CN101827846A - 伐马洛韦多形体 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及结晶形式的伐马洛韦、用于制备结晶形式的伐马洛韦的程序、其药用组合物及其使用方法。

Description

伐马洛韦多形体
相关申请的交互参考
本申请依据35U.S.C.§119(e)(l)，要求2007年9月21日提交的美国临时申请号60/994,719的权益，所述申请通过全文引用结合于本文。
1.发明领域
本发明涉及结晶形式的伐马洛韦(valomaciclovir)、用于制备结晶形式的伐马洛韦的方法、其药用组合物及其使用方法。
2.发明背景
化合物以不同结晶结构存在的能力被称为多晶形现象。这些不同的结晶形式被称为“多形体修饰”或“多形体(polymorphs)”。虽然多形体具有相同的化学组成，但是它们在外观(packing)和几何排列上不同，并且表现出不同的物理性质，诸如熔点、形状、颜色、密度、硬度、可塑性、稳定性、溶解性等(“药用固体的多形性”中的多形性的理论和起源(Theory and Origin of Polymorphism in″Polymorphism inPharmaceutical Solids″(1999)ISBN：0-8247-0237)。
伐马洛韦[L-缬氨酸，(3R)-3[(2-氨基-1，6-二氢-6-氧代-9H-嘌呤-9-基)甲基]-4-[(1-氧代十八烷基)氧基]丁基酯]，也由USAN称为伐马洛韦硬脂酸盐，或所有者编码为EPB-348、MIV-606或RP-606(图1A)，是一种强力广谱抗疱疹药无环鸟苷衍生物H2G(图1B)的二酯前药(缬氨酸和硬脂酸)。H2G具有强力抗人水痘带状疱疹病毒(VZV)、爱泼斯坦-巴尔(Epstein-Barr)病毒(EBV)、人类疱疹病毒-6(HHV-6)、HSV-1和HSV-2的活性。美国专利号5,869,493描述伐马洛韦的制备和活性。
伐马洛韦已经被开发成口服用抗带状疱疹(shingles)(带状疱疹(zoster))和其它病毒性疾病的活性剂。如在几项I期人体临床研究中所显示的，伐马洛韦在多次给药后总日剂量最高达6.0g是安全的并且耐受良好。II期研究(M98-829)，使用250、500和750mg的伐马洛韦悬浮剂，每天2次(BID)，给予带状疱疹患者7天，用阿昔洛韦作对照，结果提供对于带状疱疹损伤愈合的概念证明(proof-of-concept)和在疱疹后神经痛患者中进一步使用伐马洛韦的基础。
伐马洛韦包含鸟嘌呤部分、氨基酸酯和长链脂肪酸酯。这些成分中的每一个已经与各种制剂困难相关联，而伐马洛韦也不例外。已公布的专利申请(如，国际公布号WO 98/34917、WO 00/08025和WO 03/02564)和美国专利号6,184,376描述用于伐马洛韦的多种合成路径。然而，这些合成路径的在先技术倾向于产生非结晶形物质、非结晶形和晶质原料的混合物或具有差的特征性部分排列规则的物质的混合物。所产生的物质常常经历非常差的流动性和凝聚、明显地妨碍处理和加工。前期的使用伐马洛韦的I期和II期临床试用采用因为原料的物理性质避免处理和加工困难的悬浮液。然而，悬浮液并不是临床优选的制剂，因为它们不易于给药，特别是给予占主要患者群体的老年患者作为带状疱疹药物。
因此，存在对于稳定的结晶形式的伐马洛韦和用于生产这些稳定形式的可重复的方法的需求。
发明简述
本发明，在第一方面，通过提供包括多形体A富含的伐马洛韦的稳定结晶形式的伐马洛韦，满足这些和其它需求。多形体A为伐马洛韦的最为晶质的和在热力学上最稳定的多形体。
在第二方面，提供包含稳定的结晶形式的伐马洛韦和药学上适配的载体或稀释剂的药用组合物。
在第三方面，提供可重复的制备稳定结晶形式的伐马洛韦的方法程。该方法包括通过加热至适当的内部温度，将伐马洛韦溶解于低级烷醇溶剂或低级烷醇的混合溶剂中，在边搅拌下冷却，以实现伐马洛韦的基本结晶化和收集结晶产物。
在第四方面，本发明提供在患者中治疗病毒性感染的方法，该方法包括给予患者有效治疗量的稳定的结晶形式的伐马洛韦或其药用组合物。使用本发明的方法可治疗的病毒性感染，由以下病毒引起，例如且不限于，水痘带状疱疹病毒、单纯疱疹病毒(HSV-1和HSV-2)、人类疱疹病毒(HHV-6、HHV-7和HHV-8)、爱泼斯坦巴尔病毒、巨细胞病毒和用V。
图的简述
图1显示伐马洛韦(A)和H2G(B)的结构。
图2显示伐马洛韦多形体A的特征性X-射线衍射图。
图3显示伐马洛韦多形体A的特征性DSC温度记录图。
图4A和4B显示用于制备伐马洛韦的合成路径。
图5A-D显示在制备伐马洛韦中的最后步骤的变化。
图5E显示样品批号45-548-YS-00和12-03-011的粉末XRD图。
图5F显示样品批号45-548-YS-00的DSC图。
图5G显示样品批号2-03-011H的DSC图。
图5H显示伐马洛韦样品批号12-03-018、06-01159-2和146756的DSC图。
图5I显示伐马洛韦样品批号12-03-018、06-01159-2和146756的粉末XRD图。
图6显示在再结晶过程中的冷却曲线。
图7显示再结晶的伐马洛韦样品的X-射线衍射图。
图8显示再结晶的伐马洛韦样品的DSC温度记录图。
图9显示10-100g批次的多形体A的HPLC重叠绘图。
图10A-D显示在多形体筛选研究中的再结晶参数表。
图11A显示A组的衍射特征。
图11B显示A组的衍射特征。
图12A显示B1组的衍射特征。
图12B显示B1组的衍射特征。
图13A显示形式B1(批号12-03-011)的可变温度XRD特征。
图13B显示形式B1(批号12-03-011)的可变热特性。
图14A显示B2组的衍射特征。
图14B显示B2组的热特性。
图15A显示B2组的循环热特性。
图15B显示B2组的循环热特性。
图16A显示B3组的衍射特征。
图16B显示B3组的衍射特征。
图17A显示B3组的循环热特性。
图17B显示B3组的循环热特性。
图18A显示B4组的衍射特征。
图18B显示B4组的热特性。
图19A显示B4组的循环热特性。
图19B显示B4组的循环热特性。
图20A显示C组的衍射特征。
图20B显示C组的热特性。
发明详述
鉴于以下定义和注释可更好地理解本说明书。
除了在操作实施例中，或另有所指，所有用于本说明书和权利要求书中表示组分、反应条件等的量的数字，在所有情况下应该理解为是被术语“约”修饰的。
贯穿本说明书，单词“包含(comprise)”或其变化，诸如含有(comprises)或包括(comprising)，应该理解为意味着包含规定的要素、整数或步骤，或要素、整数或步骤的组合，但不排除任何其它要素、整数或步骤，或要素、整数或步骤的组合。
“药学上可接受的盐”指具有所需母体化合物的药理活性的伐马洛韦的盐。这样的盐包括：(1)酸加成盐，与无机酸，诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等形成的盐；或与有机酸，诸如乙酸、丙酸、己酸、环戊烷丙酸、羟基乙酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、丁二酸、苹果酸、顺丁烯二酸、反丁烯二酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、苦杏仁酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、1，2-乙烷-二磺酸、2-羟基乙烷磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸、4-甲基双环[2.2.2]-辛-2-烯-1-羧酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、十二烷基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羟基萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸等形成的盐；或(2)当存在于母体化合物中的酸性质子被金属离子，如碱金属离子、碱土金属离子或铝离子替代时形成的盐；或与有机碱，诸如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、N-甲基葡糖胺等配位形成的盐。
“药学上可接受的溶媒”指与伐马洛韦一起服用的稀释剂、佐剂、赋形剂或载体。
术语“受治疗者”、“个体”或“患者”在本文中交互使用并且是指脊椎动物，优选哺乳动物。哺乳动物包括，但不限于鼠科动物、啮齿动物、猿类、人类、家畜、运动动物和宠物。
“防止(Preventing)”或“预防(prevention)”指的是减少患病或失调的风险(即导致疾病的至少一种临床症状不在患者中发展，所述患者可暴露于或易患该疾病，但是尚未经历或表现出疾病的症状)。
“治疗”或“处理”任何疾病或失调，在一些实施方案中，指改善疾病或失调(即，阻碍或减轻疾病或其至少一种临床症状的发展)。在其它的实施方案中，“治疗(treating)”或“处理(treatment)”指改善至少一种不可由患者辨别的物理参数。在其它另外的实施方案中，“治疗”或“处理”指抑制疾病或失调，表现在物理上(如，使可辨别的症状稳定)、生理学上(如，使物理参数稳定)或者两者。在其它另外的实施方案中，“治疗”或“处理”指延迟疾病或失调的发作或进展。
