CN101843627A

CN101843627A - 二氢菲苷类化合物在制备防治心脑血管疾病药物中的应用

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Publication number: CN101843627A
Application number: CN200910119095A
Authority: CN
Inventors: 周亚伟
Original assignee: Individual
Current assignee: Suzhou Green Growth Investment Center LP
Priority date: 2009-03-23
Filing date: 2009-03-23
Publication date: 2010-09-29
Anticipated expiration: 2029-03-23
Also published as: CN101843627B

Abstract

本发明涉及二氢菲苷及衍生物在制备防治心脑血管疾病药物中的应用。发明人采用羟基化等合成反应，制得二氢菲类衍生物，并经药理实验证实，上述化合物具有治疗冠心病等作用。本发明同时还提供了二氢菲苷及其衍生物用于制备防治冠心病的药物制剂的组成和制备方法，上述制剂包括胶囊剂、片剂、颗粒剂、注射液等。

Description

二氢菲苷类化合物在制备防治心脑血管疾病药物中的应用

技术领域

本发明涉及一种二氢菲苷类化合物在制备防治心脑血管药物中的应用，具体涉及朝藿菲苷A及其衍生物在制备防治心脑血管疾病药物中的应用。

背景技术

心脑血管疾病的特点是发病急、死亡率高、致残率高。目前常用的防治心脑血管病的药物有硝酸脂、β受体阻滞剂和钙通道阻滞剂三类；但长期服用，会出现不同的不良反应或副作用。如服用钙通道阻滞剂，患者会出现体位性低血压，心动过速，头痛、颜面潮红、多尿等不良反应。故需根据患者的情况，个体用药，达到更好的治疗效果。如单硝酸山梨醇，能明显的扩张血管，对静脉系统的作用较强。可用于预防和长期治疗心绞痛，但不适用于心绞痛的急性发作的治疗。

淫羊藿是小檗科植物淫羊藿Epimedium brevicornum Maxim.、箭叶淫羊藿Epimedium sagittatum(Sieb.et Zucc.)Maxim.、柔毛淫羊藿Epimedium pubescens Maxim.、巫山淫羊藿Epimedium wushanense T.S.Ying、或朝鲜淫羊藿Epimedium koreanum Nakai的干燥地上部分，传统上用作补益药，具有补肾阳、强筋骨、祛风湿等功效。淫羊藿中含有木脂素、酚苷类、紫罗酮类、倍半萜类、苯乙醇苷类、淫羊藿苷和黄酮类等很多类成份。朝藿菲苷A可从淫羊藿药材中分离得到(参见：Li Wen-Kui，Pan Jing-Qi，Lu Mu-Jian，etc.，A 9，10-dihydrophenanthrenederivate from Epimedium Koreanum，Phytochemistry，1995，39(1)：231-233)。未见该化合物及其衍生物的在心脑血管方面作用的报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是寻找疗效好且毒副作用小的防治心脑血管药物。本发明还包括要研发起效快，作用时间长，疗效好的防治冠心病及脑缺血性疾病等药物。本发明还包括要研发能够降低心肌梗死血清心肌酶水平，保护心肌细胞的药物。

