CN101940605B - 一种继木叶总黄酮醇提取物及其医药用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种继木叶总黄酮醇提取物，其特征在于其中总黄酮醇含量在50％以上；该继木叶总黄酮醇提取物是从中药继木叶中提取、精制而得。经药效学和毒理学试验证明，该继木叶总黄酮醇能显著改善链脲佐菌素所致的大鼠糖尿病视网膜病变；扩张冠状动脉和外周血管，增加冠状动脉流量，抑制心肌，减慢心率，降低血小板的聚集，抑制血栓的形成，对脑缺血有明显的保护作用，且毒副作用小。本发明还公开了上述继木叶总黄酮醇提取物的医药用途。

Description

一种继木叶总黄酮醇提取物及其医药用途

所属技术领域

本发明属于医药制剂技术领域，涉及一种从中药继木叶中提取的有效部位，本发明还涉及该有效部位的制备方法及其医药用途。

背景技术

糖尿病视网膜病变(Diabetic retinopathy，DR)是糖尿病的慢性主要并发症之一，可导致双眼不可逆性失明，为致盲的第三位疾病，因此，DR越来越受到人们的关注。目前糖尿病视网膜病变的主要治疗措施是激光光凝和玻璃体摘除术，但这种眼手术不能完全控制病情发展，降低致盲率；同时，尚无治疗糖尿病视网膜病变的专用药物。

心脑血管疾病是导致人类死亡的的第一类疾病，随着社会生活水平的提高以及人口的老龄化，其发病率更进一步的上升。世界卫生组织调查显示，中老年人患心脑血管疾病的可能性超过70％～80％，全世界每年约有2500万人死于心脑血管病，占总病死率的50％以上。根据有关统计资料显示，我国每年死于心脑血管病的患者达500万人，死亡人数由上世纪60年代的第七位跃升至第一位。我国心脑血管的发病率正处上升趋势。

冠心病心绞痛是冠状动脉供血不足，心肌急剧的短暂缺血及缺氧所引起的临床综合征，常常发生在劳累、饱餐、受寒和情绪激动时，胸骨后突发范围不太清楚的闷痛、压榨痛或紧缩感，病人自觉心慌、窒息，有时伴有濒死的感觉。冠心病心绞痛是一种发病率高、死亡率高、严重危害人类身体健康的疾病，从而被称为“人类生命的第一杀手”。脑梗死又称缺血性脑卒中，是指局部脑组织因血液循环障碍，缺血、缺氧而发生的软化坏死。

现有治疗心脑血管疾病的西药由于存在有各种副作用，所以，中成药已占据了主要市场，而现有中成药大多为多味药材的配方制成，由于是粗提物，病人服用量大，导致了药材资源的浪费，同时，其中有中效成分不清楚，药品质量得不到严格控制，给临床用药造成了安全隐患。

中药继木叶收载于《中国药典》1977年版(一部)，为金缕梅科植物继木Loropetalum chinense(R.Br.)Oliv.的干燥叶，具有清热解毒、收敛、止血的功效，用于治疗烧、烫伤，外伤出血，吐血，崩漏，腹泻。经检索，尚未见关于继木叶总黄酮醇治疗糖尿病视网膜病变、冠心病心绞痛和脑梗死的文献报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种高效低毒的的继木叶总黄酮醇提取物。

本发明的另一个目的是提供上述继木叶总黄酮醇提取物的制备方法。

本发明还有一个目的是提供上述继木叶总黄酮醇提取物的的医药用途。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种继木叶总黄酮醇提取物，它是从中药继木叶中提取的总黄酮醇，其中总黄酮醇含量在50％以上；

并且，该继木叶总黄酮醇提取物通过包括如下步骤的方法制备而得：

(1)制备继木叶粗提物：取继木叶药材，加10％～95％的乙醇进行提取，滤过，得提取液，将此提取液浓缩，加乙醇至含醇量70％，静置过夜，滤过，滤液回收乙醇，浓缩，即得继木叶粗提物。

(2)将(1)步制得的继木叶粗提物过大孔吸附树脂，先用水或1％～30％的低浓度乙醇洗脱，将该水或低浓度乙醇洗脱液弃去不用，除去极性大的杂质，再用40％～95％的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，干燥，即得继木叶总黄酮醇提取物。

