CN102048778B - 一种人参提取物的检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种药物检测方法，特别涉及人参提取物的检测方法。本发明所述检测方法包括以下内容：对含有的成分人参总皂苷含量进行含量测定，对人参提取物的中红外一维光谱图和标准品中红外一维光谱图进行图谱对照。

Description

一种人参提取物的检测方法

技术领域

本发明涉及一种药物检测方法，特别涉及人参提取物的检测方法。

背景技术

人参提取物是五加科植物人参的干燥根经过加工提取得到的名贵药材。其功能：大补元气、固脱生津、安神。

人参提取物为现有技术，其制备，检测和应用见中国药典等文献。

现有人参提取物存在质量控制方法简单，产品质量不易控制的缺点，从而将影响产品的生产和保证质量。

为有效控制产品质量，我们建立了本发明的质量控制方法，该方法采用分光光度法，同时采用中红外广谱测定。

利用红外指纹谱图可以对中药提取物各生产环节进行质量控制：首先，利用不同提取物FT-IR谱图的特征性进行快速鉴别；其次，将提取物与相应的原药材比较，可以看到经过炮制、加热、水提后，提取物谱图与原药材之间的差异性；再则，对于使用不同炮制方法处理的提取物，该方法可以检测它们之间的差异，并可以大致判断所使用辅料；并且，对于不同厂家的提取物产品，以及同一厂家不同生产批号的浓缩颗粒产品，都可进行快速有效的鉴别。这为产品的真伪优劣鉴别、质量标准控制提供了一种先进、快速的分析手段。

因此本发明的质量控制方法精密度、灵敏度、稳定性均好，确保产品质量的“安全、均一、稳定、有效、可控”。使该药物生产标准化，达到疗效确切，质量稳定，工艺先进合理的目的。

发明内容

本发明提供的是针对人参提取物的质量控制方法，本发明所述质量控制方法包括以下内容：对含有的成分人参总皂苷含量进行含量测定，对人参提取物的中红外一维光谱图和标准品中红外一维光谱图进行图谱对照。

因此，本发明的质量控制方法其主要的内容是对人参提取物的成分进行检测。该方法可以更加准确的把握有关药品的质量，降低用药风险，提高产品质量。

本发明的检测方法，其中各种数据均为实验获得，在实际操作过程中会有误差，该误差在±20％以内均可，因此本发明的方法中的数值为在本发明记载的数值基础上±20％以内。

任何人在±20％以内使用本发明的数值均落在本发明范围内。

本发明提供一种人参提取物的检测方法，本发明的检测方法，包括对人参提取物中药物成分人参总皂苷的含量测定方法，含量测定方法采用分光光度法。

具体步骤如下：

标准曲线测定：取人参皂苷Re对照品5-15.0mg，置100ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，作为对照品溶液备用；分别精密量取对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8ml，置10ml具塞试管中，水浴蒸干，待冷却后分别加入2.5-10％的香草醛-冰醋酸溶液0.2mL，振摇溶解后加入高氯酸0.8ml，摇匀，置于70℃水浴中加热15min，迅速冷却，各加入冰醋酸5mL，充分振摇，静置10min，以相应试剂为空白，在545nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。得回归方程。

供试品溶液的制备：精密称定人参提取物0.05-0.2克，置50ml量瓶中，加甲醇适量，超声10min溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密取2ml置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

总皂苷含量测定：精密量取供试品溶液2ml，自“置10ml具塞试管中”起，按标准曲线制备项下方法操作，于545nm处测定吸光度，根据回归方程计算样品中总皂甙含量。

本发明还提供一种人参提取物的中红外图谱测定检测方法，所述方法包括对人参提取物和人参提取物标准品进行中红外图谱测定，比较两者中红外一维光谱图的相似性，具体步骤如下：

1)空白扫描：压片：将溴化钾制成的溴化钾空白片，扫描：将压好的空白片放入扫描室中，扫描开始，录制光谱图，

2)样品扫描：样品处理：取人参提取物过筛备用，取人参提取物，溴化钾制成的样品片，将压好的样品片放入扫描室中；扫描开始，录制样品图谱，将图谱进行T％A转化和归一化，得到样品一维谱图，

