CN101791392B - 治疗人乳头瘤病毒持续感染的药物组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了原料为莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物中的应用。我们科研人员配合临床医生,历时3年的时间,通过选取临床上HPV“持续感染”的患者为研究实验者,采用莪术油和冰片为原料制备的药物为治疗药物,通过临床试验确定莪术油和冰片为原料的药物组合物具有治疗HPV“持续感染”的作用。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域,具体涉及一种原料为莪术油和冰片的药物组合物的新用途。
本发明所述的人乳头瘤病毒“持续感染”是指:有性生活史,经HC2(杂交捕获2代)HPV检测,次数≥2,持续时间≥2年,结果均为阳性。
背景技术
人乳头瘤病毒(HPV)是一种明显具有宿主和组织特异性的DNA病毒,HPV只能感染人类,人类是HPV的唯一宿主,且HPV具有严格嗜上皮特点,HPV侵入人机体后,该病毒主要限定于皮肤和黏膜上皮细胞,HPV不进入血液扩散到全身,HPV能导致很多疾病,这些疾病包括湿疣、Bowen样丘疹病、阴道和外阴的上皮瘤变甚至癌症,HPV被分为两种类型,即高危型和低危型,这种病毒通过性传播而感染,因此,HPV感染导致的疾病被医学界称之为传染的感染性疾病。
HPV的感染分为“持续性感染”和“短时感染”。HPV感染时间平均为8-14个月的,称为短时感染;而感染时间超过2年(包括2年),称之为“持续感染”。大部分HPV感染是“短时感染”,可以应用免疫调节剂如干扰素、腐蚀剂如聚甲酚磺醛、重组病毒疫苗、抗炎药物、中药制剂等进行治疗;HPV的“持续感染”能否采用上述药物进行治疗,医药界一直存在着疑问,这是因为药物能否治疗疾病必须通过实验(动物试验或临床试验)才能确定,所以,如何治疗HPV的“持续感染”成为医药科研工作者研究的重点。
本公司申请的专利(申请号为200810135026.1)中公开了含有莪术油和冰 片的药物组合物具有治疗HPV感染的作用,说明书通过临床试验证明了该药物组合物具有治疗HPV短时感染的作用,而该申请并没有证明该药物组合物能够治疗HPV“持续感染”,这需要进行临床试验才能确定。
发明内容
基于上述原因,本公司的科研人员配合临床医生,历时3年的时间,通过选取临床上HPV“持续感染”的患者为研究实验者,采用莪术油和冰片为原料制备的药物为治疗药物,通过临床试验确定莪术油和冰片为原料的药物组合物具有治疗HPV“持续感染”的作用。
本发明有益的技术效果:
(1)通过科学的临床试验确定了莪术油和冰片为原料的药物组合物能够治疗HPV“持续感染”;从而预防宫颈癌。
(2)扩大了现有药物的适应症,为社会节约了大量的资源,因为新药研发需要使用大量的人力、物力、财力等大量资源;
(3)为临床医生提供了新的治疗药物:老药新用。老药新用最大的优点是,不会产生新的不良反应,更加安全有效!
(4)为患者提供经过科学实验确证的药物的新用途,这个新用途填补了国际空白!可以预防宫颈癌!提高患者的用药依从性。
(5)有效成分含量不同的莪术油和冰片的药物组合物,对HPV“持续感染”的治疗效果不同,确定了含量不同的莪术油与冰片的组合在治疗HPV“持续感染”的作用是不同的,为制备出更优的药品提供可靠的依据。
本发明通过下述技术方案实现的。
原料为莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物 中的应用。
其中优选的莪术油中牻牛儿酮含量为7.5%-25%,呋喃二烯含量为10%-35%,莪术二酮含量为2.6%-30%。
其中进一步优选的莪术油中牻牛儿酮含量为7.5%-20%,呋喃二烯含量为10%-30%,莪术二酮含量为7.8%-25%。
其中进一步优选的莪术油中牻牛儿酮含量为8%-19.5%,呋喃二烯含量为11%-25%,莪术二酮含量为10.1%-23.2%。
其中优选的人乳头瘤病毒是高危型人乳头瘤病毒。
其中优选原料莪术油为20-1200重量份、冰片为1-920重量份。
其中优选原料莪术油为82重量份,冰片为75重量份。
其中优选原料莪术油为164重量份,冰片为150重量份。
其中优选原料莪术油为1200重量份,冰片为1重量份。
其中优选高危型人乳头瘤病毒为HPV16、18、31、33、39、45、51、52、56、58、68亚型。
其中原料为莪术油和冰片的药物组合物制备的阴道给药制剂或直肠给药制剂。
其中优选制剂为栓剂、软胶囊、泡腾片、凝胶剂、软膏剂、阴道片、膜剂或泡沫剂。
本发明所述的人乳头瘤病毒“持续感染”是指:有性生活史,经HC2(杂交捕获2代)HPV检测,次数≥2,持续时间≥2年,结果均为阳性。
一、对持续感染的离体人乳头瘤病毒DNA作用的实验研究
1、资料:选择2007年至2009年12月,医院门诊为HPV感染≥2年者。
2、入选标准:①有性生活史。②经HC2(杂交捕获2代)HPV检测,次数≥2,持续时间≥2年,结果均为阳性者。接受口头知情同意,按个人意愿采取标本。
3、试剂和仪器:HPV核酸扩增(PCR)荧光检测试剂盒(包括DNA提取液1、DNA提取液2、PCR反应液、Taq酶、UNG);BIO-RADiCycler荧光定量PCR仪;离心机。
4、试验药物:
试验1组:莪术油1640g,冰片1500g,按照阴道栓剂的制备方法制备成栓剂10000粒。其中莪术油中牻牛儿酮含量为7.5%,呋喃二烯含量为10.0%,莪术二酮含量为7.8%。
试验2组:莪术油12000g,冰片9200g,按照阴道软膏剂的制备方法制备成软膏剂10000支;其中莪术油中牻牛儿酮含量为7.5%,呋喃二烯含量为10.0%,莪术二酮含量为2.6%。
试验3组:莪术油820g,冰片750g,按照阴道栓剂的制备方法制备成栓剂10000粒。其中莪术油中牻牛儿酮含量为20.0%,呋喃二烯含量为30.0%,莪术二酮含量为25.0%。
试验4组:莪术油200g,冰片10g,按照阴道泡腾片的制备方法制备成制剂10000片;其中莪术油中牻牛儿酮含量为25.0%,呋喃二烯含量为35.0%,莪术二酮含量为30.0%。
试验5组:莪术油12000g,冰片10g,按照阴道栓剂的制备方法制备成栓剂10000粒。其中莪术油中牻牛儿酮含量为19.5%,呋喃二烯含量为25.0%,莪 术二酮含量为23.2%。
试验6组:莪术油820g,冰片750g,按照阴道栓剂的制备方法制备成栓剂10000粒。其中莪术油中牻牛儿酮含量为8.0%,呋喃二烯含量为11.0%,莪术二酮含量为10.1%。
试验7组:莪术油820g,冰片750g,按照阴道栓剂的制备方法制备成栓剂10000粒。其中莪术油中牻牛儿酮含量为14.7%,呋喃二烯含量为18.5%,莪术二酮含量为16.5%。
试验8组:莪术油820g,冰片750g,按照阴道泡腾片的制备方法制备成制剂10000片;其中莪术油中牻牛儿酮含量为7.9%,呋喃二烯含量为10.3%,莪术二酮含量为2.5%。
5、试验方法:样品制备:将上述不同试验药物组配置成相同浓度的药液,备用;
持续HPV感染标本制备:从医院门诊采取的离体标本,集中到1只离心管中,称重30mg,用玻璃匀浆器匀浆,再加入5mL生理盐水,配成6mg/mL的离体混悬液,备用。
样品处理的方法:用移液枪吸取25μL样品液和25μL标本混悬液至15mL离心管中,振摇均匀,使样品与标本能充分作用,置37℃水浴箱培养。共设置6组:试验药物1-6组,在样品处理标本1d、3d、5d、7d后,各取1组进行以下试验。
HPV-DNA的提取:从温浴箱中取出经样品处理的标本混悬液,按试剂盒步骤提取DNA:加入50μL生理盐水,混匀后再加入100μLDNA提取液,振摇均匀,1200r/min离心10min,弃去上清液,再加入25μL DNA提取液2,充分混匀, 100℃沸水煮10min,1200r/min离心10min,上清液即为HPV-DNA模板。
DNA扩增:取检测试剂盒中的PCR反应液37.6μL,Taq DNA聚合酶0.4μL,UNG0.03μL于PCR反应管中,再加入HPV-DNA模板2μL,扣严管盖,置于定量PCR仪上循环扩增。HPV-DNA经高温变性、低温退火及延伸进行循环扩增,循环程序设置为:37℃,5min;94℃,1min;95℃,5sec;60℃,30sec,循环40次。
量标准曲线:用荧光探针检测定量,按照检测试剂盒要求,设立4个系列浓度的HPV-DNA定量阳性标准品,依次为5×107/mL,5×106/mL,5×105/mL,5×104/mL,经PCR检测(其检测灵敏度为1×103/mL,结果小于该浓度者判定为阴性)。以起始拷贝数的自然对数为横坐标,循环阈值为纵坐标,得到的回归直线为标准曲线,据此对样品的扩增倍数进行定量。
试验结果:见表1。
表1不同试验药物对持续HPV感染的DNA作用结果
组别 | 培养时间1天 | 培养时间3天 | 培养时间5天 | 培养时间7天 |
试验1组 | - | - | - | - |
实验2组 | - | - | - | - |
实验3组 | - | - | - | - |
实验4组 | - | - | - | - |
实验5组 | - | - | - | - |
实验6组 | - | - | - | - |
实验7组 | - | - | - | - |
实验8组 | 1.9×107 | 4.2×106 | - | - |
注:-代表阴性。
试验结论:上述试验数据表明试验1组至7组对持续HPV感染的DNA具有很好的抑制作用,而试验8组需要培养3天以后,才具有抑制作用。
二、临床试验
1、资料与方法
选择2007年1月至2009年12月,医院门诊确诊为HPV感染≥2年者。
2、入选标准:①有性生活史。②经HC2(杂交捕获2代)HPV检测,次数≥2,持续时间≥2年,结果均为阳性者。接受口头知情同意,按个人意愿非随机入组。告知病人治疗或观察期间尽量避免性生活3个月。
3、排除标准:①滴虫、霉菌、淋病奈瑟菌、衣原体任何一种感染者。②重度宫颈糜烂者。③有重要脏器疾病者。④过敏体质者。⑤孕期或哺乳期者。⑥宫颈CIN或宫颈癌者。
4、检测方法:①LCT检测采用美国TriPath公司的AutoCyte Prep试剂盒。②HC2检测采用美国QiGene公司试剂盒。③同一实验室,同一组技术人员,标本盲法编号,进行HC2和LCT测定。
5、用药方法:
试验组:莪术油820g,冰片750g,按照阴道栓剂的制备方法制备成栓剂10000粒。其中莪术油中牻牛儿酮含量为13.8%,呋喃二烯含量为11.6%,莪术二酮含量为17.3%。
对照组:莪术油820g,冰片750g,按照阴道泡腾片的制备方法制备成制剂10000片;莪术油为市售莪术油:其中莪术油中牻牛儿酮含量为8.5%,呋喃二烯含量为10.9%,莪术二酮含量为2.4%。
实验组、对照组每晚用1粒、阴道给药、连用16天、连用3个月经周期。空白组:不用任何药物。
6、随诊:用药3个月后,停药1个月(30±2天),返诊行妇科检查及HC2、LCT检测。
7、试验结果:见表2、表3。
表23个月后HC2检测RLU/CO比值变化率比较
组别 | n | 转阴% (n) | 显著改善% (n) | 改善%(n) | 无改善% (n) | 升高%(n) |
空白组 | 131 | 22.1(29) | 18.3(24) | 11.5(15) | 11.5(15) | 36.6(48) |
对照组 | 98 | 23.4(23) | 18.4(19) | 12.2(12) | 11.2(11) | 33.7(33) |
试验组 | 137 | 38.0(52) | 37.2(51) | 5.1(7) | 5.1(7) | 14.6(20) |
P值(与 对照组 比较) | - | 0.006 (<0.01) | 0.005 (<0.01) | 0.064 (>0.01) | 0.063 (>0.01) | 0.002 (<0.01) |
表33个月后宫颈炎指标积分变化率比较
n | 痊愈%(n) | 显效% | 有效% | 无效% | |
空白组 | 131 | 0 | 14.5(19) | 22.9(30) | 62.6(82) |
对照组 | 98 | 10.2(10) | 18.3(18) | 27.5(27) | 43.9(43) |
试验组 | 137 | 61.3(84) | 29.9(41) | 8.1(11) | 0.7(1) |
P值(与对 照组比较) | 0.007 (<0.01) | 0.03 (<0.05) | 0.04 | 0.001 (<0.01) |
试验结论:通过上述实验表明莪术油和冰片为原料的药物组合物可以很好的治疗HPV“持续感染”;本发明药物组合物与对照组比较具有极显著差异或显著性差异(P<0.01或P<0.05),说明成分不同的莪术油与冰片的组合物对HPV持续感染的作用是不同的,充分说明本发明具有科学意义。
实施例
实施例1
原料为莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物中的应用。
实施例2
原料为莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物中的应用。
其中莪术油中牻牛儿酮含量为7.5%,呋喃二烯含量为16.4%,莪术二酮含量为15.7%。
实施例3
原料为莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物中的应用。
莪术油中牻牛儿酮含量为7.8%,呋喃二烯含量为10.0%,莪术二酮含量为14.8%。
实施例4
原料为莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物中的应用。
其中莪术油中牻牛儿酮含量为8.7%,呋喃二烯含量为11.9%,莪术二酮含量为2.6%。
实施例5
莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物中的应用。
其中莪术油中牻牛儿酮含量为7.5%,呋喃二烯含量为10.0%,莪术二酮含量为7.8%。
实施例6
莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物中的应用。
其中莪术油中牻牛儿酮含量为20.0%,呋喃二烯含量为30.0%,莪术二酮含量为25.0%。
实施例7
莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物中的应用。
其中莪术油中牻牛儿酮含量为8.0%,呋喃二烯含量为11.0%,莪术二酮含量为10.1%。
实施例8
莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物中的应用。
其中莪术油中牻牛儿酮含量为19.5%,呋喃二烯含量为25.0%,莪术二酮含量为23.2%。
实施例9
原料为莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物中的应用。
其中莪术油15g,冰片0.5g,按照栓剂、软胶囊、泡腾片、凝胶剂、软膏剂、阴道片、膜剂或泡沫剂的制备方法制备。
实施例10
原料为莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物中的应用。
其中莪术油20g,冰片1g,按照栓剂、软胶囊、泡腾片、凝胶剂、软膏剂、阴道片、膜剂或泡沫剂的制备方法制备。
实施例11
原料为莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物 中的应用。
其中莪术油1200g,冰片920g,按照栓剂、软胶囊、泡腾片、凝胶剂、软膏剂、阴道片、膜剂或泡沫剂的制备方法制备。
实施例12
原料为莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物中的应用。
其中莪术油82g,冰片75g,按照栓剂、软胶囊、泡腾片、凝胶剂、软膏剂、阴道片、膜剂或泡沫剂的制备方法制备。
实施例13
原料为莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物中的应用。
其中莪术油25g,冰片2g,按照栓剂、软胶囊、泡腾片、凝胶剂、软膏剂、阴道片、膜剂或泡沫剂的制备方法制备。
实施例14
原料为莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物中的应用。
其中莪术油1150g,冰片5g,按照栓剂、软胶囊、泡腾片、凝胶剂、软膏剂、阴道片、膜剂或泡沫剂的制备方法制备。
实施例15
原料为莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物中的应用。
其中莪术油164g,冰片150g,按照栓剂、软胶囊、泡腾片、凝胶剂、软膏 剂、阴道片、膜剂或泡沫剂的制备方法制备。
实施例16
原料为莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物中的应用。
其中莪术油1200g,冰片1g,按照栓剂、软胶囊、泡腾片、凝胶剂、软膏剂、阴道片、膜剂或泡沫剂的制备方法制备。
实施例17
莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物中的应用。
莪术油中牻牛儿酮含量为8.0%,呋喃二烯含量为11.0%,莪术二酮量为9.9%。
实施例18
莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物中的应用。
莪术油中牻牛儿酮含量为19.5%,呋喃二烯含量为25.0%,莪术二酮含量为22.0%。
实施例19
莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物中的应用。
莪术油中牻牛儿酮含量为8.7%,呋喃二烯含量为11.9%,莪术二酮含量为10.7%。
实施例20
莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物中的应用。
莪术油中牻牛儿酮含量为19.3%,呋喃二烯含量为24.7%,莪术二酮含量为22.6%。
实施例21
莪术油和冰片的药物组合物在制备治疗人乳头瘤病毒持续感染药物中的应用。
莪术油中牻牛儿酮含量为15.4%,呋喃二烯含量为19.6%,莪术二酮含量为17.2%。
上述实施例中人乳头瘤病毒包括但不限于高危型人乳头瘤病毒。
上述所述人乳头瘤病毒包括但不限于人乳头瘤病毒为HPV16、18、31、33、39、45、51、52、56、58、68亚型。
上述实施例包括但不限于上述。
Claims (3)
1.一种治疗人乳头瘤病毒持续感染的药物组合物,其特征在于药物组合物原料为莪术油和冰片,其中莪术油820g,冰片750g,按照阴道栓剂的制备方法制备成栓剂10000粒,其中莪术油中牻牛儿酮含量为13.8%,呋喃二烯含量为11.6%,莪术二酮含量为17.3%。
2.根据权利要求1所述的一种治疗人乳头瘤病毒持续感染的药物组合物,其中人乳头瘤病毒是高危型人乳头瘤病毒。
3.根据权利要求2所述的一种治疗人乳头瘤病毒持续感染的药物组合物,其中高危型人乳头瘤病毒为HPV16、18、31、33、39、45、51、52、56、58、68亚型。
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