一种生物发酵酒糟蛋白饲料的制备方法
(一)技术领域
本发明涉及一种生物发酵酒糟蛋白饲料的制备方法。
(二)背景技术
所谓生物饲料,是在微生态理论指导下采用已知有益的微生物与营养载体混合经发酵、干燥等特殊工艺制成的含活性益生菌的安全、无污染、无残留的菌体饲料。随着动物微生态学研究的不断深入,以有益微生物菌群研制开发的生物饲料,作为一类新型无公害饲料资源已被泛应用。由于它具有生物学活性,能很好的参与动物胃肠道微生物菌群的生态平衡,促进动物的营养消化吸收和生长发育,提高饲料转化率,改善动物的生产性能,增强幼畜抗病力以及具有改善饲养环境和减少环境污染的独特作用,因此引起越来越多饲料生产企业和养殖业的高度重视,也成为国内外饲料行业研究开发的热点。但目前上市的所有生物饲料仅仅是采用益生菌发酵基质后,经过低温干燥而制成,该种饲料经过动物胃液消化后,益生菌活性大打折扣,甚至全部灭亡,失去了生物饲料的意义。
本发明是以酒糟为发酵基质,采用细菌和酵母菌共同发酵,然后经过环糊精及食用胶体壁材进行微胶囊化,制备生物发酵酒糟蛋白饲料,用于畜禽养殖,可以有效抵制胃液侵蚀,在肠道中快速崩解,该饲料富含畜禽肠道益生菌群及多种消化酶、维生素,能够在畜禽肠道中快速定植,起到生物屏障作用,能够快速提高畜禽机体免疫力。
(三)发明内容
本发明目的在于提供一种可以提高畜禽机体免疫力、降低粪便臭味对环境污染的生物发酵酒糟蛋白饲料的制备方法。
本发明的目的是这样实现的:本发明中所涉及的百分比除另有注明之外为质量比,本发明的产品采用这样的方法来制备的:
1.发酵菌株的选择及培养基的制备
A菌——植物乳杆菌CICC6051,培养基为5°Bé麦芽汁中加入酵母膏0.5%,无菌碳酸钙0.6%。
B菌——短乳杆菌CICC20298,培养基为蛋白胨10克,牛肉膏10克,酵母浸膏5克,葡萄糖20克,磷酸氢二钾2克,醋酸钠5克,柠檬酸铵2克,硫酸镁0.2克,硫酸锰0.2克,吐温80 1毫升,水1000毫升,pH6.2-6.6。
C菌——鼠李糖乳杆菌CICC 6141,培养基为蛋白胨10克,牛肉膏10克,酵母浸膏5克,葡萄糖20克,磷酸氢二钾2克,醋酸钠5克,柠檬酸铵2克,硫酸镁0.2克,硫酸锰0.2克,吐温80 1毫升,水1000毫升,pH6.2-6.6。
D菌——扣囊拟内孢霉CICC 31258,培养基为5°Bé麦芽汁。
E菌——扣囊复膜孢酵母CICC1717,培养基为5°Bé麦芽汁。
2.菌种液态发酵过程
2.1冻干菌粉末的活化
分别量取0.9%的生理盐水10ml于5只试管内,经121℃灭菌20分钟冷却至30℃,将5株菌安瓶内的冻干菌粉末在无菌状态下全部倒入0.9%的生理盐水中,震荡使其溶解,在30℃恒温箱中静止活化30分钟,备用。
2.2液态菌种扩大培养
2.2.1一级种子的制备
分别量取5株菌培养基各200ml于5只500ml三角瓶内,121℃灭菌20分钟冷却至30℃,按培养基体积的10%接种2.1步骤中已经活化的菌种,在30℃摇床培养24小时,摇床转速120-130转/分钟,作为一级种子。
2.2.2二级种子的制备
分别量取5株菌培养基各2000ml于5只500ml三角瓶内,121℃灭菌20分钟冷却至30℃,按培养基体积的10%接种一级种子,在30℃摇床培养24小时,摇床转速120-130转/分钟,作为二级种子。
3.菌种固态发酵过程
按照重量比为酒糟∶稻壳=(50-60)∶(3-5)的比例混合均匀得到固体混合物,向固体混合物中添加占固体混合物重量10%的尿素溶液,尿素浓度为15%,在100-105℃温度下蒸制20-30分钟,冷却至30-35℃,按固态混合物湿重的5%接种液态二级种子,混合均匀,然后将该固态混合物摊平,厚度12-20cm,30℃培养48小时。
4.微胶囊的制备
将发酵好的酒糟生物饲料添加2%的环糊精及12%的浓度为2.5%海藻酸钠胶体溶液,8%的浓度为0.5%亚麻籽胶胶体溶液,充分混匀后制粒机制粒。
5.干燥过程
将饲料颗粒在40-45℃条件下通风干燥,直至饲料中水分含量低于5%,即可停止干燥,然后包装即为成品。
3.应用效果
下面通过具体实验来证明本发明专利的应用效果
(1).试验动物选择:
选择断奶一周仔猪各20头,分成两组,设试验组和对照组。
(2).试验方法:
断奶前一周开始进入预试期,断奶后第二天进行称重,分组进入试验期。
(3).饲料形态及饲料配方:采用颗粒料自由采食,添加量10%,吃完后立即添加,不可断料。
对照组:膨化玉米48%,膨化大豆17.5%,全脂奶粉10%,乳清粉7%,膨化豆粕4%,鱼粉5.5%,蔗糖3%,添加剂5%。
试验组:膨化玉米48%,膨化大豆17.5%,全脂奶粉10%,乳清粉7%,微生态菌剂4%,鱼粉5.5%,蔗糖3%,添加剂5%。
(4).试验结果(10天)
初平均重Kg |
末平均重Kg |
平均日增重g |
料重比 |
腹泻比例 |
生病比例 |
圏舍气味评价 |
对照组9.25 |
12.75 |
350 |
1.28∶1 |
1∶10 |
2∶10 |
臭味重 |
试验组8.85 |
14.55 |
570 |
1.2∶1 |
无 |
无 |
臭味轻 |
(5).结果分析
本发明的产品可有效降低仔猪的腹泻率,降低生病比例,减轻排放粪便的臭味,提高日增重量50%以上。
(五)具体实施方式
下面举例对本发明作更详细的描述:
实施例一
本发明采用的5株益生菌均采购于中国工业微生物菌种保藏管理中心,分别为:植物乳杆菌CICC6051,短乳杆菌CICC20298,鼠李糖乳杆菌CICC6141,扣囊拟内孢霉CICC 31258,扣囊复膜孢酵母CICC1717。
1.菌种液态发酵过程
1.1冻干菌粉末的活化
分别量取0.9%的生理盐水10ml于5只试管内,经121℃灭菌20分钟冷却至30℃,将5株菌安瓶内的冻干菌粉术在无菌状态下全部倒入0.9%的生理盐水中,震荡使其溶解,在30℃恒温箱中静止活化30分钟,备用。
1.2液态菌种扩大培养
1.2.1一级种子的制备
分别量取5株菌培养基各200ml于5只500ml三角瓶内,121℃灭菌20分钟冷却至30℃,按培养基体积的10%接种2.1步骤中已经活化的菌种,在30℃摇床培养24小时,摇床转速120-130转/分钟,作为一级种子。
1.2.2二级种子的制备
分别量取5株菌培养基各2000ml于5只500ml三角瓶内,121℃灭菌20分钟冷却至30℃,按培养基体积的10%接种一级种子,在30℃摇床培养24小时,摇床转速120-130转/分钟,作为二级种子。
2.菌种固态发酵过程
按照重量比为酒糟∶稻壳=50∶3的比例混合均匀得到固体混合物,向固体混合物中添加占固体混合物重量10%的尿素溶液,尿素浓度为15%,在100-105℃温度下蒸制20-30分钟,冷却至30-35℃,按固态混合物湿重的5%接种液态二级种子,混合均匀,然后将该固态混合物摊平,厚度12-20cm,30℃培养48小时。
3.微胶囊的制备
将发酵好的酒糟生物饲料添加2%的环糊精及12%的浓度为2.5%海藻酸钠胶体溶液,8%的浓度为0.5%亚麻籽胶胶体溶液,充分混匀后制粒机制粒。
4.干燥过程
将饲料颗粒在40-45℃条件下通风干燥,直至饲料中水分含量低于5%,即可停止干燥,然后包装即为成品。
实施例二
1.菌种液态发酵过程
1.1冻干菌粉末的活化
分别量取0.9%的生理盐水10ml于5只试管内,经121℃灭菌20分钟冷却至30℃,将5株菌安瓶内的冻干菌粉末在无菌状态下全部倒入0.9%的生理盐水中,震荡使其溶解,在30℃恒温箱中静止活化30分钟,备用。
1.2液态菌种扩大培养
1.2.1一级种子的制备
分别量取5株菌培养基各200ml于5只500ml三角瓶内,121℃灭菌20分钟冷却至30℃,按培养基体积的10%接种2.1步骤中已经活化的菌种,在30℃摇床培养24小时,摇床转速120-130转/分钟,作为一级种子。
1.2.2二级种子的制备
分别量取5株菌培养基各2000ml于5只500ml三角瓶内,121℃灭菌20分钟冷却至30℃,按培养基体积的10%接种一级种子,在30℃摇床培养24小时,摇床转速120-130转/分钟,作为二级种子。
2.菌种固态发酵过程
按照重量比为酒糟∶稻壳=60∶5的比例混合均匀得到固体混合物,向固体混合物中添加占固体混合物重量10%的尿素溶液,尿素浓度为15%,在100-105℃温度下蒸制20-30分钟,冷却至30-35℃,按固态混合物湿重的5%接种液态二级种子,混合均匀,然后将该固态混合物摊平,厚度12-20cm,30℃培养48小时。
3.微胶囊的制备
将发酵好的酒糟生物饲料添加2%的环糊精及12%的浓度为2.5%海藻酸钠胶体溶液,8%的浓度为0.5%亚麻籽胶胶体溶液,充分混匀后制粒机制粒。
4.干燥过程
将饲料颗粒在40-45℃条件下通风干燥,直至饲料中水分含量低于5%,即可停止干燥,然后包装即为成品。