3)标准对照品的扫描：取人参提取物标准对照品，依照样品相同的方法进行处理，压片，扫描，T％A转化和归一化，

4)图谱的比较：相似度判定标准：样品的图谱和相似度应大于0.98。

优选的步骤如下：

空白扫描，压片：精密称取干燥的溴化钾细粉200mg；置于玛瑙研钵中充分研磨混匀，将溴化钾细粉移置于直径13mm的压膜中，铺布均匀，加压至0.8-1.0Gpa，保持1min，制成的溴化钾空白片，目视检查应均匀透明，无明显颗粒，扫描：将压好的空白片放入扫描室中，扫描开始。录制光谱图。

样品扫描，样品处理：取人参提取物100g，粉碎，过80目筛备用。压片：精密称取人参提取物3mg；精密称取干燥的溴化钾细粉200mg；置于玛瑙研钵中充分研磨混匀，将细粉移置于直径13mm的压膜中，铺布均匀，加压至0.8-1.0Gpa，保持1min，制成的样品片，目视检查应均匀，无明显颗粒，扫描：将压好的样品片放入扫描室中；扫描开始，样品图谱自动保存。T％A转化和归一化：在原图谱基础上，用T％A转化图谱，再归一化得到新生成的一维谱图。

标准对照品的扫描，取人参提取物对照品，依照样品相同的方法进行处理，压片，扫描，T％A转化和归一化。

图谱的比较：一维光谱图，在4000-450波数范围内，峰形与对照品的一维光谱图一致。相似度判定标准：人参提取物相似度应大于0.98。

本发明的测定方法，准确度高，灵敏度高，精确度高，对保证产品质量维护用药安全具有重要意义。

附图说明

图1为对照品一维谱图。

具体实施方式

实施例1：

测定人参提取物中药物成分人参总皂苷的含量

标准曲线测定  精密称取人参皂苷Re对照品10.0mg，置100ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，作为对照品溶液备用；分别精密量取对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8ml，置10ml具塞试管中，水浴蒸干，待冷却后分别加入5％的香草醛-冰醋酸溶液0.2mL，振摇溶解后加入高氯酸0.8ml，摇匀，置于70℃水浴中加热15min，迅速冷却，各加入冰醋酸5mL，充分振摇，静置10min，以相应试剂为空白，在545nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。得回归方程。

供试品溶液的制备  精密称定人参提取物约0.1克，置50ml量瓶中，加甲醇适量，超声10min溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密取2ml置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

总皂苷含量测定  精密量取供试品溶液2ml，自“置10ml具塞试管中”起，按标准曲线制备项下方法操作，于545nm处测定吸光度，根据回归方程计算样品中总皂甙含量。

实施例2：

人参提取物和人参提取物标准品进行中红外图谱测定，比较一维光谱的相似性，具体步骤如下：

2样品处理：取人参提取物100g，粉碎，过80目筛备用。

3.仪器准备

3.1仪器开机：将主机右后侧电源开关按钮调整到“ON”状态，等待15秒左右，待仪器面板上左侧一排四个指示灯全部变绿。

3.2程序启动：双击桌面上标有“Spectrum v5.3.1”的图标，进入“Login”状态；联机状态时“Instrument”选项处于“1.Spectrum One”状态；未联机时“Instrument”选项处于“Work Offline”状态。(其它项如初始化显示勿动，以下均同)

3.3程序自检：进入程序后陆续自动弹出三个自检对话框，依次点击确定即可。

3.4能量检测：点击“Instrument”选项中“Monitor”选项，弹出“Dispaly”选项卡，能量自动显示；“Energy”实际值应大于等于额定值，不得低于3800。

4.Blackground扫描

4.1压片：精密称取干燥的溴化钾细粉200mg；置于玛瑙研钵中充分研磨混匀，将溴化钾细粉移置于直径13mm的压膜中，铺布均匀，加压至0.8~1.0Gpa，保持1min，制成的溴化钾空白片，目视检查应均匀透明，无明显颗粒。

4.2扫描

4.2.1将压好的空白片放入扫描室中；点击“Instrument”选项中“Scan”选项，弹出“Spectrum One Scan and Instrument Setup”选项卡，选取“Scan”选项页；“Opitions”选项将“Scan Type”选中“Blackground”；“Duration”选项将“Scan Number”设为“16”。

