CN101817760A - 一种从新鲜百合中制备秋水仙碱的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种制备秋水仙碱的方法，工艺以新鲜百合药材为原料，破碎，甲醇回流提取2-3次，减压浓缩至低密度，酸碱纯化，氧化铝柱吸附，再经石油醚、乙酸乙酯梯度洗脱杂质，收集秋水仙碱流分，回收试剂至小体积，放置结晶，再在乙酸乙酯中回流饱和溶解，结晶2-3次，即得产品。采用该法生产品，工艺简单易操作。

Description

一种从新鲜百合中制备秋水仙碱的方法

技术领域：

本发明涉及一种从新鲜百合中制备秋水仙碱的方法，尤其是一种采用酸碱纯化、氧化铝柱制备秋水仙碱的方法。

背景技术：

秋水仙碱又叫秋水仙素，是一种生物碱。

分子式：C₂₂H₂₅O₆N。分子量：399.44

分子结构是：

性质：秋水仙碱是一种淡黄色鳞片状结晶或粉末，结晶水遇光易变暗色。由于具有弱极性而既可溶于水(在一定浓度的水溶液中能形成半水合物的结晶析出)，又可溶于部分有机溶剂中。1g秋水仙碱可溶于22ml水中，220ml乙醚中或100ml苯中。易溶于乙醇、氯仿，但不溶于石油醚。

秋水仙碱能抑制有丝分裂，破坏纺锤体，使染色体停滞在分裂中期，被广泛应用于细胞学、遗传学的研究和植物育种的工作中。

秋水仙碱对痛风性关节炎有选择性的消炎作用，用后数小时关节的红、肿、痛、热可见消退，还可用于微结晶性痛风急性发作，假性痛风，白塞病等。

百合属百合科(Liliaceae)草本植物，其地下鳞茎为扁平或近圆形，鳞片肉质肥厚，色白或微黄。作为一种常用中草药，百合最早收载于《神农本草经》。养阴润肺，清心安神。用于阴虚久咳，痰中带血，虚烦惊悸，失眠多梦，精神恍惚。主要化学成分有苷类、多糖、蛋白和生物碱。其中秋水仙碱含量多在0.1-0.4％之间。

国内从植物内提取秋水仙碱，原料主要是光慈姑和百合。光慈姑国内产量很小，不能满足需求，百合已成为提取秋水仙碱的原料之一。现有提取工艺多是有机试剂提取，薄层色谱分离纯化。如何纯莲发表的“百合中秋水仙碱的分离应用研究”，该文献公开了超临界萃取和一般试剂提取方法，薄层色谱纯化，但薄层色谱处理量较小。

发明内容：

发明人经多年工艺优化试验，发明了一种制备秋水仙碱的方法。该工艺简单易操作，产品收率高，生产成本低。

本发明是采用以下技术方案实现的：

一种从新鲜百合中制备秋水仙碱的方法，其特征在于包含以下步骤：

1)甲醇提取：将百合原料切片或粉碎，加入原料的4-6倍量85-95％甲醇回流提取2-3小时，提取2～3次，合并提取液，加入0.5-1％活性炭脱色，滤过，得脱色液；

2)酸碱除杂：将上述脱色液加入压浓缩至密度1.1-1.2，加入酸调节PH至0.5-2，放置沉淀，抽上清液滤过，加入碱液调节PH至10-14，放置沉淀，得沉淀物；

3)柱分离：上述沉淀物热水洗涤至中性，乙酸乙酯溶解，滤过，加入氧化铝柱，石油醚乙酸乙酯梯度洗脱，收集秋水仙碱流分，回收试剂至小体积，放置结晶；

4)重结晶：将上述粗结晶滤出在乙酸乙酯中回流饱和溶解，放置结晶，滤出低温干燥即得产品。

所述酸碱除杂条件：酸选用盐酸或硫酸的一种，碱可选用氢氧化钠、氢氧化钾或氨水，沉淀时间6-9小时。

所述氧化铝柱：氧化铝为中性氧化铝，目数120-200，装柱量是沉淀物的15-20倍量。

所述梯度洗脱条件：8-10倍石油醚洗脱杂质，石油醚∶乙酸乙酯(1∶1～2)混合溶液洗脱，高效液相监测。

所述结晶条件：秋水仙碱流分浓缩至其体积的1/4-1/5，结晶时间8-10小时。

所述重结晶条件：结晶时间12-16小时，结晶温度-10-0℃，重结晶2-3次。

综上所述，本发明存在以下优点：高醇提取杂质少、易过滤；酸碱处理，操作简单；氧化铝柱分离，处理量大。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

下述实施例中秋水仙碱的含量测定采用高效液相色谱法(参照田素英等“山慈菇中秋水仙碱提取工艺的优选”文献)，具体方法如下：

高效液相色谱条件：

色谱柱：ODS柱(250mm×4.6mm.5um)；

流动相：50％甲醇-0.05mol/L磷酸盐缓冲液(1∶1.pH-4.5)

流速：1mL/min；

检测波长：220nm

柱温：室温。

实施例1：

取新鲜百合，水洗干净，切成薄片，取10kg，投入提取罐，加入50L85％甲醇，回流提取2小时，提取3次，合并得150L提取液，加入750g活性炭脱色1小时，滤过减压浓缩至密度1.1，放出。在浓缩液中加入8％盐酸溶液调节PH至2，放置沉淀6小时，抽上清液离心，在离心液里，加入10％氢氧化钠溶液，调节PH至12，放置沉淀9小时，滤出沉淀物700克。沉淀物热水洗涤至中性，加乙酸乙酯溶解，取10.5kg120-200目氧化铝装柱，溶液过滤加入柱子吸附，量取石油醚100L洗脱氧化铝柱，用取石油醚∶乙酸乙酯(1∶1)混合溶液洗脱，高效液相监测，至无秋水仙碱结束洗脱，收集该段流分，回收试剂至其体积的1/4放置结晶。滤出粗结晶物35g。粗结晶物用乙酸乙酯回流饱和溶解，放置结晶，调节温度为-10℃，结晶12小时，滤出，再结晶两次，低温干燥，得产品18g，含量98.1％。

实施例2：

取新鲜百合，水洗干净，切成薄片，取10kg，投入提取罐，加入40L95％甲醇，回流提取3小时，提取3次，合并得120L提取液，加入580g活性炭脱色1.5小时，滤过减压浓缩至密度1.2，放出。在浓缩液中加入8％盐酸溶液调节PH至0.5，放置沉淀7小时，抽上清液离心，在离心液里，加入10％氢氧化钾溶液，调节PH至13，放置沉淀8小时，滤出沉淀物720克。沉淀物热水洗涤至中性，加乙酸乙酯溶解，取13.0kg120-200目氧化铝装柱，溶液过滤加入柱子吸附，量取石油醚110L洗脱氧化铝柱，用取石油醚∶乙酸乙酯(1∶1)混合溶液洗脱，高效液相监测，至无秋水仙碱结束洗脱，收集该段流分，回收试剂至其体积的1/5放置结晶。滤出粗结晶物38g。粗结晶物用乙酸乙酯回流饱和溶解，放置结晶，调节温度为-5℃，结晶15小时，滤出，再结晶两次，低温干燥，得产品19g，含量97.3％。

实施例3：

取新鲜百合，水洗干净，切成破碎，取10kg，投入提取罐，加入60L95％甲醇，回流提取2小时，提取2次，合并得120L提取液，加入600g活性炭脱色1小时，滤过减压浓缩至密度1.1，放出。在浓缩液中加入8％盐酸溶液调节PH至1，放置沉淀9小时，抽上清液离心，在离心液里，加入10％氢氧化钠溶液，调节PH至12，放置沉淀6小时，滤出沉淀物750克。沉淀物热水洗涤至中性，加乙酸乙酯溶解，取15kg120-200目氧化铝装柱，溶液过滤加入柱子吸附，量取石油醚140L洗脱氧化铝柱，用取石油醚∶乙酸乙酯(1∶1.5)混合溶液洗脱，高效液相监测，至无秋水仙碱结束洗脱，收集该段流分，回收试剂至其体积的1/4放置结晶。滤出粗结晶物33g。粗结晶物用乙酸乙酯回流饱和溶解，放置结晶，调节温度为0℃，结晶16小时，滤出，再结晶三次，低温干燥，得产品17.7g，含量98.5％。

实施例4：

取新鲜百合，水洗干净，切成薄片，取5kg，投入提取罐，加入25L90％甲醇，回流提取2小时，提取3次，合并得75L提取液，加入300g活性炭脱色1小时，滤过减压浓缩至密度1.1，放出。在浓缩液中加入8％盐酸溶液调节PH至2，放置沉淀8小时，抽上清液离心，在离心液里，加入10％氨水溶液，调节PH至14，放置沉淀7小时，滤出沉淀物250克。沉淀物热水洗涤至中性，加乙酸乙酯溶解，取4.5kg120-200目氧化铝装柱，溶液过滤加入柱子吸附，量取石油醚38L洗脱氧化铝柱，用取石油醚∶乙酸乙酯(1∶1)混合溶液洗脱，高效液相监测，至无秋水仙碱结束洗脱，收集该段流分，回收试剂至其体积的1/4放置结晶。滤出粗结晶物15g。粗结晶物用乙酸乙酯回流饱和溶解，放置结晶，调节温度为-10℃，结晶14小时，滤出，再结晶三次，低温干燥，得产品8g，含量98.7％。

Claims (6)

1.一种从新鲜百合中制备秋水仙碱的方法，其特征在于包含以下步骤：

1)甲醇提取：将百合原料切片或粉碎，加入原料的4-6倍量85-95％甲醇回流提取2-3小时，提取2～3次，合并提取液液，加入其体积的0.5-1％的活性炭脱色，滤过，得脱色液；

2)酸碱除杂：将上述脱色液减压浓缩至密度1.1-1.2，加入酸调节PH至0.5-2，放置沉淀，抽上清夜滤过，加入碱液调节PH至10-14，放置沉淀，得沉淀物；

3)柱分离：上述沉淀物热水洗涤至中性，乙酸乙酯溶解，滤过，加入氧化铝柱，石油醚乙酸乙酯梯度洗脱，收集秋水仙碱流分，回收试剂至小体积，放置结晶；

4)重结晶：将上述粗结晶滤出在乙酸乙酯中回流饱和溶解，放置结晶，滤出低温干燥即得产品。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的酸碱除杂条件：酸选用盐酸或硫酸的一种，碱可选用氢氧化钠、氢氧化钾或氨水，沉淀时间6-9小时。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述氧化铝柱：氧化铝为中性氧化铝，目数120-200，装柱量是沉淀物的15-20倍量。

4.所述的制备方法，其特征在于所述梯度洗脱条件：8-10倍石油醚洗脱杂质，石油醚∶乙酸乙酯(1∶1～2)混合溶液洗脱，高效液相监测。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述结晶条件：秋水仙碱流分浓缩至其体积的1/4-1/5结晶时间8-10小时。

6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述重结晶条件：结晶时间12-16小时，结晶温度-10-0℃，重结晶2-3次。