“有效治疗量”意指当给予患者用于治疗疾病的伐马洛韦的量，其足以有效用于疾病的这种治疗。“有效治疗量”可依据疾病及其严重程度以及被治疗的患者的年龄、体重等变化。
伐马洛韦的多形体筛选研究揭示几个不同的形式，包括，但不限于A、B1、B2、B3、B4、C和H形式。各组具有不同的衍射特征以及不同的热特性。
可采用以下分析方法对伐马洛韦多形体进行特征鉴定，所述方法包括，但不限于差示扫描量热法(DSC)、偏振光热台显微镜法(HSM)、热重分析法(TGA)、傅里叶变换红外光谱法(FTIR)、傅里叶变换核磁共振(NMR)光谱法、变温粉末X-射线衍射法(XRD)和高效液相色谱法(HPLC)。
形式A的特征性X-射线衍射数据示于表1中，衍射图示于图2中；和特征性差示扫描热量计温度记录图示于图3中。表1列出在XRD频谱中发现的一些峰。也可存在具有较低强度的其它峰。
多形体A的特征性DSC性质包括从约105℃至约125℃的吸热谱线(endotherm)且其中心值接近115℃(典型地为20-30J/g)和从约170℃至约180℃的熔融吸热谱线且其中心值接近171℃(典型地约为20-30J/g)。某些样品显示额外的小信号(大约为6J/g)。
表1.多形体A X-射线粉末衍射图的特征峰列表
Figure GPA00001068528700071
应该理解，精确的衍射和热特征依据所使用的仪器类型和分析条件的不同而有微小变化。例如，用于X-射线衍射图的仪器对于测量的2-θ角典型地具有+/-0.2的误差。
依据本发明，“多形体A”是伐马洛韦的晶体形式，其具有如表1或图2中所示基本上相同的X-射线衍射图，或具有如图3中所示基本上相同的DSC温度记录图。在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦含有至少约90％的多形体A。在其它的实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦含有至少约95％的多形体A。在另外的其它实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦含有至少约99％的多形体A。
可采用本领域已知的以下方法确定本文描述的多形体的多形体A含量或多形体纯度，所述方法包括，但不限于X-射线衍射法(XRD)、差示扫描量热法(DSC)、偏振光热台显微镜法(HSM)、热重分析法(TGA)、傅里叶变换红外光谱法(FTIR)和可变温粉末XRD。
本文也提供可重复的、制备高质量富含多形体A的伐马洛韦的方法。该方法包括，通过加热至适当的内部温度，使伐马洛韦溶解于低级烷醇溶剂或低级烷醇的混合溶剂中，在边搅拌下冷却实现伐马洛韦的基本结晶化和收集结晶产物。
将依据示于图5A的方案制备的一批伐马洛韦(批号45-548-YS-00)如下纯化：将粗产物溶解于CH2Cl2中，用水洗涤该溶液，并于真空去除CH2Cl2。使残余物溶解于i-PrOH中，并用乙酸异丙酯使产物沉淀。过滤沉淀物、干燥和振荡通过10目筛。
将依据示于图5B的方案制备的另一批伐马洛韦(批号12-03-011)如下纯化：将粗产物溶解于i-PrOH中，加热至70℃，过滤该热溶液，并用5小时冷却至20℃。收集产物，用i-PrOH洗涤并于45℃真空下干燥15h。
依据示于图5C的方案制备另一批伐马洛韦(批号12-03-018)。合成和纯化的最后步骤包括如下：将甲磺酸盐溶解于i-PrOH中，加入NEt3，并将混合物加热至70℃。使该热溶液经4h冷却至20℃，并于20℃搅动至少2h。过滤结晶产物，用i-PrOH洗涤和真空干燥。
依据其中CBZ保护基团被Boc保护基团替代(图5D)的方法，制备两个其它批次的伐马洛韦(批号146756和批号06-01159-2。批号146756的最后的纯化步骤包括两个反复的以下步骤：在边加热中，将粗品EPB-348游离碱溶解于CH2Cl中，并加入甲烷磺酸，使该溶液冷却至20℃，搅拌16h，过滤和干燥。将残余物溶解于i-PrOH中，并加入NEt3。将该混合物加热至使全部固体溶解，冷却至20℃，搅拌4h，过滤和干燥。在批号06-01159-2的纯化中的最后步骤，包括两个反复的以下步骤：将粗品EPB-348游离碱溶解于CH2Cl2中，并加热至35℃。加入甲烷磺酸，使该溶液冷却至20℃，搅拌16h，过滤和干燥。将残余物溶解于i-PrOH中，加入NEt3，并将该溶液加热至70℃，冷却至20℃，搅拌2h，过滤和干燥。
这些批次的XRD和DSC分析揭示不同的多形体形式。如图5E、5F和5G中所示，所观察到的对于批号45-548-YS-00和批号12-03-011的粉末XRD图和DSC温度记录图，与那些多形体A明显不同。它们分别被鉴别为B2和B1形式。
所观察到的对于批号12-03-018、批号146756和批号06-01159-2的粉末XRD图和DSC温度记录图(图5H和I)，类似于那些对多形体A所观察到的。然而，这些原料的流动性和可操纵性差和/或不协调(表2)。例如，批号146756原料具有检测到的卡尔指数(Carr Index)为64，标志极端差的流动性。该原料还产生肉眼可见的、长度为数百微米的凝聚块。肉眼可见的结果是，原料具有粘性性质，如由目测观察所确定的可操纵性差和粉末流动差。
表2.伐马洛韦批次物理特征：卡尔指数、粒度和凝聚块大小
批次 多形体形式 卡尔指数   典型的粒度范围(微米)   凝聚块大小(微米)
  146756   A   64   5-20   200
  12-03-018   A   48   5-40   100
  12-03-011   B1   42   2-15   100
在一些实施方案中，如下提供用于制备多形体A的方法。将比率为每升溶剂100g伐马洛韦的伐马洛韦和低级烷醇溶剂的混合物进行搅拌并加热至适当的内部温度，以实现完全溶解。在边搅拌下、控制温度梯度下将该溶液冷却，实现伐马洛韦的基本结晶化。过滤得到的混合物，将得到的固态空气干燥和真空烤炉干燥，以得到富含多形体A的伐马洛韦的白色固体。
如在本文所使用的，短语“如示于表1或图2的基本上相同的X-射线衍射图”，意指在一些实施方案中，多形体A具有的2-θ角为22.9°+/-0.2°和18.6°+/-0.2°。也意指在其它的实施方案中，多形体A具有的2-θ角为22.9°+/-0.2°、18.6°+/-0.2°、19.5°+/-0.2°和24.3°+/-0.2°。在另外的其它实施方案中，多形体A具有的2-θ角为22.9°+/-0.2°、18.6°+/-0.2°、19.5°+/-0.2°、24.3°+/20.2°、20.8°+/-0.2°、21.8°+/-0.2°和27.0°+/-0.2°。在另外的其它实施方案中，多形体A具有的2-θ角为22.9°+/-0.2°、18.6°+/-0.2°、19.5°+/-0.2°、24.3°+/-0.2°、20.8+/-0.2°、21.8°+/-0.2°、27.0°+/-0.2°、14.7°+/-0.2°和15.5°+/-0.2°。在另外的其它实施方案中，多形体A具有的2-θ角为22.9°+/-0.2°、18.6°+/-0.2°、19.5°+/-0.2°、24.3°+/-0.2°、20.8°+/-0.2°、21.8+/-0.2°、27.0+/-0.2°、14.7°+/-0.2°、15.5°+/-0.2°、25.5°+/-0.2°和29.9°+/-0.2°。
如在本文所使用的，短语“如示于图3的基本上相同的DSC温度记录图”，意指在一些实施方案中，多形体A具有的特征性DSC性质为从约105℃至约125℃的吸热谱线且其中心值接近115℃(典型地为20-30J/g)和从约170℃至约180℃的熔融吸热谱线且其中心值接近171℃(典型地约为20-30J/g)。
术语“低级烷醇溶剂”意指伐马洛韦可溶解于其中的任何低级烷醇，并且包括那些1-6个碳原子的伯醇、仲醇和叔醇。适宜的低级烷醇溶剂包括，例如，甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、2-甲基-1-丙醇、2-甲基-2-丙醇、2，2-二甲基-1-丙醇和环己醇。用于制备富含多形体A的伐马洛韦的低级烷醇溶剂可为甲醇、乙醇或2-丙醇。95∶5(v/v)乙醇/2-丙醇可被用作混合溶剂。
典型地，依据某些实施方案，将伐马洛韦和溶剂(如果使用混合溶剂预先混合)的混合物在边搅拌下加热至适当的内部温度(例如，于从65℃至74℃，或从68℃至72℃，如果使用乙醇或乙醇/2-丙醇的混合物)，以达到几乎完全溶解。加热过程发生约一个半小时。搅拌持续任选再进行30分钟以得到完全溶液。然后设定温度冷却速率为每小时从5℃至15℃，或每小时从8℃至12℃，整个冷却循环中不停搅拌。当内部温度达到55℃和61℃之间时，固体形成和大的结晶从溶液中析出。在回到室温(大约18至25℃)后，搅拌持续1至4小时，过滤得到的混合物，在真空烤炉(温度40至50℃，压力3～15in.Hg，慢速氮清洗)中使得到的湿滤饼干燥过夜，以得到富含多形体A的白色固体。
溶剂选择和温度控制的组合使得该过程具有高度的可重复性并且是可升级的。该过程在从10g至30kg范围的规模得到检验。
当使用其它溶剂或组合时，温度、溶解性和加载特性(profiles)可为与前述方法引用的不同，并且可依据本领域普通技术人员鉴于本文公开的内容加以调整。
在一些实施方案中，本发明方法中使用的混合溶剂为95∶5(v/v)乙醇/异丙醇，其与特殊变性酒精(SDA)3C等当量。使用SDA 3C，相对低成本的市售产品，使得该方法更具商业可行性。
多形体A是最为晶质的和在热力学上最稳定的伐马洛韦的多形体。竞争性和非-竞争性浆液试验显示最终形式的多形体A，而不论起始的多形体形式。多形体A的固体粉末更具流动性，使得其更易于被制成片剂。
在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦具有如在表1或图2中显示的基本上相同的X-射线衍射图。
在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦具有如示于图3中的基本上相同的DSC温度记录图。
在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦具有基本上与参考标准一致的IR光谱。
可通过卡尔指数(Pharmaceutical Preformulation and Formulation，A practical guide from candidate selection to commercial dosage form，Mark Gibson，Ed.；Interpharm出版社，2002；第386-7页)检测本发明固体产物的流动特征。通过使粉末经历机械力，可观察到粉末流动的阻力。经历叩打(tapping)的粉末的容积密度(可压缩性)的增加可用于确定卡尔指数。在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦具有范围从约35至约50的卡尔指数值。
可使用偏振光学显微镜在硅油中评估本发明固体产物的粒度。在一些实施方案中，如使用该系统检测时，富含多形体A的伐马洛韦具有范围从约10至约300微米的粒度。
在一些实施方案中，通过肉眼检视，富含多形体A的伐马洛韦是白色或淡棕褐色粉末。
在一些实施方案中，当溶解于溶剂，例如二氯甲烷时，富含多形体A的伐马洛韦形成澄清至几乎澄清的溶液。
在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦具有不多于0.2％的炽灼残渣。
在一些实施方案中，存在于富含多形体A的伐马洛韦中的重金属(如Pb)不多于0.002％。
在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦具有不多于1.0％的含水量。可通过卡尔·费歇尔(Karl Fischer)滴定法分析含水量。
可通过GC分析确定本发明产物中的溶剂含量。在一些实施方案中，关于残留溶剂，富含多形体A的伐马洛韦符合以下标准：丙酮、乙酸乙酯、庚烷、异丙醇、四氢呋喃、乙醇的NMT 0.5％；乙腈、二氯甲烷、甲苯的NMT 0.1％；乙二醇二甲基醚的NMT 0.05％；任何其它单个溶剂的NMT 0.05％；总溶剂NMT 1.0％。
可通过HPLC分析检测产物的纯度和杂质的量。在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦的纯度在无水和无溶剂基础上不低于970mcg/mg。在其它的实施方案中，除了在富含多形体A的伐马洛韦中存在高于1.5％的硬脂酸鸟嘌呤醇，无单个已知杂质。还在其它实施方案中，存在的硬脂酸鸟嘌呤醇不多于2.5％。在另外的其它实施方案中，不存在多于1.0％的单个未知杂质。在另外的其它实施方案中，存在的总杂质不多于3.0％。
在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦的保留时间与参考标准的差异不超过2.0％。
在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦符合以下关于非对映体和对映体杂质的标准：(S，S)-非对映体不多于4.0％；(R，R)-非对映体加(S，R)-对映体不多于3.0％。
在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦的效能在无水和无溶剂基础上不低于900mcg/mg。效能是组合物纯度的定量检测值。
在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦具有以上描述的两个或更多个特征。
在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦具有如在表1或图2中显示的基本上相同的X-射线衍射图、如示于图3中的基本上相同的DSC温度记录图、基本上与参考标准一致的IR光谱、卡尔指数值范围从约35至约50、粒度范围从约10至约300微米、炽灼残渣不多于0.2％、含水量不多于1.0％、残留溶剂不多于如上的定义和/或纯度不低于97％。
在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦具有如在表1或图2中显示的基本上相同的X-射线衍射图、如示于图3中的基本上相同的DSC温度记录图、基本上与参考标准一致的IR光谱、卡尔指数值范围从约35至约50、粒度范围从约10至约300微米、炽灼残渣不多于0.2％、含水量不多于1.0％、残留溶剂不多于如上的定义和纯度不低于97％。
伐马洛韦的其它多形体包括，但不限于B1、B2、B3、B4、C和H形式。采用如在本文实施例5-伐马洛韦的多形体筛选中描述的方法和条件得到这些多形体。这些多形体形式在评估伐马洛韦药物产品的多形体纯度中被用作分析标准品。多形体B1、B2、B3、B4、C和H易于转化为单独的A形式，或在组合中，使用本文描述的方法，并且因此可用于产生本发明的富含多形体A的伐马洛韦组合物中用作原料源。
在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦基本上没有其它多形体形式。
在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦基本上没有B1形式。
在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦基本上没有B2形式。
在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦基本上没有B3形式。
在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦基本上没有B4形式。
在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦基本上没有B1、B2、B3或B4形式。
在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦基本上没有C形式。
在一些实施方案中，富含多形体A的伐马洛韦基本上没有B1、B2、B3、B4或C形式。
本文还提供用于治疗和/或预防病毒性感染的方法，该方法包括给予有需要的患者有效治疗量的本发明的富含多形体A的伐马洛韦。
使用本文描述方法可治疗的病毒性感染，由例如，水痘带状疱疹病毒、单纯疱疹病毒(HSV-1和HSV-2)、人疱疹病毒(HHV-6、HHV-7和HHV-8)、爱泼斯坦巴尔病毒、巨细胞病毒和HIV引起。
在一些实施方案中，所述病毒性感染是选自水痘带状疱疹、单纯疱疹病毒(HSV-1和HSV-2)、人疱疹病毒6、人疱疹病毒7、人疱疹病毒8、爱泼斯坦巴尔病毒和巨细胞病毒的疱疹病毒感染。在这些实施方案中，所述病毒性感染可呈现为多种形式的人体失调，诸如水痘、带状疱疹、口唇疱疹/单纯性疱疹(cold sores)、生殖器疱疹、单核细胞增多症、卡波济氏(Kaposi’s)肉瘤、慢性疲劳、婴儿玫瑰疹、多发性硬化症、鼻咽癌和其它恶性肿瘤。
在其它的实施方案中，所述病毒性感染是HIV或共同感染的HIV/HBV或HIV/HCV或其它条件性疾病，诸如CMV或临床表现为疱疹角膜炎的HIV感染或AIDS。
富含多形体A的伐马洛韦可被用于药物的制备，所述药物用于治疗或预防病毒性感染，尤其是经由口服或其它全身给药。
富含多形体A的伐马洛韦是晶质的，具有良好的流动特征，并且可被采用本领域已知的程序和方法易于转变为口服给药的片剂。
预防或治疗病毒性感染的额外的实施方案包括在移植之前、之中或之后使用富含多形体A的伐马洛韦。
在一些实施方案中，典型地经口服或全身，与免疫调节剂，例如，糖皮质激素共同给予本文描述的多形体。代表性的糖皮质激素包括，但不限于阿氯米松、地奈德、氟泼尼定、氟米松、氢化可的松及其酯，诸如丁酸氢化可的松或乙酸氢化可的松、氯倍他松、曲安奈德、倍他米松、布地奈德(budenoside)、地塞米松(desoximethasone)、二氟拉松(diflorosane)、氟轻松(fluocinolone)、醋酸氟轻松(fluoccinonide acetonide)、氟可龙、氟替卡松、醋丙甲泼尼龙、莫米松、罗氟奈德等。Glucorticoids，诸如氢化可的松或倍他米松或dextromethasone典型地以它们常规免疫调节给药方案给药。
