CN101942445B - 核酸适体衍生物及其在制备药物载体中的应用 - Google Patents
核酸适体衍生物及其在制备药物载体中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101942445B CN101942445B CN2010102302192A CN201010230219A CN101942445B CN 101942445 B CN101942445 B CN 101942445B CN 2010102302192 A CN2010102302192 A CN 2010102302192A CN 201010230219 A CN201010230219 A CN 201010230219A CN 101942445 B CN101942445 B CN 101942445B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- nucleic acid
- acid aptamer
- derivative
- liver cancer
- aptamer
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Abstract
本发明公开了一种核酸适体衍生物及其在制备药物载体中的应用。式(I)所示的单链DNA;所述核酸适体如序列表的序列1所示;n=1-50。本发明提供的核酸适体衍生物具有肝癌细胞靶向性,可以作为药物载体,对体内肝癌细胞进行靶向给药,特异性杀死肝癌细胞,大大降低抗癌药物对机体的毒性。本发明提供的核酸适体衍生物可大规模化学合成、易于与药物分子连接,成本低,分子量相对较小,没有免疫活性和毒性,稳定性好,形成的药物复合物稳定。本发明提供的药物复合物(靶向药物)与肝癌细胞结合力强,能大大降低肝癌化疗中毒副作用,具有很高的应用价值。式(I):5’-(CG)n-核酸适体-3’。
Description
技术领域
本发明涉及核酸适体衍生物及其在制备药物载体中的应用。
背景技术
肝癌是世界上最普遍的和高致命性的癌症之一。目前早期肝癌患者的有效治疗方法主要是手术切除和肝移植。传统的化疗对肝癌患者效果不好,并且传统药物由于缺乏对肝癌细胞的特异性,通常会给患者带来致命性的副作用。为了克服这些问题并提高化疗的选择性,需要研发在肿瘤区域特异性给药的靶向药物。
肿瘤细胞靶向给药是提高肿瘤治疗效果减少毒副作用的有效途径。将药物偶联于肿瘤细胞特异性配体上是靶向给药的主要方法。例如将药物共价结合于细胞表面肿瘤标志物的单克隆抗体上,这些偶联药物的单抗能选择性结合肿瘤组织,从而提高抗肿瘤药物的效果,减少毒副作用。这类药物在临床前的试验中取得了很好的效果,目前正在进行相关的临床实验(Carter,P.J.;Senter,P.D.Cancer J.2008,14,154-169.Chari,R.V.J.Acc.Chem.Res.2008,41,98-107.)。例如人源化的CD33抗体-加里刹霉素偶联物Mylotarg,已经被批准用于急性骨髓系白血病(AML)的治疗。但是用于药物靶向输送的抗体来源于动物或融合的单克隆细胞,需通过生物过程产生,其制备繁琐,成本高,稳定性差,难以进行化学修饰和改造;同时抗体还具有分子量大、组织穿透力弱、易引起免疫反应等问题,限制了其广泛应用。寻找新的肿瘤细胞特异性识别分子取代抗体是靶向药物治疗的一个重要发展方向。
核酸适体(Aptamer,又称核酸适配体,适配子)是能高亲和性、高特异性的结合某种生物靶标的单链寡核酸分子(ssDNA或ssRNA)。核酸适体是从SELEX(指数富集配基系统进化)过程中选择出来的。它们通过分子内碱基堆积、疏水相互作用、氢键和静电相互作用折叠形成独特的三维空间结构,从而与靶分子特异性结合(Breaker R R,Nature 2004,432,838-845)。核酸适体与靶分子结合的亲和力和特异性与单克隆抗体相似,甚至更强。与抗体相比,核酸适体具有较低的分子量(15-50bases;4-15kD)、快速组织通透性、没有免疫源性和毒性。核酸适体一旦筛选出来,就可以通过自动化的固相化学合成来制备,无需免疫动物或细胞培养的过程以及后续繁琐的分离纯化过程,价格大大降低。核酸适体很容易进行结构改造并标记上各种分子,如放射性元素、荧光染料等(Nutiu R & Li Y,Angew Chem Int Ed 2005,44,1061-1065;Liu,J.W.& Lu,Y.Angew Chem Int Ed 2006,45,90-94)。核酸适体稳定性高,可以可逆的变性与复性,可在常温下保存和运输。
