CN101919959A - 预防和治疗猪流感的药物组合物、其制备方法及用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有预防和治疗猪流感效果的药物组合物,其活性成分主要由以下原料药制成:板蓝根4.7wt.%-70.0wt.%、连翘2.3wt.%-39.7wt.%、广藿香2.3wt.%-37.3wt.%、知母1.4wt.%-28.0wt.%和/或其它清热解毒类中药。其可以制备成任何一种常规剂型,如口服液、片剂、胶囊剂、颗粒剂以及注射剂等。本发明还提供了这种药物组合物的改进的制备方法,和其在制备预防或治疗猪流感的药物和保健品中的应用。这种药物组合物可有效预防、治疗猪流感,是一种更安全、来源更广泛的价廉低毒抗猪流感药物。
Description
技术领域
本发明涉及一种具有预防和治疗猪流感效果的药物组合物、其制备方法及用途,特别是涉及一种以植物中药为原料制成的具有预防和治疗猪流感效果的药物组合物、其制备方法及用途。
背景技术
猪流感(Swine influenza,SI)的病原为猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV),属于正黏病毒科。一般呈多形态,直径约100nm,有囊膜,囊膜上有突出的糖蛋白,通常称为纤突。纤突有2种,一种是血凝素(hemagglutinin,HA),另一种是神经氨酸酶(neuramidinase,NA)。HA和NA可作为确定流感病毒亚型和毒株的主要依据。HA在适宜条件下能凝集某些动物的红细胞,在感染的过程中与识别吸附靶细胞有关。NA既能使吸附在红细胞上的病毒脱离红细胞,也能使病毒从感染的细胞中释放出来。同种病毒的血凝素抗体可以防止病毒吸附细胞,在防止流感病毒的感染中起重要作用,而神经氨酸酶的抗体能限制病毒感染细胞。除了HA和NA这2种病毒蛋白以外,还有基质蛋白(M),核蛋白(NP),多聚酶(PA、PB1、PB2)以及非结构蛋白(NS)。
猪流行性感冒,是猪的一种急性、传染性呼吸器官疾病。其特征为突发,咳嗽,呼吸困难,发热及迅速转归。猪流感是猪体内因病毒引起的呼吸系统疾病。猪流感由甲型流感病毒(A型流感病毒)引发,通常爆发于猪之间,传染性很高但通常不会引发死亡。秋冬季属高发期,但全年可传播。猪流感多被辨识为丙型流感病毒(C型流感病毒),或者是甲型流感病毒的亚种之一。该病毒可在猪群中造成流感暴发。通常情况下人类很少感染猪流感病毒。
甲型流感有很多不同的类型,计有:H1N1、H1N2、H3N1、H3N2和H2N3亚型的甲型流感病毒都能导致甲型H1N1流感的感染。与禽流感不同,甲型H1N1流感能够以人传人。过往曾经发生人类感染甲型H1N1流感,但未有发生人传人案例。2009年4月中,墨西哥公布发生人传人的甲型H1N1流感案例,有关案例是一宗由H1N1病毒感染给人的病例,并在基因分析的过程发现基因内有猪、鸡及来自亚洲、欧洲及美洲人种的基因。甲型H1N1流感的症状:甲型H1N1流感患者通常有39摄氏度以上的高烧、剧烈头疼、肌肉疼痛、咳嗽、鼻塞、红眼等症状。
猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)是猪群中一种可引起地方性流行性感冒的正黏液病毒(Orthomyxoviruses)。世界卫生组织4月30日将此前被称为猪流感的新型致命病毒更名为H1N1甲型流感(influenza A(H1N1))。
甲型H1N1流感病毒是A型流感病毒,携带有H1N1亚型猪流感病毒毒株,包含有禽流感、猪流感和人流感三种流感病毒的核糖核酸基因片断,同时拥有亚洲猪流感和非洲猪流感病毒特征。
在自然状态下,AI与人流感之间的联系需要通过中间宿主(如猪、马、海豚等哺乳动物)来实现。但是,猪流感病毒的抗原性不断发生变异<抗原性转移antigenic shift和抗原性漂流antigenic drift),其寄生的动物(宿主)范围也在不断扩大。现在,猪流感病毒可以直接感染人类。首次突破种间障碍直接感染人甚至引起了人的死亡,由此又赋予了AIV全新的公共卫生意义。近来,猪流感疫情已在多个国家爆发,对人类健康和全球经济安全造成了巨大威胁。
但是由于长时间以来在人身上发现的流感病毒只有H1、H2、H3型,人类一直以这3种病毒为目标进行预防,市场上的抗病毒制剂也指的是为了治疗此类疾病。因此,人体对现在爆发的猪流感病毒H1N1没有免疫力,以往使用的人流感病毒注射用预防性药物和药物也不能用来预防猪流感病毒感染。故当毒性较高的猪流感病毒侵入人体时,便会产生发烧、肌肉酸痛、发冷等征状,比流行性感冒要严重,并产生严重的并发症,可能会导致死亡。
目前,用于抗流感的药物主要有神经氨酸酶抑制剂如:扎那米韦(Zanamivir)及奥司米韦(Oseltamivir)等;离子通道阻滞剂如金刚烷胺(Amantadine)和金刚乙胺(rimantadine),它们被认为是治疗和预防流感病毒的首选药物;以及核苷类药物:三氮唑核苷即利巴韦林(Ribavirin)亦称病毒唑。
但这些药物都存在一定的局限性:
(1)神经氨酸酶抑制剂类能有效地抑制A、B型流感病毒,此类药物较为昂贵,因此限制了其的推广使用。比如瑞士罗氏(Roche)制药独家生产的达菲(Tamiflu),其通用名称为磷酸奥司他韦(Oseltamivirphosphate),即奥司他韦((Oseltamivir),(3R,4R,5S)-4-乙酰胺-5-氨基-3(1-乙基丙氧基)-1-环己烯-1-羧酸乙酯,化学物质登记号CASRN为196618-13-0。))的磷酸盐,化学物质登记号CASRN为204255-11-8。该药物需每天服用两次,每次75mg,即每天需服用60元的药物,5天一个疗程相当于300元左右。并且由于拥有达菲专利直至2017年的罗氏公司以生产工艺既复杂又耗时、药品质量要求高等理由,拒绝放弃专利权,现在达菲产量不够,供应已经出现短缺;
而且,达菲的副作用明显,容易带来神志不清、产生幻觉、行为异常以及其它心理和神经方面的症状。部分人体产生明显的抗药性。
(2)离子通道阻滞剂对A型流感病毒也具有良好的抑制作用,但具有神经毒性,长期用药易产生耐药性,引起流感的大流行,并且此药对B型流感病毒无效;
(3)三氮唑核苷(病毒唑)对RNA、DNA病毒引起的感染均有效,但此类化合物具有一定的致畸作用,限制了其在临床的应用。
所以,一种可以有效预防、治疗猪流感,更安全、来源更广泛的价廉低毒抗猪流感药物也就显得尤为迫切和重要。
面对这种巨大的需要,许多技术工作者已将注意力集中到我国巨大的中药宝库中来。但是,这些中药组合物治疗猪流感的效果并不显著,不能满足迅速抑制猪流感爆发的需要。
发明内容
本发明的目的是提供具有预防和治疗猪流感效果的药物组合物。
本发明的另一个目的是提供本发明药物组合物的制备方法。
本发明的另一个目的是提供本发明药物组合物在制备预防或治疗猪流感的药物中的应用。
本发明的另一个目的是提供本发明药物组合物在制备预防或治疗猪流感的保健品中的应用。
在本发明的一个实施方式中,具有预防和治疗猪流感效果的药物组合物包含活性成分和/或药学上可接受的载体,其中的活性成分主要由以下原料药制成:板蓝根4.7wt.%-70.0wt.%、连翘2.3wt.%-39.7wt.%、广藿香2.3wt.%-37.3wt.%、知母1.4wt.%-28.0wt.%。
为了达到更好的疗效,上述药物组合物中活性成分主要由以下原料药制成:板蓝根14.0wt.%-46.70wt.%、连翘4.7wt.%-25.7wt.%、广藿香3.7wt.%-28.0wt.%、知母1.4wt.%-28.0wt.%。
另外,临床发现上述药物组合物还可以与芦根、石膏、穿心莲、蒲公英、青黛、红藤和/或甘草中的一种或几种清热解毒类中药组合。
在本发明的另一个实施方式中,具有预防和治疗猪流感效果的药物组合物包含活性成分和/或药学上可接受的载体,其中的活性成分主要由以下原料药制成:板蓝根4.7wt.%-46.7wt.%、连翘2.3wt.%-39.7wt.%、石膏3.3wt.%-39.7wt.%、芦根2.8wt.%-42.0wt.%、广藿香2.3wt.%-37.3wt.%、知母1.4wt.%-28.0wt.%。
为了达到更好的疗效,上述药物组合物中活性成分主要由以下原料药制成:板蓝根14.0wt.%-37.3wt.%、连翘4.7wt.%-25.7wt.%、石膏3.3wt.%-25.7wt.%、芦根3.7wt.%-25.7wt.%、知母3.7wt.%-14.0wt.%、广藿香3.7wt.%-11.7wt.%。
另外,临床发现上述药物组合物还可以进一步与石菖蒲、郁金、鸦胆子、穿心莲、蒲公英、薄荷、桔梗和/或甘草中的一种或几种清热解毒类中药组合。
在本发明的另一个实施方式中,具有预防和治疗猪流感效果的药物组合物包含活性成分和/或药学上可接受的载体,其中活性成分主要由以下原料药制成:板蓝根4.7wt.%-46.7wt.%、连翘2.3wt.%-39.7wt.%、石膏3.3wt.%-39.7wt.%、芦根2.8wt.%-42.0wt.%、地黄3.3wt.%-37.3wt.%、广藿香2.3wt.%-37.3wt.%、石菖蒲1.4wt.%-28.0wt.%、郁金1.4wt.%-28.0wt.%、知母1.4wt.%-28.0wt.%。
上述药物组合物中活性成分中原料药的组成优选为:板蓝根14.0wt.%-37.3wt.%、连翘4.7wt.%-25.7wt.%、石膏3.3wt.%-25.7wt.%、芦根3.7wt.%-25.7wt.%、地黄3.7wt.%-14.0wt.%、广藿香3.7wt.%-11.7wt.%、石菖蒲3.7wt.%-14.0wt.%、郁金3.7wt.%-14.0wt.%、知母3.7wt.%-14.0wt.%。
更优选为:板蓝根(RADIX ISATIDIS)30.1wt.%、连翘(FRUCTUS FORSYTHIAE)10.8wt.%、石膏(GYPSUM FIBROSUM)13.4wt.%、知母(RHIZOMA ANEMARRHENAE)5.8wt.%、芦根(RHIZOMA PHRAGMITIS)14.2wt.%、地黄(RADIX REHMANNIAE)7.5wt.%、广藿香(HERBA POGOSTEMONIS)6.6wt.%、石菖蒲(RHIZOMA ACORI TATARINOWI I)5.8wt.%、郁金(RADIX CURCUMAE)5.8wt.%。
本发明所述药物组合物的制备方法包括以下步骤:
(1)称取各原料药备用;
(2)将知母粉碎成最粗粉,加入80%~95%乙醇,加热回流提取3次,每次3小时,滤过,滤液减压回收乙醇并浓缩,得到50℃时相对密度为1.10的清膏A;
(3)其余原料药加水煎煮三次,同时收集挥发油,第一次1小时,第2、3次各0.5小时,滤过,滤液浓缩,得到相对密度为1.16的清膏B;
(4)将清膏A和B混合,加入辅料即得。
本发明的药物组合物可以采用中药制剂的常规方法制备成任何常规剂型。例如可以将本发明的原料药研成粉末,混合均匀制成散剂冲服;也可以将本发明的原料药水煎,然后浓缩水煎液。但是,为了使本发明的各原料药更好的发挥药效,优选对原料药中的知母进行特殊提取,如乙醇提取。但是这些不能用于限制本发明的保护范围。
优选的,本发明由板蓝根、连翘、广藿香和知母组成的药物组合物的制备方法包括以下步骤:
取以上4味处方量。首先将知母碎成最粗粉,加80%~95%乙醇加热回流提取3次,每次3小时,滤过,滤液减压回收乙醇并浓缩,得到相对密度为1.10(80℃测定)的清膏。板蓝根等3味,加水煎煮三次(同时收集挥发油),第一次1小时,第2、3次各0.5小时,滤过,滤液浓缩,得到相对密度为1.16的清膏。取上述两种清膏,加乳糖、环拉酸钠适量,制成乳糖型颗粒,或加入糊精、环拉酸钠适量,制成无糖型颗粒,再加入上述收集的挥发油和食用香料适量,混匀,即得;或取上述两种清膏混合均匀,浓缩,得到相对密度为1.30的清膏,取清膏,加蔗糖粉适量,制成颗粒,干燥,加入上述收集的挥发油和食用香料适量,混匀,制成含糖型颗粒。
上述制备方法中的原料药还可以与芦根和石膏组合,或者进一步组合穿心莲、蒲公英、青黛、红藤或甘草,其制备方法为:
取以上板蓝根、连翘、广藿香、知母、芦根和石膏等处方量。首先将知母碎成最粗粉,加80%~95%乙醇加热回流提取3次,每次3小时,滤过,滤液减压回收乙醇并浓缩,得到相对密度为1.10(80℃测定)的清膏。板蓝根等其余原料药,加水煎煮三次(同时收集挥发油),第一次1小时,第2、3次各0.5小时,滤过,滤液浓缩,得到相对密度为1.16的清膏。取上述两种清膏,加乳糖、环拉酸钠适量,制成乳糖型颗粒,或加入糊精、环拉酸钠适量,制成无糖型颗粒,再加入上述收集的挥发油和食用香料适量,混匀,即得;或取上述两种清膏混合均匀,浓缩,得到相对密度为1.30的清膏,取清膏,加蔗糖粉适量,制成颗粒,干燥,加入上述收集的挥发油和食用香料适量,混匀,制成含糖型颗粒。
上述制备方法中的原料药还可以与石菖蒲、郁金组合,或者进一步组合、鸦胆子、穿心莲、蒲公英、薄荷、桔梗或甘草,其制备方法为:
取以上板蓝根、连翘、广藿香、知母、芦根、石膏、石菖蒲和郁金等处方量。首先将知母碎成最粗粉,加80%~95%乙醇加热回流提取3次,每次3小时,滤过,滤液减压回收乙醇并浓缩,得到相对密度为1.10(80℃测定)的清膏。板蓝根等加水煎煮三次(同时收集挥发油),第一次1小时,第2、3次各0.5小时,滤过,滤液浓缩,得到相对密度为1.16的清膏。取上述两种清膏,加乳糖、环拉酸钠适量,制成乳糖型颗粒,或加入糊精、环拉酸钠适量,制成无糖型颗粒,再加入上述收集的挥发油和食用香料适量,混匀,即得;或取上述两种清膏混合均匀,浓缩,得到相对密度为1.30的清膏,取清膏,加蔗糖粉适量,制成颗粒,干燥,加入上述收集的挥发油和食用香料适量,混匀,制成含糖型颗粒。
本发明由板蓝根、连翘、石膏、芦根、地黄、广藿香、石菖蒲、郁金和知母组成的药物组合物的制备方法包括以下步骤:
取以上九味处方量。首先将知母粉碎成最粗粉,加80%~95%乙醇加热回流提取3次,每次3小时,滤过,滤液减压回收乙醇并浓缩,得到相对密度为1.10(50℃测定)的清膏。板蓝根等8味,加水煎煮三次(同时收集挥发油),第一次1小时,第2、3次各0.5小时,滤过,滤液浓缩,得到相对密度为1.16(50℃测定)的清膏。取上述两种清膏,加乳糖、环拉酸钠适量,制成乳糖型颗粒,或加入糊精、环拉酸钠适量,制成无糖型颗粒,再加入上述收集的挥发油和食用香料适量,混匀,即得;或取上述两种清膏混合均匀,浓缩,得到相对密度为1.28~1.30(55-60℃)的清膏,取清膏,加蔗糖粉适量,制成颗粒,干燥,加入上述收集的挥发油和食用香料适量,混匀,制成含糖型颗粒。
本发明的药物组合物中可以加入一种或多种药学上可接受的载体,如制备不同剂型时所需的各种常规辅料:稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等。
本发明的药物组合物可通过口服、注射或粘膜给药,可以制成片剂、胶囊、粉剂、颗粒、锭剂、栓剂,或口服液或无菌胃肠外悬液液体制剂等多种药物形式,还有大或小容量注射剂、冻干粉针或无菌粉分装剂等针剂形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。
本发明的药物组合物可以饲料添加剂的形式加入到猪类饲料中,提高猪类预防禽流感的能力。
本发明的药物组合物或添加剂,其有效用量为20-80mg/kg体重·天;优选剂量为30-65mg/kg体重·天。
本发明的药物组合物以天然植物作为原料药,对猪流感病毒具有明显的抑制作用,制备成药物或添加剂,具有毒性小、作用强、安全有效等优点,为猪流感病毒的防治开辟新的途径,具有重要的社会价值、经济价值和广阔的应用前景。
本发明所述猪流感为甲型猪流感,所述甲型猪流感是H1N1引起的疾病。优选的是,所述猪流感为人感染猪流感或动物感染猪流感。
附图说明
以下,结合附图来详细说明本发明的实施例,其中:
图1为实施例29中在进行中药组合物抗猪流感病毒体外细胞学实验研究时,连续三天观察细胞的病理变化中第二天的照片。其中A为10mg实验组,说明病毒被大量杀死;B为5mg实验组说明,部分病毒被杀死;C为无病毒对照组;D为达菲10umol/ml对照组。
具体实施方式
以下通过实施例来进一步阐明本发明的药物组合物相比已有的抗猪流感药物具有的有益效果。
实施例1-26进一步阐述本发明药物各种实施方式的制备方法。
实施例1:制备本发明药物组合物的大容量注射液
取板蓝根1000g、连翘550g、石膏250g、芦根200g、地黄300g、广藿香300g、石菖蒲280g、郁金180g、知母180g,加工成药材饮片,加入原料药8倍量的水,浸泡3小时后,煎煮提取2次,每次1小时,合并提取液,滤过,减压浓缩至65℃下相对密度为1.25,冷却;加乙醇使含醇量至70%,静置;取上清液,回收并除尽乙醇,浓缩至65℃下相对密度为1.15;用2倍量醋酸乙酯逆流萃取,合并酯提液,回收并除尽醋酸乙酯,加全量50%注射用水,煮沸,冷却,过滤,补加适量注射用水,加入0.08%吐温-80,搅匀,用40%NaOH溶液调pH至8.0,加入氯化钠搅拌溶解,加全量注射用水使成等渗溶液,最后用0.22μm的微孔滤膜滤过,灌封,灭菌,灯检,包装。
实施例2:制备本发明药物组合物的小容量注射液
取板蓝根700g、连翘350g、石膏350g、芦根300g、地黄300g、广藿香50g、石菖蒲30g、郁金30g、知母30g,加水煎煮,过滤,减压浓缩滤液,加入乙醇静置,过滤,减压浓缩至9g药物/ml,加水稀释,冷藏,过滤,减压浓缩,用大孔树脂进行分离,依次用水、NaOH溶液和浓度为35wt%的乙醇淋洗,然后浓度为75wt%的乙醇液洗脱,收集洗脱液;用水稀释的洗脱液中加入L-精氨酸,调节pH至7.5,加入活性炭,加热过滤脱炭,加入与洗脱液等体积的水稀释,加入L-精氨酸使其浓度为总重量的4wt%,即得。
实施例3制备本发明药物组合物的20ml冻干粉针剂
取板蓝根300g、连翘100g、石膏450g、芦根80g、地黄150g、广藿香250g、石菖蒲300g、郁金250g、知母600g,加入注射用水3200ml浸泡1小时,加入6400ml注射用水煎煮二次,每次1.5小时,过滤,合并滤液,得到提取组合物。取提取组合物10g,加注射用水适量使其溶解,加入氯化钠2.25g,用注射用水调整体积至250ml,加入适量注射用炭,煮沸20分钟,放冷,滤过,消毒,按1ml体积分灌于低硼玻璃安瓿瓶中,冷却干燥,即得冻干粉针剂样品。
实施例4制备本发明药物组合物的小容量注射液
取板蓝根100g、连翘50g、石膏850g、芦根300g、地黄80g、广藿香800g、石菖蒲80g、郁金80g、知母144g,加水煎煮,过滤,减压浓缩滤液,加入乙醇静置,过滤,减压浓缩至11g药物/ml,加水稀释,冷藏,过滤,减压浓缩,用大孔树脂进行分离,依次用水、NaOH溶液和浓度为55wt%的乙醇淋洗,然后浓度为65wt%的乙醇液洗脱,收集洗脱液;用水稀释的洗脱液中加入L-精氨酸,调节pH至7.0,加入活性炭,加热过滤脱炭,加入与洗脱液等体积的水稀释,即得。
实施例5:制备本发明药物组合物的颗粒剂
取板蓝根164g、连翘650g、石膏70g、芦根900g、地黄124g、广藿香50g、石菖蒲90g、郁金100g、知母50g,加70wt.%乙醇于多功能提取罐中,浸泡过夜。回流提取二次,每次1.5小时,过滤得药渣I和药液I,药液I置于减压浓缩锅中,减压回收至无乙醇味,并浓缩成稠浸膏。
将淀粉烘干,过筛,甘露醇过筛,备用。称取500g的浸膏与甘露醇500g、淀粉150g混合均匀,于颗粒机上用12目不锈钢筛网制粒,沸腾床干燥,12目筛整粒,测定颗粒的含量和水分,分装,每袋装7g,密封,于阴凉干燥处保存
实施例6:制备本发明药物组合物的片剂
取板蓝根110g、连翘100g、石膏550g、芦根124g、地黄800g、广藿香120g、石菖蒲80g、郁金100g、知母300g,加入注射用水3200ml浸泡1小时,加入3200ml注射用水煎煮二次,每次1小时,过滤,弃除药渣,将置三效浓缩器中,浓缩至比重1.08(70℃)时停止浓缩,放冷至室温,缓慢加入95wt.%乙醇,使乙醇浓度达50wt.%,放置过夜,抽取上清液,弃去沉淀物。浓缩上清液得浓缩液,加入填充剂200g,混合均匀;将混合物置制粒机中,加入30wt.%酒精60ml,制粒,干燥,即可。
2.取维生素50克,加入填充剂120g,混合均匀;将混合物置制粒机中,加入6wt.%粘合剂35ml,制粒,干燥。
3.将两组混合均匀,测含量,33冲旋转压片机压片,分装,即可。
实施例7:制备本发明药物组合物的片剂
取板蓝根642.9g、连翘232.1g、石膏285.7g、知母125g、芦根303.6g、地黄160.7g、广藿香125g、石菖蒲125g、郁金125g。首先将知母粉碎成最粗粉,加95%乙醇加热回流提取3次,每次3小时,滤过,滤液减压回收乙醇并浓缩,得到相对密度为1.10(50℃测定)的清膏。板蓝根等8味,加水煎煮三次(同时收集挥发油),第一次1小时,第2、3次各0.5小时,滤过,滤液浓缩,得到相对密度为1.16(50℃测定)的清膏。取上述两种清膏,加乳糖、环拉酸钠适量,制成1000g乳糖型颗粒,或加入糊精、环拉酸钠适量,制成1000g无糖型颗粒,再加入上述收集的挥发油和食用香料适量,混匀,即得;或取上述两种清膏混合均匀,浓缩,得到相对密度为1.30(60℃)的清膏,取清膏,加蔗糖粉适量,制成颗粒,干燥,加入上述收集的挥发油和食用香料适量,混匀,制成含糖型颗粒3000g,即得。
实施例8:制备本发明药物组合物的胶囊剂
取板蓝根124g、连翘800g、石膏70g、芦根60g、地黄300g、广藿香50g、石菖蒲600g、郁金400g、知母80g,加入注射用水3200ml浸泡1小时,加入7200ml注射用水煎煮二次,每次1小时,过滤,合并滤液,减压回收至无乙醇味,并浓缩成稠浸膏,相对比重为1.0(60℃测),置于真空干燥箱中,70℃减压干燥36小时,取出,粉碎,过60-80目筛;将药粉与辅料混合均匀,过筛,制粒,烘干,20目筛整粒,加入硬脂酸镁混合均匀,填充胶囊,即得。
实施例9:制备本发明药物组合物的胶囊剂
取板蓝根100g、连翘50g、石膏70g、芦根864g、知母600g、广藿香800g,加入注射用水3200ml浸泡1小时,加入3200ml注射用水煎煮二次,每次2.5小时,过滤,合并滤液,减压回收至无乙醇味,并浓缩成稠浸膏,相对比重为1.30,置于真空干燥箱中,80℃减压干燥48-96小时,取出,粉碎,过60-80目筛;将药粉与辅料混合均匀,过60目筛,制粒,烘干,整粒,加入硬脂酸镁混合均匀,填充胶囊,即得。
实施例10:制备含有本发明药物组合物的乳制品(保健食品)
取板蓝根500g、连翘20g、石膏600g、芦根20g、地黄500g、广藿香344g、石菖蒲200g、郁金100g、知母200g,加入注射用水3200ml浸泡1小时,加入3200ml注射用水煎煮二次,每次2.5小时,过滤,合并滤液,减压回收至无乙醇味,并浓缩至比重1.08。
牛乳原料经验收和过滤净化及标准化处理(脱脂则免)后,在每100克乳液(加含适量调味剂)中加入0.5-6毫克的浓缩液,经过滤、预热(控温≤115℃)杀菌、均质(脱脂则免),至冷却后,再接种发酵菌种(凝固型先灌装)、培养发酵后,将凝酸乳破碎(凝固型则免)冷却,经灌装(凝固型则免)检验后成品。
实施例11:制备含有本发明药物组合物的饮料(食品)
(1)取板蓝根300g、连翘550g、石膏70g、芦根300g、广藿香422g、知母500g反复淘洗,捣碎,置于碱液中,碱液是占药物重量2%~3%的NaOH溶液和0.3%的六偏磷酸钠溶液,在85℃温度下加热5分钟,捞出,流水冲漂至药物表层呈中性;(2)将得到的药物切成细小片状,置于电动捣碎机中捣细呈浆状物,置于不锈钢器皿中,加入浆状物重量2%的食用磷酸,在75℃恒温水浴中加热70分钟,恒温时应不断搅拌浆状物;(3)添加食用小苏打将浆状物中和呈中性,中和时,应用水冷却,并不停搅拌,浆状物过滤,压榨至干;(4)滤液中加入液重6%粉状活性炭,在88℃的恒温水浴上保温120分钟,过滤,滤液为清亮的略带淡黄色或褐色,调配、包装杀菌,按重量比药物水解液∶磷酸∶柠檬酸为100∶3∶4配料液,将料液中加入水,使料液和水的重量比为1∶50,混匀,装瓶,压盖,然后进行巴氏灭菌。
实施例12:制备含有本发明药物组合物的兽药
取板蓝根600g、连翘400g、石膏300g、芦根600g、地黄100g、广藿香300g、石菖蒲200g、郁金100g、知母100g,将药材粉碎、过80目筛、混匀,得到散剂,分包装即可。
实施例13:制备本发明药物组合物的注射用预防性药物
取板蓝根1000g、连翘250g、石膏350g、芦根384g、地黄70g、广藿香200g、石菖蒲100g、郁金100g、知母30g加水煎煮,过滤,减压浓缩滤液,加入乙醇静置,过滤,减压浓缩至11g药物/ml,加水稀释,冷藏,过滤,减压浓缩,用大孔树脂进行分离,依次用水、NaOH溶液和浓度为55wt%的乙醇淋洗,然后浓度为65wt%的乙醇液洗脱,收集洗脱液;用水稀释的洗脱液中加入L-精氨酸,调节pH至7.0,加入活性炭,加热过滤脱炭,然后加入与洗脱液等体积的生理盐水稀释,即得所述注射用预防性药物。
实施例14:制备本发明药物组合物的颗粒剂
取板蓝根500g、连翘584g、知母600g、广藿香800g,加70wt.%乙醇于多功能提取罐中,浸泡过夜。回流提取二次,每次1.5小时,过滤得药渣I和药液I,药液I置于减压浓缩锅中,减压回收至无乙醇味,并浓缩成稠浸膏。
将淀粉烘干,过筛,甘露醇过筛,备用。称取500g的浸膏与甘露醇500g、淀粉150g混合均匀,于颗粒机上用12目不锈钢筛网制粒,沸腾床干燥,12目筛整粒,测定颗粒的含量和水分,分装,每袋装7g,密封,于阴凉干燥处保存。
实施例15:制备本发明药物组合物的颗粒剂
取板蓝根1084g、连翘850g、知母300g、广藿香50g药材加70wt.%乙醇于多功能提取罐中,浸泡过夜。回流提取二次,每次1.5小时,过滤得药渣I和药液I,药液I置于减压浓缩锅中,减压回收至无乙醇味,并浓缩成稠浸膏。
将淀粉烘干,过筛,甘露醇过筛,备用。称取500g的浸膏与甘露醇500g、淀粉150g混合均匀,于颗粒机上用12目不锈钢筛网制粒,沸腾床干燥,12目筛整粒,测定颗粒的含量和水分,分装,每袋装7g,密封,于阴凉干燥处保存。
实施例16:制备本发明药物组合物的胶囊剂
取板蓝根1500g、连翘50g、知母400g、广藿香334g、穿心莲200g加入注射用水3200ml浸泡1小时,加入3200ml注射用水煎煮二次,每次2.5小时,过滤,合并滤液,减压回收至无乙醇味,并浓缩成稠浸膏,相对比重为1.30,置于真空干燥箱中,80℃减压干燥48-96小时,取出,粉碎,过60-80目筛;将药粉与辅料混合均匀,过60目筛,制粒,烘干,整粒,加入硬脂酸镁混合均匀,填充胶囊,即得。
实施例17:制备本发明药物组合物的注射用预防性药物
取板蓝根1000g、连翘750g、知母400g、广藿香600g、青黛400g、蒲公英120g加水煎煮,过滤,减压浓缩滤液,加入乙醇静置,过滤,减压浓缩至11g药物/ml,加水稀释,冷藏,过滤,减压浓缩,用大孔树脂进行分离,依次用水、NaOH溶液和浓度为55wt%的乙醇淋洗,然后浓度为65wt%的乙醇液洗脱,收集洗脱液;用水稀释的洗脱液中加入L-精氨酸,调节pH至7.0,加入活性炭,加热过滤脱炭,然后加入与洗脱液等体积的生理盐水稀释,即得所述预防性药物。
实施例18:制备本发明药物组合物的胶囊剂
取板蓝根500g、连翘550g、石膏400g、芦根200g、知母300g、广藿香500g、穿心莲500g加入注射用水3200ml浸泡1小时,加入3200ml注射用水煎煮二次,每次2.5小时,过滤,合并滤液,减压回收至无乙醇味,并浓缩成稠浸膏,相对比重为1.30,置于真空干燥箱中,80℃减压干燥48-96小时,取出,粉碎,过60-80目筛;将药粉与辅料混合均匀,过60目筛,制粒,烘干,整粒,加入硬脂酸镁混合均匀,填充胶囊,即得。
实施例19:制备本发明药物组合物的胶囊剂
取板蓝根300g、连翘250g、石膏200g、芦根700g、知母250g、广藿香400g、鸦胆子400g加入注射用水3200ml浸泡1小时,加入3200ml注射用水煎煮二次,每次2.5小时,过滤,合并滤液,减压回收至无乙醇味,并浓缩成稠浸膏,相对比重为1.20,置于真空干燥箱中,80℃减压干燥48-96小时,取出,粉碎,过60-80目筛;将药粉与辅料混合均匀,过60目筛,制粒,烘干,整粒,加入硬脂酸镁混合均匀,填充胶囊,即得。
实施例20:制备本发明药物组合物的糖浆剂
取板蓝根300g、连翘250g、石膏200g、芦根500g、知母250g、广藿香400g、桔梗380g,甘草400g用水蒸气蒸馏法提取挥发油后(挥发油备用)。加药材量6~8倍的水煎煮3次,每次1h,合并3次药液,过滤,真空减压(40℃)浓缩至适量,冷沉24h后,取上清液加入挥发油、单糖浆、防腐剂(苯甲酸钠)、蒸馏水至1000ml,搅拌均匀,分装,流通蒸汽消毒30min即可。
实施例21:制备含有本发明药物组合物的兽药
取板蓝根1500g、连翘400g、广藿香554g、知母30g,将药材粉碎、过80目筛、混匀,得到散剂,分包装即可。
实施例22:制备含有本发明药物组合物的兽药
取板蓝根100g、连翘850g、广藿香800g、知母600g,将药材粉碎、过80目筛、混匀,得到散剂,分包装即可。
实施例23:制备本发明药物组合物的胶囊剂
取板蓝根100g、连翘850g、石膏570g、芦根364g、知母300g、广藿香300g,加入注射用水3200ml浸泡1小时,加入3200ml注射用水煎煮二次,每次2.5小时,过滤,合并滤液,减压回收至无乙醇味,并浓缩成稠浸膏,相对比重为1.30,置于真空干燥箱中,80℃减压干燥48-96小时,取出,粉碎,过60-80目筛;将药粉与辅料混合均匀,过60目筛,制粒,烘干,整粒,加入硬脂酸镁混合均匀,填充胶囊,即得。
实施例24:制备本发明药物组合物的颗粒剂
取板蓝根1000g、连翘700g、知母584g、广藿香200g,加70wt.%乙醇于多功能提取罐中,浸泡过夜。回流提取二次,每次1.5小时,过滤得药渣I和药液I,药液I置于减压浓缩锅中,减压回收至无乙醇味,并浓缩成稠浸膏。
将淀粉烘干,过筛,甘露醇过筛,备用。称取500g的浸膏与甘露醇500g、淀粉150g混合均匀,于颗粒机上用12目不锈钢筛网制粒,沸腾床干燥,12目筛整粒,测定颗粒的含量和水分,分装,每袋装7g,密封,于阴凉干燥处保存。
实施例25:制备本发明药物组合物的片剂
取板蓝根300g、连翘250g、广藿香600g、知母500g,加入注射用水3200ml浸泡1小时,加入3200ml注射用水煎煮二次,每次1小时,过滤,弃除药渣,将置三效浓缩器中,浓缩至比重1.08(70℃)时停止浓缩,放冷至室温,缓慢加入计算量之95%乙醇,使乙醇浓度达50%,放置过夜,抽取上清液,弃去沉淀物。浓缩上清液得浓缩液,加入填充剂200g,混合均匀;将混合物置制粒机中,加入30wt.%酒精60ml,制粒,干燥,即可。
2.取维生素150克,加入填充剂684g,混合均匀;将混合物置制粒机中,加入6wt.%粘合剂35ml,制粒,干燥,即可。
3.将两组混合均匀,测含量,33冲旋转压片机压片,分装,即可。
实施例26:制备本发明药物组合物的颗粒剂
取板蓝根1000g、连翘400g、知母600g、广藿香200g。首先将知母粉碎成最粗粉,加95%乙醇加热回流提取3次,每次3小时,滤过,滤液减压回收乙醇并浓缩,得到相对密度为1.10(50℃测定)的清膏。板蓝根等8味,加水煎煮三次(同时收集挥发油),第一次1小时,第2、3次各0.5小时,滤过,滤液浓缩,得到相对密度为1.16(50℃测定)的清膏。取上述两种清膏,加乳糖、环拉酸钠适量,制成1000g乳糖型颗粒,或加入糊精、环拉酸钠适量,制成1000g无糖型颗粒,再加入上述收集的挥发油和食用香料适量,混匀,即得;或取上述两种清膏混合均匀,浓缩,得到相对密度为1.30(60℃)的清膏,取清膏,加蔗糖粉适量,制成颗粒,干燥,加入上述收集的挥发油和食用香料适量,混匀,制成含糖型颗粒3000g,即得。
实施例27-29包括本发明的药物组合物的细胞学及动物学试验结果
实施例27:本发明的药物组合物对感染猪流感病毒的鸡的保护效果
试验用鸡为50天龄优质黄鸡,中山大学动物试验鸡场购进。本发明的药物组合物是本申请中的实施例5制备的颗粒剂溶于注射用水制成的,由丽珠集团提供;对照药物之一金刚乙胺,购于浙江裕康制药有限公司,之二依照中国专利200510011432.3制备。病毒株为:H1N1血清亚型猪流感病毒(1.0X10-6)。
试验方法:
取50天龄优质黄鸡190只,随机分为5组,正常对照组30只,其余40只。将含猪流感病毒的鸡胚尿囊液席稀释为0.5X10-5,每只鸡腹部注射0.2ml接种。在接种AIV当天各组给药,健康对照组和感染对照组喂生理盐水,每天喂一次,连续喂天。健康对照组为A组,本发明的药物组合物组(每天10mg)为B组,对照药物之一金刚乙胺(每天10mg)为C组,依照中国专利200510011432.3方案制备对照药物之二(每天10mg)为D组,感染对照组为E组。结果见表1:
表1
从表1可以看出,本发明的药物组合物对感染禽流感病毒的鸡有很好的保护效果,较依照中国专利200510011432.3和传统治疗药物金刚乙胺有更好的效果.
实施例28:治疗H1N1甲型流感病毒引起的病毒性肺炎的实验
取哈尔滨医科大学实验动物室提供的昆明小白鼠,注H1型病毒制成小鼠模型,实验组中药注射液取处方量。
试验方法:
实验组及对照组每组有17只小鼠。对照1组以15ml/kg生理盐水腹腔内注射;对照2组以15ml/kg一般抗病毒药物莪术油注射液腹腔内注射;对照3组以15ml/kg一般治疗肺炎的双苏连注射液腹腔内注射;实验1组注射板鱼腥草、忍冬藤、板蓝根、贯众为原料药制成的注射剂,腹腔内注射15ml/kg;实验2组注射鱼腥草、忍冬藤、板蓝根、贯众、甘草为原料药制成的注射剂,腹腔内注射15ml/kg;实验3组注射鱼腥草、忍冬藤、板蓝根、贯众、山豆根、白芷为原料药制成的注射剂,腹腔内注射15ml/kg;均连用10天。各组小鼠在用药11天后全部处死采集标本进行指标检测,结果见表2:
表2
组别 | 显效 | 有效 | 无效 | 死亡 |
实验1组 | 9 | 4 | 4 | 3 |
实验2组 | 8 | 4 | 5 | 3 |
实验3组 | 12 | 4 | 1 | 1 |
对照1组 | 0 | 2 | 15 | 13 |
对照2组 | 3 | 5 | 9 | 8 |
对照3组 | 2 | 3 | 12 | 10 |
注:显效是指病情明显好转,体温正常,炎症消除;有效是指病情好转,体温正常,炎症略减少,咳嗽减轻;无效是指病情无好转或加重。
表2显示与对照1、2、3组相比,实验组1、2、3组中使用的药物组合物有明显改善肺部循环,清除血小板聚集,消除肺部炎症,修复肺损伤,治疗H1N1甲型流感病毒的作用,其中,实验3组中使用的药物组合物比对照1、2组中使用的药物组合物疗效更好。
实施例29:本发明的中药组合物抗猪流感病毒体外细胞学实验研究
一、材料
1、实验药物:
KBD-GB(按实施例7制备):4.7g生药/ml浸膏
对照药物:达菲(Tamiflu)原料(磷酸奥司他韦Oseltamivir phospha te),Roche公司提供。
2、细胞:MDCK细胞(狗肾细胞),中国香港大学医学院微生物系。
3、病毒:A/California/4/2009,A/Hong Kong/xx/2008中国香港大学医学院微生物系。
二、方法
1.细胞毒性测定:按Mosmann法常规(1983年),以确定50%细胞出现毒性病变的药物浓度(CC50)。
a.药物的准备:将浸膏稀释于1x MEM培养液,终浓度为200g/ml,充分混匀药液后离心,2000转/分钟,5分钟,取上清为检测药物。
b.准备24孔MDCK板,MDCK细胞饱和度为70-80%,于37°5%CO2孵箱培养。
c.将200g/ml药液对倍稀释成100mg/ml,50mg/ml,25mg/ml,12.5mg/ml,6.25mg/ml。
d.分别将每个浓度的药液加入MDCK板上,每孔加500微升后,将MDCK细胞放回37°,5%CO2孵箱
e.连续两天观察MDCK细胞的生长状态,以确定检测药物的起始浓度。
f.我们以10mg/ml,5mg/ml两个不同浓度的药物作为我们的实验药物浓度。
2.抗病毒实验:
a.根据病毒TCID50的滴度,准备100TCID5的病毒。
b.稀释5ml两个不同浓度的药物10mg/ml,5mg/ml,Tamiflu的浓度为100μmol/ml、10μmol/ml两个浓度。
c.取1毫升病毒与1毫升各浓度的药物充分混匀,室温下孵化30分钟。
d.将病毒与药物的混合液加入MDCK细胞板,每孔120微升,每个浓度加入2孔,然后移入37℃,5%CO2孵箱孵化1小时。
e.1小时后移去病毒与药物的混合液,再加入不同浓度的药物,每孔1毫升,每个浓度加入2孔,然后把MDCK细胞板移入37℃,5%CO2孵箱孵化。
f.连续三天观察细胞的病理变化,第二,三天拍照,及取上清做REAL-TIME PCR检测。
实验结果
结论:我们的实验证实,实施例7的KBD-GB浸膏在第二天可以抑制病毒的繁殖,而在第三天后基本无效,效果等同于达菲。
Claims (18)
1.一种具有预防和治疗猪流感效果的药物组合物,其包含活性成分和/或药学上可接受的载体,其特征在于所述的活性成分主要由以下原料药制成:板蓝根4.7wt.%-70.0wt.%、连翘2.3wt.%-39.7wt.%、广藿香2.3wt.%-37.3wt.%、知母1.4wt.%-28.0wt.%和/或其它清热解毒类中药。
2.根据权利要求1中所述的药物组合物,其特征在于所述的其它清热解毒类中药是芦根、石膏、穿心莲、蒲公英、青黛、红藤和甘草。
3.根据权利要求1中所述的药物组合物,其特征在于所述的活性成分主要由以下原料药制成:板蓝根4.7wt.%-70.0wt.%、连翘2.3wt.%-39.7wt.%、广藿香2.3wt.%-37.3wt.%、知母1.4wt.%-28.0wt.%。
4.一种具有预防和治疗猪流感效果的药物组合物,其包含活性成分和/或药学上可接受的载体,其特征在于所述的活性成分主要由以下原料药制成:板蓝根4.7wt.%-46.7wt.%、连翘2.3wt.%-39.7wt.%、石膏3.3wt.%-39.7wt.%、芦根2.8wt.%-42.0wt.%、广藿香2.3wt.%-37.3wt.%、知母1.4wt.%-28.0wt.%和/或其它清热解毒类中药。
5.根据权利要求4中所述的药物组合物,其特征在于所述的其它清热解毒类中药是石菖蒲、郁金、鸦胆子、穿心莲、蒲公英、薄荷、桔梗和甘草。
6.根据权利要求4中所述的药物组合物,其特征在于所述的活性成分主要由以下原料药制成:板蓝根4.7wt.%-46.7wt.%、连翘2.3wt.%-39.7wt.%、石膏3.3wt.%-39.7wt.%、芦根2.8wt.%-42.0wt.%、广藿香2.3wt.%-37.3wt.%、知母1.4wt.%-28.0wt.%。
7.一种具有预防和治疗猪流感效果的药物组合物,其包含活性成分和/或药学上可接受的载体,其特征在于所述的活性成分主要由以下原料药制成:板蓝根4.7wt.%-46.7wt.%、连翘2.3wt.%-39.7wt.%、石膏3.3wt.%-39.7wt.%、芦根2.8wt.%-42.0wt.%、地黄3.3wt.%-37.3wt.%、广藿香2.3wt.%-37.3wt.%、石菖蒲1.4wt.%-28.0wt.%、郁金1.4wt.%-28.0wt.%、知母1.4wt.%-28.0wt.%。
8.根据权利要求7中所述的药物组合物,其特征在于所述的活性成分主要由以下原料药制成:板蓝根14.0wt.%-37.3wt.%、连翘4.7wt.%-25.7wt.%、石膏3.3wt.%-25.7wt.%、芦根3.7wt.%-25.7wt.%、地黄3.7wt.%-14.0wt.%、广藿香3.7wt.%-11.7wt.%、石菖蒲3.7wt.%-14.0wt.%、郁金3.7wt.%-14.0wt.%、知母3.7wt.%-14.0wt.%。
9.根据权利要求8中所述的药物组合物,其特征在于所述的活性成分主要由以下原料药制成:板蓝根30.1wt.%、连翘10.8wt.%、石膏13.4wt.%、知母5.8wt.%、芦根14.2wt.%、地黄7.5wt.%、广藿香6.6wt.%、石菖蒲5.8wt.%、郁金5.8wt.%。
10.根据权利要求1-9中所述的药物组合物,其特征在于所述的药物组合物是任何一种药剂学上所说的剂型。
11.根据权利要求10中所述的药物组合物,其特征在于所说的药物组合物是颗粒剂。
12.一种制备权利要求1-11中所述的药物组合物的方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)称取各原料药备用;
(2)将知母粉碎成最粗粉,加入80%~95%乙醇,加热回流提取3次,每次3小时,滤过,滤液减压回收乙醇并浓缩,得到50℃时相对密度为1.10的清膏A;
(3)其余原料药加水煎煮三次,同时收集挥发油,第一次1小时,第2、3次各0.5小时,滤过,滤液浓缩,得到相对密度为1.16的清膏B;
(4)将清膏A和B混合,加入辅料即得。
13.权利要求1-11中所述的药物组合物在制备预防或治疗猪流感的药物中的应用。
14.权利要求1-11中所述的药物组合物在制备预防或治疗猪流感的保健品中的应用。
15.根据权利要求13或14中所述的应用,其特征在于所述猪流感为甲型猪流感。
16.根据权利要求15中所述的应用,其特征在于所述甲型猪流感是H1N1引起的疾病。
17.根据权利要求15中所述的应用,其特征在于所述猪流感为人感染猪流感。
18.根据权利要求13中所述的应用,其特征在于所述猪流感为动物感染猪流感。
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