CN101854914B - 胰岛淀粉样多肽及其类似物的稳定制剂 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及用于胃肠外给药的可溶性药物组合物以及用于治疗高血糖症的方法，所述药物组合物包含胰岛淀粉样多肽类和阴离子表面活性剂。

Description

胰岛淀粉样多肽及其类似物的稳定制剂
发明领域
本发明涉及用于胃肠外给药的可溶性药物组合物，所述药物组合物包含胰岛淀粉样多肽类(amylin peptide)和阴离子表面活性剂。本发明还描述了用于治疗高血糖症的方法。
发明背景
糖尿病是一种利用葡萄糖的能力部分或完全丧失的代谢疾病。
在糖尿病的治疗中，有许多种胰岛素制剂。通常通过皮下注射给予这些胰岛素制剂。
在糖尿病治疗中的另一种有价值的肽是胰岛淀粉样多肽(amylin)。胰岛淀粉样多肽与糖尿病有关的作用有：食物摄取减少引起体重减轻、胃排空减慢、餐后葡萄糖分布曲线平缓和过量糖尿病性胰高血糖素释放减少(A.Young，Amylin：Physiology and Pharmacology，Academic Press(2005))。总的来说，通过已鉴定出的CNS受体而不是直接对靶器官来介导胰岛淀粉样多肽的作用。
人胰岛淀粉样多肽是一种37个氨基酸长的肽，所具有的理化性质为其用作药物造成了麻烦。具体来讲，它具有离体(ex-vivo)形成原纤维的倾向，并且由于沉淀而变得不起作用。目前有一种称为Symlin
Figure GPA00001138589400011
的上市药品含有人胰岛淀粉样多肽的类似物(普兰林肽)，其中在位置25、28和29上的3个氨基酸分别被脯氨酸取代。这实质上改善了形成原纤维的倾向。然而，甚至是普兰林肽也难以在中性pH溶液中保存，因此在一种酸性溶液中提供，即Symlin
Figure GPA00001138589400012
。当在酸性pH下给予药物时，存在将会引起患者局部刺激的风险。
提供在生理pH下呈稳定溶液的包含胰岛淀粉样多肽类的药物组合物将会是有益的。
发明概述
本发明涉及用于胃肠外给药的可溶性药物组合物，所述药物组合物包含胰岛淀粉样多肽类和阴离子表面活性剂。
本发明还涉及用于胃肠外给药的可溶性药物组合物，所述药物组合物包含胰岛淀粉样多肽类和阴离子表面活性剂，所述阴离子表面活性剂是1，2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸-外消旋-(1-甘油)(DMPG)。
本发明的一个目的是获得在生理pH下是稳定的药物组合物。在本发明的一个方面，所述药物组合物或所述药物组合物的重配溶液的pH为约pH 4.0～约pH 9.0。
本发明还涉及通过给予本发明的药物组合物来治疗高血糖症的方法，以及用作药物的所限定的药物组合物。
附图说明
图1：如采用ThT原纤维形成实验所评价的一样，类似于市售Symli
Figure GPA00001138589400021
制剂的普兰林肽制剂的物理稳定性。图中显示ThT荧光是时间的函数。
图2：采用ThT原纤维形成实验评价的不同普兰林肽制剂的物理稳定性。图中显示ThT荧光是时间的函数。
图3显示不同的普兰林肽制剂中普兰林肽的起始浓度和在完成ThT实验后余留在溶液中的浓度。
定义
本文所使用的术语“胰岛淀粉样多肽类(amylin peptide)”是指胰岛淀粉样多肽本身、胰岛淀粉样多肽类似物、胰岛淀粉样多肽衍生物或胰岛淀粉样多肽激动剂。
本文所使用的“胰岛淀粉样多肽(amylin)”是指一种来自胰脏β细胞的37个氨基酸的人肽激素，称为amylin(胰岛淀粉样多肽)，与胰岛素共分泌。人胰岛淀粉样多肽具有下列氨基酸序列：Lys-Cys-Asn-Thr-Ala-Thr-Cys-Ala-Thr-Gln-Arg-Leu-Ala-Asn-Phe-Leu-Val-His-Ser-Ser-Asn-Asn-Phe-Gly-Ala-Ile-Leu-Ser-Ser-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Asn-Thr-Tyr(SEQ ID NO：1)。因此，结构式为Lys-Cys-Asn-Thr-Ala-Thr-Cys-Ala-Thr-Gln-Arg-Leu-Ala-Asn-Phe-Leu-Val-His-Ser-Ser-Asn-Asn-Phe-Gly-Ala-Ile-Leu-Ser-Ser-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Asn-Thr-Tyr-NH2(SEQ ID NO：1)，具有位于2个Cys残基之间的二硫桥及通过肽键与C端氨基酸连接的酰胺基团。该术语还包括存在于其它哺乳动物物种中，且呈可分离形式的胰岛淀粉样多肽的变体。至于天然存在的胰岛淀粉样多肽化合物，该术语包括呈分离形式、纯化形式或自然界不存在的其它形式的这类化合物。
胰岛淀粉样多肽的“激动剂”是指体外或体内模拟胰岛淀粉样多肽的一种或多种作用(或活性)的化合物。胰岛淀粉样多肽的作用包括与被胰岛淀粉样多肽激活或钝化的一种或多种受体直接或间接相互作用或结合的能力，例如，在WO 2004/037168的实施例2和3中分别描述的受体结合测定法和比目鱼肌测定法。优选，胰岛淀粉样多肽激动剂不是降钙素，本文所使用的降钙素是指人肽激素降钙素及其物种变种，例如大鼠、鲑鱼10和鳗鲡的降钙素(包括氨基辛二酸鳗鲡降钙素)。
优选的胰岛淀粉样多肽激动剂还可以是与SEQ ID NO：1具有至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％氨基酸序列同一性并且具有胰岛淀粉样多肽活性的化合物。
本发明用途中所包括的示例性胰岛淀粉样多肽激动剂类似物包括美国专利号5,686,411、US 6,114,304和6,410,511(AmylinPharmaceuticals Inc)中所描述的胰岛淀粉样多肽激动剂类似物，所述专利通过引用其全部结合到本文中。
