CN101948763A - 一种高效发酵床复合菌剂及其制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种高效发酵床复合菌剂,具体地说是涉及一种由枯草芽孢杆菌CGMCC1.769、CGMCC1.210、植物乳杆菌CICC6073、热带假丝酵母CGMCC2.587、康宁木霉CGMCC3.4290共5株有益菌和其代谢产物(淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶、有机酸、抗菌素等)组成的发酵床用复合菌剂,及其制备方法和用途。本发明提供的复合菌剂采用深层液体混合发酵工艺制成,首先将植物乳杆菌35℃液体深层发酵12h,再分别接种热带假丝酵母菌和康宁木霉30℃混合发酵12h后,再接种枯草芽孢杆菌液体深层混合发酵24h,使发酵活菌数分别控制为:1-2×109cfu/ml、5-8×108cfu/ml、3-5×108cfu/ml、3-5×109cfu/ml2-5×109cfu/ml,终止发酵,分装密封即可得到高效发酵床复合菌剂。同时本发明也提供了高效复合菌剂用途——制备发酵床垫料的方法。本发明的复合菌剂,活菌含量高,生物活性高,杂菌污染少,不仅可显著降低猪圈舍的臭味,减少蚊蝇滋生机会,达到无污染、零排放的生态养殖目的,而且制作发酵床过程简单、节省了垫料及人力等。
Description
技术领域
本发明涉及一种用于发酵床养猪的高效复合菌剂,还涉及这种复合菌剂的制备方法、用途,属于饲料添加剂领域。
背景技术
近年来,随着我国规模化、集约化养猪业的迅猛发展,生产效率得到了极大提高,而传统水泥地面饲养模式也产生了一些弊端,一是猪粪集中排放,需要大面积的粪场和冲刷用水,浪费资源和劳力,并造成养殖环境和周边环境的严重污染,我国每年畜禽粪便产生量已达19亿吨,超过了工业固体废弃物排放量的2倍多。二是抗生素滥用造成的毒副作用、药残和细菌抗药性以及畜产品质量安全问题;因此,养猪生产必须寻求能达到降低环境污染.提高猪肉食品安全等要求的全新生猪养殖生产方式。发酵床式生态养猪模式在某种程度上满足了这些要求。
发酵床式生态养猪模式是利用全新的自然农业理念,结合现代微生物发酵处理技术提出的一种环保、安全、有效的生态养猪法。
发酵床式生态养殖模式的原理是利用发酵床菌种,按一定比例混合秸秆、锯末屑、稻壳粉等垫料进行微生物发酵繁殖形成一个微生态发酵床,再利用生猪的拱翻习性,使猪粪、尿和垫料充分混合,微生物以尚未消化的猪粪为营养繁殖,使猪粪、尿中的有机物质得到充分的分解和转化,臭味消失。而同时繁殖生长的大量微生物又提供了营养和菌体蛋白质为猪食用,从而使发酵床成微生态环境,因此说,发酵床养猪是一种无污染、无排放的、无臭气的新型环保生态养猪技术。
目前,我国处于发酵床推广应用兴起阶段,相对养殖市场的大量需求,专业高效的发酵床用产品、技术显得很匮乏,为追求利润,市场上很多发酵床产品、技术良莠不齐,部分厂家直接采集土著菌,经简单处理后包装销售,产品质量和效果无法保证。有个别单位推出发酵床养猪用复合微生态制剂,但存在的问题是:生产工艺过于简单,产品质量、效果一般,制备发酵床垫料方法,仍需要进行垫料提前发酵,垫料厚度须为80-100cm,操作过程复杂,浪费人力、物力。这些都限制了发酵床的广泛推广与应用。
针对上述存在的问题,本发明提出的解决方案是:首先根据猪粪分解原理、微生态平衡原理选择性能优良的有益菌种,即能高产淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶、抗菌素、菌体蛋白的菌种组合,并且菌种之间互生互利,互不拮抗;然后采用深层液体混合发酵工艺制成高生物活性的复合菌剂;利用本发明的复合菌剂制备发酵床,垫料不用提前发酵,垫料厚度可以降低至50cm。因此本发明解决了分解粪便效率低;制备发酵床垫料需求量大,厚度须为80-100cm;且垫料需要提前发酵、制备过程复杂且劳动量大的问题。
