CN101806719A - 一种测定土壤中速效磷含量的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种测定土壤中速效磷含量的方法。该方法包括以下步骤：1)将待测土壤样品用浸提剂浸提，得到浸提液；所述浸提剂是pH值为8.0-8.5的0.5mol·L-1的NaHCO3溶液；2)将上述步骤1)的浸提液过滤，在滤液中依次加入试剂A和试剂B，得到反应液，将反应液进行色度值或吸光度值比较，得出待测土壤样品中速效磷的含量；所述试剂A是钼酸铵的酸溶液；所述试剂B是将氯化亚锡的酸溶液和甘油混合得到的。本发明通过对土壤样品与浸提剂的比例、试剂A和试剂B的酸度、标准比色卡的制作等步骤的筛选，得到一种测定土壤中速效磷含量的测定方法。本发明方法具有简便快捷、灵敏度高、操作步骤简单等特点，特别适合于野外条件下对土壤中速效磷含量的快速测定。
Description
技术领域
本发明涉及一种测定速效磷含量的方法，特别是涉及一种适合野外应用的快速测定土壤中速效磷含量的方法。
背景技术
土壤速效磷是可以被植物吸收利用的磷，是土壤中磷素养分供应水平高低的指标，土壤中速效磷的含量反映了土壤的实际供磷能力，对施肥具有重要的指导意义。在农业生产中，一般采用土壤速效磷的指标来指导施用磷肥。
目前，速效磷的测定方法以化学测定方法为主，其中，用0.5mol·L-1 NaHCO3溶液做浸提剂提取待测样品中的速效磷，是使用较广泛的速效磷的测定方法。0.5mol·L-1 NaHCO3法(即Olsen法)已经成为实验室测定速效磷的常规方法之一。该方法的精确度高，但是操作步骤较为复杂，同时还需较为专业的仪器，如恒温振荡器和分光光度计等，而且对振荡时间、转速和温度都有要求。因此，该方法只适合于实验室内使用，且需专业人员操作，无法用于野外测定。
发明内容
本发明的目的是提供一种测定土壤中速效磷含量的方法。
本发明所提供的测定土壤中速效磷含量的方法的原理是：在酸性条件下，磷酸盐与钼酸铵生成磷钼黄，再用氯化亚锡将磷钼黄还原成磷钼蓝，通过与标准比色卡进行比色或进行吸光度值测定，得出待测样品中速效磷的含量。
本发明所提供的测定土壤中速效磷含量的方法，包括以下步骤：
1)将待测土壤样品进行浸提，得到浸提液；
2)将上述步骤1)的浸提液过滤，在滤液中依次加入试剂A和试剂B，得到反应液，将反应液进行色度值或吸光度值比较，得出待测土壤样品中速效磷的含量；
所述试剂A是钼酸铵的酸溶液；
所述试剂B是氯化亚锡的酸溶液和甘油组成的混合液。
上述方法中，所述步骤2)中，所述试剂A是将10-16g钼酸铵与300-600ml比重为1.19g/ml的盐酸混合，将混合液用水定容至1L所得的溶液。
所述试剂B是1.0-3.0g氯化亚锡与10ml比重为1.19g/ml的盐酸混合，再在混合液中加入90ml甘油混合得到的。
上述方法中，所述步骤1)中，将待测土壤样品用浸提剂进行浸提；
所述浸提剂是pH值为8.0-8.5的0.5mol·L-1的NaHCO3溶液；
所述待测土壤样品和所述浸提剂的配比为1g待测土壤样品：(10-110)ml浸提剂。
所述滤液、试剂A和试剂B的体积比为(2-10)∶(1-4)∶(0.05-0.2)。
上述方法中，可将反应液进行色度值比较或进行吸光度值比较，得出待测土壤样品中速效磷的含量。具体应用时，可以通过制备标准比色卡进行色度值比较，所述标准比色卡的制作包括以下步骤：
1)将已知含有不同量速效磷的物质作为待测样品，分别用浸提剂浸提，得到不同浓度的速效磷浸提液；
所述浸提剂是pH值为8.5的0.5mol·L-1的NaHCO3溶液；
2)分别在上述步骤1)的不同浓度的速效磷浸提液中依次加入试剂A和试剂B，得到反应液，对反应液拍照，得到标准比色卡；
所述试剂A是将10-16g钼酸铵与300-600ml比重为1.19g/ml的盐酸混合，将混合液用水定容至1L所得的溶液；
所述试剂B是1.0-3.0g氯化亚锡与10ml比重为1.19g/ml的盐酸混合，再在混合液中加入90ml甘油混合得到的。
具体的，可以配制浓度为0-2.0mg·kg-1，浓度梯度为0.2mg·kgw的KH2PO4溶液作为待测样品，制作标准比色卡。
本发明方法可用于土壤中速效磷含量的测定。
目前，速效磷含量的测定中，有的是选用硫酸钼酸铵体系，本发明方法选用了盐酸钼酸铵体系。盐酸钼酸铵体系和硫酸钼酸铵体系中，速效磷的测定范围分别为(0.05-2)mg·kg-1和(0.02-1.0)mg·kg-1，可见盐酸钼酸铵体系的适用范围更广。本发明方法通过对试剂中盐酸含量的调整，可以保证在滤液中加入试剂A后得到的反应液的pH值与制作标准比色卡时在浸提液中加入试剂A后得到的反应液的pH值相一致，且可除掉多余的NaHCO3，以排除NaHCO3的干扰。
本发明方法具有简便快捷、灵敏度高、操作步骤简单等特点，特别适合于野外条件下对待测样品中速效磷含量的快速测定。
附图说明
图1为用实验室常规方法和本发明方法测定土壤中速效磷含量的结果
具体实施方式
下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和生物材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