胰岛淀粉样多肽的“类似物”或“相似物”或“激动剂类似物”是指结构上类似(例如通过取代一个或多个天然或者非天然氨基酸或肽模拟物而衍生自胰岛淀粉样多肽的一级氨基酸序列)于胰岛淀粉样多肽并且在体外或体内模拟胰岛淀粉样多肽作用的化合物。
可采用用于本发明的各种胰岛淀粉样多肽类似物的命名法来表示基于序列的肽以及对任何基础肽胰岛淀粉样多肽序列(例如人胰岛淀粉样多肽)所做的修饰。后面有数字的氨基酸或前面有上标数字的氨基酸表示，所命名的氨基酸置换基础氨基酸序列中正常存在于有数字/上标数字的氨基酸位置上的氨基酸。例如“Arg18Pro25Pro28-h-胰岛淀粉样多肽”和“18Arg25，28Pro-h-胰岛淀粉样多肽”是指具有下列取代的基于“h-胰岛淀粉样多肽”或“人胰岛淀粉样多肽”序列的肽：在残基18上Arg置换His，在残基25上Pro置换Ala，在残基28上Pro置换Ser。术语“des-Lys1-h-胰岛淀粉样多肽”和“des-1Lys-h-胰岛淀粉样多肽”是指基于人胰岛淀粉样多肽序列的肽中第一个即N端氨基酸缺失。本发明有益的胰岛淀粉样多肽类似物还可包括胰岛淀粉样多肽的片段，例如EP 289287中所披露的片段，所述专利的内容通过引用结合到本文中。
胰岛淀粉样多肽类似物还包括在SEQ ID NO：1中的至少一个或多个氨基酸位置上具有插入、缺失和/或取代的胰岛淀粉样多肽。氨基酸插入、缺失或取代的数目可以是至少1、2、3、4、5、6、10个。可以用其它天然或非天然氨基酸、合成氨基酸、肽模拟物或其它化合物进行插入或取代。
示例性化合物包括但不限于des-Lys1-h-胰岛淀粉样多肽、Pro28-h-胰岛淀粉样多肽、Pro25Pro28Pro29-h-胰岛淀粉样多肽、Arg18Pro25Pro28-h-胰岛淀粉样多肽、Pro25Val26Pro28Pro29-h-胰岛淀粉样多肽和Arg18Pro25Pro28-des-Lys1-h-胰岛淀粉样多肽，这些在所治疗的试验动物体内都具有胰岛淀粉样多肽活性(例如引起明显的高乳酸血(hyperlactemia)继发高血糖)。除了具有胰岛淀粉样多肽特有的活性以外，当与人胰岛淀粉样多肽相比较时，还发现本发明的某些优选化合物具有更理想的溶解度和稳定性特征。
胰岛淀粉样多肽的“衍生物”是指经化学修饰的胰岛淀粉样多肽，例如通过在胰岛淀粉样多肽主链的一个或多个位置上引入侧链，或者通过氧化或还原胰岛淀粉样多肽中氨基酸残基的某些基团，或者通过将游离羧酸基团转化成酯基团或酰胺基团。通过使游离氨基或羟基酰化获得其它衍生物。胰岛淀粉样多肽衍生物的实例参见国际专利申请WO 2007/104789(Novo Nordisk A/S)和待审的欧洲专利申请第07116067.5号。胰岛淀粉样多肽衍生物的其它实例为N-甲基化胰岛淀粉样多肽，例如以下文献所披露的胰岛淀粉样多肽类：Yan等，PNAS，第103卷，第7期，第2046-2051页，2006，其中胰岛淀粉样多肽在位置24和26上被N-甲基化。
发明详述
一方面，本发明涉及用于胃肠外给药的可溶性药物组合物，所述药物组合物包含胰岛淀粉样多肽类和表面活性剂。
本发明的一个目的是获得在生理pH下是稳定的药物组合物。在本发明的一个方面，所述药物组合物或所述药物组合物的重配溶液的pH为约pH 4.0～约pH 9.0。在本发明的又一个方面，所述药物组合物或所述药物组合物的重配溶液的pH为约pH 5.O～约pH 8.5。在本发明的又一个方面，所述药物组合物或所述药物组合物的重配溶液的pH为约pH 6.0～约pH 8.5。在本发明的又一个方面，所述药物组合物或所述药物组合物的重配溶液的pH为约pH 6.5～约pH 8.5。在本发明的又一个方面，所述药物组合物或所述药物组合物的重配溶液的pH为约pH 6.5～约pH 8.0。在本发明的又一个方面，所述药物组合物或所述药物组合物的重配溶液的pH为约pH 7.0～约pH 8.0。在本发明的又一个方面，所述药物组合物或所述药物组合物的重配溶液的pH约为pH 7.4。
在本发明的另一个方面，所述药物组合物为溶液。在本发明的另一个方面，所述药物组合物为固体。在本发明的另一个方面，所述药物组合物用水溶液重配，例如用注射用缓冲液或注射用水重配。在本发明的另一个方面，所述药物组合物适于通过注射或输注给药。在本发明的又一个方面，所述药物组合物适于通过皮下给药给予。在本发明的另一个方面，所述药物组合物适于肌内给药。在本发明的另一个方面，所述药物组合物适于静脉内给药。
在本发明的一个方面，所述胰岛淀粉样多肽类是胰岛淀粉样多肽、胰岛淀粉样多肽类似物、胰岛淀粉样多肽衍生物或胰岛淀粉样多肽激动剂。
本发明的胰岛淀粉样多肽类能够与以下受体结合或以别的方式直接或间接相互作用：胰岛淀粉样多肽受体，或者胰岛淀粉样多肽本身可与之相互作用而引起生物反应(例如减少食物摄取)的一种或多种其它受体。本发明的化合物可与胰岛淀粉样多肽受体结合，其亲和力大于20nM、10nM、5nM，更优选其亲和力大于0.10nM，例如通过在“实验方法”部分中的胰岛淀粉样多肽受体测定法来测定。
胰岛淀粉样多肽类似物还包括在SEQ ID NO：1中的至少一个或多个氨基酸位置上具有插入、缺失和/或取代的胰岛淀粉样多肽。氨基酸插入、缺失或取代的数目可以是至少1、2、3、4、5、6、10个。可以用其它天然或非天然氨基酸、合成氨基酸、肽模拟物或其它化合物进行插入或取代。
在本发明的一个方面，所述胰岛淀粉样多肽类是人胰岛淀粉样多肽。在本发明的一个方面，所述胰岛淀粉样多肽类是Pro25 Pro28Pro29-h-胰岛淀粉样多肽(普兰林肽)。在本发明的又一个方面，所述胰岛淀粉样多肽类是在位置24和26上被甲基化的人胰岛淀粉样多肽。
在本发明的一个方面，所述胰岛淀粉样多肽类的浓度范围为约0.05mg/mL～约10mg/mL，或约0.1mg/mL～约4mg/mL，或约0.4mg/mL～约1.2mg/mL。
在本发明的一个方面，所述表面活性剂是阴离子表面活性剂。
在本发明的一个方面，所述药物组合物包含浓度高于其临界胶束浓度(CMC)的阴离子表面活性剂。
阴离子表面活性剂可选自：鹅脱氧胆酸、鹅脱氧胆酸钠盐、胆酸、脱氢胆酸、脱氧胆酸、脱氧胆酸甲酯、毛地黄皂苷、毛地黄毒苷配基、N，N-二甲基十二烷基胺N-氧化物、多库酯钠、甘氨鹅脱氧胆酸钠(Glycochenodeoxycholic acid sodium)、甘氨胆酸水合物、甘氨脱氧胆酸一水合物、甘氨脱氧胆酸钠盐、甘氨脱氧胆酸钠盐、甘氨石胆酸3-硫酸二钠盐、甘氨石胆酸乙酯、N-月桂酰肌氨酸钠盐、N-月桂酰肌氨酸钠盐、N-月桂酰肌氨酸、N-月桂酰肌氨酸、十二烷基硫酸锂、Lugol、1-辛烷磺酸钠盐、1-辛烷磺酸钠盐、1-丁烷磺酸钠、1-癸烷磺酸钠、1-十二烷磺酸钠、1-庚烷磺酸钠、1-庚烷磺酸钠、1-壬烷磺酸钠、1-丙烷磺酸钠一水合物、2-溴乙烷磺酸钠、胆酸钠水合物、牛胆汁或羊胆汁、胆酸钠水合物、络胆酸钠、脱氧胆酸钠、十二烷基硫酸钠、十二烷基硫酸钠、己烷磺酸钠、辛基硫酸钠、戊烷磺酸钠、牛磺胆酸钠、牛磺鹅脱氧胆酸钠盐、牛磺脱氧胆酸钠盐一水合物、牛磺石胆酸3-硫酸二钠盐、牛熊脱氧胆酸钠盐、Trizmadodecyl sulfate、DSS(多库酯钠，CAS登记号[577-11-7])、多库酯钙、CAS登记号[128-49-4])、多库酯钾、CAS登记号[7491-09-0])，SDS(十二烷基硫酸钠/月桂基硫酸钠)、十二烷基磷酸胆碱(FOS-胆碱-12)、癸基磷酸胆碱(FOS-胆碱-10)、壬基磷酸胆碱(FOS-胆碱-9)、二棕榈酰磷脂酸、辛酸钠和/或乌索脱氧胆酸。
在本发明的一个方面，阴离子表面活性剂是甘油磷酸甘油衍生物。在本发明的一个方面，所述甘油磷酸甘油衍生物是二肉豆蔻酰基衍生物，例如1，2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸-外消旋-(1-甘油)(DMPG)。在本发明的一个方面，二肉豆蔻酰基衍生物以介于0.1mM和10mM之间的浓度加入，优选介于0.5mM和5mM之间，优选介于0.5mM和3mM之间。在本发明的一个方面，二肉豆蔻酰基衍生物以介于0.1mM和0.5mM之间的浓度加入。在本发明的一个方面，所述甘油磷酸甘油衍生物是1，2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸-外消旋-(1-甘油)(DMPG)，例如CAS登记号67232-80-8。
在本发明的一个方面，所述表面活性剂的浓度为约5mg/L～约50g/L。在本发明的又一个方面，所述表面活性剂的浓度为约10mg/L～约30g/L。在本发明的又一个方面，所述表面活性剂的浓度为约20mg/L～约3000mg/L。在本发明的又一个方面，所述表面活性剂的浓度为约30mg/L～约500mg/L。在本发明的又一个方面，所述表面活性剂的浓度为约50mg/L～约200mg/L。
在本发明的一个方面，所述表面活性剂以介于0.1mM和10mM之间的浓度加入，优选介于0.5mM和5mM之间，优选介于0.5mM和3mM之间。
一方面，本发明的可溶性药物组合物包含另外的表面活性剂。又一方面，所述另外的表面活性剂选自：阴离子表面活性剂、非离子表面活性剂、两性离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、泊洛沙姆(poloxamer)和烷基多葡糖苷。再一方面，所述另外的表面活性剂选自：泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、泊洛沙姆124、泊洛沙姆181、泊洛沙姆182、泊洛沙姆237、泊洛沙姆331、泊洛沙姆338、聚山梨酯20(吐温20)、聚山梨酯80、Solutol HS 15、d-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯、十四烷基-β-D-麦芽糖苷和n-十二烷基β-D-麦芽糖苷。
本发明的药物组合物在物理和化学上是稳定的，并且在所需要的pH下是可溶解的。所谓“在指定pH下可溶解”是指本发明组合物中所含的胰岛淀粉样多肽类在组合物的pH下完全溶解，其中用于测定本发明组合物中所含的胰岛淀粉样多肽类是否溶解的方法是本领域已知的。
一方面，可将所述药物组合物在30,000g下进行离心20分钟，然后可通过RP-HPLC来测定上清液中的胰岛淀粉样多肽类的浓度。如果在实验误差范围内，这个浓度等于原来用于制备组合物的胰岛淀粉样多肽类的浓度，则胰岛淀粉样多肽类在本发明组合物中完全溶解。
另一方面，在本发明组合物中的胰岛淀粉样多肽类的溶解度可只通过肉眼检查装有组合物的容器来确定。如果用肉眼看，溶液是澄清的，而且无颗粒物质悬浮或沉淀在容器侧壁/底部，则胰岛淀粉样多肽类是可溶解的。
另一方面，可通过用于评价蛋白质制剂的物理稳定性的ThT原纤维形成实验，来确定本发明组合物中的胰岛淀粉样多肽类的物理稳定性。
在本发明的一个方面，本发明的药物组合物是“物理上稳定的”药用组合物。用于这种情况下的术语“物理上稳定的”是指胰岛淀粉样多肽类不会形成原纤维，或不会因其它形式的聚集、沉淀或吸附到例如装有药物组合物的容器表面而丧失。可按照“实验方法”部分下ThT原纤维形成实验中所描述的方法来测定物理稳定性。
当然，技术人员应当了解的是，在本发明的组合物中，胰岛淀粉样多肽类的溶解度不仅受其组成及其pH的影响，还受测量溶解度之前保存组合物的温度和时间的影响。
在本发明的一个方面，所述药物组合物包含防腐剂。一方面，所述防腐剂选自苯酚、间甲酚或其混合物。
在本发明的又一个方面，所述药物组合物包含缓冲剂。一方面，所述缓冲剂选自磷酸盐、Good缓冲剂例如TRIS、BICINE和HEPES、甘氨酸、甘氨酰甘氨酸、柠檬酸盐或其混合物。又一方面，所述缓冲剂选自：Good缓冲剂例如TRIS、BICINE和HEPES、甘氨酸、甘氨酰甘氨酸或其混合物。
在本发明的又一个方面，所述药物组合物包含等渗剂。一方面，所述等渗剂不是盐。又一方面，所述等渗剂选自海藻糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、甘油、丙二醇及其混合物。
在本发明的又一个方面，所述药物组合物包含稳定剂。一方面，所述稳定剂选自L-组氨酸、咪唑和L-精氨酸。一方面，所述稳定剂是聚乙二醇。
另一方面，本发明涉及通过胃肠外给予有效量的药物组合物来治疗高血糖症的方法，所述药物组合物包含胰岛淀粉样多肽类和表面活性剂。
另一方面，本发明涉及用于治疗暴食症(binge eating)或贪食症的方法，所述方法包括胃肠外给予有效量的药物组合物，所述药物组合物包含胰岛淀粉样多肽类和表面活性剂。
另一方面，本发明涉及用于治疗或预防以下疾病的方法：2型糖尿病、葡萄糖耐量减低、1型糖尿病、肥胖症、高血压、X综合征、血脂异常(dyslipidemia)、认知障碍、动脉粥样硬化、心肌梗塞、冠心病和其它心血管疾病、中风、炎症性肠综合征、消化不良和胃溃疡，所述方法包括胃肠外给予有效量的药物组合物，所述药物组合物包含胰岛淀粉样多肽类和表面活性剂。
另一方面，本发明涉及用于延迟或阻止2型糖尿病的疾病进程的方法，所述方法包括胃肠外给予有效量的药物组合物，所述药物组合物包含胰岛淀粉样多肽类和表面活性剂。
另一方面，本发明涉及用于减少食物摄取、减少β细胞凋亡、增加β细胞功能和β细胞量和/或用于恢复β细胞的葡萄糖敏感性的方法，所述方法包括胃肠外给予有效量的药物组合物，所述药物组合物包含胰岛淀粉样多肽类和表面活性剂。
又一方面，本发明涉及治疗上述任何疾病的方法，所述方法还包括给予有需要的人药用相关量的胰岛素、胰岛素类似物、胰岛素衍生物、GLP-1或GLP-1衍生物。
另一方面，与本发明组合物联用的胰岛素指的是人胰岛素。
另一方面，与本发明组合物联用的胰岛素指的是人胰岛素类似物。
另一方面，与本发明组合物联用的胰岛素指的是人胰岛素类似物的衍生物。
另一方面，所述胰岛素类似物和衍生物选自以下专利所公开的胰岛素类似物和衍生物：EP 375437、EP 0 792 290、EP 0 214 826、EP1660531、EP 1846446、EP 1846447、WO 2007/096431、WO2007/128817、WO 2007/128815和EP 0 705 275(Novo Nordisk A/S)、US 5,504,188和EP 383472(Eli Lilly)以及EP 0 368 187(Aventis)。
一方面，所述胰岛素衍生物可包括以商品名Apidra
Figure GPA00001138589400111
出售的格鲁辛胰岛素(LysB3 GluB29人胰岛素)和US 621633(Sanofi Aventis)中公开的其它胰岛素衍生物。
一方面，所述胰岛素衍生物和胰岛素类似物可包括甘精胰岛素(GlyA21 ArgB31 ArgB32人胰岛素)，这是一种目前作为酸性制剂销售的长效胰岛素类似物，商品名为Lantus
Figure GPA00001138589400112
。一方面，胰岛素类似物是以商品名Humalog
Figure GPA00001138589400113
销售的赖脯胰岛素(LysB28 ProB29人胰岛素)或者以商品名Novorapid
Figure GPA00001138589400114
或Novolog
Figure GPA00001138589400115
销售的门冬胰岛素(AspB28人胰岛素)。
另一方面，与本发明组合物联用的胰岛素是指在一个或多个位置上被酰化的胰岛素分子，例如在人胰岛素或desB30人胰岛素的B29位置上。
另一方面，与本发明组合物联用的胰岛素选自：GlyA21 ArgB31ArgB32人胰岛素、NεB29-十四烷酰基GlnB3 des(B30)人胰岛素)、NεB29-十三烷酰基人胰岛素、NεB29-十四烷酰基人胰岛素、NεB29-癸酰基人胰岛素、DesB30 ArgB31 ArgB32人胰岛素、NεB29-十二烷酰基人胰岛素和LysB29(Nε-十六烷二酰基-γ-Glu)des(B30)人胰岛素。
在本发明的另一个方面，胰岛素类似物选自WO2004/080480中公开的酸稳定的胰岛素类似物，例如GlyA21 AspB28 desB30人胰岛素或GlyA21 GluB28 desB30人胰岛素。
在本发明的另一个方面，所述人胰岛素类似物是人胰岛素desB30(亦称des(B30)人胰岛素)
另一方面，与本发明组合物联用的GLP-1衍生物是指GLP-1(1-37)、毒蜥激动肽-4(1-39)、其促胰岛素片段、其促胰岛素类似物及其促胰岛素衍生物。GLP-1(1-37)的促胰岛素片段是其整个序列可存在于GLP-1(1-37)序列中且其中至少一个末端氨基酸缺失的促胰岛素肽。GLP-1(1-37)的促胰岛素片段的实例为GLP-1(7-37)，其中在GLP-1(1-37)的位置1-6上的氨基酸残基缺失；以及GLP-1(7-36)，其中在GLP-1(1-37)的位置1-6和37上的氨基酸残基缺失。毒蜥激动肽-4(1-39)的促胰岛素片段的实例为毒蜥激动肽-4(1-38)和毒蜥激动肽-4(1-31)。化合物的促胰岛素性质可通过本领域众所周知的体内或体外测定法进行测定。比如，可将化合物给予动物，监测胰岛素浓度随时间的变化。GLP-1(1-37)和毒蜥激动肽-4(1-39)的促胰岛素类似物是指其中一个或多个氨基酸残基与其它氨基酸残基互换和/或从中缺失一个或多个氨基酸残基和/或从中添加一个或多个氨基酸残基的相应分子，前提条件是所述类似物或为促胰岛素化合物，或为促胰岛素化合物的前药。GLP-1(1-37)的促胰岛素类似物的实例为例如Met8-GLP-1(7-37)，其中位置8上的丙氨酸被甲硫氨酸置换且位置1-6上的氨基酸残基均缺失；Arg34-GLP-1(7-37)，其中位置34上的缬氨酸被精氨酸置换且位置1-6上的氨基酸残基均缺失。毒蜥激动肽-4(1-39)的促胰岛素类似物的实例为Ser2Asp3-毒蜥激动肽-4(1-39)，其中位置2和3上的氨基酸残基分别被丝氨酸和天冬氨酸置换(这种特殊的类似物在本领域亦称为毒蜥激动肽-3)。GLP-1(1-37)的促胰岛素衍生物、毒蜥激动肽-4(1-39)及其类似物在本领域技术人员看来是这些肽的衍生物，即具有至少一个在母体肽分子中不存在的取代基，前提条件是所述衍生物或为促胰岛素化合物，或为促胰岛素化合物的前药。取代基的实例为酰胺、糖、烷基和亲脂取代基。GLP-1(1-37)的促胰岛素衍生物、毒蜥激动肽-4(1-39)及其类似物的实例为GLP-1(7-36)-酰胺、Arg34，Lys26(Nε-(γ-Glu(Nα-十六烷酰基)))-GLP-1(7-37)和Tyr31-毒蜥激动肽-4(1-31)-酰胺。GLP-1(1-37)、毒蜥激动肽-4(1-39)、其促胰岛素片段、其促胰岛素类似物及其促胰岛素衍生物的另外的实例参见WO98/08871(Novo Nordisk A/S)、WO 99/43706(Novo Nordisk A/S、US5424286(Eng)、WO 00/09666(美国政府)、WO 2006/097537 (NovoNordisk A/S)和欧洲专利申请第08101008.4号(Novo Nordisk A/S)。
当通过注射(例如通过注射笔或注射器)给予本发明的药物组合物时，通常每天给予3次，优选在餐前给药。优选每次给药包含少于约500μL，或少于约200μL，因为较大的注射体积会给患者带来不适。当通过泵给予本发明的药物组合物时，通常连续或间断地给药，例如至少每天10次或更多次给药。
在本发明的一个方面，所述治疗方法包括给予有效量的药物组合物，为30μL/天～约600μL/天，例如约60μL/天～约360μL/天。在本发明的另一个方面，所述方法包括通过皮下注射给予药物组合物。在本发明的另一个方面，所述方法包括通过泵给予药物组合物。在本发明的另一个方面，所述方法包括通过递送不连续量的所述药物组合物的泵给药。在本发明的另一个方面，所述方法包括通过递送不连续量的所述药物组合物的泵给药，其中所述药物组合物的所述不连续给药是通过脉冲给药一段时间，这段时间不长于两次脉冲之间的时间。
在本发明的另一个方面，涉及胰岛淀粉样多肽类和表面活性剂在制备用于胃肠外给药的药物组合物中的用途，所述药物组合物包含胰岛淀粉样多肽类和表面活性剂。在本发明的一个方面，所述用途包括用于通过皮下注射给药的药物组合物。在本发明的另一个方面，所述用途包括用于通过泵给药的药物组合物。在本发明的另一个实施方案中，所述用途包括通过泵给药，所述泵递送不连续量的所述药物组合物。在本发明的另一个方面，所述用途包括通过泵给药，所述泵递送不连续量的所述药物组合物，其中所述药物组合物的所述不连续给药是通过脉冲给药一段时间，这段时间不长于两次脉冲之间的时间。
另一方面，本发明涉及胰岛淀粉样多肽类和表面活性剂在制备通过胃肠外给药治疗高血糖症的药物组合物中的用途，所述组合物包含胰岛淀粉样多肽类和表面活性剂。
另一方面，本发明涉及用于治疗高血糖症的本发明药物组合物。另一方面，本发明涉及胰岛淀粉样多肽类和表面活性剂在制备用于治疗暴食症或贪食症的药物组合物中的用途。
发明的其它方面
1.一种用于胃肠外给药的可溶性药物组合物，所述药物组合物包含胰岛淀粉样多肽类和阴离子表面活性剂。
2.方面1中限定的药物组合物，其中所述阴离子表面活性剂是甘油磷酸甘油衍生物或阴离子磷脂。
3.方面1或2中限定的药物组合物，其中所述阴离子表面活性剂是二肉豆蔻酰基衍生物。
4.方面1-3中任一项限定的药物组合物，其中所述阴离子表面活性剂是1，2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸-外消旋-(1-甘油)(DMPG)。
5.方面1-4中任一项限定的药物组合物，其中所述药物组合物或所述药物组合物的重配溶液的pH为约pH 4.0～约pH 9.0。
6.方面1-5中任一项限定的药物组合物，其中所述药物组合物或所述药物组合物的重配溶液的pH为约pH 4.5～约pH 8.5。
7.方面1-6中任一项限定的药物组合物，其中所述药物组合物或所述药物组合物的重配溶液的pH为约pH 5.0～约pH 8.5。
8.方面1-7中任一项限定的药物组合物，其中所述药物组合物或所述药物组合物的重配溶液的pH为约pH 6.0～约pH 8.5。
9.方面1-8中任一项限定的药物组合物，其中所述药物组合物或所述药物组合物的重配溶液的pH为约pH 6.5～约pH 8.5。
10.方面1-9中任一项限定的药物组合物，其中所述药物组合物或所述药物组合物的重配溶液的pH为约pH 6.8～约pH 8.0。
11.方面1-10中任一项限定的药物组合物，其中所述药物组合物或所述药物组合物的重配溶液的pH为约pH 7.0～约pH 7.8。
12.方面1-11中任一项限定的药物组合物，其中所述药物组合物或所述药物组合物的重配溶液的pH为约pH 7.2～约pH 7.6。
13.方面1-12中任一项限定的药物组合物，其中所述组合物为溶液。
14.方面1-12中任一项限定的药物组合物，其中所述组合物为固体。
15.方面14中限定的药物组合物，其用水溶液重配，例如用注射用缓冲液或注射用水重配。
16.方面1-15中任一项限定的药物组合物，所述药物组合物适于通过注射或输注给予。
17.方面1-16中任一项限定的药物组合物，其中所述胰岛淀粉样多肽类是胰岛淀粉样多肽、胰岛淀粉样多肽类似物或胰岛淀粉样多肽激动剂。
18.方面1-17中任一项限定的药物组合物，其中所述胰岛淀粉样多肽类是人胰岛淀粉样多肽。
19.方面1-17中任一项限定的药物组合物，其中所述胰岛淀粉样多肽类是Pro25 Pro28 Pro2925，28，29Pro-h-胰岛淀粉样多肽。
20.方面1-17中任一项限定的药物组合物，其中所述胰岛淀粉样多肽类是在位置24和26上被甲基化的人胰岛淀粉样多肽。
21.方面1-17或19中任一项限定的药物组合物，其中所述阴离子表面活性剂是DMPG，所述胰岛淀粉样多肽类是Pro25Pro28Pro2925，28，29Pro-h-胰岛淀粉样多肽。
22.方面1-17或20中任一项限定的药物组合物，其中所述阴离子表面活性剂是DMPG，所述胰岛淀粉样多肽类是在位置24和26上被甲基化的人胰岛淀粉样多肽。
23.方面1-18中任一项限定的药物组合物，其中所述阴离子表面活性剂是DMPG，所述胰岛淀粉样多肽类是人胰岛淀粉样多肽。
24.方面1-23中任一项限定的药物组合物，其中所述胰岛淀粉样多肽类的浓度范围为约0.05mg/mL～约10mg/mL，或约0.1mg/mL～约4mg/mL，或约0.4mg/mL～约1.2mg/mL。
25.方面1-24中任一项限定的药物组合物，其中所述阴离子表面活性剂的浓度范围为约0.1mg/mL～约4.0mg/mL或约1.0mg/mL～约4.0mg/mL或约1.3mg/mL～约3.4mg/mL。
26.方面1-25中任一项限定的药物组合物，其中所述阴离子表面活性剂的浓度约为2.1。
27.方面1-25中任一项限定的药物组合物，其中所述阴离子表面活性剂的浓度范围为约0.1mg/mL～约3.4mg/mL。
28.方面1-27中任一项限定的药物组合物，其中所述胰岛淀粉样多肽类的浓度范围为约0.05mg/mL～约10mg/mL，所述阴离子表面活性剂的浓度范围为约0.1mg/mL～约4.0mg/mL。
29.方面1-27中任一项限定的药物组合物，其中所述胰岛淀粉样多肽类的浓度范围为约0.05mg/mL～约10mg/mL，所述阴离子表面活性剂的浓度范围为约1.0mg/mL～约4.0mg/mL。
30.方面1-27中任一项限定的药物组合物，其中所述胰岛淀粉样多肽类的浓度范围为约0.05mg/mL～约10mg/mL，所述阴离子表面活性剂的浓度范围为约1.3mg/mL～约3.4mg/mL。
31.方面1-27中任一项限定的药物组合物，其中所述胰岛淀粉样多肽类的浓度范围为约0.05mg/mL～约10mg/mL，所述阴离子表面活性剂的浓度约为2.1mg/mL。
32.方面21中限定的药物组合物，其中Pro25Pro28Pro2925，28，29Pro-h-胰岛淀粉样多肽的浓度范围为约0.05mg/mL～约10mg/mL，DMPG的浓度范围为约0.1mg/mL～约4.0mg/mL。
33.方面21中限定的药物组合物，其中Pro25Pro28Pro2925，28，29Pro-h-胰岛淀粉样多肽的浓度范围为约0.05mg/mL～约10mg/mL，DMPG的浓度范围为约1.0mg/mL～约4.0mg/mL。
34.方面21中限定的药物组合物，其中Pro25Pro28Pro2925，28，29Pro-h-胰岛淀粉样多肽的浓度范围为约0.05mg/mL～约10mg/mL，DMPG的浓度范围为约1.3mg/mL～约3.4mg/mL。
35.方面21中限定的药物组合物，其中Pro25Pro28Pro2925，28，29Pro-h-胰岛淀粉样多肽的浓度范围为约0.05mg/mL～约10mg/mL，DMPG的浓度约为2.1。
36.方面21中限定的药物组合物，其中Pro25Pro28Pro2925，28，29Pro-h-胰岛淀粉样多肽的浓度范围为约0.1mg/mL～约4mg/mL，DMPG的浓度范围为约0.1mg/mL～约3.4mg/mL。
37.方面1-36中任一项限定的药物组合物，其中所述药物组合物包含防腐剂。
38.方面1-37中任一项限定的药物组合物，其中所述防腐剂选自苯酚、间甲酚或其混合物。
39.方面1-38中任一项限定的药物组合物，其中所述药物组合物包含缓冲剂。
40.方面39中限定的药物组合物，其中所述缓冲剂选自磷酸盐、Good缓冲剂例如TRIS、BICINE和HEPES、甘氨酸、甘氨酰甘氨酸、柠檬酸盐或其混合物。
41.方面40中限定的药物组合物，其中所述缓冲剂选自TRIS、BICINE和HEPES、甘氨酸、甘氨酰甘氨酸或其混合物。
42.方面1-41中任一项限定的药物组合物，其中所述药物组合物包含等渗剂。
43.方面42中限定的药物组合物，其中所述等渗剂不是盐。
44.方面42中限定的药物组合物，其中所述等渗剂选自海藻糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、甘油、丙二醇或其混合物。
45.方面1-44中任一项限定的药物组合物，其中所述药物组合物包含稳定剂。
46.方面45中限定的药物组合物，其中所述稳定剂选自L-组氨酸、咪唑和L-精氨酸。
47.方面45中限定的药物组合物，其中所述稳定剂是聚乙二醇。
48.方面1-47中任一项限定的药物组合物，所述药物组合物包含另外的表面活性剂。
49.方面48中限定的药物组合物，其中所述另外的表面活性剂选自：阴离子表面活性剂、非离子表面活性剂、两性离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、泊洛沙姆和烷基多葡糖苷。
50.方面49中限定的药物组合物，其中所述另外的表面活性剂是泊洛沙姆。
51.方面49或50中限定的药物组合物，其中所述另外的表面活性剂是泊洛沙姆188。
52.方面49或50中限定的药物组合物，其中所述另外的表面活性剂选自泊洛沙姆407、泊洛沙姆124、泊洛沙姆181、泊洛沙姆182、泊洛沙姆237、泊洛沙姆331和泊洛沙姆338。
53.方面49中限定的药物组合物，其中所述另外的表面活性剂是聚山梨酯20(吐温20)。
54.方面49中限定的药物组合物，其中所述另外的表面活性剂是聚山梨酯80。
55.方面49中限定的药物组合物，其中所述另外的表面活性剂是Solutol HS 15。
56.方面49中限定的药物组合物，其中所述另外的表面活性剂是d-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯。
57.方面49中限定的药物组合物，其中所述另外的表面活性剂是十四烷基-β-D-麦芽糖苷或n-十二烷基β-D-麦芽糖苷。
58.方面48-57中任一项限定的药物组合物，其中所述另外的表面活性剂的浓度为约5mg/L～约50g/L。
59.方面48-58中任一项限定的药物组合物，其中所述另外的表面活性剂的浓度为约50mg/L～约200mg/L。
60.一种用于治疗高血糖症的方法，所述方法包括胃肠外给予有效量的方面1-59中任一项限定的药物组合物。
61.方面60中限定的方法，其中所述药物组合物的所述有效量为约30μL/天～约600μL/天，例如约60μL/天～约360μL/天。
62.方面60-61中任一项限定的方法，其中给药是通过皮下注射。
63.方面60-62中任一项限定的方法，其中给药是通过泵。
64.方面60-63中任一项限定的方法，其中给药是通过泵，所述泵递送不连续量的所述药物组合物。
65.方面64中限定的方法，其中所述药物组合物的所述不连续给药是通过脉冲给药一段时间，这段时间不长于两次脉冲之间的时间。
66.方面1-59中任一项限定的药物组合物，用作药物。
67.方面66中限定的药物组合物，用作皮下注射的药物。
68方面66中限定的药物组合物，用作通过泵给药的药物。
69.方面66或68中限定的药物组合物，用作通过泵给药的药物，所述泵递送不连续量的所述药物组合物。
70.方面66中限定的药物组合物，用作不连续给药的药物，所述药物的不连续给药通过脉冲给药一段时间，这段时间不长于两次脉冲之间的时间。
71.方面66中限定的药物组合物，用作治疗高血糖症的药物。
72.方面66中限定的药物组合物，用作治疗暴食症或贪食症的药物。
实验方法
萤光素酶测定法(I)
1.胰岛淀粉样多肽测定法概要
以前的研究(Poyner DR等，2002，Pharmacological Reviews 54(2)233-246)公开了胰岛淀粉样多肽所致的胰岛淀粉样多肽受体的活化(降钙素受体和受体活性调节肽RAMP共表达)，导致cAMP胞内浓度增加。因此，转录在含有多拷贝cAMP反应元件(CRE)的启动子下被激活。因此，通过使用CRE萤光素酶报道基因来测定胰岛淀粉样多肽活性是可行的，所述CRE萤光素酶报道基因被引入到还表达胰岛淀粉样多肽受体的BHK细胞中。
2.胰岛淀粉样多肽3(a)/CRE-luc细胞系的构建
用人降钙素受体(CTa)和CRE反应性萤光素酶报道基因(CRE-responsive luciferase reportergene)来稳定转染BHK570细胞系。采用标准方法，用RAMP-3进一步转染所述细胞系。这会使降钙素受体转变为胰岛淀粉样多肽3(a)受体。甲氨蝶呤、新霉素和潮霉素分别是萤光素酶、降钙素受体和RAMP-3的选择标记。
3.胰岛淀粉样多肽萤光素酶测定法
为了进行活性测定，将BHK胰岛淀粉样多肽3(a)//CRE-luc细胞接种在白色96孔培养板上，密度约为20,000个细胞/孔。这些细胞是在100μl生长培养基(DMEM，其中含有10％FBS、1％青霉素/链霉素、1mM丙酮酸钠、250nM甲氨蝶呤、500μg/ml新霉素和400μg/ml潮霉素)中。在37℃和5％CO2下孵育过夜后，将生长培养基更换为50μl/孔的测定培养基(DMEM(无酚红)、GlumamaxTM、10％FBS和10mMHepes，pH 7.4)。此外，加入溶于测定缓冲液中的50μl/孔标准品或样品。在37℃和5％CO2下孵育4小时后，取出标准品或样品的测定培养基并更换为100μl/孔PBS。此外，加入100μl/孔LucLiteTM。将各板密封并在室温下孵育30分钟。最后，在TopCounter(Packard)上用SPC(单光子计数)模式测量发光。
测定法(II)：用于评价蛋白质制剂物理稳定性的ThT原纤维形成测定的概论
肽的物理稳定性低下可导致淀粉状蛋白原纤维形成，在样品中观察到的这样的原纤维是井然有序的线状大分子结构，并最终导致凝胶的形成。传统上通过肉眼检查样品来衡量。然而，这种衡量是非常主观的并取决于观察者。因此，应用小分子指示探针要有利得多。硫黄素T(ThT)便是这样一种探针，当与原纤维结合时具有明显的荧光信号[Naiki等(1989)Anal.Biochem.177，244-249；LeVine(1999)Methods.Enzymol.309，274-284]。
用具有下列表达式的S形曲线可描述原纤维形成的时程[Nielsen等(2001)Biochemistry 40，6036-6046]：
F = f i + m i t + f f + m f t 1 + e - [ ( t - t 0 ) / τ ] 等式(1)
这里，F是在时间t时的ThT荧光。常数t0是达到最大荧光的50％所需要的时间。描述原纤维形成的两个重要参数是用t0-2τ计算出的滞后时间和表观速率常数kapp＝1/τ。
Figure GPA00001138589400212
有研究提出，肽的部分折叠中间体的形成作为通用的原纤维形成的起始机制。这些中间体中的少数成核而形成模板，而更多中间体可装配在其上并且原纤维形成继续进行。滞后时间相当于建立临界量的核的间隔时间，而表观速率常数则是原纤维本身形成的速率。
样品制备
每次测定之前都要新制备样品。每个实施例中都描述了每种样品的组成。样品的pH用适量的浓NaOH和HClO4或HCl调节至期望值。将硫黄素T由溶于H2O中的母液加到样品中至终浓度为1μM。
取200μl的等分样品加到96孔微量滴定板(PackardOptiPlateTM-96，白色聚苯乙烯)中。通常，将各样品一式4份或8份(相当于一个试验条件)加到一列孔中。该板用Scotch Pad(Qiagen)密封。
孵育和荧光测量
在给定温度下孵育、振荡并在Fluoroskan Ascent FL荧光读板仪或Varioskan读板仪(Thermo Labsystems)中对ThT荧光发射进行测定。调节温度至37℃。在提供的全部数据中，定轨振荡都被调节至960rpm，振幅为1mm。使用通过444nm滤色片的激发光并测定通过485nm滤色片的发射光，进行荧光测定。
每轮一开始都是在测定温度下孵育该板长达10分钟。在所需时间周期，每隔20分钟测量该板一次。每次测量之间，按照所述，将该板振摇和加热。
数据处理
将测量点数据保存在微软Excel格式中，用于进一步处理，并用GraphPad Prism进行曲线绘制和拟合。忽略原纤维不存在时来自ThT的背景发射。数据点通常是4份或8份样品的平均值，并给出标准偏差误差棒(standard deviation error bar)。只有同一实验所得数据(即在同一板上的样品)才显示在同一图表中，以确保各实验间原纤维形成的相对度量。
数据集可拟合到等式(1)。然而，因为在这种情况下，在测量期间并非总能达到完全S曲线，所以原纤维形成的程度表示为按照不同时间点的样品平均值的ThT荧光表并给出标准偏差。
起始浓度和终浓度的测定
在ThT原纤维形成实验中应用之前(“起始”)和在ThT原纤维形成完成之后(“ThT实验后”)，测定了各个受试制剂的肽浓度。使用普兰林肽标准作为参比，通过反相HPLC方法对浓度进行了测定。在完成之后测定之前，从各重复试验中收集150μl，并转移到Eppendorf管中。将其以30000G离心40分钟。将上清液通过0.22μm滤器过滤后，应用到HPLC系统中。
实施例
实施例1
采用ThT原纤维形成实验，对类似于市售Symlin
Figure GPA00001138589400231
制剂的普兰林肽制剂的物理稳定性进行了评价，参见图1。制剂A由150μM普兰林肽、4.5mM乙酸钠、25.5mM乙酸、236mM甘露醇、20mM间甲酚组成，调节至pH 4.0。在所采用的条件下，制剂对于原纤维形成是无效的，因为没有出现ThT荧光信号。
实施例2
在生理pH下配制普兰林肽导致产生物理上不稳定的制剂。采用ThT原纤维形成实验表明了这一点，参见图2。在某些时间点上4种制剂的ThT荧光如下：
                    5小时 SD   20小时  SD   40小时  SD
制剂B               159   32   195     37   203     43
制剂B+1.0mM DMPG    28    0    322     81   287     73
制剂B+3.0mM DMPG    24    0    23      0    23      0
制剂B+5.0mM DMPG    23    1    24      2    41      36
制剂B由100μM普兰林肽、174mM甘油、30mM苯酚、8mM甘氨酰甘氨酸(pH 7.4)组成。该制剂几乎立即开始原纤维形成。将1.0mM DMPG加到制剂B中改进了稳定性，在约5小时的滞后时间后，开始原纤维形成。在制剂B中，将DMPG浓度增加到3.0mM，导致制剂对于原纤维形成是无效的，因为在测量期间没有出现ThT荧光信号。具有DMPG加至5.0mM的制剂B，在约22小时的滞后时间之后，才显示出少量ThT荧光，这比起无DMPG的制剂B显著延长。
实施例3
按上文“起始浓度和终浓度的测定”中所述，测量了肽的起始浓度和在完成ThT原纤维形成实验之后的浓度。对于制剂A按照实施例1中所述方法进行，不含DMPG和含有DMPG的4种制剂B按照实施例2中所述方法进行。结果见图3柱状图以及下表：
Figure GPA00001138589400241
在完成ThT实验之后，制剂A中回收的普兰林肽超过93％，尽管在该实验中运用了严重的胁迫条件。因此，ThT荧光的滞后与稳定的普兰林肽制剂的一致，肽的损失并非吸收或沉淀或其它方式引起。
在ThT实验中，不含DMPG的制剂B中，所有普兰林肽消失。在制剂B中将DMPG加至1mM，导致在ThT原纤维形成实验之后回收到初始普兰林肽的约40％。在制剂B中将DMPG浓度增加至3.0mM，导致在实验后回收到约100％的普兰林肽，这就表明了ThT荧光的滞后不是由于通过其它方式(例如吸收或沉淀)使肽损失所引起的。在DMPG加至5.0mM的制剂B中，在完成实验后回收到约100％的普兰林肽，尽管ThT信号非常弱。

Claims (9)

1.一种用于胃肠外给药的可溶性药物组合物，所述药物组合物包含胰岛淀粉样多肽类和阴离子表面活性剂，其中所述药物组合物或所述药物组合物的重配溶液的pH为pH6.0～pH8.5，所述阴离子表面活性剂是1，2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸-外消旋-(1-甘油)(DMPG)，所述胰岛淀粉样多肽类是Pro25 Pro28Pro29-h-胰岛淀粉样多肽，且其中所述阴离子表面活性剂的浓度范围为0.1mg/mL～4.0mg/mL。
2.权利要求1的药物组合物，其中所述阴离子表面活性剂的浓度范围为1.0mg/mL～4.0mg/mL。
3.权利要求1的药物组合物，其中所述阴离子表面活性剂的浓度范围为1.3mg/mL～3.4mg/mL。
4.权利要求1的药物组合物，其中所述药物组合物或所述药物组合物的重配溶液的pH为pH6.5～pH8.5。
5.权利要求4的药物组合物，其中所述药物组合物或所述药物组合物的重配溶液的pH为pH6.8～pH8.0。
6.权利要求4的药物组合物，其中所述药物组合物或所述药物组合物的重配溶液的pH为pH7.0～pH7.8。
7.权利要求4的药物组合物，其中所述药物组合物或所述药物组合物的重配溶液的pH为pH7.2～pH7.6。
8.权利要求1-7中任一项的药物组合物，其中所述组合物是溶液。
9.权利要求1-8中任一项的药物组合物在制备用于治疗高血糖症的药物中的用途。
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