CN108478706A - 一种保护心血管的组合物及其制备方法 - Google Patents

一种保护心血管的组合物及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于中药保健的技术领域，具体的涉及一种保护心血管的组合物及其制备方法。该组合物，包括以下制备原料：红芹、人参、山楂、山药、沙棘果、菊花、黄精、桑叶。其制备方法包括榨汁、粉碎、提取、混合、灭菌、灌装等步骤。所述组合物具有保护心血管的功效，可用于预防心血管疾病，而且携带方便、易于服用，依从性好，特别适合高血压、高血脂、动脉粥样硬化病人的辅助治疗和中老年人的日常保健。

Description

一种保护心血管的组合物及其制备方法
技术领域
本发明属于中药保健的技术领域，具体涉及一种保护心血管的组合物及其制备方法。
背景技术
随着现代社会的发展，老龄化人口越来越多，心血管疾病的发病率也急剧上升。心血管疾病，又称为循环系统疾病，是一系列涉及循环系统的疾病，循环系统指人体内运送血液的器官和组织，主要包括心脏、血管(动脉、静脉、微血管)，可以细分为急性和慢性，一般都是与动脉硬化有关。动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是冠心病、脑梗死、外周血管病的主要原因，而动脉粥样硬化是多因素共同作用引起的，发病机制复杂，目前尚未完全阐明。主要危险因素有高血压、高血脂和大量吸烟，还有糖尿病、肥胖和遗传因素等，高胆固醇血症是动脉粥样硬化的致病性因素，前期临床上主要采用长期服用西药、改变生活习惯等的方式来降低心血管疾病的发病几率。
但是长期服用西药的副作用及不良反应、改变生活习惯等方式都是造成患者对医师确定的治疗方案的依从性差，造成不间断用药或不改变生活方式，故影响治疗效果。
发明内容
鉴于现有技术中所存在的问题，本发明的目的在于提供一种保护心血管的组合物及其制备方法与应用。本发明的中药组合物疗效确切，可用于中老年人日常保健，且服用方便，一日1-2次。所述组合物具有保护心血管的功效，适合高血压、高血脂、动脉粥样硬化病人的辅助治疗和中老年人的日常保健。
为了实现上述目的及其他相关目的，本发明采用以下技术方案：
本发明的第一方面，提供了一种中药组合物，其制备原料包括：红芹、人参、山楂、山药、沙棘果、菊花、黄精、桑叶。
红芹为伞形科植物东鹅芹属Tongoloa dunnii(Boiss.)Wolff的植株。红芹菜是红茎绿叶的，叶子和普通芹菜叶子一样为嫩绿色，而且红芹的出汁率高于普通芹菜。
沙棘果为胡颓子科沙棘属植物沙棘Hippophae rhamnoides L.的果实，又名醋柳果，酸刺果。
人参为五加科植物人参Panax ginseng C.A.Mey.的干燥根和根茎。
山楂为蔷薇科植物山里红Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br.或山楂Crataegus pinnatifida Bge.的干燥成熟果实。
山药为薯蓣科植物薯蓣Dioscorea opposita Thunb.的干燥根茎。
菊花为菊科植物菊Chrysanthemum morifolium Ramat.的干燥头状花序。
黄精为百合科植物滇黄精Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl.、黄精Polygonatum sibiricum Red.或多花黄精Polygonatum cyrtonema Hua的干燥根茎。
桑叶为桑科植物桑Morus alba L.的干燥叶。
优选地，所述中药组合物的制备料中，药效原料由红芹、人参、山楂、山药、沙棘果、菊花、黄精、桑叶组成。
本发明组合物中选用红芹、桑叶、菊花、山楂作为主要降压、减脂成分，人参、黄精、山药、沙棘果作为保护心血管的成分。该组合物采用了独特的中药配伍理论，补泄相宜，采用四补四泄，采用红芹、桑叶、菊花、山楂为泄药，人参、黄精、山药、沙棘果为补药，其中泄药用量重于补药，主要以清泄肝肾为主，兼补心肺脾。该组合物不仅遵从中药的配伍要求，而且在非临床、临床上都具有良好的药理作用，可以降低血压和血脂，保护血管内层细胞，从而抑制动脉粥样硬化形成，从而保护心血管。
优选地，所述中药组合物中，各制备原料之间的重量份数比例范围是：红芹100～400份、人参1～3份、山楂20～100份、山药20～100份、沙棘果20～100份、菊花20～100份、黄精10～30份、桑叶10～30份。
进一步地，所述中药组合物中，各制备原料之间的重量份数比例范围是：红芹100～400份、人参1～3份、山楂50～100份、山药50～100份、沙棘果50～100份、菊花30～100份、黄精10～30份、桑叶10～30份。
进一步地，所述中药组合物中，各制备原料之间的重量份数比例范围是：红芹200～400份、人参1份、山楂50～100份、山药50～100份、沙棘果50～100份、菊花30～50份、黄精10～20份、桑叶10～20份。
进一步地，所述中药组合物中，各制备原料之间的重量份数比例范围是：红芹100～200份、人参1～3份、山楂50～100份、山药50～100份、沙棘果50～100份、菊花50～100份、黄精20～30份、桑叶20～30份。
进一步地，所述中药组合物中，各制备原料之间的重量份数比例范围是：红芹100～400份、人参1～3份、山楂100份、山药100份、沙棘果100份、菊花30～100份、黄精10～30份、桑叶10～30份。
