CN101955511A

CN101955511A - 氧化型谷胱甘肽及其碱金属盐的合成方法

Info

Publication number: CN101955511A
Application number: CN2009101814059A
Authority: CN
Inventors: 邹巧根
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2009-07-16
Filing date: 2009-07-16
Publication date: 2011-01-26

Abstract

本发明涉及氧化型谷胱甘肽及其碱金属盐的合成方法，该合成方法以谷胱甘肽为原料，分别选用不同的试剂进行反应得到氧化型谷胱甘肽，并制备成其碱金属盐的形式。本发明涉及的两种不同试剂分别为溴代丙二酸二乙酯和三氯硝基甲烷。本发明涉及的碱金属盐包括锂盐、钠盐和钾盐。本发明还涉及了反应过程的监测方法。

Description

氧化型谷胱甘肽及其碱金属盐的合成方法

技术领域

本发明涉及氧化型谷胱甘肽及其碱金属盐的合成方法。本发明还涉及合成过程的反应监测。

背景技术

本发明叙述的氧化型谷胱甘肽其结构式如下：

还原型谷胱甘肽可以激活多种酶(如巯基酶)从而促进糖、脂肪及蛋白质代谢，并能影响细胞的代谢过程；它可通过巯基与体内的自由基结合，可以转化成容易代谢的酸类物质从而加速自由基的排泄，有助于减轻化疗、放疗的毒副作用，对化疗、放疗的疗效无明显影响；通过转甲基及转丙氨基反应，还原型谷胱甘肽还能保护肝脏的合成、解毒、灭活激素等功能，并促进胆酸代谢，有利于消化道吸收脂肪及脂溶性维生素；还原型谷胱甘肽为化疗患者、放射治疗患者、各种低氧血症、肝脏疾病，亦可用于有机磷、胺基或硝基化合物中毒的辅助治疗。

氧化型谷胱甘肽主要是通过调节细胞氧化还原状态而起到免疫调节和保护全身细胞；刺激正常细胞增殖和分化，同时可以诱导不正常的细胞凋亡；主要免疫生理学作用包括增加中枢免疫器官和淋巴组织的细胞，增强脊髓造血功能、激活吞噬作用(包括免疫缺陷的情况)、恢复外周血中的中性粒细胞，单核细胞和淋巴细胞的数量以及组织中巨噬细胞的活性。氧化型谷胱甘肽为预防和治疗与辐射、化学和感染有关的二次免疫缺陷、肝炎、预防手术后化脓性并发症、与抗肺结核药物联合应用。

发明内容

本发明提供了两种合成氧化型谷胱甘肽(GSSG)及其碱金属盐的合成方法。本发明还提供了监测上述反应的高效液相色谱条件。

本发明中氧化型谷胱甘肽的合成采用以下技术方案实现：

1、溴代丙二酸二乙酯法

A、将溴代丙二酸二乙酯溶于乙醇，于-16℃滴入谷胱甘肽和LiOH的乙醇溶液中。滴毕，维持此温度搅拌；

B、反应结束后，用1M的HCl调节pH至3，减压蒸馏。所得残余物用乙醇重结晶，过滤。将得到的粉末溶于少量的水中，加入乙醇，析出粉末为氧化型谷胱甘肽与乙醇的结合物，减压干燥得氧化型谷胱甘肽。

2、三氯硝基甲烷法

A、将三氯硝基甲烷加入到谷胱甘肽的水溶液中，室温搅拌；

B、反应结束后，减压蒸馏至干，然后用无水乙醇重结晶，减压干燥，得到氧化型谷胱甘肽。m.p.＝178-180℃。

氧化型谷胱甘肽的合成过程中的反应监测是以高效液相色谱法进行监测的。高效液相色谱法的色谱条件为：

色谱柱：C₁₈柱

流动相：乙腈∶三氟乙酸∶水(2∶0.1∶97.9)

流速：1.0mL/min

检测波长：220nm

进样：20μL

氧化型谷胱甘肽碱金属盐(包括锂盐、钠盐和钾盐)的合成采用以下技术方案实现：

取三份氧化型谷胱甘肽，分别加入少量的水，搅拌，使其刚刚溶解，分别加入LiOH、NaOH、KOH，维持温度在0～30℃加毕搅拌，分别加入4～12倍体积的无水乙醇析晶，搅拌，过滤，干燥分别得到氧化型谷胱甘肽二锂盐、二钠盐、二钾盐。

本发明用溴代丙二酸二乙酯法和三氯硝基甲烷法合成氧化型谷胱甘肽，收率可达到90％。

具体实施方式

1溴代丙二酸二乙酯法制备氧化型谷胱甘肽

将溴代丙二酸二乙酯66g(0.28mol)，溶于200ml乙醇，滴加入谷胱甘肽154g(0.5mol)和LiOH44g(1.05mol)的300ml乙醇溶液中，-16℃滴加30分钟。滴加完成后，维持此温度搅拌1小时左右。

反应过程使用高效液相色谱监测。色谱条件如下：

色谱柱：C₁₈柱

流动相：乙腈∶三氟乙酸∶水(2∶0.1∶97.9)

流速：1.0mL/min

检测波长：220nm

进样：20μL

氧化型谷胱甘肽、还原型谷胱甘肽、乙醇分别用GSSG、GSH、EtOH表示。

当图谱显示GSSG∶GSH的比例大于95时，可以认为反应已经完成。

反应结束后，1N的HCl调节pH至3，减压蒸馏。所得残余物用乙醇重结晶，过滤。将得到的粉末溶于少量的水中，加入乙醇。分离得到的粉末为GSSG-EtOH(1∶1)的结合物，减压干燥，得到氧化型谷胱甘肽(148g，收率90％)。[α]²⁵D＝-90.9°(c＝1.1，H2O)，[α]²⁰D＝-108°(c＝2，H₂O)；IR(KBr)：1720(C＝O)，1635(NH₂和C＝O)，1530(NH)；1H-NMR(D₂O)δ：1.08(3H，t，J＝7.0Hz，CH₃CH₂OH)，1.88-2.70(8H，m，COCH₂CH₂×2)，3.00(2H，dd，J＝13.0，8Hz，CHBS×2)，3.27(2H，dd，J＝13.0，5Hz，CHAS×2)，3.63(2H，q，J＝7.0Hz，CH₃CH₂OH)，3.81(2H，t，J＝6.0Hz，NCHCO×2)，3.93(4H，s，COCH₂N×2)(NCHCO上的氢信号被重水交换，没有显示)。

2三氯硝基甲烷法制备氧化型谷胱甘肽

将三氯硝基甲烷32.8g(0.2mol)，加入到谷胱甘肽7.5g(25mmol)的200mL水溶液中。室温搅拌，如实施例一中的HPLC方法监测反应进程。

反应结束后，减压蒸馏至干，然后用无水乙醇重结晶，减压干燥，得到13.5g氧化型谷胱甘肽，收率90％。m.p.＝178-180℃。

3氧化型谷胱甘肽锂盐的制备

取氧化型谷胱甘肽61.3g(0.1mol)，加入少量的水，搅拌，使其刚刚溶解，然后分次加入LiOH 8.4g(0.2mol)，维持温度在4℃，加毕搅拌10min，加入6倍体积的无水乙醇析晶，搅拌过夜，过滤，干燥得到氧化型谷胱甘肽二锂盐。

4氧化型谷胱甘肽钠盐的制备

取氧化型谷胱甘肽61.3g(0.1mol)，加入少量的水，搅拌，使其刚刚溶解，然后分次加入NaOH 8g(0.2mol)，维持温度在10℃，加毕搅拌14min，加入10倍体积的无水乙醇析晶，搅拌过夜，过滤，干燥得到氧化型谷胱甘肽二钠盐。

5氧化型谷胱甘肽钾盐的制备

取氧化型谷胱甘肽61.3g(0.1mol)，加入少量的水，搅拌，使其刚刚溶解，然后分次加入KOH 11.2g(0.2mol)，维持温度在25℃，加毕搅拌12min，加入8倍体积的无水乙醇析晶，搅拌过夜，过滤，干燥得到氧化型谷胱甘肽二钾盐。

Claims

1.氧化型谷胱甘肽及其碱金属盐的合成方法。

2.如权利要求1所述的氧化型谷胱甘肽的合成方法，其特征在于以谷胱甘肽为原料，用两种方法得到氧化型谷胱甘肽。

3.如权利要求1所述的氧化型谷胱甘肽碱金属盐的合成方法，其特征在于以反应得到的氧化型谷胱甘肽为原料合成氧化型谷胱甘肽碱金属盐。

4.如权利要求2所述的合成方法，其中一种是以溴代丙二酸二乙酯为主要试剂进行合成的，包含如下步骤：

5.如权利要求2所述的合成方法，其中一种是以三氯硝基甲烷为主要试剂进行合成的，包含如下步骤：

A、将三氯硝基甲烷加入到谷胱甘肽的水溶液中，室温搅拌；

B、反应结束，减压蒸馏至干，无水乙醇重结晶，减压干燥得到氧化型谷胱甘肽。m.p.＝178-180℃。

6.如权利要求3所述的碱金属盐包括锂盐、钠盐和钾盐。

7.如权利要求6所述的锂盐、钠盐和钾盐，其特征在于合成步骤如下：

取三份氧化型谷胱甘肽，加入少量的水，搅拌，使其刚刚溶解，然后分别加入LiOH、NaOH、KOH，维持温度在0～30℃，加毕搅拌数分钟，分别加入4～12倍体积的无水乙醇析晶，搅拌，过滤，干燥分别得到氧化型谷胱甘肽二锂盐、二钠盐、二钾盐。

8.如权利要求4和5所述的合成方法的反应监测是以高效液相色谱法进行监测的，高效液相色谱法的色谱条件为：

色谱柱：C₁₈柱

流动相：乙腈∶三氟乙酸∶水(2∶0.1∶97.9)

流速：1.0mL/min

检测波长：220nm

进样：20μL。