CN101848894A - 新型抗凝血剂化合物、以其为基础治疗血栓形成病况的药物组合物,和用来纠正血液稀释的高凝血缺陷的血浆代用液 - Google Patents

新型抗凝血剂化合物、以其为基础治疗血栓形成病况的药物组合物,和用来纠正血液稀释的高凝血缺陷的血浆代用液 Download PDF

Info

Publication number
CN101848894A
CN101848894A CN200880104823A CN200880104823A CN101848894A CN 101848894 A CN101848894 A CN 101848894A CN 200880104823 A CN200880104823 A CN 200880104823A CN 200880104823 A CN200880104823 A CN 200880104823A CN 101848894 A CN101848894 A CN 101848894A
Authority
CN
China
Prior art keywords
plasma
blood
compound
hydrogen
thrombin
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN200880104823A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101848894B (zh
Inventor
埃琳娜·I·西诺里兹
法佐尔·I·阿陶拉卡诺夫
安德雷·A·巴蒂林
弗拉迪米尔·B·苏利莫夫
亚历克西·N·罗马诺夫
亚历克西·A·博戈莱伯夫
尤里·V·库兹涅索夫
伊里纳·V·格里布科瓦
亚历山大·S·戈巴坦科
奥尔加·A·康达科瓦
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
BIONIKA有限责任公司
OBSCHESTVO S OGRANICHENNOI OTVETSTTVENNOCTIYU 'BIONIKA'
Original Assignee
OBSCHESTVO S OGRANICHENNOI OTVETSTTVENNOCTIYU 'BIONIKA'
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by OBSCHESTVO S OGRANICHENNOI OTVETSTTVENNOCTIYU 'BIONIKA' filed Critical OBSCHESTVO S OGRANICHENNOI OTVETSTTVENNOCTIYU 'BIONIKA'
Publication of CN101848894A publication Critical patent/CN101848894A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101848894B publication Critical patent/CN101848894B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/08—Plasma substitutes; Perfusion solutions; Dialytics or haemodialytics; Drugs for electrolytic or acid-base disorders, e.g. hypovolemic shock
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/73—Unsubstituted amino or imino radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/38—Nitrogen atoms
    • C07D277/40—Unsubstituted amino or imino radicals

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及新型化合物、这些化合物作为抗凝血剂的应用、以其为基础的药物组合物和血浆代用液，可以用来治疗下列疾病中的血栓栓塞性并发症，如：心肌梗死、中风和深静脉或肺动脉的血栓形成；用来防止由于损伤、手术、败血症、多种产科病理、药灾、复苏等所造成的高凝血病况的发展。

Description

新型抗凝血剂化合物、以其为基础治疗血栓形成病况的药物组合物，和用来纠正血液稀释的高凝血缺陷的血浆代用液
本发明涉及新型化合物、这些化合物作为抗凝血剂(anticoagulants)的用途、以其为基础的药物组合物和血浆代用液(plasma-substituting solutions)，本发明可以用来治疗下列疾病中的血栓栓塞性(thromboembolic)并发症，如：心肌梗死、中风、深静脉或肺动脉的血栓形成，本发明还可以阻止由于损伤、手术、败血症、各种产科病理、药灾(in disaster medicine)、复苏(resuscitation)等所造成的高凝血(hypercoagulation)病况的发展。
止血系统中的异常会引起生物体产生大量不同种类的病理变化。由心肌梗死、中风、深静脉或肺动脉的血栓形成等疾病发展的血栓栓塞性并发症是世界上主要的致死原因。因此，并不惊讶于数年来进行了大量研究来开发能用作安全有效的临床药物的药品。尤其是发现了多种表出抗凝血剂性质的抗血栓形成剂。
凝血酶是凝血系统中重要的酶，其将可溶血浆蛋白“纤维蛋白素原”转化为不溶性纤维蛋白血凝块，同时向系统中发出大量正性和负性应答，激活凝血细胞(血小板)、凝血因子V、VIII和XIII以及蛋白C。凝血酶还启动了多种细胞和血管反应等，包括内皮细胞的增生、纤溶酶原激活因子的排出(ejection)等。考虑到凝血酶涉及大量的关键生物调节性活动(bioregulatory events)，针对凝血酶活性中心抑制凝血酶必然会非常有效，并且在控制多种病理生理学病症中提供更多前景。
有三种基本方法涉及止血系统以防止不期望的血栓形成——在凝血系列反应(clotting series)(首先，凝血酶和凝血因子Xa)中使用丝氨酸蛋白酶的直接和间接抑制剂；使用抗血栓形成制剂(拮抗剂GPIIb/IIIa、阿司匹林、凝血酶受体拮抗剂等)，它们减少凝血酶的聚集属性，因此防止进一步凝血；以及使用维生素K拮抗剂，它们减少凝血因子前体在肝脏中的合成。
目前在临床中使用的三种主要的抗血栓形成制剂——普通肝素(unfractionated heparin)、口服的抗凝血剂华法林(warfarin)(维生素K拮抗剂)和用作凝血细胞聚集抑制剂的阿司匹林。但是，这些制剂中的每一种在使用上都有局限，并且产生不期望的副作用。
普通肝素(UFH)是天然的阴离子型多糖，是重复二糖单元所构成的不同链长度多糖的混合物，所述二糖由糖醛酸(L-艾杜糖醛酸和/或D-葡糖醛酸)残基和D-葡糖胺残基组成。不同来源的肝素其分子量不同，为3000-5000至30000-40000道尔顿，峰值在12000至15000道尔顿之间。
普通肝素及其较轻(lighter)的类似物(低分子量肝素或LMWH)为间接抗凝血剂。它们本身不抑制凝血酶，而是只增强天然凝血抑制剂抗凝血酶III(ATIII)的作用。因此，如果出于某些原因患者血浆中的ATIII含量非常低的话，肝素的抗凝血剂作用就会弱。
普通肝素在用于临床实践中时，存在许多问题：
1.普通肝素的作用短暂，在从药物中释出后很快就清除，并且UFH不能降低血栓形成事件复发的风险。
2.肝素间接地发挥抗血栓形成作用，并且为了完全表现该作用，其必须在系统中存在抗凝血酶时使用。
3.肝素只针对循环凝血酶(circulating thrombin)呈现活性，并且几乎不抑制吸附在血凝块上的凝血酶。
4.同样剂量的肝素在不同的患者中具有不可预测的响应，原因很多，包括血浆中的ATIII水平、单次制剂注射速率、不同血浆蛋白以及激活的凝血细胞(血小板因子3、肝素酶等)作用下的肝素结合及中和。这要求以频繁的间隔监控凝血系统的状态。
5.出血性并发症的风险和血小板减少的可能性。
6.长期以肝素治疗(超过6个月)和过高的肝素剂量(＞15000单位)可能会并发骨质疏松症。
7.在医院条件下，肝素只能经静脉内注射。
(华法林类型的)维生素K拮抗剂也是间接凝固抑制剂。这类制剂对凝血系统的作用机制是由于其有效地阻断维生素K依赖的凝血因子在肝脏中合成的能力。因子前体(future factor)N末端的翻译后γ-羧基化对于合成凝血因子分子是重要的。凝血因子分子要在凝血期间结合(通过Ca2+离子)至激活的凝血细胞的带负电荷的磷脂表面并完成其功能，羧基化是绝对必需的。维生素K是重要的羧基化辅助因子。反应期间，该因子在其羟基-醌形式和其氧化的环氧形式之间交替变化，其羟基-醌形式实际上涉及羧基化反应。在维生素K还原酶的作用下，环氧形式分子被还原，并被再次引入羧基化反应中。香豆素类(group)中的制剂阻断还原反应。
华法林也具有一些局限和缺陷。首先是对治疗的响应慢。其在给药24小时后首次观察到响应，并在数天内发挥最强作用。除此之外，该制剂牢固地结合至各种食品成分，并且明显与许多药品交叠(overlapped)。在华法林代谢酶的活性方面还存在很大的遗传变异性。这解释了华法林的作用具有显著的个体差异性，因此华法林接受者要求某些饮食限制和全身性监控。
如上所述，抗血栓形成制剂(阿司匹林、GPIIb/IIIa拮抗剂等)阻碍凝血细胞的完全激活及其对增强凝血反应的贡献，对凝血酶的连续产生施加约束。但是，它们不影响已经形成的凝血酶的作用。
总之，上述的所有标准抗血栓形成剂，每一种都具有其自身的缺陷。其中一些不是直接凝血酶，要求抗凝血酶III(UFH或LMWH)存在于血浆中才能起作用，或者仅能缓慢的发挥作用，抑制重要凝血因子的合成(华法林等)，而另一些(抗血栓形成剂)不会影响已经形成的凝血酶。这解释了为什么多年来持续努力地寻找具有大部分相同的功效但不具有这些标准制剂的许多缺陷的“理想的”的抑制剂。
在这个意义上非常吸引人的是开发起抗凝血剂作用的小型合成凝血酶的策略。这些抑制剂对血液中存在的凝血酶具有快速直接的作用，燃起了有效控制急性血栓形成并发症(甚至血浆中缺乏ATII)的希望。
这个在凝血系列反应(clotting series)中寻求新的合成的直接的丝氨酸蛋白酶抑制剂的策略关注于满足下列要求，从而预期这些抑制剂可达到满意的效果：
●对靶酶的高度亲和性(即，高抑制功效)。
●与其他相关丝氨酸蛋白酶相比，对靶酶的高度选择性。
●化学和代谢稳定性。
●没有毒性。
●对血浆蛋白的结合弱(或不是很强)。
●当经口给药时的生物利用度高。
●制剂的半衰期较长，当经口给药时，血浆中的治疗剂水平保持在某一水平，一天摄入一或两次制剂便足以达到该水平。
●简单监控制剂水平的可能性。
在撰写本文使已经有许多致力于开发低分子量凝血酶抑制剂的研究发表(Shafer J.A.，Cardiovascular Chemotherapy：Anticoagulants，Curr.Opin.Chem.Biol.，1998，2：458-465；Steinmetzer T.，Hauptmann J.，Sturzebecher J.，Advances in the Development of Thrombins，Exp.Opin.Invest.Drugs，2001，10(5)：845-864；Edmunds JJ，Rapundalo ST，Siddiqui MA，Thrombin and FactorXa Inhibition，Ann.Rep.Med.Chem.，1996，31：51-60；Wiley M.R.，Fisher M.J.，Small Molecule Direct Thrombins，Expert Opin.Ther.Patents，1997，7：1265-1282；Hauptmann J，Sturzebecher J.，Synthetic Inhibitors of Thrombinand Factor Xa：from Bench to Bedside，Thromb.Res.，1999，93(5)：203-241；Vacca JP.，New Advances in the Discovery of Thrombin and Factor XaInhibitors，Curr.Opin.Chem.Biol.，2000，4(4)：394-400)。
但是，基于新型化合物开发药物除了要求评估其可能的药理学作用外，还要求仔细测试制剂的毒理学性质以及制剂对遗传的可能影响，并鉴别使用该制剂的其他长期后果。
该任务较为复杂是基于这样的事实：每种在缓冲水溶液中降低凝血酶活性的抑制剂在生物体中并不都能用作控制血液凝固的真正抗凝血剂。这可能会与例如抑制机制有关。特别地，除非抑制剂是竞争性的，酶活性不会被完全抑制，即使血浆凝血酶的全部100％的活性中心结合至这种抑制剂时也如此。残余凝血酶活性会足够低，但是在一些情况下，其在血浆中不会被天然凝血酶——ATIII完全抑制。这种现象的发生是由于凝血酶分子结合至这种抑制剂时，其构象发生了改变，这种改变阻止ATIII接近活性凝血酶中心。因此，血液继续长时间暴露在残余的凝血酶活性中，整体(integral)凝血反应不仅没有降低，甚至会因为这种化合物存在于生物体中而最终增强。如果有前景的凝血酶抑制剂与凝血系统的其他成分反应(各凝血因子或凝血抑制剂)，那么该系统的最终响应也不可能提前预测。抑制剂和各种血浆蛋白之间的强的结合会大大增加为了实现所期望的抗凝血效果而必须向生物体给药的剂量。
考虑到上文所述，很清楚为什么目前获得了如此大量的能够抑制凝血酶的合成化合物，但是只有一种——阿加曲班(Argatroban)(在日本合成的凝血酶抑制剂)——通过所有必要的测试并且事实上批准用于临床实验(美国专利5,214,052，1993；Schwarz R.P.，The Preclinical and Clinical Pharmacologyof Novastan(Argatroban)，见：“New Anticoagulants for the CardiovascularPatient，”Pifarre R.，编辑，Hanley and Belfus，Inc.，Philadelphia，PA，U.S.，1997，pp.231-249；Okamoto S，Hijikata A，Kikumoto R，Tonomura S，Hara H，Ninomiya K，Maruyama A，Sugano M，Tamao Y.，Potent Inhibition of Thrombinby the Newly Synthesized Arginine Derivative No.805.The Importance ofStereo-Structure of its Hydrophobic Carboxamide Portion，Biochem.Biophys.Res.Commun.1981，101(2)：440-446)。
在合成的低分子量凝血酶抑制剂中寻找新的抗凝血剂仍热是艰巨的挑战。
这些抑制剂可以直接用作抗凝血剂来治疗因各种病理学原因在生物体中引起的急性血栓形成病况。
除此之外，它们也可用来防止高凝固性(hypercoagulability)。本发明建议使用在血浆中具有抗凝血活性的合成的低分子量凝血酶抑制剂，将其加入标准的血浆代用液。
临床中常见的情况要求大量的失血快速被人造血浆代用液(PSS)置换。失血是由损伤、手术、败血病、各种产科病理、药灾、复苏等造成的。
本发明寻求下列基本目标：
1.置换一定量的循环血(circulating blood)(VCB)以保持动脉压和心输出量，防止血管塌陷，以及保持血液的正常流变学特性和器官及组织的正常灌注。
2.保持血浆的正常胶态渗透压及其酸碱平衡。
3.保持血液的氧气输送功能和凝血系统功能。
为了实现前两个目标，通常是输液各种血浆代用液和清蛋白溶液。输送氧气的功能通过输液红细胞、修饰的血红蛋白或perfluorans的载氧溶液(oxygen-enduring solutions)来实现，凝血系统功能通过输液新鲜冷冻的血浆(FFP)、凝血细胞浓缩物或浓缩的凝血酶原复合物因子或单独的凝血因子来维持。
人造血浆代用液分成两类：晶样体(crystalloidal)和胶体(colloidal)。第一类是盐溶液(例如，0.9％NaCl溶液，生理盐水)，第二类含有高分子量聚合物添加剂(葡聚糖、羟乙基淀粉、明胶衍生物等)。
大体积输注标准PSS导致血液被这些溶液稀释(血液稀释)。因为目前使用的标准血浆代用液都不合凝血因子和抑制剂，所以血液稀释降低了血液中凝血系统组分的浓度。已经发现大量输液标准PSS引起的血液稀释使凝血系统失去平衡并且加剧了凝血。其发生是因为稀释使系统对凝血抑制剂浓度的降低更敏感，而凝血因子的促凝血前体在血浆中即使明显过量至中度稀释不会造成其浓度的降低的范围，也不会对凝血速率产生任何可观察到的作用。为了纠正(correct)可能由大量PSS输液造成的高凝血病症，本发明的发明人已经开发出一种新型PSS，其包括天然凝血酶抑制剂、抗凝血酶III(俄罗斯专利，申请号2005140841，2005年12月27日的审查意见通知书)。其要求保护的溶液是能够部分纠正由大量PSS输液造成的高凝血病症的新一代血浆代用液的先驱。该溶液绝非最佳选择，因为抗凝血酶III是一种天然蛋白质，必须从人血浆中提取。因此，这是相当昂贵的，并且不能排除制剂受到病毒(HIV、肝炎等)感染的可能性。合成的低分子量凝血酶抑制剂，一种抗凝血剂，可以是抗凝血酶III的一个不错的备选方案。
根据下列标准选择在起抗凝血剂作用的实际应用方面吸引人的化合物，即能够延缓和/或防止血液凝固的化合物：
1.该物质必须为凝血酶抑制剂，即，能够防止凝血酶催化的酰胺水解反应(amidolytic reaction)，在该反应中纤维蛋白原分子被分解。
2.该物质必须具有可接受的物化特性(亲脂性和亲水性)从而以足够浓度的未结合态存在于血浆中。换句话说，该物质必须适当地结合至其他血浆蛋白(清蛋白、球蛋白等)。
3.该物质在血浆中必须具有足够长的寿命以展示其固有的治疗作用。
根据第一个标准分两步进行选择。首先，构建以结构通式(I)所描述的结构为中心的虚拟库，并且将所得到的结构对接至凝血酶分子的活性中心中。在第一步结束时，选择最有可能的有前景分子(“虚拟匹配(virtual hits)”)，即，记录评分功能读数(在对接过程中测量)至少好为-5.0kcal/mole的分子。第二选择步骤包括测量前述选择的化合物在缓冲水溶液中对凝血酶活性的直接抑制作用，其中凝血酶分解特定的产色(或者产荧光)的底物。底物分解反应速率在存在抑制剂时减慢。式(I)化合物，即使以足够小的浓度(＜1mM)使用，也抑制缓冲液中的凝血酶活性至超过60％，选择这样的式(I)化合物用于后续的在血浆中对新化合物进行的抗凝血剂作用的测试。
在生物体内为有效抗凝血剂的新型凝血酶抑制剂分子以这种方式构建，以赋予抑制剂分子可接受的对良好的药物代谢动力学有贡献的理化属性：优选通过选择亲水性连接基使式(I)抑制剂分子作为整体的疏水性偏离平衡(balance off)至一定程度。出于相同的目的，可以用沉积在接触溶剂侧的口袋中的亲水性残基来修饰沉积在凝血酶分子口袋S3中的疏水性片段。
在血浆中足够的寿命可以通过保持抑制剂结构不合不稳定化学基团来实现，这些不稳定化学基团在化学或生化过程中很容易分解。例如酯基，是这种不希望的基团的实例。
总之，可以选择满足上述标准最好的分子(即使有时存在矛盾)进行化学合成，并接着作为抗凝血剂进行实验测试。
考虑到合成方法可能的复杂性最终决定合成方法。
除非另外说明，在本说明书中使用下列定义：
“活性中心”是蛋白质大分子在生物化学反应中起重要作用的区域。
“蛋白质”指蛋白质大分子。
“靶蛋白”指结合过程中所涉及的蛋白质大分子。
“配体”指低分子量化学结构的集合。
“结合过程(Binding process)”指配体与靶蛋白活性中心之间形成范德华力或共价键复合(complex)。
“筛选”指在化学结构的集合中鉴定一组选择性地与蛋白质大分子的特定区域发生反应的化合物。
“定位(Correct positioning)”指将配体置于某个位置以使得蛋白质结合能(minimum free protein binding energy)最小。
“选择性配体”指以特异性方式结合至特定靶蛋白的配体。
“参照蛋白质(Reference protein)”指根据实验数据或在操作系统校验(Validation)期间用于调节评分参数的蛋白质，或者指用于评估特定抑制剂的结合特异性的蛋白质。
“校验(Validation)”指一系列计算和比较方法，其用于评估系统在运行时的质量，以及从可靠结合至给定靶蛋白的配体的随机组中选择配体的系统的效率。
“特异性结合的配体”指仅与特定蛋白质结合而不与任何其他蛋白质结合的配体。
“抑制剂”指结合至特定靶蛋白的活性中心并阻断生化反应正常过程的配体。
“对接”指配体在蛋白质活性中心中的定位。
“评分(Scoring)”指评估结合配体至蛋白质所需自由能的计算。
“ΔG结合(ΔG binding)”指配体结合至靶蛋白所需的最终自由能计算增益(free energy calculation gain)(使用SOL软件)。
“C1-6烷基”指含有具有1至6个碳原子的、无支链或支链烃链的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基等。
“C1-6烷氧基”指含有具有1至6个碳原子的、无支链或支链烃链的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基等。
“卤素”指氯、溴、碘或氟。
“可药用盐”指由式(I)活性化合物制备的任何盐，除非其为毒性的或抑制该活性化合物的吸收和药理作用。这种盐可以通过式(I)化合物和有机碱或无机碱之间的反应制备，有机碱或无机碱例如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、甲胺、乙胺等。
“溶剂化物”指式(I)活性化合物的结晶形式，其晶格含有水或其他溶剂的分子，式(I)活性化合物在这些水或其他溶剂中结晶。
“可药用载体”指必须与组合物的其他成分相容并且对接受者无害(即在在所使用的剂量和浓度上对细胞或哺乳动物无毒)的载体。可药用载体经常为pH缓冲水溶液。生理学上可接受的载体的实例包括：缓冲剂，如磷酸盐、柠檬酸盐或其他有机酸的盐；抗氧化剂，包括抗坏血酸、低分子量(少于10个残基)的多肽；蛋白质类，如血清清蛋白、明胶或免疫球蛋白类；亲水性聚合物，如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸，如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、精氨酸或赖氨酸；单糖类，二糖类，和其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂，如EDTA；糖醇，如甘露糖醇或山梨糖醇。
“治疗有效量”指用来在哺乳动物生物体内实现期望的治疗效果(即期望的血栓形成抑制程度)所需的量。
“哺乳动物”在本文中所使用的含义包括灵长类动物(例如人类、类人猿猿类(anthropoid apes)、非类人猿猿类动物(non-anthropoid apes)和低等猴类)、食肉类动物(predators)(例如猫、犬和熊)、啮齿类动物(例如小鼠、大鼠和松鼠)、食虫类动物(例如鼩鼱(shrew)和鼹鼠)，等等。
本发明人要解决的实际问题通过开发表现出高度抗凝血剂活性的新型低分子量化合物得以实现。
本文公开了一系列这类表现出高度抗凝血剂活性的新型低分子量化合物，具体地，公开了结构通式(I)的化合物，及其可药用盐或溶剂化物：
A-B-C    (I)，
其中C选自下列结构：
Figure GPA00001037515900091
其中R1、R2、R3和R4彼此独立地为氢或C1-6烷基；
B为-(CH2)n-，其中n为1至5的整数；及
A选自下列结构：
Figure GPA00001037515900101
其中R5选自氢、C1-6烷氧基、CH2NR10R11和CH(CH3)NR10R11，
Figure GPA00001037515900102
其中R6和R7彼此独立地为氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基或卤素；
R8为氢或C1-6烷基；
R9选自：
R10和R12彼此独立地选自氢、C1-6烷基、(CH2)mCOOR13和(CH2)mCON(R13)2，
Figure GPA00001037515900111
其中m为1至4的整数，
R13为氢或C1-6烷基，
R11为C1-6烷基或Ar，
Ar为苯基、吡啶基，噁唑基、噻唑基、噻吩基、呋喃基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、吲哚基、苯并呋喃基或苯并硫代苯基，它们具有1至5个选自下列的取代基：
氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、N(R13)2、OH、NO2、CN、COOR13、CON(R13)2和SO2R13；
所述结构通式(I)的化合物排除下列化合物：
Figure GPA00001037515900112
从这一组化合物中排除的化合物是已知的，具体而言，4-氨基-1-[3-[(2-甲基苯基)氨基]-3-氧代丙基]吡啶鎓氯化物记载于Journal of MedicinalChemistry，17(7)，739-744，1974，“Carbocyclic Derivatives Related toIndoramin”中；4-氨基-1-(2-苯氧基乙基)-吡啶溴化物记载于Joumal ofOrganic Chemistry，26，2740-7，1961，“Application of Sodium BorohydrideReduction to Synthesis of Substituted Aminopiperidines，Aminopiperazines，Aminopyridines，and Hydrazines”中。尽管如此，值得注意的是，这些文献并没有提到所述化合物用作血栓形成抑制剂的可能性。
本发明优选的实施方式公开了了下面的权利要求1的化合物及其可药用盐或溶剂化物：
a)
Figure GPA00001037515900121
b)
Figure GPA00001037515900122
c)
Figure GPA00001037515900123
其中Y选自氢、卤素、COOR13、CON(R13)2和SO2R13；以及
R为2至5的整数。
本文还公开了给药式(I)化合物及其可药用盐或溶剂化物作为抗凝血剂用于治疗和预防各种血栓形成病况，以及公开了用于治疗血栓形成病况的药物组合物，该药物组合物含有治疗有效量的权利要求1的化合物和/或其可药用盐和/或溶剂化物和可药用载体。
