述填充剂选自淀粉、预胶化淀粉、糊精、乳糖、微晶纤维素、甘露醇；所述的粘合剂选自羟丙甲纤维素、聚维酮、淀粉浆、糊精、胶浆或纤维素及其衍生物；所述的崩解剂选自羟丙基纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚维酮或交联羧甲基纤维素钠。

优选的，所述药物，组分如下，均为重量份：

桃叶珊瑚苷10份，乳糖或微晶纤维素0.5～2份，淀粉浆0.8～2份，羟丙基纤维素或羧甲基淀粉钠0.5～2份，组成常规压制片剂(0.1～0.5克)。

更优的，所述药物，组分如下，均为重量份：

桃叶珊瑚苷10份，乳糖或微晶纤维素0.8～1.2份，淀粉浆0.9～1.5份，羟丙基纤维素或羧甲基淀粉钠0.8～1.2份；

优选的，所述药物，组分如下，均为重量份：

桃叶珊瑚苷10份，乳糖或微晶纤维素0.3～0.8份，羟丙甲纤维素K4M 1.5～4份，组成常规片剂。

更优的，所述药物，组分如下，均为重量份：

桃叶珊瑚苷10份，乳糖或微晶纤维素0.5～0.7份，羟丙甲纤维素K4M 2～3份。

上述药学上可接受的载体还包括润滑剂0.1～3％(重量百分比)。

所述的润滑剂选自硬脂酸镁、硅酸镁、氢化植物油、十二烷基硫酸镁、聚乙二醇或微粉硅胶。

优选的，所述药物，组分如下，均为重量份：

桃叶珊瑚苷10份，淀粉或预胶化淀粉8～20份，硬脂酸镁或微粉硅胶0.3～0.5份，灌装成胶囊。

更优的，所述药物，组分如下，均为重量份：

桃叶珊瑚苷10份，淀粉或预胶化淀粉8～20份，硬脂酸镁或微粉硅胶0.3～0.36份。

本发明所述的桃叶珊瑚苷可由从天然产物中提取得到，如从车前科、杜仲科植物中提取分离得到；也可以来源于化工合成的产品。

本发明所述药物的给药途径可为肠道或非肠道给药，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔黏膜、皮肤、腹膜或直肠等。上述给药途径可以单一或多种搭配使用，这受限于给药医生临床经验及包括同时运用其他治疗手段的给药方案。

本发明所述药物组合物的给药剂量取决于许多因素，例如所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物的性别、年龄、体重、个体反应，给药途径给药次数、治疗目的，因此本发明的治疗剂量可以有较大范围的变化，可以根据本发明化合物组合物中的单位制剂剂量，加以适当的调整，以达到其治疗有效量的要求，完成本发明的预防或治疗目的。本发明化合物的每天合适剂量范围为0.1～50mg/kg体重，优选为50mg～1000mg/天/人。

本发明有益效果如下：

1、发明人经研究中发现桃叶珊瑚苷具有抑制ADP引起的血小板凝集的作用。这与以往报道的桃叶珊瑚苷用途都不同。为预防和治疗血小板凝集引起的血栓形成性疾病提供了新的途径。

2、本发明中的抗血小板凝集剂-桃叶珊瑚苷来源于中药，已经作为传统疗法使用了几千年，安全性高。急性毒性实验表明桃叶珊瑚苷是无毒的。药物研发基础好，原材料经现代分离提纯手段，活性大大提高，有利于充分发挥药效成分。