优选地，所述中药组合物中，各制备原料之间的重量份数比例是：红芹200份、人参1份、山楂50份、山药50份、沙棘果50份、菊花50份、黄精20份、桑叶20份。
优选地，所述中药组合物中，各制备原料之间的重量份数比例是：红芹100份、人参3份、山楂100份、山药100份、沙棘果100份、菊花100份、黄精30份、桑叶30份。
优选地，所述中药组合物中，各制备原料之间的重量份数比例是：红芹400份、人参1份、山楂100份、山药100份、沙棘果100份、菊花30份、黄精10份、桑叶10份。
进一步地，本发明的第二方面，提供了一种中药提取物，为以上述中药组合物为原料提取有效成分制得。
本发明中，中药组合物中各原料及其配方最为关键，在获知中药配方后，本技术领域的技术人员可采用各种常规的中药有效成分提取方法来提取其有效成分，如常规的煎煮、水提醇沉法、醇提水沉法、盐析法等，由于上述提取方法均能获得前述中药配方中的主要药效成分，因此均能对心血管具有一定的防治疗效。
其中，水提醇沉法为：先以水为溶剂提取药材有效成分，再用不同浓度的乙醇沉淀去除提取液中杂质的方法。一般含乙醇量达到50～60％(重量体积比即g/100mL)时，可去除淀粉等杂质，当含醇量达75％以上，除鞣质、水溶性色素等少数无效成分外，其余大部分杂质均可沉淀去除。
醇提水沉法为：先以适宜浓度的乙醇提取药材成分，再用水除去提取液中杂质的方法。
所述中药组合物提取有效成分后可再经常规的步骤浓缩、纯化或干燥获得中药提取物。其中浓缩的方法包括但不限于：常压蒸发、减压蒸发、薄膜蒸发、多效蒸发，纯化的方法包括但不限于：盐析纯化、大孔树脂吸附纯化、乙醇沉淀纯化、离子交换树脂纯化、絮凝沉淀纯化、膜分离纯化、聚酰胺吸附纯化、硅胶吸附层析纯化等，干燥的方法包括但不限于：烘干法、鼓式干燥法、带式干燥法、吸湿干燥法、沸腾干燥法、喷雾干燥法、减压干燥法、冷冻干燥法、红外线干燥法、微波干燥法等。
根据所述中药组合物中不同原料有效成分的特性，可采用不同的提取工艺。
优选地，所述提取采用水提法。
进一步优选地，所述水提法，包括如下步骤：取中药组合物，加水煎煮，过滤，浓缩，干燥，获得中药提取物。
进一步地，本发明的第三方面，还提供了一种中药提取物的制备方法，所述方法包括步骤：取中药组合物，加水煎煮，过滤，浓缩，干燥，获得中药提取物。
再进一步地，所述中药提取物的制备方法，包括步骤：
(1)榨汁：将新鲜的红芹、沙棘果榨汁，后过滤，留鲜汁备用；
(2)粉碎：将人参、山楂、山药、菊花、黄精、桑叶分别粉碎；
(3)提取：将人参、山楂、山药、菊花、黄精、桑叶按重量比例混合，加水提取；
(4)混合：将步骤(3)中所得提取液与步骤(1)中所得鲜汁混合。
进一步地，所述方法还包括：
(5)灭菌：将步骤(4)中所得混合液进行瞬时高温灭菌。
进一步地，所述方法还包括：
(6)灌装：将灭菌后的混合液进行无菌灌装。
优选地，步骤(1)中，将新鲜的红芹、沙棘果放入榨汁机榨汁。
优选地，步骤(1)中，采用80～200目板框过滤机过滤。进一步地，可采用80目、100目、120目或200目板框过滤机过滤。
优选地，步骤(2)中，将人参、山楂、山药、菊花、黄精、桑叶分别粉碎至小碎块，过二号药典筛(24目)。
优选地，步骤(3)中，将人参、山楂、山药、菊花、黄精、桑叶按重量比例混合，加水进行水浴提取。
优选地，步骤(3)中，将人参、山楂、山药、菊花、黄精、桑叶按重量比例混合，用四至六倍体积的水进行水浴提取二次；之后减压浓缩至1～2倍体积量。
进一步地，步骤(3)中，将人参、山楂、山药、菊花、黄精、桑叶按重量比例混合，用六倍体积的水进行水浴提取二次；之后减压浓缩至2倍体积量。
优选地，步骤(4)中，将步骤(3)中所得提取液与步骤(1)中所得鲜汁按照1：(1～3)重量比例混合。
优选地，步骤(4)中，混合后，加入抗氧化剂。进一步地，所述抗氧化剂选自维生素C、木糖醇、柠檬酸。
优选地，步骤(4)中，混合后，加水稀释。
优选地，步骤(4)中，混合后，加水10～40重量份均质。
进一步地，均质压强为25～50Mpa、均质次数为2～3次和均质时间为1～3min。均质前调节pH为6～7。
优选地，步骤(5)中，所述瞬时高温灭菌工艺条件为灭菌温度121～130℃，灭菌时间10-15s。进一步地，所述瞬时高温灭菌工艺条件为灭菌温度125～130℃，灭菌时间10-15s。进一步地，所述瞬时高温灭菌工艺条件为灭菌温度125℃，灭菌时间10-15s。进一步地，所述瞬时高温灭菌工艺条件为灭菌温度125℃，灭菌时间15s。
本发明的第四方面，提供了前述中药组合物或中药提取物用于制备防治心血管疾病药物的用途。
优选地，所述用途具体是指：前述中药组合物或中药提取物用于制备防治高血压药物的用途。
进一步地，前述中药组合物或中药提取物可用于制备提高血管内皮细胞存活率的药物。
进一步地，前述中药组合物或中药提取物可用于制备降血脂药物。
进一步地，前述中药组合物或中药提取物可用于制备降血清总胆固醇(TC)药物。
进一步地，前述中药组合物或中药提取物可用于制备降甘油三酯(TG)药物。
进一步地，前述中药组合物或中药提取物可用于制备降血压药物。
进一步地，前述中药组合物或中药提取物可用于制备保护心血管药物。
本发明的第五方面，还进一步提供了一种中药制剂，包括治疗有效量的前述中药提取物及一种或多种常规的药学上可接受的辅料。
药学上可接受的辅料包括(但并不限于)：药物可接受的载体、稀释剂、填充剂、结合剂及其它赋形剂。本领域枝术人员已知的治疗惰性的无机或有机的载体包括(但不限于)乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、植物油、蜡、脂肪、多羚基化合物例如聚乙二醇、水、蔗糖、乙醇、甘油，诸如此类，各种防腐剂、润滑剂、分散剂、矫味剂。保湿剂、抗氧化剂、甜味剂、着色剂、稳定剂、盐、缓冲液诸如此类也可加入其中，这些物质根据需要用于帮助配方的稳定性或有助于提高活性或它的生物有效性或在口服的情况下产生可接受的口感或气味。诸如颗粒剂和膏剂之类的中药制剂，可通过常规方法进行制备。本发明的药物组合物还可与其他治疗剂一起使用。
优选地，所述的中药制剂为口服制剂，包括但不限于颗粒剂、丸剂、片剂、胶囊剂、糖浆剂、喷雾剂等。
在提取出中药组合物中的有效成分后，可采用常规的药用辅料及添加剂制备前述药物组合物。
本发明的药物组合物的有效治疗剂量为，以原料药材的总重量计，口服安全有效量通常为1.00-2.65g/kg体重。当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明选用红芹、人参、山楂、山药、菊花、沙棘果、黄精、桑叶进行组合，使各组分的功效产生协同作用，从而有效地起到保护心血管的功效。该清组合物疗效确切，可用于高血压、高血脂、动脉粥样硬化病人的辅助治疗和中老年人的日常保健。同时，制成制剂后携带方便，易于服用，一日1-2次，可增加患者的依从性。
附图说明
图1：红芹及白芹对血管内皮细胞存活率的影响效果图，其中Saline为对照组，A.graveolens为白芹组、G为葡萄糖组、T.dunnii为红芹组。
图2A：红芹与其他组分进行配伍形成的中药组合物的降TC的效果图。
图2B：红芹与其他组分进行配伍形成的中药组合物的降TG的效果图。
图3：红芹与其他组分进行配伍形成的中药组合物的降血压的效果图。
图4A：OX-LDL对细胞死亡率的影响。
图4B不同浓度的OX-LDL对PEDF表达的影响。
图4C：中药组合物2-1有效成分提取物处理血管内皮细胞结果图。
图4D：中药组合物3-1有效成分提取物处理血管内皮细胞结果图。
图5：红芹与其他组分进行配伍形成的中药组合物的安全性实验。
图6：红芹与其他组分进行配伍形成的中药组合物对血管内皮细胞的作用。
具体实施方式
在进一步描述本发明具体实施方式之前，应理解，本发明的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案；还应当理解，本发明实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，而不是为了限制本发明的保护范围。
当实施例给出数值范围时，应理解，除非本发明另有说明，每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义，本发明中使用的所有技术和科学术语与本技术领域技术人员通常理解的意义相同。除实施例中使用的具体方法、设备、材料外，根据本技术领域的技术人员对现有技术的掌握及本发明的记载，还可以使用与本发明实施例中所述的方法、设备、材料相似或等同的现有技术的任何方法、设备和材料来实现本发明。
实施例1红白芹的作用以及红芹、白芹与其他组分进行配伍形成的中药组合物的作用一、首先考察红芹与白芹的作用
实验方法包括如下步骤：
本实验中，红芹的有效成分提取物的制备方法包括如下步骤：新鲜的红芹放入榨汁机榨汁，出汁率为50-60％，将榨好的鲜汁减压过滤，得到红芹滤液后加水稀释。
本实验中，白芹的有效成分提取物的制备方法包括如下步骤：新鲜的白芹放入榨汁机榨汁，出汁率为40-50％，将榨好的鲜汁减压过滤，得到白芹滤液后加水稀释。
通过体外培养血管内皮细胞培养至对数期时，分别加入相同计量的滤液为10μL，浓度为5mg/ml的上述红芹的有效成分提取物、上述白芹的有效成分提取物，对照组加入相同计量的生理盐水和葡萄糖10μL，培养48h之后，通过细胞计数仪对细胞进行计数并进行统计分析，得出结果为如图1所示。
发明人发现红芹不但能降血压还能补血，对于高血压患者来说，既可以降压又可以补血。同时通过血管内皮细胞实验考量白芹、红芹对血管内皮细胞存活率的影响，如图1所示，为红白芹对血管内皮细胞存活率的影响效果图，其中，Saline为对照组(亦即生理盐水组)、A.graveolens为白芹组、G为葡萄糖组、T.dunnii为红芹组，由此可知，白芹与对照组相比没有显著性差异，而红芹与对照组相比有显著性差异，进一步肯定了红芹对于血管内皮细胞的存活率效果要优于白芹，具有保护心血管的作用。
二、考察红芹、白芹分别与其他组分进行配伍形成的中药组合物后所具有的作用
1、中药组合物1-1中，各制备原料之间的重量份数比例是：红芹100份、人参3份、山楂100份、山药100份、沙棘果100份、菊花100份、黄精30份、桑叶30份。
中药组合物1-1有效成分提取物制备方法包括如下步骤：
(1)榨汁：将新鲜的红芹、沙棘果放入榨汁机榨汁，出汁率为45-50％，将榨好的鲜汁采用板框过滤器过100目，留过滤液放冰箱冷藏2～8℃备用；
(2)粉碎：将人参、山楂、山药、菊花、黄精、桑叶分别粉碎至小碎块，过二号药典筛(24目)；
(3)提取：将粉碎步骤2)获得的所述的小碎块按配比(人参3份、山楂100份、山药100份、菊花100份、黄精30份、桑叶30份的重量比例)进行混合，加入四倍至六倍体积量的水进行水浴提取；提取过程为：先浸泡12h后，进行第一次水浴提取1h，之后再浸泡1h，进行第二次水浴提取45min；水浴提取温度为60～65℃；之后将两次的水提液合并后进行减压浓缩，浓缩至2倍体积量，获得浓缩液；
(4)混合：将步骤(3)中所得浓缩液与步骤(1)中所得鲜汁按照1：1的重量比例进行混合，备用。
2、中药组合物1-2中，各制备原料之间的重量份数比例是：白芹100份、人参3份、山楂100份、山药100份、沙棘果100份、菊花100份、黄精30份、桑叶30份。
中药组合物1-2有效成分提取物制备方法包括如下步骤：
(1)榨汁：将新鲜的白芹、沙棘果放入榨汁机榨汁，出汁率为45-50％，将榨好的鲜汁采用板框过滤器过100目，留过滤液放冰箱冷藏2～8℃备用；
(2)粉碎：将人参、山楂、山药、菊花、黄精、桑叶分别粉碎至小碎块，过二号药典筛(24目)；
(3)提取：将粉碎步骤2)获得的所述的小碎块按配比(人参3份、山楂100份、山药100份、菊花100份、黄精30份、桑叶30份的重量比例)进行混合，加入四倍至六倍体积量的水进行水浴提取；提取过程为：先浸泡12h后，进行第一次水浴提取1h，之后再浸泡1h，进行第二次水浴提取45min；水浴提取温度为60～65℃；之后将两次的水提液合并后进行减压浓缩，浓缩至1～2倍体积量，获得浓缩液；
(4)将步骤(3)中所得浓缩液与步骤(1)中所得鲜汁按照1：1的重量比例进行混合，备用。
3、中药组合物2-1中，各制备原料之间的重量份数比例是：红芹200份、人参1份、山楂50份、山药50份、沙棘果50份、菊花50份、黄精20份、桑叶20份。
中药组合物2-1有效成分提取物制备方法包括如下步骤：
(1)榨汁：将新鲜的红芹、沙棘果放入榨汁机榨汁，出汁率为45-50％，将榨好的鲜汁采用板框过滤器过200目，留过滤液放冰箱冷藏2～8℃备用；
(2)粉碎：将人参、山楂、山药、菊花、黄精、桑叶分别粉碎至小碎块，过二号药典筛(24目)；
(3)提取：将粉碎步骤2)获得的所述的小碎块按配比(人参1份、山楂50份、山药50份、菊花50份、黄精20份、桑叶20份的重量比例)进行混合，加入六倍体积量的水进行水浴提取；提取过程为：先浸泡12h后，进行第一次水浴提取1h，之后再浸泡1h，进行第二次水浴提取45min；水浴提取温度为60～65℃；之后将两次的水提液合并后进行减压浓缩，浓缩至1～2倍体积量，获得浓缩液；
(4)混合：将步骤(3)中所得浓缩液与步骤(1)中所得鲜汁按照1：1的重量比例进行混合，备用。
4、中药组合物2-2中，各制备原料之间的重量份数比例是：白芹200份、人参1份、山楂50份、山药50份、沙棘果50份、菊花50份、黄精20份、桑叶20份。
中药组合物2-2有效成分提取物制备方法包括如下步骤：
(1)榨汁：将新鲜的白芹、沙棘果放入榨汁机榨汁，出汁率为45-50％，将榨好的鲜汁采用板框过滤器过200目，留过滤液放冰箱冷藏2～8℃备用；
(2)粉碎：粉碎：将人参、山楂、山药、菊花、黄精、桑叶分别粉碎至小碎块，过二号药典筛(24目)；
(3)提取：将粉碎步骤2)获得的所述的小碎块按配比(人参1份、山楂50份、山药50份、菊花50份、黄精20份、桑叶20份的重量比例)进行混合，加入六倍体积量的水进行水浴提取；提取过程为：先浸泡12h后，进行第一次水浴提取1h，之后再浸泡1h，进行第二次水浴提取45min；水浴提取温度为60～65℃；之后将两次的水提液合并后进行减压浓缩，浓缩至2倍体积量，获得浓缩液；
(4)混合：将步骤(3)中所得浓缩液与步骤(1)中所得鲜汁按照1：1的重量比例进行混合，备用。
5、中药组合物3-1中，各制备原料之间的重量份数比例是：红芹400份、人参1份、山楂100份、山药100份、沙棘果100份、菊花30份、黄精10份、桑叶10份。
中药组合物3-1有效成分提取物制备方法包括如下步骤：
(1)榨汁：将新鲜的红芹、沙棘果放入榨汁机榨汁，出汁率为45-50％，将榨好的鲜汁采用板框过滤器过80目，留过滤液放冰箱冷藏2～8℃备用；
(2)粉碎：将人参、山楂、山药、菊花、黄精、桑叶分别粉碎至小碎块，过二号药典筛(24目)；
(3)提取：将粉碎步骤2)获得的所述的小碎块按配比(人参1份、山楂100份、山药100份、菊花30份、黄精10份、桑叶10份)进行混合，加入四倍至六倍体积量的水进行水浴提取；提取过程为：先浸泡12h后，进行第一次水浴提取1h，之后再浸泡1h，进行第二次水浴提取45min；水浴提取温度为60～65℃；之后将两次的水提液合并后进行减压浓缩，浓缩至1～2倍体积量，获得浓缩液；
(4)混合：将步骤(3)中所得浓缩液与步骤(1)中所得鲜汁按照1：3的重量比例进行混合，备用。
6、中药组合物3-2中，各制备原料之间的重量份数比例是：白芹400份、人参1份、山楂100份、山药100份、沙棘果100份、菊花30份、黄精10份、桑叶10份。
中药组合物3-2有效成分提取物制备方法包括如下步骤：
(1)榨汁：将新鲜的白芹、沙棘果放入榨汁机榨汁，出汁率为45-50％，将榨好的鲜汁采用板框过滤器过80目，留过滤液放冰箱冷藏2～8℃备用；
(2)粉碎：将人参、山楂、山药、菊花、黄精、桑叶分别粉碎至小碎块，过二号药典筛(24目)；
(3)提取：将粉碎步骤2)获得的所述的小碎块按配比(人参1份、山楂100份、山药100份、菊花30份、黄精10份、桑叶10份)进行混合，加入四倍至六倍体积量的水进行水浴提取；提取过程为：先浸泡12h后，进行第一次水浴提取1h，之后再浸泡1h，进行第二次水浴提取45min；水浴提取温度为60～65℃；之后将两次的水提液合并后进行减压浓缩，浓缩至1～2倍体积量，获得浓缩液；
(4)混合：将步骤(3)中所得浓缩液与步骤(1)中所得鲜汁按照1：3的重量比例进行混合，备用。
7、考察上述中药组合物1-1有效成分提取物、中药组合物1-2有效成分提取物、中药组合物2-1有效成分提取物、中药组合物2-2有效成分提取物、中药组合物3-1有效成分提取物、中药组合物3-2有效成分提取物对血管内皮细胞的作用。
实验方法包括如下步骤：
通过体外培养血管内皮细胞培养至对数期时，分别加入相同计量的溶液为10μL，浓度为5mg/ml的中药组合物1-1有效成分提取物、中药组合物1-2有效成分提取物、中药组合物2-1有效成分提取物、中药组合物2-2有效成分提取物、中药组合物3-1有效成分提取物、中药组合物3-2有效成分提取物，对照组加入相同计量的生理盐水和葡萄糖10μL，培养48h之后，通过TC20细胞计数仪对细胞进行计数并进行统计分析，得出结果为如图6所示，中药组合物1-1有效成分提取物、中药组合物2-1有效成分提取物、中药组合物3-1有效成分提取物与对照组相比有显著性差异，中药组合物3-1和中药组合物2-1的显著性差异最大，能够减缓心血管细胞的凋亡作用，由于中药组合物2-1的口感优于中药组合物3-1的口感，所以优选中药组合物2-1。
实施例2红芹与其他组分进行配伍形成的中药组合物的降血脂效果实验
(1)、中药组合物1-1中，各制备原料之间的重量份数比例是：红芹100份、人参3份、山楂100份、山药100份、沙棘果100份、菊花100份、黄精30份、桑叶30份。
中药组合物1-1有效成分提取物制备方法同实施例1。
(2)、中药组合物2-1中，各制备原料之间的重量份数比例是：红芹200份、人参1份、山楂50份、山药50份、沙棘果50份、菊花50份、黄精20份、桑叶20份。
中药组合物2-1有效成分提取物制备方法同实施例1。
(3)、中药组合物3-1中，各制备原料之间的重量份数比例是：红芹400份、人参1份、山楂100份、山药100份、沙棘果100份、菊花30份、黄精10份、桑叶10份。
中药组合物3-1有效成分提取物制备方法同实施例1。
(4)通过实验建立大鼠高胆固醇血症模型：配方饲料(1-4％胆固醇、10％猪油、2％甲基硫氧嘧啶、86-89％基础饲料)，喂服7～10天，可形成高胆固醇血症模型。
对比中药组合物1-1有效成分提取物、中药组合物2-1有效成分提取物、中药组合物3-1有效成分提取物对高胆固醇血症的效果，通过两个指标分别是血清总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)。
具体实验方法为，将高胆固醇血症大鼠随机分为三组，每组15只大鼠，第一组(亦即Embodiment 1组)给予中药组合物1-1有效成分提取物，进行腹腔注射，给药剂量为45mg/4.5ml、给药频率为每天2次、给药15天后，测量血清总胆固醇(TC)含量和甘油三酯(TG)含量，取平均值。第二组(亦即Embodiment 2组)给予中药组合物2-1有效成分提取物，给药剂量为45mg/4.5mL、给药频率为每天2次、给药15天后，测量血清总胆固醇(TC)含量和甘油三酯(TG)含量，取平均值。第三组(亦即Embodiment 3组)给予中药组合物3-1有效成分提取物，给药剂量为45mg/4.5mL、给药频率为每天2次、给药15天后，测量血清总胆固醇(TC)含量和甘油三酯(TG)含量，取平均值。设置健康大鼠对照组(亦即Control组)，共有10只大鼠，每只大鼠给予4.5mL生理盐水。
结果如图2A所示，对健康对照组相比，施用中药组合物2-1有效成分提取物组、中药组合物3-1有效成分提取物组的血清总胆固醇(TC)含量有降低且有显著性差异。
如图2B所示，与健康对照组相比，施用中药组合物2-1有效成分提取物组、中药组合物3-1有效成分提取物组的甘油三酯(TG)含量有降低且有显著性差异。
此外，与中药组合物3-1有效成分提取物相比，中药组合物2-1有效成分提取物的口感更好，药味更轻。
实施例3红芹与其他组分进行配伍形成的中药组合物的降压效果实验
(1)中药组合物2-1中，各制备原料之间的重量份数比例是：红芹200份、人参1份、山楂50份、山药50份、沙棘果50份、菊花50份、黄精20份、桑叶20份。
中药组合物2-1有效成分提取物制备方法包括如下步骤：
1)榨汁：将新鲜的红芹、沙棘果放入榨汁机榨汁，出汁率为45-50％，将榨好的鲜汁采用板框过滤器过200目，留过滤液放冰箱冷藏2～8℃备用；
2)粉碎：将人参、山楂、山药、菊花、黄精、桑叶分别粉碎至小碎块，过二号药典筛(24目)；
3)提取：将粉碎步骤2)获得的所述的小碎块按配比(人参1份、山楂50份、山药50份、菊花50份、黄精20份、桑叶20份的重量比例)进行混合，加入六倍体积量的水进行水浴提取；提取过程为：先浸泡12h后，进行第一次水浴提取1h，之后再浸泡1h，进行第二次水浴提取45min；水浴提取温度为60～65℃；之后将两次的水提液合并后进行减压浓缩，浓缩至2倍体积量，获得浓缩液；
4)混合：将榨汁步骤1)获得的鲜汁与提取步骤3)获得的浓缩液按鲜汁2份、浓缩液1份重量比例混合，该混合液可以立即进行稀释，或冷链运输到外地工厂再加入辅料进行稀释；
5)再加入木糖醇、维生素C、柠檬酸各1份，最后加水20重量份进行均质，均质压强为35Mpa、均质次数为3次和均质时间为1.5min；均质前调节为弱酸性，pH 6～7，可以减少红芹中酸性降压物质在均质和灭菌中的损失，提高降压活性。此外，经过实验发现，当混合后，可加水10～40重量份均质。均质压强可为25～50Mpa、均质次数可为2～3次和均质时间可为1～3min。
6)灭菌：分别采用水浴灭菌、微波灭菌、瞬时高温灭菌上述混合液，并进行感官、药理活性确定灭菌方式。灭菌情况如下表1：
表1
如上表1所述，水浴灭菌方式灭菌效果好，但是会造成颜色褐变和降压活性减弱，故不宜采用。微波灭菌方式灭菌效果一般，温度高于65℃，会造成颜色褐变和降压活性减弱也不宜采用。瞬时高温灭菌在125℃，15s灭菌效果好，且颜色和药理活性无明显变化，故选用瞬时高温灭菌方式进行灭菌。
7)灌装：将灭菌后的混合液在洁净区，采用液体自动灌装机进行无菌灌装，灌装到30～100mL棕色玻璃瓶内。棕色玻璃瓶可以避光，保护酸性物质避免在光催化下水解。
采用瞬时高温灭菌的方式筛选最佳的灭菌温度及时间。实验情况如下：
表2
序号 灭菌温度(℃) 灭菌时间(s) 灭菌效果 感官效果
1 120 10 不合格 无明显变化
2 120 12 不合格 无明显变化
3 120 15 合格 无明显变化
4 125 10 合格 无明显变化
5 125 12 合格 无明显变化
6 125 15 好 无明显变化
7 130 10 好 褐变
8 130 12 好 褐变
9 130 15 好 褐变
故灭菌温度等于或高于130℃，会造成颜色褐变，在等于或低于125℃时则不会造成褐变，但是在120℃，灭菌时间低于12s时会造成灭菌效果不合格。综上，可采用灭菌温度为125℃，灭菌时间为10-15s。
(2)、中药组合物1-1中，各制备原料之间的重量份数比例是：红芹100份、人参3份、山楂100份、山药100份、沙棘果100份、菊花100份、黄精30份、桑叶30份。
中药组合物1-1有效成分提取物制备方法同实施例1。
(3)、中药组合物3-1中，各制备原料之间的重量份数比例是：红芹400份、人参1份、山楂100份、山药100份、沙棘果100份、菊花30份、黄精10份、桑叶10份。
中药组合物3-1有效成分提取物制备方法同实施例1。
(4)肾性高血压动物模型：两肾一夹法用丝线或银夹狭窄左侧肾动脉，狭窄程度在50-80％之间，此方法复制率高，并在4-5周形成稳定的高血压并维持。通过手术将沿向心方向插入腹主动脉约1.5cm，腹主动脉插管后接上有创血流动力学监测仪，仪器对零后2min开始测定血压，记录1，2，3，4，5，6min时的动脉平均压，取平均值。
具体实验方法为，将肾性高血压大鼠随机分为三组，每组15只大鼠，第一组(亦即Embodiment 1组)给予中药组合物1-1有效成分提取物，进行腹腔注射，给药剂量为45mg/4.5mL、给药频率为每天2次、给药15天后，测量血压，取平均值。第二组(亦即Embodiment2组)给予中药组合物2-1有效成分提取物，给药剂量为45mg/4.5mL、给药频率为每天2次、给药15天后，测量血压，取平均值。第三组(亦即Embodiment 3组)给予中药组合物3-1有效成分提取物，给药剂量为45mg/4.5mL、给药频率为每天2次、给药15天后，测量血压，取平均值。设置健康大鼠对照组(亦即Control组)，共有11只大鼠，每只大鼠给予4.5mL生理盐水。
结果如图3所示，对健康对照组相比，施用中药组合物2-1有效成分提取物组、中药组合物3-1有效成分提取物组的血压降低且显著性差异。
此外，与中药组合物3-1有效成分提取物相比，中药组合物2-1有效成分提取物的口感更好，药味更轻。
(5)临床试验验证降压功效的研究：
表3
由表3可以直接看出，高血压患者试验总人数为100人，在服用中药组合物2-1有效成分提取物后一个月后反应无效症状无减轻的人数为10人，无效率为10％，有效症状减轻的人数为82人，有效率为82％，具有显效症状明显消失的人数58人，显效率为58％，反应副作用的人数为0人，无副作用，试验结果表明，服用中药组合物2-1可以减轻情绪激动或劳累后感头晕、头痛、眼花、耳鸣、注意力不集中等症状，达到降压的效果。
在另外一组中，高血压患者试验总人数为100人，在服用中药组合物3-1有效成分提取物后一个月后反应无效症状无减轻的人数为8人，无效率为8％，有效症状减轻的人数为92人，有效率为92％，具有显效症状明显消失的人数63人，显效率为63％，反应副作用的人数为0人，无副作用，试验结果表明，服用中药组合物2-1有效成分提取物可以减轻情绪激动或劳累后感头晕、头痛、眼花、耳鸣、注意力不集中等症状，达到降压的效果。
实施例4红芹与其他组分进行配伍形成的中药组合物的保护心血管效果实验
(1)、中药组合物1-1中，各制备原料之间的重量份数比例是：红芹100份、人参3份、山楂100份、山药100份、沙棘果100份、菊花100份、黄精30份、桑叶30份。
中药组合物1-1有效成分提取物制备方法同实施例1。
(2)、中药组合物2-1中，各制备原料之间的重量份数比例是：红芹200份、人参1份、山楂50份、山药50份、沙棘果50份、菊花50份、黄精20份、桑叶20份。
中药组合物2-1有效成分提取物制备方法同实施例1。。
(3)、中药组合物3-1中，各制备原料之间的重量份数比例是：红芹400份、人参1份、山楂100份、山药100份、沙棘果100份、菊花30份、黄精10份、桑叶10份。
中药组合物3-1有效成分提取物制备方法同实施例1。
氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)可造成血管内皮细胞损伤，诱导血管内皮细胞促炎症细胞因子和促炎症因子表达。
本实施例通过实验考察上述中药组合物1-1有效成分提取物、中药组合物2-1有效成分提取物、中药组合物3-1有效成分提取物对PEDF表达的影响。
实验方法包括如下步骤：
通过体外培养血管内皮细胞培养至对数期时，分别加入10μL不同浓度的OX-LDL的溶液，分别为12.5mg/L、25mg/L和50mg/L，而对照组加入相同体积的生理盐水10μL，细胞培养48h之后，通过TC20细胞计数仪对细胞进行计数并进行统计分析，得出结果为如图4A。
通过图4A可以看出当低密度脂蛋白被氧化成氧化低密度脂蛋白时能够使内皮细胞凋亡增加，并且当氧化低密度脂蛋白增加时能使得在动脉粥样硬化中具有保护的色素上皮衍生因子(PEDF)表达降低，在OX-LDL浓度达到50mg/L时有显著性差异。
如图4B，说明了在不同浓度OX-LDL处理血管内皮细胞时，具有在动脉粥硬化中具有保护作用的PEDF表达情况，发现在OX-LDL浓度为50mg/L时对PEDF的表达有抑制作用且有显著性差异。如果在OX-LDL浓度为50mg/L时，加入中药组合物的有效成分提取物后，能够使PEDF的表达增加，则说明该中药组合物的有效成分提取物以使PEDF表达增加。
通过体外培养血管内皮细胞培养至对数期时，对照组(Control)生理盐水10μL。通过体外培养血管内皮细胞培养至对数期时，加入10μL 50mg/L的OX-LDL的溶液，记为OX-LDL(50mg/L)组。通过体外培养血管内皮细胞培养至对数期时，加入10μL 50mg/L的OX-LDL的溶液的基础上，加入中药组合物2-1有效成分提取物，细胞培养，检测PEDF表达量。
如图4C，本发明中药组合物2-1有效成分提取物处理血管内皮细胞，与OX-LDL组相比有显著性差异，表明了中药组合物2-1有效成分提取物有利于在动脉粥样硬化中具有保护的PEDF表达增加，从而降低了高血脂的发病几率。
同样地，当通过体外培养血管内皮细胞培养至对数期时，加入10μL 50mg/L的OX-LDL的溶液的基础上，加入中药组合物3-1有效成分提取物，细胞培养，检测PEDF表达量。
如图4D，本发明中药组合物3-1有效成分提取物处理血管内皮细胞，中药组合物3-1有效成分提取物处理血管内皮细胞，分别在0h、12h、24h、36h、48h分别通过细胞计数仪计数并进行统计，发现中药组合物3-1有效成分提取物在24h、36h和48h时与对照生理盐水组(Saline)相比有显著性差异，表明了中药组合物3-1有效成分提取物有利于在动脉粥样硬化中具有保护的PEDF表达增加，从而降低了高血脂的发病几率。
此外，中药组合物1-1有效成分提取物处理血管内皮细胞，也有利于在动脉粥样硬化中具有保护的PEDF表达增加，从而降低了高血脂的发病几率，但中药组合物2-1有效成分提取物和中药组合物3-1有效成分提取物提高PEDF表达的效果更好。
接下来通过动物实验来研究本发明的中药组合物是否能够脉粥样硬化的治疗效果。
通过家兔构建主动脉粥样硬化模型，然后在肉眼可以观察到不同程度的红色斑块，呈点、斑、条状，融合成片。将主动脉粥样硬化家兔随机分为四组，每组12只主动脉粥样硬化家兔，第一组给予中药组合物1-1有效成分提取物，进行腹腔注射，给药剂量为100mg/10mL、给药频率为每天2次、给药15天后观察结果；第二组中药组合物2-1有效成分提取物，进行腹腔注射，给药剂量为100mg/10mL、给药频率为每天2次、给药15天后观察结果；第二组中药组合物3-1有效成分提取物，进行腹腔注射，给药剂量为100mg/10mL、给药频率为每天2次、给药15天后观察结果；第四组为对照组，给予生理盐水，进行腹腔注射，给药剂量为10mL、给药频率为每天2次、给药15天后观察结果。
结果显示，给予中药组合物1-1有效成分提取物、给予中药组合物2-1有效成分提取物、给予中药组合物3-1有效成分提取物与对照组相比，均能能够增强PEDF的表达，保护内皮细胞，可以明显的减轻或减少粥样斑块的程度和面积。其中给予中药组合物2-1有效成分提取物、给予中药组合物3-1有效成分提取物对于增强PEDF的表达、保护内皮细胞、减轻或减少粥样斑块的程度和面积的效果相当，均好于给予中药组合物1-1有效成分提取物的效果。
实施例5红芹与其他组分进行配伍形成的中药组合物的安全性实验
(1)、中药组合物1-1中，各制备原料之间的重量份数比例是：红芹100份、人参3份、山楂100份、山药100份、沙棘果100份、菊花100份、黄精30份、桑叶30份。
中药组合物1-1有效成分提取物制备方法同实施例1。
(2)、中药组合物2-1中，各制备原料之间的重量份数比例是：红芹200份、人参1份、山楂50份、山药50份、沙棘果50份、菊花50份、黄精20份、桑叶20份。
中药组合物2-1有效成分提取物制备方法同实施例1。
(3)、中药组合物3-1中，各制备原料之间的重量份数比例是：红芹400份、人参1份、山楂100份、山药100份、沙棘果100份、菊花30份、黄精10份、桑叶10份。
中药组合物3-1有效成分提取物制备方法同实施例1。
本发明还对中药组合物1-1有效成分提取物、中药组合物2-1有效成分提取物、中药组合物3-1有效成分提取物进行安全性实验。