发明内容
本发明的目的是提供了一种枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、康宁木霉、热带假丝酵母共5株益生菌及其代谢产物组成的高效发酵床复合菌剂,其特征在于,枯草芽孢杆菌CGMCC1.210产α-淀粉酶活力很强,枯草芽孢杆菌CGMCC1.769产蛋白酶活力很高,产蛋白酶1200U/mL,康宁木霉CGMCC3.4290产纤维素酶活力很高,植物乳杆菌CICC6073产乳酸、抗菌素高,热带假丝酵母CGMCC2.587是良好的菌体蛋白,菌体蛋白质含量高达55%。
本发明的另一目的是提供了一种高效发酵床复合菌剂的制备方法,为利用5株菌种之间互生互利,互不拮抗的原理采用深层液体混合发酵工艺制成高活性复合菌剂。首先接种植物乳杆菌30-37℃液体深层发酵12-20h,再分别接种热带假丝酵母菌和康宁木霉25-30℃混合发酵12h-24h后,再接种枯草芽孢杆菌35-37℃液体深层混合发酵12-20h,使发酵液活菌数分别达到:1-2×109cfu/ml、5-8×108cfu/ml、3-5×108cfu/ml、3-5×109cfu/ml 2-5×109cfu/ml,终止发酵,分装密封即可得到高效发酵床复合菌剂。
本发明的还一个目的是提供了一种高效发酵床复合菌剂的用途,即制备发酵床垫料的方法。
本发明的目的是通过如下技术方案实现的:
1、优良菌种的选择
猪粪(干物质含量)中有机物80.1%,易分解性有机碳27.3%,相脂肪15.7%,半纤维素3.5%,纤维素9.0%,半固体部分30.8%,木质素17.6%,含氮量3.61%。因此应选择能分泌淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶且活力高的能够有效分解粪便中有机物的有益菌种;其次选择具有抑菌功能的益生菌,能够有效抑制粪便、垫料中的致病菌。
因此本发明选择的优良菌种具体如下:
枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis)CGMCC1.769:中国普通微生物菌种保藏管理中心。单个细胞0.7~0.8×2~3微米,无荚膜,周生鞭毛,能运动。革兰氏阳性菌,芽孢0.6~0.9×1.0~1.5微米,椭圆到柱状,位于菌体中央或稍偏,芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明,污白色或微黄色,在液体培养基中生长时,常形成皱醭。需氧菌。可利用蛋白质、多种糖及淀粉,分解色氨酸形成吲哚。特别指出的是本发明的选择的枯草芽孢杆菌蛋白酶活性很高,产蛋白酶1200U/mL。
枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis)CGMCCl.210:中国普通微生物菌种保藏管理中心。产α-淀粉酶活力很强。
康宁木霉(Trichoderma koningii)CGMCC3.4290:中国普通微生物菌种保藏管理中心。菌丝有隔膜,蔓延生长,广铺于固体培养基上,菌外观为浅绿,黄绿或绿色,反面无色,分生孢子。梗为菌丝的短侧枝,其上对生或互生分枝,分枝上又可继续分枝,形成2级、3级分枝,分枝末端即为瓶状梗。分生孢子由小梗相继生出,靠黏液把它们聚成球形或近球形的孢子头,分生孢子卵形成椭圆形,壁光滑。单个孢子近无色,形成堆状为绿色。此菌有很强的纤维素酶及淀粉酶等,特别指出的是本发明选择的康宁木霉产纤维素酶活性很高。
热带假丝酵母(Candida tropicalis)CGMCC2.587:中国普通微生物菌种保藏管理中心。热带假丝酵母是最常见的假丝酵母。细胞呈球形或卵球。在麦芽汁琼脂上菌落为白色到奶油色,无光泽或稍有光泽。软而平滑或部分有皱纹。培养时间长时,菌落变硬。用农副产品和工业废弃物也可培养热带假丝酵母,既扩大了饲料来源,又减少了环境污染。特别指出,本发明的热带假丝酵母含蛋白质55%,是优质饲料菌体蛋白。