4.2.2选取“Sample”选项页；其中“Name”选项中填写“bk”；点击选项卡右侧“Scan”按钮，出现“Apply”按钮，继续点击，扫描开始。

4.2.3用溴化钾制成的空白片，录制光谱图，除去3340cm^-1与1630cm^-1附近因残留或附着水而呈现一定的吸收峰外，其它区域不应出现大于基线3％透过率的吸收谱带。视窗图中Blackground谱图左起点高于纵坐标所示值35，即为有效谱图。

5Sample扫描

5.1压片：精密称取人参提取物3mg；精密称取干燥的溴化钾细粉200mg；置于玛瑙研钵中充分研磨混匀，将细粉移置于直径13mm的压膜中，铺布均匀，加压至0.8~1.0Gpa，保持1min，制成的样品片，目视检查应均匀，无明显颗粒。

5.2扫描

5.2.1将压好的样品片放入扫描室中；点击“Instrument”选项中“Scan”选项，弹出“Spectrum One Scan and Instrument Setup”选项卡，选取“Scan”选项页；“Opitions”选项将“Scan Type”选中“Sample”；“Duration”选项将“Scan Number”设为“16”；

5.2.2选取“Sample”选项页；其中“Name”选项中填写样品名称，命名为名称拼音加批号，小于10个字节；点击选项卡右侧“Scan”按钮，出现“Apply”按钮，继续点击，扫描开始，样品图谱自动保存。

5.2.3样品所制成的供试品片最高峰值控制在20％透过以上；基线一般控制在70％透过以上。

6光谱特征

6.1一维谱参数设置：“Setup”项下“Options”页中“Peak”条目“Find”选中“Peak”，“％T”设为“2.00”其它设置如初始化状态不变。

6.2T％A转化：在视窗中打开一张原谱，点击“Process”选项中“Absorbance”。

6.3归一化：选中T％A转化图谱，点击“Process”选项中“BaselineCorrection”选项，选取“Automatic Correction”选项；保存新生成的谱图。

6.4对照谱图：6.4标准对照品的扫描，取人参提取物对照品，依照样品相同的方法进行处理，压片，扫描，T％A转化和归一化。

6.5判定标准：

6.5.1峰形：扫描得到的人参提取物原谱，经T％A转化处理得到的一维光谱图，在4000-450波数范围内，峰形与6.4对照一维光谱图一致。

6.5.2峰位置：人参提取物一维光谱图，应在3000-2800波数范围内有一个亚甲基特征峰，为2931±2cm^-1；在1800-1000波数范围内有五个特征峰，分别为1605±2cm^-1；1412±2cm^-1；1390±2cm^-1；1074±2cm^-1；1050±2cm^-1；

6.5.3峰强度：人参提取物一维光谱图，1050±2cm^-1处峰吸收强度高。

7相似度

7.1操作方法

7.1.1设置对照谱图：点击“Setup”选项中“Compare”选项，弹出“CompareSetup”选项卡，选取“Type”选项页，点击“Browse”选择丹参对照药材一维归一谱图；选取“Regions”选项页，“Sart”设置4000.00cm^-1，“End”设置650.00cm^-1，点击“OK”。

7.1.2相似度比较：点击“Open”选项，打开丹参样品一维归一谱图，然后点击“Process”选项中“Compare”，生成相似度对话框，记录数值，即可。

7.1.3判定标准：人参提取物相似度应大于0.98。

Claims (3)

1.一种人参提取物的检测方法，其特征在于，包括对含有的药物成分人参总皂苷的含量进行含量测定，对人参提取物的中红外一维光谱图和标准品中红外一维光谱图进行图谱对照，

其中，药物成分人参总皂苷的含量测定方法，步骤如下：

标准曲线测定：取人参皂苷Re对照品5-15.0mg，置100ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，作为对照品溶液备用；分别精密量取对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8ml，置10ml具塞试管中，水浴蒸干，待冷却后分别加入2.5-10％的香草醛-冰醋酸溶液0.2mL，振摇溶解后加入高氯酸0.8ml，摇匀，置于70℃水浴中加热15min，迅速冷却，各加入冰醋酸5mL，充分振摇，静置10min，以相应试剂为空白，在545nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程；