从靶向老鼠肝癌细胞的核酸适体中曾经筛选得到一条核酸适体序列TLS11a,如序列表的序列1所示(Shangguan,Dihua;Meng,Ling;Cao,Zehu i Charles;Xiao,Zeyu;Fang,Xiaohong;Li,Ying;Cardona,Diana;Witek,Rafal P.;Liu,Chen;Tan,Weihong,Identification of Liver Cancer-Specific Aptamers Using Whole Live Cells.Analytical Chemistry,2008,80(3),721-728.。
发明内容
本发明的目的是提供核酸适体衍生物及其在制备药物载体中的应用。
本发明提供的核酸适体衍生物为式(I)或式(II)或式(III)所示的单链DNA;
式(I):5’-(CG)n-核酸适体-3’;式(II):5’-核酸适体-(CG)m-3’;
式(III):5’-(CG)t1-核酸适体-(CG)t2-3’;
所述核酸适体如序列表的序列1所示;n=1-50;m=1-50;t1=1-50;t2=1-50。
n、m、t1和t2均为自然数。
还可将所述核酸适体衍生物进行如下改造,也可以达到相同的靶向功能:
(1)将核酸适体衍生物的骨架部分或全部改造为硫代磷酸酯骨架或对部分或全部骨架上的糖环进行2’-F和2’-NH2修饰;
(2)将核酸适体衍生物的部分或全部改造为肽核酸;
(3)将核酸适体衍生物中的一个以上核苷酸替换为锁核酸(Locked Nucleic Acid,LNA)和/或连接分子,再将抗癌药物通过嵌入形成核酸适体-药物复合物;所述连接分子为一个以上的六聚乙二醇-1-磷酸。
如式(I)所示,六聚乙二醇-1-磷酸的骨架为6个乙二醇的聚合物,骨架一端的氧连接一个带负电的磷酸基团。用六聚乙二醇-1-磷酸替代核酸适体中的核苷酸时,通过骨架两端的氧与两端的核苷酸连接。
所述核酸适体衍生物具体可如序列表的序列3、序列4或序列5所示。
所述核酸适体衍生物可用于制备药物载体,特别是靶向药物载体。所述药物可为抗癌药物,所述抗癌药物具体可为抗肝癌药物,如阿霉素。
本发明还保护一种治疗癌症的药物,它的活性成分由所述核酸适体衍生物和抗癌药物组成。所述癌症可为肝癌,所述抗癌药物具体可为抗肝癌药物,如阿霉素。所述活性成分中,所述抗癌药物嵌入所述核酸适体中,所述核酸适体和所述抗癌药物的配比具体可为1∶25(摩尔比)。
所述的核酸适体衍生物可用于制备辅助鉴别肝癌细胞和正常肝细胞的试剂盒。
所述肝癌细胞具体可为人体肝癌细胞系LH86。所述正常肝细胞具体可为人体正常肝细胞Hu1082。
所述的核酸适体衍生物可用于辅助鉴别肝癌细胞和正常肝细胞。
所述肝癌细胞具体可为人体肝癌细胞系LH86。所述正常肝细胞具体可为人体正常肝细胞Hu1082。
本发明在核酸适体TLS11a的基础上,进一步发现它能特异结合人的肝癌细胞。本发明中,将核酸适体的末端分别或同时添加一段延伸序列(如可形成双链的GC重复序列),可以得到核酸适体衍生物。抗癌药物可以嵌入到DNA双链的GC碱基对中,形成核酸适体-药物复合物。核酸适体-药物复合物可制备人体肝癌的靶向药物。
抗癌药物与选择性试剂(如抗体,核酸适体)的结合是一种潜在的,可用于增强化疗的效果并降低药物毒性的方法。利用本发明的核酸适体衍生物作为药物载体,可以使药物特异性结合靶细胞,降低给药剂量,明显降低药物毒副作用、提高治疗效果,具有很高的潜在应用价值。
本发明提供的核酸适体衍生物具有肝癌细胞靶向性,可以作为药物载体,对体内肝癌细胞进行靶向给药,特异性杀死肝癌细胞,大大降低抗癌药物对机体的毒性。本发明提供的核酸适体衍生物可大规模化学合成、易于与药物分子连接,成本低,分子量相对较小,没有免疫活性和毒性,稳定性好,形成的药物复合物稳定。本发明提供的药物复合物(靶向药物)与肝癌细胞结合力强,能大大降低肝癌化疗中毒副作用,具有很高的应用价值。
附图说明
图1为核酸适体衍生物与肝癌细胞系LH86、人体正常肝细胞Hu1082的亲和力表征。
图2为核酸适衍生物-阿霉素复合物(TLS11a-(GC)29-Dox)示意图。
图3为核酸适体衍生物-阿霉素复合物对肝癌细胞的细胞毒性实验结果;横坐标为浓度,坐标值标注为阿霉素的浓度,TLS11a和TLS11a-(GC)29的浓度均为坐标值标注除以25。
图4为经核酸适体衍生物-阿霉素复合物处理后的老鼠活体实验结果;图4A为老鼠肿瘤体积;图4B为老鼠体重的降低率。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明,但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料,如无特殊说明,均为自常规生化试剂商店购买得到的。下述实施例中的%,如无特殊说明,均为质量百分含量。以下实施例中的定量试验,均设置三次重复实验,结果取平均值。
人体正常肝细胞Hu1082购自美国ATTC公司(Manassas,VA)。人体肝癌细胞系LH86由美国佛罗里达大学医学院病理系刘晨教授实验室提供,由高分化的肝癌组织切片制备,制备方法见文献(“Hepatitis C virus triggers apoptosis of a newly developed hepatoma cell line through antiviral defense system”,Zhu H,Dong H,Eksioglu E,Hemming A,Cao M,Crawford JM,Nelson DR,Liu C.,Gastroenterology2007,133,1649-59);谭蔚泓保证向公众提供。NOD.Cg-Prkdc(scid)IL2型老鼠购自美国Jackson Laboratory(Bar Harber,ME,USA),在佛罗里达州立大学的动物设施上养殖。
洗涤缓冲液:含5mM MgCl2,4.5mg/mL葡萄糖的PBS溶液。
结合缓冲液:含5mM MgCl2,4.5mg/mL葡萄糖,0.1mg/mL yeast tRNA,1mg/mL BSA的PBS溶液。
肝癌核酸适体TLS11a的序列为(序列表的序列1):
5’-ACAGCATCCCCATGTGAACAATCGCATTGTGATTGTTACGGTTTCCGCCTCATGGACGTGCTG-3’。
对照核酸适体TD05的序列为(序列表的序列2):
5’-CACCGGGAGGATAGTTCGGTGGCTGTTCAGGGTCTCCTCCCGGTG-3’。
实施例1、核酸适体衍生物与人体肝癌细胞亲和力的表征
一、核酸适体及其衍生物的制备
人工合成三种核酸适体衍生物,分别在核酸适体TLS11a的5’末端引入1个GC、29个GC和50个GC。TLS11a-(GC)1如序列表的序列3所示。TLS11a-(GC)29如序列表的序列4所示。TLS11a-(GC)50如序列表的序列5所示。
人工合成三种对照核酸适体衍生物,分别在核酸适体TD05的5’末端引入1个GC、29个GC和50个GC。TD05-(GC)1如序列表的序列6所示。TD05-(GC)29如序列表的序列7所示。TD05-(GC)50如序列表的序列8所示。
人工合成序列表的序列1所示的核酸适体TLS11a和序列2所示的对照核酸适体TD05。
二、核酸适体衍生物的荧光标记
用荧光染料Phycoerythrin-Cy5.5(藻红蛋白/青色素染料5.5)标记步骤一合成的三种核酸适体衍生物、三种对照核酸适体衍生物、核酸适体TLS11a以及对照核酸适体TD05。
三、核酸适体衍生物与人体肝癌细胞亲和力的表征
分别检测三种核酸适体衍生物、三种对照核酸适体衍生物、核酸适体TLS11a和对照核酸适体TD05与人体肝癌细胞(或人体正常肝细胞Hu1082)的亲和力,检测方法如下:
人体癌细胞LH86采用无酶细胞裂解液(Cellgro)溶解,并用洗涤缓冲液清洗。在100mL结合缓冲液中将肝癌细胞LH86(约105个)分别与0.1mL 25nM核酸适体衍生物(TLS11a-(GC)1、TLS11a-(GC)29、TLS11a-(GC)50、TD05-(GC)1、TD05-(GC)29、TD05-(GC)50、TLS11a或TD05)混合,冰浴下培养0.5小时。然后用洗涤缓冲液清洗细胞两次并悬浮于0.2mL结合缓冲液中,进行流式细胞仪检测。
结果见图1;A:TLS11a及其三种衍生物;B:TD05及其三种衍生物。
结果表明:TLS11a及其衍生物对人体肝癌细胞(LH86)有着显著的亲和力,但是人体正常肝细胞(Hu1082)不与TLS11a及其衍生物作用,TLS11a及其衍生物与肝癌细胞的结合力比与正常肝细胞的结合力显著增加,与人体肝癌细胞结合均有较高的特异性和高结合能力,可以作为区分正常肝细胞和肝癌细胞的探针;TD05及其三种衍生物对人体肝癌细胞(LH86)和人体正常肝细胞(Hu1082)的亲和力没有显著差异。
实施例2、核酸适体衍生物-药物复合物的制备
一、核酸适体TLS11a和核酸适体衍生物TLS11a-(GC)29的制备
为了嵌入较多的阿霉素,在核酸适体TLS11a的5’末端引入一个长的GC序列(由29个GC依次连接组成),从而得到一个具有延伸序列的核酸适体衍生物TLS11a-(GC)29。TLS11a-(GC)29如序列表的序列4所示。
人工合成序列表的序列1所示的核酸适体TLS11a。人工合成序列表的序列4所示的核酸适体衍生物TLS11a-(GC)29。
二、核酸适体衍生物-药物复合物的制备和表征
1、核酸适体衍生物-药物复合物的制备
在结合缓冲液中,将核酸适体衍生物TLS11a-(GC)29与阿霉素以1∶25(摩尔比)的比例混合,室温搅拌孵育3小时,得到核酸适体衍生物-药物复合物。
2、核酸适体衍生物-药物复合物的纯化
步骤1制备的核酸适体衍生物-药物复合物采用HPLC进行纯化。
色谱柱柱长为250mm,内径为4.6mm。填料为silica,粒径为5um。流动相为This-HCl缓冲溶液(10mM,pH7.4)和乙腈(梯度淋洗:0-3min,0%乙腈,3-30min:乙腈浓度线形增至60%,30-35min:乙腈浓度线形增至90%,35-45min乙腈90%,45min后0%乙腈)。流速为1mL/min。检测波长为260nm。目标产物核酸适体衍生物-药物复合物(TLS11a-(GC)29)在35min出峰。
3、核酸适体衍生物-药物复合物的表征
对纯化得到的核酸适体衍生物-药物复合物进行紫外检测。阿霉素浓度由495nm波长紫外吸收值得到。TLS11a-(GC)29浓度由260nm波长紫外吸收值得到。由于阿霉素在260nm处有明显的紫外吸收,干扰TLS11a-(GC)29浓度的测定,为准确测定TLS11a-(GC)29浓度,采用紫外光谱仪分别测量495nm、260nm的吸收值。阿霉素在495nm、260nm的紫外吸光系数分别为ε495=12000Gm-1M-1,ε260=24000cm-1M-1。通过495nm测得的阿霉素浓度,扣除阿霉素在260nm处的干扰,最终得到TLS11a-(GC)29的浓度。TLS11a-(GC)29浓度由以下公式计算得到:
A为对应波长的紫外吸收值。
平均每个核酸适体衍生物-药物复合物中,含有1个核酸适体衍生物和25个阿霉素。
核酸适体衍生物-药物复合物(TLS11a-(GC)29-DOX)示意图如图2所示。
三、核酸适体-药物复合物的制备和表征
1、在结合缓冲液中,将核酸适体TLS11a与阿霉素以1∶25(摩尔比)的比例混合,室温搅拌孵育3小时,得到核酸适体-药物复合物。
2、核酸适体-药物复合物的纯化
步骤1制备的核酸适体-药物复合物采用HPLC进行纯化。液相色谱参数同步骤二。
核酸适体-药物复合物的峰在24min时出现。
3、核酸适体-药物复合物的纯化
步骤2制备的核酸适体-药物复合物采用紫外表征,检测参数同步骤二。
结果表明,平均每个核酸适体-药物复合物中,含有1个核酸适体和2个阿霉素。
因此,利用核酸适体衍生物能提高载药量。
实施例3、核酸适体衍生物-药物复合物对肝癌细胞的影响
肝癌细胞LH86对阿霉素或核酸适体衍生物-药物复合物的化学敏感性的测定使用CellTiter AQueous单溶液细胞增殖分析试剂盒(Promega,Madison,WI,USA)进行。CellTiter AQueous单溶液试剂:3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,内盐;MTS和一个电子偶联试剂(乙硫吩嗪,PES)。具体如下:100μL肝癌细胞LH86(约5×104细胞/mL)在96孔板(n=3)上接种并37℃放置过夜生长(5%CO2,无FBS的DMEM培养基),然后分别加入100μL下列DNA链:
(1)TLS11a;设置四个浓度梯度,分别与(4)中核酸适体衍生物-药物复合物中的TLS11a-(GC)29浓度相同,即分别为40,100,200,300nM。
(2)TLS11a-(GC)29;设置四个浓度梯度,分别与(4)中核酸适体衍生物-药物复合物中的TLS11a-(GC)29浓度相同,即分别为40,100,200,300nM。
(3)阿霉素;设置四个浓度梯度,分别为1.0,2.5,5.0.7.5μM。
(4)实施例2纯化得到的TLS11a-(GC)29-DOX;设置四个浓度梯度,以阿霉素的浓度计,浓度分别为1.0,2.5,5.0.7.5μM;相应TLS11a-(GC)29的浓度分别为40,100,200,300nM。
1小时后清洗并在新鲜的DMEM培养基(10%FBS)中培养48h。
细胞毒性测定中,先除去每个孔中的培养基,然后在每个孔中加入20uL细胞滴定试剂(CellTiter AQueous单溶液试剂)和DMEM培养基(100μL),培养3h。采用微孔板报告器(Tecan Safire microplate reader,AG,Swi tzerland),在490nm下记录吸收值。通过对比用TLS11a、TLS11a-GC、阿霉素、核酸适体衍生物-药物复合物处理过的细胞与空白细胞的活性,来计算细胞活性(活细胞数量)。
结果见图3。TLS11a-GC与TLS11a对细胞活性没有明显影响,阿霉素和TLS11a-(GC)29-DOX能明显地降低肝癌细胞活性。结果表明,不同浓度下,核酸适体衍生物-药物复合物对肝癌细胞具有与阿霉素相近的杀灭能力。
实施例4、核酸适体衍生物-药物复合物在活体动物靶向给药中的应用
20只NOD.Cg-Prkdc(scid)IL2老鼠,每只注射约7×106个人体肝癌细胞LH86。注射1天后,小鼠肝部均可以检测到肿块,活体检测肿瘤体积为100-200mm3。
将实施例2纯化得到的核酸适体衍生物-药物复合物用生理盐水稀释。
将上述得到的小鼠进行为期12天的试验如下(20只小鼠分成三组):
第一组(6只)(对照组):每次注射100uL生理盐水;
第二组(7只):每次注射100uL阿霉素溶液,给药剂量为2mg阿霉素/kg体重;
第三组(7只):每次注射100uLTLS11a-(GC)29-DOX溶液,给药剂量为2mg阿霉素/kg体重;
实验前后,每只老鼠称重,计算各组老鼠的平均值。分别在第1、2、3、4、5、9、10、11天通过老鼠尾部静脉注射给药并检测老鼠的肿瘤体积。实验结束时,统计各组老鼠的体重下降率,体重下降率=(实验开始时体重-实验结束时体重)/实验开始时体重×100%。
2、核酸适体-药物复合物对老鼠的毒性分析
实验过程中,老鼠的肿瘤体积见图4A,实验结束时,各组老鼠的体重下降率见图4B。实验结果说明TLS11a-(GC)29-DOX与阿霉素对老鼠肿瘤体积的增长均具有较强的抑制作用。TLS11a-(GC)29-DOX对肝癌细胞生长的抑制作用与阿霉素相近,但是老鼠的体重降低更少即副作用更少,说明核酸适体和药物结合后,具有细胞膜穿透性的阿霉素对细胞的非特异性作用得到了抑制,因此核酸适体-药物复合物的非特异性细胞毒性大大降低。结果表明:核酸适体-药物复合物能在体内实现肝癌细胞靶向给药,对肝癌细胞生长的抑制作用与阿霉素相近,但非特异性细胞毒性比阿霉素大大降低。
Claims (6)
1.核酸适体衍生物,如序列表的序列4所示。
2.权利要求1所述核酸适体衍生物在制备药物载体中的应用。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于:所述药物为阿霉素。
4.一种治疗癌症的药物,它的活性成分由权利要求1所述核酸适体衍生物和阿霉素组成。
5.权利要求1所述核酸适体衍生物在制备辅助鉴别肝癌细胞和正常肝细胞的试剂盒中的应用。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于:所述肝癌细胞为人体肝癌细胞系LH86;所述正常肝细胞为人体正常肝细胞Hu1082。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2010102302192A CN101942445B (zh) | 2010-07-19 | 2010-07-19 | 核酸适体衍生物及其在制备药物载体中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2010102302192A CN101942445B (zh) | 2010-07-19 | 2010-07-19 | 核酸适体衍生物及其在制备药物载体中的应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101942445A CN101942445A (zh) | 2011-01-12 |
CN101942445B true CN101942445B (zh) | 2012-05-30 |
Family
ID=43434653
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN2010102302192A Active CN101942445B (zh) | 2010-07-19 | 2010-07-19 | 核酸适体衍生物及其在制备药物载体中的应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN101942445B (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102229932B (zh) * | 2011-06-03 | 2013-02-27 | 湖南大学 | 可识别hcv e1e2蛋白的核酸适体、核酸适体的衍生物及其筛选方法和应用 |
Families Citing this family (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102229933A (zh) * | 2011-06-03 | 2011-11-02 | 湖南大学 | 可识别hcv ns5a蛋白的核酸适体、核酸适体的衍生物及其筛选方法和应用 |
CN102864150B (zh) * | 2011-06-03 | 2013-08-21 | 湖南大学 | 一种可识别hcv ns5a蛋白的核酸适体、核酸适体的衍生物及其筛选方法和应用 |
CN103290017B (zh) * | 2012-02-24 | 2015-04-29 | 中国医学科学院基础医学研究所 | Her2蛋白核酸适配子、复合体、组合物及其用途 |
CN102732522B (zh) * | 2012-02-27 | 2014-04-09 | 南昌大学 | 一组肝癌血清核酸适配子 |
CN102732606B (zh) * | 2012-02-27 | 2013-11-27 | 南昌大学 | 基于核酸适配子的肝癌诊断试剂盒 |
CN103374572B (zh) * | 2012-04-28 | 2015-11-25 | 复旦大学附属华山医院 | 一种肝癌细胞的核酸适配体的序列及应用 |
CN103374573B (zh) * | 2012-04-28 | 2016-01-06 | 复旦大学附属华山医院 | 肝癌细胞核酸适配体序列及其用途 |
CN102766693B (zh) * | 2012-07-25 | 2013-08-28 | 湖南大学 | 可用于检测人肝癌细胞株smmc-7721的核酸适体及其筛选方法和应用 |
CN102766634B (zh) * | 2012-08-09 | 2013-09-11 | 武汉大学 | 一种靶向人高转移肝癌细胞的单链dna适配子及其应用 |
CN105925582B (zh) * | 2016-05-03 | 2019-03-29 | 中南大学湘雅医院 | 非酒精性脂肪肝细胞核酸适体及其应用 |
CN108239646B (zh) * | 2018-01-26 | 2020-06-12 | 青岛大学 | 结合肝癌细胞的核酸适配体及其应用和应用其的检测方法 |
CN111218443B (zh) * | 2018-11-23 | 2024-03-08 | 上海交通大学医学院附属仁济医院 | 合成核酸药物偶联物的方法 |
CN110055218B (zh) * | 2019-04-22 | 2023-02-17 | 上海瑞可新生物科技有限公司 | 一种人工改造自然杀伤性细胞及其制备与应用 |
CN114591386B (zh) * | 2022-05-10 | 2022-09-09 | 深圳厚存纳米药业有限公司 | 一种含尿苷衍生物的纳米粒、核酸纳米复合物及其制备方法和用途 |
-
2010
- 2010-07-19 CN CN2010102302192A patent/CN101942445B/zh active Active
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
Vaishali Bagalkot等."An Aptamer–Doxorubicin Physical Conjugate as a Novel Targeted Drug-Delivery Platform".《Antitumor Agents》.2006,第45卷(第48期),第8149-8152页. |
Zhang Liangfang等."Co-Delivery of Hydrophobic and Hydrophilic Drugsfrom Nanoparticle–Aptamer Bioconjugates".《ChemMedChem》.2007,第2卷(第9期),第1268-1271页. |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102229932B (zh) * | 2011-06-03 | 2013-02-27 | 湖南大学 | 可识别hcv e1e2蛋白的核酸适体、核酸适体的衍生物及其筛选方法和应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN101942445A (zh) | 2011-01-12 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101942445B (zh) | 核酸适体衍生物及其在制备药物载体中的应用 | |
CN107952080A (zh) | 一种肿瘤靶向多肽-药物偶联衍生物、其制备方法及应用 | |
CN107050464A (zh) | 一种载有阿霉素的适配体修饰dna纳米笼及其制备方法 | |
JPH05502787A (ja) | 外因性分子の経膜的輸送を高める方法 | |
KR102114447B1 (ko) | Her2-gst-cpt 복합체, 및 이를 포함하는 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
JP2020189867A (ja) | 受容体媒介化学療法による癌の治療のためのペプチド化合物およびペプチドコンジュゲート | |
US20220380721A1 (en) | Method for coupling antibody to surface of cell and method for applying cell coupled with the antibody | |
CN102711788B (zh) | 使用组织特异性模拟肽配体的靶向递送 | |
KR20120106763A (ko) | Bpb-기반 카르고 운반 시스템 | |
WO2016076347A1 (ja) | 外来物質の細胞内への導入方法ならびに該方法に用いる材料 | |
CN117730143A (zh) | 通过缀合的n-末端甘氨酸修饰的细胞及其用途 | |
Cho et al. | A Tumor-Homing Peptide Platform Enhances Drug Solubility, Improves Blood–Brain Barrier Permeability and Targets Glioblastoma | |
Chen et al. | Targeted extracellular vesicles delivered verrucarin A to treat glioblastoma | |
Malicki et al. | Imaging of clear cell renal carcinoma with immune checkpoint targeting aptamer-based probe | |
CN112852722A (zh) | 具有特异性靶向功能的靶向细胞、其制备方法和细胞药物 | |
EP1634603A1 (de) | Behandlung von transformierten oder infizierten biologischen Zellen | |
CN111393507B (zh) | 一种与多种肿瘤细胞特异性结合的新型多肽及其用途 | |
CN105859846A (zh) | 对hpv16 e7具有结合亲和力的多肽及其用途 | |
CN103290018B (zh) | 一种与人表皮生长因子受体iii型突变体特异性结合的核酸适配子及其应用 | |
CN109517824B (zh) | 一种识别靶标蛋白cd71的方法及核酸适体的应用 | |
CN114796525B (zh) | 细胞周期调控蛋白抑制剂在肿瘤治疗中的应用 | |
CN105854025B (zh) | 多靶点多肽—阿霉素复合物及其制备方法和应用 | |
CN111518171B (zh) | 一种靶向人肝癌细胞的多肽及其用途 | |
CN104212800A (zh) | 一种与人表皮生长因子受体iii型突变体特异性结合的核酸适配子及其应用 | |
CN110003311A (zh) | 多肽Ahf-caltide的新用途 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |