CN101804126A - 一种中药组合物的气血两虚、脾肾不足证的用途和制法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种中药组合物在治疗气血两虚、脾肾不足证的药物中的应用及该组合物的制法，以及用上述中药组合物制成的中药及该中药的制法和质量控制方法。本发明药剂包含剂量为2-5g的中药组合物，并且每个药剂单位含所述中药组合物以黄芪甲苷计，为1.5-20mg。上述组合物的制备方法技术参数明确，不需要对药渣进行重新提取。同时公开了上述组合物制成的颗粒剂的含量和鉴别的质量控制方法。本发明颗粒剂可显著降低癌症化疗引起的毒副反应，该药治疗后中医证候改善有效率为81.4％，患者行为状况改善总有效率为87.62％，体重增加和稳定不变的总有效率为85.57％，在改善中医证候、改善患者行为状况、保持体重稳定性方面疗效显著。

Description

一种中药组合物的气血两虚、脾肾不足证的用途和制法

技术领域

本发明属于中药领域，涉及一种中药组合物在治疗气血两虚、脾肾不足证的药物中的应用及该组合物的制法，以及用上述中药组合物制成的中药及该中药的制法和质量控制方法。

背景技术

对于癌症的辅助治疗，西医认为应避免造成病人营养障碍，抑制白细胞减少，避免免疫功能抑制，避免消化和内分泌功能紊乱而影响化、放疗的疗程与剂量，并且要充分发挥治疗性药物疗效，直接延长病人的生存期和生存质量。而中医一般认为，对于具有气血两虚、脾肾不足证的肿瘤患者的辅助治疗，应该从补气、补血入手。气虚证是指元气亏损而出现的以呼吸气短、神疲乏力、少气懒言等为主要表现的证候，多有素体虚弱、久病大病，或劳累过度所致。血虚证是指血液亏虚、脏腑经络形体失养所致的证候，证见面色淡白或萎黄、头晕眼花、心悸、失眠、手足麻木等症。治疗气血两虚、脾肾不足的中药组方很多，有着广泛临床应用，但是在安全性、有效性、可控性几个方面仍然存在不足，在传统的中医理论和现代药物治疗原理指导下，医药工作者一直在优选最佳的中药组合物及其制成的药物用于在气血两虚、脾肾不足的癌症的辅助治疗。

发明内容

本发明的目的是提供一种中药组合物在治疗气血两虚、脾肾不足证的药物中的应用用途，提供了该中药组合物制备的药物的制剂单位中的中药组合物的含量、及主要有效成分含量。

本发明也提供了上述中药组合物的制备方法，以及含中药组合物制得的颗粒剂的制备方法和该颗粒剂的质量控制方法。

本发明的用下述重量份原料制成的含有黄芪甲苷的中药组合物在制备适用于口服给药用以治疗气血两虚、脾肾不足证的药剂中的应用，其中所述药剂包含剂量为2-5g的所述中药组合物，并且每个所述药剂单位含所述中药组合物以黄芪甲苷计，为1.5-20mg；

黄芪350-450份  人参150-250份    大枣150-250份  香菇150-250份

桑椹150-250份  枸杞子150-250份  昆布100-200份  牡蛎150-250份

红花100-200份  山楂150-250份。

一种较好的原料重量份组成为：

黄芪400份  人参200份  大枣200份  香菇200份  桑椹200份

枸杞子200份  昆布160份  牡蛎200份  红花160份  山楂200份。

另外一种较好的原料重量份组成为：

黄芪450份    人参150份  大枣150份  香菇150份  桑椹200份

枸杞子200份  昆布200份  牡蛎250份  红花200份  山楂150份。

本发明的每个所述药剂单位含所述中药组合物以黄芪甲苷计为1.5-10mg较为理想；

更优的每个所述药剂单位含所述中药组合物以黄芪甲苷计为1.5-5mg。

本发明提供的中药组合物优选是用以在治疗气血两虚、脾肾不足证的肿瘤患者的药剂中的应用。

本发明的中药组合物的具体制备方法为：将所述十味原料，加水煎煮两次，第一次加水8倍量，煎煮2.5小时，第二次加水5倍量，煎煮2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至在50℃时测定的相对密度为1.36-1.38的清膏，取清膏干燥，即得。

