CN101906099A - 一种埃博霉素d-内酰胺衍生物化学合成方法 - Google Patents
一种埃博霉素d-内酰胺衍生物化学合成方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101906099A CN101906099A CN 201010227784 CN201010227784A CN101906099A CN 101906099 A CN101906099 A CN 101906099A CN 201010227784 CN201010227784 CN 201010227784 CN 201010227784 A CN201010227784 A CN 201010227784A CN 101906099 A CN101906099 A CN 101906099A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- tetrahydrofuran
- thf
- time
- carry out
- ethyl acetate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Abstract
本发明公开了一种埃博霉素D-内酰胺衍生物化学合成方法，它包括以下步骤：它采用埃博霉素B、叠氮钠作为起始原料，选择一种稀有金属化合物为催化剂，进行开环氮化反应生成氮酸，再进行水解反应，生成氨基酸，再进行环合反应生成埃博霉素B内酰胺衍生物，再进行还原反应，得到埃博霉素D-内酰胺衍生物。本发明可以有效地从埃博霉素中合成埃博霉素D-内酰胺衍生物。
Description
技术领域
本发明提供了一种埃博霉素D-内酰胺衍生物化学合成方法。
背景技术
埃博霉素(epothilone)是一类大环内酯类化合物，由德国国家生物技术中心(GBF)的G.Hö；fle等人于1993年首次报道。从粘细菌亚目的纤维堆囊菌菌株发酵液中可以分离埃博霉素，其主要组分为Epothilone A和B。目前还没有出现埃博霉素D-内酰胺衍生物的合成方法，这样使得埃博霉素得不到充分的利用。
发明内容
本发明提供了一种埃博霉素D-内酰胺衍生物化学合成方法，它有效地从埃博霉素中合成埃博霉素D-内酰胺衍生物。
本发明采用了以下技术方案：一种埃博霉素D-内酰胺衍生物化学合成方法，它包括以下步骤：步骤一，开环氮化反应：在氮气保护下，反应釜中投入四氢呋喃和水的混合液、埃博霉素B和催化剂，然后投入叠氮钠，在搅拌下，慢慢升温、搅拌，使得溶液变成黄色，再用乙酸乙酯进行萃取，利用有机相用饱和盐水进行洗涤，用无水硫酸钠进行干燥，真空浓缩，得到氮酸；步骤二，水解反应：在氩气保护下，反应釜中投入四氢呋喃、步骤一中得到的氮酸和三苯膦进行第一次搅拌升温，再进行第一次冷却，滴加25％氢氧化铵溶液，滴加完毕后进行第二次升温和搅拌，进行第二次冷却至室温，最后采用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，真空浓缩，得到氨基酸；步骤三，环合反应：在氩气保护下，反应釜中投入四氢呋喃和步骤二中得到的氨基酸进行搅拌，再投入碳酸钠进行降温，降温后缓慢滴加二苯基磷酰基叠氮化物后进行保温搅拌，然后将配制的25％磷酸二氢钠溶液冷却后加入到反应釜中，继续搅拌，最后再加入乙酸乙酯进行萃取，采用有机相无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得埃博霉素B内酰胺衍生物；步骤四，还原反应：在氩气保护下，在反应釜中投入四氢呋喃和埃博霉素B内酰胺进行搅拌冷却，再缓慢滴加四氢化铝锂和四氢呋喃的混合溶液进行反应，滴加完毕后继续搅拌，再自然升温至常温，投入10％氯化钾溶液搅拌，最后再采用乙酸乙酯进行萃取，有机相无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到埃博霉素D内酰胺衍生物；步骤五，纯化：在反应釜中投入第四步得到的埃博霉素D内酰胺衍生物溶解在四氢呋喃中，用饱和盐水清洗搅拌，再依次采用乙酸乙酯萃取进行萃取、采用无水硫酸钠干燥和采用减压浓缩，最后经过两次纯化后得到纯埃博霉素D内酰胺衍生物。
所述的步骤一中四氢呋喃和水的混合液为800ml，四氢呋喃与水的体积比为9∶1，埃博霉素B为25g，催化剂为四(三苯基膦)合钯，四(三苯基膦)合钯为3.5g，叠氮钠为4.76g，投入叠氮钠后搅拌升温至60℃，搅拌的时间为7小时，在搅拌的过程中跟踪TLC∶EtOAc/MSO＝1∶2，在萃取时进行三次萃取，每次采用250ml的乙酸乙酯进行萃取；在洗涤时进行2次洗涤，每次采用200ml的有机相用饱和盐水进行洗涤，最后得到的氮酸为17.1g。所述的步骤二中四氢呋喃为500ml，氮酸为17.1g，三苯膦为16.3g，第一次搅拌升温至50℃，搅拌的时间为18小时，第一次冷却至10℃以下，滴加25％氢氧化铵溶液为150ml，滴加时的温度控制在10℃以下，第二次升温至50℃，搅拌的时间为6小时，在萃取时进行三次萃取，每次采用100ml的乙酸乙酯进行萃取；在洗涤时进行2次洗涤，每次采用200ml的有机相用饱和盐水进行洗涤，最后得到的氨基酸为12.5g。所述的步骤三中四氢呋喃为500ml，氨基酸为12.5g，碳酸钠为15g，投入碳酸钠后降温至0℃，滴加的二苯基磷酰基叠氮化物为20ml，滴加时的温度控制在0℃以下，在滴加后搅拌的时间为24小时，配制的25％磷酸二氢钠溶液为200ml，磷酸二氢钠溶液冷却到0-3℃后加入到反应釜中继续搅拌的时间为2小时，乙酸乙酯的温度为0-3℃，在萃取时进行三次萃取，每次采用500ml的乙酸乙酯进行萃取，最后得到的埃博霉素B内酰胺衍生物为5.6g。所述的步骤四中四氢呋喃为300ml，埃博霉素B内酰胺衍生物为5.6g，搅拌冷却至5℃以下，滴加四氢化铝锂和四氢呋喃的混合溶液为50ml，其中四氢化铝锂为6.3g，在滴加时的温度控制在5℃以下，滴加完毕后继续搅拌12小时，氯化钾溶液为200ml，投入氯化钾溶液后搅拌的时间为半小时，在萃取时进行三次萃取，每次采用500ml的乙酸乙酯进行萃取，还原反应后得到的埃博霉素B内酰胺衍生物为4.2g。所述的步骤五中埃博霉素D内酰胺衍生物为4.2g，四氢呋喃为200ml，饱和盐水为200ml，清洗搅拌的时间为20分钟，在萃取时进行三次萃取，每次采用250ml的乙酸乙酯进行萃取，两次纯化的过程为：第一次色谱纯化，色谱纯化在10*80cm的二氧化硅上采用2-5％甲醇-氯仿进行梯度洗脱，第二次为制备型HPLC纯化，它采用6-55％甲醇-氯仿梯度洗脱，最后得到纯埃博霉素D内酰胺衍生物3.6g。
本发明具有以下有益效果：本发明不但可以采用生化的方法合成埃博霉素D-内酰胺衍生物，制备过程简单，成本低，而且制备的埃博霉素D-内酰胺衍生物对于人体肿瘤的异种移植有效，当每天给正常裸鼠腹膜内注射埃坡西龙B0.6mg/kg，小鼠7天内全部死亡，然而，腹膜内注射埃博霉素D 25mg/kg，小鼠全部存活，且埃博霉素D可导致肿瘤非常明显地减少，6个小鼠中有1个在35天后已查不到肿瘤，另外埃博霉素D在治疗的过程中毒性低，裸鼠试验再次证明，埃博霉素D对人肿瘤异种移植有效，这些肿瘤用紫杉醇是难以治疗的。
具体实施方式
本发明提供了一种埃博霉素D-内酰胺衍生物化学合成方法，它包括以下步骤：步骤一为开环氮化反应：在氮气保护下，反应釜中投入800ml混合液，四氢呋喃与水的体积比为9∶1)、埃博霉素B25g(5.76mmol)和3.5g(0.35mmol)四(三苯基膦)合钯，分批投入4.76g(8.64mmol)叠氮钠，在搅拌下，慢慢升温至60℃，搅拌7个小时，在搅拌过程中跟踪TLC∶EtOAc/MSO＝1∶2，使得反应状态为溶液变成黄色，再用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯分3次，每次250ml进行萃取，有机相用饱和盐水洗涤，洗涤时进行2次洗涤，每次采用200ml的有机相用饱和盐水进行洗涤，无水硫酸钠干燥，真空浓缩，得到氮酸17.1g；步骤二为水解反应：在氩气保护下，反应釜中投入四氢呋喃500ml、步骤一得到的氮酸17.1g和三苯膦16.3g，搅拌升温至50℃，搅拌18小时。再冷却至10℃以下，滴加25％氢氧化铵溶液150ml，温度控制在10℃以下，滴加完毕，再升温至50℃，搅拌6个小时后，冷却至室温，再用乙酸乙酯分3次，每次100ml进行萃取，有机相用饱和盐水洗涤，洗涤时进行2次洗涤，每次采用200ml的有机相用饱和盐水进行洗涤，无水硫酸钠干燥，真空浓缩，得到氨基酸12.5g；步骤三，环合反应：在氩气保护下，反应釜中投入四氢呋喃500ml、步骤二得到的氨基酸12.5g搅拌，再投入15g碳酸钠，降温至0℃。缓慢滴加二苯基磷酰基叠氮化物20ml(8.5mmol)，温度控制在0℃以下，保温搅拌24小时。配制25％磷酸二氢钠溶液200ml，冷却至0-3℃，加入到反应釜中，继续搅拌2小时，加入0-3℃乙酸乙酯进行萃取，乙酸乙酯分3次，每次500ml进行萃取，有机相无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到5.6g埃博霉素B内酰胺衍生物；步骤四，还原反应：在氩气保护下，在反应釜中投入四氢呋喃300ml、埃博霉素B内酰胺5.6g，搅拌冷却至5℃以下，缓慢滴加四氢化铝锂和四氢呋喃溶液50ml(其中氢化铝锂6.3g)，反应温度控制在5℃以下，滴加完毕后继续搅拌12小时，再自然升温至常温，投入10％氯化钾溶液200ml，搅拌半个小时，乙酸乙酯进行萃取，乙酸乙酯分3次，每次500ml进行萃取，有机相无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到4.2g埃博霉素D内酰胺衍生物；步骤五，纯化：在反应釜中投入第四步得的4.2g埃博霉素D内酰胺衍生物溶解在四氢呋喃200ml中，用饱和盐水200ml清洗搅拌20分钟清洗，乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯分3次，每次250ml进行萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，第一次色谱纯化，色谱纯化在10*80cm的二氧化硅上采用2-5％甲醇-氯仿进行梯度洗脱，第二次为制备型HPLC纯化，它采用6-55％甲醇-氯仿梯度洗脱，最后得到纯埃博霉素D内酰胺衍生物3.6g。
Claims (6)
1.一种埃博霉素D-内酰胺衍生物化学合成方法，它包括以下步骤：
步骤一，开环氮化反应：在氮气保护下，反应釜中投入四氢呋喃和水的混合液、埃博霉素B和催化剂，然后投入叠氮钠，在搅拌下，慢慢升温、搅拌，使得溶液变成黄色，再用乙酸乙酯进行萃取，利用有机相用饱和盐水进行洗涤，用无水硫酸钠进行干燥，真空浓缩，得到氮酸；
步骤二，水解反应：在氩气保护下，反应釜中投入四氢呋喃、步骤一中得到的氮酸和三苯膦进行第一次搅拌升温，再进行第一次冷却，滴加25％氢氧化铵溶液，滴加完毕后进行第二次升温和搅拌，进行第二次冷却至室温，最后采用乙酸乙酯萃取，有机相用饱和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，真空浓缩，得到氨基酸；
步骤三，环合反应：在氩气保护下，反应釜中投入四氢呋喃和步骤二中得到的氨基酸进行搅拌，再投入碳酸钠进行降温，降温后缓慢滴加二苯基磷酰基叠氮化物后进行保温搅拌，然后将配制的25％磷酸二氢钠溶液冷却后加入到反应釜中，继续搅拌，最后再加入乙酸乙酯进行萃取，采用有机相无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得埃博霉素B内酰胺衍生物；
步骤四，还原反应：在氩气保护下，在反应釜中投入四氢呋喃和埃博霉素B内酰胺进行搅拌冷却，再缓慢滴加四氢化铝锂和四氢呋喃的混合溶液进行反应，滴加完毕后继续搅拌，再自然升温至常温，投入10％氯化钾溶液搅拌，最后再采用乙酸乙酯进行萃取，有机相无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到埃博霉素D内酰胺衍生物；
步骤五，纯化：在反应釜中投入第四步得到的埃博霉素D内酰胺衍生物溶解在四氢呋喃中，用饱和盐水清洗搅拌，再依次采用乙酸乙酯萃取进行萃取、采用无水硫酸钠干燥和采用减压浓缩，最后经过两次纯化后得到纯埃博霉素D内酰胺衍生物。
2.根据权利要求1所述的埃博霉素D-内酰胺衍生物化学合成方法，其特征是所述的步骤一中四氢呋喃和水的混合液为800ml，四氢呋喃与水的体积比为9∶1，埃博霉素B为25g，催化剂为四(三苯基膦)合钯，四(三苯基膦)合钯为3.5g，叠氮钠为4.76g，投入叠氮钠后搅拌升温至60℃，搅拌的时间为7小时，在搅拌的过程中跟踪TLC∶EtOAc/MSO＝1∶2，在萃取时进行三次萃取，每次采用250ml的乙酸乙酯进行萃取；在洗涤时进行2次洗涤，每次采用200ml的有机相用饱和盐水进行洗涤，最后得到的氮酸为17.1g。
3.根据权利要求1所述的埃博霉素D-内酰胺衍生物化学合成方法，其特征是所述的步骤二中四氢呋喃为500ml，氮酸为17.1g，三苯膦为16.3g，第一次搅拌升温至50℃，搅拌的时间为18小时，第一次冷却至10℃以下，滴加25％氢氧化铵溶液为150ml，滴加时的温度控制在10℃以下，第二次升温至50℃，搅拌的时间为6小时，在萃取时进行三次萃取，每次采用100ml的乙酸乙酯进行萃取；在洗涤时进行2次洗涤，每次采用200ml的有机相用饱和盐水进行洗涤，最后得到的氨基酸为12.5g。
4.根据权利要求1所述的埃博霉素D-内酰胺衍生物化学合成方法，其特征是所述的步骤三中四氢呋喃为500ml，氨基酸为12.5g，碳酸钠为15g，投入碳酸钠后降温至0℃，滴加的二苯基磷酰基叠氮化物为20ml，滴加时的温度控制在0℃以下，在滴加后搅拌的时间为24小时，配制的25％磷酸二氢钠溶液为200ml，磷酸二氢钠溶液冷却到0-3℃后加入到反应釜中继续搅拌的时间为2小时，乙酸乙酯的温度为0-3℃，在萃取时进行三次萃取，每次采用500ml的乙酸乙酯进行萃取，最后得到的埃博霉素B内酰胺衍生物为5.6g。
5.根据权利要求1所述的埃博霉素D-内酰胺衍生物化学合成方法，其特征是所述的步骤四中四氢呋喃为300ml，埃博霉素B内酰胺衍生物为5.6g，搅拌冷却至5℃以下，滴加四氢化铝锂和四氢呋喃的混合溶液为50ml，其中四氢化铝锂为6.3g，在滴加时的温度控制在5℃以下，滴加完毕后继续搅拌12小时，氯化钾溶液为200ml，投入氯化钾溶液后搅拌的时间为半小时，在萃取时进行三次萃取，每次采用500ml的乙酸乙酯进行萃取，还原反应后得到的埃博霉素B内酰胺衍生物为4.2g。
6.根据权利要求1所述的埃博霉素D-内酰胺衍生物化学合成方法，其特征是所述的步骤五中埃博霉素D内酰胺衍生物为4.2g，四氢呋喃为200ml，饱和盐水为200ml，清洗搅拌的时间为20分钟，在萃取时进行三次萃取，每次采用250ml的乙酸乙酯进行萃取，两次纯化的过程为：第一次色谱纯化，色谱纯化在10*80cm的二氧化硅上采用2-5％甲醇-氯仿进行梯度洗脱，第二次为制备型HPLC纯化，它采用6-55％甲醇-氯仿梯度洗脱，最后得到纯埃博霉素D内酰胺衍生物3.6g。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201010227784 CN101906099A (zh) | 2010-07-16 | 2010-07-16 | 一种埃博霉素d-内酰胺衍生物化学合成方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201010227784 CN101906099A (zh) | 2010-07-16 | 2010-07-16 | 一种埃博霉素d-内酰胺衍生物化学合成方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101906099A true CN101906099A (zh) | 2010-12-08 |
Family
ID=43261709
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 201010227784 Pending CN101906099A (zh) | 2010-07-16 | 2010-07-16 | 一种埃博霉素d-内酰胺衍生物化学合成方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101906099A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103936748A (zh) * | 2014-05-08 | 2014-07-23 | 成都摩尔生物医药有限公司 | 一种埃博霉素b内酰胺衍生物的制备方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1270589A (zh) * | 1997-07-08 | 2000-10-18 | 布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司 | 环氧噻酮衍生物 |
| WO2000071521A1 (en) * | 1999-05-21 | 2000-11-30 | Bristol-Myers Squibb Co. | A process for the reduction of oxiranyl epothilones to olefinic epothilones |
-
2010
- 2010-07-16 CN CN 201010227784 patent/CN101906099A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1270589A (zh) * | 1997-07-08 | 2000-10-18 | 布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司 | 环氧噻酮衍生物 |
| WO2000071521A1 (en) * | 1999-05-21 | 2000-11-30 | Bristol-Myers Squibb Co. | A process for the reduction of oxiranyl epothilones to olefinic epothilones |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 《Journal of The American Chemical Society》 20000826 Robert M. Borzilleri等 A Novel Application of a Pd(0)-Catalyzed Nucleophilic Substitution Reaction to the Regio- and Stereoselective Synthesis of Lactam Analogues of the Epothilone Natural Products 第8890-8897页 1-6 第122卷, 第37期 2 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103936748A (zh) * | 2014-05-08 | 2014-07-23 | 成都摩尔生物医药有限公司 | 一种埃博霉素b内酰胺衍生物的制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103193628B (zh) | α-酮苯丙氨酸钙的制备方法 | |
| CN101830946B (zh) | 一种克林霉素磷酸酯的合成方法 | |
| CN103788090B (zh) | 一种(1r,6s)-8-苄基-7,9-二氧代-2,8-二氮杂双环[4,3,0]壬烷的外消旋化方法 | |
| CN107337703A (zh) | 一种猪胆汁中鹅去氧胆酸的分离纯化方法 | |
| CN101440030B (zh) | 超临界制取共轭亚油酸的方法 | |
| CN103275043A (zh) | 2-芳基苯并呋喃及其衍生物的合成方法 | |
| CN102250261A (zh) | 生产右旋糖酐铁的新方法 | |
| CN103864865A (zh) | 一种高纯度泰拉霉素的合成方法 | |
| CN104119324A (zh) | 一种卡格列净的制备方法 | |
| CN104945436B (zh) | 一种米诺膦酸的制备方法 | |
| CN102351790B (zh) | 7-溴-6-氯-4(3h)-喹诺酮的合成方法 | |
| CN101906099A (zh) | 一种埃博霉素d-内酰胺衍生物化学合成方法 | |
| CN103833714A (zh) | 木犀草素、木犀草苷、木犀草素芸香糖苷半合成的方法 | |
| Jarosz | Stereoselective reduction of higher sugar enones with zinc borohydride | |
| CN103694223B (zh) | 一种一锅法制备埃索美拉唑镁的方法 | |
| CN102250166A (zh) | 一种依替米星硫酸盐的制备方法 | |
| CN101544576B (zh) | 一种芴甲氧羰基-天冬氨酸-α-烯丙酯的制备方法 | |
| CN106518840A (zh) | 一种2‑氯噻吩‑5‑甲酸的合成方法 | |
| CN102617503B (zh) | (s)-3-吗啉基羧酸的合成方法 | |
| CN105153013A (zh) | 6-溴异吲哚啉-1-酮的合成方法 | |
| CN103304623B (zh) | 一种6β,19-环氧雄甾-3,17-二酮的合成方法 | |
| CN101880284A (zh) | 一种埃博霉素b-内酰胺衍生物化学的合成方法 | |
| CN110963937B (zh) | 秋水仙碱和别秋水仙碱的不对称合成方法 | |
| CN107513047A (zh) | 微波辅助法合成头孢他啶侧链酸活性酯的绿色工艺 | |
| CN103483232B (zh) | 一种盐酸沃尼妙林的精制方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20101208 |