如有必要，经上述(2)步精制得的继木叶总黄酮醇提取物，可用乙酸乙酯进一步纯化处理，以制得总黄酮醇含量高的继木叶总黄酮醇提取物。

本发明继木叶总黄酮醇提取物中，总黄酮醇含量优选在70％以上更好。

本发明继木叶总黄酮醇提取物中，总黄酮醇含量更优选在90％以上更好，100％最好。

继木叶总黄酮醇提取物的制备过程中，(2)步中所述的大孔吸附树脂为中低极性的大孔吸附树脂，如D101、D201、D301、AB-8、X-5、HP-20等。

(2)步中所述的干燥方法可以为烘干、真空干燥、喷雾干燥、冷冻干燥等。

上述继木叶总黄酮醇提取物的医药用途为：治疗糖尿病视网膜病变、冠心病心绞痛和脑梗死。所述治疗糖尿病视网膜病变、冠心病心绞痛和脑梗死的药物中含有有效剂量的上述继木叶总黄酮醇提取物。

所述的药物剂型可以是粉针、滴丸、片剂、缓释片、硬胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂等任何一种现有药物剂型。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：经药效学及毒理学试验证明，该继木叶总黄酮醇提取物能显著改善链脲佐菌素所致的大鼠糖尿病视网膜病变；并能扩张冠状动脉和外周血管，增加冠状动脉流量，抑制心肌，减慢心率，降低血小板的聚集，抑制血栓的形成，对脑缺血有明显的保护作用，且毒副作用小。不仅有效成分(黄酮醇类)明确，而且，总黄酮醇的含量越高，杂质越少，其效果越好，这可减少服用量，在一定程度上也可减少毒副作用，更有利于保证药物的安全性和有效性。同时，该继木叶总黄酮醇提取物不同于化学药物单一成分起效，而是“多成分、多途径、多靶点”的作用，且毒副作用小。

本发明对继木叶的有效部位进行了追踪，以不同含量的继木叶总黄酮醇提取物为药物进行试验，结果证实了继木叶总黄酮醇提取物治疗糖尿病视网膜病变、冠心病心绞痛和脑梗死的作用。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明作进一步的详细描述。

但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于下述实施例。

实施例1

取继木叶药材100kg，加50％的乙醇回流提取2次，每次1小时，第1次加800kg50％的乙醇，第2次加600kg50％的乙醇，滤过，合并提取液，提取液回收乙醇并浓缩至相对密度1.05的稀浸膏，将此稀浸膏过D101大孔吸附树脂，先用20％的乙醇洗脱至无色，将此20％乙醇洗脱液弃去，再用80％的乙醇洗脱至无色，收集此80％乙醇洗脱液，回收乙醇并浓缩成相对密度1.25的稠膏，真空干燥，即得到含总黄酮醇50％的继木叶总黄酮醇提取物。

实施例2

取继木叶药材100kg，加70％的乙醇回流提取2次，每次1.5小时，第1次加700kg70％的乙醇，第2次加600kg70％的乙醇，滤过，合并提取液，提取液回收乙醇并浓缩至相对密度1.08的稀浸膏，将此稀浸膏过AB-8大孔吸附树脂，先用30％的乙醇洗脱至无色，将此30％乙醇洗脱液弃去，再用70％的乙醇洗脱至无色，收集此70％乙醇洗脱液，回收乙醇并浓缩成相对密度1.10的清膏，喷雾干燥，即得到含总黄酮醇70％的继木叶总黄酮醇提取物。

实施例3

取继木叶药材100kg，加90％的乙醇回流提取2次，每次2小时，第1次加800kg90％的乙醇，第2次加600kg90％的乙醇，滤过，合并提取液，提取液回收乙醇并浓缩至相对密度1.10的稀浸膏，将此稀浸膏过D201大孔吸附树脂，先用水洗脱至无色，将此水洗脱液弃去，再用90％的乙醇洗脱至无色，收集此90％乙醇洗脱液，回收乙醇，真空干燥，即得干浸膏。将此干浸膏加5倍量水使混悬，用乙酸乙酯萃取4次，每次乙酸乙酯的用量与样品体积相等，合并乙酸乙酯层，回收乙酸乙酯后，真空干燥，即得到含总黄酮醇90％的继木叶总黄酮醇提取物。