对于以上表明的效用和适应症，所需要的伐马洛韦API的量将取决于多种因素，包括要治疗的病症的严重程度和接受者的特性，并且将最终在于主治医师的判断。可是，一般而言，适宜的有效剂量将在每公斤接受者体重每天1至150mg范围内。其它适宜的有效剂量在每天每公斤体重5至120mg的范围内(除非另有所指，活性成分的所有重量均以伐马洛韦计)。在给药日需要的剂量可呈现为全天以适当间期的一、二、三或四次或更多次亚剂量给药。这些亚剂量可以单位剂型给予，例如，每单位剂型含有约50至2000mg或从约250、500、1000、2000或3000mg的活性成分。在一些实施方案中，单位剂量是1000mg/天。
为了指导起见给出以下给药方案：治疗水痘带状疱疹病毒感染(例如带状疱疹)：给予约500mg至3g每天单一剂量三至七天；或者，约500mg至3g的每天总剂量，以每天两次给予250mg至1.5g，三至七天。例如，可在带状疹发红开始的72小时内用1000mg、2000mg或3000mg的每天剂量治疗患者七天。在一些实施方案中，治疗或预防水痘带状疱疹病毒感染的给药方案是给予1gm七天。在其它的实施方案中，治疗或预防水痘带状疱疹病毒感染的给药方案是给予2gm七天。
为了指导起见给出以下给药方案：治疗爱泼斯坦-巴尔病毒感染(例如，单核细胞增多症)：以每天两次，每次1.0g给予约2.0g的每天总剂量7至21天。对于移植患者，给予该每天剂量三至六个月应对危险期；和对于HIV阳性患者，给予如通常指示的每天剂量以提高生活质量，例如用两年或更久的时间。在一些实施方案中，用于治疗或预防爱泼斯坦-巴尔病毒(例如，单核细胞增多症)的给药方案是给予1g七天。
为了指导起见给出以下给药方案：抑制人疱疹病毒6A(HHV-6A)：每天一次给予500mg至3.0g的每天总剂量三至六个月应对危险期。
为了指导起见给出以下给药方案：抑制人疱疹病毒8(HHV-8)：每天一次给予500mg至3.0g的每天总剂量三至六个月应对危险期。
为了指导起见给出以下给药方案：治疗1型和2型单纯疱疹病毒的病毒感染：给予1.0至4g的每天总剂量(500mg每天两次或2.0g每天两次，5至10天)；抑制1型和2型单纯疱疹病毒感染：给予250mg至1g的每天总剂量约一至十年(取决于患者)。
虽然，例如，富含多形体A的伐马洛韦可单独以胶囊形式给予，其也可呈现为药物制剂。这样的制剂包含富含多形体A的伐马洛韦，连同一种或多种可接受的载体/赋形剂和任选其它治疗成分。载体必须是可接受的，其含义即与制剂中的其它成分相容的且不伤害接受者。
制剂包括，但不限于那些适宜于直肠、鼻腔、局部(包括口颊和舌下)、阴道或胃肠外(包括皮下、肌肉内、静脉和皮内)给药的制剂。在一些实施方案中，制剂是口服给药制剂。制剂可常规呈现为单位剂型，如片剂和缓释胶囊剂，并可由制药领域熟知的任何方法制备。
这样的方法包括将多形体与载体相组合。通常，通过将富含多形体A的伐马洛韦与液体载体或细微粉碎的固体载体或两者均匀地和密切地组合，然后如果需要，使产物定型，制备制剂。本发明扩展到用于制备药用组合物的方法，该方法包括将富含多形体A的伐马洛韦与药学上可接受的载体或溶媒结合或组合。如果药用制剂的制备包括药用赋形剂的密切混合，通常是所使用的赋形剂为性质上是非碱性的，即为或者酸性或者中性的。
本发明的用于口服给药的制剂可呈现为不连续的单位，诸如胶囊剂、囊片剂或片剂，每种制剂含有预定量的活性剂。或者，它们可呈现为粉末剂或颗粒剂，诸如在水性液体、非水性液体、水包油液体乳剂、油包水液体乳剂、大剂量注射剂(bolus)等中的活性剂的溶液剂或混悬剂。
关于口服给药的组合物(如，片剂和胶囊剂)，术语“适宜的载体”包括溶媒，诸如常用的赋形剂，例如，粘合剂，诸如糖浆、阿拉伯树胶、明胶、山梨醇、黄蓍胶、聚乙烯吡咯烷酮(聚维酮)、甲基纤维素、乙基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙基甲基-纤维素、蔗糖和淀粉；填充剂和载体，例如，玉米淀粉、明胶、乳糖、蔗糖、微晶纤维素、高岭土、甘露醇、磷酸氢二钙、氯化钠和褐藻酸；和润滑剂，诸如硬脂酸镁、硬脂酸钠和其它的硬脂酸金属盐、硬脂酸甘油酯、硬脂酸、硅油、滑石粉、蜡、类和硅胶。也可使用矫味剂，诸如胡椒油、鹿蹄草油、樱桃调味品等。可值得需要的是加入着色剂以使剂型易于识别。也可采用本领域熟知的方法对片剂进行包衣。
可通过压制或模制，任选与一种或多种成分一起，制备片剂。可通过以自由流动形式，诸如粉末或颗粒呈现的活性剂，任选与粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、表面活性剂或分散剂混合，在适宜的机器中压缩，制备压制片剂。可通过在适宜的机器中对用惰性液体稀释剂湿润的、粉末化的化合物的混合物进行模压，制备模制片剂。片剂可任选被包衣或划痕，并且可配制以提供慢速或者控制释放的活性剂。
其它适宜用于口服给药的制剂包括含有在矫味剂基质，通常为蔗糖和阿拉伯树胶或黄蓍胶中的活性剂的菱形锭剂；含有在惰性基质，诸如明胶和丙三醇或蔗糖和阿拉伯树胶中的活性剂的锭剂；和含有在适宜的液体载体中的活性剂的嗽口剂。
在一些实施方案中，药用组合物是包含晶质的伐马洛韦、交联羟甲纤维素钠、聚维酮K-30、吐温-80、滑石粉和硬脂酸镁的囊片剂。在其它实施方案中，药用组合物是包含晶质的伐马洛韦(77％w/w)、交联羟甲纤维素钠(13.90％，w/w)、聚维酮K-30(3.25％)、吐温-80(1.10％)、滑石粉(4.10％)和硬脂酸镁(0.74％)的囊片剂。
在一些实施方案中，通过使用聚维酮K-30和吐温-80将晶质的伐马洛韦和交联羟甲纤维素钠湿法制粒，制备上述药用组合物。使颗粒干燥，然后通过网筛(#16)过筛。干燥和过筛制粒，然后使交联羟甲纤维素钠和滑石粉混合。加入硬脂酸镁，然后将混合的原料通过#30目网筛过筛，混合，然后卸料。然后使用高速旋片压缩机压制原料，和用Accela Cota包衣机用Opadyr II 33G99020对囊片进行包衣。然后将巴西棕间蜡加至包衣锅中和对囊片抛光，然后包装。
在一些实施方案中，片剂加工包括湿法制粒、干燥、过筛、混合和压制操作。用Opadyr II蓝33G99020对原料囊片进行包衣，并用巴西棕间蜡NF抛光。
药用组合物和/或多形体可与其它其它抗病毒剂，诸如用于疱疹适应症的阿昔洛韦、伐昔洛韦、喷昔洛韦、泛昔洛韦、更昔洛韦及其前药、西多福韦、膦甲酸等联合给予。
对于HIV治疗，典型地药用组合物和/或多形体与其它HIV疗法共同给予，以在免疫受损的个体中避免产生药物逃逸突变和治疗伴随的感染。然而，某些抗感染剂可与允许以比相应单一疗法中较低的剂量给予的一种或两种活性成分，产生协同反应。例如，在倾向于由Cyp3A4快速代谢的药物中，与HIV蛋白酶抑制剂利托那韦共同给药可允许给予较低剂量的给药方案。典型地，本文描述的多形体和各个其它的抗病毒剂，以反映它们各自的活性和生物利用度的摩尔比率共同-给予。一般地，这样的比率相对多形体而言，将为250∶1至1∶250或25∶1至1∶25，但是可以更低，例如在细胞色素P450拮抗剂，诸如利托那韦的情况下。
代表性的HIV抗病毒剂，包括，但不限于核苷类逆转录酶抑制剂(NRTI)，诸如阿洛夫定(FLT)、齐多夫定(AZT、ZDV)、司他夫定(d4T，Zerit)、扎西他滨(ddC)、去羟肌苷(ddI，Videx)、阿巴卡韦、(ABC，Ziagen)、拉米夫定(3TC，Epivir)、恩曲他滨(FTC，Emtriva)、racevir(外消旋的FTC)、阿德福韦(ADV)、恩替卡韦(BMS 30 200475)、阿洛夫定(FLT)、富马酸替诺福韦酯(TNF，Viread)、氨多索韦(amdoxavir)(DAPD)、D-d4FC(DPC-817)、-dOTC(Shire SPD754)、艾夫西他滨(Achillion ACH-126443)、BCH 10681(Shire)、SPD-756、racivir、D-FDOC、GS7340、INK-20(硫醚磷脂AZT，Kucera)、2′3′-二脱氧-3′-氟代鸟苷(FLG)及其前药，诸如MIV-210和reverset(RVT，D-D4FC，Pharmasset DPC-817)。
代表性的非-核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTI)包括，但不限于地拉韦啶(Rescriptor)、依法韦仑(DMP-266，Sustiva)、奈韦拉平(BIRG-587，Viramune)、(+)红厚壳素植物提取物A和B(Advanced LifeSciences)、卡普韦林(AG1549f S-1153；Pfizer)、GW-695634(GW-8248；GSK)、MIV-150(Medivir)、MV026048(R-1495；MedivirAB/Roche)、NV-05 2 2(Idenix Pharm.)、R-278474(Johnson &Johnson)、RS-1588(Idenix Pharm.)、TMC-120/125(Johnson &Johnson)、TMC-125(R-165335；Johnson & Johnson)、UC-781(Biosyn Inc.)和YM215389(Yamanoushi)。