本发明还研究了含有朝藿菲苷A或其衍生物防治心脑血管疾病的药物组合物；并且还研究了含有朝藿菲苷A及其衍生物的药物组合物的给药途径及其药物制剂。

为了解决上述问题，本发明提供如下技术方案。

如式I所示的朝藿菲苷A及其衍生物在制备防治心脑血管疾病药物中的应用

(1)R₁＝O-Glc，R₂＝OMe，R₃＝OMe，R₄＝H，R₅＝OMe，R₆＝OMe；

(2)R₁＝OMe，R₂＝OMe，R₃＝O-Glc，R₄＝H，R₅＝OMe，R₆＝OH；

(3)R₁＝O-Glc，R₂＝OMe，R₃＝OMe，R₄＝H，R₅＝OMe，R₆＝OH；

(4)R₁＝OH，R₂＝OMe，R₃＝OH，R₄＝OH，R₅＝OMe，R₆＝OH；

(5)R₁＝OMe，R₂＝OMe，R₃＝H，R₄＝H，R₅＝H，R₆＝O-Glc；

(6)R₁＝O-Glc，R₂＝OMe，R₃＝OH，R₄＝OMe，R₅＝OMe，R₆＝O-Glc；

(7)R₁＝OMe，R₂＝OH，R₃＝OMe，R₄＝OMe，R₅＝OH，R₆＝OMe；

(8)R₁＝CH₂OH，R₂＝H，R₃＝H，R₄＝OH，R₅＝OMe，R₆＝OH；

(9)R1＝COOH，R2＝H，R3＝OH，R4＝OH，R5＝H，R6＝OH；

(10)R1＝GLc，R2＝OH，R3＝OMe，R4＝H，R5＝H，R6＝GLc；

(11)R1＝HO(Me)₂C，R2＝OH，R3＝H，R4＝H，R5＝H，R6＝OH；

(12)R1＝Cl，R2＝H，R3＝OH，R4＝H，R5＝OMe，R6＝CL；

(13)R1＝isomylene，R2＝H，R3＝H，R4＝OMe，R5＝OH，R6＝OMe；

(14)R1＝O-Glc-Glc，R2＝H，R3＝H，R4＝OH，R5＝OMe，R6＝OH。

式I的朝藿菲苷A及其衍生物在制备防治心脑血管疾病药物中的应用中，所述防治心血管病的药物是改善心和/或脑缺血性疾病的药物。所述心脑血管疾病包括冠心病、心肌梗死、心绞痛、脑血栓。所述防治心血管病的药物，是通过降低心肌梗死后血清中心肌酶水平，保护心肌细胞的药物。

上述应用中，其药物是由有效量的朝藿菲苷A或其衍生物和药学上可接受的载体组成。所述药学上可接受的载体包括口服制剂载体、注射制剂载体、局部给药制剂载体。所述药物以口服剂、注射剂及局部给药制剂形式存在。所述口服剂包括胶囊剂、口服液、口嚼剂、丸剂、片剂、颗粒剂；所述注射剂包括注射液、注射用冻干粉针剂型；局部给药制剂包括霜剂、软膏剂、贴剂、喷雾剂。

朝藿菲苷A的结构式如下：

化学名称：3，4，6，7-四甲氧基-9，10-二氢菲-2-O-β-D吡喃葡萄糖甙。

本发明人通过系列实验证实了朝藿菲苷A及其衍生物，具有防治心脑血管疾病的作用，尤其是防治冠心病、心肌梗死、心绞痛、脑血栓等作用显著。本发明人采用了垂体后叶素所致的大鼠急性心肌缺血模型、心脏冠状动脉结扎所致的大鼠和Beagle犬急性心肌缺血模型等，以心电图表现、心肌缺血程度和范围、心肌缺血面积及心肌酶等作为观测指标，结果表明朝藿菲苷A及其衍生物可明显改善缺血时心电图T波抬高，明显减轻心肌缺血程度，降低心肌缺血面积和血清心肌酶含量，提示其具有较好的防治心肌缺血性疾病的作用。

本发明人采用了大鼠大脑中动脉结扎所致的部分脑缺血模型以及沙土鼠四动脉结扎所致的全脑缺血模型，以神经生物学评分，脑缺血程度及范围为观测指标，结果发现朝藿菲苷A给药后可明显改善大鼠神经生物行为，明显降低脑缺血程度及范围，提示其具有显著的改善脑缺血的作用。

本实验结果表明朝藿菲苷A及其衍生物可用于制备防治心脑血管疾病尤其是冠心病的药物。在制备防治心脑血管疾病药物包括防治冠心病药物时可以单独使用，也可以含有朝藿菲苷A及其衍生物的药物组合物的形式使用。

朝藿菲苷A十二指肠给药对冠脉结扎所致大鼠实验性心肌梗死在20mg/kg剂量时具有治疗作用。根据实验推算，推荐人临床日用量为200mg/天左右。

本发明还提供了以朝藿菲苷A及其衍生物为活性成分用于防治心脑血管疾病的药物组合物及其药物剂型。本发明提供的药物组合物可按本领域内已知方法制备，并可通过口服、舌下、经皮、肌肉或皮下、皮肤粘膜、尿道、阴道或静脉等途径给药。本发明提供的药物组合物的剂型可按本领域已知方法制备，即以上述有效量的朝藿菲苷A为有效活性成分，并包括了药剂学上可接受的其他辅料组分，其中所述的朝藿菲苷A或其衍生物含量可以为1％～99.99％。本发明的药物制剂包括口服剂和非肠道给药制剂，其中口服剂包括胶囊剂、口服液、口嚼剂、丸剂、片剂、颗粒剂等，非肠道给药制剂包括注射液剂型及注射用冻干粉针剂型等。本发明的药物制剂还包括局部给药制剂，如霜剂、软膏剂、贴剂、喷雾剂等。本发明所述的剂型并不限于此。