实施例4

取继木叶药材100kg，加30％的乙醇回流提取3次，每次1小时，第1次加600kg30％的乙醇，第2、3次分别加400kg30％的乙醇，滤过，合并提取液，提取液回收乙醇并浓缩至相对密度1.20，加乙醇至含醇量70％，静置过夜，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成稀浸膏，将此稀浸膏过D301大孔吸附树脂，先用30％的乙醇洗脱至无色，将此30％乙醇洗脱液弃去，再用80％的乙醇洗脱至无色，收集此80％乙醇洗脱液，回收乙醇并浓缩成相对密度1.25的稠膏，真空干燥，即得到含总黄酮醇60％的继木叶总黄酮醇提取物。

实施例5

取继木叶药材100kg，加20％的乙醇回流提取3次，每次1小时，第1次加700kg20％的乙醇，第2、3次分别加600kg20％的乙醇，滤过，合并提取液，提取液回收乙醇并浓缩至相对密度1.20，加乙醇至含醇量70％，静置过夜，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成稀浸膏，将此稀浸膏过HP-20大孔吸附树脂，先用30％的乙醇洗脱至无色，将此30％乙醇洗脱液弃去，再用70％的乙醇洗脱至无色，收集此70％乙醇洗脱液，回收乙醇，真空干燥，即得到含总黄酮醇70％的继木叶总黄酮醇提取物。将此继木叶总黄酮醇提取物加5倍量水使混悬，用乙酸乙酯萃取4次，每次乙酸乙酯的用量与样品体积相等，合并乙酸乙酯层，回收乙酸乙酯后，再加5倍量水使混悬，再用乙酸乙酯萃取3次，每次乙酸乙酯的用量与样品体积相等，合并乙酸乙酯层，回收乙酸乙酯，冷冻干燥，即得到含总黄酮醇100％的继木叶总黄酮醇提取物。

实施例6

取所述的继木叶总黄酮醇提取物300g，糊精700g，混合均匀，采用现有硬胶囊剂制备工艺，即制得含继木叶总黄酮醇提取物的硬胶囊剂型的药物。

实施例7

取所述的继木叶总黄酮醇提取物3kg，植物油7kg，混合均匀，用明胶作囊壳材料，采用现有软胶囊剂制备工艺，即制得含继木叶总黄酮醇提取物的软胶囊剂型的药物。

实施例8

取所述的继木叶总黄酮醇提取物300g，聚乙二醇₆₀₀₀700g，混合均匀，采用现有滴丸剂制备工艺，即制得含继木叶总黄酮醇提取物的滴丸剂型的药物。

实施例9

取所述的继木叶总黄酮醇提取物300g，可溶性淀粉500g，蔗糖200g，混合均匀，制粒，过筛，干燥，即制得含继木叶总黄酮醇提取物的颗粒剂型的药物。或将制得的颗粒进一步压片，即制得含继木叶总黄酮醇提取物的片剂的药物。

实施例10

取所述的继木叶总黄酮醇提取物420g，羟丙甲纤维素60g，羧甲基淀粉钠8g，微晶纤维素10g，混合均匀，再加硬脂酸镁1g作为润滑剂，压片，即制得含继木叶总黄酮醇提取物的缓释片剂型的药物。

实施例11

取所述的继木叶总黄酮醇提取物300g，溶于10000ml注射用水中(加少许乙醇使溶解)，采用粉针剂冷冻干燥制备工艺，即制得含继木叶总黄酮醇提取物的粉针剂型的药物。

