CN102036662B - 利用肉豆蔻衣木脂素预防和治疗ppar介导的疾病的方法 - Google Patents

利用肉豆蔻衣木脂素预防和治疗ppar介导的疾病的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN102036662B
CN102036662B CN2006800230079A CN200680023007A CN102036662B CN 102036662 B CN102036662 B CN 102036662B CN 2006800230079 A CN2006800230079 A CN 2006800230079A CN 200680023007 A CN200680023007 A CN 200680023007A CN 102036662 B CN102036662 B CN 102036662B
Authority
CN
China
Prior art keywords
macelignan
ppar
present
obesity
body weight
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN2006800230079A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102036662A (zh
Inventor
黄在宽
韩奎利
孙钟熙
金我真
秋政翰
李在英
金正焕
金道彦
郑熹徹
郑栽润
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Newtree Co Ltd
Original Assignee
Newtree Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from KR1020050055539A external-priority patent/KR100627643B1/ko
Priority claimed from KR1020050056692A external-priority patent/KR20070001326A/ko
Application filed by Newtree Co Ltd filed Critical Newtree Co Ltd
Publication of CN102036662A publication Critical patent/CN102036662A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102036662B publication Critical patent/CN102036662B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/357—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having two or more oxygen atoms in the same ring, e.g. crown ethers, guanadrel
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Paper (AREA)
  • Heterocyclic Compounds That Contain Two Or More Ring Oxygen Atoms (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

本发明涉及治疗PPAR介导的疾病的方法，其特征在于将有效量的下式的肉豆蔻衣木脂素或其药学上可接受的盐施用至受试者。本发明的肉豆蔻衣木脂素通过作为PPAR的配体而发挥作用，从而活化PPAR，因此具有预防和治疗PPAR介导的疾病的效果。所以，本发明的肉豆蔻衣木脂素可用于预防和治疗PPAR介导的疾病，例如糖尿病和糖尿病并发症。