代表性的HIV蛋白酶抑制剂包括，但不限于PA-457(Panacos)、KPC-2(Kucera Pharm.)、5HGTV-43(Enzo Biochem)、氨普那韦(VX-478，Agenerase)、阿扎那韦(Reyataz)、硫酸茚地那韦(MK-639，Crixivan)、Lexiva(膦沙那韦钙、GW-433908或908、VX-175)、利托那韦(Norvir)、洛匹那韦+利托那韦(ABT-378，Kaletra)、替拉那韦、甲磺酰奈非那韦(Viracept)、沙奎那韦(Invirase，Fortovase)、AG1776(JE-2147、KNI-764；Nippon Mining Holdings)、AG-1859(Pfizer)、DPC-681/684(BMS)、GS224338(Gilead Sciences)、KNI-272(NipponMining Holdings)、Nar-DG-35(Narhex)、P(PL)-100(P-1946；ProcyonBiopharma)、P-1946(Procyon Biopharma)、R-944(Hoffmann-LaRoche)、RO-0334649(Hoffmann-LaRoche)、TMC-114(Johnson & Johnson)、VX-385(GW640385；GSK/Vertex)、VX-478(Vertex/GSK)。
其它HIV抗病毒剂包括，但不限于侵入抑制剂，包括融合(fusion)抑制剂、CD4受体抑制剂、CCR5共同受体抑制剂和CXCR4共同受体抑制剂，或其药学上可接受的盐或其前药。侵入抑制剂的实例为AMD-070(AMD11070；AnorMed)、BlockAide/CR(ADVENTRXPharm.)、BMS 806(BMS-378806；BMS)、恩夫韦肽(T-20、R698，Fuzeon)、KRH1636(Kureha Pharmaceuticals)、ONO-4128(GW-873140、AK-602、E-913；ONO Pharmaceuticals)、PRO-140(Progenics Pharm)、PRO-542(Progenics Pharm.)、SCH-D(SCH-417690；Schering-Plough)、T-1249(R724；Roche/Trimeris)、TAK-220(Takeda Chem.Ind.)、TNX-355(Tanox)和UK 427,857(Pfizer)。整合酶抑制剂的实例为L-870810(Merck & Co.)、c-2507(Merck & Co.)和S(RSC)-1838(shionogi/GSK)。
现在将通过实施例对本发明进行阐述。所述实施例并不意欲限制本发明的范围，而是应该与以上描述的细节和一般描述联合阅读，以提供对本发明的进一步理解和概述制备需要的本发明的方法所产生的产物的过程，以及本发明其它部分。
实施例
实施例1.-用于伐马洛韦API的分析的检验证书
用于批号A501S8-07-001的伐马洛韦API的分析的检验证书在表3中显示，以证明对本发明产物所获得的分析数据。
表3.用于伐马洛韦API的分析的检验证书
  试验   说明书
  性状   白色至淡棕褐色粉末
  鉴别(IR)   符合参考标准
  湿度(KF)   NMT 1.0％
  溶液澄明度   澄清至几乎澄清；可存在少量纤维
  试验   说明书
  炽灼残渣   NMT 0.2％
  重金属(如Pb)   NMT 0.002％
  非对映体性和对映体杂质   (S，S)-非对映体不多于4.0％；(R，R)-非对映体加(S，R)对映体不多于3.0％
  效能(HPLC)   在无水和无溶剂基础上不低于900mcg/mg
  纯度(HPLC)   在无水和无溶剂基础上不低于970mcg/mg
  鉴别   样品和参考标准的保留时间的差异不超过2.0％
残留溶剂   丙酮、乙酸乙酯、庚烷、异丙醇、四氢呋喃、乙醇的NMT 0.5％；乙腈、二氯甲烷、甲苯的NMT 0.1％；乙二醇、二甲基醚的NMT 0.05％；任何其它单个溶剂的NMT 0.05％；总溶剂的NMT 1.0％。
杂质(HPLC)   无多于1.5％的单个杂质；硬脂酸鸟嘌呤醇：NMT 2.5％已知杂质：C16酯；N-7异构体；N-乙基缬氨酸；位置异构体；硬脂酸鸟嘌呤醇(IV)；C20酯；硬脂酸酯醛(III)；鸟嘌呤硬脂酸酯(II)；O，O二硬脂酸酯；V Boc；单个未知杂质不＞1.0％；总杂质NMT 3.0％
实施例2.-用于伐马洛韦多形体A的再结晶方法
向装配有机械搅拌器，由210T J KEM型号温度控制器/热电偶控制油浴温度的，内在的热电偶连接至Yokagowa温度记录仪和烘干管的2L圆底烧瓶中加入批号146756的110g的EPB 348、1.1L的由55mL的2-丙醇(Fisher，批号050564)和1045mL的200Proof乙醇(Aaper，批号06128WA)(SDA 3C变性无水酒精的等价物)组成的预混合溶液。将得到的经搅拌的混合物加热至内部温度72℃，达到固体几乎完全溶解。加热过程历经约一个半小时。大批固体易于形成溶液；最后一小块需要在约72℃内部温度搅拌30分钟，直至达到完全溶解。允许内部温度高达74℃。*然后将该溶液以每小时10℃的速率冷却**，在整个冷却循环中不停搅拌。当内部温度达到55和61℃之间时，从溶液中有固体和大量结晶析出。作为结晶化的结果，有2℃的放热曲线。在将回到室温(大约25℃)后搅拌持续一个小时，过滤得到的混合物并且风干得到的固体，然后在真空烤炉干燥过夜(50℃，大约半个大气压的真空，慢速氮清洗)，得到106g的白色固体(52772-10-6)。
*HPLC证据(柱：Phenomenex Inersil ODS-2，250×4.6mm，5微米粒度；流动相：在62∶38乙腈∶水/乙腈中的0.2％高氯酸；梯度：经25分钟0至95％；流速：1.5mL/min；检测：254nm)提示，通过使结晶化的时间延长(包括结晶后的混悬液的过夜搅拌)，杂质(硬脂酸鸟嘌呤醇)构成从最初开始时的约0.3面积％水平至约0.9面积％。通过以下报告的时间和温度，杂质构成限制在0.6面积％，其是普遍认为可接受的。
**已经探究和发现的冷却速率范围从每小时5℃、每小时约12℃，以得到可比较的化学纯度和多形体形式的产物。
产物的特征具有与那些在图2和3中发现的类似的衍射特征，其为代表性的伐马洛韦多形体A。
实施例3.-结晶化过程发展
使用批号146756作为原材料实施小规模的(1-5g)结晶化。确定几种倾向于产生良好的物质固体的溶剂(吡啶、DMF、乙醇等)。由于这些溶剂中的许多具有低可行性和由乙醇显示的前景，选择乙醇用于进一步研究。
第一个10g规模再结晶
使10.1g的EPB 348(批号#146756)样品从100mL的无水乙醇(Aaper USP)中再结晶。在达到完全溶解前需要将内部温度升至68℃。于75℃搅拌溶液一个小时，然后停止加热，并将搅拌的混合物任其在机械搅拌中缓慢冷却至室温过夜。过滤得到的晶体块，于50℃干燥至恒重，得到9.3g的白色固体(样品52772-2-7)。
第二个10g规模再结晶
为了证明重现性，用10.0g的同样批号的EPB 348起始，重复该过程。分离和干燥后，此次得到9.3g白色固体(样品52772-3-17)。通过质子NMR分析，该原料与EPB 348的原始样品一致。
第三个10g规模再结晶
为了使该方法更具商业可行性，重复该过程，不同的是使用新鲜制备的变性乙醇，其与特殊变性乙醇(SDA)3C等价。其通过加入5体积的2-丙醇至95体积的无水乙醇中并且使得到的溶液充分混合制备。向100mL的该3C变性乙醇中加入10.0g的EPB 348，并将得到的混合物加热至内部温度为70℃，允许其在机械搅拌中缓慢回至室温。定时周期记录内部温度并作图，如图6中所示。使混合物于61.5℃完全溶解，但是随着时间的推移冷却至55.3℃的内部温度而形成固体。在搅拌后，使混悬液冷却至室温，过滤、风干，然后真空烤炉干燥(50℃，大约半个大气压真空，用慢速氮清洗)，得到9.37g的白色固体，样品52772-5-8。
第一个100g规模再结晶
在更大规模上重复从SDA 3C乙醇中的再结晶，控制冷却曲线于每小时5℃下降，并且在整个冷却过程中记录内部温度。向装配有机械搅拌器的，由210T J KEM型号温度控制器/热电偶控制油浴温度的，内在的热电偶连接至Yokagowa温度记录仪、烘干管的的2L圆底烧瓶中加入：批号146756的110g的EPB-348、1.1L的由55mL的2-丙醇(Fisher，批号050564)和1045mL的200Proof乙醇(Aaper，批号06128WA)组成的预混合溶液。将得到的经搅拌的混合物加热至内部温度72℃，这样达到完全溶解。然后设定温度至以每小时5℃速率冷却，在整个冷却循环中不停搅拌。当内部温度达到60和61℃之间时，固体从溶液中结晶出来。持续搅拌过夜，然后过滤得到的混合物，并且风干得到的固体，然后在真空烤炉中干燥(50℃，大约半个大气压的真空，慢速氮清洗)，得到106.7g的白色固体(52772-8-10)。
另外的100g规模再结晶
如前描述的，使两个额外批次的EPB-348从批号146756以100g规模在3C乙醇中再结晶。该过程中的变化包括：1)更快速分离(溶液达到室温后过滤固体，而不是静置于母液中过夜)和2)冷却速率目标为10和15℃/hr，而不是之前用于100g批次的5℃/hr。
将第一批次于～10℃/hr下冷却，而将第二批次于起先速率为13℃/hr后由于室温条件减缓至约每小时12℃下冷却。分别指定它们的批次为52772-10-6和52772-12-27。冷却至室温后分离该两个批次，得到好的固体，并通过XRD分析多形体形式和通过HPLC分析杂质分布。
