CN103316120B - 过山香或其提取物的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了过山香或其提取物在制备抗癌药物中的用途。本发明还提供了过山香提取物及一种抗癌药物组合物。过山香药材及其水和乙醇提取物对肝癌、结肠癌均有良好的抑制作用，为治疗癌症提供了新的用药选择。

Description

过山香或其提取物的用途
技术领域
本发明涉及过山香或其提取物的新用途。
背景技术
癌症是目前世界范围内导致死亡的主要疾病，在21世纪依然是医药领域急待攻克的难题。国内外在抗癌药物的研制开发上都投入了大量的人力、物力和财力。目前，对于癌症的治疗，主要是采用手术、放疗化疗等方法，手术治疗只能切除局部肿瘤，但对扩散转移的癌细胞无法切除，放化疗在杀灭肿瘤细胞的同时，也杀伤了正常的细胞，具有一定的毒副作用，给患者造成极大的痛苦。中草药在我国有悠久的历史和丰富的资源，在疾病的治疗和保健上发挥着重要的作用。
过山香为芸香科黄皮属植物过山香Clausena excavata Burm.f.,其以根、叶入药,味苦、性辛温,具有疏风解表，行气利湿，截疟，解毒之功效，主要分布在我国云南南部、海南、广东、广西、福建、台湾以及东南亚地区。目前还未见将过山香用于治疗癌症的相关报道。
发明内容
本发明的目的在于提供过山香或其提取物的新用途。本发明的另一目的在于提供过山香提取物。
本发明提供了过山香或其提取物在制备抗癌药物中的用途。
进一步地，所述药物是抗结肠癌或肝癌的药物。
其中，所述提取物为过山香的水或有机溶剂提取物。
进一步地，所述有机溶剂为乙醇或含水乙醇。
更进一步地，所述含水乙醇的浓度为60-80%v/v。
进一步优选地，所述含水乙醇的浓度为70%v/v。
其中，所述过山香为芸香科黄皮属植物过山香Clausena excavata Burm.f.的根、叶或/和叶柄。
本发明还提供了一种过山香提取物，它是以过山香为原料，加水提取制备而成。
本发明还提供了一种过山香提取物，它是以过山香为原料，加60-80%v/v乙醇提取制备而成。
进一步地，所述乙醇浓度为70%v/v。
本发明还提供了一种抗癌药物组合物，它是以上述过山香提取物为活性成分，加上药学上常用的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。
过山香药材及其水和乙醇提取物对肝癌、结肠癌均有良好的抑制作用，为治疗癌症提供了新的用药选择。
具体实施方式
本发明使用的过山香为芸香科黄皮属植物过山香Clausena excavataBurm.f.的根、叶、叶柄。
实施例1过山香提取物的制备
取过山香叶和叶柄100g，粉碎后，加入10倍量水共1000mL,加热回流提取2次，每次1h，合并两次提取液，浓缩，干燥后，即得过山香水提物。
实施例2过山香提取物的制备
取过山香根、叶和叶柄100g，粉碎后，加入10倍量水共1200mL,加热回流提取3次，每次0.5h，合并两次提取液，浓缩，干燥后，即得过山香水提物。
实施例3过山香提取物的制备
取过山香叶、叶柄，粉碎，过80目筛，精密称取粉末500g，加入10倍量70%v/v乙醇5000mL,水浴加热回流提取2次，每次1.5h，合并两次提取液，减压浓缩，回收乙醇，即得过山香乙醇提取物。
以下通过试验例具体说明本发明的有益效果。
试验例1过山香及其提取物的抗癌活性研究
1.1过山香粉末的制备
过山香经鉴定为芸香科黄皮属植物过山香Clausena excavata Burm.f.。取过山香叶和叶柄，自然风干，粉碎，过80目筛，PBS溶解,微孔滤膜过滤除菌，在4℃保存待试。
1.2过山香水提物的制备
精密称取1.1项中粉末100g，加入10倍量水共1000mL,水浴加热回流提取2次，每次1h，合并两次提取液，浓缩，经微孔滤膜过滤除菌，定容至100mL。经微孔滤膜过滤除菌，溶于PBS,在4℃保存待试。
1.3过山香乙醇提取物的制备
精密称取1.1项中粉末500g，加入10倍量70%v/v乙醇5000mL,水浴加热回流提取2次，每次1.5h，合并两次提取液，旋转蒸发仪减压浓缩，回收乙醇，即得70%乙醇提取物102.8g。提取物经微孔滤膜过滤除菌，溶于PBS,在4℃保存待试。
1.4细胞株
结肠癌细胞株HT-29和HCT-8、肝癌细胞HepG2，分别购自中科院上海细胞库、ATCC（美国模式培养物集存库）。
1.5试剂与仪器
无水乙醇（国药集团化学试剂有限公司）；RPMI1640培养基、胰蛋白酶(trypsin)，Hyclone公司；胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)，Gibco公司；四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium MTT)干粉，Sigma公司；上海亚荣旋转蒸发器RE-5299；ELX800酶标仪：BioTek公司；二氧化碳培养箱：德国Heraeus；倒置相差显微镜：日本OLYMPUS。
1.6过山香粉末、水提物、乙醇提取物抑制细胞增殖的实验
1.6.1细胞培养将人结肠癌细胞HT-29、HCT-8与肝癌HepG2分别置于含10％热灭活胎牛血清（FBS）的RPMI-1640培养液中，于37℃、5％CO2饱和湿度的细胞培养箱中培养。
1.6.2MTT法测定细胞增殖取对数生长期的人结肠癌细胞HT-29、HCT-8与肝癌细胞HepG2，用0.25%胰酶消化并收集细胞。以RPMI1640培养液（含10%FBS）制成细胞悬液，进行细胞计数，调整细胞密度为1×105个/ml，接种于96孔培养板中，每孔100ul，常规培养24h，使细胞同步化。分别按照表1方案给药干预，以上各组均设8个复孔。继续培养24h，吸弃各孔中的液体，每孔加入0.5mg/ml的MTT溶液100ul，37℃孵育4h，然后吸弃各孔中的液体，加入DMSO100ul/孔，振荡混匀，室温放置10min，使结晶充分溶解并混匀，于全自动酶标仪570nm测定各组吸光度值（即OD值），并按下列公式计算细胞活力(%)=实验组吸光度值/对照组平均吸光度值×100%。抑制率(%)=100(%)—细胞活力(%)
表1过山香各样品药物干预细胞浓度设置表
1.6.3细胞形态学观察HT-29细胞培养24小时后．用倒置显微镜下观察细胞的形态变化。
1.7统计学分析
采用SPSS16.0软件进行分析，实验数据用x±S表示，组间比较采用t检验。
2结果
2.1过山香水提取物的浸膏得率测定结果
精密吸取上述水提浓缩液20ml，平行三次操作，置已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，于105℃干燥3h，取出，置干燥器中冷却0.5h，取出立即称重，计算干膏收得率。结果见表2。
表2过山香水提取物的浸膏得率实验结果
2.2过山香乙醇提取物的浸膏得率测定结果
精密吸取上述乙醇浓缩液50ml，平行三次操作，置已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，于105℃干燥3h，取出，置干燥器中冷却0.5h，取出立即称重，计算干膏收得率。结果见表3。
表3过山香乙醇提取物的浸膏得率实验结果
2.3过山香粉末对人结肠癌细胞HCT-8增殖的影响
表4中表明，过山香粉末浓度达到1.25mg/ml及以上，均对结肠癌细胞HCT-8增殖有明显的抑制作用(p<0.01)，随着药物浓度的升高对HCT-8的抑制率也升高。
表4过山香粉末对HCT-8增殖的影响(n=8)
2.4过山香水提取物对人结肠癌细胞HCT-8增殖的影响
表5中表明，过山香水提取物浓度达到1mg/ml及以上，均对结肠癌细胞HCT-8增殖有明显的抑制作用(p<0.01)，随着药物浓度的升高对HCT-8的抑制率也升高。
表5过山香水提取物对HCT-8增殖的影响(n=8)
2.5过山香乙醇提取物对人结肠癌细胞HCT-8增殖的影响
表6中表明，过山香乙醇提取物浓度达到0.5mg/ml及以上，均对结肠癌细胞HCT-8增殖有明显的抑制作用(p<0.01)，随着药物浓度的升高对HCT-8的抑制率也升高。
表6过山香乙醇提取物对HCT-8增殖的影响(n=8)
2.6过山香粉末对人结肠癌细胞HT-29增殖的影响
表7中表明，过山香粉末浓度达到1.5mg/ml及以上，均对结肠癌细胞HT-29增殖有明显的抑制作用(p<0.01)，随着药物浓度的升高对HT-29的抑制率也升高。
表7过山香粉末对HT-29增殖的影响(n=8)
2.7过山香水提物对人结肠癌细胞HT-29增殖的影响
表8中表明，过山香水提取物浓度达到1.25mg/ml及以上，均对结肠癌细胞HT-29增殖有明显的抑制作用(p<0.01)，随着药物浓度的升高对HT-29的抑制率也升高。
表8过山香水提取物对HT-29增殖的影响(n=8)
2.8过山香乙醇提取物对人结肠癌细胞HT-29增殖的影响
表9中表明，过山香乙醇提取物浓度达到0.5mg/ml及以上，均对结肠癌细胞HT-29增殖有明显的抑制作用(p<0.01)，随着药物浓度的升高对HT-29的抑制率也升高。
表9过山香乙醇提取物对HT-29增殖的影响(n=8)
2.9过山香粉末对肝癌细胞HepG2增殖的影响
表10中表明，过山香粉末浓度达到2.5mg/ml及以上，均对肝癌细胞HepG2增殖有明显的抑制作用(p<0.01)，随着药物浓度的升高对HepG2的抑制率也升高。
表10过山香粉末对肝癌HepG2增殖的影响(n=8)
2.10过山香水提取物对肝癌细胞HepG2增殖的影响
表11中表明，过山香水提取物浓度达到1.5mg/ml及以上，均对肝癌细胞HepG2增殖有明显的抑制作用(p<0.01)，随着药物浓度的升高对HepG2的抑制率也升高。
表11过山香乙醇提取物对肝癌HepG2增殖的影响(n=8)
2.11过山香乙醇提取物对肝癌细胞HepG2增殖的影响
表11中表明，过山香乙醇提取物浓度达到0.5mg/ml及以上，均对肝癌细胞HepG2增殖有明显的抑制作用(p<0.01)，随着药物浓度的升高对HepG2的抑制率也升高。
表11过山香乙醇提取物对肝癌HepG2增殖的影响(n=8)
2.12过山香粉末、水提物、乙醇提取物对HT-29、HCT-8形态的影响
倒置显微镜下观察，空白组HT-29、HCT-8细胞胞质均匀．核仁清楚，伸展性好，生长良好，形成贴壁的梭形细胞。过于不同浓度的过山香粉末、水提物、乙醇提取物后，HT-29、HCT-8细胞均不同程度出现；胞质混浊，细胞多呈圆形，体积缩小，折光性差，细胞悬浮、脱落而死亡。
3结论
本实验结果显示，过山香药材及其水和乙醇提取物都对HT-29、HCT-8、HepG2细胞增殖的有明显的抑制作用，并随浓度的增加而增强，呈一定的量效趋势。
综上所述，过山香药材及其水和乙醇提取物对肝癌、结肠癌均有良好的抑制作用，为治疗癌症提供了新的用药选择。

Claims (3)

1.过山香或其提取物在制备抗结肠癌或肝癌药物中的用途；所述过山香为芸香科黄皮属植物过山香Clausena excavata Burm.f.的叶和叶柄；所述提取物为过山香的水或有机溶剂提取物；所述的有机溶剂提取物为70％v/v乙醇提取物。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述的药物是以过山香为原料，加水提取制备而成。
3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述的药物是以过山香为原料，加70％v/v乙醇提取制备而成。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1357327A (zh) * 2001-02-09 2002-07-10 崔承彬 咔唑生物碱类抗癌药物及其制备

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7727561B2 (en) * 2001-08-31 2010-06-01 Pacific Arrow Limited Composition comprising Xanthoceras sorbifolia extracts, compounds isolated from same, methods for preparing same and uses thereof

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1357327A (zh) * 2001-02-09 2002-07-10 崔承彬 咔唑生物碱类抗癌药物及其制备

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Cytotoxic constituents of Clausena excavata;N. W. Muhd Sharif et al.;《African Journal of Biotechnology》;20111116;第10卷(第72期);第16337-16341页，尤其是第16338页左栏第1-3行 *
Dentatin isolated from Clausena excavata induces apoptosis in MCF-7 cells through the intrinsic pathway with involvement of NF-kB signalling and G0/G1 cell cycle arrest: A bioassay-guided approach;Ismail Adam Arbab et al.;《Journal of Ethnopharmacology》;20121123;第145卷;第343-354页，尤其是第344页表2，第343页左栏第1-2行 *
Nutrient Composition, Antioxidant Andantiproliferative Properties Of Clausena Excavata Andmurraya Koenigii;WAN NOR I’ZZAH et al.;《Universiti Putra Malaysia》;20051231;第vi页，尤其是第vi页第1-3行 *

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