植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CICC6073:中国工业微生物菌种保藏中心。外观为杆状直线型,两端以圆弧形收尾。通常宽为0.9~1.2mm;长为3.0~8.0mm;以单个,两两成对或短链形式排列存在;兼性厌氧菌,产乳酸,产抗菌素,能够有效抑制大肠杆菌、沙门氏菌等致病菌。
2、高效复合菌剂的制备
2.1、斜面菌种活化:
取安瓿管菌种,分别无菌操作接种于相应的试管斜面培养基中,植物乳杆菌30-37℃恒温培养48-72h;康宁木霉、热带假丝酵母菌25-30℃恒温培养48-72h;芽孢杆菌35-37℃恒温培养24-36h;制成试管斜面菌种,4℃冰箱保藏备用。
2.2、种子液的制备:
(1)植物乳杆菌种子液的制备:取冰箱保减斜面菌种,无菌操作接种于装有150-200ml的MRS培养基的500ml三角瓶中,转速100-150rpm,30-37℃恒温培养20-30h。
(2)热带假丝酵母、康宁木霉菌种子液的制备:取冰箱保藏斜面菌种,分别无菌操作接种于装有100-200ml的麦芽汁培养基的500ml三角瓶中,转速100-150rpm,25-30℃恒温培养24-36h。
(3)枯草芽孢杆菌种子液的制备:取冰箱保藏斜面菌种,分别无菌操作接种于装有30-50ml的LB培养基的500ml三角瓶中,转速200-240rpm,35-37℃恒温培养8-16h。
本发明步骤2.1和2.2中所述的培养基配方分别如下:
植物乳杆菌用培养基(g/L):MRS培养基:蛋白陈:10.0g,牛肉粉:5.0g,酵母粉:4.0g,葡萄糖:20.0g,吐温80:1.0mL,磷酸氢二钾:2.0g,乙酸钠:5.0g,柠檬酸三铵:2.0g,硫酸镁:0.2g,硫酸锰:0.05g,蒸馏水:1000mL,如制成试管斜面培养基再加15-20.0g琼脂,121℃灭菌20min。
热带假丝酵母、康宁木霉用培养基(g/L):5Brix麦芽汁培养基,如制成试管斜面培养基再加15-20.0g琼脂,121℃灭菌20min。
枯草芽孢杆菌用培养基(g/L):LB培养基:胰蛋白胨:10.0g,酵母提取物:5.0g,氯化钠:10.0g,蒸馏水1000ml,如制成试管斜面培养基再加15.0-20.0g琼脂,121℃灭菌20min。
2.3、高效复合菌剂的制备
将植物乳杆菌种子液按照3-10%的接种量,接种于装有30-35L发酵培养基的50L发酵罐中,控制初始pH值为6.5-7.0,搅拌转速100-150rpm,通气量0.15-0.3V/V·min,30-37℃培养12-20h;再将热带假丝酵母菌、康宁木霉种子液按照3-10%的接种量分别同时接种,搅拌转速100-150rpm,通气量0.15-0.3V/V·min,25-30℃培养12-24h;再按照3-10%的接种量分别同时接种枯草芽孢杆菌,搅拌转速160-200rpm,通气量0.3-0.8V/V·min,35-37℃培养12-20h;活菌数分别达到1-2×109cfu/ml、5-8×108cfu/ml、3-5×108cfu/ml、3-5×109cfu/ml 2-5×109cfu/ml,终止发酵,分装密封,即得高效复合菌剂。
本发明的步骤2.3中所述的发酵培养基配方(g/L):葡萄糖40,酵母膏5,大豆蛋白胨18,氯化钠5,121℃灭菌20min。
3、高效复合菌剂的使用方法——发酵床垫料的制备
利用本发明的高效复合菌剂制备发酵床垫料,不用提前进行垫料发酵,随铺即用,这是由于:复合菌剂中含有抗菌物质,能够有效抑制垫料中病原菌的生长繁殖,另外在发酵床启动后垫料中部的高温发酵也会杀死多数的病原菌。本发明的复合菌剂是按下述步骤制备发酵床垫料的:
1)铺10cm左右木屑,洒水达到30-40%湿度;
2)复合菌剂的使用量为1L/m3,将复合菌剂适当稀释,均匀泼洒在木屑表面;
3)铺10cm左右稻壳,洒水至30-40%湿度;