Description

利用肉豆蔻衣木脂素预防和治疗PPAR介导的疾病的方法
技术领域
本发明涉及通过将有效量肉豆蔻衣木脂素(macelignan)或其药学上可接受的盐施用于受试者治疗PPAR介导的疾病的方法。
背景技术
过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)是一种核内受体，其以使得过氧化物酶体的量增加的化合物，即过氧化物酶体增殖剂为配体，并且已知它的亚型体有PPARα、PPARδ和PPARγ(J.Steroid Biochem.Molec.Biol.，51，157，1994；Gene Expression，4，281，1995；Biochem.Biophys.Res.Commun.，224，431，1996)。
PPAR主要调控与脂肪代谢有关的基因或与脂肪细胞分化有关的基因的表达(J.Invest.Dermatol.111，1116-1121，1998；J.Med.Chem.，43，527-550，2000)。已发现PPAR的异构体PPARα主要在肝脏、视网膜以及脂肪组织中表达，而且参与了脂肪酸的氧化、毒性物质的中和或炎症反应。已经发现PPARγ主要在脂肪细胞、免疫细胞、肾上腺、脾脏以及小肠中表达，并且已知其作为脂肪细胞分化的主要介质发挥作用。PPARδ表达范围广泛，但表达具有非组织特异性，其机能了解的不清楚(Endocrinology.，137，354，1996)。
由于PPAR在脂肪代谢方面扮演着重要角色，已经开展了许多用于开发与PPAR有关的代谢性疾病治疗剂的研究。已经探明，在PPARα活化时，肝脏中使脂肪酸的分解增加、脂肪酸合成降低的酶的表达升高，从而甘油三酯的合成以及VLDL(极低密度脂蛋白)的生成以及分泌也降低。并且也探明了，PPARα的活化在使脂肪分解酶LPL(脂蛋白脂肪酶)活化的同时，还使诱导VLDL生成的apoC-III的生成减少(Curr.Pharm Des.，3：1-14，1997)。已知，作为PPARα配体的贝特类(fibrate)使甘油三酯减少20-50％，并使LDL减少，而增加HDL(Atherosclerosis，171：1-13，2-3)。所以，PPARα可用于治疗甘油三酯的积累造成的肥胖病以及血脂异常、心血管疾病(Curr.Opin.Lipidol.，10：245-257，1999)。
另外，PPARγ的活化导致脂肪细胞的糖感受性(sugar receptability)被最大化，刺激脂肪细胞分化并降低胰岛素抵抗(Tren.Pharmacol.Sci.，25：331-336，2004)。因此，PPARγ配体能用作治疗胰岛素抵抗引起的非胰岛素依赖型糖尿病(2型糖尿病)的药物，目前如匹格列酮和罗西格列酮之类的TZD药物作为PPARγ的配体用作治疗非胰岛素依赖型糖尿病的药物。
如上所述，因为PPAR是治疗包括糖尿病、糖尿病并发症或类似病症在内的代谢疾病的靶标，所以至今已有许多开发PPAR配体用于活化PPAR的尝试。美国专利6,939,875公开了用于治疗PPAR介导的疾病而使用的组合物，所述组合物对非胰岛素依赖型糖尿病、肥胖症、进食障碍疾患(eating disorders)、食欲低下(suppressing appetite)、瘦素水平调制(leptin level modulation)、代谢综合症(metabolic syndrome)有疗效。另外，美国专利6,967,212公开了关于具有PPAR激动剂作用、且含有取代的吡咯酸衍生物的组合物，所述组合物对胰岛素抵抗、高血糖症、高胰岛素症、高脂血症、肥胖症、X综合症、代谢异常综合症、炎症、糖尿病并发症(diabetic complications)、糖稳态受损、糖耐量减低、高甘油三酸酯血症(hypertriglyceridemia)或者动脉硬化症(atherosclerosis)等具有疗效。除此之外，已知其它治疗PPAR介导的各种疾病的物质(美国专利6,930,120、美国专利7,041,691和美国专利7,037,914)。
但是，由于目前已知的PPAR配体引起对肝脏的毒性、低血糖症状以及肥胖症等副作用，有必要开发出毒性等副作用小的、天然物质来源的能够活化PPAR的配体，然而对从天然物质中开发能够活化PPAR的配体的研究极少。
与此同时，肉豆蔻(Myristica fragrans)是热带栽培的多年生植物，作为其果实的肉豆蔻衣(mace)或肉豆蔻(nutmeg)自古用作香料。肉豆蔻衣木脂素是从肉豆蔻中发现的代表性木脂素类化合物(Phytochemistry，59：169-17，2002)，已经报道其具有诱导细胞凋亡的半胱氨酸蛋白酶3活性的增强作用(Biol.Pharm.Bull.，27：1305-1307，2004)，针对口腔微生物的抗菌活性(韩国专利公报：10-2005-0035954)以及抑制脂质过氧化以及活性氧生成的效果(Biochem.Biophys.Res.Commu.，331：1264-1269)等。但是，还没有针对肉豆蔻衣木脂素和PPAR之间的关系的研究报告。
发明详述
本文中，本发明的发明者们以多种天然物质为来源，为发现能治疗糖尿病、糖尿病并发症、肥胖症和高血脂症等PPAR介导的疾病的物质进行了深入探索，结果发现了从肉豆蔻中分离出的肉豆蔻衣木脂素能活化PPAR，并具有治疗PPAR介导的疾病方面的功效，本发明就是基于此发现而完成。
因此，本发明的目的是提供了治疗PPAR介导的疾病方法，所述方法包括向受试者施用有效量的肉豆蔻衣木脂素或其药学上可接受的盐。
为了实现上述目的，本发明提供了治疗PPAR介导的疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的肉豆蔻衣木脂素或其药学上可接受的盐。
下文对本发明的内容进行更详细的说明。
本发明的特征在于提供了一种治疗PPAR介导疾病的方法，该方法包括向受试者施用有效量的下述化学式(I)的肉豆蔻衣木脂素、或其药学上可接受的盐。
【化学式I】
Figure S2006800230079D00031
本发明所使用的肉豆蔻衣木脂素是从天然材料中分离、纯化而成，或通过市购获得，或通过本领域公知的化学合成法而制得。
优选地，本发明所使用的肉豆蔻衣木脂素是从天然材料中分离、纯化而得到。更优选地，其为从肉豆蔻中分离、纯化而得，最优选地，其为从肉豆蔻或假种皮中分离、纯化而得。另外，也可从其他肉豆蔻科植物，例如Myristica argentea Warb(Nat.Prod.Lett.，16：1-7，2002)、红楠(Machilusthunbergii)(Bio.Pharm.Bull.，27：1305-1307，2004)或蜂巢草(Leucasaspera)(Chem.Pharm.Bull.，51：595-598，2003)等中分离、纯化而得。
优选地，本发明使用的肉豆蔻衣木脂素是根据本领域公知的利用溶剂提取法以及层析法的分离方法而从肉豆蔻中分离、纯化而得。
例如，从肉豆蔻中提取肉豆蔻衣木脂素可使用选自下述溶剂中的任一种或它们的混合溶剂进行提取，所述溶剂例如为：水和有机溶剂，有机溶剂包括如乙醇、甲醇、丙醇、异丙醇、和丁醇等的碳原子数为1-6的醇，还包括丙酮、醚(如乙醚)、氯仿、乙酸乙酯、二氯甲烷、己烷、环己烷、石油醚、二乙醚和苯、或它们的混合物。优选地，该提取使用水或C1～C6醇进行。最优选地，本发明的肉豆蔻衣木脂素利用甲醇为溶剂提取。
提取时，甲醇以肉豆蔻粉末重量的1-20倍添加到肉豆蔻粉末中，但不限于此。优选地，甲醇的添加量为肉豆蔻粉末的2-5倍(重量)，以提高提取率。
肉豆蔻的提取温度优选为常压下的室温。尽管提取时间有赖于提取温度，但提取通常进行6-96小时，优选为36-72小时。另外，提取时使用搅拌器搅拌能进一步提高提取率。
肉豆蔻在收集、洗涤后用于提取，并任选在干燥后提取。可使用如下干燥方法：晒干、阴干、热风干燥和自然干燥。另外，为了提高提取率，可对肉豆蔻或其干体用粉碎机进行粉碎。
从提取物中分离肉豆蔻衣木脂素可使用本领域公知的利用层析的分离方法进行。所述分离方法例如为，提取物利用硅胶柱层析得到不同极性的组分，然后对分离后的特定组分进行反向柱层析和高效液相色谱(HPLC)，以分离肉豆蔻衣木脂素。
根据优选的具体实施方式，本发明使用的肉豆蔻衣木脂素通过下述过程提取：将干燥的肉豆蔻粉碎为20-40目；向所述肉豆蔻粉末添加3倍的甲醇；然后在常温下进行48小时的提取。对上述获得的提取物进行离心，去除沉淀物并回收上清夜，从而制得含有肉豆蔻衣木脂素的肉豆蔻提取物。上述提取物被分离为乙酸乙酯层、丁醇层和水层，对所述乙酸乙酯层进行硅胶柱层析，并使用己烷和乙酸乙酯的混合溶液(10∶1，V/V)进行洗脱，从而得到分离物。对上述组分进一步进行硅胶柱层析，并使用己烷和乙酸乙酯的混合溶液(20∶1，V/V)进行洗脱而获得想要的组分，然后将该组分进行RP-18柱层析，并用80％的甲醇洗脱，从而分离得到肉豆蔻衣木脂素。
本发明的肉豆蔻衣木脂素是PPAR的配体，所以其能活化PPAR，这一点由本发明的发明者们最先证明。
在本发明的一个实施例中，根据检测配体能够结合PPAR而活化具有PPAR反应元件(PPRE)的基因的公知方法确认了本发明使用的肉豆蔻衣木脂素能与PPAR结合，特别是能与PPARα和PPARγ结合，从而使其活化。
PPAR活化时，其与称为PPRE(PPAR反应元件)的DNA序列结合，从而调控目的基因的表达，其中主要是增加与脂肪代谢有关的PPAR目的基因的表达。所以，在本发明的其它实施例中，研究了肉豆蔻衣木脂素是否提高已知的PPAR目的基因的表达，所述目的基因有CD36、CPT-1、PDK4、ACO、LPL和PEPCK。结果，在用肉豆蔻衣木脂素处理时，上述PPAR目的基因的表达明显增加。
同时，PPAR活化时，脂肪细胞的糖感受性被最大化，且刺激脂肪细胞的分化(Trends in Pharmacological Sciences，25：331-336，2004)。从而，在本发明的其它实施例中，检测了本发明的肉豆蔻衣木脂素是否使PPAR活化并进而刺激脂肪细胞的分化。结果确认了本发明使用的肉豆蔻衣木脂素能刺激前体脂肪细胞3T3-L1的脂肪细胞分化(见图10)。
在本发明的一个实施例中，确认了肉豆蔻衣木脂素在患肥胖症糖尿病的小鼠模型中具有如下效果：显著降低体重，治疗或预防肥胖症、由肥胖症诱发的高血脂症以及心血管疾病。同时，在本发明的其它实施例中，确认了肉豆蔻衣木脂素在患肥胖症/糖尿病的小鼠中具有如下效果：通过显著降低血糖来预防或治疗非胰岛素依赖型糖尿病。
这样，确认了本发明的肉豆蔻衣木脂素为使脂肪分解增加的PPARα的配体以及使胰岛素敏感性增加的PPARγ的配体，且本发明的肉豆蔻衣木脂素通过显著降低患肥胖症/糖尿病小鼠模型中的体重和血液中的甘油三酯，从而对包括高脂血症以及心血管疾病在内的肥胖症和代谢性疾病具有抑制作用，而且本发明的肉豆蔻衣木脂素通过使相同模型中的血糖减少而对非胰岛素依赖型糖尿病具有抑制作用。
因此，本发明的肉豆蔻衣木脂素提供了PPAR介导的疾病的治疗方法。
本发明所述的“PPAR介导的疾病”是指由于PPAR的活化而可以预防、治疗、减轻或缓和症状的疾病。优选地，上述PPAR介导的疾病为NIDDM(非胰岛素依赖型糖尿病)、高胰岛素血症、肥胖症、高血糖症、高脂血症、X综合症、高胆固醇血症(hypercholesterolemia)、高脂蛋白血症(hyperlipoproteinemia)、动脉粥样硬化(atherosclerosis)、高血压(hypertension)、胰岛素抵抗(insulin resistance)、代谢障碍综合征(dysmetabolic syndrome)、糖尿病并发症(diabetic complications)、糖稳态受损(impaired glucose homeostasis)、糖耐量受损(impaired glucosetolerance)、高甘油三酯血症(hypertriglyceridemia)、骨质疏松(osteoporosis；J.Biol.Chem.275：14388-14393，2000)、肾小球肾炎(glomerulonephritis；Kidney Int.，60：14-30，2001)、或者糖尿病肾病(KidneyInt.，60：14-30，2001)。
本发明所述治疗PPAR介导疾病的方法包括向受试者施用有效量的具有肉豆蔻衣木脂素或其药学上可接受的盐的组合物。上述“有效量”是指这样一个量，即该量可得到比阴性对照反应更高的反应，优选地，该量是指足以治疗或预防PPAR介导疾病的量。本发明的具有肉豆蔻衣木脂素或其药学上可接受的盐的组合物的有效量为0.1～200mg/天/kg(体重)，优选为1～30mg/天/kg(体重)，但不限于此。但是，上述有效量根据疾病及其严重程度、年龄、体重、健康状况、性别、患者的饮食和排泄、施用途径、施用周期、治疗频率以及与其它药剂的组合等种种因素变化而确定。另外，术语“受试者”是指需要治疗或预防PPAR介导疾病的哺乳动物，所述受试者优选为人。
本发明中所述的肉豆蔻衣木脂素可以以其盐的形式使用，优选以其药物上可接受的盐的形式使用。优选地，上述盐为与药学上可接受的游离酸形成的酸加成盐。对于上述游离酸，可使用有机酸和无机酸，其包括但不限于：柠檬酸、醋酸、乳酸、酒石酸、马来酸、富马酸、蚁酸、丙酸、乙二酸、三氟醋酸、苯甲酸、葡糖酸、甲磺酸、羟乙酸、琥珀酸、4-甲苯磺酸、谷氨酸以及天门冬氨酸。另外，上述无机酸包括但不限于盐酸、氢溴酸、硫酸以及磷酸。
上述“药学上可接受”是指，施用于人或动物时是生理上可接受的，且不阻碍活性成分的作用，也不引起诸如通常所说的肠胃紊乱、眩晕等过敏反应或与其类似的反应。
同时，本发明所述的肉豆蔻衣木脂素或其药学上可接受的盐可与适于施用途径的载体一起配制。所述载体包括各种溶剂、分散剂、水包油或油包水乳化剂、含水组合物、脂质体、微球、微粒体。本发明药物组合物的施用途径包括但不限于经口途径和胃肠外途径。所述的胃肠外途径包括，例如透皮、经鼻、腹腔内、肌内、皮下或静脉等多种途径。
当施用本发明的肉豆蔻衣木脂素或其药学上可接受的盐时，根据本领域的公知方法可将其与胃肠外施用载体一起配制成粉末、颗粒、片剂、丸剂、糖衣片剂、胶囊、液体、凝胶、糖浆、混悬剂、薄片等剂型。合适的载体的具体实例包括：乳糖、右旋醣、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、赤藓糖醇以及麦芽糖醇等的糖类；包括玉米淀粉、小麦淀粉、米淀粉以及马铃薯淀粉等的淀粉类；包括甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙基甲基纤维素等的纤维素；包括明胶、聚乙烯吡咯烷酮等的填充剂。进一步地，需要时可添加诸如交联剂、聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、海藻酸或海藻酸钠等的崩解剂。另外，本发明的药物组合物可进一步地含有抗凝结剂、润滑剂、湿润剂、香料、乳化剂以及防腐剂。
另外，当胃肠外施用时，根据本领域公知的方法可将本发明的肉豆蔻衣木脂素或其药学上可接受的盐与合适的用于胃肠外给药的载体一起配制成注射剂、透皮施用的制剂、鼻腔吸入的制剂。对于注射剂，有必要对其进行灭菌和保护其免受细菌和真菌等微生物的污染。对于注射剂，适宜的载体的例子包括但不限于水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇、液态聚乙二醇)、其混合物和/或含有植物油的溶剂或分散剂。更优选地，适宜的载体包括如下溶液：汉克斯平衡盐溶液、林格氏溶液、包含三乙醇胺的PBS(磷酸缓冲液)或注射用无菌水、诸如10％乙醇、40％聚乙二醇或5％右旋醣的等渗溶液等。为了保护上述注射剂免受微生物的污染，本发明的制剂可进一步含有各种抗细菌剂以及抗真菌剂，例如含有对羟苯甲酸类、三氯叔丁醇、酚、山梨醇、硫柳汞等。在大多数情况下，上述注射剂可进一步含有诸如糖或氯化钠等的等渗剂。
透皮施用试剂时，该试剂可配制成软膏剂、乳膏剂、洗剂、凝胶、外用溶液、糊剂、搽剂、气雾剂等剂型。上述“透皮施用”是指将药物组合物局部施用至皮肤，从而使有效量的药物组合物所包含的活性成分递送至皮肤内。上述剂型在制药化学一般的公知文献中有记载(Remington′sPharmaceutical Science，15th Edition，1975，Mack Publishing Company，Easton，Pennsylvania)。
在通过吸入的方式施用试剂时，本发明中所使用的化合物可以喷雾剂的剂型来递送，所述的喷雾剂剂型可通过使用适宜的推进剂，从而产生加压容器或喷雾器来实现，其中所述的推进剂例如为二氯氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟甲烷、二氧化碳或其它合适的气体。对于加压气雾剂，剂量单位可通过能递送定量药物的阀来确定。例如，在吸入器或吹入器中所用的明胶胶囊以及药包囊包括粉末混合物，其中所述粉末混合物包含化合物、以及乳糖或淀粉等适宜的粉末基质。
对于其它药学上可接受载体，可参照下述文献中记载的内容(Remington′s Pharmaceutical Sciences，19th ed.，Mack Publishing Company，Easton，PA，1995)。
另外，本发明的方法中使用的肉豆蔻衣木脂素或其药学上可接受的盐可进一步含有至少一种缓冲剂(例如盐水或PBS)、碳水化合物(例如葡萄糖、甘露糖、蔗糖或葡聚糖)、抗氧化剂、抑菌剂、鳌合剂(例如EDTA或谷胱甘肽)、佐剂(例如氢氧化铝)、混悬剂、增稠剂和/或防腐剂中的至少一种。
进一步地，本发明的肉豆蔻衣木脂素及其药学上可接受的盐可利用本领域公知的方法来配制，以使在施用至受试者后，活性成分能迅速、持久或延时地释放。
另外，本发明的肉豆蔻衣木脂素及其药学上可接受的盐可与具有预防或治疗PPAR介导疾病功效的已知化合物一并施用，其中该已知化合物例如为TZD。
将本发明的肉豆蔻衣木脂素经口施用至大鼠的毒性试验表明，口服施用的毒性试验中半数(50％)致死量(LD50)为2000mg/kg以上。
附图简要说明
结合相应附图，本发明以上及其他目的、特性和有益效果从以下详细的说明书中可以更清楚得到体现：
图1为从肉豆蔻中分离肉豆蔻衣木脂素的流程图。
图2为本发明的肉豆蔻衣木脂素的13C-NMR图谱。
图3为本发明的肉豆蔻衣木脂素的1H-NMR图谱。
图4为本发明的肉豆蔻衣木脂素的1H-1H COSY图谱。
图5为本发明的肉豆蔻衣木脂素的1H-13C HMBC图谱。
图6为本发明的肉豆蔻衣木脂素的EI-质谱。
图7为在不同浓度下本发明的肉豆蔻衣木脂素使PPARα(A)或PPARγ(B)活化的效果。
图8为测定本发明的肉豆蔻衣木脂素使PPARα目的基因表达增加的效果。
A：CD36
B：CPT-1
C：PDK4
D：ACO
图9为本发明的肉豆蔻衣木脂素使PPARγ目的基因表达增加的效果。
A：LPL
B：PEPCK
图10为本发明的肉豆蔻衣木脂素刺激小鼠成纤维细胞的脂肪细胞3T3-L1分化的结果。
图11为在肥胖病/糖尿病小鼠模型中测定本发明的肉豆蔻衣木脂素对血糖影响的结果。
图12为在肥胖病/糖尿病小鼠模型中测定本发明的肉豆蔻衣木脂素对耐糖量影响的结果。
图13为在肥胖病/糖尿病小鼠模型中测定本发明的肉豆蔻衣木脂素对血液中胰岛素浓度影响的结果。
图14为在肥胖病/糖尿病小鼠模型中测定本发明的肉豆蔻衣木脂素对血液中脂联素浓度影响的结果。
图15为在肥胖病/糖尿病小鼠模型中测定本发明的肉豆蔻衣木脂素对饮食摄入影响的结果。
图16为在肥胖病/糖尿病小鼠模型中测定本发明的肉豆蔻衣木脂素对体重影响的结果。
图17为在肥胖病/糖尿病小鼠模型中测定本发明的肉豆蔻衣木脂素对脂肪组织的量的影响结果。
图18为在肥胖病/糖尿病小鼠模型中测定本发明的肉豆蔻衣木脂素对肌肉细胞中甘油三酯影响的结果。
图19为在肥胖病/糖尿病小鼠模型中测定本发明的肉豆蔻衣木脂素对血液中甘油三酯影响的结果。
图20为在肥胖病/糖尿病小鼠模型中测定本发明的肉豆蔻衣木脂素对血液中游离脂肪酸浓度影响的结果。
图21为在肥胖病/糖尿病小鼠模型中测定本发明的肉豆蔻衣木脂素对血液中总胆固醇浓度影响的结果。
图22为在肥胖病/糖尿病小鼠模型中测定本发明的肉豆蔻衣木脂素对血液中HDL-胆固醇浓度影响的结果。
图23为在肥胖病/糖尿病小鼠模型中测定本发明的肉豆蔻衣木脂素对血液中IL-6浓度影响的结果。
图24为在肥胖病/糖尿病小鼠模型中测定本发明的肉豆蔻衣木脂素对血液中TNF-α浓度影响的结果。
图25为在肥胖病/糖尿病小鼠模型中测定本发明的肉豆蔻衣木脂素对肝脏组织中甘油三酯含量影响的结果。
图26为在肥胖病/糖尿病小鼠模型中测定本发明的肉豆蔻衣木脂素对肝脏组织中PPARα目的基因表达的影响结果。
A：CD36
B：ACO
C：CPT-1
图27为在肥胖病/糖尿病小鼠模型中测定本发明的肉豆蔻衣木脂素对肝脏组织中PPARγ目的基因的表达的影响结果。
A：CD36
B：LPL
C：ACS
D：GyK
实施例
以下通过实施例进本发明进行详细说明。
但是，下述实施例仅是示例性的，本发明的内容并不限于下述实施例。
实施例1：从肉豆蔻中分离和提纯肉豆蔻衣木脂素
(1-1)肉豆蔻衣木脂素的分离和提纯
向100g干燥粉碎的肉豆蔻中加入75％甲醇400ml，并在室温下放置两天。过滤提取液并真空浓缩，从而制得种子的甲醇提取物(7g)。其后，提取物分级为乙酸乙酯层、丁醇层和水层，分别对各层进行真空浓缩，从而获得乙酸乙酯组分、丁醇组分和水组分。以己烷和乙酸乙酯(10∶1(v/v))的混合溶液作为洗脱剂，对乙酸乙酯组分(4.2g)进行硅胶柱层析(Merck Kieselgel66；70-230mesh)，得到组分III(1g)。以己烷和乙酸乙酯(20∶1(v/v))的混合溶液作为洗脱剂，对组分III进行硅胶柱层析，从而得到组分III-B(0.52g)。接着，以80％甲醇作为洗脱液，对组分III-B进行Rp-18柱层析(MerckLiChroprep：25-40μm)，获得单一物质组分III-B-2(0.5g)。上述的分离过程以流程图的形式如图1所示。
(1-2)结构分析
为了测定上述分离的单一物质III-B-2的结构，分别在600MHz和150MHz(溶剂：DMSO)下进行1H-NMR和13C-NMR图谱测定。结果分别如图2和图3所示。为了以1H-NMR图谱和13C-NMR图谱的结果为基础而测定1H-1H相互间的关系和1H-13C相互间的关系，进行了1H-1H COSY和1H-13C HMBC光谱测定。结果分别如图4和图5所示。对1H-NMR、13C-NMR、1H-1H COSY、1H-13CHMB结果的综合分析如下表1所示。
【表1】
Figure 2006800230079A00800011
(1-3)质谱分析
对上述分离得到的单一物质III-B-2进行进行了EI/MS以确定其分子量，质谱结果如图6所示。根据m/z 328的[M]+确定该化合物的分子量为328，分子式为C20H24O4。
(1-4)旋光率的测定
将20mg上述分离得到的单一物质III-B-2溶解于2m1三氯甲烷(CHCl3)中，再用偏光计(Automatic Polarimeter，APIII-589，Rodulph，NJ，USA)测定旋光率([α]D)，结果如下：[α]D＝+4.0(CHCI3、c＝1.0)。
经过对上述1H-NMR、13C-NMR、1H-1H COSY、1H-13C HMBC、EI/MS以及([α]D)与已经发表的研究报告(Woo，W.S.et al.，Phytochemistry，26：1542-1543，1987)进行比较分析，结果确认了所分离的单一物质是下述化学式(I)表示的肉豆蔻衣木脂素。
【化学式I】
Figure S2006800230079D00121
(实施例2)肉豆蔻衣木脂素导致的PPAR的活化
(2-1)肉豆蔻衣木脂素导致的PPARα的活化
为了研究肉豆蔻衣木脂素是否作为PPAR的配体而发挥作用，使用公知方法(Cell，68：879-887，1992；J.Biol.Chem.，272：25252-25259，1997)利用表达PPAR的质粒和具有PPRE控制的荧光素酶基因的载体对其进行了试验。
荧光酶素表达的活化可通过如下方法测定，即用PPARα质粒和pFR-荧光素酶载体(Stratagene，USA)转化COS-7猴肾细胞(ATCC CRL-1651)，并用上述实施例1中分离的肉豆蔻衣木脂素处理24小时。上述PPARα质粒是通过如下方式获得，即以SEQ ID NO：1(CTTGGATCCGAACATGACATA)以及SEQ ID NO：2(TGGGGTACCTGTGGCTGAT)为引物，对编码人PPARα序列(Genbank Acession No.S74349)中200-500位氨基酸(其为PPARα配体结合结构域)的碱基序列进行RT-PCR，然后将编码上述200-500位氨基酸的碱基序列克隆至pFA载体(Stratagene，USA)的BamHI和KpnI限制性酶切位点之间。RT-PCR的模板mRNA是从培养的Hep G2(ATCC HB-8065)人肝脏细胞中使用TRIZOL(Invitrogen，USA)分离的总RNA。RT-PCR的操作如下，即利用逆转录酶在42℃下合成cDNA60分钟；然后进行30个如下的循环：利用Taq聚合酶在95℃下进行1分钟、54℃下30秒以及72℃下2分钟。这时，将用不同浓度(1、5、10和25μM)的本发明的肉豆蔻衣木脂素处理的试验组与用0.01％DMSO处理的对照组以及用不同浓度(1、5、10和25μM)的化合物Wy-14643(Sigma，USA)处理的试验进行比较，其中所述的化合物Wy-14643为公知的PPARα的配体。
结果，如图7A所示，肉豆蔻衣木脂素以浓度依赖的方式使PPARα的活性增加，不同浓度的肉豆蔻衣木脂素处理组相对对照组都显示出显著差异(*，p＜0.01)。例如，当两组都使用25μM的浓度处理时，已知的化合物Wy-14643的活性比对照组的高大约16倍，同时本发明的肉豆蔻衣木脂素衍生出的荧光素酶活性比对照组高约14倍。这就确认了本发明的天然物质肉豆蔻衣木脂素能作为PPARα的配体活化PPARα，且活化的效率与公知的PPARα的配体Wy-14643(合成物质)相当，因此可以有效地活化PPARα。
(2-2)肉豆蔻衣木脂素导致的PPARγ的活化
通过下述方法研究肉豆蔻衣木脂素是否能活化PPARγ，即，除分别使用PPARγ和曲格列酮替代PPARα和Wy-14643外，其余与实施例1(2-1)相同。此时，PPARγ质粒通过下述方法制得，即以SEQ ID NO：3(TCGGTTTAAGATTCATCTTTATT)以及SEQ ID NO：4(GTCTCCGGTACCTTGATCACCTGC)为引物，对编码人PPARγ(Genbank Acession No.NM 138712)中176-477位氨基酸(其为PPARγ配体结合结构域)的碱基序列进行RT-PCR，然后将编码上述176-477位氨基酸的碱基序列克隆至pFA载体(Stratagene，USA)的XbaI和KpnI限制性酶切位点之间。
结果，如图7B所示，肉豆蔻衣木脂素以浓度依赖的方式使PPARγ的活性的增加，不同浓度的肉豆蔻衣木脂素处理组相对对照组都显示出显著差异(*，p＜0.01)。例如，当两组都使用25μM的浓度处理时，被比较化合物曲格列酮的活性比对照组的高大约8.3倍，而本发明的肉豆蔻衣木脂素衍生的荧光素酶活性比对照组高约10.4倍。这就确认了本发明的天然物质肉豆蔻衣木脂素作为PPARα的配体能活化PPARγ，其且活化的效率比现有的药剂曲格列酮对PPARγ受体的活化更高。
(实施例3)测定肉豆蔻衣木脂素活化PPAR所诱导的目的基因的表达
(3-1)测定PPARα目的基因的表达
在含有10％FBS的DMEM培养基中以1×106/孔的密度将SK-HEP-1肝脏细胞(ATCC CL-17)3转移到多孔板中，并继续培养5小时。向培养细胞的培养基中添加不同浓度(1、5、10和25μM)的肉豆蔻衣木脂素，并放置24小时。收集细胞，并使用TRIZOL(Invitrogen，USA)分离总RNA。对分离的总RNA进行定量，并利用逆转录酶以及相同量的RNA在42℃反转录20分钟合成cDNA。对上述合成的cDNA进行30个如下循环的RT-PCR，即在95℃下1分钟、56℃下30秒以及72℃下2分钟，其中在PCR过程中使用Taq聚合酶以及如下引物：用于扩增CD36的引物SEQ ID NO：5(CGGCGATGAGAAAGCAGAA)以及SEQ ID NO：6(CAACCAGGCCCAGGAGC)、用于扩增CPT-1的引物SEQID NO：7(AGACGGTGGAACAGAGGCTGAAG)以及8(TGAGACCAAACAAAGTGATGATGTCAG)、用于扩增PDK4的引物序列号9(TCAAATCAAAATAGCCTTCCC)以及SEQ ID NO：10(ATAAGTTAAGTGGGCCTGG)、和用于扩增ACO的引物SEQ ID NO：11(GGGCATGGCTATTCTCATTGC)以及SEQ IDNO：12(CGAACAAGGTCAACAGAAGTTAGGTTC)。
如图8所示，结果确认了，所有用肉豆蔻衣木脂素处理的试验组中，表达被PPARα提高的目的基因CD36、CPT-1、PDK4和ACO的mRNA表达相对对照组而言有显著的增加(*，p＜0.01；**，p＜0.05)。这说明了本发明的肉豆蔻衣木脂素能使PPARα活化，并能控制PPARα目的基因的表达。
(3-2)测定PPARγ目的基因的表达
在含有10％FBS的DMEM培养基中以1×106/孔的密度将3T3-L1小鼠前体脂肪细胞(ATCC CL-173)转移到多孔板中，并继续培养5小时。向培养细胞的培养基中添加10μM的肉豆蔻衣木脂素，并放置24小时。收集细胞，并使用TRIZOL(Invitrogen，USA)分离总RNA。将培养细胞的培养基更换成MDI培养基(0.5mM 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤，0.5uM地塞米松，10ug/ml胰岛素)，从而诱导脂肪细胞的分化(Am.J.Physiol.Cell Physiol.，280：C807-C813，2001)。在更换成MDI培养基2天后收集细胞，并使用TRIZOL(Invitrogen，USA)分离总RNA。对分离后的总RNA定量后，利用逆转录酶以及相同量的RNA在42℃反转录20分钟合成cDNA。对上述合成的cDNA进行30个如下循环的RT-PCR，即在95℃下1分钟、56℃下30秒以及72℃下2分钟，其中在PCR过程中使用Taq聚合酶以及如下引物：用于扩增LPL的引物SEQ ID NO：13(TATCCGCGTGATTGCAGAGA)以及SEQ ID NO：14(AGAGAGTCGATGAAGAGATGAATGG)，以及用于扩增PEPCK的引物SEQ ID NO：15(CAGGCGGCTGAAGAAGTATGA)以及SEQ ID NO：16(AACCGTCTTGCTTTCGATCCT)。
如图9所示，结果确认了，所有用肉豆蔻衣木脂素处理的试验组中，表达被PPARγ提高的目的基因LPL和PEPCK的mRNA表达在相对对照组而言有显著的增加(*，p＜0.01；**，p＜0.05)，且与肉豆蔻衣木脂素的处理浓度成正比。这说明了本发明的肉豆蔻衣木脂素能使PPARγ活化，并能控制PPARγ目的基因的表达。
(实施例4)测定肉豆蔻衣木脂素活化PPAR诱导的对脂肪细胞的分化的刺激
在含有10％FBS的DMEM培养基中以1×106/孔的密度培养将3T3-L1小鼠前体脂肪细胞转移槽多孔板中，并继续培养5小时。向培养的细胞中添加10μM本发明的肉豆蔻衣木脂素，并放置24小时。将培养细胞的培养基更换成成MDI(0.5mM 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤，0.5uM地塞米松，10ug/ml胰岛素)，从而诱导脂肪细胞的分化(Am.J.Physiol.Cell Physiol.，280：C807-C813，2001)。在更换成培养基MDI2天后收集细胞，并在光学显微镜下观察细胞形态。
结果，从图10可知，与用0.01％DMSO代替肉豆蔻衣木脂素处理的对照组以及用10μM曲格列酮处理的组相比，用肉豆蔻衣木脂素(10μM)处理的组刺激了脂肪细胞的分化。这说明了本发明的肉豆蔻衣木脂素能使PPAR活化，最大化了脂肪细胞的糖吸收，并能刺激脂肪细胞的分化。
(实施例5)研究肥胖病/糖尿病鼠模型中肉豆蔻衣木脂素的抗糖尿病作用
本发明用作肥胖病/糖尿病的模型动物的小鼠(db/db mouse；The JacksonLaboratory，USA)缺失来普汀基因，不能控制食欲，从而持续地过渡摄取食物。结果，脂肪在体内过渡积累，与一般小鼠相比体重超重且有高血脂症，从而成为典型的肥胖病和代谢性疾病的模型。同时，与一般的小鼠相比，由于其具有更高的血糖水平，所以也成为了非胰岛素依赖糖尿病的模型。
为了研究肉豆蔻衣木脂素对糖尿病的预防及治疗效果，每个试验组分别使用7只10周龄的肥胖病/糖尿病小鼠(db/db mouse)。将悬浮于0.25％羧甲基纤维素的肉豆蔻衣木脂素经口施用于试验组，其中施用的剂量分别为5mg/kg(体重)、10mg/kg(体重)和25mg/kg(体重)，在预定的时间每日施用一次且持续施用14天。对照组为将0.25％羧甲基纤维素以与试验组相同的剂量单独经口施用于正常小鼠。另一对照组，将0.25％羧甲基纤维素以与试验组相同的剂量单独经口施用于肥胖病/糖尿病小鼠。再一对照组，将曲格列酮以10mg/kg(体重)的剂量经口施用。从施用前的6天起，以每三天一次的频率测定肥胖病/糖尿病小鼠的血糖水平。在经口施用后的第12天，对试验组和对照组进行口服葡萄糖耐量实验(OGTT)。根据如下进行该实验，即，使试验组和对照组的肥胖病/糖尿病小鼠处于饥饿状态至少达18小时以上，将葡萄糖以3g/kg(体重)的剂量经口施用后，分别在0分钟、30分钟、60分钟和120分钟检测血糖的变化。另外，在经口施用的14天分析最终血糖水平、血液内胰岛素含量(mouse insulin ELISA Kit，Linco Research，no.EZRMI-BK，USA)以及血液内乙二腈含量(Adiponectin Quantikine ELISA Kit，R&D systems，no.MRP300，USA)。
从经口施用的14天内对试验组和对照组的血糖变化的检测结果如图11所示。与对照组相比，试验组组中的血糖有降低的趋势。特别是在经口施用后14天内，肥胖病/糖尿病小鼠对照组的血糖水平为618.61±35.03mg/dl，而与对照组相比，用5mg/kg(体重)剂量处理的组、用10mg/kg(体重)剂量处理的组以及用25mg/kg(体重)剂量处理的组的血糖水平分别为552.84±47.95mg/dl、501.03±43.67mg/dl以及412.74±31.15mg/dl(p＜0.05)，表现除降低的趋势。
进一步，进行OGGT以及测定血液中胰岛素的量和血液中己二腈的量的结果如下表2和图12-14所示。相对对照组，用肉豆蔻衣木脂素处理的试验组显著提高了葡萄糖耐受性，显著降低了血液中的胰岛素，且血液中乙二腈显著增加了。
表2
Figure 2006800230079A00800021
对上述结果进行综合分析可知，用肉豆蔻衣木脂素处理时，肥胖病/糖尿病小鼠中血液的胰岛素减少，己二腈增加，且葡萄糖耐受性增加并且血糖降低。肉豆蔻衣木脂素在改善胰岛素抗性的同时，其也能对糖尿病具有预防和治疗作用。
(实施例6)肉豆蔻衣木脂素的抗肥胖效果的评估
为了研究肉豆蔻衣木脂素的抗肥胖效果，每组使用7只10周龄的肥胖病/糖尿病小鼠。将悬浮于0.25％羧甲基纤维素的肉豆蔻衣木脂素经口施用于试验组，其中施用的剂量分别为5mg/kg(体重)、10mg/kg(体重)和25mg/kg(体重)，在预定的时间每天施用一次且持续施用14天。对照组将0.25％羧甲基纤维素以与试验组相同剂量经口施用于正常小鼠。另一对照组，将0.25％羧甲基纤维素以与试验组相同的剂量经口施用于肥胖病/糖尿病小鼠。再一对照组，将曲格列酮以10mg/kg(体重)的剂量经口施用。从施用前的6天起，以每三天一次的频率测定肥胖病/糖尿病小鼠的饮食量和体重。而且，在经口施用后的14天，测定白色脂肪组织(white adipose tissue)重量以及肌肉内集聚的甘油三酯的量(甘油三酯测定试剂盒，Wako，no.432-40201，Japan)。
在施用后的14天中，试验组和对照组的饮食量与体重的变化的测定结果如图15所示，其中对照组和试验组的饮食量没有差异。然而，如图16所示，经口施用第14天时，对照组的体重为48.16±2.09g。与上述对照组相比，以5mg/kg(体重)、10mg/kg(体重)和25mg/kg(体重)的剂量施用豆蔻衣木脂素的试验组的体重分别为：46.32±2.31 g、43.8±2.94g、41.80±1.56g，体重有下降的趋势(p＜0.05)。经口施用的14天，脂肪组织的量如图17所示，对照组的脂肪组织的重量为4508.30±605.20mg，与此相比，以5mg/kg(体重)、10mg/kg(体重)和25mg/kg(体重)的剂量施用肉豆蔻衣木脂素的试验组的脂肪组织重量分别为：4231.9±284.5mg、3904.1±278.6mg、2689.40±154.2m，呈现下降的趋势(p＜0.05)。肌肉中中性脂肪的积累如图18所示，对照组为27.62±2.44mg/g，与此相比，对于5mg/kg(体重)、10mg/kg(体重)和25mg/kg(体重)的剂量施用豆蔻衣木脂素的试验组而言，测得其肌肉中脂肪的积累分别为24.73±4.74mg/g(体重)、22.80±5.76mg/g(体重)和20.24±3.82mg/g(体重)，肌肉中脂肪的积累呈现下降趋势(p＜0.05)。从上可以看出，将肉豆蔻衣木脂素经口施用于肥胖病/糖尿病小鼠模型时，其能降低体重及脂肪组织的量、降低肌肉内脂肪的积累，所以肉豆蔻衣木脂素能有效预防和治疗肥胖病。
(实施例7)研究肉豆蔻衣木脂素对抗高血脂和抗心血管疾病的作用
为了研究肉豆蔻衣木脂素对高血脂和心血管疾病的治疗效果，每个试验组使用7只10周龄的肥胖病/糖尿病小鼠。将悬浮于0.25％羧甲基纤维素的肉豆蔻衣木脂素经口施用于试验组，其中施用的剂量分别为5mg/kg(体重)、10mg/kg(体重)和25mg/kg(体重)，在预定的时间每天施用一次且持续施用14天。将0.25％羧甲基纤维素以与试验组相同的剂量单独经口施用于正常小鼠。另一对照组，将0.25％羧甲基纤维素以与试验组相同的剂量单独施用于肥胖病/糖尿病小鼠。再一对照组，将曲格列酮以10mg/kg(体重)的剂量经口施用。
在施用14天后，测定对照组和试验组的血液中甘油三酯(甘油三酯测定试剂盒，Wako，Japan)、游离脂肪酸(free fatty acid)(游离脂肪酸的测定试剂盒，Wako，Japan)、总胆固醇(ASAN T-CHO-Lq Reagents、Asan Pharmaceutical、韩国)、HDL-胆固醇(ASAN HDL-Cholesterol、Asan Pharmaceutical、韩国)、IL-6(IL-6 Quantikine ELISA Kit，R&D systems，USA)以及TNF-α(TNF-α Quantikine ELISA Kit.R&D systems，USA)含量。
结果如表3及图19-24所示。血液中甘油三酯、游离脂肪酸、IL-6、TNF-α含量显著降低。血液中总胆固醇含量在对照组和试验组中没有显著差异，血液中HDL-胆固醇含量显著增加。
【表3】
Figure 2006800230079A00800031
因此，从上述结果中可以看出，对于肥胖病/糖尿病小鼠和小鼠模型而言，用肉豆蔻衣木脂素处理的处理组中血液中甘油三酯和游离脂肪酸、IL-6以及TNF-α的浓度降低，而HDL-胆固醇含量增加了，从而证明了肉豆蔻衣木脂素对高血脂和心血管疾病的和治疗效果。
(实施例8)研究肉豆蔻衣木脂素对脂肪肝的作用
为了研究肉豆蔻衣木脂素对脂肪肝的预防和治疗效果，测定肉豆蔻衣木脂素对脂肪肝的预防和治疗效果，每个试验组使用7只10周龄的肥胖病/糖尿病小鼠。将悬浮于0.25％羧甲基纤维素的肉豆蔻衣木脂素经口施用于试验组，其中施用的剂量分别为5mg/kg(体重)、10mg/kg(体重)和25mg/kg(体重)，在预定的时间每天施用一次且持续14天。将0.25％羧甲基纤维素以试验组相同的剂量单独经口施用于正常小鼠。另一对照组，将0.25％羧甲基纤维素以与试验组相同的剂量单独施用于肥胖病/糖尿病小鼠。再一对照组，将曲格列酮以10mg/kg(体重)的剂量经口施用。从经口施用开始14天后，分离肝脏组织并将其粉碎用于提取总脂质和脂肪，之后测量肝脏组织中积累的甘油三酯的量。
结果，如图25所示。对于对照组而言，肝脏组织中甘油三酯的含量为10.32±1.72mg/g，而与该对照组相比而言，用肉豆蔻衣木脂素以25mg/kg为剂量而处理的试验组为6.30±1.59mg/g，所以试验组的血液中中性脂肪相对对照组而言显著减少(*，p＜0.05)，从而确认了肉豆蔻衣木脂素对脂肪肝的预防和治疗作用。
(实施例9)肥胖病/糖尿病小鼠模型中由PPAR活化而诱导目的基因表达的测定
(9-1)PPARα目的基因表达的测定
取出上述实施例5-8中经口施用的试验组和对照组的肝脏组织。用液氮中匀浆所取出的肝脏组织。用TRIZOL(Invitrogen，USA)从匀浆的肝脏组织中分离总RNA。对分离后的总RNA定量后，在相同量的RNA下使用逆转录酶于42℃逆转录20分钟合成cDNA。对上述合成的cDNA进行30个如下循环的RT-PCR，即在95℃下1分钟、56℃下30秒以及72℃下2分钟，其中在PCR过程中使用Taq聚合酶以及如下引物：用于扩增CD36的引物(SEQ ID NO：5和SEQID NO：6)、用于扩增ACO的引物(SEQ ID NO：11和SEQ ID NO：12)及用于扩增CPT-1的引物(SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8)。通过实时定量PCR测定基因的表达量。
结果如图26所示，所有用肉豆蔻衣木脂素处理的试验组相对对照组而言，表达被PPARα活化的目的基因CD36、ACO和CPT-1的mRNA表达显著增加(*，p＜0.05)。在此，图26中的图是统计处理由实施例5-8中使用的各个小鼠所得数据的结果，每张照片通过图形显示了典型的结果。由此说明，本发明的肉豆蔻衣木脂素能使PPARα活化，控制PPARα目的基因的表达，这些目的基因在脂肪酸酸化、脂肪代谢和抑制炎症方面有重要作用，从而减少血液和肝脏组织中的脂肪，从而肉豆蔻衣木脂素能预防和治疗PPAR介导的高血脂、心血管疾病和脂肪肝。
(9-2)PPARγ目的基因表达的测定
取出上述实施例5-8中经口施用的试验组和对照组的肝脏组织。用液氮中匀浆所取出的肝脏组织。用TRIZOL(Invitrogen，USA)从匀浆的肝脏组织中分离总RNA。对分离后的总RNA定量后，在相同量的RNA下使用逆转录酶于42℃逆转录20分钟合成cDNA。对上述合成的cDNA进行30个如下循环的RT-PCR，即在95℃下1分钟、56℃下30秒以及72℃下2分钟，其中在PCR过程中使用Taq聚合酶以及如下引物：用于扩增CD36的引物(SEQ ID NO：5和SEQID NO：6)、用于扩增LPL的引物(SEQ ID NO：13和SEQ ID NO：14)、用于扩增ACS的引物SEQ ID NO：17(AGCAGAGCTTCGCAGCGGC)和SEQ ID NO：18(TCTGCTGTTTTCGCTGGGTCC)以及用于扩增GyK的引物SEQ ID NO：19(TCGAACCCGAGGATTTGTCT)和SEQ ID NO：20(AATTTCACTTTCCTCCGCATTAAT)，通过实时定量PCR测定基因的表达量。
结果如图27所示，所有用肉豆蔻衣木脂素处理的试验组相对对照组而言，表达被PPARα活化的目的基因CD36、LPL和ACS的mRNA表达显著增加(*，p＜0.05)。在此，图27中的图是统计处理由实施例5-8中使用的各个小鼠所得数据的结果，每张照片通过图形显示了典型的结果。由此说明，本发明的肉豆蔻衣木脂素能使PPARγ活化，控制在糖代谢方面有重要作用的PPARγ目的基因的表达从而降低血糖和提高胰岛素敏感性，从而肉豆蔻衣木脂素能预防和治疗PPAR介导的糖尿病以及如糖代谢相关疾病等糖尿病并发症。
(制备实施例1)
制备含有本发明所述的用于治疗或预防肥胖病、高血脂和心血管疾病的药物组合物的药物
(1-1)片剂的制备
将本发明的肉豆蔻衣木脂素25mg以及其它物质在混合机中U形混合器中混合20分钟，其中，所述的其它物质为：用于直接的片剂制备的赋形剂，即26mg乳糖和3.5mg的Avicel(微晶粉末纤维素)；1.5mg辅助崩解剂淀粉葡萄糖酸钠(sodium starch glyconate)；以及8mg粘合剂L-HPC(低级羟丙基纤维素)。混合完毕后，进一步加入1mg硬脂酸镁作为润滑剂，并进一步混合3分钟。对混合物进行称重和抗湿检测。然后由混合物制片，并用薄膜包衣，从而制备最终的片剂。
(1-2)糖浆的制备
制备包含2％(W/V)的肉豆蔻衣木脂素或其药学上可接受的盐作为有效成分的糖浆的方法如下：将2g本发明的肉豆蔻衣木脂素的酸加成盐、0.8g糖精以及25.4g糖溶解于80g的热水中。冷却上述溶液后，将8.0g甘油、0.04g香料、4.0g乙醇、0.4g山梨酸以及适量的蒸馏水与溶液混合。向该混合物中添加水至100ml。
(1-3)胶囊的制备
将50mg本发明的肉豆蔻衣木脂素、50mg乳糖、46.5mg淀粉、1mg滑石以及适量的硬脂酸镁相混合。然后将上述混合物填充到硬胶囊中，从而制备最终的胶囊。
(1-4)注射剂的制备
含10mg有效成分的注射剂的制备方法如下所述：将1g本发明的肉豆蔻衣木脂素的盐酸盐、0.6g氯化钠以及0.1g的抗坏血酸溶解于蒸馏水中，制得终体积为100ml的溶液。将上述溶液导入安培瓶中，并在120℃下加热30分钟以灭菌。
工业实用性
从以上可以看出，本发明的肉豆蔻衣木脂素作为PPAR的配体并活化PPAR，因而本发明的肉豆蔻衣木脂素具有预防和治疗PPAR介导的疾病的功效。所以，本发明的肉豆蔻衣木脂素可用来预防和治疗PPAR介导的疾病，例如糖尿病和糖尿病并发症。
序列表
<110>黄在宽(HWANG，JAE-KWAN)
<120>利用肉豆蔻衣木脂素预防和治疗PPAR介导的疾病的方法
     (Method for preventing and treating conditions mediated by PPAR using mace“gnan
)
<130>op06-1034
<160>20
<170>KopatentIn 1.71
<210>1
<211>21
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>PPARa正向
<400>1
cttggatccg aacatgacat a                            21
<210>2
<211>19
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>PPARa反向
<400>2
tgggtaacct gtggctgat                                  19
<210>3
<211>23
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>PPARr正向
<400>3
tcgtttaag attcatcttt att                                23
<210>4
<211>24
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>PPARr反向
<400>4
gtctccggta ccttgatcac ctgc                               24
<210>5
<211>19
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>CD36正向
<400>5
cggcgatgag aaagcagaa                                      19
<210>6
<211>17
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>CD36反向
<400>6
caaccaggcc caggagc                                     17
<210>7
<211>23
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>CPT-1正向
<400>7
agacggtgga acagaggctg aag                                23
<210>8
<211>27
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>CPT-1反向
<400>8
tgagaccaaa caaaggatg atgtcag                             27
<210>9
<211>21
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>PDK4正向
<400>9
tcaaatcaaa atagccttcc c                                       21
<210>10
<211>19
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>PDK4反向
<400>10
ataagttaag tgggcctgg                                            19
<210>11
<211>21
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>ACO正向
<400>11
gggcatggct attctcattg c                                            21
<210>12
<211>27
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>ACO反向
<400>12
cgaacaaggt caacagaagt taggttc                          27
<210>13
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>LPL正向
<400>13
tatccgcgtg attgcagaga                                    20
<210>14
<211>25
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>LPL反向
<400>14
agagagtcga tgaagagatg aatgg                              25
<210>15
<211>21
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>PEPCK正向
<400>15
caggcggctg aagaagtatg a                           21
<210>16
<211>21
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>PEPCK反向
<400>16
aaccgtcttg ctttcgatcc t                             21
<210>17
<211>19
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>ACS正向
<400>17
agcagagctt cgcagcggc                                   19
<210>18
<211>21
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>ACS反向
<400>18
tctgctgttt tcgctgggtc c                               21
<210>19
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>GyK正向
<400>19
tcgaacccga ggatttgtct                          20
<210>20
<211>24
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>GyK反向
<400>20
aatttcactt tcctccgcat taat                      24

