CN101798357B - 一种提取燕麦β-葡聚糖的方法 - Google Patents

一种提取燕麦β-葡聚糖的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种提取燕麦β-葡聚糖的方法,包括如下步骤:1)将燕麦麸皮去除表面的淀粉和浮尘;2)将燕麦麸皮在40~50℃加入水,调节pH7~8,搅拌1~5小时;3)分离后收集滤液,冷却至10~30℃,调整pH为4.5~5.0,搅拌后静置0.5~3小时;4)离心分离得滤液,加入低温α-淀粉酶,在35~45℃下,pH值5.5~6.5,处理1~2小时,采用硅藻土板框过滤,得到澄清液体;5)用截留分子量为50000~100000Da的超滤膜过滤,得到燕麦β-葡聚糖溶液。本发明的燕麦β-葡聚糖,生产工艺中未使用有机溶剂,而且操作温度不高于50℃,节能环保,安全性高。本发明还发现了燕麦β-葡聚糖在改善面部泛红和减少细纹的应用。

Description

一种提取燕麦β-葡聚糖的方法
技术领域
本发明属于植物提取物领域,特别涉及一种提取燕麦β-葡聚糖的方法。
背景技术
燕麦β-葡聚糖是由燕麦麸皮中提取,提取后产品附加值大增。燕麦β-葡聚糖是以β-1,3-,β-1,4-糖苷键连接起来的粘性多聚葡聚糖,其主要集中于燕麦麸皮的糊粉层。燕麦β-葡聚糖具有多种功能,可以降低血脂、控制血糖、增强免疫力,以及防治便秘、改善肠道微环境等,广泛应用于医药和保健食品领域。
目前,制备燕麦β-葡聚糖一般都通过溶剂提取或者采用温和碱提取法。这些方法都需要引入有机溶剂,成本高,去除不易,而且生产温度较高,对节能环保不利。
发明内容
因此,本发明要解决的技术问题就是针对现有的提取燕麦β-葡聚糖的方法使用有机溶剂、操作温度高,不节能环保的不足,提供一种新的提取燕麦β-葡聚糖的方法,其既节能又环保。
因此,本发明解决上述技术问题所采用的技术方案是:一种提取燕麦β-葡聚糖的方法,包括如下步骤:
1)将燕麦麸皮去除表面的淀粉和浮尘;
2)将燕麦麸皮在40~50℃加入水,调节pH7~8,搅拌1~5小时;
3)分离后收集滤液,冷却至10~30℃,调整pH为4.5~5.0,搅拌后静置0.5~3小时;
4)离心分离得滤液,加入低温α-淀粉酶,在35~45℃下,pH值5.5~6.5,处理1~2小时,采用硅藻土板框过滤,得到澄清液体;
5)用截留分子量为50000~100000Da的超滤膜过滤,得到燕麦β-葡聚糖溶液。
其中,步骤1)较佳的通过淀粉筛分机除去燕麦麸皮表面的淀粉和浮尘。步骤1)所述燕麦麸皮的粒径优选20~60目。
步骤2)所述的燕麦麸皮与水的重量比优选1∶20~1∶30。
步骤3)所述的分离后收集滤液,分离方法优选100目滤布过滤。所述的静置0.5~3小时,优选静置1小时。静置后有蛋白质沉淀析出。
步骤4)离心分离的速度为2500~10000rpm,优选5000rpm。低温α-淀粉酶反应的温度在35~45℃,较佳的是40℃。pH5.5~6.5,优选6pH。低温α-淀粉酶的用量优选50~150U/g燕麦麸皮,更优选100U/g燕麦麸皮。低温α-淀粉酶是一种反应温度在25~45℃的淀粉酶。而一般的淀粉酶在25~45℃温度下催化效率及其低下。同时在生产过程中,如温度超过60℃,淀粉的物理性质发生明显变化,使溶液十分粘稠,处理困难;而且高温容易导致燕麦β-葡聚糖分解,使提取率降低。所以,采用低温α-淀粉酶不仅使生产过程更加容易,降低设备能耗,还提高了燕麦β-葡聚糖的提取率。
步骤5)得到燕麦β-葡聚糖溶液可以进一步冷冻干燥,或者配制到0.2~1%浓度进行使用。
本发明还提供上述方法提取的燕麦β-葡聚糖。
本发明还提供燕麦β-葡聚糖在改善面部泛红和减少细纹的应用,可用于制备改善面部泛红和减少细纹的药物或化妆品。
本发明所用的原料或试剂除特别说明之外,均市售可得。
相比于现有技术,本发明的有益效果如下:本发明的燕麦β-葡聚糖的生产工艺中,未使用有机溶剂,而且操作温度不高于50℃,节能环保,安全性高。本发明还发现了燕麦β-葡聚糖在改善面部泛红和减少细纹的应用。
附图说明
以下结合附图说明本发明的特征和有益效果。
图1是涂用燕麦β-葡聚糖前后面部泛红的改善状况图。
图2是涂用燕麦β-葡聚糖前后面部细纹的改善状况图。
具体实施方式
下面用实施例来进一步说明本发明,但本发明并不受其限制。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件,或按照制造厂商所建议的条件。所述的百分比若无特别说明,是指质量百分比。
实施例1
选择粒径20目的燕麦麸皮。通过淀粉筛分机(新乡市三禾振动设备有限公司)采用60目的筛网,除去燕麦麸皮表面的淀粉颗粒或粉末以及浮尘。燕麦麸皮在50℃下加水搅拌,燕麦麸皮与水的重量比为1∶20,调节pH8,搅拌1小时。5000rpm离心分离后收集滤液,冷却至30℃,调整pH为4.5,搅拌后静置1小时。5000rpm离心分离得滤液,加入低温α-淀粉酶(购自Sigma公司,A-3176,Type VI-B型,酶活力24000U/g),用量为0.42g低温α-淀粉酶/100g燕麦麸皮。在40℃下,pH值6,处理1小时,采用硅藻土板框过滤,得到澄清液体。采用截留分子量为100000Da的超滤膜过滤,收集截留液,得到燕麦β-葡聚糖溶液,冷冻干燥。提取率85%,纯度88%。用水配制成1%(wt)燕麦β-葡聚糖浓度的溶液。
实施例2
选择粒径60目的燕麦麸皮。通过淀粉筛分机采用80目的筛网,除去燕麦麸皮表面的淀粉颗粒或粉末以及浮尘。燕麦麸皮在40℃下加水搅拌,燕麦麸皮与水的重量比为1∶30,调节pH7,搅拌5小时。100目滤布过滤,收集滤液,冷却至10℃,调整pH为5.5,搅拌后静置3小时。5000rpm离心分离得滤液,加入低温α-淀粉酶(酶活力24000U/g),用量为1.25g低温α-淀粉酶/100g燕麦麸皮。在45℃下,pH值6.5,处理2小时,采用硅藻土板框过滤,得到澄清液体。采用截留分子量为50000Da的超滤膜过滤,收集截留液,得到燕麦β-葡聚糖溶液,冷冻干燥。提取率78%,纯度95%。用水配制成0.2%(wt)燕麦β-葡聚糖浓度的溶液。
实施例3
选择粒径40目的燕麦麸皮。通过淀粉筛分机采用60目的筛网,除去燕麦麸皮表面的淀粉颗粒或粉末以及浮尘。燕麦麸皮在45℃下加水搅拌,燕麦麸皮与水的重量比为1∶25,调节pH7.5,搅拌2小时。10000rpm离心分离后收集滤液,冷却至20℃,调整pH为5.0,搅拌后静置0.5小时。5000rpm离心分离得滤液,加入低温α-淀粉酶(酶活力24000U/g),用量为0.85g低温α-淀粉酶/100g燕麦麸皮。在35℃下,pH值5.5,处理1.5小时,采用硅藻土板框过滤,得到澄清液体。采用截留分子量为80000Da的超滤膜过滤,收集截留液,得到燕麦β-葡聚糖溶液,冷冻干燥。提取率82%,纯度93%。用水配制成0.5%(wt)燕麦β-葡聚糖浓度的溶液。采用硫酸-苯酚法检测燕麦β-葡聚糖浓度。
硫酸-苯酚法如下:
苯酚-硫酸试剂可与游离的寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸起显色反应,显色后在490nm处有最大吸收值,吸收值与糖含量呈线性关系。
仪器与用具:紫外可见分光光度计;分析天平。
试药与试液:
β-葡聚糖标准溶液:精密称取β-葡聚糖标准品10mg,双蒸水定容至100ml(若配置过程中较难溶解,可先加少量水,70℃水浴助溶,冷却至室温后,定溶)。冰箱储存备用。
苯酚溶液(5%):取苯酚5g,加水使溶解成100ml,摇匀,即得。
标准曲线的制备:取6组具塞试管,每组三个平行。分别精密量取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mlβ-葡聚糖标准溶液(0.10mg/ml)加入各组试管中,补加双蒸水至2.0ml;另取3支试管加入蒸馏水2.0ml做空白。分别精密加入5%苯酚溶液1.0ml,摇匀,迅速精密加入浓硫酸5.0ml,摇匀后放置至室温,以空白液为对照调零,在490nm处测定吸光值。以β-葡聚糖的量为横坐标,吸光值A为纵坐标,绘制标准曲线。
得回归方程Y=aX+b(Y为为吸光度(abs),X为β-葡聚糖的加入量(μg)),相关系数r≥0.99。
待测样品溶液的制备:精密称取待测样品1g定容于100ml容量瓶中,摇匀后精密量取1.0ml加入平行试管中,补双蒸水至2.0ml,精密加入5%苯酚1ml,摇匀后精密加入浓硫酸5.0ml,冷却至室温,在490nm下测定其吸光值A。每个待测溶液做三组平行。
含量计算:将待测样品的吸光度带入标准曲线回归方程中,计算出待测样品中的β-葡聚糖含量。葡聚糖浓度=(x/100)%,其中,X为代入标准曲线求出的待测样品葡聚糖的量(μg)。
下面通过试验例来进一步说明本发明的有益效果。
效果实施例1
取实施例1制备的浓度的燕麦β-葡聚糖浓度的溶液。给予5位面部泛红(Baumann皮肤分型为敏感性皮肤,已发生面部皮肤泛红现象)的女性和5位面部有皱纹的女性使用。每次取0.5ml均匀涂满面部,每天早晚洗脸后使用,不涂其他东西。连续使用30天。
使用30天后的结果见图1和图2。5位原来面部泛红的女性的面部的均得到不同程度的消退,其中2人基本恢复正常。2人消退了60~70%。一人消退40%。5位原来面部有皱纹的女性面部的皱纹都有减少。特别是细纹和干纹所有人都明显减少。可见燕麦β-葡聚糖具有明显改善面部泛红和减少细纹的作用。

Claims (8)

1.一种提取燕麦β-葡聚糖的方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)将燕麦麸皮去除表面的淀粉和浮尘;
2)将燕麦麸皮在40~50℃加入水,调节pH7~8,搅拌1~5小时;
3)分离后收集滤液,冷却至10~30℃,调整pH为4.5~5.0,搅拌后静置0.5~3小时;
4)离心分离得滤液,加入低温α-淀粉酶,在35~45℃下,pH值5.5~6.5,处理1~2小时,采用硅藻土板框过滤,得到澄清液体;
5)用截留分子量为50000~100000Da的超滤膜过滤,得到燕麦β-葡聚糖溶液。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1)所述燕麦麸皮的粒径优选20~60目。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2)所述的燕麦麸皮与水的重量比为1∶20~1∶30。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤3)所述的静置1小时。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤4)所述的离心分离的速度为5000rpm。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤4)所述的低温α-淀粉酶反应温度40℃,pH6。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤4)所述的低温α-淀粉酶的用量是50~150U/g燕麦麸皮。
8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,所述的低温α-淀粉酶的用量是100U/g燕麦麸皮。
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