实施例1、土壤中速效磷含量的测定
1、试剂的配制
1)试剂A的配制
试剂A是钼酸铵-盐酸溶液，具体的配制方法如下：称取10-16g钼酸铵溶于300ml蒸馏水中(溶液如有浑浊，应过滤)，冷却后缓缓加入比重为1.19g/ml的浓盐酸300-600ml，边加边搅拌，最后加蒸馏水稀释到1000ml，得到试剂A，将试剂A贮存于棕色玻璃瓶中备用。
2)试剂B的配制
试剂B是氯化亚锡的甘油溶液，具体的配制方式如下：称取1-3g分析纯的氯化亚锡于烧杯中，加入比重为1.19g/ml的浓盐酸10ml，加热溶解后，再加入90ml甘油，搅匀得到试剂B，将试剂B密封保存备用。
2、标准比色卡的制作
磷标准溶液的配制：准确称取在105℃烘箱中烘干的KH2PO4(分析纯)0.2195g，溶解于pH8.5的0.5mol·L-1的NaHCO3溶液中，用pH 8.5的0.5mol·L-1的NaHCO3溶液定容至1L，即得到浓度为50mg·kg-1的磷标准溶液。分别吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0ml上述制备的50mg·kg-1的磷标准溶液至50ml容量瓶中，用pH8.5的0.5mol·L-1的NaHCO3溶液定容，即得到浓度为0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0mg·kg-1的磷标准溶液。
NaHCO3溶液暴露于空气中可能因为失去CO2而使pH值增高，因此需在塑料瓶中密封保存，若贮存时间超过一个月，应检查溶液的pH值是否改变，使用时用NaOH调整pH值至8.5。
分别吸取浓度为0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0mg·kg-1的上述制备的磷标准溶液各2-10ml于管径相同的25ml比色管中，再加入1-4ml试剂A，摇匀，最后再滴入0.05-0.2ml试剂B，摇匀，比色管中呈现出深浅不同的蓝色。将比色管中的反应液分别用数码相机照相，得到的照片作为标准比色卡。
3、土壤中速效磷含量的测定
称取1.0g新鲜土样于50ml塑料瓶中，加入0.5mol·L-1的NaHCO3溶液50ml，手摇5分钟后过滤；取滤液2-10ml于25ml比色管中，加入1-4ml上述步骤1配制的试剂A，摇匀；再滴入0.05-0.2ml上述步骤1配制的试剂B，摇匀，两分钟后观察反应液的颜色，与上述步骤2制备的标准比色卡进行比较，得出土壤中速效磷的含量。
实验设三次重复，结果表明，土壤中速效磷的含量为32.5±1.2mg·kg-1。
4、方法的精确度验证
1)用磷标准溶液验证
对于已知浓度的磷标准溶液，分别用实验室常规的0.5mol·L-1NaHCO3方法和上述步骤3的方法测定速效磷的含量，然后将用上述两种方法得到的反应液分别用752型-分光光度计在710nm下进行比色，结果如下表所示：
对上述两种方法的吸光度值进行相关性分析，结果发现，两者有很好的相关性，R2达到0.9984，表明本发明的测定速效磷含量的方法的精确度可以满足测定的需要。
2)用土样验证
取来自北京郊区的25个土壤样品，用上述步骤3的方法测定速效磷的含量，并与实验室常规的0.5mol·L-1NaHCO3方法的测定值进行比较，结果如图1所示。结果表明，上述两种测定速效磷含量的方法有很好的相关性，说明本发明方法在土壤速效磷含量的测定上具有很高的精确度。
Claims (5)
1.一种测定土壤中速效磷含量的方法，包括以下步骤：
1)将待测土壤样品进行浸提，得到浸提液；
2)将上述步骤1)的浸提液过滤，在滤液中依次加入试剂A和试剂B，得到反应液，将反应液进行色度值或吸光度值比较，得出待测样品中速效磷的含量；
所述试剂A是钼酸铵的酸溶液；
所述试剂B是氯化亚锡的酸溶液和甘油组成的混合液。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤2)中，所述试剂A是将10-16g钼酸铵与300-600ml比重为1.19g/ml的盐酸混合，将混合液用水定容至1L所得的溶液。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤2)中，所述试剂B是1.0-3.0g氯化亚锡与10ml比重为1.19g/ml的盐酸混合，再在混合液中加入90ml甘油混合得到的。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤1)中，将待测土壤样品用浸提剂进行浸提；
所述浸提剂是pH值为8.0-8.5的0.5mol·L-1的NaHCO3溶液；
所述待测土壤样品和所述浸提剂的配比为1g待测土壤样品：(10-110)ml浸提剂。
5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：所述滤液、试剂A和试剂B的体积比为(2-10)∶(1-4)∶(0.05-0.2)。
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