供试品溶液的制备：精密称定人参提取物0.05-0.2克，置50ml量瓶中，加甲醇适量，超声10min溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密取2ml置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；

总皂苷含量测定：精密量取供试品溶液2ml，自“置10ml具塞试管中”起，按标准曲线制备项下方法操作，于545nm处测定吸光度，根据回归方程计算样品中总皂甙含量；其中，对人参提取物的中红外一维光谱图和标准对照品中红外一维光谱图进行图谱对照，步骤如下：

1)空白扫描：压片：将溴化钾制成的溴化钾空白片，扫描：将压好的空白片放入扫描室中，扫描开始，录制光谱图，

2)样品扫描：样品处理：取人参提取物过筛备用，取人参提取物，溴化钾制成的样品片，将压好的样品片放入扫描室中；扫描开始，录制样品图谱，将图谱进行T％A转化和归一化，得到样品一维谱图，

3)标准对照品的扫描：取人参提取物标准对照品，依照样品相同的方法进行处理，压片，扫描，T％A转化和归一化，

4)图谱的比较：相似度判定标准：样品的图谱和相似度应大于0.98。

2.权利要求1的检测方法，其特征在于，药物成分人参总皂苷的含量测定方法，步骤如下：

标准曲线测定：精密称取人参皂苷Re对照品10.0mg，置100ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，作为对照品溶液备用；分别精密量取对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8ml，置10ml具塞试管中，水浴蒸干，待冷却后分别加入5％的香草醛-冰醋酸溶液0.2mL，振摇溶解后加入高氯酸0.8ml，摇匀，置于70℃水浴中加热15min，迅速冷却，各加入冰醋酸5mL，充分振摇，静置10min，以相应试剂为空白，在545nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程；

供试品溶液的制备：精密称定人参提取物约0.1克，置50ml量瓶中，加甲醇适量，超声10min溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密取2ml置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；

总皂苷含量测定：精密量取供试品溶液2ml，自“置10ml具塞试管中”起，按标准曲线制备项下方法操作，于545nm处测定吸光度，根据回归方程计算样品中总皂甙含量。

3.权利要求1的测定方法，其特征在于，对人参提取物的中红外一维光谱图和标准对照品中红外一维光谱图进行图谱对照，步骤如下：

空白扫描，压片：精密称取干燥的溴化钾细粉200mg；置于玛瑙研钵中充分研磨混匀，将溴化钾细粉移置于直径13mm的压膜中，铺布均匀，加压至0.8-1.0Gpa，保持1min，制成的溴化钾空白片，目视检查应均匀透明，无明显颗粒，扫描：将压好的空白片放入扫描室中，扫描开始，录制光谱图，

样品扫描，样品处理：取人参提取物100g，粉碎，过80目筛备用，压片：精密称取人参提取物3mg；精密称取干燥的溴化钾细粉200mg；置于玛瑙研钵中充分研磨混匀，将细粉移置于直径13mm的压膜中，铺布均匀，加压至0.8-1.0Gpa，保持1min，制成的样品片，目视检查应均匀，无明显颗粒，扫描：将压好的样品片放入扫描室中；扫描开始，样品图谱自动保存，T％A转化和归一化：在原图谱基础上，用T％A转化图谱，再归一化得到新生成的一维谱图，

标准对照品的扫描，取人参提取物对照品，依照样品相同的方法进行处理，压片，扫描，T％A转化和归一化，

图谱的比较：峰形：扫描得到的人参提取物原谱，经T％A转化处理得到的一维光谱图，在4000-450波数范围内，峰形与对照一维光谱图一致；

峰位置：人参提取物一维光谱图，应在3000-2800波数范围内有一个亚甲基特征峰，为2931±2cm^-1；在1800-1000波数范围内有五个特征峰，分别为1605±2cm^-1；1412±2cm^-1；1390±2cm^-1；1074±2cm^-1；1050±2cm^-1；

峰强度：人参提取物一维光谱图，1050±2cm^-1处峰吸收强度高；

相似度判定标准：人参提取物相似度应大于0.98。

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