在制备口服制剂时可选用的赋形剂可以是淀粉、糊精或环糊精、蔗糖、硬脂酸盐等常规充填剂。在制备冻干粉针剂可以通过无菌喷雾干燥、低温真空干燥、冷冻干燥等方法制备。各制剂的后期制备工艺及设备均属制药领域的常规技术，本发明对此不作限定，故在此不予详述。

具体实施方式

实施例1、朝藿菲苷A及其衍生物的制备

本发明所述的朝藿菲苷A可由淫羊藿药材中分离得到(参见：Li Wen-Kui，Pan Jing-Qi，Lu Mu-Jian，etc.，A 9，10-dihydrophenanthrene derivate from Epimedium Koreanum，Phytochemistry，1995，39(1)：231-233)。制备方法如下：取朝鲜淫羊藿Epimedium koreanum Nakai药材5kg经70％乙醇回流提取，回收溶剂，得到1kg粗提物，用10倍重量的水转溶后，取上清液上D101大孔吸附树脂，依次用水和10％的低浓度乙醇洗脱除杂，收集40％乙醇洗脱部分，用乙酸乙酯萃取后，上硅胶柱，再用乙酸乙酯-丙酮(100∶1-1∶100)梯度洗脱，反复重结晶后，依次得到Icariside A7(82mg)、Icariside A3(94mg)及朝藿菲苷A共3个晶体(116mg)。

朝藿菲苷A：分子式测定：C₂₄H₃₀O₁₀，相对分子量为478，mp：205～206℃。吸光度[α]²⁰ _D为-13.2℃(C 1.0，MeOH)。UV波谱在280、304和316nm处有强吸收。易溶于乙醇、甲醇，微溶于水。

Icariside A7(2-羟基-3，5，6-三甲氧基-9，10-二氢菲-7-O-葡萄糖甙)：淡黄色固体，Molish反应呈阳性，分子式测定：C₂₃H₂₈O₁₀，相对分子量为464，UV波谱在264、256、251、243nm处有强吸收。

Icariside A3(2-羟基-3，6，7-三甲氧基-9，10-二氢菲-5-O-葡萄糖甙)：淡黄色固体，Molish反应呈阳性，分子式测定：C₂₃H₂₈O₁₀，相对分子量为464，UV波谱在299，277，262，256，245nm处有强吸收。

通过核磁共振技术及质谱技术解析3个化合物结构，经与上述文献(江芳，朝鲜淫羊藿中抗骨质疏松活性成分的研究，2008，6)对照，3个产物的理化性质及波谱数据与文献一致。将样品溶于甲醇后，采用HPLC法测定含量。

色谱条件为：色谱柱：Diamonsil C18(250×4.6mm，5μm)，流动相：乙腈∶0.05mol/L磷酸二氢钠＝25∶75，流速1.0ml/min，进样量：10ul，检测波长282nm，AUFS＝1.0000。结果该样品的纯度为95.3％。

实施例2、2，3，4，5，7-五羟基-6-甲氧基-9，10-二氢菲的制备方法

取9，10-二氢菲10g加圆底烧瓶中，加入1.2mol的三氯化铝和450mg的MeOCl，常压下加热搅拌4小时。将反应物混合物过滤，干燥后，加入20％的氢氧化钠溶解后，在80度下加热8小时，冷却至晶体完全析出，过滤，红外灯下干燥，得淡黄色晶体3.5g。

实施例3、3，5，6-三甲氧基-9，10-二氢菲-3，7-二-葡萄糖甙的制备流程

实施例4、4，5，7-三羟基-9，10-二氢菲-2-甲酸的制备方法

为了便于理解朝藿菲苷A及其衍生物的防治心脑血管疾病的效果，本发明人在下面进一步描述了朝藿菲苷A及其衍生物的的药效学实验。

实施例1朝藿菲苷A十二指肠给药后对冠脉结扎致大鼠实验性心肌梗死的影响

将60只Wistar大鼠随机分为4组，每组10只，分别为：假手术组、模型组、阳性药组(长效心痛治(5-单硝酸异山梨醇)3mg/kg)、朝藿菲苷A(10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg)。将大鼠麻醉后，用注射器吸取阳性药、朝藿菲苷A溶液0.4ml，直接注入到大鼠十二指肠中。朝藿菲苷A是按实施例1的方法制备而得。采用结扎冠状动脉复制心肌梗死的动物模型，考察其对心电图，心肌梗死面积，心肌酶的影响，并比较朝藿菲苷A和阳性药的作用效果。结果见表1-3：

表1朝藿菲苷A对冠脉结扎致大鼠II导联心电图T波变化绝对值的影响

注：与假手术组比较，^△P＜0.05，^△△P＜0.01，^△△△P＜0.001；与模型组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01，^***P＜0.001。

由上表可见，冠脉结扎后，与假手术组比较，模型组在扎后T波明显升高，提示心肌缺血明显。与模型组比较，阳性药长效心痛治组及朝藿菲A组、及Icariside A3、Icariside A3、和3，5，6-三甲氧基-9，10-二氢菲-3，7-二-葡萄糖甙各组，均显著改善冠脉结扎引起的大鼠心肌缺血表现，朝藿菲苷A起效快，作用时间长，疗效好。

表2.朝藿菲苷A对冠脉结扎致大鼠实验性心肌梗死血清心肌酶的影响

与假手术组比较，^△△△P＜0.001；与模型组比较，^***P＜0.001

由上表2可见，冠脉结扎后，与假手术组比较，模型组心肌细胞破坏严重，血清心肌酶AST、LDH、CK、CK-MB值显著升高。数据表明：与模型组及长效心痛治组比较，朝藿菲苷A、Icariside A3、Icariside A3、和3，5，6-三甲氧基-9，10-二氢菲-3，7-二-葡萄糖甙各组，显著降低心肌梗死血清心肌酶水平，具有保护心肌细胞的作用，尤其是中、高剂量组的作用更为明显。

表3朝藿菲苷A对冠脉结扎致大鼠心肌梗死面积占全心面积百分比的影响

与模型组比较，^＊＊P＜0.01

由上表3可见，冠脉结扎后，模型组心肌梗死严重，出现明显心肌梗死。与模型组比较，长效心痛治组及朝藿菲苷A及Icariside A3、Icariside A3、和3，5，6-三甲氧基-9，10-二氢菲-3，7-二-葡萄糖甙各组，均能显著缩小心肌梗死面积，且朝藿菲苷A大剂量组的治疗效果接近于阳性药组。

由上述结果可见，朝藿菲苷A及Icariside A3、Icariside A3、和3，5，6-三甲氧基-9，10-二氢菲-3，7-二-葡萄糖甙，对冠脉结扎所致大鼠实验性心肌缺血有显著的治疗作用，通过改善缺血，减少心肌细胞损伤和减少心肌梗死范围等作用对冠脉结扎所致大鼠实验性心肌缺血、心肌梗死及心绞痛会有治疗作用。实验例2：朝藿菲苷A对大脑中动脉结扎所致大鼠脑梗死的影响

将96只Wistar大鼠，随机分为6组，每组16只分别为：假手术组、模型组、阳性药组(尼莫地平30mg/kg)、朝藿菲苷A小剂量组(8mg/kg)、中剂量组(15mg/kg)、大剂量组(30mg/kg)。采用结扎大鼠大脑中动脉复制局部脑梗死的动物模型，观察其对局部脑缺血及梗死的影响，考察其对脑梗死面积的影响。结果见表4：

表4朝藿菲苷A对大脑中动脉结扎所致脑梗死面积占全脑面积的百分比的影响

与模型组比较，^**P＜0.01

由上表可见，单侧大脑中动脉结扎后，模型组损伤严重，出现明显梗死。与模型组比较，尼莫地平组及朝藿菲苷A各组均能顺利通过血脑屏障，很好的改善脑动脉缺血导致的局部脑梗死，显著缩小脑梗死面积，改善梗死情况大剂量效果显著，作用优于阳性药。朝藿菲苷A及其衍生物可减少脑细胞的损伤，用于治疗多发性的脑梗塞，缓解脑梗塞诱发的神经系统病变，改善老年痴呆的症状。

实施例3：朝藿菲苷A胶囊剂的制备

取朝藿菲苷A50g，研磨粉碎，过80目筛。加过80目筛的微晶纤维素100g混合均匀后，加入90％乙醇作为粘合剂制软材，过30目筛制颗粒，烘干后，过30-80目筛整粒，分装于3号胶囊中，用铝塑复合包装，即得。每粒胶囊含朝藿菲苷A 0.05g。口服给药，每日3次，每次1～2粒。

实施例4：朝藿菲苷A片剂的制备

取朝藿菲苷A50g，研磨粉碎，过80目筛。加过80目筛的微晶纤维素50g混合均匀后，加入2％的羟丙甲纤维素作为粘合剂进行制软材，制粒干燥整粒，加入4％的崩解剂羧甲基淀粉钠和润滑剂0.5％硬脂酸镁与细粉混合均匀整粒，混匀，压片，即得。每片含朝藿菲苷A0.05g。口服给药，每日2次，每次2片。

实施例5：朝藿菲苷A冻干粉针剂的制备

取朝藿菲苷A50g，加入2％的甘露醇为支架剂，加入注射用水至1800ml搅拌溶解后，加入总配置量2.0‰活性炭，搅拌半小时，过滤，定容至2000ml，继以0.45μm、0.22μm微孔滤膜分级过滤，滤液以每瓶2ml定量分装于西林瓶中，冷冻干燥，回充氮气，加塞，轧盖，包装，即得。每支冻干粉针剂含量有朝藿菲苷A0.05g，每天注射给药1次，每次1～2支。

Claims

1.如通式I所示的9，10-二氢菲苷类及其衍生物在制备防治心脑血管疾病药物中的应用。

(4)R₁＝OH，R₂＝OMe，R₃＝OH，R₄＝OH，R₅＝OMe，R₆＝OH；

(5)R₁＝OMe，R₂＝OMe，R₃＝H，R₄＝H，R₅＝H，R₆＝O-Glc；

(7)R₁＝OMe，R₂＝OH，R₃＝OMe，R₄＝OMe，R₅＝OH，R₆＝OMe；

(8)R₁＝CH₂OH，R₂＝H，R₃＝H，R₄＝OH，R₅＝OMe，R₆＝OH；

(9)R1＝COOH，R2＝H，R3＝OH，R4＝OH，R5＝H，R6＝OH；

(10)R1＝GLc，R2＝OH，R3＝OMe，R4＝H，R5＝H，R6＝GLc；

(11)R1＝HO(Me)₂C，R2＝OH，R3＝H，R4＝H，R5＝H，R6＝OH；

(12)R1＝Cl，R2＝H，R3＝OH，R4＝H，R5＝OMe，R6＝CL；

(13)R1＝isomylene，R2＝H，R3＝H，R4＝OMe，R5＝OH，R6＝OMe；

(14)R1＝O-Glc-Glc，R2＝H，R3＝H，R4＝OH，R5＝OMe，R6＝OH。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述防治心血管病的药物是改善心和/或脑缺血性疾病的药物。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述心脑血管疾病包括冠心病、心肌梗死、心绞痛、脑血栓。

4.权利要求1所述的应用，其特征在于所述防治心血管病的药物，是通过降低心肌梗死后血清中心肌酶水平，保护心肌细胞的药物。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述药物是由有效量的朝藿菲苷A或其衍生物和药学上可接受的载体组成。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于所述药学上可接受的载体包括口服制剂载体、注射制剂载体、局部给药制剂载体。

7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述药物以口服剂、注射剂及局部给药制剂形式存在。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于所述口服剂包括胶囊剂、口服液、口嚼剂、丸剂、片剂、颗粒剂；所述注射剂包括注射液、注射用冻干粉针剂型；局部给药制剂包括霜剂、软膏剂、贴剂、喷雾剂。