CN101974470A - 一种稀有放线菌的分离方法 - Google Patents
一种稀有放线菌的分离方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101974470A CN101974470A CN2010105358081A CN201010535808A CN101974470A CN 101974470 A CN101974470 A CN 101974470A CN 2010105358081 A CN2010105358081 A CN 2010105358081A CN 201010535808 A CN201010535808 A CN 201010535808A CN 101974470 A CN101974470 A CN 101974470A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- actinomycete
- separating
- rare
- sterilized water
- rare actinomycete
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明名称是一种稀有放线菌的分离方法,属于微生物技术领域,主要用于土壤稀有放线菌的分离。本发明解决分离放线菌时土壤中优势菌群的干扰问题,通过无菌水多次淘洗减少土壤样品中的优势菌群。根据放线菌容易紧密依附于营养基质的特点,通过接种淘洗后剩下的沉淀泥于放线菌选择培养基上来提高稀有放线菌分离的成功率。
Description
所属技术领域
本发明属于微生物技术领域,应用于稀有放线菌的分离。
背景技术
放线菌是抗生素、酶和酶抑制剂的重要来源,稀有放线菌(rare actinomycete)指用常规的分离程序和分离手段进行样品分离时,一些出现频率要比常见的链霉菌低得多的类群。也有学者把所有的非链霉菌归为稀有放线菌。放线菌的最主要分离源是土壤,链霉菌是其优势菌群,而非链霉菌的分布密度相对来说非常低。
迄今许多已知具有商业意义的代谢产物的发现,几乎均是依靠新的筛选系统及新的微生物分离和鉴定技术的使用。然而,由于长期以来在天然产物的筛选过程中使用传统的菌种分离和鉴定技术,导致大量缺乏明确鉴定的菌株被重复分离和使用,因此从中发现新化合物的概率在逐渐降低,严重的影响着新的生物活性物质的筛选效率。通过新的和稀有放线菌的分离,寻找和发现新的生物活性物质和代谢产物,其潜力仍然是其他生物无法比拟的。
土壤是微生物的大本营,用放线菌选择培养基和常规的稀释平板涂布法偏向于分离数目占优且在培养基上快速生长的优势放线菌,而忽视生长缓慢、数目稀少、紧密结合于土壤微小颗粒的放线菌。稀释法只适合分离容易进入水溶液的微生物或其繁殖体,因而特别偏向于多产孢子的真菌、单细胞的细菌、有鞭毛可运动的、在土壤中数量占优势的菌群,而有些放线菌产生的假根容易长入营养基质,不容易与土壤颗粒分离,还不易产生无性孢子,因而不容易进入溶液,使用稀释法难以分离这类放线菌。如果不经过无菌水淘洗以土壤样品直接接种于放线菌选择培养基,则容易受到其他优势放线菌、甚至细菌和真菌的干扰而难以分离。
发明内容
本发明的目的是减少土壤样品中优势菌群的干扰,提高分离稀有放线菌的成功率。
本发明的目的是通过以下关键技术方案实现的:
一种稀有放线菌的分离方法,包括无菌水淘洗法和沉淀泥接种法这两个关键技术。
无菌水淘洗法是用无菌水对土壤样品进行多次淘洗以减少优势菌的干扰。
沉淀泥接种法是将经过无菌水多次淘洗的土壤样品沉淀泥接种于放线菌选择培养基上以提高分离稀有放线菌的成功率。
本发明的有益效果是:可以极大减少能进入水溶液的微生物的干扰,而直接分离依附于土壤颗粒上的放线菌,提高分离稀有放线菌的成功率。
具体实施方式
本发明的一个实施例包括三个步骤:1)通过无菌水淘洗法减少土壤样品中容易进入水溶液的优势菌的干扰;2)通过选择培养基提高分离稀有放线菌的选择性;3)通过沉淀泥接种法接种纯化。详细具体的实施方案如下:
1)无菌水淘洗法步骤是:a)用灭菌三角瓶盛装土样少量;b)往三角瓶中倒入冷却后的无菌水;c)摇晃混匀;d)倒掉上层悬浊液;e)重复本步骤bcd项数次。
2)选择培养基配制步骤是:a)用高氏1号固体培养基倒平板;b)用无菌水加重铬酸钾配制3%溶液;c)往平板中加入3%重铬酸钾溶液100uL后用无菌玻璃涂棒涂布均匀。
3)沉淀泥接种法步骤是:a)将步骤1中第e步剩下的沉淀泥接种于步骤2中第c步制备的平板培养基上;b)用薄膜密封平板口以防培养基干燥;c)将接种密封后的平板放30℃温箱倒置培养;d)待长出菌落后挑取菌落转接入新的平板培养基中纯化。
Claims (3)
1.一种稀有放线菌的分离方法,其特征是包括无菌水淘洗法和沉淀泥接种法这两个关键技术。
2.根据权利要求1所述的无菌水淘洗法,其特征是用无菌水对土壤样品进行多次淘洗以减少优势菌的干扰。
3.根据权利要求1所述的沉淀泥接种法,其特征是将经过无菌水多次淘洗的土壤样品沉淀泥接种于放线菌选择培养基上以提高分离稀有放线菌的成功率。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2010105358081A CN101974470A (zh) | 2010-11-09 | 2010-11-09 | 一种稀有放线菌的分离方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2010105358081A CN101974470A (zh) | 2010-11-09 | 2010-11-09 | 一种稀有放线菌的分离方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101974470A true CN101974470A (zh) | 2011-02-16 |
