CN101904499A - 益生菌银杏花粉口服液的制备方法 - Google Patents

益生菌银杏花粉口服液的制备方法 Download PDF

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本发明提供一种益生菌银杏花粉口服液的制备方法，a.将新鲜银杏花粉置于水中，然后对银杏花粉进行破壁处理，得破壁银杏花粉；b.将鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌两种益生菌分别接入MRS液体种子培养基，30-37℃下静置培养，得益生菌种子液；c.取a步骤的破壁银杏花粉，与糖、氯化钠和谷氨酸钠混合，加入去离子水溶解，经高温灭菌，得发酵培养基；d.将b步骤中的两种益生菌种子液按1∶1比例组合，再按照总接种量为1-3％接入c步骤的发酵培养基中，然后塑料膜封口，静置厌氧培养，待发酵液培养基降至pH＝3.0-3.5，经纱布过滤后，无菌条件下灌装，得产品。

Description

益生菌银杏花粉口服液的制备方法
技术领域：
本发明属于食品饮料技术领域，尤其涉及一种可以提高人体免疫力，具有保健功能的益生菌银杏花粉口服液的制备方法。
技术背景：
随着人们健康意识的提高，保健食品越来越引起人们的关注。采用药食同源的中草药以及改善胃肠平衡的微生物开发的产品，成为这一食品行业的发展趋势。银杏树是我国特有的珍惜植物，被称为植物界的“活化石”。银杏树浑身是宝，其果、叶、苗具有重要的食用、药用和观赏价值。目前，国内外利用银杏叶和银杏果的提取物(如GBE761)，开发出了很多种药品和保健品，市场非常热销。但是，对于银杏花粉的研究比较少，国内文献仅报道了形态特征，生长发育，化学成分，生物活性和人工授粉等方面的研究成果。目前，还没有关于银杏花粉产品开发的报道，市场上也未见有银杏花粉保健食品和药品的销售。银杏花粉富含人体所必需的氨基酸，黄酮，内酯，可溶性糖，有机酸，不饱和脂肪酸，核酸，酶，人体不可缺少的矿物元素及维生素E，对人体有极高的营养保健和药用价值。因此，研究开发银杏花粉技术和产品，具有重要意义。
乳酸菌是重要的益生菌，活性乳酸菌在生长时会分泌对人体健康有益的物质，因此对人体有较多的好处。1、饮料有促进胃液分泌、提高食欲、加强消化的功效；益生菌能将牛奶中的乳糖和蛋白质分解，使人体更易消化和吸收；2、维护肠道菌群生态平衡，形成生物屏障，抑制有害菌对肠道的入侵；3、乳酸菌能减少某些致癌物质的产生，因而有防癌作用；4、能抑制肠道内腐败菌的繁殖，并减弱腐败菌在肠道内产生的毒素；通过产生大量的短链脂肪酸促进肠道蠕动及菌体大量生长改变渗透压而防止便秘；5、有降低胆固醇的作用，特别适宜高血脂的人饮用；6、提高人体免疫功能，乳酸菌可以产生一些增强免疫功能的物质，可以提高人体免疫，防止疾病。一般来说，无论是手术后，还是急性、慢性病愈后的病人，为了治疗疾病或防止感染都曾服用或注射了大量抗生素，使肠道菌从发生很大改变，甚至一些有益的肠道菌也统统被抑制或杀死，造成菌群失调。饮料中含有大量的乳酸菌，每天喝0.25-0.5千克，可以维持肠道正常菌群平衡，调节肠道有益菌群到正常水平。所以大病初愈者多喝饮料，对身体恢复有着其它食物不能替代的作用。
益生菌银杏花粉保健产品，复合了两种单一产品的保健功能，既含有抗癌、增强记忆和提高免疫等功能的银杏成分，又具有能调节胃肠内平衡的益生菌群，集保健与治疗于一体，符合当前人们预防、保健、治疗与康复相结合的医学观点，市场前景将更为广泛。
发明内容：
本发明的目的是提供一种制作工艺简单，方便操作，无环境污染，产品可以提高免疫力并具有保健功能的益生菌银杏花粉口服液的制备方法。
本发明的目的可通过以下技术措施来实现：
本发明制作工艺步骤如下：
a.将新鲜银杏花粉按照新鲜银杏花粉∶水＝1∶8-10重量份配比置于水中，然后对银杏花粉进行破壁处理，得破壁银杏花粉水溶液；
b.将鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌两种益生菌分别接入MRS液体种子培养基，30-37℃下静置培养10-14小时，得两益生菌种子液；
c.取a步骤的破壁银杏花粉水溶液，按照破壁银杏花粉水溶液∶糖∶氯化钠∶谷氨酸钠＝7-10∶3-5∶0.02-0.05∶0.02-0.05重量份配比混合，加入75-80倍量去离子水溶解，经110-120℃高温灭菌15-30min，得发酵培养基；
d.取b步骤中的两种益生菌种子液按1∶1比例组合，再按照总接种量为1-3％接入c步骤的发酵培养基中，然后塑料膜封口，30-37℃静置厌氧培养40-45小时，待发酵液培养基降至pH＝3.0-3.5，经纱布过滤后，无菌条件下灌装，得产品。
本发明的目的还可通过以下技术措施来实现：
所述的破壁处理是采用转速为10000-15000r/min匀浆机破壁10-20分钟，得破壁率超过90％的破壁银杏花粉；也可采用超微粉碎的方法对银杏花粉进行破壁处理，得破壁率超过95％的破壁银杏花粉。
本发明的方法以新鲜银杏花粉为主要原料，经机械破壁处理后，由鼠李糖乳杆菌Lactobacillus rhamnosus(菌种编号：CGMCC 1.22)和嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus(菌种编号：CGMCC 1.1854)两种益生菌厌氧发酵而成，两种益生菌均购自中国普通微生物菌种保藏管理中心。本发明方法制备的乳酸菌银杏花粉口服液为棕色液体，味酸，采用血球计数板法测定口服液中活菌含量达109/mL。该口服液含有丰富的八种人体必需氨基酸，以及黄酮内酯，可用于改善消化不良、吸收不良、腹泻、便秘等胃肠问题，并具有提高免疫力，预防高血压、高血脂和高血糖的功效。
本发明所用的原料为银杏花粉及具有益生特性的两种乳酸菌，经以上过程所生产的益生菌银杏花粉口服液口味酸甜，乳酸菌活菌数达109个/毫升，含有人体所必需的八种氨基酸，黄酮含量也较高，具有很好的保健作用。
本发明复合了两种单一产品的保健功能，既含有抗癌、增强记忆和提高免疫等功能的银杏成分，又具有能调节胃肠内平衡的益生菌群，集保健与治疗于一体，符合当前人们预防、保健、治疗与康复相结合的医学观点和养生追寻目标，市场前景将更为广泛。
益生菌银杏花粉口服液经口急性毒性试验：
将本发明乳酸菌银杏花粉口服液原液饲喂昆明种小鼠40只，体重19-20g，雌雄各半。将小鼠随机分为给药组和空白对照组，每组20只，雌雄各半。给药组按0.4ml/10g给小鼠灌胃相应药液，一日两次；空白对照组给予小鼠同等体积的蒸馏水灌胃。计算一日内的给药量，进行急性毒性试验观察，连续观察14天。观察记录动物的饮食、活动、大小便及有无死亡等情况。观察期结束，将小鼠脱臼处死解剖，肉眼观察不同脏器的改变情况；并取小鼠胸腺、脾脏，电子天平称重，计算胸腺系数和脾脏系数，进行统计分析。
银杏花粉乳酸菌发酵液组给药后，小鼠全部存活，活动自如，毛发光滑，饮食正常，呼吸道、眼及口腔等处无分泌物外，未发现明显的中毒症状，体重均有增加。与空白对照组比较，银杏花粉乳酸菌发酵液组药后14天雄性小鼠体重显著增加(P＜0.001)。药后14天观察期结束，将小鼠脱臼处死解剖，肉眼观察心、肝、脾、肺、肾、脑、肠、胃、小肠等脏器均未见明显异常表现。另外，小鼠胸腺系数和脾脏系数结果表明，与空白对照组比较，银杏花粉乳酸菌发酵液组雄性小鼠脾脏系数明显增加(P＜0.01)，提示银杏花粉乳酸菌发酵液具有一定的免疫增强作用。
银杏花粉乳酸菌发酵液对小鼠最大给药量达80ml/kg，小鼠在该剂量下无明显异常反应，表明该药物安全范围较大，小鼠灌胃给药的最大给药量为80ml/kg。
实验中发现银杏花粉乳酸菌发酵液能明显增加雄性小鼠胸腺系数和脾脏系数，揭示银杏花粉乳酸菌发酵液具有一定的免疫增强作用。
具体实施方式：
实施例1：
该方法按如下步骤进行：
a.将新鲜银杏花粉按照新鲜银杏花粉∶水＝1∶8重量份配比置于水中，然后对银杏花粉采用转速为15000r/min匀浆机破壁10分钟，得破壁银杏花粉水溶液；
b.将鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌两种益生菌分别接入MRS液体种子培养基，37℃下静置培养10小时，得两益生菌种子液；
c.取a步骤的破壁银杏花粉水溶液，按照破壁银杏花粉水溶液∶糖∶氯化钠∶谷氨酸钠＝7∶5∶0.02∶0.05重量份配比混合，加入75倍量去离子水溶解，经120℃高温灭菌15min，得发酵培养基；
d.取b步骤中的两种益生菌种子液按1∶1比例组合，再按照总接种量为3％接入c步骤的发酵培养基中，然后塑料膜封口，30℃静置厌氧培养45小时，待发酵液培养基降至pH＝3.0，经纱布过滤后，无菌条件下灌装，得产品。
实施例2：
该方法按如下步骤进行：
a.将新鲜银杏花粉按照新鲜银杏花粉∶水＝1∶10重量份配比置于水中，然后对银杏花粉采用转速为10000r/min匀浆机破壁20分钟，得破壁银杏花粉水溶液；
b.将鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌两种益生菌分别接入MRS液体种子培养基，30℃下静置培养14小时，得两益生菌种子液；
c.取a步骤的破壁银杏花粉水溶液，按照破壁银杏花粉水溶液∶糖∶氯化钠∶谷氨酸钠＝10∶3∶0.05∶0.02重量份配比混合，加入80倍量去离子水溶解，经110℃高温灭菌30min，得发酵培养基；
d.取b步骤中的两种益生菌种子液按1∶1比例组合，再按照总接种量为1％接入c步骤的发酵培养基中，然后塑料膜封口，37℃静置厌氧培养40小时，待发酵液培养基降至pH＝3.5，经纱布过滤后，无菌条件下灌装，得产品。
实施例3：
该方法按如下步骤进行：
a.将新鲜银杏花粉按照新鲜银杏花粉∶水＝1∶9重量份配比置于水中，然后对银杏花粉采用转速为12000r/min匀浆机破壁15分钟，得破壁银杏花粉水溶液；
b.将鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌两种益生菌分别接入MRS液体种子培养基，35℃下静置培养12小时，得两益生菌种子液；
c.取a步骤的破壁银杏花粉水溶液，按照破壁银杏花粉水溶液∶糖∶氯化钠∶谷氨酸钠＝8∶4∶0.03∶0.03重量份配比混合，加入78倍量去离子水溶解，经115℃高温灭菌20min，得发酵培养基；
d.取b步骤中的两种益生菌种子液按1∶1比例组合，再按照总接种量为2％接入c步骤的发酵培养基中，然后塑料膜封口，33℃静置厌氧培养42小时，待发酵液培养基降至pH＝3.2，经纱布过滤后，无菌条件下灌装，得产品。
实施例4：
不同的是a步骤中用超微粉碎代替匀浆机破壁，其它分别同实施例1-3。

Claims (2)

1.益生菌银杏花粉口服液的制备方法，其特征在于：
a.将新鲜银杏花粉按照新鲜银杏花粉∶水＝1∶8-10重量份配比置于水中，然后对银杏花粉进行破壁处理，得破壁银杏花粉水溶液；
b.将鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌两种益生菌分别接入MRS液体种子培养基，30-37℃下静置培养10-14小时，得两益生菌种子液；
c.取a步骤的破壁银杏花粉水溶液，按照破壁银杏花粉水溶液∶糖∶氯化钠∶谷氨酸钠＝7-10∶3-5∶0.02-0.05∶0.02-0.05重量份配比混合，加入75-80倍量去离子水溶解，经110-120℃高温灭菌15-30min，得发酵培养基；
d.取b步骤中的两种益生菌种子液按1∶1比例组合，再按照总接种量为1-3％接入c步骤的发酵培养基中，然后塑料膜封口，30-37℃静置厌氧培养40-45小时，待发酵液培养基降至pH＝3.0-3.5，经纱布过滤后，无菌条件下灌装，得产品。
2.根据权利要求1所述的益生菌银杏花粉口服液的制备方法，其特征在于所述的破壁处理是采用转速为10000-15000r/min匀浆机破壁10-20分钟或超微粉碎。
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