3、经一系列的实验证明，本发明所述的药物在预防血栓形成方面具有显著效果，能够显著抑制动静脉旁路血栓形成，显著抑制ADP诱导的大鼠血液凝集。

具体实施方法

下面结合实施例，对本发明做进一步阐述，但本发明所保护范围不限于此。

实施例中所述羟丙甲基纤维素K4M和微晶纤维素购自安徽山河药用辅料有限公司，桃叶珊瑚苷购自上海同田生物技术有限公司。

为了更好的理解本发明实质内容并进一步阐明桃叶珊瑚苷可应用于制备预防血栓形成药物，下面用桃叶珊瑚苷的药理实验及结果来说明其在制药领域中的新用途。

实施例1：

一种由桃叶珊瑚苷为药效成分的预防血栓形成的药物，每百克含有如下组分：

桃叶珊瑚苷50克，预胶化淀粉49克，微粉硅胶0.5克，硬脂酸镁0.5克。

将上述药物过筛混合均匀，灌装成100mg/粒的胶囊。

实施例2：

一种由桃叶珊瑚苷为药效成分的预防血栓形成的药物，每百克含有如下组分：

桃叶珊瑚苷50克，淀粉37.5克，聚维酮3克，胶浆(瓜儿胶)4克，甘露醇5克，硬脂酸镁0.5克，混合均匀，并控制粒在35～80μm，直接压片即得桃叶珊瑚苷压制片1000片。

实施例3：桃叶珊瑚苷对大鼠动静脉旁路血栓的影响

取SD大鼠50只，雌雄各半，体重200～300克。按照体重随机分为5组，每组10只。第一组从尾静脉注射等体积的生理盐水。第二组从尾静脉注射100mg/kg阿司匹林。第3～5组分别从尾静脉注射50，100，200mg/kg桃叶珊瑚苷。15min后，用戊巴比妥钠30mg/kg麻醉，仰卧固定，手术分离一侧大鼠的颈总动脉和另一侧的颈外静脉，在聚乙烯管中放一长6cm的F4手术线，用50000U/L肝素的生理盐水充满聚乙烯管，然后将该聚乙烯管一端插入左颈外静脉，再将此管的另一端插入右颈总动脉中，开放动脉夹，立即计时。20min后中断血流，迅速取出丝线称量，称取的总质量减去丝线质量即为血栓湿质量，将给药组与生理盐水组进行比较，结果见表1。桃叶珊瑚苷低中高剂量组对形成的血栓湿重有明显的抑制作用，且呈一定的剂量依赖性，200mg/kg桃叶珊瑚苷处理组降低血栓湿重的程度与血塞通相当，说明桃叶珊瑚苷具有减缓血栓形成的功效。

表1 桃叶珊瑚苷对大鼠静脉血栓形成的影响

组别	剂量	血栓的湿重mg
			对照		45.32±12.18
血塞通	10mg/kg	19.29±2.46
			桃叶珊瑚苷	50mg/kg	31.71±8.45
桃叶珊瑚苷	100mg/kg	25.63±7.24
			桃叶珊瑚苷	200mg/kg	20.56±4.26

实施例4：桃叶珊瑚苷对大鼠血小板聚集的影响

取SD大鼠50只，雌雄各半，随机分为五组：正常对照组、阿司匹林(100mg/kg)组、桃叶珊瑚苷(50，100，200mg/kg)组。正常对照组每次灌喂生理盐水，给药组分别给予相应剂量药物，每天2次，共5次，末次给药60min后，摘眼球取血。装至有质量分数为3.8％枸橼酸钠溶液的硅化试管中，血与抗凝剂体积比为9∶1，轻轻混匀后，离心制备富血小板血浆(PRP)和贫血小板血浆(PPP)。

分别取180μl PPP和PRP于比浊管中。将含PPP比浊管放入聚集仪的测定孔中，使透光度调节到100，然后将含PRP比浊管放入聚集仪的测定孔中预热5分钟。最后向各实验组的比浊管中加入20μl ADP(200μM)，观察各实验组的PRP在5分钟内的最大聚集率，计算药物抑制聚集的百分率，结果见表2。结果表明，桃叶珊瑚苷有十分明显的抑制血小板聚集的作用。

表2 桃叶珊瑚苷对ADP诱导的血小板聚集的影响

组别	剂量	最大聚集率(％)	聚集抑制率(％)
				对照		55.42±6.24	---
阿司匹林	100mg/kg	20.46±3.28	63.08
				桃叶珊瑚苷	50mg/kg	38.32±7.56	30.86
桃叶珊瑚苷	100mg/kg	26.75±7.51	51.73
				桃叶珊瑚苷	200mg/kg	22.48±5.39	59.44

实施例5：桃叶珊瑚苷对家兔血小板聚集性的影响

实验时从家兔心脏取血，以3.8％枸橼酸钠抗凝(9∶1)，混匀。分装于试管中，1000转/分离心10分钟(20～25℃条件下)，小心吸取上层液，即富含血小板血浆(PRP)，室温下放置备用。余下的血浆再3000转/分，离心10min，分离贫小板血浆(PPP)。

将桃叶珊瑚苷按不同浓度配制后，取20μl药液加入含180μl PRP比浊管中置于37℃孵育4分钟。由PPP调零后，用微量进液器在不同比色杯中加入20μl ADP(2mM)，观察各实验组的PRP在5分钟内的最大聚集率，计算药物抑制聚集的百分率，结果见表3。结果表明，桃叶珊瑚苷明显抑制体外血小板的聚集，并具有一定的剂量依赖性，高剂量组(200μg/ml)的聚集抑制率与肝素钠相当，说明桃叶珊瑚苷可能通过抑制血小板凝集发挥抑制血栓形成的作用。

表3 桃叶珊瑚苷对体外血小板聚集的影响

组别	剂量	最大聚集率(％)	聚集抑制率(％)
				对照		86.57±5.22	---
肝素钠	25U/ml	25.31±4.62	70.76
				桃叶珊瑚苷	50μg/ml	52.20±6.47	39.70
桃叶珊瑚苷	100μg/ml	31.77±5.64	63.30
				桃叶珊瑚苷	200μg/ml	22.29±4.76	74.25

Claims (10)

1.桃叶珊瑚苷在制备预防血栓形成药物中的应用。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述血栓形成是指心肌梗塞、脑梗塞、肺栓塞血栓性疾病。

3.一种由桃叶珊瑚苷为药效成分的预防血栓形成的药物，组分如下，均为重量份：

桃叶珊瑚苷10～99，药学上可接受的载体1～90。

4.如权利要求3所述的药物，其特征在于，所述药学上可接受的载体包括：药剂学意义上的填充剂75～90％(重量百分比)、黏合剂1～5％(重量百分比)、崩解剂5～20％(重量百分比)。

5.如权利要求4所述的药物，其特征在于，上述填充剂选自淀粉、预胶化淀粉、糊精、乳糖、微晶纤维素或甘露醇；所述的粘合剂选自羟丙甲纤维素、聚维酮、淀粉浆、糊精、胶浆或纤维素及其衍生物；所述的崩解剂选自羟丙基纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚维酮或交联羧甲基纤维素钠。

6.如权利要求5所述的药物，其特征在于，所述药物，组分如下，均为重量份：

桃叶珊瑚苷10份，乳糖或微晶纤维素0.5～2份，淀粉浆0.8～2份，羟丙基纤维素或羧甲基淀粉钠0.5～2份，制成常规片剂；优选的，桃叶珊瑚苷10份，乳糖或微晶纤维素0.8～1.2份，淀粉浆0.9～1.5份，羟丙基纤维素或羧甲基淀粉钠0.8～1.2份。

7.如权利要求5所述的药物，其特征在于，组分如下，均为重量份：

桃叶珊瑚苷10份，乳糖或微晶纤维素0.3～0.8份，羟丙甲基纤维素K4M 1.5～4份，制成常规片剂；优选的，桃叶珊瑚苷10份，乳糖或微晶纤维素0.5～0.7份，羟丙甲基纤维素K4M 2～3份。

8.如权利要求4所述的药物，其特征在于，上述药学上可接受的载体还包括润滑剂0.1～3％(重量百分比)，所述的润滑剂选自硬脂酸镁、硅酸镁、氢化植物油、十二烷基硫酸镁、聚乙二醇或微粉硅胶。

9.如权利要求8所述的药物，其特征在于，组分如下，均为重量份：

桃叶珊瑚苷10份，淀粉或预胶化淀粉8～20份，硬脂酸镁或微粉硅胶0.3～0.5份，灌装成胶囊。

10.如权利要求9所述的药物，其特征在于，组分如下，均为重量份：

桃叶珊瑚苷10份，淀粉或预胶化淀粉8～20份，硬脂酸镁或微粉硅胶0.3～0.36份。