Family
ID=43574379
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN2010105358081A Pending CN101974470A (zh) | 2010-11-09 | 2010-11-09 | 一种稀有放线菌的分离方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN101974470A (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111254097A (zh) * | 2020-03-19 | 2020-06-09 | 新疆大学 | 一种土壤中放线菌原位培养的方法 |
-
2010
- 2010-11-09 CN CN2010105358081A patent/CN101974470A/zh active Pending
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
《云南大学学报(自然科学版)》 20071231 彭云霞等 稀有放线菌的选择性分离方法 第29卷, 第1期 2 * |
《极地研究》 20090331 腾海波等 北极黄河站植物根际土壤放线菌分离培养及其鉴定 第21卷, 第1期 2 * |
《生命科学仪器》 20051231 张学武等 稀有放线菌的选择性分离 第3卷, 第6期 2 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111254097A (zh) * | 2020-03-19 | 2020-06-09 | 新疆大学 | 一种土壤中放线菌原位培养的方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Hmidet et al. | Enhancement of surfactin and fengycin production by Bacillus mojavensis A21: application for diesel biodegradation | |
JP4439401B2 (ja) | マクロライド系化合物の製造方法 | |
WO2022262384A1 (zh) | 一种提高刺糖多孢菌多杀菌素产量的方法 | |
CN106434510B (zh) | 一株发酵产l-天冬氨酸的基因工程菌 | |
CN104928202A (zh) | 一种芽孢杆菌的发酵培养方法 | |
CN102643770A (zh) | 利用合成培养基纯厌氧生长产丁二酸的大肠杆菌及其应用 | |
CN110551654A (zh) | 阿氏芽孢杆菌、其代谢产物及其应用 | |
CN108026546A (zh) | 微杆菌属菌株用于生产抗菌剂的用途 | |
CN103937691B (zh) | 一株产β‑果糖苷酶的米曲霉菌株及其培养方法与应用 | |
CN108611274A (zh) | 定向筛选土壤目标微生物菌群的方法 | |
CN101851591B (zh) | 一种纤维堆囊菌生产埃坡霉素b的发酵方法及发酵培养基 | |
WO2008043368A2 (en) | Method for obtaining endospores of sporogenous fermentable thermophilic strains of microorganism and use of the obtained endospores to inoculate fermentation | |
CN105936879B (zh) | 枯草芽孢杆菌k13及其培养方法和应用 | |
JP2013132248A (ja) | 光合成細菌の培養方法および光合成細菌 | |
CN101974470A (zh) | 一种稀有放线菌的分离方法 | |
CN105255936A (zh) | 一种海洋放线菌基因遗传操作系统的构建方法 | |
CN111534471B (zh) | 一种粘细菌培养基及培养方法 | |
CN105018410B (zh) | 一种诱导三孢布拉氏霉老化菌株快速大量产孢的方法 | |
CN102936575B (zh) | 一株大肠埃希氏菌ll016及其应用 | |
CN105296407A (zh) | 一种副鸡禽杆菌菌液的培养方法 | |
CN111733202A (zh) | 一种泰乐菌素混种发酵方法 | |
CN104388460A (zh) | 一种转化芽孢杆菌的方法 | |
CN104513847A (zh) | 利用甲烷氧化混合菌生物合成聚β-羟基丁酸酯的方法 | |
Nashima et al. | Production and optimization of lipase from wild and mutant strains of Bacillus sp. and Pseudomonas sp | |
CN104498542A (zh) | 连续法发酵生产l-乳酸的方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20110216 |