衍射和热特征
得自以上10-克规模的再结晶方法的样品的X-射线衍射图和DSC温度记录图分别示于图7和8中。晶体化样品的X-射线衍射和热特征均与多形体A的一致。
粒度和流动特征
通过使粉末经历机械力，可观察到粉末流动阻力。经历叩打(tapping)的粉末的容积密度(可压缩性)的增加可用于确定卡尔指数。检测四个再结晶批次各自的该指数并列表如下。
采用偏振光学显微镜评估硅油中再结晶样品的粒度范围。粒度范围在表4中与粉末流动数据一起报告。
总之，卡尔指数范围从38至56。随着粒度增加，卡尔指数改善，这似乎与规模的增加相关。通过此方法制备的原料，比之前由肉眼观察确定的批次具有较好的加工性和粉末流动性。
表4.再结晶的伐马洛韦样品的卡尔指数和粒度
  批次   描述   卡尔指数   典型粒度范围
  52772-2-7   1st 10g   53   20-50
  52772-3-17   2nd 10g   56   10-30
  52772-5-8   3rd 10g   44   35-50
  52772-8-10   110g   38   150-300
HPLC分析
对四个批次的再结晶原料实施HPLC分析。(柱：PhenomenexInersil ODS-2，250×4.6mm，5微米粒度；流动相：在62∶38乙腈∶水/乙腈中的0.2％高氯酸；梯度：经25分钟0至95％；流速：1.5mL/min；检测：254nm)。将样品与用作再结晶的起始原料的批号146756比较。
表5.经HPLC分析的伐马洛韦样品的纯度
  分析序列   批次   描述   HPLC(面积％)
  1   批号146756   起始原料   98.8
  52772-2-7   第一个10g   98.8
  52772-3-17   第二个10g   98.8
  52772-5-8   第三个10g   98.9
  52772-8-10   第一个100g   98.4
  2   批号146756   起始原料   99.1
  52772-10-6   第二个100g   98.8
  52772-12-27   第三个100g   98.7
一般地，乙醇再结晶原料的杂质分布与起始原料的类似。低于0.05面积百分比的单个杂质未整合进去。将得自三个10g规模结晶的样品和得自第一个100g规模结晶的样品一起分析(分析序列1)。主要杂质通过保留时间列于表6中。HPLC重叠图示于显示代表性的色谱的图9中。
表6.再结晶的伐马洛韦(批次52772-2-7、52772-3-17、52772-5-8和52772-8-10)的杂质分布
  杂质   近似面积％   再结晶过程中的变化
  RRT 0.62   0.1   稍微减少
  RRT 1.24   0.1   稍微减少
  RRT 1.37   0.3至0.9   增加
  RRT 1.50   0.2   稍微减少
  RRT 1.53   0.1   无变化
  RRT 2.27   0.05   无变化
有六种杂质＞0.05面积％。对于所有再结晶样品，于RRT 0.62、1.24和1.50的杂质减少。
两种杂质，RRT 1.53和RRT 2.27，在再结晶过程中似乎无变化。
杂质之一，RRT 1.37，经观察在再结晶原料中升高。
在再结晶原料中未观察到新的杂质。
于RRT 1.37的杂质在每个样品中随着时间的过去增加。观察到于室温在“标准”溶液中经约14小时从0.3增加至0.5。虽然观察到该杂质随着时间的过去增加缓慢，在分析过程中溶液稳定性的缺乏，解释不了观察到的该杂质的变化。
一起分析得自两个额外的100g规模结晶的样品(分析序列2)。主要杂质通过保留时间列于表7中。
表7.再结晶的伐马洛韦(批次52772-10-6和52772-12-27)的杂质分布
  杂质   近似面积％   再结晶过程中的变化
  RRT 0.64   0.1   无变化
  RRT 1.31   0.1   稍微减少
  RRT 1.54   0.26至0.62   增加
  RRT 1.72   0.2   稍微减少
  RRT 1.76   0.1   无变化
  RRT 2.73   0.05   无变化
得自两个HPLC运行的第一个观察比较数据是，信号的保留时间是不同的。此归因于在具有冷却的自动进样器样品托盘(序列2)、预混合的流动相制备和其它精细差异的不同HPLC上运行所致。保留时间在该方法的系统适宜性标准之内。
第二点是，在结晶化过程的杂质分离中观察到相同的一般倾向。主要的问题是于RRT 1.54的杂质(对应于之前于RRT 1.37的杂质)。还观察到杂质在再结晶时增加；然而，由于更快速分离(不使固体在收集前成熟过夜)和更快的冷却速率(更少的时间暴露于升高的温度中)，该杂质的量的增加似乎已经被减弱。
HPLC数据表明，起始批次(146756)具有约0.26面积％的RRT 1.54，其在第二个和第三个再结晶100g批次中增加至0.55和0.62面积％。使用冷冻的自动进样器样品托盘使在HPLC分析过程中的该杂质的任何增长减至最小。
在两个新的再结晶批次中未观察到新的杂质(0.05面积％以上)。
HPLC结果表明，通过使用10至12-13℃/hr的冷却速率和在达到室温后收集固体，于RRT 1.54(之前RRT 1.37)的杂质的形成稍微减少。
注意到保留时间可依据所用的HPLC仪器不同而异。内标用作对照。
LCMS分析
LCMS分析用于确认在分离的产物中增长(或浓缩)的杂质的特性。自供应的方法的HPLC条件被用于产生在LCMS上的相同杂质分布，如使用HPLC所观察到的。用LCMS经得起检验的酸(TFA)取代高氯酸，如在LC方法中要求的。
令人怀疑的是，该主要杂质是伐马洛韦的des缬氨酸类似物。推定杂质的结构显示如下。
Figure GPA00001068528700281
在与双重酯化的前药一致的阳性离子模式中，观察到母体API具有619.4的m/z。观察到主要杂质(经由二极管阵列)具有520.3的m/z，与在去除缬氨酸取代基后的母体结构的MH+一致(如上所示)。
暂时的结论是，在再结晶过程中的杂质增长是des缬氨酸杂质。
残留溶剂分析
在采用较早报告的结晶方法的、多批次的10和100g规模再结晶的伐马洛韦上，实施对异丙醇(IPA)和乙醇的GC分析。各批次的结果概述于表8中。采用于0.5、1和1.5乘以乙醇和IPA的ICH限(5000ppm)的3点校准曲线分析样品。也对样品溶液进行示踪回收(Spike Recoveries)，以证明在样品基质中的回收是适宜的。
表8.10-100g规模多形体A批次的残留溶剂分析
  批次   描述  乙醇(ppm)   IPA(ppm)
  52227-2-7   第一个10g  ＜1990   ND
  52772-3-17   第二个10g   ＜1905   ND
  52772-5-8   第三个10g   ND   ＜1870
  52772-8-10   第一个100g   ＜1945   ＜1865
  52772-12-27   第三个100g   ＜1950   ＜1865
  示踪回收   NA   97.1％   95.8％
GC残留溶剂分析的结果表明，显著量的EtOH和IPA不被产物保留。示踪回收表明，分析物反应适宜用作分析。
实施例4.-用于伐马洛韦多形体A的大规模再结晶方法
4Kg规模再结晶
两个额外批次的伐马洛韦从批号146756于4+kg规模在如前描述的3C乙醇中再结晶。两个批次均产生好的、白色原料，经XRD证实为多形体A。
每个4+kg批次均在优良实验室规范(GLP)下进行特征鉴定。结果表明，结晶化过程在多公斤规模上产生可接受的结果。
30Kg规模再结晶
向184.7kg的乙醇200Proof和12.6kg的异丙醇的混合物中加入31.6kg的伐马洛韦，经20min将得到的混合物加热至内部温度为68.2℃(从18.4℃起始)，得到澄清溶液。在搅动中，经4小时以每小时10-15℃的速率使该溶液冷却至室温(20.0℃)。再于20℃下搅动该混合物另外4小时，且在过滤前使其静置另外7小时。用69.8kg的乙醇和3.6kg的异丙醇的混合物洗涤固体残留物，得到69.3kg的湿饼。在真空烤炉(≤45℃，～27in.Hg真空，用慢速氮清扫)中干燥湿饼，得到29.8kg白色固体，批次A501S8 07 001。
实施例5.-伐马洛韦的多形体筛选
对伐马洛韦活性药用成分实施多形体筛选研究。筛选需要使用溶剂再结晶、从熔化、退火再结晶试验和浆液试验，使原料再结晶。总之，API在超过100种不同的晶体生长条件下再结晶并用粉末X-射线衍射分析。对X-射线数据的化学计量处理被用于将样品类分为不同的组别。采用热的、光学的、分光镜的和其它工具研究这些组别，以阐明哪些组别表现出独特的固态形式的API。
一般地，API显示出许多不同的多形体形式，其中的许多似乎具有低顺序(low order)。无一被鉴定的固态形式是溶剂化物或水合物。除了多形体形式外，所述原料还似乎以液晶态存在。在研究中被鉴定的最稳定的多形体形式被指定为A形式(多形体A)。
溶剂再结晶
为了实施基于溶剂-部分的多形体筛选，将测试原料在大约100种不同的晶体生长条件进行溶剂再结晶。再结晶试验的规模为大约15mL。改变晶体生长条件的主要方式通过使用溶剂混合物的二进位梯度阵列(binary gradient arrays)完成。也改变饱和温度、生长温度和蒸发速率(相对过饱和度)，以在晶体生长条件中产生额外的差异。
总之，将多形体筛选分为四个不同的再结晶阶段(panels)。从四个再结晶阶段产生的固体连同通过其它方式(浆液、退火等)产生的样品一起经粉末XRD分析。为了减轻晶粒效应，将二维探测系统用于收集所有的XRD扫描数据。采用全方位化学计量学方法(full profilechemometric)处理评估收集的XRD数据，以确定样品的晶型在再结晶时是否改变。
衍射数据的化学计量学分析将样品类分为8个不同的组别(或群)，从A至H进行标记。有三个主要的组别和五个具有小量成员的组别。再结晶样品的范围从完全结晶至完全非结晶形(或液晶)，表明在研究过程中探测到适宜范围的结晶率。
A组含有24个成员。一些“如被承认的”批次进入该组中。相对于其它组别而言，该组具有高的结晶度。
B组是最大的组，其含有43个成员。该组具有低的结晶度，并且最终被细分为额外的组别(从B1至B4)。
C组含有23个成员。该组代表非结晶形或LC样品。
其它5个组别(从D至H)各自具有少量成员(1个或2个成员)。显示各组(从A直至H)成员数的概要示于表9中。得到的、对于单个(基于溶剂的)再结晶试验的组别的命名示于图10-A至D中的较低部分。
Figure GPA00001068528700311
非-竞争性浆液试验
除了溶剂再结晶试验外，还为了搜寻新的固态形式实施非竞争性浆液试验。这些试验依赖于不同的多形体形式(如果化合物以不同的多形体形式存在)的溶解度差异。如此，仅具有比最初溶解的晶型更低的溶解度(更稳定)的多形体形式(和溶剂化物)，可由非竞争性浆液试验产生。
从本质上看，当固体溶解于(浆液)溶剂时，最终产生饱和溶液。如果多形体形式溶解，该溶液将是饱和的。然而，如果比最初溶解的多形体形式更稳定的任何多形体形式(更稳定形式具有较低的溶解度)，该溶液将是过饱和的。因此，任何更稳定的多形体形式可成核并从溶液中沉淀出来。此外，非竞争性浆液试验常被用于鉴定与API形成溶剂化物的溶剂。
通过将更多的原料暴露于少量的纯溶剂中，并于室温下搅动得到的混悬液大约1周，实施浆液试验。固体经机械过滤和通过XRD分析，确定得到的形式。为了避免分离后可能的解溶剂化或物理变化，在X-射线分析前，不使样品经历干燥过程。表10显示这些非竞争性浆液试验的结果。
Figure GPA00001068528700321
大多数浆液试验导致基于X-射线散射行为的起始多形体形式无显著性变化。一种溶剂，MeOH确实改变固体的衍射特征，充分改变其所属的组别。在该样品上所实施额外的研究，在标记为“组别的特征鉴定”的段落中更详细地描述。
退火(annealing)试验
除了溶剂再结晶试验和非竞争性浆液试验外，实施退火试验以搜寻新的固态形式。这些试验需要寻找作为温度的函数的结构变化。此通过采用变温粉末X-射线衍射、热-台显微镜法和DSC试验完成，以搜寻可存在于多形体系统中的相变。
该项工作的主体是针对理解多种形式的热特性。通过使退火样品加热和寻找在热、X-射线、光学等行为中的变化，可确定是否导致新的固态形式。
自熔融中再结晶
通过使用HS显微镜或DSC实施自熔融中再结晶，以加热样品直至熔融，然后通过冷却至不同的温度，或者以不同的速率冷却它们，试图使它们结晶。然后，通过XRD、DSC等分析样品，以确定是否观察到不同的晶型。
组别的特征鉴定
在将再结晶数据编码入基于衍射行为的不同的组别后(见表7)，研究各组以确定各组别的其它性能是否可加以区别。各组的特征由将各组的代表性衍射数据与其它组别的比较开始。此一般随后进行DSC分析、TGA分析、热台显微镜法、NMR分析和其它分析。
A组
该组有大约24个成员。该组的特征性衍射性质示于图11A中，连同在图11B中的相应的热特性。该组的成员命名为形式A。导致形式A的样品源自不同类型的多形体筛选试验(多形体形式对照结晶试验、结晶筛选试验和浆液试验)。
形式A的样品的特征包括良好程度的结晶度和两个主要的热事件。接近115-125℃的大的吸热事件意味着形式A转化为液晶态。
有时接近115-125℃的主要的吸热信号，伴随有在低和/或高温度侧的较小的可辨别的信号。可变温XRD工作提示，形式A可逆性转化为接近的相关形式，其被命名为形式AE。
在形式A原料的样品中观察到的第二个主要的吸热事件，归因于在大约170℃的熔融。
形式A的分子光谱和TGA表明，其是无水、无溶剂的API的多形体形式。
B(B1-B4)组
未加工的化学计量学数据描述为含有大约43个成员的B组。组中的衍射行为的可变性表明，其由四个亚组组成。这些亚组被命名为B1、B2、B3和B4组。一般地，B亚组的样品展现出彼此相当类似的行为，并且具有比形式A的样品较低的顺序(结晶度)。
B1组
B1组的衍射和热特征分别示于图12A和12B中。特征性热行为包括三个独特的特性。第一个特性是在75-110℃区域的一对吸热谱线。第二个特性是在接近115-125℃温度范围的小的吸热谱线。第三个特性是接近170℃的熔融吸热谱线。
接近75-110℃的吸热谱线对归因于一对可逆的固体-固体多形体性转型，其将形式B1转变为形式H。采用可变温X-射线衍射跟踪这些转换。
接近115-125℃的吸热信号归因于形式H至液晶的转化，随后于170℃的液化(熔融)。需要注意的是示于图12B中的温度记录图中的可变性可归因于某些程度上样品的结晶度的差异。
如示于图13A的，形式H的衍射图完全未能解析分辨(unresolved)。图13B中的循环DSC温度记录图显示，随着温度升高和降低，转换是可逆的。
形式B1样品的分子光谱和TGA表明，其为API的无水、无溶剂的多形体形式。
B2组
B2组是B亚组中最大的一组。该形式的衍射和热特性分别示于图14A和14B中。基于更大数目和更好解析的衍射峰，该组似乎具有比B1组更高的结晶度。
该组的热特性包括三个区域的吸热特性。第一个特性通常是在100-110℃范围大的、回旋的吸热谱线。采用DSC，该特性显示为可逆的(见图15A和15B)，并且提示形式B2可逆地转变为被命名为形式B2E的亚稳态的形式，后者转型为形式H。第二个热特性是接近125℃的小的吸热谱线，其使形式H转化为液晶态。最后，液晶态在大约170℃经历液化。
形式B2样品的NMR和TGA表明，其是API的无水、无溶剂的多形体形式。
B3组
该组的典型衍射和热行为分别示于图16A和16B中。B3样品的衍射和热特征与其它的B组样品的类似。
形式B3的热特性与B1的最类似，只是B3样品一般在75-110℃温度区域具有一个独特的吸热谱线，而形式B1具有两个独特的吸热谱线。相信在75-110℃区域的最初的吸热谱线代表多形体性转化为形式H。于大约125℃形式H转变为液晶态，然后于大约170℃液化。图17A和17B显示循环DSC温度记录图表明形式B3至H的转化是可逆的，如同其它形式B/H互变体对。
可变温XRD还提示，形式B3缓慢地和可逆地转换为被命名为形式B3E的密切相关的结构，之后转换为形式H。
形式B3样品的分子光谱和TGA表明，其是API的无水、无溶剂的多形体形式。
B4组
衍射和热行为分别示于图18A和18B中。该组与B2组间在XRD行为中的细微差异包括在多个角度的一些增强的和缺乏的反射。该组热特征表明，其与B2组相似但又不同。B4组在大约75-110℃的温度区域显示出两个吸热谱线，然而B2组仅显示出一个吸热谱线。
在通过接近75-110℃的吸热谱线区域后，B4组可逆地转变(见图19A和19B)为被命名为形式H的亚稳态的多形体形式。其伴随使原料转变为液晶态的接近125℃的较小的吸热谱线。该态维持直至温度达到大约170℃时原料被液化。
可变温XRD用于研究作为温度函数的原料。似乎是，形式B4也经历细微的可逆的变化，在转变为形式H之前，变成被命名为形式B4E的密切相关的结构。
形式B4样品的分子光谱和TGA表明，其为API的无水、无溶剂的多形体形式。
B1-B4组
基于少量的衍射峰，并且观察到它们是宽峰并常常回旋的，所有B组成员的XRD图具有低的结晶度。由于衍射表现的类型的相似性，这种普通的特性使得难以辨别和编码B1至B4组以及它们相应的明显的亚稳态的形式(B2E、B3E、B4E)。应该注意的是，可变温XRD和循环DSC表明，一旦冷却时，这些升高的温度形式(H、B2E、B3E、B4E)可逆地转变回B1至B4。形式H、B2E、B3E和B4E的在冷却至室温时的转化，防止这些形式在室温下被分离和进一步研究。
C组
该组具有大约23个成员。该组的衍射和热特征分别示于图20A和20B中。该组代表的液晶或非结晶形态的样品。X-射线衍射图仅显示出在低角度具有较小衍射信号的轫致辐射散射。一般地，其它形式的样品，被加热直至它们转化为液晶态，即使在冷却至室温后仍倾向于维持在此态。应该注意的是有许多类型的液晶并且液晶态的确切性质尚未确定，除了其为热致变的。可能的是，存在一种以上的液晶态或在研究过程中所鉴别的不同的多形体形式形成不同的类型的液晶态。
H组
H组描述仅通过加热B组样品穿过它们的第一个吸热活性区域所观察的样品。观察到每个B组样品可逆地转换为被命名为形式H的另一个多形体形式。形式H在118℃的衍射行为通过如在图13中如此标记的曲线显示(标记25℃的曲线是形式B1和标记140℃的曲线是液晶)。
能量关系
采用各种形式于乙醇中的混合物(通常50∶50)并且于大约25℃搅动数天实施竞争性浆液试验。通过于室温搅动在乙醇中的一种形式的过多固体，实施非-竞争性浆液试验。基于其对于手头多形体形式的适中的溶解性选择乙醇，并且应该理解的是乙醇似乎不与多形体形式形成溶剂化物。
在竞争性和非竞争性浆液试验两者中，固体经真空过滤和通过XRD分析。XRD图用于确定未溶解的固体是否转化为不同的多形体形式。在一种情况下，不同的多形体形式显现的是，不同于最初存在的两种形式中的任一种。此表明这两种起始形式对于被分离的最终形式而言是亚稳态的。
一般地，在形式A的存在下，B多形体样品易于转变为形式A。此表明形式A比B多形体溶解性更小并且在热力学上更稳定。观察到两种形式B的多形体之间的一些竞争性浆液导致形式A，其进一步支持该能量关系的描述。
非-竞争性浆液试验表明，易于转换为A的B组多形体甚至没有形成晶种(或引导入形式A)。浆液数据概述于表11.中。
表11.多种多形体形式的浆液互变现象
  起始形式   最终形式
  B1   A
  B2   A
  B3   A
  B4   A
  F   A
  A-B1   A
  A-B2   A
  B1-B2   A
形式C是该原料的液晶态。由于在工艺上是液体，其不经历浆液试验。
形式H多形体，对于其给出可逆的吸热(互变的)关系的、相应的B多形体配对物而言，被认为是亚稳态的。此意味着形式H多形体比B多形体具有更好地溶解性和在热力学上较不稳定性。此与H多形体由于转化为更稳定的B家族多形体不能在室温下分离的观察一致。
多形体筛选结论
采用化学计量学处理方法，将产生自多形体筛选试验(溶剂再结晶、自熔融中再结晶、退火、非-竞争性浆液试验)的、未加工的衍射数据初步类分为8个不同的组别。对这些不同的组别的分析用于实施额外的试验(如DSC、TGA、HSM、NMR等)，以使通过化学计量学处理的组别被精确判定。对这些组别的精确划分导致于表12中概述的多形体形式被编码(codification)。
表12.不同的多形体形式的概述
Figure GPA00001068528700391
在表10中显示的所有不同的形式命名为非-溶剂化的、非-水合的形式。实际上，在研究期间没有观察到明显的溶剂化物。尽管对各种形式没有实施正式的吸附/水合研究，未发现明显的水合物。一般地，API实际上不溶解于水而有相当的脂溶性，提示其可不倾向于形成水合物。
竞争性浆液用于阐明在室温条件下能够被分离的多形体形式之间的能量关系。非-竞争性浆液试验(由形式A起始，见表10)不显示任何多形体性变化。此，与非-竞争性浆液试验数据相符，提示在多形体筛选过程中发现的形式，形式A似乎是API的热力学上稳定的形式。
试验方法
显微镜
使用配置偏振可见光源和可极化检偏器的蔡司(Zeiss)通用显微镜评估样品的光学性能。典型地，将标本固定于具有滴加浸镜油和盖玻片的显微镜载玻片上。典型地，放大倍率为250X。记录观察到的粒子/晶体大小和形状。还注意双折射的存在。
分子光谱法-1H-NMR
通过使1-10mg样品溶解于含0.05％(v/v)四甲基硅烷(TMS)的二甲亚砜(DMSO)-d6中，制备样品。于室温在Varian Gemini 300MHzFT-NMR分光计上收集光谱。
红外光谱法(FTIR)
用装配Harrick SplitpeaTM衰减全反射仪的、Nicolet 510M-O傅里叶变换红外分光计获得红外光谱。用分辨率4cm-1、自4000-400cm-1获得光谱，并收集128行扫描用于每一次分析。
差示扫描量热法(DSC)
在TA Instruments 2910DSC上收集DSC数据。一般地，在铝质样品锅中将质量范围为1至10mg的样品卷曲，并用清洗速率为50mL/min的氮从25至约175℃、以10℃/分钟速率扫描。
热重分析仪法(TGA)
在TA Instruments 2950DSC上收集TGA数据。一般地，将5至15mg质量范围的样品置于打开的、预称皮重的铂样品锅中，并用氮清洗从25至约150℃、以10℃/分钟速率扫描。
热台显微镜法(HSM)
使用配置偏振可见光源和梅特勒(Mettler)热台附件的蔡司通用显微镜。将标本固定于滴加浸镜油和盖玻片的显微镜载玻片上。典型地，放大倍率为200X。将样品以3或10℃/分钟的速率从25℃加热至175℃.记录观察到的相变化、再结晶、泡沫的进展演化等。
粉末流动
采用卡尔指数比较粉末流动特征。通过使粉末经历机械力，可观察粉末流动的阻力。经历叩打的粉末的容积密度(可压缩性)的增加可用于确定卡尔指数。卡尔指数的概要和定性的流动性概述于下表13中。
Figure GPA00001068528700411
实验前使各批次过＜1000微米筛。此对去除样品中的任何结块是必需的。
高效液相色谱(HPLC)
采用Perkin Elmer HPLC，用LC-410泵，LC-235二极管阵列检测器和200系列自动进样器，收集LC数据。HPLC配备peltier控制器样品托盘和柱加热器。通过经验证的客户机-服务器LIMS收集数据。
所使用的HPLC方法如下：柱：Phenomenex Inersil ODS-2，250×4.6mm，5微米粒度；流动相：于62∶38乙腈∶水/乙腈中的0.2％高氯酸；梯度：25分钟自0至95％；流速：1.5mL/min；检测：254nm)提示，通过延长结晶化时间(包括结晶化后的混悬液搅拌过夜)，杂质(硬脂酸鸟嘌呤醇)从最初起始水平的约0.3面积％达到约0.9面积％。通过提供以下时间和温度，杂质的构成限制至现行认为可接受的0.6面积％。
液相色谱质谱法(LCMS)
采用由以下部件组成的Agilent 1100LC/MS系统收集数据：G1367A孔板进样器，G1316A柱加热室，G1315A二极管阵列检测器，G1322A真空除气器，G1312A二元泵和G1946C质谱检测器(电喷雾单-quad)。
基于之前描述的HPLC方法选择LC条件。对于该方法的主要修改是使用甲酸而不是高氯酸。使用由UV二极管阵列电喷雾和阳离子型MS分析样品。
X-射线粉末衍射(XRD)
使用装配XYZ调整台、用于定位的激光视频显微镜和两个二维HiStar面积检测器的Bruker D8 Discovery衍射计获得X-射线粉末衍射图。采集时间名义上为60秒。于40kV和40mA运行的Cu Kα放射1.5406埃源用于照射样品。X-射线光学由连接0.5mm的针孔瞄准仪的Gobel镜组成。采用配有给出有效2θ范围为4-40°的距离15cm的样品-检测器的θ-θ连续扫描仪。将样品固定于低背景石英板中。使用可变温热台操纵样品温度用于某些试验。
本领域技术人员应该认识到，可在不背离广义的本发明概念时对以上描述的实施方案作出修改。因此，应该理解，本发明并不受限于所公开的具体实施方案，但意欲涵盖于如在所附权利要求书中限定的本发明的精神和范围内的修改。

Claims (21)

1.结晶伐马洛韦或其药学上可接受的盐。
2.依据权利要求1的结晶伐马洛韦，其在X-射线粉末衍射图中的22.9°+/-0.2°、18.6°+/-0.2°、19.5°+/-0.2°、24.3°+/-0.2°、20.8°+/-0.2°、21.8°+/-0.2°、27.0°+/-0.2°、14.7°+/-0.2°、15.5°+/-0.2°、25.5°+/-0.2°和29.9°+/-0.2°处具有特征吸收峰。
3.一种药用组合物，其包含结晶伐马洛韦或其药学上可接受的盐和药学上可接受的赋形剂或稀释剂。
4.权利要求3的药用组合物，其中的结晶伐马洛韦在X-射线粉末衍射图中的22.9°+/-0.2°、18.6°+/-0.2°、19.5°+/-0.2°、24.3°+/-0.2°、20.8°+/-0.2°、21.8°+/-0.2°、27.0°+/-0.2°、14.7°+/-0.2°、15.5°+/-0.2°、25.5°+/-0.2°和29.9°+/-0.2°处具有特征吸收峰。
5.权利要求1或2的结晶伐马洛韦，其纯度至少为90％。
6.权利要求1或2的结晶伐马洛韦，其纯度至少为95％。
7.权利要求1或2的结晶伐马洛韦，其纯度至少为99％。
8.一种制备结晶伐马洛韦的方法，其包括以下步骤：
通过加热至适当的内部温度，将伐马洛韦溶解于低级烷醇溶剂或低级烷醇的混合溶剂中；
在边搅拌下，使该溶液冷却，以实现伐马洛韦的基本结晶化；和
收集结晶伐马洛韦。
9.权利要求8的方法，其中的低级烷醇溶剂是乙醇。
10.权利要求8的方法，其中的低级烷醇的混合溶剂是95∶5(v/v)乙醇/2-丙醇的混合物。
11.权利要求8的方法，其中的内部温度为从约65℃至约74℃。
12.权利要求11的方法，其中的内部温度为从约68℃至约72℃。
13.权利要求8的方法，其中的冷却速率为每小时从约5℃至约15℃。
14.权利要求13的方法，其中的冷却速率为每小时从约8℃至约12℃。
15.一种在患者中治疗或预防病毒性感染的方法，所述方法包括给予有需要的患者有效治疗量的权利要求1的结晶化合物或权利要求3的药用组合物。
16.权利要求15的方法，其中的病毒性感染是水痘带状疱疹病毒感染。
17.权利要求15的方法，其中的病毒性感染是单纯疱疹病毒感染。
18.权利要求15的方法，其中的病毒性感染是人类疱疹病毒感染。
19.权利要求15的方法，其中的病毒性感染是爱泼斯坦巴尔病毒感染。
20.权利要求15的方法，其中的病毒性感染是巨细胞病毒感染。
21.权利要求15的方法，其中的病毒性感染是HIV感染。
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