本文公开了新型的血浆代用液(PSS)，其含有式(I)化合物及其可药用盐或溶剂化物作为抗凝血剂。该溶液通过将式(I)化合物及其可药用盐或溶剂化物加至标准血浆代用液来制备。添加的抗凝血剂的浓度取决于其抑制能力，并且对于不同的化合物可在大范围(0.01nM至1mM)内变化。含有抗凝血剂的溶液能够部分地纠正在生物体中由于大量输液不含凝血因子(更重要的是不合凝血抑制剂)的标准血浆代用液所造成的高凝病症。含有人造的合成的低分子量抗凝血剂的新型PSS大大优于含有天然凝血酶抑制剂ATIII的相似的溶液，这是因为前者含有不是很昂贵的标准抑制剂代替昂贵的天然蛋白质(ATIII)，并且在PSS输注期间不具有病毒感染的威胁。
本发明的化合物能以任何导致它们在血液中生物累积的合适方式给药。这可以通过肠胃外给药方法实现，包括静脉内、肌肉内、皮内、皮下和腹膜内注射。也可以使用其他给药方法，例如通过经口施用合适的组合物经胃肠道吸收。经口使用因为其使用简单是优选的。或者，药物可以通过阴道和直肠肌肉组织给药。此外，本发明的化合物可以经皮肤注射(例如，经皮)或者吸入给药。可以理解的是，优选的给药方法取决于患者的状况、年龄和敏感性。
对于经口给药，药物组合物可以与可药用添加剂一起封装成例如片剂或胶囊剂，可药用添加剂如结合剂(例如，胶溶的玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮或羟丙基甲基纤维素)；填料(例如，乳糖、微晶纤维素、磷酸氢钙；硬脂酸镁、滑石粉、或氧化硅；土豆淀粉或淀粉状羟乙酸钠)；或者湿润剂(例如，月桂基硫酸钠)。片剂可以经包衣。液体口服制剂可以制备成例如溶液剂、糖浆剂、混悬剂的形式。这类液体组合物可以通过常规方法使用可药用添加剂得到，可药用添加剂如助悬剂(例如，纤维素衍生物)；乳化剂(例如，卵磷脂)；稀释剂(纯化的植物油)；和防腐剂(例如，甲基或丙基-n-羟基苯甲酸酯或山梨酸)。该组合物还可以含有合适的缓冲盐、调味剂、色素和甜味剂。
使用标准的药学方法在实验动物上测量LD50(致死50％的实验动物的剂量)以测定这些凝血酶抑制剂的毒性。对于本发明优选的化合物，LD50剂量超过367mg/kg，这与临床测试后的阿加曲班的致死剂量(LD50＝475mg/kg)相一致。
为了更全面的理解本发明的主题，下文给出了若干实施例以解释该新型化合物的制备方法以及用来研究这些化合物的抗凝血剂活性的方法和这些研究的结果。这些实施例仅为示意性的，本发明的思想并不受到下面所给实施例的范围的限制。
实施例1
中间体产物3-(3-氯代丙氧基)-5-甲酚的合成
将3.8g(27mmol)的地衣酚(orcin)水合物、4.8g(30mmol)的1-溴-3-氯丙烷和4.0g(29mmol)的碳酸钾的混合物在30ml的乙腈于中搅拌下沸煮36小时。然后将反应混合物蒸发，溶解在30ml的乙醚中，用15ml的饱和碳酸钾溶液洗涤两次，弃去水层，并用15ml的10％氢氧化钠溶液萃取乙醚层3次。弃去乙醚层，将水层用浓HCl小心地酸化，然后用15ml的乙醚萃取3次。合并乙醚萃取物，并用少量饱和碳酸氢钠溶液洗涤，用无水硫酸钠干燥，用约1/3份(体积)的己烷稀释，经一层硅胶过滤。蒸发得到1.7g的黄色油状物，为约70％的地衣酚(Rf0.10)和约30％的3-(2-氯代丙氧基)-5-甲酚(Rf0.26，得到约1.2g(22％的纯物质))的混合物。
使用类似的方法从地衣酚水合物和1-溴-2-氯乙烷制备3-(2-氯代乙氧基)-5-甲酚(Rf 0.26，得到约1.1g(20％的纯物质))，从地衣酚水合物和1-溴-4-氯丁烷得到3-(4-氯代丁氧基)-5-甲酚。
实施例2
中间体产物2-氟代苯磺酸的3-(3-氯代丙氧基)-5-甲基苯基酯的合成
Figure GPA00001037515900142
将2.05g(10mmol)的氟代苯磺酰氯和1.1g(11mmol)的三乙胺加入1.3g实施例1A的混合物在30ml干燥四氢呋喃(THF)中的溶液。搅拌混合物6小时，过滤掉三乙基氯化铵沉淀并蒸发。将所得油状物溶解在20ml的乙醚中，并以10ml的约10-12％的氨水溶液洗涤数次以分离过量的未反应的苯磺酰氯(由薄层色谱(TLC)控制)，然后用10ml的约20％的盐酸洗涤。用无水硫酸钠干燥，并蒸发得到2.4g的浅黄色油状物，为目标产物与二苯磺酰化的(dibenzene-sulfonylated)地衣酚的混合物，两者比率约为2∶1，产量以纯目标产物计算为1.6g(根据反应为97％)(Merck plate 60的TLC，己烷-乙酸乙酯2∶1。Rf0.35-产物，Rf0.25-二苯酯杂质)。
类似地，3-(2-氯代乙氧基)-5-甲酚、3-(3-氯代丙氧基)-5-甲酚和3-(4-氯代丁氧基)-5-甲酚和合适的芳基磺酰氯得到：
2-氯苯磺酸的3-(3-氯代丙氧基)-5-甲基苯基酯(77％的纯物质)
苯磺酸的3-(3-氯代丙氧基)-5-甲基苯基酯(60％)
2-甲酯基苯磺酸的3-(3-氯代丙氧基)-5-甲基苯基酯(56％)
苯磺酸的3-(2-氯代乙氧基)-5-甲基苯基酯(72％)
2-氯苯磺酸的3-(2-氯代乙氧基)-5-甲基苯基酯(35％)
2-氟苯磺酸的3-(2-氯代乙氧基)-5-甲基苯基酯(34％)
2-甲酯基苯磺酸的3-(2-氯代乙氧基)-5-甲基苯基酯(37％)
苯磺酸的3-(4-氯代丁氧基)-5-甲基苯基酯(45％)
2-氯苯磺酸的3-(4-氯代丁氧基)-5-甲基苯基酯(27％)
2-氟苯磺酸的3-(4-氯代丁氧基)-5-甲基苯基酯(32％)
2-甲酯基苯磺酸的3-(4-氯代丁氧基)-5-甲基苯基酯(21％)。
实施例3
中间体产物2-氟苯磺酸的3-(3-碘代丙氧基)-5-甲基苯基酯的合成
Figure GPA00001037515900151
将2g(13mmol)的煅烧过的碘化钠加入2.4g先前实验(2A)的混合物在30ml干燥丙酮中的溶液中，并沸煮27小时。然后，用10ml的己烷稀释反应混合物，过滤并蒸发。将所得深黄色油状物溶解在20ml的乙醚-己烷混合物(2.3g)中，经硅胶层(2cm，Lancaster)过滤，并蒸发。产物为2.45g的黄色油状物，含有2-氟苯磺酸的3-(2-碘代乙氧基)-5-甲基苯基酯(Rf0.35)和地衣酚的相应二苯甲酰基磺基酯(Rf0.25)。
使用类似的技术将合适的氯化物制备成：
苯磺酸的3-(3-碘代丙氧基)-5-甲基苯基酯
2-氯苯磺酸的3-(3-碘代丙氧基)-5-甲基苯基酯
2-甲酯基苯磺酸的3-(3-碘代丙氧基)-5-甲基苯基酯
苯磺酸的3-(2-碘代乙氧基)-5-甲基苯基酯
2-氯苯磺酸的3-(2-碘代乙氧基)-5-甲基苯基酯
2-氟苯磺酸的3-(2-碘代乙氧基)-5-甲基苯基酯
2-甲酯基苯磺酸的3-(2-碘代乙氧基)-5-甲基苯基酯
苯磺酸的3-(4-碘代丁氧基)-5-甲基苯基酯
2-氯苯磺酸的3-(4-碘代丁氧基)-5-甲基苯基酯
2-氟苯磺酸的3-(4-碘代丁氧基)-5-甲基苯基酯
2-甲酯基苯磺酸的3-(4-碘代丁氧基)-5-甲基苯基酯。
实施例4
4-氨基-1-(3-(3-甲基-5-(2-氟代苯磺酰基氧基)苯氧基)丙基)-吡啶鎓碘化物(HC_029s_IOC)的合成
Figure GPA00001037515900161
0.65g的“碘化物粗产物”(来自实验3A)(以70％的活性物质计算)和0.09g(0.95mmol)的4-氨基吡啶的混合物在10ml的干燥二氧六环中沸煮20小时。混合物冷却后，蒸发溶液，所得油状物用若干份乙醚研磨直到变成固体。滤除固体沉淀物并以二氧六环和乙腈(5∶1)的混合物重结晶，过滤出盐沉淀物，并用乙醚洗涤。真空干燥得到0.4g(72％)的浅米色盐，含有约4-5％的未鉴定出的杂质。从相同的系统再次重结晶该物质以除去杂质，得到0.25g的浅色粉末。
使用类似技术将合适的碘化物和杂环化合物、硫脲和硫脲衍生物制备成：
4-氨基-1-(3-(3-甲基-5-(苯磺酰基氧基)苯氧基)丙基)-吡啶鎓碘化物(HC_016s_IOC)
Figure GPA00001037515900171
产率78％。
NMR1H(Bruker DRX500，500MHz，DMSO-d6，m.d.，JHz)：2.20s，3H；3.88t，2H，J＝5.50；2.16m，2H，J＝6.11；4.25t，2H，J＝6.71；6.31s，1H，6.44s，1H，6.66s，1H；7.68t，2H，J＝7.94，7.82t，1H，J＝7.94，7.87d，2H，J＝7.32；6.81d，2H，J＝6.72，8.17d，2H，J＝6.72；8.09s，2H
2-氨基-1-(3-(3-甲基-5-(苯磺酰基氧基)苯氧基)丙基)-噻唑鎓碘化物(HC_017s_IOC)
Figure GPA00001037515900172
产率65％。
NMR1H(Bruker DRX500，500MHz，DMSO-d6，m.d.，J Hz)：2.21s，3H；3.93t，2H，J＝6.11；2.11m，2H，J＝6.10；4.15t，2H，J＝6.71；6.35s，1H，6.44s，1H，6.68s，1H；7.69t，2H，J＝7.33，7.84t，1H，J＝7.32，7.88d，2H，J＝7.93；7.02d，1H，J＝4.27，7.42d，1H，J＝4.27；9.42s，2H
3-(3-甲基-5-(苯磺酰基氧基)苯氧基)丙基-异硫脲鎓(isothiouronium)碘化物(HC_018s_IOC)
产率80％。
NMR1H(Bruker DRX500，500MHz，DMSO-d6，m.d.，JHz)：2.21s，3H；3.95t，2H，J＝6.10；2.00m，2H，J＝6.71；3.25t，2H，J＝7.32；6.40s，1H，6.25s，1H，6.74s，1H；7.69t，2H，J＝7.94，7.84t，1H，J＝7.93，7.89d，2H，J＝7.33；9.03s，4H
4-氨基-1-(2-(3-甲基-5-(苯磺酰基氧基)苯氧基)乙基)-吡啶鎓碘化物(HC_019s_IOC)
Figure GPA00001037515900182
产率60％。
NMR1H(Bruker DRX500，500MHz，DMSO-d6，m.d.，J Hz)：2.20s，3H；4.24t，2H，J＝4.88；4.48t，2H，J＝4.89；6.39s，1H，6.45s，1H，6.73s，1H，；7.68t，2H，J＝7.93，7.82t，1H，J＝7.93，7.87d，2H，J＝7.32；6.82d，2H，J＝7.32，8.18d，2H，J＝7.33；8.14s，2H
2-(3-甲基-5-(苯磺酰基氧基)苯氧基)乙基-异硫脲鎓碘化物(HC_020s_IOC)
Figure GPA00001037515900183
产率45％。
NMR1H(Bruker DRX500，500MHz，DMSO-d6，m.d.，J Hz)：2.22s，3H；4.11t，2H，J＝5.49；3.54t，2H，J＝5.49；6.41s，1H，6.48s，1H，6.76s，1H；7.69t，2H，J＝7.93，7.84t，1H，J＝7.93，7.89d，2H，J＝7.32；9.10s，4H
2-(3-甲基-5-(2-氯代苯磺酰基氧基)苯氧基)乙基-异硫脲鎓碘化物(HC_024s_IOC).
产率53％。
NMR1H(Bruker DRX500，500MHz，DMSO-d6，m.d.，J Hz)：2.21s，3H；3.95t，2H，J＝5.50；2.12m，2H，J＝5.50；4.15t，2H，J＝6.10；6.42t，1H，6.51s，1H，6.70s，1H；7.59t，1H，J＝7.32，7.83t，1H，J＝7.94，7.88d，1H，J＝7.94，7.95d，1H，J＝7.94；7.01d，1H，J＝4.27，7.42d，1H，J＝4.27；9.39s，2H
3-(3-甲基-5-(2-氯代苯磺酰基氧基)苯氧基)丙基-异硫脲鎓碘化物(HC_026s_IOC).
Figure GPA00001037515900192
产率55％。
NMR1H(Bruker DRX500，500MHz，DMSO-d6，m.d.，J Hz)：2.22s，3H；3.97t，2H，J＝6.10；2.01m，2H，J＝7.33，J＝6.10；4.26t，2H，J＝7.33；6.47s，1H，6.51s，1H，6.75s，1H；7.60t，1H，J＝7.93，7.84t，1H，J＝7.94，7.88d，1H，J＝7.93，7.96d，1H，J＝7.94；8.95s，2H，9.07s，2H
4-氨基-1-(2-(3-甲基-5-(2-氯代苯磺酰基氧基)苯氧基)乙基)-吡啶鎓碘化物(HC_025s_IOC)
Figure GPA00001037515900201
产率58％。
NMR1H(Bruker DRX500，500MHz，DMSO-d6，m.d.，J Hz)：2.20s，3H；4.26t，2H，J＝4.88；4.49t，2H，J＝4.88；6.45s，1H，6.51s，1H，6.74s，1H；7.58t，1H，J＝7.93，7.84t，1H，J＝7.94，7.88d，1H，J＝7.93，7.94d，1H，J＝7.94；6.82d，2H，J＝7.32，8.18d，2H，J＝7.33；8.14s，2H.
以类似的方式，通过实施例1-4中记载的技术，从不同的芳基磺酰氯和杂环磺酰氯合成化合物。表1中示出了化学式、质谱参数、合成化合物的计算评分功能(computed scoring functions)。可以得到碘化物、溴化物、氯化物或其他盐形式的化合物。
实施例5
化合物的合成
Figure GPA00001037515900202
1.4-氯-3-硝基苯-1-磺酰氯
在搅拌下将邻硝基氯苯胺(15g)加入30ml的氯磺酸中，并在100℃下加热2小时，接着在110℃下加热2小时，并在127℃加热5小时。将反应混合物冷却至室温，倾倒入碎冰(140g)中。过滤沉淀物，用冰水漂洗滤饼，并在空气中干燥。产物为15g的4-氯-3-硝基苯-1-磺酰氯。
2.4-氯-N-甲基-3-硝基-N-苯基苯磺酰胺
Figure GPA00001037515900211
将4-氯-3-硝基苯-1-磺酰氯(10.6g，0.041mol)溶解在甲苯(50ml)中，然后加入三乙胺(4.14g，0.041mol)。向所得溶液中搅拌加入N-甲基苯胺(4.4g，0.041mol)。在70-80℃温育反应混合物1小时。然后将其冷却。冷却的溶液用30ml的水洗涤两次，并真空浓缩。残余物从乙醇中重结晶。4-氯-N-甲基-3-硝基-N-苯基苯磺酰胺的产量为9.4g(61％)。
3.N-甲基-4-(甲基氨基)-3-硝基-N-苯基苯磺酰胺
Figure GPA00001037515900212
将4-氯-N-甲基-3-硝基-N-苯基苯磺酰胺(9.4g，0.029mol)在乙醇(50ml)中的溶液加入25ml的40％甲胺水溶液。将反应混合物加热至70℃，并在该温度下搅拌1小时。冷却并过滤后，用乙醇洗涤滤饼，并在60℃下干燥。N-甲基-4-(甲基氨基)-3-硝基-N-苯基苯磺酰胺的产量为9.0g(97％)。
4.3-氨基-N-甲基-4-(甲基氨基)-N-苯基苯磺酰胺
Figure GPA00001037515900213
将N-甲基-4-(甲基氨基)-3-硝基-N-苯基苯磺酰胺(9g，0.028mol)溶解在异丙醇(90ml)中。向该溶液中加入水合肼(11ml)、活性碳(2g)和FeCl3·6H2O(0.5g在10ml乙醇中)。将反应混合物沸煮8小时。过滤除去活性炭。蒸发滤液至干燥。3-氨基-N-甲基-4-(甲基氨基)-N-苯基苯磺酰胺的产量为8.1g(99％)。
5.3-氯-N-(5-(N-甲基-N-苯基氨磺酰基)-2-(甲基氨基)苯基)丙酰胺
Figure GPA00001037515900221
向在冰上冷却(～5℃)的3-氨基-N-甲基-4-(甲基氨基)-N-苯基苯磺酰胺(5.4g，0.018mol)和三乙胺(1.81g，0.018mol)在二甲基甲酰胺(16ml)中的溶液加入氯代丙酰氯(2.32g，0.018mol)。室温下搅拌反应5小时。然后，经5小时加入水(14ml)和乙腈(5ml)。滤除所形成的沉淀物。3-氯-N-(5-(N-甲基-N-苯基氨磺酰基)-2-(甲基氨基)苯基)丙酰胺的产量为3.1g(45％)。
6.4-氨基-1-(3-(5-(N-甲基-N-苯基氨磺酰基)-2-(甲基氨基)苯基氨基)-3-氧代丙基)吡啶鎓氯化物
Figure GPA00001037515900222
在无水丙酮(50ml)中将3-氯-N-(5-(N-甲基-N-苯基氨磺酰基)-2-(甲基氨基)苯基)丙酰胺(1g，0.0026mol)和4-氨基吡啶鎓(0.73g，0.0078mol)沸煮50小时。过滤残余物，并从乙腈与乙醇的10∶1混合物中结晶。
4-氨基-1-(3-(5-(N-甲基-N-苯基氨磺酰基)-2-(甲基氨基)苯基氨基)-3-氧代丙基)吡啶鎓氯化物的产量为0.54g(43％)。
7.4-氨基-1-(2-(1-甲基-5-(N-甲基-N-苯基氨磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基吡啶鎓氯化物
Figure GPA00001037515900231
向4-氨基-1-(3-(5-(N-甲基-N-苯基氨磺酰基)-2-(甲基氨基)苯基氨基)-3-氧代丙基)吡啶鎓氯化物(0.2g，0.00042mol)在乙腈(8ml)中的混悬液中，加入亚硫酰氯(0.2ml)。沸煮反应混合物10分钟后，将其置于室温下24小时，然后用乙醚(8ml)稀释。过滤收集所形成的沉淀物，并从乙腈比脱水乙醇为10∶1的混合物中结晶。4-氨基-1-(2-(1-甲基-5-(N-甲基-N-苯基氨磺酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)吡啶鎓氯化物的产量为0.055g(26％)。
以类似的方式，通过实施例5中记载的技术合成了不同的化合物，其化学式、质谱参数和计算评分功能示于表2中。可以得到碘化物、溴化物、氯化物或其他盐形式的化合物。
实施例6
合成化合物的止血作用的评估
在该研究中使用标准的凝血测试测量凝血酶凝血时间(TT)，并进行了两种体外模型测试——凝血酶生成(generation)测试和血凝块空间生长速率(theclot growth rate in space)测试，从而来评估在新合成化合物存在时凝固系统的状态。标准的凝血时间测试分别针对内源性或外源性的最大凝固激活作用的背景而进行，因此不能检测要研究的系统中的高凝状态，与此不同的是，本发明的测试在相当低的初始激活作用(接近生物体中存在的激活作用)下进行。这使得这些测试对所研究的血浆样品中的低凝态高凝态都是敏感的。
凝血酶时间测量
凝血酶凝血时间测试是凝血反应系列(即在加至系统中的凝血酶的作用下将血浆纤维蛋白素原转化为不溶性纤维蛋白凝块)中的最后一步。将标准激活水平下的固定量的凝血酶加至缺乏血小板的血浆(PPP)中，该缺乏血小板的血浆(PPP)通过离心(在1300g下15分钟)基于3.8％柠檬酸钠(pH＝5.5)制备的血浆(血液与柠檬酸盐的比率＝9∶1)制得。在该测试中测量的凝固时间取决于血液中存在的凝血酶抑制剂的量。强凝血酶抑制剂可降低所加入酶的活性，当其存在于系统中时会以这种方式延缓凝血，因此凝血时间变长。
使用标准方法测量凝血酶时间(Z.S.Barkagan，A.P.Momot，“Diagnosticsand Controlled Therapy of Hemostatic Disorders，”Newdiamed，Moscow，2001，pp.87-89)。具体而言，90微升的PPP在37℃水浴上加热3分钟，并将其置于凝集计(aggregometer)(Biola Ltd.，Russia)的小玻璃管中，接着加入10微升的测试物质和缓冲剂的混合物(以在小玻璃管中使不同化合物的最终浓度为0.005mM至5mM)，并且加入100微升的凝血酶溶液(根据正常空白血浆进行校正)。测量凝固时间，重复进行三次独立实验，取其均值。
内源凝血酶能力(potential)的测量(凝血酶生成(generation)测试)
该方法详细记载于许多文献中(Hemker HC，Giesen PL，Ramjee M，Wagenvoord R，Beguin S.The thrombogram：monitoring thrombin generation inplatelet-rich plasma.Thromb.Haemost.，2000；83(4)：589-591；Hemker HC，AlDieri R，Beguin S.Thrombin generation assays：accruing clinical relevance.Curr.Opin.Hematol.，2004，11(3)：170-175；Hemker HC，Giesen P，AlDieri R，Regnault V，de Smed E，Wagenvoord R，Lecompte T，Beguin S.The calibratedautomated thrombogram(CAT)：a universal routine test for hyper-andhypocoagulability.Pathophysiol.Haemost.Thromb.，2002，32(5-6)：249-253)。该测试用来测量样品中于标准的凝固激活水平下经指定时间在血浆样品中产生的活性凝血酶的动力学和总量。本申请人的方法适合于使用慢作用的荧光底物(BOC-Ile-Gly-Arg-AMC)来测量凝血酶浓度，这在被凝血酶断裂时产生了高度荧光的产物，7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)。使用产荧光的而不是产色的底物是根据这样一个事实：测量池中形成的固体纤维蛋白血凝块实际上不会影响样品中的荧光水平，但是会限制产色底物应用(Hemker HC，Giesen P，AlDieri R，Regnault V，de Smed E，Wagenvoord R，Lecompte T，Beguin S.The calibrated automated thrombogram(CAT)：a universal routine testfor hyper-and hypocoagulability.Pathophysiol.Haemost.Thromb.，2002，32(5-6)：249-253)。另一方面，根据公知常识，在第一血凝块已经形成后，样品中产生凝血酶的块体(约95％)(Hemker HC，AlDieri R，Beguin S.Thtombingeneration assays：accruing clinical relevance.Curr.Opin.Hematol.，2004，11(3)：170-175)。
在图1中显示了凝固激活作用后血浆中凝血酶的生成和最终消失的动力学，其说明了血浆样品中活性凝血酶浓度和时间的关系。凝血酶产生时间(在本发明中，培育0至50分钟)曲线下面积称为内源凝血酶潜能(ETP)。曲线还以tmax(样品中凝血酶达到最大浓度的时间)、Amax(系统中最大凝血酶浓度)和tlag(凝固开始前的时间，通常为凝血酶达到5nM浓度的时间)为特征。
显然，重要的凝固信息包含在凝血酶对时间曲线的形状中，以及ETP水平的积分(integral ETP level)中。具体地，针对低凝血因子和凝血抑制剂浓度的背景，凝血酶浓度最大值可以更低并且更宽，尽管ETP总量完全不会改变。另外的凝血酶抑制剂存在于血浆中必然降低ETP和可达到的最大凝血酶浓度，并增加凝固延迟和凝血酶达到最大浓度所需的时间。
按照下述方法进行测量：将90微升的正常供体血浆(PPP)、0至20微升的测试物质溶液和20至0微升的缓冲液(20mM的HEPES，140mM的NaCal，pH 7.5)分配于96孔板的孔中，这样所加物质和缓冲剂的总体积总是为20微升。当将20微升的产荧光底物溶液(在5mM初始浓度下)加至每个板孔(board holes)时，在37℃加热血浆3至5分钟。接着，(使用多道移液器)将25微升的凝血激活剂溶液(clotting activator solution)同时加入所有的孔。以另外含有80mM CaCl2的相同缓冲剂将标准的促凝血酶原激酶试剂稀释至其初始浓度的1/250制备促凝血酶原激酶溶液，该溶液用作激活剂来测量凝血酶原时间(PT)(RENAM，Russia)。加入激活剂的时间为倒计时开始时间。记录荧光反应产物蓄积(AMC)的动力学60分钟。每个时间点的产物蓄积时间与此刻血浆中存在的凝血酶浓度成比例。通过微分AMC蓄积曲线，可以测量凝血酶浓度在系统中的浓度对时间的比率，以及相应地，测量表征曲线的参数。对于每个样品，通过根据这些血浆样品中已知的AMC浓度信号校准信号，将常规的荧光单元(units)转化为绝对AMC浓度。事先在宽范围的AMC浓度内测试该方法的线性。
血凝块空间生长速率的测量
血凝块空间生长速率描述凝血的动力学，这是一种随时间和空间发展的过程。该方法就测量光散射以确定凝血开始后不同时间期的血凝块尺寸。在系统中通过精确定位在空间中的激活剂无需搅动就激活凝血。激活剂或者为具有引起内源性接触激活的磨砂边(ground edge)的简单玻璃板，或者为表面涂覆成纤维细胞的聚对苯二甲酸乙二醇酯膜，该膜还具有组织因子(tissue factor)以激活外源性凝血。当激活外源性凝血时，将玉米胰蛋白酶抑制剂加入浓度为200mkg/ml的初始血浆以防止系统中的接触凝血激活。在不含血小板的血浆(PFP)中进行测量，此血浆通过在10000g下在此离心PPP10分钟得到。
将微型照相机固定在35mm的聚苯乙烯培养皿中。当外源性激活凝血时，将玻璃板(1mm厚)的端部用聚对苯二甲酸乙二醇酯膜包裹，在该膜上已经生长有成纤维细胞。然后用两面Scotch胶带固定在培养皿底部。该玻璃板端部用作涂覆激活剂的微型照相机的侧边。类似地，用黑漆包覆在外部并延伸超过玻璃板边缘的聚苯乙烯板粘附在玻璃板的顶部表面上以限定微型照相机的顶部表面。将含有或不合有可能有活性的(prospective)凝血酶抑制剂的无血小板的血浆再次钙化(Recalcified)(加入的CaCl2的最终浓度为20mM)，再将其小心地倒入顶部板和相机底部之间的空间，以避免其与激活凝血的侧壁接触。将血浆与激活剂接触的时刻标记为t＝0。将培养皿紧密密封并且置于底部透明的37℃恒温小试管中，通过透明底部，用红色二极管的光(660nm)照射培养皿中的血浆。永久(permanent)微型照相机区域(7.2×5.4mm)的图像用连接至图像捕捉板(image capture plate)EZ98(LifeviewInc.，USA)摄像机OS-75D(Mintron Enterprise，Taiwan)每30秒记录一次，以实现数字化，并从摄像机输入图像电脑的存储器。
通过处理各系列记录图像获得相应于从实验开始时不同时刻(timemoments)的光散射曲线(profiles)。当其生长(As it grew on)，血凝块进一步从激活剂表面扩散至血浆中。将每个框(frame)中的血凝块大小确定为从激活剂至血凝块边缘的距离，假设为光散射是最大值一半的点。然后发现血凝块生长速率为血凝块尺寸对时间曲线上的点的切线的斜率。该方法更详细地记载于下列论文中：Ovanesov MV，Krasotkina JV，Ul′yanova LI，Abushinova KV，Plyushch OP，Domogatskii SP，Vorob′ev AI，Ataullakhanov FI.Hemophilia A and B are associated with abnormal spatial dynamics of clotgrowth.Biochim.Biophys.Acta，2002，1572(1)：45-57；Ovanesov MV，LopatinaEG，Saenko EL，Ananyeva NM，Ul′yanova LI，Plyushch OP，Butilin AA，Ataullakhanov FI.Effect of factor VIII on tissue factor-initiated spatial clotgrowth.Thromb.Haemost.，2003，89(2)：235-242。
图2表明在正常血浆中血凝块生长的照片(photo sequence)(左侧带是玻璃激活剂，亮区域为纤维蛋白)。第一框表示垂直于激活剂的带，根据其计算光散射曲线。
图3显示了凝血开始后在不同的时刻的生长血凝块的光散射曲线。
最后的输出处理阶段为根据所得光散射曲线计算血凝块生长速率。在各个时间点评估血凝块尺寸，为各光散射曲线离激活剂的距离(在最大曲线高度的一半处)。图4示出了计算的血凝块尺寸对时间的比率。根据曲线的线性部分的倾斜角计算血凝块的似稳定(quasi-stationary)生长速率。
所进行的测试表明本发明所要求保护的新合成化合物具有抗凝血性质，即它们延缓了血浆凝固。
下面的实施例对在血浆中存在不同浓度的化合物HC-020s-IOC的凝血酶产生测试中测量的一些参数的变化做了摘要(参见表3)。图5展示了在凝血导致的荧光底物和凝血酶之间的断裂反应中产荧光产物的累积曲线，其直接由记录仪记录(使用事先已经准备的标定，将常规的荧光单元转化为绝对AMC浓度)。图6示出了通过微分图5的曲线所测量的凝血酶浓度变化随实验过程的动力学曲线。随着系统中抑制剂浓度增加，凝血酶潜能的降低和达到凝血酶生成曲线最大值所需的时间的增加分别示于图7和图8中。这些结果表明随着测试化合物(HC-020s-IOC)浓度的增加，血浆凝固显著减缓。发现引起内源凝血酶潜能(IC50)减少50％的化合物浓度为0.9mcM。因此，该化合物为强抗凝血剂。
接下类三幅图展示了存在化合物HC-025s-IOC时的空间血凝块生长动力学。图9和图l0示出了分别为当在初始正常血浆中和存在1mcM该化合物的在相同的血浆中凝血时记录的光散射曲线。图11表示对于血浆对照组和在存在1mcM的化合物HC-025s-IOC中的血浆中的血凝块尺寸生长(为离激活剂的距离，在该距离上血凝块扩散)随时间的变化图。所得曲线之间的比较还表明存在于血浆中的化合物HC-025s-IOC抑制凝血。
表3中给出了展示一些说明新合成化合物的抗凝作用的实施例。
实施例7
用含晶样体血浆代用液(NaCl 0.9％)的正常供体血液的稀释液对凝固进行强化，并通过向代用液加入各种浓度的凝血酶活性抑制化合物HC-025s-IOC对其进行纠正
以比例为9∶1的3.8％柠檬酸钠和血液制备供体血液(20ml)，然后将其在1300g下在离心15分钟。将一些缺乏血小板的血浆在10000g下继续离心10分钟得到无血小板的血浆(PFP)。接着，这样制备出的PFP用于测量内源凝血酶潜能。
用输液级的生理盐水(NaCl 0.9％)或用相同的但是还含有凝血酶抑制剂HC-025s-IOC (浓度分别为0.25、0.5或1mcM)的溶液将PFP稀释1.5、2、3和4倍。为了在再钙化(recalcification)后的测试期间保持Ca2+浓度不变，需要保持柠檬酸钠在所有血浆稀释液中的浓度不变，并与初始未稀释的血浆的浓度等同，为此目的，用来稀释血浆的初始血浆代用液首先要混合3.8％柠檬酸钠，混合方法与与溶液比柠檬酸盐为9∶1的初始血液相似。
用于上述ETP测试方法中的血浆样品自始至终总是以1.5的比率稀释。实验中必须提供一次机会以测量未经稀释的血浆中ETP从而用PSS稀释血浆。相应地，开发了专门化的方法以测量这些实验中的ETP而不用在测量时真正稀释血浆。为了进行测试，将200微升的血浆样品(未稀释的PSS或稀释至所需倍数的PSS)置于96孔板的孔中以进行测量。接下来，将2微升的荧光的底物在DMSO中的溶液(起始浓度为30.75mM)加至各孔。当凝固开始时，将3微升的激活剂加至各孔。激活剂溶液从标准的促凝血酶原激酶制备，用于测量凝血酶原时间(来自Renam公司，俄罗斯)，用缓冲液(含20mM HEPES、140mM NaCl和1.235M CaCl2，pH 7.5)稀释20倍。然后用前述方法进行测量。测量每个稀释血浆在存在不同浓度的HC-025s-IOC时的内源凝血酶潜能。
用含有不同抑制剂浓度的NaCl(0.9％)溶液稀释血浆，图12表示在这一系列血浆稀释液(plasma dilutions)中进行的ETP测量的结果。显然，当在不存在所加抑制剂时用代用液逐渐稀释血浆，内源凝血酶能力显著增加，这表明凝血在这些条件下得以强化。具体地，小至20％的ETP变化被认为是血栓形成风险因素(Hemker HC，Al Dieri R，Beguin S.Thrombin generationassays：accruing clinical relevance.Curr.Opin.Hematol.2004，11(3)：170-175)。尽管在本文的实验中用稀释了1.5至4倍的初始血浆，但是对于不同的血浆最大ETP增加在1.5倍至超过4倍间变化。由于血浆稀释液的原因，抑制剂的添加不会完全中和凝固强化作用，但是却显著地进行了调节，对于不同的血浆稀释降低了ETP值。此外，在HC-025s-IOC浓度为0.25-0.5mcM溶液中产生的曲线中，不同血浆稀释液的ETP值最接近正常值。
表1
根据实施例1-4中记载的方法合成的凝血酶抑制剂的质谱参数和计算评分功能
Figure GPA00001037515900291
Figure GPA00001037515900301
Figure GPA00001037515900311
Figure GPA00001037515900331
表2
根据实施例5说明的方法合成的凝血酶抑制剂的质谱参数和计算的评分功能
Figure GPA00001037515900332
Figure GPA00001037515900341
Figure GPA00001037515900351
Figure GPA00001037515900371
Figure GPA00001037515900401
Figure GPA00001037515900421

Claims (6)

1.结构通式(I)的化合物及其可药用盐或溶剂化物：
A-B-C    (I)，
其中C选自下列结构：
其中R1、R2、R3和R4彼此独立地为氢或C1-6烷基；
B为-(CH2)n-，其中n为1至5的整数；
A选自下列结构：
Figure FPA00001037515800021
其中R5选自氢、C1-6烷氧基、CH2NR10R11和CH(CH3)NR10R11、
Figure FPA00001037515800022
其中R6和R7独立地为氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基和卤素；
R8为氢或C1-6烷基；
R9选自下列基团：
Figure FPA00001037515800023
R10和R12彼此独立地选自氢、C1-6烷基、(CH2)mCOOR13和(CH2)mCON(R13)2、
Figure FPA00001037515800031
其中m为1至4的整数；
R13为氢或C1-6烷基；
R11为C1-6烷基或Ar，
Ar为苯基、吡啶基，噁唑基、噻唑基、噻吩基、呋喃基、嘧啶基、哒嗪酮基、吡嗪基、吲哚基、苯并呋喃基或苯并硫代苯基，它们具有1至5个选自下列的取代基：
氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、N(R13)2、OH、NO2、CN、COOR13、CON(R13)2和SO2R13；
所述结构通式(I)的化合物排除下列化合物：
Figure FPA00001037515800032
2.权利要求1所述的化合物及其可药用盐或溶剂化物，特别是：
Figure FPA00001037515800041
其中Y选自氢、卤素、COOR13、CON(R13)2和SO2R13；和
r为2至5的整数。
3.权利要求1所述的化合物及其可药用盐或溶剂化物，其能够减缓血浆凝固。
4.权利要求1所述的化合物及其可药用盐或溶剂化物作为治疗哺乳动物血栓形成病况的抗凝血剂的用途。
5.用于治疗血栓形成病况的药物组合物，其包含治疗有效量的权利要求1所述的化合物和/或其可药用盐或溶剂化物以及可药用载体。
6.用于纠正血液稀释中高凝血病症的血浆代用液，其中含有权利要求1所述的化合物和/或其可药用盐和/或溶剂化物。
CN200880104823.1A 2007-06-28 2008-06-27 新型抗凝血剂化合物、以其为基础治疗血栓形成病况的药物组合物,和用来纠正血液稀释的高凝血缺陷的血浆代用液 Expired - Fee Related CN101848894B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2007124202/04A RU2353619C2 (ru) 2007-06-28 2007-06-28 Новые соединения, обладающие функцией антикоагулянтов, фармацевтические композиции на их основе для лечения тромботических состояний и плазмозамещающий раствор для коррекции гиперкоагуляционных нарушений при гемодилюции
RU2007124202 2007-06-28
PCT/RU2008/000401 WO2009002229A2 (en) 2007-06-28 2008-06-27 New anticoagulant compounds, pharmaceutical compositions on their basis to treat thrombotic conditions, and plasma-substituting solution to correct hypercoagulation defects of hemodilution

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101848894A true CN101848894A (zh) 2010-09-29
CN101848894B CN101848894B (zh) 2014-08-20

Family

ID=40186196

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN200880104823.1A Expired - Fee Related CN101848894B (zh) 2007-06-28 2008-06-27 新型抗凝血剂化合物、以其为基础治疗血栓形成病况的药物组合物,和用来纠正血液稀释的高凝血缺陷的血浆代用液

Country Status (11)

Country Link
US (1) US8426433B2 (zh)
EP (1) EP2178839A2 (zh)
JP (1) JP2010531353A (zh)
KR (1) KR20100028122A (zh)
CN (1) CN101848894B (zh)
AU (1) AU2008269258B2 (zh)
CA (1) CA2692363A1 (zh)
EA (1) EA020915B1 (zh)
RU (1) RU2353619C2 (zh)
UA (1) UA98969C2 (zh)
WO (1) WO2009002229A2 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114080382A (zh) * 2019-06-19 2022-02-22 株式会社Lg化学 制备吲哚或吲唑化合物的方法

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2354647C2 (ru) * 2007-06-28 2009-05-10 Общество С Ограниченной Ответственностью "Бионика" Новые соединения, обладающие функцией ингибиторов тромбина, и фармацевтические композиции на их основе
RU2353619C2 (ru) * 2007-06-28 2009-04-27 Общество С Ограниченной Ответственностью "Бионика" Новые соединения, обладающие функцией антикоагулянтов, фармацевтические композиции на их основе для лечения тромботических состояний и плазмозамещающий раствор для коррекции гиперкоагуляционных нарушений при гемодилюции
EA021562B1 (ru) * 2012-08-15 2015-07-30 Общество С Ограниченной Ответственностью "Гематологическая Корпорация" Устройство мониторинга пространственного свертывания крови и ее компонентов
RU2685261C1 (ru) * 2018-04-05 2019-04-17 Общество с ограниченной ответственностью "ФК ЛАБОРАТОРИЗ" Вещество 4-амино-1-{ 2-[3-метил-5-(бензолсульфонилокси)фенокси] этил} -пиридиний хлорид, обладающее свойствами биологически активного агента, влияющими на естественно текущие процессы свертываемости крови млекопитающих, антикоагулянт на его основе и способ его получения путем химического синтеза

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE1245937B (zh) 1964-09-09 1967-08-03
US5089634A (en) * 1984-08-20 1992-02-18 Georgia Tech Research Corporation Isocoumarins with cationic substituents
JPH0341065A (ja) * 1989-07-06 1991-02-21 Morishita Pharmaceut Co Ltd アリールオキシアルキルイソチオウレア臭化水素酸塩類
JP3084458B2 (ja) 1991-11-08 2000-09-04 コニカ株式会社 ハロゲン化銀写真感光材料
TW257757B (zh) * 1993-03-03 1995-09-21 Boehringer Mannheim Gmbh
IL109319A0 (en) * 1993-04-27 1994-07-31 Du Pont Merck Pharma Amidino and guanidino substituted boronic acid compounds
DE4430757A1 (de) * 1994-08-30 1996-03-07 Boehringer Mannheim Gmbh Neue 4-Aminopyridazine, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel
US5792769A (en) * 1995-09-29 1998-08-11 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. Guanidino protease inhibitors
DE69736777T2 (de) * 1996-03-29 2007-08-23 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Amidinohydrazone als protease-inhibitoren
GB9613718D0 (en) * 1996-06-29 1996-08-28 Thrombosis Res Inst Thrombin inhibitors
CA2264037A1 (en) * 1996-09-13 1998-03-19 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
US5886191A (en) * 1997-08-18 1999-03-23 Dupont Pharmaceuticals Company Amidinoindoles, amidinoazoles, and analogs thereof
UA75093C2 (en) 2000-10-06 2006-03-15 Dimensional Pharm Inc Aminopyridinyl-,aminoguanidinyl-, and alkoxyguanidinesubstituted phenylsubstituted phenylacetamides as protease inhibitors
JP4896387B2 (ja) * 2003-09-30 2012-03-14 武田薬品工業株式会社 チアゾリン誘導体およびその用途
WO2005094828A1 (en) 2004-03-02 2005-10-13 F. Hoffmann-La Roche Ag 4- (sulfanyl-pyrimidin-4-ylmethyl) -morpholine derivatives and related compounds as gaba receptor ligands for the treatment of anxiety, depression and epilepsy
WO2007140385A2 (en) * 2006-05-31 2007-12-06 Abbott Laboratories Thiazole compounds as cannabinoid receptor ligands and uses thereof
RU2353619C2 (ru) * 2007-06-28 2009-04-27 Общество С Ограниченной Ответственностью "Бионика" Новые соединения, обладающие функцией антикоагулянтов, фармацевтические композиции на их основе для лечения тромботических состояний и плазмозамещающий раствор для коррекции гиперкоагуляционных нарушений при гемодилюции
RU2354647C2 (ru) * 2007-06-28 2009-05-10 Общество С Ограниченной Ответственностью "Бионика" Новые соединения, обладающие функцией ингибиторов тромбина, и фармацевтические композиции на их основе
JP5134337B2 (ja) * 2007-11-01 2013-01-30 矢崎エナジーシステム株式会社 音声出力集約装置、及び、音声連動システム

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114080382A (zh) * 2019-06-19 2022-02-22 株式会社Lg化学 制备吲哚或吲唑化合物的方法
CN114080382B (zh) * 2019-06-19 2024-05-24 株式会社Lg化学 制备吲哚或吲唑化合物的方法

Also Published As

Publication number Publication date
AU2008269258B2 (en) 2012-12-13
EP2178839A2 (en) 2010-04-28
AU2008269258A1 (en) 2008-12-31
UA98969C2 (ru) 2012-07-10
CN101848894B (zh) 2014-08-20
US20110003826A1 (en) 2011-01-06
RU2007124202A (ru) 2009-01-10
CA2692363A1 (en) 2008-12-31
JP2010531353A (ja) 2010-09-24
WO2009002229A2 (en) 2008-12-31
RU2353619C2 (ru) 2009-04-27
KR20100028122A (ko) 2010-03-11
EA020915B1 (ru) 2015-02-27
EA201000064A1 (ru) 2010-06-30
WO2009002229A3 (en) 2009-03-12
US8426433B2 (en) 2013-04-23
AU2008269258A8 (en) 2010-03-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101848894B (zh) 新型抗凝血剂化合物、以其为基础治疗血栓形成病况的药物组合物,和用来纠正血液稀释的高凝血缺陷的血浆代用液
CN102224423B (zh) 聚集的τ分子的配体
JP2010531353A5 (zh)
CN115381827B (zh) 苯骈三氮唑烷基衍生物在制备治疗或预防心血管疾病的药物中的应用
CN87106032A (zh) 二氢吡啶抗过敏剂和抗炎剂
CN101861304A (zh) 新的凝血酶功能化合物和基于其的药物组合物
BR112021008249A2 (pt) sais cristalinos de um inibidor de calicreína plasmática
JP2010531352A5 (zh)
KR20200053270A (ko) 에독사반의 신규염 및 이의 제조방법
JPS6258335B2 (zh)
WO1986001507A1 (en) Cyclimmonium salts
KR100378091B1 (ko) 항혈전 효과를 나타내는 찰콘 유도체, 그를 포함하는약학적 조성물 및 그의 제조방법
JPH0466238B2 (zh)
JP4390453B2 (ja) トロンビン阻害物質としてのアミジノフェニルアラニン誘導体
JPS5823622A (ja) 血小板凝集抑制剤
JPH0480005B2 (zh)
JPH05170690A (ja) ジフェニル炭化水素誘導体を有効成分として含有する血栓溶解促進剤
CN103387550B (zh) 一种抗菌抗癌活性化合物的制备方法
CN108129369A (zh) P2y12受体拮抗剂的二苯基硫代乙酸、制备方法及其用途
CN108191723A (zh) 一种硝基二苯基硫代乙酸结构的p2y12受体拮抗剂及其用途
CN108191724A (zh) 含甲氧二苯基硫代乙酸结构的p2y12受体拮抗剂及其用途
CN108129370A (zh) 一种腈基二苯基硫代乙酸结构的p2y12受体拮抗剂及其用途
CN108191722A (zh) 卤代二苯基硫代乙酸结构的p2y12受体拮抗剂及其用途
CN106674282A (zh) 芳基氧化膦p2y12受体拮抗剂、制备方法及其用途
CN106831867A (zh) 一种腈基噻吩芳基氧化膦p2y12受体拮抗剂及其用途

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20140820

Termination date: 20150627

EXPY Termination of patent right or utility model