为考察本发明继木叶总黄酮醇提取物的有效性和安全性，发明人分别以上述部分实施例所述的提取物为试验药物，进行了药效学试验和毒理学试验考察，试验方法和结果等分别如下：

药效学试验：

试验一、对链脲佐菌素诱导大鼠糖尿病视网膜病变模型的影响

动物：SD大鼠，清洁级，体重200～250g，由湖南中医药大学动物中心提供。

药物：继木叶总黄酮醇提取物(含总黄酮醇50％的由实施例1制得、含总黄酮醇70％的由实施例2制得、含总黄酮醇90％的由实施例3制得)，分别给药200mg/kg；阳性对照药：导升明胶囊(奥地利依比威大药厂生产，批号：090524，规格：500mg/粒)，给药150mg/kg。实验时用生理盐水配制成溶液。

试验方法：(1)大鼠糖尿病视网膜病变模型诱导建立

大鼠120只，适应性喂养7天后，随机分为正常空白对照组、模型组、50％、70％、90％继木叶总黄酮醇提取物组及阳性对照组，每组各20只。禁食12小时后，以链脲佐菌素60mg/kg一次性腹腔注射，链脲佐菌素临用前以0.1mmol/L、pH 4.5柠檬酸缓冲液溶解，配置成2％溶液。正常空白对照组腹腔注射等量生理盐水。于72h后检测定性尿糖和血糖，用微量血糖测量仪(配套血糖试纸)监测血糖，用强生尿糖试纸测尿糖浓度，血糖浓度达16.5mol/L、尿糖达+++～++++，即为诱导成功，以后每周测一次尿糖、每月测一次血糖，同时观察大鼠一般状况。实验结束时，去除中间死亡鼠和血糖恢复鼠。每组以15只大鼠作为实验统计对象。

(2)试验方法

造模4个月后开始按上述分组情况进行给药，药物组按200mg/kg分别灌胃50％、70％、90％的继木叶总黄酮醇提取物，阳性对照组同时灌胃导升明胶囊150mg/kg，正常空白对照组和模型组灌胃等容量的生理盐水，给药容量1ml/100g，每天给药1次，连续给药45天。末次给药后，测血糖值，并摘除各组大鼠的眼球，观察其视网膜病理组织学的改变。

结果：见表1。

表1 各组大鼠视网膜组织形态变化

组别                        大鼠视网膜的组织形态

正常对照组                  视网膜各层结构清晰，排列整齐，形态正常。

模型组                      视网膜内层组织水肿，细胞排列紊乱，偶见出血。

50％的继木叶总黄酮醇        视网膜各层结构清晰，排列较整齐，形态正常。

70％的继木叶总黄酮醇        视网膜各层结构清晰，排列整齐，形态正常。

90％的继木叶总黄酮醇        视网膜各层结构清晰，排列整齐，形态正常。

阳性对照组                  视网膜各层结构清晰，排列整齐，形态正常。

表1说明：继木叶总黄酮醇提取物能明显改善链脲佐菌素所致的大鼠糖尿病视网膜病变。

试验二、对体外大鼠心脏冠脉灌流量、心率及心博幅度的影响

动物：SD大鼠，清洁级，体重320～360g，由湖南中医药大学动物中心提供。

药物：继木叶总黄酮醇提取物(含总黄酮醇50％的由实施例1制得、含总黄酮醇70％的由实施例2制得、含总黄酮醇90％的由实施例3制得)；阳性对照药：银杏叶片(深圳海王药业有限责任公司生产，批号：080612)。实验时用生理盐水配制成溶液。

试验方法：取大鼠50只，随机分组，击后脑致死，颈动脉放血。剪开胸腔和心包，轻轻提起心脏，剪断与心脏连接的血管，取出心脏，立即放入4℃左右洛氏液中并轻轻挤压，排除余血。调节恒温水浴使洛氏液恒定在37±1℃，灌流瓶不断通入氧气，瓶与主动脉插管连接。在升主动脉与肺主动脉间穿过一根丝线，向升主动脉插入动脉插管结扎固定。打开弹簧夹，使洛氏液由冠脉插管经心肌而入右心房，从腔静脉和肺动脉的断端流出。用蛙心夹夹住心尖，经滑轮连接于肌力换能器上，并与LMS-ZR二道热笔生理记录仪连结，描记心脏搏动曲线，记录心率；在心脏下置漏斗，下接量筒以测定冠脉流量。连续测量3min的流量(ml/min)，取平均值作为给药前的正常流量。然后从主动脉插管上方之橡皮管皮内分别注入50％、70％及90％继木叶总黄酮醇提取物溶液、银杏叶片溶液、生理盐水各0.6ml，观察给药2min后每分钟冠脉流量(ml/min)、心率及心搏幅度的变化。

结果：见表2。

表2 对体外大鼠心脏冠脉灌流量、心率及心博幅度的影响(X±s)

注：与生理盐水组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01。

表2表明：用药后冠脉流量明显增加，心率减慢，心博幅度降低，与生理盐水组相比较，有显著性差异。说明继木叶总黄酮醇提取物能扩张冠状动脉，增加冠状动脉流量，抑制心肌，减慢心率。同时，其作用呈量效关系，随着其总黄酮醇含量增加，其作用越强。

试验三、对体外大鼠后肢血管灌流量的影响

动物：SD大鼠，清洁级，体重320～360g，由湖南中医药大学动物中心提供。

药物：继木叶总黄酮醇提取物(含总黄酮醇50％的由实施例1制得、含总黄酮醇70％的由实施例2制得、含总黄酮醇90％的由实施例3制得)；阳性对照药：银杏叶片(深圳海王药业有限责任公司生产，批号：080612)。实验时用生理盐水配制成溶液。

试验方法：取大鼠50只，随机分组，击后脑致死，剖开腹腔把内脏推向一侧，找出腹主动脉及其下部分支左右髂动脉。与分支上方1.5cm处腹主动脉下预置二线，结扎近心端，在结扎部下端剪一小口，插入动脉插管(动脉插管与盛有洛氏液恒压瓶相连温度控制38℃，并以氧饱和)，结扎固定。在插管上方将大鼠躯体横截剪断，立即开放灌流液，冲洗血管内血液直至流出液澄清为止。记录流出量，灌流液速度控制在40～50滴/min，待流速稳定后，连续记录3min的流速(滴/min)，取其平均值作为给药前的对照值。再由动脉插管上方的橡皮管内分别注入50％、70％及90％继木叶总黄酮醇提取物溶液、银杏叶片溶液、生理盐水各0.6ml，观察给药2min后每分钟滴数。

结果：见表3。

表3 对体外大鼠后肢血管灌流量的影响(X±s)

注：与生理盐水组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01。

表3表明：用药后体外大鼠后肢血管流量明显增加，与生理盐水组比较，差异非常显著，说明继木叶总黄酮醇提取物有扩张外周血管作用。同时，其作用呈量效关系，随着其总黄酮醇含量增加，其作用越强。

试验四、对实验性大鼠脑缺血的影响

动物：SD大鼠，清洁级，体重260～300g，由湖南中医药大学动物中心提供。

药物：继木叶总黄酮醇提取物(含总黄酮醇50％的由实施例1制得、含总黄酮醇70％的由实施例2制得、含总黄酮醇90％的由实施例3制得)，分别给药100mg/kg、200mg/kg和400mg/kg；阳性对照药：银杏叶片(深圳海王药业有限责任公司生产，批号：080612)。实验时用生理盐水配制成溶液。

试验方法：取大鼠110只，随机分组，每组10只，前9组分别灌胃50％、70％、90％的继木叶总黄酮醇提取物100mg/kg、200mg/kg和400mg/kg(为临床用量的5、10、20倍)，阳性对照组灌银杏叶片125mg/kg(临床用量的10倍)，对照组灌胃等容量的生理盐水，给药容量1ml/100g，每天给药1次，连续6d，末次给药后1h，每鼠经腹腔注射戊巴比妥钠30mg/kg麻醉后，背位固定在手术台上，在颈正中纵行切口，分离出两侧颈总动脉，穿线结扎，并开始记录时间至呼吸停止，此段时间为脑缺血生存时间。

结果：见表4。

表4 对实验性大鼠脑缺血的影响(X±s)

注：与生理盐水组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01。

表4表明：给药组能明显的延长实验性大鼠脑缺血生存时间，与对照组比较，差异非常显著。说明继木叶总黄酮醇提取物对脑缺血有明显保护作用。同时，其作用呈量效关系，随着其总黄酮醇含量增加，其作用越强。

试验五、对大鼠血小板血栓形成的影响

动物：SD大鼠，清洁级，体重260～300g，由湖南中医药大学动物中心提供。

药物：继木叶总黄酮醇提取物(含总黄酮醇50％的由实施例1制得、含总黄酮醇70％的由实施例2制得、含总黄酮醇90％的由实施例3制得)，分别给药100mg/kg、200mg/kg和400mg/kg；阳性对照药：银杏叶片(深圳海王药业有限责任公司生产，批号：080612)。实验时用生理盐水配制成溶液。

试验方法：取大鼠110只，随机分组，每组10只，前9组分别灌胃50％、70％、90％的继木叶总黄酮醇提取物100mg/kg、200mg/kg和400mg/kg(为临床用量的5、10、20倍)，阳性对照组灌银杏叶片125mg/kg(临床用量的10倍)，对照组灌胃等容量的生理盐水，给药容量1ml/100g，每天给药1次，连续6d，末次给药后1h，每鼠经腹腔注射戊巴比妥钠30mg/kg麻醉后，背位固定在手术台上，在颈部正中线由甲状软骨起始切开长3～4cm切口，找出气管，向心方向插入气管插管，以便清除分泌物。再分离右颈总动脉和左颈外静脉。在三段聚乙烯管的中段放入一根长5cm的4号手术丝线；将肝素生理盐水溶液(5μg/ml)充满聚乙烯管腔.当管的一端插入左颈外静脉后，从聚乙烯管注入肝素50μg/kg，夹住管壁，将管的另一端插入右颈总动脉。开放血流，则血流右颈总动脉流经聚乙烯管，返回左颈外静脉。开放血流15min后，中断血流，迅速取出丝线称重，总重量减去丝线重即血栓湿重。

结果：见表5。

表5 对大鼠血小板血栓形成的影响(X±s)

注：与生理盐水组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01。

表5表明：给药组血栓湿重比对照组明显减轻，差异显著。说明继木叶总黄酮醇提取物有降低血小板的聚集功能，抑制血栓形成。同时，其作用呈量效关系，随着其总黄酮醇含量增加，其作用越强。

急性毒性试验：

为了考察继木叶总黄酮醇提取物的安全性，特对其进行了急性毒性的考察研究，试验方法结果如下：

药物：由实施例3制得的继木叶总黄酮醇提取物(含总黄酮醇90％)。

动物：ICR小鼠，一级，鼠龄8～9周，体重18～22g。

方法：改良寇法(参照《中药药理研究方法学》第113页，人民卫生出版社，第1版，陈奇主编)。

结果：LD₅₀为11.37g/kg，95％的可信限为10.68～12.06g/kg。

结果表明本发明药物急性毒性小，安全度大。

由上述药效学和毒理学试验的结果可以得出：继木叶总黄酮醇提取物具有较好的治疗糖尿病视网膜病变、冠心病心绞痛和脑梗死的作用，且LD₅₀为11.37g/kg，毒性很低。

Claims (4)

1.一种檵木叶总黄酮醇提取物作为唯一的活性成分用于制备治疗糖尿病视网膜病变药物的用途，其特征在于：其中檵木叶总黄酮醇提取物中总黄酮醇含量在50％以上；而且，该檵木叶总黄酮醇提取物是通过包括以下步骤的方法制得的：

(1)、制备檵木叶粗提物：取檵木叶药材，加10％～95％的乙醇进行提取，滤过，得提取液，将此提取液浓缩，加乙醇至含醇量70％，静置过夜，滤过，滤液回收乙醇，浓缩，即得檵木叶粗提物；

(2)、将(1)步制得的檵木叶粗提物过大孔吸附树脂，先用水或1％～30％的低浓度乙醇洗脱，将水或低浓度乙醇洗脱液弃去不用，除去极性大的杂质，再用40％～95％的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，干燥，即得檵木叶总黄酮醇提取物。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述的檵木叶总黄酮醇提取物中总黄酮醇含量在70％以上。

3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于：所述的檵木叶总黄酮醇提取物中总黄酮醇含量在90％以上。

4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述的方法中，经步骤(2)精制得的檵木叶总黄酮醇提取物，用乙酸乙酯进一步纯化处理。