CN102028722A - 翼首草总皂苷有效部位提取物及其制备方法和应用 - Google Patents

翼首草总皂苷有效部位提取物及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN102028722A
CN102028722A CN200910196870XA CN200910196870A CN102028722A CN 102028722 A CN102028722 A CN 102028722A CN 200910196870X A CN200910196870X A CN 200910196870XA CN 200910196870 A CN200910196870 A CN 200910196870A CN 102028722 A CN102028722 A CN 102028722A
Authority
CN
China
Prior art keywords
extract
total saponins
preparation
herba pterocephali
macroporous resin
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN200910196870XA
Other languages
English (en)
Other versions
CN102028722B (zh
Inventor
朱国福
崔文霞
雷旭东
尹胜利
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shanghai University of Traditional Chinese Medicine
Original Assignee
Shanghai University of Traditional Chinese Medicine
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shanghai University of Traditional Chinese Medicine filed Critical Shanghai University of Traditional Chinese Medicine
Priority to CN200910196870A priority Critical patent/CN102028722B/zh
Publication of CN102028722A publication Critical patent/CN102028722A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102028722B publication Critical patent/CN102028722B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明属中药制药领域，涉及翼首草总皂苷有效部位提取物及其制备方法和应用。本发明以翼首草总皂苷的含量为指标，提供了总皂苷含量高、质量可控、稳定、药效显著的翼首草总皂苷提取物。本发明的翼首草总皂苷有效部位提取物，其主要成分为齐墩果烷型五环三萜皂苷，总皂苷含量50％-90％。本发明的制备方法提纯工艺经济、简便、适用于工业化大生产。所得的提取物具有显著的抑制肿瘤细胞增殖的作用，可应用于抗肿瘤药物的制备。

Description

翼首草总皂苷有效部位提取物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属中药制药领域，涉及翼首草总皂苷有效部位提取物及其制备方法和应用。
背景技术
翼首草为藏医常用药材，广泛应用于藏药制剂，如十二味翼首散、洁白丸、二十五味甘子丸、二十五味驴血丸、二十六味余甘子丸、九味青鹏散、石榴普安散、清肺止咳丸等。藏医认为翼首草性寒、味苦、有小毒，具有清热解毒、祛风湿、止痛的作用，可用于治疗瘟毒、痹证、痢疾、关节炎等症。目前，有关翼首草研究与应用的报道较少，与其相关的文献有：
文献[1]：一种药物组合物及其制备方法和用途，专利号：200310104142.4；
文献[2]：Two triterpenoid saponins from Pteroccephalus bretschneidri.Phytochemistry，1993，32(6)：1539；
文献[3]：Triterpenoid saponins from Pteroccephalus hookeri.Phytochemistry，1993，32(6)：1535；
文献[4]：匙叶翼首花的化学成分.天然产物研究与开发，1999，12(1)：35-37；
文献[5]：匙叶翼首花的化学成分.云南植物研究，1995，17(1)：108-110；
文献[6]：藏药翼首草化学成分的研究，成都中医药大学学报，2002年25卷3期；
文献[7]：翼首草的抗炎作用与急毒实验研究，北京中医药大学学报，2004年27卷2期
文献[8]：藏药翼首草抗类风湿性关节炎作用与机理研究，成都中医药大学硕士学位论文，2002年
上述文献1中公开了一种药物组合物的制备，其中君药翼首草仅仅涉及了乙醇加热回流提取的简单处理，文献2-5涉及到基于实验室条件下，通过化学方法和波谱分析共得到16种三萜皂苷类成分，文献6中张艺等首次从翼首草中分离得到rivularicin，文献7中涉及到翼首草总皂苷抗炎镇痛的药效学研究。文献8中涉及到翼首草抗类风湿性关节炎(RA)作用与机理的探讨。综上所述，目前尚未见对于翼首草总皂苷有效部位的提取纯化研究及其在抗肿瘤方面的药效学研究报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是：提供翼首草总皂苷有效部位提取物，同时，提供上述有效部位提取物的制备方法及其应用。
本发明以翼首草总皂苷的含量为指标，提供了总皂苷含量高、质量可控、稳定、药效显著的翼首草总皂苷提取物。本发明所述的翼首草总皂苷有效部位提取物，其主要成分为齐墩果烷型五环三萜皂苷，其总皂苷的含量在50-90％。通过下述方法和步骤制得：
(1)提取
翼首草根粉碎后，用50％-95％含水乙醇加热回流提取，将提取液浓缩备用；
(2)纯化
将上述所得的浓缩液进行大孔树脂吸附，用水淋洗除去杂质，再用40％-95％C1-C5的低级醇洗脱，将洗脱液浓缩至稠浸膏后真空干燥或除去低级醇后喷雾干燥，得提取物。
具体而言，本发明通过下述步骤制备翼首草总皂苷有效部位提取物：
将粉碎后的翼首草根用50％-95％含水乙醇热提3次，每次溶媒用量约为生药量的5-12倍，每次提取时间1-3h；提取液浓缩后进行大孔树脂吸附，本发明中，所述的大孔树脂为聚苯乙烯型多孔性吸附树脂，优选AB-8、X-5、HPD-100型大孔树脂等，用水淋洗除去杂质，再用40％-95％C1-C5的低级醇洗脱，本发明中，采用的低级醇为甲醇、乙醇、或丙醇等C1-C5醇类，将洗脱液浓缩至稠浸膏后真空干燥或除去低级醇后喷雾干燥，得本发明的翼首草总皂苷有效部位提取物，经含量测定，其总皂苷含量为50-90％。
本发明中，对上述所得翼首草总皂苷有效部位提取物进行含量测定：
以齐墩果酸为对照品，采用比色法测定翼首草提取物中总皂苷的含量。结果显示，所述翼首草提取物中其主要成分为齐墩果烷型五环三萜皂苷，总皂苷的含量在50-90％，达到有效部位的要求。
为进一步说明本发明提取物在制备抗肿瘤药物中的应用，对所制得的提取物进行了体外抑制人肿瘤细胞增殖实验，本发明中，优选人消化系统肿瘤细胞SMMC-7721，SGC-7901，BGC-823，GAS进行增殖实验。试验结果表明，本发明提取物在体外能显著抑制人胃癌(SGC-7901、BGC-823、GAS)、肝癌(SMMC-7721)等人消化系统肿瘤细胞的增殖。
本发明的制备方法其提纯工艺经济、简便、适用于工业化大生产，所得提取物具有显著的抑制肿瘤细胞增殖的作用，可应用于抗肿瘤药物的制备。
具体实施方式
通过下面给出的本发明的具体实施例可以进一步清楚地了解本发明，但它们不是对本发明的限定。
实施例1
称取粉碎后的翼首草根60g，用80％乙醇浸渍12h后热提3次，每次溶媒用量5-12倍，每次提取时间为60min，合并3次提取液，浓缩至60ml，用25％乙醇稀释至120ml，以1.5BV/h的流速通过50mlAB-8型大孔树脂，依次用200ml水洗脱除去杂质，再用200ml 60％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠浸膏，真空干燥4h，得本发明的翼首草总皂苷有效部位提取物，重2.98g，总皂苷含量80％。
实施例2
称取粉碎后的翼首草根60g，用70％乙醇浸渍12h后热提3次，每次溶媒用量5-12倍，每次提取时间为90min，合并3次提取液，浓缩至60ml，用25％乙醇稀释至120ml，以4BV/h的流速通过50mlX-5型大孔树脂，依次用250ml水洗脱除去杂质，再用250ml 70％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠浸膏，真空干燥4h，得本发明的翼首草总皂苷有效部位提取物，重2.65g，总皂苷含量65％。
实施例3
称取粉碎后的翼首草根60g，用80％乙醇浸渍12h后热提3次，每次溶媒用量5-12倍，每次提取时间为120min，合并3次提取液，浓缩至60ml，用25％乙醇稀释至120ml，以0.75BV/h的流速通过50ml HPD-100型大孔树脂，依次用300ml水洗脱除去杂质，再用250ml80％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠浸膏，真空干燥4h，得本发明的翼首草总皂苷有效部位提取物，重2.8g，总皂苷含量60％。
实施例4
体外抑制人肿瘤细胞SMMC-7721，SGC-7901，BGC-823，GAS增殖实验，将融合为单层生长的肿瘤细胞，用0.25％胰蛋白酶消化，计数并调整细胞浓度为5×104cells/mL，接种于96孔板，90μL/well，同时设阴性对照、阳性对照和空白对照组(只加培养液，不加细胞和药物)，置于37℃、5％CO2培养箱中培养24h后，实验组分别加入6种浓度的受试样品(0.3-100μg/ml)，使用液10μL，阳性对照组加入3种浓度的5-氟尿嘧啶(5-Fu)(1-100μg/ml)使用液10μL，阴性对照和空白对照组均加入10μL PBS，继续培养。分别于48h后，每孔加入10μL的MTT，继续置培养箱中培养，4h后终止培养，吸去孔内培养上清液，每孔加入150μL的DMSO，微量振荡仪震荡10min，用酶标检测仪检测并记录490nm处OD值。
抑制细胞率＝(阴性对照OD值-用药组OD值)/阴性对照OD值×100％。
用SPSS13.0统计软件计算各样品的IC50值，结果显示，本发明提取物对肿瘤细胞增殖有明显的抑制作用。
表1是本发明提取物对肿瘤细胞增殖的抑制作用。
表1
Figure B200910196870XD0000061

Claims (7)