Claims (2)

1.下述化学式(I)的肉豆蔻衣木脂素或其药学上可接受的盐用于制备治疗PPAR介导的疾病的药物中的用途：
【化学式I】
Figure FDA00002386840300011
其中所述PPAR介导的疾病选自如下：肥胖症、高脂血症或糖尿病。
2.根据权利要求1所述的用途，其中所述的PPAR为PPARα或PPARγ。
CN2006800230079A 2005-06-27 2006-06-27 利用肉豆蔻衣木脂素预防和治疗ppar介导的疾病的方法 Active CN102036662B (zh)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR10-2005-0055539 2005-06-27
KR1020050055539A KR100627643B1 (ko) 2005-06-27 2005-06-27 제 2 형 당뇨병 치료 또는 예방용 약제학적 조성물
KR1020050056692A KR20070001326A (ko) 2005-06-29 2005-06-29 핵수용체 피피에이알감마의 신규한 리간드
KR10-2005-0056692 2005-06-29
KR10-2005-0087991 2005-09-22
KR20050087991 2005-09-22
PCT/KR2006/002493 WO2007001150A2 (en) 2005-06-27 2006-06-27 Method for preventing and treating conditions mediated by ppar using macelignan

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102036662A CN102036662A (zh) 2011-04-27
CN102036662B true CN102036662B (zh) 2013-02-27

Family

ID=37595537

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2006800230079A Active CN102036662B (zh) 2005-06-27 2006-06-27 利用肉豆蔻衣木脂素预防和治疗ppar介导的疾病的方法

Country Status (7)

Country Link
US (1) US7902254B1 (zh)
EP (1) EP1948161B1 (zh)
JP (1) JP5416969B2 (zh)
CN (1) CN102036662B (zh)
AT (1) ATE539743T1 (zh)
ES (1) ES2380556T3 (zh)
WO (1) WO2007001150A2 (zh)

Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100844376B1 (ko) * 2007-02-07 2008-07-07 한국화학연구원 육두구 추출물 또는 이로부터 분리된 활성 화합물을포함하는 골다공증 예방 또는 치료용 조성물
KR101404398B1 (ko) * 2007-06-20 2014-06-09 (주)뉴트리 주름개선 화장료 조성물
US8969408B2 (en) * 2007-10-17 2015-03-03 Biocare Co., Ltd. Use of lignan-type compounds or extract of nutmeg or aril of nutmeg comprising the same
LT2349324T (lt) 2008-10-17 2017-12-27 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Insulino ir glp-1 agonisto derinys
WO2010064845A2 (en) * 2008-12-02 2010-06-10 Dong Wha Pharm. Co., Ltd. The pharmaceutical composition or the functional foods for the treatment or prevention of obesity comprising the extract from myristica fragrans houttuyn
KR101062670B1 (ko) * 2009-06-01 2011-09-06 (주)아모레퍼시픽 2,5-비스-아릴-3,4-디메틸테트라하이드로퓨란 리그난을 유효성분으로 포함하는 에이엠피케이의 활성화에 의해 매개되는 비만 관련 질환의 예방 또는 치료용 조성물
PL2498801T3 (pl) 2009-11-13 2018-08-31 Sanofi Aventis Deutschland Kompozycja farmaceutyczna zawierająca desPro<sup>36</sup>eksendyno-4(1-39)-Lys6-NH2 i metioninę
ES2534191T3 (es) 2009-11-13 2015-04-20 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Composición farmacéutica que comprende un agonista de GLP-1, una insulina y metionina
EP2555745B1 (en) 2010-04-08 2016-12-21 Symrise AG Use of dihydrodehydrodiisoeugenol and preparations comprising dihydrodehydrodiisoeugenol
HUE031181T2 (en) 2010-08-30 2017-06-28 Sanofi Aventis Deutschland Use of AVE0010 for the manufacture of a medicament for the treatment of type 2 diabetes
US20120277147A1 (en) * 2011-03-29 2012-11-01 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Prevention of hypoglycaemia in diabetes mellitus type 2 patients
US9821032B2 (en) 2011-05-13 2017-11-21 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Pharmaceutical combination for improving glycemic control as add-on therapy to basal insulin
CN108079281A (zh) 2011-08-29 2018-05-29 赛诺菲-安万特德国有限公司 用于2型糖尿病患者中的血糖控制的药物组合
AR087744A1 (es) 2011-09-01 2014-04-16 Sanofi Aventis Deutschland Composicion farmaceutica para uso en el tratamiento de una enfermedad neurodegenerativa
US9950039B2 (en) 2014-12-12 2018-04-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Insulin glargine/lixisenatide fixed ratio formulation
TWI748945B (zh) 2015-03-13 2021-12-11 德商賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 第２型糖尿病病患治療
TW201705975A (zh) 2015-03-18 2017-02-16 賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 第２型糖尿病病患之治療
CN105153107B (zh) * 2015-08-21 2017-06-06 河南大学 一种促凝血肉豆蔻外壳有效成分及其提取分离方法、应用

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ZA200103250B (en) * 2000-01-20 2001-10-25 Irene Amiras The treatment of immunomodulatory related and other diseases or conditions.
WO2004066963A2 (en) * 2003-01-17 2004-08-12 Merck & Co., Inc. N-cyclohexylaminocarbonyl benzenesulfonamide derivatives
AR044399A1 (es) * 2003-05-20 2005-09-14 Novartis Ag Compuestos heterociclicos y su uso como activadores de receptores de ppar. composiciones farmaceuticas que los contienen
US6987118B2 (en) * 2003-05-21 2006-01-17 Pfizer Inc. Tetrahydroisoquinoline derivatives as PPAR-alpha activators
US20050004179A1 (en) * 2003-05-22 2005-01-06 Pedersen Ward A. Methods and materials for treating, detecting, and reducing the risk of developing Alzheimer's Disease
CN100482649C (zh) * 2003-09-17 2009-04-29 诺瓦提斯公司 有机化合物
EP2314576A1 (en) * 2003-11-05 2011-04-27 F.Hoffmann-La Roche Ag Phenyl derivatives as PPAR agonists
CN101102761B (zh) * 2005-01-07 2010-09-29 黄在宽 木酚素类化合物用于治疗或预防炎症性疾病的用途
KR100679306B1 (ko) * 2005-03-31 2007-02-06 아미코젠주식회사 리그난계 화합물을 함유하는 뇌신경질환의 치료 또는예방용 약학적 조성물
US7893260B2 (en) * 2005-11-04 2011-02-22 Hydra Biosciences, Inc. Substituted quinazolin-4-one compounds for antagonizing TRPV3 function

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"Effects of Lignans on Hepatic Drug-Metabolizing Enzymes";Kuk Hyun Shin, et al.;《Arch.Pharm.Res.》;19901231;第13卷(第3期);第265-268页 *
"PPARγ与代谢性疾病";谢谆怡等;《生命的化学》;20041231;第24卷(第2期);第152-155页 *
"THE STRUCTURE OF MACELIGNAN FROM MYRISTICA FRAGRANS";WON SICK Woo,et al.;《Phytochemistry》;19871231;第26卷(第5期);第1542-1543页 *
Kuk Hyun Shin, et al.."Effects of Lignans on Hepatic Drug-Metabolizing Enzymes".《Arch.Pharm.Res.》.1990,第13卷(第3期),第265-268页.
WON SICK Woo,et al.."THE STRUCTURE OF MACELIGNAN FROM MYRISTICA FRAGRANS".《Phytochemistry》.1987,第26卷(第5期),第1542-1543页.
谢谆怡等."PPARγ与代谢性疾病".《生命的化学》.2004,第24卷(第2期),第152-155页.

Also Published As

Publication number Publication date
EP1948161A2 (en) 2008-07-30
ATE539743T1 (de) 2012-01-15
WO2007001150A2 (en) 2007-01-04
JP5416969B2 (ja) 2014-02-12
EP1948161A4 (en) 2010-04-21
CN102036662A (zh) 2011-04-27
ES2380556T3 (es) 2012-05-16
JP2008543931A (ja) 2008-12-04
US7902254B1 (en) 2011-03-08
US20110071221A1 (en) 2011-03-24
EP1948161B1 (en) 2012-01-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102036662B (zh) 利用肉豆蔻衣木脂素预防和治疗ppar介导的疾病的方法
Vongtau et al. Anti-nociceptive and anti-inflammatory activities of the methanolic extract of Parinari polyandra stem bark in rats and mice
Xue-Mei et al. Advances on the pharmacological effects of red yeast rice
RU2668135C1 (ru) Фармацевтическая композиция для лечения и предотвращения дегенеративных неврологических нарушений, которая содержит, в качестве активного ингредиента, смешанный экстракт коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки или его фракцию
CN103269706A (zh) 抗癌萃取物及化合物
US9655878B2 (en) Composition comprising coumestrol or a bean extract containing coumestrol
US20080160119A1 (en) Sesquiterpenoid Derivatives Having Adipocyte Differentiation Inhibitory Effect
Munjal et al. Polyphenol-enriched fraction and the compounds isolated from Garcinia indica fruits ameliorate obesity through suppression of digestive enzymes and oxidative stress
Yalamanchili et al. In search for potential antidiabetic compounds from natural sources: docking, synthesis and biological screening of small molecules from Lycium spp.(Goji)
KR101497109B1 (ko) Ｐｐａｒ 작용 조절 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물
KR100902338B1 (ko) 민둥아까시 추출물, 이의 분획물, 또는 상기 분획물에서분리한 화합물들을 유효성분으로 함유하는 조성물
JP2009263344A (ja) 脂肪細胞分化促進剤
KR101052594B1 (ko) 디아실 코에이:글리세롤 아실트랜스퍼라제 저해활성을 갖는감초 추출물, 이의 용매분획물 또는 이로부터 분리된 화합물을 포함하는 조성물
JP2009203209A (ja) アカシア属樹皮由来物を含有する血糖降下及び／又は抗肥満組成物
KR100959557B1 (ko) 육두구 가종피 추출 화합물을 유효성분으로 포함하는당뇨병 또는 피피에이알-감마 매개 질환 예방 및 치료용약학적 조성물
WO2016173274A1 (zh) 芳香族法尼基类化合物及其应用
CN114853706A (zh) 二苯甲酮二聚体化合物及其用途
FR2669823A1 (fr) Extrait de melange d&#39;ecorce de philodendron et de graines de croton, procede pour sa preparation et drogue contenant celui-ci.
CN1748779A (zh) 一种治疗慢性前列腺炎的药物组合物及其制备方法和用途
JP2008285438A (ja) ＰＰＡＲγ活性化剤
KR102249795B1 (ko) 선복화 추출물을 포함하는 비만 또는 운동수행능력 개선용 조성물
CN107137393B (zh) 一种用于治疗糖尿病神经损伤的植物单体复方制剂
KR100627643B1 (ko) 제 2 형 당뇨병 치료 또는 예방용 약제학적 조성물
JPH04230628A (ja) 脂質調節薬としての１０員環ラクトンの使用
KR100773246B1 (ko) 연령초 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만 억제 및 혈당강하용 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant