CN102048796A - 一种红景天提取物的检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种药物检测方法，特别涉及红景天提取物的检测方法。所述检测方法可以更加准确的把握有关药品的质量，降低用药风险，提高产品质量。

Description

一种红景天提取物的检测方法

技术领域

本发明涉及一种药物检测方法，特别涉及红景天提取物的检测方法。

背景技术

红景天提取物是红景天块根及根茎经过加工提取得到的名贵药材。其主治功能：脑缺氧、抗疲劳、活血止血、清肺止咳、化淤消肿、解热退烧、滋补元气等功效外用治跌打损伤和烧烫伤。

红景天提取物为现有技术，其制备，检测和应用见中国药典等文献。

现有红景天提取物存在质量控制方法简单，产品质量不易控制的缺点，从而将影响产品的生产和保证质量。

为有效控制产品质量，我们建立了本发明的质量控制方法，该方法采用液相色谱技术，同时采用中红外广谱测定。

利用红外指纹谱图可以对中药提取物各生产环节进行质量控制：首先，利用不同提取物FT-IR谱图的特征性进行快速鉴别；其次，将提取物与相应的原药材比较，可以看到经过炮制、加热、水提后，提取物谱图与原药材之间的差异性；再则，对于使用不同炮制方法处理的提取物，该方法可以检测它们之间的差异，并可以大致判断所使用辅料；并且，对于不同厂家的提取物产品，以及同一厂家不同生产批号的浓缩颗粒产品，都可进行快速有效的鉴别。这为产品的真伪优劣鉴别、质量标准控制提供了一种先进、快速的分析手段。

因此本发明的质量控制方法精密度、灵敏度、稳定性均好，确保产品质量的“安全、均一、稳定、有效、可控”。使该药物生产标准化，达到疗效确切，质量稳定，工艺先进合理的目的。

发明内容

本发明提供的是针对红景天提取物的质量控制方法，本发明所述质量控制方法包括以下内容：对含有的成分红景天苷和酪醇的含量进行含量测定，对红景天提取物的中红外一维光谱图和标准品中红外一维光谱图进行图谱对照。

因此，本发明的质量控制方法其主要的内容是对红景天提取物的成分进行检测。该方法可以更加准确的把握有关药品的质量，降低用药风险，提高产品质量。

本发明的检测方法，其中各种数据均为实验获得，在实际操作过程中会有误差，该误差在±20％以内均可，因此本发明的方法中的数值为在本发明记载的数值基础上±20％以内。

任何人在±20％以内使用本发明的数值均落在本发明范围内。

本发明提供一种红景天提取物的检测方法，本发明的检测方法，包括对红景天提取物中药物成分红景天苷和酪醇的含量测定方法，含量测定方法采用高效液相色谱技术。

具体步骤如下：

采用高效液相色谱法测定，

色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基键合硅胶为填充物，以甲醇和水的混合物为流动相，检测波长为260-270nm，流速1ml/min，柱温30℃。理论塔板数按红景天苷峰计算应不低于2000。

对照品溶液的制备：取红景天苷5-20mg和酪醇5-20mg，置100ml的棕色容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

供试品溶液的制备：取红景天提取物0.5-2g，加甲醇50ml，超声提取，过滤，即得。

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液10ul，注入液相色谱仪，按外标法测定，即得。

本品含红景天苷不得少于1.5％，酪醇含量不得少于0.3％。

本发明还提供一种红景天提取物的中红外图谱测定检测方法，所述方法包括对红景天提取物和红景天提取物标准品进行中红外图谱测定，比较两者中红外一维光谱图的相似性，具体步骤如下：

1)空白扫描：压片：将溴化钾制成的溴化钾空白片，扫描：将压好的空白片放入扫描室中，扫描开始，录制光谱图，

2)样品扫描：样品处理：取红景天提取物过筛备用，取红景天提取物，溴化钾制成的样品片，将压好的样品片放入扫描室中；扫描开始，录制样品图谱，将图谱进行T％A转化和归一化，得到样品一维谱图，

3)标准对照品的扫描：取红景天提取物标准对照品，依照样品相同的方法进行处理，压片，扫描，T％A转化和归一化，

4)图谱的比较：相似度判定标准：样品的图谱和相似度应大于0.98。

优选的步骤如下：

空白扫描，压片：精密称取干燥的溴化钾细粉200mg；置于玛瑙研钵中充分研磨混匀，将溴化钾细粉移置于直径13mm的压膜中，铺布均匀，加压至0.8-1.0Gpa，保持1min，制成的溴化钾空白片，目视检查应均匀透明，无明显颗粒，扫描：将压好的空白片放入扫描室中，扫描开始。录制光谱图。

样品扫描，样品处理：取红景天提取物100g，粉碎，过80目筛备用。压片：精密称取红景天提取物3mg；精密称取干燥的溴化钾细粉200mg；置于玛瑙研钵中充分研磨混匀，将细粉移置于直径13mm的压膜中，铺布均匀，加压至0.8-1.0Gpa，保持1min，制成的样品片，目视检查应均匀，无明显颗粒，扫描：将压好的样品片放入扫描室中；扫描开始，样品图谱自动保存。T％A转化和归一化：在原图谱基础上，用T％A转化图谱，再归一化得到新生成的一维谱图。

标准对照品的扫描，取红景天提取物对照品，依照样品相同的方法进行处理，压片，扫描，T％A转化和归一化。

图谱的比较：一维光谱图，在4000-450波数范围内，峰形与对照品的一维光谱图一致。相似度判定标准：红景天提取物相似度应大于0.98。

本发明的测定方法，准确度高，灵敏度高，精确度高，对保证产品质量维护用药安全具有重要意义。

附图说明

图1为对照品一维谱图。

具体实施方式

通过以下实施例进一步说明本发明，但不作为本发明的限制。

实施例1：

高效液相色谱法测定红景天提取物中药物成分红景天苷和酪醇含量

照高效液相色谱法(附录VID)测定

3含量测定

3.1色谱条件与系统适用性实验以十八烷基键合硅胶为填充物；流动相：甲醇∶水(100∶430)；检测波长为276nm，流速1ml/min，柱温30℃。理论塔板数按红景天苷峰计算应不低于2000。

3.2对照品溶液的制备精密称取红景天苷10mg和酪醇10mg，置100ml的棕色容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得(每1ml中含红景天苷和酪醇各100μm)。

3.3供试品溶液的制备取本品粉末(过三号筛)1g，加甲醇50ml，超声提取30分钟，离心(2500转/分钟)15分钟，用0.45um的微孔滤膜过滤，即得。

3.4测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液10ul，注入液相色谱仪，按外标法测定，即得。

本品含红景天苷不得少于1.5％，酪醇含量不得少于0.3％。

实施例2：

红景天提取物和红景天提取物标准品进行中红外图谱测定，比较一维光谱的相似性，具体步骤如下：

2样品处理：取红景天提取物100g，粉碎，过80目筛备用。

3.仪器准备

3.1仪器开机：将主机右后侧电源开关按钮调整到“ON”状态，等待15秒左右，待仪器面板上左侧一排四个指示灯全部变绿。

3.2程序启动：双击桌面上标有“Spectrum v5.3.1”的图标，进入“Login”状态；联机状态时“Instrument”选项处于“1.Spectrum One”状态；未联机时“Instrument”选项处于“Work Offline”状态。(其它项如初始化显示勿动，以下均同)

3.3程序自检：进入程序后陆续自动弹出三个自检对话框，依次点击确定即可。

3.4能量检测：点击“Instrument”选项中“Monitor”选项，弹出“Dispaly”选项卡，能量自动显示；“Energy”实际值应大于等于额定值，不得低于3800。

4.Blackground扫描

4.1压片：精密称取干燥的溴化钾细粉200mg；置于玛瑙研钵中充分研磨混匀，将溴化钾细粉移置于直径13mm的压膜中，铺布均匀，加压至0.8～1.0Gpa，保持1min，制成的溴化钾空白片，目视检查应均匀透明，无明显颗粒。

4.2扫描

4.2.1将压好的空白片放入扫描室中；点击“Instrument”选项中“Scan”选项，弹出“Spectrum One Scan and Instrument Setup”选项卡，选取“Scan”选项页；“Opitions”选项将“Scan Type”选中“Blackground”；“Duration”选项将“Scan Number”设为“16”。

4.2.2选取“Sample”选项页；其中“Name”选项中填写“bk”；点击选项卡右侧“Scan”按钮，出现“Apply”按钮，继续点击，扫描开始。

4.2.3用溴化钾制成的空白片，录制光谱图，除去3340cm^-1与1630cm^-1附近因残留或附着水而呈现一定的吸收峰外，其它区域不应出现大于基线3％透过率的吸收谱带。视窗图中Blackground谱图左起点高于纵坐标所示值35，即为有效谱图。

5Sample扫描

5.1压片：精密称取红景天提取物3mg；精密称取干燥的溴化钾细粉200mg；置于玛瑙研钵中充分研磨混匀，将细粉移置于直径13mm的压膜中，铺布均匀，加压至0.8～1.0Gpa，保持1min，制成的样品片，目视检查应均匀，无明显颗粒。

5.2扫描

5.2.1将压好的样品片放入扫描室中；点击“Instrument”选项中“Scan”选项，弹出“Spectrum One Scan and Instrument Setup”选项卡，选取“Scan”选项页；“Opitions”选项将“Scan Type”选中“Sample”；“Duration”选项将“Scan Number”设为“16”；

5.2.2选取“Sample”选项页；其中“Name”选项中填写样品名称，命名为名称拼音加批号，小于10个字节；点击选项卡右侧“Scan”按钮，出现“Apply”按钮，继续点击，扫描开始，样品图谱自动保存。

5.2.3样品所制成的供试品片最高峰值控制在20％透过以上；基线一般控制在70％透过以上。

6光谱特征

6.1一维谱参数设置：“Setup”项下“Options”页中“Peak”条目“Find”选中“Peak”，“％T”设为“2.00”其它设置如初始化状态不变。

6.2T％A转化：在视窗中打开一张原谱，点击“Process”选项中“Absorbance”。

6.3归一化：选中T％A转化图谱，点击“Process”选项中“Baseline Correction”选项，选取“Automatic Correction”选项；保存新生成的谱图。

6.4对照谱图：6.4标准对照品的扫描，取红景天提取物对照品，依照样品相同的方法进行处理，压片，扫描，T％A转化和归一化。

6.5判定标准：

6.5.1峰形：扫描得到的红景天提取物原谱，经T％A转化处理得到的一维光谱图，在4000-450波数范围内，峰形与6.4对照一维光谱图一致。

6.5.2峰位置：红景天提取物一维光谱图，应在3000-2800波数范围内有一个亚甲基特征峰，为2933±2cm^-1；在1800-1000波数范围内有五个特征峰，分别为1614±2cm^-1；1449±2cm^-1；1374±2cm^-1；1236±2cm^-1；1034±2cm^-1；

6.5.3峰强度：红景天提取物一维光谱图，1034±2cm^-1处峰吸收强度高。

7相似度

7.1操作方法

7.1.1设置对照谱图：点击“Setup”选项中“Compare”选项，弹出“Compare Setup”选项卡，选取“Type”选项页，点击“Browse”选择丹参对照药材一维归一谱图；选取“Regions”选项页，“Sart”设置4000.00cm^-1，“End”设置650.00cm^-1，点击“OK”。

7.1.2相似度比较：点击“Open”选项，打开丹参样品一维归一谱图，然后点击“Process”选项中“Compare”，生成相似度对话框，记录数值，即可。

7.1.3判定标准：红景天提取物相似度应大于0.98。

Claims (5)

1.一种红景天提取物的检测方法，其特征在于，包括对含有的药物成分红景天苷和酪醇的含量进行含量测定，对红景天提取物的中红外一维光谱图和标准品中红外一维光谱图进行图谱对照。

2.权利要求1的检测方法，其中药物成分红景天苷和酪醇的含量测定方法，步骤如下：采用高效液相色谱法测定，

色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基键合硅胶为填充物；流动相：以甲醇和水的混合物为流动相，检测波长为260-270nm，流速1ml/min，柱温30℃。理论塔板数按红景天苷峰计算应不低于2000。

对照品溶液的制备：取红景天苷5-20mg和酪醇5-20mg，置100ml的棕色容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

供试品溶液的制备：取红景天提取物0.5-2g，加甲醇50ml，超声提取，过滤，即得。测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液10ul，注入液相色谱仪，按外标法测定，即得。

计算红景天苷和酪醇的含量，以干燥品计算，样品中含红景天苷不得少于1.5％，酪醇含量不得少于0.3％。

3.权利要求2的检测方法，其中药物成分红景天苷和酪醇的含量测定方法，步骤如下：照2005版中国药典附录VID高效液相色谱法测定

色谱条件与系统适用性实验以十八烷基键合硅胶为填充物；流动相：甲醇∶水(100∶430)；检测波长为276nm，流速1ml/min，柱温30℃。理论塔板数按红景天苷峰计算应不低于2000。

对照品溶液的制备精密称取红景天苷10mg和酪醇10mg，置100ml的棕色容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得(每1ml中含红景天苷和酪醇各100μm)。

供试品溶液的制备取本品粉末(过三号筛)1g，加甲醇50ml，超声提取30分钟，离心(2500转/分钟)15分钟，用0.45um的微孔滤膜过滤，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液10ul，注入液相色谱仪，按外标法测定，即得。

本品含红景天苷不得少于1.5％，酪醇含量不得少于0.3％。

4.权利要求1的测定方法，其中对红景天提取物的中红外一维光谱图和标准对照品中红外一维光谱图进行图谱对照，步骤如下：

1)空白扫描：压片：将溴化钾制成的溴化钾空白片，扫描：将压好的空白片放入扫描室中，扫描开始，录制光谱图，

2)样品扫描：样品处理：取红景天提取物过筛备用，取红景天提取物，溴化钾制成的样品片，将压好的样品片放入扫描室中；扫描开始，录制样品图谱，将图谱进行T％A转化和归一化，得到样品一维谱图，

3)标准对照品的扫描：取红景天提取物标准对照品，依照样品相同的方法进行处理，压片，扫描，T％A转化和归一化，

4)图谱的比较：相似度判定标准：样品的图谱和相似度应大于0.98。

5.权利要求4的测定方法，步骤如下：

空白扫描，压片：精密称取干燥的溴化钾细粉200mg；置于玛瑙研钵中充分研磨混匀，将溴化钾细粉移置于直径13mm的压膜中，铺布均匀，加压至0.8-1.0Gpa，保持1min，制成的溴化钾空白片，目视检查应均匀透明，无明显颗粒，扫描：将压好的空白片放入扫描室中，扫描开始，录制光谱图，

样品扫描，样品处理：取红景天提取物100g，粉碎，过80目筛备用，压片：精密称取红景天提取物3mg；精密称取干燥的溴化钾细粉200mg；置于玛瑙研钵中充分研磨混匀，将细粉移置于直径13mm的压膜中，铺布均匀，加压至0.8-1.0Gpa，保持1min，制成的样品片，目视检查应均匀，无明显颗粒，扫描：将压好的样品片放入扫描室中；扫描开始，样品图谱自动保存，T％A转化和归一化：在原图谱基础上，用T％A转化图谱，再归一化得到新生成的一维谱图，

标准对照品的扫描，取红景天提取物对照品，依照样品相同的方法进行处理，压片，扫描，T％A转化和归一化，

图谱的比较：峰形：扫描得到的红景天提取物原谱，经T％A转化处理得到的一维光谱图，在4000-450波数范围内，峰形与对照一维光谱图一致。

峰位置：红景天提取物一维光谱图，应在3000-2800波数范围内有一个亚甲基特征峰，为2933±2cm^-1；在1800-1000波数范围内有五个特征峰，分别为1614±2cm^-1；1449±2cm^-1；1374±2cm^-1；1236±2cm^-1；1034±2cm^-1；

峰强度：红景天提取物一维光谱图，1034±2cm^-1处峰吸收强度高。

相似度判定标准：红景天提取物相似度应大于0.98。

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