重复以上步骤2-4次,最后一层表面铺木屑10cm左右,将发酵池填满,喷水到湿度30-40%,垫料的铺设即完成。
特别指出,本发明步骤3中所述的垫料厚度可以是50-100cm;垫料原料还可以是锯末、稻壳、秸秆、花生壳等常见的农作物下脚料的组合。
本发明的优点和有益效果是:
本发明的复合菌剂,不仅含有高效分泌纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶的有益菌种,保证了粪便的高效分解,可以降低垫料厚度至50cm,提高了相对饲养密度;还含有产生抗菌物质的乳酸菌,又保证了垫料可以不用提前发酵,从而节省了许多人力、垫料、水、时间成本,方便用户使用;含有活性高的酵母菌,提供了大量的菌体蛋白,节省了饲料;因此本发明的复合菌剂,可以显著减轻环境污染,提高猪肉品质,提高饲料利用率,节工省本,提高经济效益。
具体实施方式
通过下列实施例将更具体的说明本发明,但是应理解所述实施例仅是为了说明本发明,而不是以任何方式限制本发明的范围。
实施例1:斜面菌种活化
(1)植物乳杆菌斜面菌种活化:取安瓿管菌种,无菌操作接种于试管斜面培养基中,37℃恒温培养72h,制成试管斜面菌种,4℃冰箱保藏备用。斜面培养基(g/L):MRS培养基:蛋白陈:10.0g,牛肉粉:5.0g,酵母粉:4.0g,葡萄糖:20.0g,吐温80:1.0mL,磷酸氢二钾:2.0g,乙酸钠:5.0g,柠檬酸三铵:2.0g,硫酸镁:0.2g,硫酸锰:0.05g,蒸馏水:1000mL,琼脂15g,121℃灭菌20min。
(2)热带假丝酵母菌、康宁木霉斜面菌种活化:取安瓿管菌种,分别无菌操作接种于试管斜面培养基中,30℃恒温培养48h,制成试管斜面菌种,4℃冰箱保藏备用。斜面培养基(g/L):5Brix麦芽汁培养基,20g琼脂,121℃灭菌20min。
(3)枯草芽孢杆菌斜面菌种活化:取安瓿管菌种,无菌操作接种于试管斜面培养基中,37℃恒温培养24h,制成试管斜面菌种,4℃冰箱保藏备用。斜面培养基(g/L):LB培养基:胰蛋白胨:10.0g,酵母提取物:5.0g,氯化钠:10.0g,蒸馏水1000ml,琼脂20.0g,121℃灭菌20min。
实施例2:种子液的制备
(1)植物乳杆菌种子液的制备:取冰箱保藏斜面菌种,无菌操作接种于装有200ml的MRS培养基的500ml三角瓶中,37℃恒温150rpm培养20h。种子培养基:本发明实施例1(1)中的斜面培养基不加琼脂。
(2)热带假丝酵母菌、康宁木霉种子液的制备:取冰箱保藏斜面菌种,分别无菌操作接种于装有100ml的麦芽汁培养基的500ml三角瓶中,30℃恒温100rpm培养24h。种子培养基:本发明实施例1(2)中的斜面培养基不加琼脂。
(3)枯草芽孢杆菌种子液的制备:取冰箱保藏斜面菌种,分别无菌操作接种于装有30ml的LB培养基的500ml三角瓶中,35℃恒温200rpm培养16h。种子培养基:本发明实施例1(3)中的斜面培养基不加琼脂。
实施例3:高效复合菌剂的制备
将植物乳杆菌按照10%的接种量分别同时接种于装有30L发酵培养基的50L发酵罐中,控制初始pH值为6.5;搅拌转速100rpm,通气量0.15V/V·min,30℃培养20h;再分别同时将热带假丝酵母菌、康宁木霉种子液按照5%的接种量接种,搅拌转速100rpm,通气量0.3V/V·min,25℃培养12h;再分别同时接种枯草芽孢杆菌,搅拌转速200rpm,通气量0.8V/V·min,37℃培养20h;活菌数分别达到1×109cfu/ml、8×108cfu/ml、5×108cfu/ml、1×109cfu/ml、3×109cfu/ml,终止发酵,分装、密封,即得复合菌剂。
实施例4:复合菌剂的用途——发酵床垫料的制备
(1)铺10cm木屑,洒水达到40%湿度;
(2)复合菌剂的使用量为1L/m3,取5L复合菌剂并稀释至20L,均匀泼洒在木屑表面;
(3)铺10cm稻壳,洒水至40%湿度;
重复以上步骤2次,最后一层表面铺木屑10cm,将发酵池填满至50cm,喷水到湿度40%,垫料的铺设即完成。
发酵垫料含水量的控制:40%较合适,鉴别方法:手抓可成团,松手即散,指缝无水渗出。
实施例5、利用本发明的复合菌剂制备发酵床的养猪功效
选择同批的杜×长×大三元健康活泼体重约10kg的断奶仔猪96头,根据体重及性别比例相近的原则,试验分四组,对照组、试验组I、试验组II、试验组III,每组有三个重复,每个重复8头断奶仔猪。其中对照组,水泥地板饲喂,试验组I为用本发明的复合菌剂制成50cm的发酵床垫料饲喂,试验组II为用本发明的复合菌剂制成100cm的发酵床垫料饲喂,试验组III为用发明的复合菌剂按照常规方法进行垫料提前发酵制作发酵床,饲喂70天。
实验结果如下:
发酵床与水泥地面圈舍环境及体表观察结果
发酵床与水泥地面养猪的生产性能结果
由上表看出,试验组I、II、III的圈舍环境明显比对照组好,没有明显臭味,无蚊蝇滋生;猪的外表也显著良好,毛色光亮,清洁干净;试验组I、II、III的日增重显著高于对照组(P<0.01),料肉比显著低于对照组(P<0.01),腹泻率显著低于对照组(P<0.01)。实验组I、II、III之间差异不显著。由此得出结论,本发明的复合菌剂,可以减轻环境污染,提高猪肉品质,提高饲料利用率,降低腹泻率,节工省本,提高效益。
Claims (3)
1.一种高效发酵床复合菌剂及其制备方法和用途,其特征在于:不仅包括植物乳杆菌CICC6073、热带假丝酵母CGMCC2.587、康宁木霉CGMCC3.4290、枯草芽孢杆菌CGMCC1.769、CGMCC1.210高活性益生菌,活菌数分别为1-2×109cfu/ml、5-8×108cfu/ml、3-5×108cfu/ml、3-5×109cfu/ml、2-5×109cfu/ml,还包括其代谢产物淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶、有机酸及抗菌素。
2.如权利要求1所述的一种高效发酵床复合菌剂,其特征在于,是由下列步骤制成的:
1)、斜面菌种活化:
取安瓿管菌种,分别无菌操作接种于相应的试管斜面培养基中,植物乳杆菌30-37℃恒温培养48-72h;康宁木霉、热带假丝酵母菌25-30℃恒温培养48-72h;枯草芽孢杆菌35-37℃恒温培养24-36h;制成试管斜面菌种,4℃冰箱保藏备用。
2)、种子液的制备:
A、植物乳杆菌种子液的制备:取冰箱保藏斜面菌种,无菌操作接种于装有150-200ml的MRS培养基的500ml三角瓶中,转速100-150rpm,30-37℃恒温培养20-30h。
B、热带假丝酵母、康宁木霉菌种子液的制备:取冰箱保藏斜面菌种,分别无菌操作接种于装有100-200ml的麦芽汁培养基的500ml三角瓶中,转速100-150rpm,25-30℃恒温培养24-36h。
C、枯草芽孢杆菌种子液的制备:取冰箱保藏斜面菌种,分别无菌操作接种于装有30-50ml的LB培养基的500ml三角瓶中,转速200-240rpm,35-37℃恒温培养8-16h。
3)、高效复合菌剂的制备
将植物乳杆菌种子液按照3-10%的接种量,接种于装有30-35L发酵培养基的50L发酵罐中,控制初始pH值为6.5-7.0,搅拌转速100-150rpm,通气量0.15-0.3V/V·min,30-37℃培养12-20h;再将热带假丝酵母菌、康宁木霉种子液按照3-10%的接种量分别同时接种,搅拌转速100-150rpm,通气量0.15-0.3V/V·min,25-30℃培养12-24h;再按照3-10%的接种量分别同时接种枯草芽孢杆菌,搅拌转速160-200rpm,通气量0.3-0.8V/V·min,35-37℃培养12-20h;活菌数分别达到1-2×109cfu/ml、5-8×108cfu/ml、3-5×108cfu/ml、3-5×109cfu/ml 2-5×109cfu/ml,终止发酵,分装密封,即得高效复合菌剂。
权利要求2步骤3)中所述的发酵培养基配方为(g/L):葡萄糖40,酵母膏5,大豆蛋白胨18,氯化钠5,121℃灭菌20min。
3.如权利要求1、2所述的高效发酵床复合菌剂,其特征在于,是按照下列步骤制备发酵床垫料的:
1)铺10cm木屑,洒水达到30-40%湿度;
2)复合菌剂的使用量为1L/m3,将复合菌剂适当稀释,均匀泼洒在木屑表面;
3)铺10cm稻壳,洒水至30-40%湿度;
重复以上步骤2-4次,最后一层表面铺木屑10cm,将发酵池填满至50cm-100cm,喷水到湿度30-40%,发酵床垫料的铺设即完成。垫料原料还可以是锯末、稻壳、秸秆、花生壳常见的农作物下脚料的组合。
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CN (1) | CN101948763B (zh) |
Cited By (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102329749A (zh) * | 2011-09-19 | 2012-01-25 | 山东宝来利来生物工程股份有限公司 | 一株经航天育种技术选育的枯草芽孢杆菌及其应用 |
CN102776167A (zh) * | 2012-04-12 | 2012-11-14 | 大连大学 | 微生物发酵生产纤溶酶的方法 |
CN103053432A (zh) * | 2013-01-07 | 2013-04-24 | 湖南省微生物研究所 | 一种发酵床生物活性垫料及其制备和应用方法 |
CN103194393A (zh) * | 2013-03-27 | 2013-07-10 | 广西防城港市亿林农牧有限公司 | 发酵床菌剂及其制备方法 |
CN103355180A (zh) * | 2013-04-18 | 2013-10-23 | 湖北宏全农牧有限公司 | 一种畜禽养殖发酵菌床及其制备方法 |
CN103865860A (zh) * | 2014-04-01 | 2014-06-18 | 江苏省农业科学院 | 一种猪发酵床三元复合菌剂 |
MD4285C1 (ro) * | 2013-02-28 | 2014-12-31 | Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы | Tulpină de fungi Trichoderma koningii Oudemans - producătoare de proteaze acide, neutre şi alcaline |
CN104620996A (zh) * | 2014-04-17 | 2015-05-20 | 北京华牧伟业科技有限公司 | 一种用于畜禽养殖的益生菌发酵床 |
CN105039469A (zh) * | 2015-07-17 | 2015-11-11 | 季维峰 | 一种利用有机废弃物制备复合菌体蛋白的方法 |
CN105948278A (zh) * | 2016-07-06 | 2016-09-21 | 苏州市相城区阳澄湖镇东枪塘水产养殖专业合作社 | 一种水产养殖用微生物酶制剂 |
CN106244481A (zh) * | 2016-07-29 | 2016-12-21 | 河南普爱饲料股份有限公司 | 一种用于畜禽排泄物处理的复合微生态制剂、其制备方法及应用 |
CN107629976A (zh) * | 2016-07-18 | 2018-01-26 | 中国石油天然气集团公司 | 一种微生物及其菌剂和应用 |
CN107779416A (zh) * | 2016-08-30 | 2018-03-09 | 蒋爱国 | 一种高效发酵床用复合微生物菌剂 |
CN109526536A (zh) * | 2017-07-31 | 2019-03-29 | 张家港爱尔乐信息科技有限公司 | 一种秸秆发酵床接种剂及其制备方法和使用方法 |
CN109618944A (zh) * | 2018-12-13 | 2019-04-16 | 哈尔滨森荞生物科技有限公司 | 一种超敏蛋白复合酶制剂及其制备方法与应用 |
CN109943505A (zh) * | 2019-03-21 | 2019-06-28 | 内蒙古和美科盛生物技术有限公司 | 一种用于无害化处理粪渣卧床垫料的复合益生菌菌剂 |
CN110172413A (zh) * | 2019-03-21 | 2019-08-27 | 内蒙古和美科盛生物技术有限公司 | 一种用于制备液体生物肥的复合益生菌剂及其应用 |
CN112280103A (zh) * | 2020-10-29 | 2021-01-29 | 巢湖学院 | 一种抗菌包装膜及制备方法 |
CN113142418A (zh) * | 2021-05-07 | 2021-07-23 | 焦作美博士饲料有限公司 | 一种复合发酵的鹌鹑饲料 |
CN116491599A (zh) * | 2023-06-26 | 2023-07-28 | 云南大台农台标农业科技有限公司 | 一种复合菌剂及其在猪饲料中的应用 |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101356950B (zh) * | 2008-09-24 | 2011-04-27 | 东北农业大学 | 一种复合菌剂发酵床的制备方法 |
CN101463335A (zh) * | 2009-01-16 | 2009-06-24 | 黑龙江泽农寒地生物工程有限公司 | 一种猪舍发酵床复合微生物菌剂及其制备方法 |
CN101507416A (zh) * | 2009-03-25 | 2009-08-19 | 刘富来 | 一种养猪用发酵床填料的配方及其发酵剂制作方法 |
-
2009
- 2009-10-13 CN CN 200910180285 patent/CN101948763B/zh not_active Expired - Fee Related
Cited By (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102329749A (zh) * | 2011-09-19 | 2012-01-25 | 山东宝来利来生物工程股份有限公司 | 一株经航天育种技术选育的枯草芽孢杆菌及其应用 |
CN102776167A (zh) * | 2012-04-12 | 2012-11-14 | 大连大学 | 微生物发酵生产纤溶酶的方法 |
CN103053432A (zh) * | 2013-01-07 | 2013-04-24 | 湖南省微生物研究所 | 一种发酵床生物活性垫料及其制备和应用方法 |
MD4285C1 (ro) * | 2013-02-28 | 2014-12-31 | Институт Микробиологии И Биотехнологии Академии Наук Молдовы | Tulpină de fungi Trichoderma koningii Oudemans - producătoare de proteaze acide, neutre şi alcaline |
CN103194393A (zh) * | 2013-03-27 | 2013-07-10 | 广西防城港市亿林农牧有限公司 | 发酵床菌剂及其制备方法 |
CN103355180A (zh) * | 2013-04-18 | 2013-10-23 | 湖北宏全农牧有限公司 | 一种畜禽养殖发酵菌床及其制备方法 |
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