针对中药组合物2-1有效成分提取物，实验采用大鼠雌雄对半各50只，随机分成两组，连续12个月分别给予水和中药组合物2-1有效成分提取物，其死亡率结果从图5中可以看出中药组合物2-1有效成分提取物组(Embodiment组)与对照组(Control组)无显著性差异，从而说明了中药组合物2-1有效成分提取物组的安全性较好。我们在提纯压缩后使用3倍量进行老鼠喂食，连续一周观察老鼠身体状况，并无相关病症出现。
针对中药组合物3-1有效成分提取物，实验采用大鼠雌雄对半各50只，随机分成两组，连续12个月分别给予水和中药组合物3-1有效成分提取物，其死亡率结果从图5中可以看出中药组合物3-1有效成分提取物组(Embodiment组)与对照组(Control组)无显著性差异，从而说明了中药组合物3-1有效成分提取物组的安全性较好。我们在提纯压缩后使用3倍量进行老鼠喂食，连续一周观察老鼠身体状况，并无相关病症出现。
针对中药组合物1-1有效成分提取物，实验采用大鼠雌雄对半各50只，随机分成两组，连续12个月分别给予水和中药组合物1-1有效成分提取物，其死亡率结果从图5中可以看出中药组合物1-1有效成分提取物组(Embodiment组)与对照组(Control组)无显著性差异，从而说明了中药组合物1-1有效成分提取物组的安全性较好。我们在提纯压缩后使用3倍量进行老鼠喂食，连续一周观察老鼠身体状况，并无相关病症出现。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。

Claims (14)

1.一种中药组合物，其制备原料包括：红芹、人参、山楂、山药、沙棘果、菊花、黄精、桑叶。
2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物中，各制备原料之间的重量份数比例范围是：红芹100～400份、人参1～3份、山楂20～100份、山药20～100份、沙棘果20～100份、菊花20～100份、黄精10～30份、桑叶10～30份。
3.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物中，各制备原料之间的重量份数比例范围是：红芹100～400份、人参1～3份、山楂50～100份、山药50～100份、沙棘果50～100份、菊花30～100份、黄精10～30份、桑叶10～30份。
4.一种中药提取物，为以如权利要求1-3任一项所述中药组合物为原料提取有效成分制得。
5.一种如权利要求4所述中药组合物的制备方法，所述方法包括步骤：取中药组合物，加水煎煮，过滤，浓缩，干燥，获得中药提取物。
6.根据权利要求5所述的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述中药提取物的制备方法，包括步骤：(1)榨汁：将新鲜的红芹、沙棘果榨汁，后过滤，留鲜汁备用；(2)粉碎：将人参、山楂、山药、菊花、黄精、桑叶分别粉碎；(3)提取：将人参、山楂、山药、菊花、黄精、桑叶按重量比例混合，加水提取；(4)混合：将步骤(3)中所得提取液与步骤(1)中所得鲜汁混合。
7.根据权利要求6所述的中药组合物的制备方法，其特征在于，还包括以下特征中的任一项或多项：a)步骤(1)中，将新鲜的红芹、沙棘果放入榨汁机榨汁；b)步骤(1)中，采用80～200目板框过滤机过滤；c)步骤(2)中，将人参、山楂、山药、菊花、黄精、桑叶分别粉碎至小碎块，过二号药典筛；d)步骤(3)中，将人参、山楂、山药、菊花、黄精、桑叶按重量比例混合，加水进行水浴提取；e)步骤(4)中，将步骤(3)中所得提取液与步骤(1)中所得鲜汁按照1：(1～3)重量比例混合；f)步骤(4)中，混合后，加入抗氧化剂；g)步骤(4)中，混合后，加水稀释；h)步骤(4)中，混合后，加水10～40重量份均质。
8.根据权利要求7所述的中药组合物的制备方法，其特征在于，还包括以下特征中的任一项或多项：(A)步骤(3)中，将人参、山楂、山药、菊花、黄精、桑叶按重量比例混合，用四至六倍体积的水进行水浴提取二次，之后减压浓缩至1～2倍体积量；(B)所述抗氧化剂选自维生素C、木糖醇、柠檬酸；(C)均质压强为25～50Mpa、均质次数为2～3次和均质时间为1～3min；(D)均质前调节pH为6～7。
9.根据权利要求6所述的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述方法还包括：(5)灭菌：将步骤(4)中所得混合液进行瞬时高温灭菌。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，步骤(5)中，所述瞬时高温灭菌工艺条件为灭菌温度121～130℃，灭菌时间10-15s。
11.如权利要求1-3任一项所述中药组合物或如权利要求4所述中药提取物用于制备防治心血管疾病药物的用途。
12.根据权利要求11所述的用途，其特征在于，所述用途具体是指：所述中药组合物或中药提取物用于制备防治高血压药物的用途。
13.如权利要求1-3任一项所述中药组合物或如权利要求4所述中药提取物的制药用途，包括以下特征中的任一项或多项：(1)用于制备提高血管内皮细胞存活率的药物；(2)用于制备降血脂药物；(3)用于制备降血清总胆固醇药物；(4)用于制备降甘油三酯药物；(5)用于制备降血压药物；(6)用于制备保护心血管药物。
14.一种中药制剂，包括治疗有效量的如权利要求4所述中药提取物及一种或多种常规的药学上可接受的辅料。
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