1.翼首草总皂苷有效部位提取物，其特征在于，所述的提取物其主要成分为齐墩果烷型五环三萜皂苷，其总皂苷的含量为50-90％。
2.权利要求1的翼首草总皂苷有效部位提取物的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：
(1)提取
翼首草根粉碎后，用50％-95％含水乙醇加热回流提取，将提取液浓缩备用；
(2)纯化
将步骤(1)所得浓缩液进行大孔树脂吸附，用水淋洗除去杂质，再用40％-95％C1-C5的低级醇洗脱，将洗脱液浓缩至稠浸膏后真空干燥或除去低级醇后喷雾干燥，得提取物。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)的大孔树脂为聚苯乙烯型多孔性吸附树脂。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的大孔树脂选自AB-8、X-5或HPD-100型大孔树脂。
5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)的低级醇选自甲醇、乙醇或丙醇。
6.权利要求1的翼首草总皂苷有效部位提取物在制备抗肿瘤药物中的用途。
7.根据权利要求6所述的用途，其中所述的肿瘤是人消化系统肿瘤。
CN200910196870A 2009-09-30 2009-09-30 翼首草总皂苷有效部位提取物及其制备方法和应用 Expired - Fee Related CN102028722B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN200910196870A CN102028722B (zh) 2009-09-30 2009-09-30 翼首草总皂苷有效部位提取物及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN200910196870A CN102028722B (zh) 2009-09-30 2009-09-30 翼首草总皂苷有效部位提取物及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102028722A true CN102028722A (zh) 2011-04-27
CN102028722B CN102028722B (zh) 2012-08-29

Family

ID=43882532

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN200910196870A Expired - Fee Related CN102028722B (zh) 2009-09-30 2009-09-30 翼首草总皂苷有效部位提取物及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102028722B (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102526141A (zh) * 2011-03-09 2012-07-04 成都中医药大学 翼首草总环烯醚萜苷提取物及其制备方法和用途
CN110885385A (zh) * 2019-11-19 2020-03-17 西南大学 翼首草毒素a及其应用和低肝损伤毒性翼首草提取物的制备方法
CN114276405A (zh) * 2021-12-06 2022-04-05 上海诗丹德标准技术服务有限公司 五环三萜类化合物、其制备方法及应用

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102526141A (zh) * 2011-03-09 2012-07-04 成都中医药大学 翼首草总环烯醚萜苷提取物及其制备方法和用途
CN102579518A (zh) * 2011-03-09 2012-07-18 成都中医药大学 翼首草总皂苷提取物及其制备方法和用途
CN102579519A (zh) * 2011-03-09 2012-07-18 成都中医药大学 翼首草总苷提取物及其制备方法和用途
CN102526141B (zh) * 2011-03-09 2013-07-10 成都中医药大学 翼首草总环烯醚萜苷提取物及其制备方法和用途
CN102579519B (zh) * 2011-03-09 2013-08-21 成都中医药大学 翼首草总苷提取物及其制备方法和用途
CN110885385A (zh) * 2019-11-19 2020-03-17 西南大学 翼首草毒素a及其应用和低肝损伤毒性翼首草提取物的制备方法
CN110885385B (zh) * 2019-11-19 2020-09-25 西南大学 翼首草毒素a及其应用和低肝损伤毒性翼首草提取物的制备方法
CN114276405A (zh) * 2021-12-06 2022-04-05 上海诗丹德标准技术服务有限公司 五环三萜类化合物、其制备方法及应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN102028722B (zh) 2012-08-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101904968B (zh) 重楼薯蓣类皂苷的制备方法及其抗肿瘤药物制剂
CN103316096A (zh) 一种黑种草子总黄酮提取物及其制备方法和用途
CN101759544A (zh) 一种新查耳酮化合物及其制备方法与其应用
CN108003214A (zh) 一种从土贝母中提取的皂苷化合物及其方法和应用
CN103169725A (zh) 一种绞股蓝提取物及其制备治疗肿瘤药物的用途
CN104873570B (zh) 一种夏枯草总黄酮的提取纯化方法及其应用
CN107929337A (zh) 一种屏边三七抗炎有效部位的制备方法及应用
CN102028722B (zh) 翼首草总皂苷有效部位提取物及其制备方法和应用
CN105832789A (zh) 一种利用高压微波辅助-半仿生法提取制备皂苷富集物的方法
CN101028322B (zh) 毛裂蜂斗菜提取物用于制备防治肿瘤疾病药物的用途
CN1775267A (zh) 一种开口箭提取物及其制备方法和应用
Wu et al. Preparation of paeoniflorin from the stems and leaves of Paeonia lactiflora Pall.‘Zhongjiang’through green efficient microwave-assisted extraction and subcritical water extraction
CN104971088A (zh) 藏茵陈提取物及其制备方法、药物组合物和用途
CN102362877B (zh) 一种雾水葛提取物的应用
CN102764320B (zh) 山大颜提取物及其制备方法与抗肿瘤应用
CN104857245A (zh) 紫萼玉簪花总皂苷的制备方法和应用
CN108676054B (zh) 一种三萜类化合物及其制备方法和应用
CN104398950A (zh) 一种菖蒲四味抗癌提取物及其制备方法和应用
CN101721434B (zh) 一种阿里红有效组分及其制备方法和用途
CN103027932A (zh) 一种香加皮抗肿瘤有效组分提取物及其制法和用途
CN109456163B (zh) 一种具有对称结构的环烯酮类化合物及其制备方法和应用
CN106317155A (zh) 一种还原性葫芦烷型三萜及其制法和用途
CN105079174B (zh) 一种补肾强身片及其制备方法
CN103316120B (zh) 过山香或其提取物的用途
CN113876826B (zh) 一种铜锤玉带草提取物及其制备方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20120829

Termination date: 20170930

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee