CN102021218A

CN102021218A - 薯蓣皂甙降解催化剂

Info

Publication number: CN102021218A
Application number: CN 200910175592
Authority: CN
Inventors: 张晖
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2009-09-18
Filing date: 2009-09-18
Publication date: 2011-04-20
Anticipated expiration: 2029-09-18
Also published as: CN102021218B

Abstract

本发明涉及一种薯蓣皂素生产预发酵过程中添加由植物生长调节剂和微生物酶组成的“薯蓣皂甙降解催化剂”，提高发酵降解效率，增加薯蓣皂素收率的生产方法。其具体方法是：原料清洗、除杂、粉碎。添加“薯蓣皂甙降解催化剂”一同进入发酵、调酸水解、水洗水解物呈中性、烘干、溶剂汽油提取、结晶，95％乙醇重结晶，得薯蓣皂素。用本方法，发酵降解效率提高；薯蓣皂素收率提高。

Description

薯蓣皂甙降解催化剂

一种薯蓣皂素生产，预发酵过程中添加“薯蓣皂甙降解催化剂”，提高发酵降解效率，提高薯蓣皂素收率的生产方法。

薯蓣属植物根茎中含有多种3B-0HΔ525R类甾体皂甙。总皂甙经水解产生的薯蓣皂素(薯蓣皂甙元Diosgenin)是合成甾体激素类药物的起始原料。在生产中，先将原料发酵降解，然后再行酸水解，是增加薯蓣皂素收率的有效途径。此类记载见于上世纪七十年代中国科学院成都生物研究所，北京医学院药学系的预发酵后，再行酸水解，可提高薯蓣皂素收率的生产研究实践。目前各生产厂家在生产中，绝大多数采取该步骤，在薯蓣植物根茎中有皂甙酶(Saponinase)，当根茎组织被粉碎成粉或磨成浆时，皂甙酶便释放出来与皂甙接触而产生的酶解作用，把原皂甙(Proto-Saponin)酶解成次级甙(Pro-Sanponin)。在发酵中，就是要创造条件，充分发挥薯蓣植物内酶的作用，使存於根茎组织中的皂甙经酶作用降解为次级甙，降解的越彻底，甾体皂甙C₃，位糖链的位阻越小，在酸水解中越容易被水解完全，越容易被提取出来，从而提高收率。现有技术中，不足之处是：预发酵中，仅从酵温度和时间给以便利。创造酶解的有利条件还不够充分，发酵降解效率不高，最终增加收率不大。本发明的目的是提供一种薯蓣皂素生产预发酵中添加薯蓣皂甙降解催化剂，充分激发存在於其组组中内酶作用力，创造酶解有利条件，提高发酵降解效率，最终提高薯蓣皂素收率的生产方法。

本发明的目的是以实现，具体实施方案是向粉碎的原料中添加含植物生长调节剂和生物酶组成的“薯蓣皂甙降解催化剂”一同进行发酵，以提高发酵降解效率，提高薯蓣皂素收率。其具体实施步骤如下：

1、准确称取植物生长调节剂a-奈乙酸和纤维素酶用自来水稀释，配制成“薯蓣皂甙降解催化剂”。

2、原料清洗除杂后粉碎时，取步骤1中“薯蓣皂甙降解催化剂”，随水加入发酵物中。使发酵中水分为80％左右；a-奈乙酸浓度为20-40ppm；纤维素酶为1‰(20000u/g)混合均匀后进行发酵，发酵温度为36±2℃，避光发酵时间为72小时。

3、取步骤2中发酵物，加入无机酸进行水解。盐酸用量为0.7mol/L，压力0.2Wpa，时间为2小时。

4、取步骤3中水解物，过滤酸渣，水洗水解物呈中性。烘干水解物。

5、取步骤4中干燥物，投入提取器中，用溶剂汽油提取出薯蓣皂素。回收溶剂，结晶、烘干、收取薯蓣皂素粗品。

6、取步骤5中薯蓣皂素，用95％乙醇重结晶后，收取薯蓣皂素。

薯蓣皂素生产中，用本方法与传统方法相比较，可显著提高发酵降解效率，增加薯蓣皂素收率。且由於水解干燥物的减少，可节省提取的溶剂。

使用本方法，对比例、实施例如下：

取当地清洗干净的鲜黄姜3000g，含水率为70.9％，干物质为29.1％，粉碎后备用。

对比例1，取粉碎的鲜黄姜500g，加水使含水量为80％左右。加盐酸2mol/L。回流水解4小时，过滤出酸液，水洗水解物呈中性。烘干得干燥物40g。水解率为72.51％，干燥物用溶剂汽油回流提取4小时，回收溶剂汽油，结晶，经95％乙醇结晶、烘干，得薯蓣皂素2.67g。折生药含量1.84％。

对比例2，取粉碎的同批鲜黄姜500g，加水使含水量为80％左右。放进恒温水浴锅於40±2℃发酵48小时，加盐酸2mol/L。回流水解4小时，过滤出酸渣，水洗水解物呈中性。烘干得干燥物38.4g。比对比例1少1.6g少4％：水解率为73.54％，比对比例1提高1.03％。干燥物用溶剂汽油回流提取4小时，回收溶剂汽油、结晶。95％乙醇重结晶，烘干得薯蓣皂素3.17g。折合生药含量2.18％。比对比例1多提薯蓣皂素0.5g，提高18.73％，生药含量提高0.34％。

实施例1，取同批粉碎的鲜黄姜500g，加水同进加入“薯蓣皂甙降解催化剂”。使含水量为80％左右，a-奈乙酸浓度为20ppm。纤维素酶为1‰(20000u/g)。放进恒温水浴锅於36±2℃避光发酵72小时。加盐酸至2mol/L。回流水解4小时，过滤出酸渣，水洗水解物呈中性，烘干得干燥物37.7g。水解率为74.09％，比对比例1少2.3g，少5.75％。水解率提高1.58％。比对比例2少0.7g，少5.75％，水解率提高1.58％。干燥物用溶剂汽油回流提取4小时，回收溶剂汽油，结晶。95％乙醇重结晶。烘干得薯蓣皂素3.5g，折生药含量2.4％。比对比例2多收0.33g，提高10.41％。生药含量提高0.22％，对比例1多收0.83g，提高31.1％，生药含量提高0.56％。

实施例2，取同批粉碎的鲜黄姜500g，加水同时加入“薯蓣皂甙降解催化剂”，使含水量为80％左右；a-奈乙酸浓度为40ppm；纤维素酶为1‰(20000u/g)放进恒温水浴锅於36±2℃避光发酵72小时，加盐酸至2mol/L。回流水解4小时。过滤出酸液，水洗水解物呈中性。烘干得干燥物36g，水解率为75.3％。比实施例1干燥物少收1.7g，少4.5％，水解率提高1.21％；比对比例2干燥物少收2.4g，少6.25％，水解率提高1.76％；比对比例1干燥物少收4g，少10％；水解率提高2.79％。干燥物用溶剂汽油回流提取4小时，回收溶剂汽油，结晶，95％乙醇重结晶，烘干得薯蓣皂素4g。折生药含量2.75％，比实例1多收0.5g，提高14.29％，生药含量提高0.35％；比对比例2多收0.83g提高26.18％。生药含量提高0.57％；比对比例1多收1.33g，提高49.81％，生药含量提高0.91％。

所得薯蓣皂素，经溶距、溶点，红外光谱薄层层析等检查对照，与已知标准薯蓣皂素相一致。

“薯蓣皂甙降解催化剂”在发酵中起催化降解作用，加速皂甙更彻底的酶降解，反应前后其本身质量和化学性质不起变化，不影响皂甙元的化学结构。它不会使原料中的皂素含量增加，而只是创造条件，使原料中固有的皂素更充分的被提取出来而已。

Claims

1.本发明涉及一种薯蓣皂素生产，提高薯蓣皂素收率的生产方法，其特征是：

(1)准确称取植物生长调节剂a奈乙酸和纤维素酶用自来水稀释，配制成“薯蓣皂甙降解催化剂”。

(2)原料清洗除杂后粉碎时，取步骤(1)中“薯蓣皂甙降解催化剂”，随水加入发酵物中。使发酵中水分为80％左右；a-奈乙酸浓度为20-40ppm；纤维素酶为1‰(20000u/g)混合均匀后进行发酵，发酵温度为36±2℃，避光发酵时间为72小时。

(3)取步骤(2)中发酵物，加入无机酸进行水解。盐酸用量为0.7mol/L，压力0.2Wpa，时间为2小时。

(4)取步骤(3)中水解物，过滤酸渣，水洗水解物呈中性。烘干水解物。

(5)取步骤(4)中干燥物，投入提取器中，用溶剂汽油提取出薯蓣皂素。回收溶剂，结晶、烘干、收取薯蓣皂素粗品。

(6)取步骤(5)中薯蓣皂素，用95％乙醇重结晶后，收取薯蓣皂素。

2.根据权利书1所述的生产方法，其特征是：原料粉碎时，“薯蓣皂甙降解催化剂”随水加入发酵物中，使发酵物中水分为80％左右；a-奈乙酸浓度为20-40ppm，纤维素酶为1‰(20000u/g)。混合均匀后进行发酵，发酵温度40±2℃，发酵时间48小时。