本发明创造性的提出相对密度为1.36-1.38时，具有最佳的工艺效果。而且本发明还证实，不应将水煎煮过的药材所得药渣重新煎煮而增加出膏量，这样会影响药品疗效份发挥，造成产能浪费，制备工艺时间延长。现有技术中，一般均是将药渣重新提取，而想要提高活性成分的提取量，而提高药材的使用率。本发明克服了上述的技术偏见。

用本发明中药组合物制得的颗粒剂的制法为：将所述十味原料，加水煎煮两次，第一次加水8倍量，煎煮2.5小时，第二次加水5倍量，煎煮2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至在50℃时测定的相对密度为1.36-1.38的清膏，取全部清膏作为1重量份，加入糊精1重量份，蔗糖0.5重量份，混匀，制粒，于60-70℃干燥，制成1000份，即得。

本发明还提供了上述颗粒剂的质量控制方法，其中含量测定为：取所述颗粒剂，研细，取10g，精密称定，置索氏提取器中，加乙醚40ml，加热回流2小时，弃去乙醚液，晾干，加甲醇50ml，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流10小时，提取液回收甲醇并浓缩至干，残渣加水30ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，每次提取液分别为30ml、30ml、20ml、20ml、10ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的氨试液提取3次，每次提取液分别为30ml、20ml、20ml，弃去氨液，再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加水6ml使溶解，放冷，通过内径为1.5cm、长15cm的D101型大孔吸附树脂柱，以水50ml洗脱，弃去水液，再用30％乙醇30ml洗脱，弃去30％乙醇洗脱液，继用70％乙醇60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5μl，对照品溶液1μl与3μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，用10℃以下放置过夜的配比为13∶6∶2的氯仿-甲醇-水下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照中国药典薄层色谱法的薄层色谱法进行扫面，波长：λS＝530，λR＝650nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得；所述颗粒剂每袋含黄芪甲苷不得少于1.5mg。

本发明颗粒剂的质量控制方法中还包括下述鉴别中一种或几种：

A.取所述颗粒剂10g，加甲醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨试液洗涤2次，每次15ml，再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品、人参皂苷Rg1、Re对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液；照中国药典的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以在10℃以下放置过夜的配比为65∶35∶10的氯仿-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105加热至斑点显色清晰，分别置日光及365nm波长的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在于对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点；

B.取所述颗粒剂20g，研细，加醋酸乙酯50ml，超声提取30分钟，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品溶液；另取枸杞子对照药材0.5g，加水35ml，加热煮沸15分钟，放冷，滤过，滤液用醋酸乙酯15ml振摇提取，提取液浓缩至约1ml，作为对照药材溶液；照中国药典的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以配比为3∶2∶1醋酸乙酯-氯仿-甲酸溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm波长的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在于对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

本发明所用的药材来源如下：

人参：为五加科植物人参Panax ginseng C.A.Mey.的干燥根及根茎。

黄芪：为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongho-licus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根。春秋二季采挖，除去须根及根头，晒干。

大枣：为鼠李科植物枣Ziziphus jujuba Mill.的干燥成熟果实。秋季果实成熟时采收，晒干。

香菇：为侧耳科植物香菇Lentinus edodes(Berk.)Sing.的干燥子实体。子实体成熟时采收，干燥。

枸杞子：为茄科植物宁夏枸杞Lycium barbarum L.的干燥成熟果实。

桑椹：为桑科植物桑Morus alba L.的干燥果穗。

牡蛎：为牡蛎科动物长牡蛎Ostrea gigas Thunberg、大连湾牡蛎Ostreatalienwhanensis Crosse或近江牡蛎Ostrea rivularis Gould的贝壳。

昆布：为海带科植物海带Laminaria japonica Aresch.或翅藻科植物昆布Ecklonia kurome Okam.的干燥叶状体。

山楂：为蔷薇科植物山里红Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br.或山楂Crataegus pinnatifida Bge.的干燥成熟果实。

红花：为菊科植物红花Carthamus tinctorius L.的干燥花。

君药：生晒参、黄芪；臣药：大枣、香菇、枸杞子、桑椹；佐药：牡蛎、昆布；使药：山楂、红花。

本发明组方的中医理论为：

方中人参甘温、大补元气，健脾和胃。黄芪、甘温、升阳益气、大补脾肺。参、芪为制虚损之要药。贵在补气的同时又能生血、“血虚以人参补之，阳旺则生阴血也。”气血是维持生命的重要物质。香菇、大枣，益气血、生津液，调营卫、解药毒。与参芪配伍，脾升胃降，可以减少放、化疗所致胃肠道反应(厌食、恶心、呕吐、腹泻)；枸杞子、桑椹性味甘苦，滋补肝肾，养血生精，与参芪为伍可增强脾与肾之造血功能(升高白细胞、血小板；骨髓有核细胞)，调月经，强精子、固须发、润口舌、充血脉等气阴两虚症状。参、芪补而不燥，枸杞子、桑椹，滋而不腻。中焦补脾以生气血，下焦兹肾以生精髓。《景岳全书.新方八略》“凡气虚者以补其上，人参、黄芪是属也；精虚者，补其下，熟地、枸杞子是属也。”牡蛎其性微寒、滋阴养血、补心清肺、宁心安神。《清罗氏会约医镜》一书所著，“化老痰、结血、结核、去胁下积块、消痈肿。”与参、芪为伍，滋补心肺、化积块、消痈肿；与枸杞子、桑椹为伍，滋阴养血更著；与昆布相伍，软坚散结、消痰除瘤(抑瘤作用)；山楂消食健胃，行气散瘀，伍参、芪、香菇、大枣和胃苏脾、行气消积；伍红花行气活血，红花活血通络、散瘀止痛，与参芪益气之品为伍，益在推动血液之运行(保护皮肤、血管、改善色素沉着减轻疼痛)，牡蛎、昆布、山楂、红花四位寓消于补，旨在扶正消瘤。

本发明具有以下有益的效果：

临床研究结果显示：本发明颗粒剂可显著降低癌症化疗引起的毒副反应，该药治疗后中医证候改善有效率为81.4％，患者行为状况改善总有效率为87.62％，体重增加和稳定不变的总有效率为85.57％，在改善中医证候、改善患者行为状况、保持体重稳定性方面疗效显著。本发明组合物的制备方法技术参数明确，即包括相对密度等关键参数，又不需要对药渣进行重新提取，使药效产生了较大变化。同时公开了上述组合物制成的颗粒剂的含量和鉴别的质量控制方法。下面结合试验例对本发明效果进行详细说明：

试验例1：对肿瘤效价的影响

1.实验对象与方法：

(1)T-739纯系小鼠的L_A-795实验肿瘤.(2)给药方法：实验分单纯放疗组和本发明样品加放疗组。给药按每公斤40克生药量口服灌胃，于接种肿瘤前7天开始服药。连续灌胃21天(对照组活杀之日为止)，单纯放疗组每日灌胃同体积生理盐水。(3)照射条件：实验采用S_L75-20直线加速器内，8M.V-X线，SSD＝100cm，剂量率＝3.8GY/分。照射时将清醒小鼠置于特制的有机玻璃固定器内。肿瘤暴露于照射野中，铅屏蔽开身体其他部位。局部照射表面覆盖2cm堵块。照射分5个剂量点(0GY，4GY，8GY，12GY，16GY).(4)实验方法：T-739纯系小鼠70支(雌雄各半)，体重18-20g。实验共分两大组；单纯放疗组和本发明样品与放疗联合组(加药组)。两大组均含上述不同剂量照射分组，每组有7只小鼠。将L_A-795肺腺癌接种在T-739小鼠左右腿肌肉内，待肿瘤长至规定大小时分组接受不同剂量的照射，定期测量肿瘤生长情况，观察二组肿瘤生长速度上的改变。

实验结果：(1)与对照组比较放射增敏比SER＝1.69。说明本发明样品能增强放射线对L_A-795肺癌的杀伤作用。(2)单纯用药组与空白组肿瘤生长相比，单纯用药组下移，生长缓慢，反映单纯服用本发明样品对肿瘤生长有一定的抑制作用(3)结果评价：本发明样品对小鼠L_A-795肿瘤放射治疗的效果有明显的增强作用。

试验例2辅助治疗气血两虚脾肾不足证非小细胞肺癌

一、病例选择

(一)诊断标准

1、西医诊断标准

肿瘤诊断标准和分期参见中华人民共和国卫生部颁发的《中国常见恶性肿瘤诊治规范》。

2、中医征候诊断标准

(1)证候

气血两虚证气血亏虚，形体失养，以神疲乏力，气短懒言，面色淡白或萎黄，头晕目眩，唇甲色淡，心悸失眠，舌淡脉弱等为常见症的证候。

上症状见有3项或以上，结合舌脉，即可诊断。

脾肾不足证以神疲气短，食少，腹胀，便溏或久泄，腰酸，腰痛，耳呜，舌淡脉弱等为常见症的证候。

(2)症状的分级量化

中医证候评分标准：按主症等级评分。

(二)纳入标准

(1)明确诊断的恶性肿瘤。

(2)中医辨证符合标准。

(3)放和/或化疗适应症。

(4)预计生存期在3个月以上者。

(5)受试者体力状况尚好，卡劳夫斯基评分≥60分。

(6)年龄≥18岁，≤70岁(根据不同试验观察期可适当变更)。

(三)排除标准

(1)不符合上述标准。

(2)妊娠、哺乳期妇女。

(3)精神病患者。

(4)过敏体质或对多种药物过敏者。

(5)用药前1个月内行抗肿瘤治疗。

二、观察指标

(一)安全性观察

(1)一般体检项目。

(2)血、尿、便常规检查。

(3)心、肝、肾功能检查。

(4)免疫功能检测。

(5)药物可能出现的不良反应观测。

(二)疗效观测

1、增效

主要指标：瘤体变化

次要指标：症状改善情况、生活状态评价(karnofsky、体重)、肿瘤相关指标变化(CEA，CA199，CAI25、AFP等)、心肝肾及造血系统相关检查。

2、减毒

(1)主要指标

1放化疗完成率。

2症状改善情况。

3放射性损伤(放疗)

4生活状态评价(karnofaky、体重、生存质量自我评价)

5对心肝肾及造血系统的损害。

(2)次要指标

1免疫功能变化

2其他放化疗不良反应

三、治疗方法

病历选择符合本研究疾病纳入标准的患者共计147例，按照3∶1的比例分为试验组(A组)与对照组(B组)。A组97例，男57例，女40例；B组50例，男31例，女19例。两组受试者年龄、性别、病程等一般资料比较没有明显差异(P＞0.05)，具有可比性。年龄30～75岁，中位年龄52岁。

A组采用本发明实施例2颗粒剂(秦皇岛皇威制药有限公司生产，规格：20g/袋)，开水冲服，一次20g，一日3次；B组采用安慰剂。两组均进行常规化疗吉西他滨(GEM)加顺铂(DDP)联合化疗。均于饭后服药，化疗的当天开始服用，连续服药21d为1周期，共2个周期，随化疗周期同步进行。疗程结束而未愈者，则按目前已知的方法进行治疗。

四、疗效判定标准

(一)肿瘤客观疗效判定标准

按照《中国常见恶性肿瘤诊治规范》

(二)临床证候疗效判定标准

治疗后临床证候积分值比治疗前积分值下降≥70％为显效；积分值下降≥30％为有效；积分无变化者为无效。

(三)行为状况评分标准

以Karnofsky行为状况评分标准为指标，在治疗前及每个疗程结束后均予评分，凡在疗程结束后较治疗前评分增加大于10分者为提高，减少大于等于10分者为降低，增加或减少不及10分者为稳定。

(四)体重

凡在疗程结束后，治疗后较治疗前体重增加或减少1kg作为“增加”或“下降”，增加或减少未超过1kg者为“稳定”。

(五)免疫功能评价

各项指标，疗前、疗后做比较。

(1)提高治疗后较治疗前由异常提高≥10％，或由异常恢复到正常。

(2)下降治疗后较治疗前由异常下降≥10％，或由正常转变为异常。

(3)稳定治疗后较治疗前上升、下降不足10％者或维持在正常范围。

五、试验结果

1、两组中医证候疗效比较

与B组比较，治疗后A组中医证候积分显著高于B组，两组比较有统计学意义(P＜0.001)，见表1。

表1两组中医证候疗效比较/例

组别	例数	显效/例	有效/例	无效/例	总有效率/％
						A组	97	31	48	18	81.4
B组	50	7	16	27	46.0

注：与B组比较，P＜0.001。

2、两组行为状况比较

与B组比较，治疗后A组行为状况提高和稳定的改善情况显著高于B组，两组比较有统计学意义(P＜0.001)，见表2。

表2两组行为状况疗效比较/例

组别	例数	提高/例	稳定/例	降低/例	总有效率/％
						A组	97	31	54	12	87.62
B组	50	8	17	25	50.00

注：与B组比较，P＜0.001。

2、两组体重变化比较

与B组比较，治疗后A组体重变化稳定，体重下降情况低于B组；两组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。见表3。

表3两组体重变化比较/例

组别	例数	提高/例	稳定/例	下降/例	总有效率/％
						A组	97	15	68	14	85.57
B组	50	11	28	11	78.00

注：与B组比较，P＜0.001。

3、两组实体瘤疗效比较

与B组比较，治疗后A组的实体瘤缓解疗效等级分布及有效率高于B组，但两组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。见表4。

表4两组实体瘤疗效比较

组别	例数	显效/例	有效/例	无效/例	进展/例	总有效率/％
							A组	47	10	5	27	5	31.91
B组	27	4	3	18	2	25.92

注：与B组比较，P＞0.05。

4、安全性评价

两组各观察时点的生命体征，各系统体格检查情况，心电图检查结果，血、尿、便常规，肝、肾功能，出凝血功能，经统计学检验，组间差异均无统计学意义(P＞0.05)。

附图说明

图1、本发明的黄芪鉴别薄层色谱图；

其中1、黄芪甲苷对照品；2-4、本发明样品；

图2、本发明的枸杞子鉴别的薄层色谱图；

其中1、枸杞子对照药材；2-4、本发明样品。

具体实施方式

实施例1、本发明颗粒剂制备。

黄芪400g    人参200g  大枣200g  香菇200g  桑椹200g

枸杞子200g  昆布160g  牡蛎200g  红花160g  山楂200g。

将所述十味原料，加水煎煮两次，第一次加水8倍量，煎煮2.5小时，第二次加水5倍量，煎煮2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至在50℃时测定的相对密度为1.36-1.38的清膏，干燥失重法检测清膏含固体物量(中药组合物重量)，取全部清膏作为1重量份，加入糊精1重量份，蔗糖0.5重量份，混匀，制粒，于60-70℃干燥，制成1000袋，即得。

每制剂单位为20g中，含有中药组合物2.7g，含黄芪甲苷为3.9mg。

实施例2、本发明颗粒剂的制备

黄芪45kg    人参15kg    大枣15kg  香菇15kg  桑椹20kg

枸杞子20kg  昆布20kg    牡蛎25kg  红花20kg  山楂15kg

每制剂单位为20g中，含有中药组合物4.7g，含黄芪甲苷为11.8mg。

表5实施例3-8                                                        重量单位：g

	实施例3	实施例4	实施例5	实施例6	实施例7
						黄芪	350	420	440	370	400
人参	160	200	175	220	245
						大枣	150	240	200	175	240
香菇	200	240	160	245	200
						桑椹	200	200	240	150	150
枸杞子	200	240	170	240	150
						昆布	100	200	150	190	140
牡蛎	200	240	240	160	220
						红花	100	200	100	150	150
山楂	240	150	200	170	200

	实施例3	实施例4	实施例5	实施例6	实施例7
						实际产量(袋)	987	963	920	939	911
单位制剂重量(g/袋)	20	20	20	20	20
						中药组合物量(g/袋)	2.1	4.4	4.9	3.8	3.9
黄芪甲苷量(mg/袋)	3.1	4.9	15.1	7.8	9.4

实施例9本发明颗粒剂的鉴别

【鉴别】(1)取本品10g，加甲醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨试液洗涤2次，每次15ml，再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品、人参皂苷Rg1、Re对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典一部附录薄层色谱法)试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(65∶35∶10)10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在于对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。

(2)取本品20g，研细，加醋酸乙酯50ml，超声提取30分钟，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材0.5g，加水35ml，加热煮沸15分钟，放冷，滤过，滤液用醋酸乙酯15ml振摇提取，提取液浓缩至约1ml，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典一部附录薄层色谱法)试验，吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-氯仿-甲酸(3∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在于对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

实施例10本发明颗粒剂的含量测定

【含量测定】取本品装量差异项下的内容物，混匀，研细，取10g，精密称定，置索氏提取器中，加乙醚40ml，加热回流2小时，弃去乙醚液，晾干，加甲醇50ml，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流10小时，提取液回收甲醇并浓缩至干，残渣加水30ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，(30ml、30ml、20ml、20ml、10ml)，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的氨试液提取3次(30ml、20ml、20ml)弃去氨液，再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加水6ml使溶解，放冷，通过D₁₀₁型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长15cm)，以水50ml洗脱，弃去水液，再用30％乙醇30ml洗脱，弃去30％乙醇洗脱液，继用70％乙醇60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典一部附录薄层色谱法)试验，吸取供试品溶液5μl，对照品溶液1μl与3μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(13∶6∶2)10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法(中国药典一部附录薄层色谱法)进行扫面，波长：λS＝530，λR＝650nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得。本品每袋含黄芪甲苷(C₄₁H₆₈O₁₄)不得少于1.5mg。

以上所述实施例仅仅是本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领普通技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本发明的权利要求书确定的保护范围内。

Claims (10)

1.用下述重量份原料制成的含有黄芪甲苷的中药组合物在制备适用于口服给药用以治疗气血两虚、脾肾不足证的药剂中的应用，其中所述药剂包含剂量为2-5g的所述中药组合物，并且每个所述药剂单位含所述中药组合物以黄芪甲苷计，为1.5-20mg；

黄芪350-450份  人参150-250份    大枣150-250份  香菇150-250份

桑椹150-250份  枸杞子150-250份  昆布100-200份  牡蛎150-250份

红花100-200份  山楂150-250份。

2.如权利要求1的应用，其中原料的重量份组成为：

黄芪400份    人参200份  大枣200份  香菇200份  桑椹200份

枸杞子200份  昆布160份  牡蛎200份  红花160份  山楂200份。

3.如权利要求1的应用，其中原料的重量份组成为：

黄芪450份    人参150份  大枣150份  香菇150份  桑椹200份

枸杞子200份  昆布200份  牡蛎250份  红花200份  山楂150份。

4.如权利要求1的应用，其中黄芪甲苷的剂量为1.5-10mg。

5.如权利要求4的应用，其中黄芪甲苷的剂量为1.5-5mg。

6.如权利要求5的应用，其特征在于，所述中药组合物是用以治疗气血两虚、脾肾不足证的肿瘤患者的药剂中的应用。

7.如权利要求1-6所述任一中药组合物的制备方法，其特征在于，

将所述十味原料，加水煎煮两次，第一次加水8倍量，煎煮2.5小时，第二次加水5倍量，煎煮2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至在50℃时测定的相对密度为1.36-1.38的清膏，取清膏干燥，即得。

8.一种用权利要求1-6所述任一中药组合物的制得的颗粒剂，其特征在于：将所述十味原料，加水煎煮两次，第一次加水8倍量，煎煮2.5小时，第二次加水5倍量，煎煮2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至在50℃时测定的相对密度为1.36-1.38的清膏，取全部清膏作为1重量份，加入糊精1重量份，蔗糖0.5重量份，混匀，制粒，于60-70℃干燥，制成1000份，即得。

9.一种如权利要求8所述的颗粒剂的质量控制方法，其特征在于该方法中的含量测定为：

取所述颗粒剂，研细，取10g，精密称定，置索氏提取器中，加乙醚40ml，加热回流2小时，弃去乙醚液，晾干，加甲醇50ml，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流10小时，提取液回收甲醇并浓缩至干，残渣加水30ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，每次提取液分别为30ml、30ml、20ml、20ml、10ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的氨试液提取3次，每次提取液分别为30ml、20ml、20ml，弃去氨液，再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加水6ml使溶解，放冷，通过内径为1.5cm、长15cm的D101型大孔吸附树脂柱，以水50ml洗脱，弃去水液，再用30％乙醇30ml洗脱，弃去30％乙醇洗脱液，继用70％乙醇60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5μl，对照品溶液1μl与3μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以10℃以下放置过夜的配比为13∶6∶2的氯仿-甲醇-水下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照中国药典薄层色谱法的薄层色谱法进行扫面，波长：λS＝530，λR＝650nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得；所述颗粒剂每袋含黄芪甲苷不得少于1.5mg。

10.如权利要求9所述颗粒剂的质量控制方法，其特征在于该方法中还包括下述鉴别中一种或几种：

A.取所述颗粒剂10g，加甲醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨试液洗涤2次，每次15ml，再用正丁醇饱和的水洗至中性，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品、人参皂苷Rg1、Re对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液；照中国药典的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以在10℃以下放置过夜的配比为65∶35∶10的氯仿-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105加热至斑点显色清晰，分别置日光及365nm波长的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在于对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点；

B.取所述颗粒剂20g，研细，加醋酸乙酯50ml，超声提取30分钟，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品溶液；另取枸杞子对照药材0.5g，加水35ml，加热煮沸15分钟，放冷，滤过，滤液用醋酸乙酯15ml振摇提取，提取液浓缩至约1ml，作为对照药材溶液；照中国药典的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以配比为3∶2∶1醋酸乙酯-氯仿-甲酸溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm波长的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在于对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

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