CN101698861A - 采用一株米根霉提取薯蓣皂苷的环保提取工艺 - Google Patents
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Abstract
采用一株米根霉提取薯蓣皂苷的环保提取工艺,属于生物技术领域,其工艺是:称取定量的穿龙薯蓣粉末,加入二倍量体积的蒸馏水,拌匀均匀。置于120℃-130℃条件下灭菌20-35min,接入米根霉菌种,于室温下培养28-35天,灭菌,用NaOH调pH至7,于78℃-85℃烘箱中烘干至恒重,准确称取干粉于索氏提取器中,用8-15倍体积石油醚在水浴78-83℃条件下提取,回收石油醚,得总薯蓣皂苷元粗品。有益效果是:薯蓣皂苷元得率高,工艺易于操控,产出的薯蓣皂苷元质量稳定,同时,最大的优点是免去了酸水解这一步,使其在生产过程中环保无污染。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域。
背景技术
长期以来,人们普遍采用直接酸水解法提取分离皂苷元。该工艺存在以下缺点:1)由于薯蓣根茎质地坚硬,并含大量淀粉,不易水解彻底,皂素收率低;2)大量纤维贯穿于生产始末,使消耗成本增大;3)由于在浓酸高温等条件下水解,薯蓣中其它成分遭到破坏,不利于综合利用。此外在酸水解过程中,值得注意的问题是常发生副反应,一是若用盐酸水解则有可能发生羟基氯代,故有人建议最好用硫酸。二是薯蓣皂苷元易脱水转变为Δ3,5-deoxytigogenin,其所得量可随酸的浓度、供试品稀释程度增加而增加。而且苷比苷元更容易形成脱水产物。此外,还可发生25S转25R构型的差向异构化,产生-epimer及F环开环的化合物等。薯蓣皂苷在植物体内与纤维素结合存在于细胞壁中。由于细胞壁较坚韧,因而经典的酸解法仅能提取到约1/4的薯蓣皂苷元。并且因酸水解条件剧烈,破坏了薯蓣淀粉糖的结构,不能综合利用。
预发酵能提高皂素产率,由于薯蓣原料中根茎中含有大量的淀粉和纤维素,对有效成分的溶出有很大的干扰作用,而预发酵法使淀粉和纤维素一定程度的降解,从而使有效成分易于溶出。而也有人认为这是酶解作用。酶解的主要作用是使一部分呋喃醇皂素转化为螺甾醇皂素,而螺甾醇皂素比呋喃醇皂素更易转化为薯蓣皂苷元。从它们结构可知,对于螺甾醇皂素只需除去3-位上的糖就可以转化为薯蓣皂苷元,而对于呋喃醇皂素,不仅需要除去26-位的糖及3-位上的糖,而且还需要进行F-环化才能转化为薯蓣皂苷元。发酵过程中pH值改变可能就是酶解作用引起的。但自然发酵法影响因素(时间、温度、pH值等)较多,产品质量不太稳定。而且此方法虽然提高了得率,但它最终也避免不了酸水解这一步仍然会造成原料中其他成分的结构破坏,而且费酸水的排放会造成环境污染。
酶预处理法与自然发酵法类似,即在酸水解前进行酶解淀粉、纤维素的处理工序。采用酶法,专一性更强。薯蓣皂苷的C3位上结合的支链糖存在着位阻及薯蓣原料中存在的大量淀粉对薯蓣皂苷的“包裹”与“屏蔽”作用,对皂苷水解产生干扰作用,故在酸水解前对原料进行了预处理-淀粉酶酶解淀粉,后酸水解,用此法薯蓣皂苷元得率提高了很多,同时使分离的淀粉得到回收利用。纤维素酶应用于穿山龙提取薯蓣皂甙元,其工艺只比原工艺多了一步,但在纤维素酶的作用下,提高了薯蓣皂苷元的收率。因此,对酸水解前的原料进行酶处理非常必要,不仅效果明显,而且操作起来简单,成本不高,生产反应条件要求温和。但此方法受影响因素(酶量、时间、温度、pH值等)也较多。而且此方法虽然提高了得率,但它最终也避免不了酸水解这一步,仍然会造成原料中其他成分的结构破坏,而且费酸水的排放会造成环境污染。
发明内容
本发明的目的是:采用一株米根霉提取薯蓣皂苷的环保提取工艺,该工艺可以避免酸水解这一步,从而达到不破坏原料中其它成分并且环保的目的。
本发明的工艺是:称取定量的穿龙薯蓣粉末,加入二倍量体积的蒸馏水,拌匀均匀。置于120℃-130℃条件下灭菌20-35min,接入米根霉菌种(HMJAU A03-0005),于室温下培养28-35天,灭菌,用NaOH调pH至7,于78℃-85℃烘箱中烘干至恒重,准确称取干粉于索氏提取器中,用8-15倍体积石油醚(沸点60~90℃)在水浴78-83℃条件下提取,回收石油醚,得总薯蓣皂苷元粗品。
本发明的有益效果是:薯蓣皂苷元得率高(薯蓣皂苷元含量达2.79%),工艺易于操控,产出的薯蓣皂苷元质量稳定,同时,最大的优点是免去了酸水解这一步,使其在生产过程中环保无污染。
具体实施方式
实施例1
称取一定量的穿龙薯蓣粉末,加入二倍量体积的蒸馏水,拌匀均匀。置于126℃条件下灭菌30min,接入米根霉菌种(HMJAU A03-0005),于室温下培养30天,灭菌,用NaOH调pH至7,于80℃烘箱中烘干至恒重,准确称取10克干粉于索氏提取器中用100毫升石油醚(沸点60~90℃)在水浴80℃条件下提取6h,回收石油醚,得总薯蓣皂苷元粗品。此方法总薯蓣皂苷元得率为3.00%,而薯蓣皂苷元得率达2.79%。
Claims (1)
1.采用一株米根霉提取薯蓣皂苷的环保提取工艺,其工艺是:称取定量的穿龙薯蓣粉末,加入二倍量体积的蒸馏水,拌匀均匀。置于120℃-130℃条件下灭菌20-35min,接入米根霉菌种,于室温下培养28-35天,灭菌,用NaOH调pH至7,于78℃-85℃烘箱中烘干至恒重,准确称取干粉于索氏提取器中,用8-15倍体积石油醚在水浴78-83℃条件下提取,回收石油醚,得总薯蓣皂苷元粗品。
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